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Determinao espectrofotomtrica multielementar: amarelo de crepsculo e amarelo de tartrazina

Acadmicas: Flvia Costa Marlia Elias Gallon Paula Campos Reis Thas de Oliveira Loiola Professor: Pedro Orival Farmcia 2009/1 5 Perodo

Alfenas - MG 2011

Introduo: Corantes alimentares so utilizados amplamente pelas indstrias alimentcias para conferir aos produtos um aspecto mais agradvel, fazendo com que eles sejam preferidos pelos consumidores. Muitos corantes apresentam propriedades txicas e, por isso, necessrio garantir um controle de qualidade eficiente, para que os consumidores tenham produtos seguros e de qualidade. Os mtodos espectrofotomtricos so utilizados com tal finalidade. A partir da Lei de Lambert-Beer possvel determinar simultaneamente duas ou mais substncias diferentes em uma mesma amostra. O experimento a seguir utiliza tal princpio. Materiais e Equipamentos: Pipetas; Bales volumtricos (100mL); Frascos de plstico com tampa; Bqueres; Pipetador; Basto de vidro; Cubetas; Micropipetas; Funil; Espectrofotmetro e balana analtica; Reagentes: gua destilada Solues padro de Amarelo de Tartrazina; Solues padro de Amarelo Crepsculo; Amostras de Refresco em p sabor abacaxi e maracuj; Mtodo: Primeiramente o espectrofotmetro foi ligado quinze minutos antes de se iniciar as medies no aparelho. Em seguida foram preparadas as solues dos refrescos em p, pesando em um bquer 0,5 gramas do sabor abacaxi e diluda com

gua destilada. A soluo foi transferida para um balo volumtrico de 100mL, completou-se at o menisco. O mesmo procedimento foi adotado para o refresco de maracuj. Para a realizao do experimento, foram feitas as leituras da soluo padro de Amarelo de Tartrazina (concentraes iguais a 1ml.L -1, 12mg.L-1, 24mg.L-1, 36mg.L-1 e 48mg.L-1) e da soluo padro de Amarelo Crepsculo (concentraes iguais a 0,5mg.L-1, 6,5mg.L-1, 12,5mg.L-1, 18,5mg.L-1 e 25mg.L-1), obtendo-se a curva analtica de cada corante nos comprimentos de onda de 430 e 480nm. As leituras foram realizadas em triplicata, intercaladas com aferies do branco e nos comprimentos de onda iguais a 430 e 480nm. Tabela 1: Leitura dos padres do corante amarelo de tartrazina, no comprimento de onda de 430 nm. C (mg/L) 1 12 24 36 48 A1 0,053 0,440 0,893 1,301 1,730 A2 0,052 0,440 0,893 1,301 1,730 A3 0,053 0,440 0,893 1,301 1,729 Am 0,053 0,440 0,893 1,301 1,730 Tm 0,886 0,363 0,128 0,050 0,019

Onde, C representa a concentrao medida em mg/L; A1, A2 e A3 as absorbncias obtidas em triplicada, Am a absorbncia mdia e Tm a transmitncia mdia.

Grfico 1: Curva Analtica do amarelo de tartrazina para comprimento de onda de 430nm. Sensibilidade: m1 = 0,04 Coeficiente de Correlao: R = 1,00

Curva Analtica 1
2 1.8 1.6 1.4

f(x) = 0.04x + 0.02 R = 1

Absorbncia

1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0 10 20 30 40 50 60

Concentrao (mg/L)

Tabela 2: Leitura dos padres do corante amarelo, no comprimento de onda de 430 nm.

C (mg/L) 0,5 6,5 12,5 18,5 25

A1 0,006 0,173 0,327 0,479 0,636

A2 0,007 0,173 0,327 0,479 0,635

A3 0,007 0,172 0,327 0,479 0,635

Am 0,007 0,173 0,327 0,479 0,635

Tm 0,985 0,672 0,471 0,332 0,231

Onde, C representa a concentrao medida em mg/L; A1, A2 e A3 as absorbncias obtidas em triplicada, Am a absorbncia mdia e Tm a transmitncia mdia.

Grfico 2: Curva analtica do amarelo crepsculo para comprimento de onda de 430 nm.

Curva Analtica 2
0.7 0.6 0.5

f(x) = 0.03x + 0 R = 1

Absorbncia

0.4 0.3 0.2 0.1 0 0 5 10 15 20 25 30

Concentrao (mg/L)

Sensibilidade: m2 = 0,03

Coeficiente de Correlao: R = 1,00

Tabela 3: Leitura dos padres do corante amarelo de tartrazina, no comprimento de onda de 480 nm. Concentra o (mg.L-1) 1 12 24 36 48 A1 0,036 0,088 0,166 0,226 0,301 A2 0,036 0,087 0,166 0,23 0,301 A3 0,036 0,09 0,167 0,227 0,300 Am 0,036 0,09 0,166 0,226 0,301 Tm 0,920 0,818 0,682 0,594 0,500

Onde, C representa a concentrao medida em mg/L; A1, A2 e A3 as absorbncias obtidas em triplicada, Am a absorbncia mdia e Tm a transmitncia mdia.

Grfico 3: Curva Analtica do amarelo de tartrazina para comprimento de onda de 480nm.

Curva Analtica 3
0.35 0.3 0.25
Absorbncia

f(x) = 0.01x + 0.03 R = 1

0.2 0.15 0.1 0.05 0 0 10 20 30 40 50 60

Concentro (mg/L)

Sensibilidade: m3 = 0,01

Coeficiente de Correlao: R = 1,00

Tabela 4: Leitura dos padres do corante amarelo crepsculo, no comprimento de onda de 480 nm. Concentra o (mg.L-1) 0,5 6,5 12,5 18,5 25 A1 0,042 0,336 0,559 0,896 1,167 A2 0,042 0,336 0,558 0,896 1,167 A3 0,042 0,336 0,558 0,896 1,167 Am 0,042 0,336 0,558 0,896 1,167 Tm 0,908 0,461 0,277 0,127 0,068

Onde, C representa a concentrao medida em mg/L; A1, A2 e A3 as absorbncias obtidas em triplicada, Am a absorbncia mdia e Tm a transmitncia mdia.

Grfico 4: Curva Analtica do amarelo crepsculo para comprimento de onda de 480nm

Curva Analtica 4
1.4 1.2 1

f(x) = 0.05x + 0.02 R = 1

Absorbncia

0.8 0.6 0.4 0.2 0 0 5 10 15 20 Concentrao (mg/L) 25 30

Sensibilidade: m = 0,05 Coeficiente de Correlao: R = 1,00 Foram dadas trs amostras de concentraes desconhecidas e duas amostras de refrescos em p de maracuj e de abacaxi, com concentraes de

amarelo tartrazina e amarelo crepsculo tambm desconhecidas. A absorbncia de cada uma das amostras foi medida, possibilitando a determinao das concentraes de cada um dos corantes. Tabela 5: Medidas das transmitncias e absorbncias de amostras, no comprimento de onda de 430 nm. Amostra A B C Suco de abacaxi Suco de maracuj A1 0,51 1,292 1,979 0,235 0,848 A2 0,513 1,292 1,978 0,234 0,848 A3 0,513 1,292 1,979 0,234 0,847 Am 0,513 1,292 1,979 0,234 0,848 Tm 0,307 0,051 0,010 0,587 0,142

Onde, A1, A2 e A3 representam as absorbncias obtidas em triplicada, Am a absorbncia mdia e Tm transmitncia mdia.

Tabela 6: Medidas das transmitncias e absorbncias de amostras, no comprimento de onda de 480 nm. Amostra A B C Suco de Abacaxi Suco de Maracuj A1 0,322 0,873 1,215 0,199 0,644 A2 0,321 0,873 1,215 0,199 0,644 A3 0,321 0,873 1,215 0,199 0,644 Am 0,321 0,873 1,215 0,199 0,644 Tm 0,478 0,134 0,061 0,632 0,227

Onde, A1, A2 e A3 representam as absorbncias obtidas em triplicada, Am a absorbncia mdia e Tm transmitncia mdia.

Verificou-se o rudo do aparelho a partir das leituras das absorbncias do branco, que nesse caso era a gua destilada. Tabela 7: Valores de transmitncia e absorbncia para o branco em comprimento de onda de 430 nm. Leitura do branco em transmitncia 1,000 1,000 1,000 Leitura do branco em absorbncia 0,000 0,000 0,000

1,000 1,000 1,000 1,000 1,000 1,000 0,998 Desvio padro do branco = 0,000316

0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,001

Limite de deteco e de quantificao do amarelo de tartrazina, em comprimento de onda de 430nm. LD = 3 branco m1 LD = 3 x 0,000316 0,04 LD = 0,0237 LQ = 10 branco m1 LQ = 10 x 0,000316 0,04 LQ = 0,079

Limite de deteco e de quantificao para o amarelo crepsculo, em comprimento de onda de 430 nm. LD = 3 branco m2 LD = 3 x 0,000316 0,03 LD = 0,0316 LQ = 10 branco m2 LQ = 10 x 0,000316 0,03 LQ = 0,1053

Tabela 8: Valores de transmitncia e absorbncia para o branco em comprimento de onda de 480 nm. Leitura do branco em transmitncia 1,000 1,000 1,000 1,000 0,998 1,000 1,000 Leitura do branco em absorbncia 0,000 0,000 0,000 0,000 0,001 0,000 0,000

1,000 1,000 0,998 Desvio padro do branco = 0,000422

0,000 0,000 0,001

Limite de deteco e quantificao para o amarelo tartrazina, em comprimento de onda de 480 nm. LD = 3 branco m3 LD = 3 x 0,000422 0,01 LD = 0,1266 LQ = 10 branco m3 LQ = 10 x 0,000422 0,01 LQ = 0,4220

Limite de deteco e de quantificao para o amarelo crepsculo, em comprimento de onda de 480 nm. LD = 3 branco m4 LD = 3 x 0,000422 0,05 LD = 0,0253 LQ = 10 branco m4 LQ = 10 x 0,000422 0,05 LQ = 0,0844

Faixa Linear: o intervalo entre o limite de quantificao e a maior concentrao que produz uma correlao linear prxima de 1. Amarelo de Tartrazina (430 nm): 1,475 mg/L a 48 mg/L Amarelo de Tartrazina (480 nm): 39,2 mg/L a 48 mg/L Amarelo Crepsculo (430 nm): 3,51 a 25mg/L Amarelo Crepsculo (480 nm): 1,288 mg/L a 25 mg/L

Para a determinao das concentraes de amarelo tartrazina e amarelo crepsculo foi necessrio determinar as medidas das absorbncias nos comprimentos de onda de 430 e 480 nm, pois o amarelo tartrazina absorve mais no comprimento de 430 nm e o amarelo crepsculo no comprimento de 480 nm.

Atravs do princpio da aditividade da Lei de Lambert-Beer possvel obter a absorbncia total em cada um dos comprimentos de onda. Para cada comprimento de onda, a absorbncia total devida as espcies presentes na soluo pode ser expressa como a soma das absorbncias de cada uma das espcies. A430 = AAC 430 + A AT 430 A480 = AAC 480 + AAT 480 Onde A430 e A480 so os valores das absorbncias medidas em cada um dos comprimentos de onda. AAC
430

eA

AT 430

representam as absorbncias do amarelo

crepsculo e do amarelo tartrazina no comprimento de onda de 430 nm, respectivamente e AAC 480 e AAT 480 ,as absorbncias do amarelo crepsculo e amarelo tartrazina no comprimento de onda de 480 nm. A concentrao de cada amostra pode ser calculada a partir de uma combinao entre as duas equaes: A430 = m1CAT + m2CAC CAT = A430 m2CAC m1 A480 = m3CAT + m4CAC m1A480 = m3A430 m2m3CAC + m1m4CAC A480 = m3 A430 m2CAC + m4CAC m1 A480 = m3A430 m2m3CAC + m1m4CAC m1 m1 m1A480 = m3A430 CAC (m1m4 m2m3) CAC = m1A480 m3A430 m1m4 m2m3

m1 = 0,04 Amostra A:

m2 = 0,03

m3 = 0,01

m4 = 0,05

CAC = 0,04 x 0,321 0,01 x 0,513 0,04 x 0,05 0,03 x 0,01 CAC = 4,54 mg/L

CAT = 0,513 0,03 x 4,54 0,04 CAT = 9,42 mg/L

Amostra B: CAC = 0,04 x 0,873 0,01 x 1,292 0,04 x 0,05 0,03 x 0,01 CAC = 12,94 mg/L Amostra C: CAC = 0,04 x 1,215 0,01 x 1,979 0,04 x 0,05 0,03 x 0,01 CAC = 16,95 mg/L CAT = 1,979 0,03 x 16,95 0,04 CAT = 36,76 mg/L CAT = 1,292 0,03 x 4,54 0,04 CAT = 22,595 mg/L

Suco de Abacaxi: CAC = 0,04 x 0,199 0,01 x 0,230 0,04 x 0,05 0,03 x 0,01 CAC = 3,33 mg/L CAT = 0,230 0,03 x 3,33 0,04 CAT = 3,25 mg/L

Suco de Maracuj: CAC = 0,04 x 0,644 0,01 x 0,848 0,04 x 0,05 0,03 x 0,01 CAC = 10,16 mg/L CAT = 0,848 0,03 x 10,16 0,04 CAT = 13,58 mg/L

Concluso: A partir do experimento realizado foi possvel obter as concentraes de amarelo tartrazina e amarelo crepsculo em cada uma das amostras. Todas as amostras tiveram concentraes de amarelo tartrazina maiores que a de amarelo crepsculo, sendo coerente com a cor mais amarelada observada. A

espectrofotometria um mtodo simples, de baixo custo e alta sensibilidade, que pode ser utilizada na determinao multielementar de corantes alimentcios.