PCR:

Mtodos e aplicaes
Lucas Nogueira, M.Sc. CCB-MIP-UFSC Laboratrio de Imunologia Doenas Infecciosas E-mail: lnogueira@ccb.ufsc.br

Tpicos:
-Breve histrico. -O que a PCR? - Como funciona a PCR? - OKmizando a PCR. - Desenho de Primers. - Aplicaes da PCR.

ANTECEDENTES HISTRICOS
Algumas das etapas principais do desenvolvimento da tecnologia do DNA recombinante com seus correspondentes autores so: Marmur & Doty. 1961. Descubriram a renaturalizao do DNA, estabelecendo a especicidade e a possibilidade das reaes de hibridao dos cidos nucleicos. J Mol Biol. 1962 Jul;5:109-18.Determina3on of the base composi3on of deoxyribonucleic acid from its thermal denatura3on temperature. MARMUR J, DOTY P P.PMID: 14470099 [PubMed - indexed for MEDLINE]

Prof. Julius Marmur

Prof. Paul Doty

Arber. 1962. Proporcionou a primeira prova da existncia das enzimas de restrio do DNA que conduziu a sua posterior puricao e uKlizao na caracterizao da sequncia do DNA por parte de Nathans & H.Smith.

Arber

Smith

Nathans

Monod, Jacob & Lwof. 1965. Dividiram o Premio Nobel em Medicina pelo trabalho sobre a aKvidade reguladora dos genes.

Jacob

Lwof

Monod

Nirenberg, Ochoa & Khorana. 1966. Decifraram o cdigo genKco.

Nirenberg Ochoa Khorana Gellert. 1967. Descobriu a DNA ligase, a enzima uKlizada para unir os fragmentos de DNA.

Boyer, Cohen & Berg. 1972-1973- Desenvolveram as tcnicas de clonagem do DNA.

Cohen

Boyer

Sanger, Barrell, Maxam&Gilbert. 1975-1977. Desenvolveram mtodos rpidos de sequenciamento de DNA.

Gilbert Sanger

James Watson. 1990. Um dos primeiros diretores do projeto genoma humano.

PCR
Polymerase Chain Reaction ou Reao em Cadeia da Polimerase
Tcnica de biologia molecular empregada para obter-se amplificao exponencial de pequenas quantidades de DNA in vitro

Mtodo rpido e eficiente para amplificao de sequncias especficas a partir de uma mistura complexa de sequncias genmicas ou cDNA Amplicons produtos da PCR