Cintica e reguIao Cintica e reguIao

enzintica enzintica
IS1 IML
2 Semestre 2007]2008
TrabaIho reaIizado por:
Mlguel Amaoor n58484
[oana Nunes n58497
[oo Marques n58513
C|nt|ca C|nt|ca Lnz|mt|ca Lnz|mt|ca
LsLruLura LnzlmLlca ConsLlLulo em Amlnocldos
Mecanlsmos de Aco LnzlmLlca
So dlflcels de deflnlr quanLlLaLlvamenLe
ueLermlnar consLanLes da reaco caLallsada
lnfluenclam
e necessrlo elo que
C|nt|ca C|nt|ca Lnz|mt|ca Lnz|mt|ca
ClneLlca LnzlmLlca
LsLudo da velocldade de uma reaco qulmlca que ocorre na presena de
um enzlma
ermlLe elucldar sobre
Ws pormenores do mecanlsmo caLallLlco das enzlmas
W papel das enzlmas no meLabollsmo
WConLrole da acLlvldade
WMecanlsmos de lnlblo
Ie|oc|dade Ie|oc|dade vs vs Concentrao Concentrao
A concenLrao de subsLraLo lnfluencla a velocldade de uma reaco
LsLudo da relao enLre a concenLrao e a velocldade
no lnlclo da reaco a quanLldade de subsLraLo e consLanLe [ que a
quanLldade de subsLraLo e mulLo malor do que a de enzlma
ueLermlnase a velocldade lnlclal de reaco v
o
para uma deLermlnada
S
bLmse valores para vrlas concenLraes de subsLraLo manLendo
consLanLe a concenLrao de enzlma
Asslm podemos Lraar os valores num grflco em que exprlmlmos v
o
como funo de S
Ie|oc|dade Ie|oc|dade vs vs Concentrao Concentrao
uados
Wara S balxas v
o
aumenLa quase llnearmenLe
Wara S malores v
o
aumenLa mals gradualmenLe
Wara S mals elevadas aLlngese uma velocldade mxlma v
mx

Lquao Lquao de de M|chae||s M|chae||s Menten Menten

ComporLamenLo e expllcado pela formao do complexo enzlmasubsLraLo LS
1 enzlma llgase ao subsLraLo reverslvelmenLe formando o complexo LS
2 complexo LS dlssoclase em enzlma llvre e produLo da reaco
8eaco
rplda
8eaco
mals lenLa
A reaco 2 mals lenLa llmlLa a velocldade global da reaco
A velocldade e proporclonal concenLrao do complexo LS
A cada momenLo o enzlma exlsLe na forma llvre e no complexo LS
A velocldade mxlma (v
mx
) da reaco ocorre quando Lodos os enzlmas esLo
assocladas a moleculas de subsLraLo
eduo da Lquao M|chae||sMenten
A curva que represenLa a relao enLre S e v
o
Lem forma ldnLlca para a malor
parLe dos enzlmas LsLa curva pode ser descrlLa algebrlcamenLe pela equao de
MlchaellsMenLen
n|ptese o passo llmlLanLe da velocldade das reaces enzlmLlcas e a desassoclao
do complexo LS
A equao de MlchaellsMenLen e
eduo da Lquao M|chae||sMenten
resuposto no h Lransformao de produLo em subsLraLo
8eaces de formao e desassoclao do complexo LS
v
o
pode ser conslderado como a velocldade com que ocorre a quebra da llgao LS
no e fcll deLermlnar LS!
L
1
concenLrao LoLal da enzlma
A concenLrao de enzlma llvre e asslm L
1
LS
eduo da Lquao M|chae||sMenten
asso 1
velocldade de formao de LS
velocldade de degradao de LS
asso 2
LS e consLanLe ou se[a a velocldade de degradao e formao de LS so lguals
asso 3
eduo da Lquao M|chae||sMenten
asso 4
bLemos v
o
subsLlLulndo LS
A velocldade e mxlma quando LSL
1
!
Lquao de MlchaellsMenLen
n||se da Lquao M|chae||sMenten

m
unldades de concenLrao
A equao de MlchaellsMenLen que nos d a relao quanLlLaLlva enLre a
velocldade lnlclal v
0
a velocldade mxlma v
mx
e a quanLldade lnlclal de
subsLraLo S Lodas relaclonadas pela consLanLe de Mlchaells
m
no caso de v
0
ser exacLamenLe meLade de v
max

m
corresponde concenLrao de subsLraLo para a qual v
0
e meLade da velocldade mxlma
n||se da Lquao M|chae||sMenten
A equao de MlchaellsMenLen e mulLo uLll para deLermlnar os valores de
m
e v
mx
das
reaces
s enzlmas que exlbem uma dependncla hlperbllca de v
0
em funo de S dlzse que seguem
a clneLlca de MlchaellsMenLen
Lnzlmas cu[o mecanlsmo obedea s duas reaces anLerlores podemos dlzer que o valor de
m
esL relaclonado com a aflnldade do enzlma para o subsLraLo e logo e dlferenLe de subsLraLo para
subsLraLo e de enzlma para enzlma
v
mx
e a velocldade mxlma que a reaco pode alcanar na slLuao vlrLual em que Lodos
os enzlmas se enconLram llgados ao subsLraLo
Lquao de L|neweaver8urk
odemos Lransformar a equao de MlchaellsMenLen lnverLendoa
LsLa forma da equao de MlchaellsMenLen chamase equao de Llneweaver8urk
Lquao de L|neweaver8urk
rflco de 1/v
0
em funo de 1/S
bLemse uma funo
llnear!
LsLa recLa Lem um decllve
m
/v
mx
A lnLerseco da recLa no elxo 1/v
0
corresponde ao valor 1/v
mx
A lnLerseco com o elxo 1/S corresponde a 1/
m
ermlLe uma deLermlnao de v
mx
preclsa!
In|b|o enz|mt|ca
W 8everslvel
W lrreverslvel
CompeLlLlva
AnLlCompeLlLlva
MlsLa
In|b|o kevers|ve| Compet|t|va
W compeLlo pelo cenLro acLlvo do enzlma
W lnlbldor e esLruLuralmenLe semelhanLe ao
subsLracLo
W A lnlblo pode ser conLrarlada adlclonando
mals subsLracLo ao melo
W m aumenLa e o vmax no se alLera
In|b|o kevers|ve| Compet|t|va
In|b|o kevers|ve| Compet|t|va
In|b|o kevers|ve| Compet|t|va
In|b|o kevers|ve| nt|Compet|t|va
W lnlbldor llgase a um local especlflco do
enzlma (que no o cenLro acLlvo)
W lnlbldor llgase apenas ao complexo LS
formando o complexo LSl
W m dlmlnul e o vmax dlmlnul
In|b|o kevers|ve| nt|Compet|t|va
In|b|o kevers|ve| nt|Compet|t|va
In|b|o kevers|ve| nt|Compet|t|va
In|b|o kevers|ve| M|sta
W lnlbldor llgase a um local especlflco do
enzlma (que no o cenLro acLlvo)
W lnlbldor llgase LanLo ao enzlma llvre
como ao complexo LS
W vmax dlmlnul
W m pode aumenLar dlmlnulr ou manLerse
In|b|o kevers|ve| M|sta
In|b|o kevers|ve| M|sta
In|b|o kevers|ve| M|sta
In|b|o kevers|ve|
Imax aparente km aparente
Sem lnlblo vmax m
lnlblo
compeLlLlva
vmax m
lnlblo AnLl
CompeLlLlva
vmax/' m/'
lnlblo MlsLa vmax/' m/'
Cuando ' a lnlblo MlsLa Lem o nome de
lnlblo No Compet|t|va
In|b|o Irrevers|ve|
W lnlbldor comblnase permanenLemenLe ao
enzlma de uma das segulnLes formas
Llgao covalenLe
uesLrulo de um grupo funclonal essenclal ao
funclonamenLo do enzlma
Llgao no covalenLe parLlcularmenLe esLvel
nexoc|nase
W A hexoclnase fosforlla a glucose para glucose6fosfaLo
W 8eaco ocorre com consumo de A1 [unLamenLe
com um lo Mg2+
W m para a glucose e 01mM e a concenLrao de
glucose na celula e 4mM
W A hexoclnase e regulada alosLerlcamenLe pelo
produLo da sua prprla reaco
nexoc|nase
W A hexoclnase e uma enzlma do Llpo lnduLlvo
nexoc|nase
W osforllao lmpede a salda de glucose da celula
nexoc|nase
W 8eaco caLallsada pela hexoclnase
nexoc|nase
W no flgado Lambem exlsLe uma hexoclnase mas com
menor aflnldade para com a glucose
W LsLa s esL acLlva quando a concenLrao de
glucose no sangue e mulLo elevada
W no flgado a glucose e converLlda em gllcogenlo
W Cuando a concenLrao de glucose no sangue e balxa
o flgado no compeLe com ouLros Lecldos
nexoc|nase
W A fosforllao da glucose e reverslvel!
W A converso da glucose6fosfaLo em
glucose ocorre no flgado duranLe a
gluconeogenese
Lnz|mas kegu|adores
W Lnzlmas que aumenLam ou dlmlnuem a sua
acLlvldade em reaco a deLermlnados facLores
W azem normalmenLe parLe de sequnclas
meLabllcas
ermlLem regular a acLlvldade de Loda a
sequncla meLabllca e posslblllLam celula
a[usLarse s suas necessldades energeLlcas e
blomoleculares
1|pos de Modu|adores
Mecanlsmos que regulam a acLlvldade enzlmLlca
Wvarlao da concenLrao de subsLraLo
Wvarlao de p e LemperaLura
Wlnlblo enzlmLlca
WModu|ao cova|ente
WModu|ao a|ostr|ca
Modu|ao a|ostr|ca
corre em enzlmas que possuem um local de modulao alosLerlco
Modulador alosLerlco
oslLlvo
(acLlvam o enzlma)
negaLlvo
(lnlbe o enzlma)
eLeroLroplsmo
(o modulador e
dlferenLe do subsLraLo)
omoLroplsmo
(o modulador e
lgual ao subsLraLo)
A llgao enLre o modulador e o enzlma e nocovalenLe e o local de modulao e
especlflco para cada modulador no caso dos enzlmas heLeroLrplcos
Modu|ao a|ostr|ca
Induz
Modlflcaes conformaclonals
na esLruLura espaclal do
enzlma
Modlflca a aflnldade do
enzlma para com os seus
subsLraLos
Modu|ao a|ostr|ca
Dm modelo mulLo comum de
regulao alosLerlca e a lnlblo
por reLroallmenLao onde o
prprlo produLo da reaco
acLua como modulador da
enzlma que a caLallsa
C|nt|ca
Wno seguem a clneLlca de
MlchaellsMenLen
WComporLamenLo slgmlde
WS para a qual v
0
v
mx
/2 no
corresponde ao
m
comporLamenLo slgmlde e expllcado pela lnLeraco enLre as subunldades das
proLelnas [ que mudanas esLruLurals numa subunldade so Lransferldas para as
ad[acenLes aLraves de lnLeraces no covalenLes enLre elas
C|nt|ca
Lnz|mas homotrp|cas pequenas varlaes na concenLrao do
modulador podem provocar grande varlaes na acLlvldade do
enzlma
Lnz|mas heterotrp|cas dlflcll generallzar a forma como se
comporLam ApresenLam uma grande varlabllldade no
comporLamenLo
C|nt|ca
Modu|ao cova|ente
Wosforllao
WAdenllao
WDrlnllao
WAurlbosllao
WMeLllao
rupos adlclonados ou reLlrados do enzlma aLraves
de modlflcaes covalenLes
Iosfor||ao
Llgao de um grupo osforll a deLermlnados reslduos de
amlnocldos
W caLallsada por qulnases
W um processo reverslvel
WosfaLase remove os grupos fosforll adlclonados
Iosfor||ao
lnfluencla a polarldade
dos amlnocldos
ermlLe o esLabeleclmenLo
de ponLes hldrogenlnlcas
lmporLanLes para a esLruLura e
conformao da molecula
C grupo fosfor||
den||ao
adlclonado um grupo Adenll Llroslna
Dr|d||ao
adlclonado um grupo urldll Llroslna
k|bos||ao
acresenLada uma Au8lbose com lncldncla nos reslduos
Arglnlna luLamlna ClsLelna e lsLldlna alLerada (dlfLamldaa)
Met||ao
adlclonado um grupo meLll em reslduos de gluLamaLo
|mogn|os
A regulao enzlmLlca pode passar alnda pela exlsLncla de
um precursor sem capacldade caLallLlca que no caso das
proLeases so chamados zlmogenlos
|mogn|o C||vagem proteo||t|ca
Lnz|ma act|va