V WORKSHOP SOBRE PREPARO DE AMOSTRAS ANLISE DIRETA DE SLIDOS EM ESPECTROMETRIA DE ABSORO ATMICA COM ATOMIZAO ELETROTRMICA: ASPECTOS GERAIS

E APLICAES
Pedro Vitoriano de Oliveira
Laboratrio de Espectrometria de Emisso e Absoro Atmica (LEEAA) Instituto de Qumica USP

E-mail: pvolivei@iq.usp.br

1860 G. Kirchhoff e R. Bunsen

amostragem de slido

1959 Boris V. LVov

B. V. LVov, Spectrochim. Acta, 39B (1984) 159 B. Welz, M. Sperling; Atomic Absorption Spectrometry Third, Completely Revised Edition, Wiley-VCH Verlag GmbH, Alemanah, 1999

Amostragem de Slidos e Tcnicas Espectroscpicas

Arco e fasca para OES e MS Glow discharge para OES e MS Espectrometria de fluorescncia de raio-X Amostragem de suspenses/slidos em FAAS Amostragem de suspenses em ICP OES e ICP-MS Ablao por laser para amostragem em ICP OES e ICP-MS Amostragem de suspenso/direta de slido em ETAAS Amostragem de suspenso/slido com vaporizao

eletrotrmica em ICP-OES e ICP-MS

Amostragem de slidos/suspenses Vantagens:

reduzir tempo de anlise reduzir custo evitar contaminao evitar o uso de reagentes perigosos aumentar sensibilidade avaliar micro distribuio estudar homogeneidade minimizar interferncias provocadas por cidos mtodos mais limpos

Amostragem de slidos/suspenses Problemas:

Introduo de amostras (ICP OES e ICP MS) Eficincia de atomizao e ionizao (ICP-OES e ICP-MS) Homogeneidade da amostra Calibrao do instrumento Interferncias espectrais Branco analtico

ETAAS Anlise de Solues (Decomposio de Amostra)

ETAAS Anlise de Slidos (suspenso) (direta)

Materiais orgnicos e inorgnicos Quantidades de Amostras (10 1000 g) quarteamento Preparao da Amostra homogeneizao secagem ou liofilizao moagem tamanho de partculas Sub Amostra m = 250 5000 mg (n = 1-3) Digesto ou Dissoluo Diluio Anlise Instrumental Processamento dos Dados Descarte e Lavagem de Material
Fonte: Solid Sample Analysis, Edited by Ulrich Kurfrst, Springer, Berlin, 1998

Sub amostra (n=1-5) m=10 100 mg

Sub amostra (n=3-10) m=0,050 10mg

Suspenso

AMOSTRADOR DE SLIDOS

analytikjenaAG

analytikjenaAG

analytikjenaAG

APLICAES DA SS-ETAAS

Materiais de Alta Materiais de Alta Pureza Pureza

Materiais de Difcil Decomposio

Disponibilidade de Pequena Massa de Amostra

Estudo da Homogeneidade

M.A. Belarra, M. Resano, F. Vanhaecke, L. Moens, Trends in Anal.. Chem., 21 (2002) 828

APLICAO: Materiais de Alta Pureza

Determinao de Si em xido de Nibio, Zircnio e Titnio
Uso: Material Tecnolgico Pureza: 99,997 99,999 % (Si < 1 g/g)
Limite de deteco de algumas tcnicas espectroscpicas Amostra Nb2O5 TiO2 ZrO2 LD (g/g) SS-ETAAS 0,020 0,070 0,020 ETAAS 7 2 ICP-OES XRFS 15 20 30 SSMS 10 -

Tamanho de Partcula: 10 50 m Mod. Qum.: 10 g Pd + 10g Mg

Massa: 3 15 mg Calibrao: Sol. Aquosa

H. M. Dong, V. Krivan, Spectrochim. Acta, 56B (2001) 1645 M. D. Huang, V. Krivan, Fresenius J. Anal. Chem., 368 (2000) 227

Concentrao de Si determinado em amostras de Nb2O5, TiO2 e ZrO2 Amostra Nb2O5 TiO2 ZrO2 Concentrao (g/g) SS-ETAAS 1,1 0,2 73 8 27 2 ETAAS 76 4 25 4 DC-AES 75 5 -

H. M. Dong, V. Krivan, Spectrochim. Acta, 56B (2001) 1645

Determinao de Cu, Fe e Pb em Ag2O

Ag2O sem moagem

Tamanho mdio de partculas: 34 m

Intervalo de massas:

70 to 190 g to Cu 30 to 150 g to Fe 80 to 250 g to Pb

RSD>10%
C. S. Silva (ps-doutorado)

Determination of Cu, Fe and Pb in Ag2O (% oxide sd, n=5)

Element Cu Fe Pb ICP OES 2.5 0.3 12.4 0.7 24.5 0.3 ETAAS 2.1 0.8 11.7 0.7 22.9 0.6 SS ETAAS 3.1 0.3 12.3 0.8 23.8 2.1

Tubo: 750 cycles ; Plataforma: 350 cycles

APLICAES DA SS-ETAAS

Materiais de Alta Pureza

Materiais de Materiais de Difcil Difcil Decomposio Decomposio

Disponibilidade de Pequena Massa de Amostra

Estudo da Homogeneidade

M.A. Belarra, M. Resano, F. Vanhaecke, L. Moens, Trends in Anal.. Chem., 21 (2002) 828

DETERMINAO DE Fe EM AREIA Aplicao: Indstria de vidro Fe: impureza Moagem + Digesto

Procedimento convencional

Reagentes: HCl/HF/HClO4 Tempo gasto: 4 horas Moagem Tempo gasto: 30 minutos

SS-ETAAS

C. S. Silva, C. S. Nomura, J. A. Nbrega, P. V. Oliveira

Distribuio do Tamanho de Partculas

Areia antes da moagem

Distribuio do Tamanho de Partculas

Areia aps a moagem

Determinao de Fe em Areia HOMOGENEIDADE x TAMANHO DE PARTCULA

Areia no moda
12 Absorbancia / massa de areia 10 8 6 4 2 0

Areia moda
12 Absorbancia / massa de areia

RSD = 57%

RSD = 13%

10 8 6 4 2 0

1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 01 11 21 31 41 51 61 71 81 92 0 n m e r o d e d e te r m in a e s

1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 1 11 2 1 3 1 41 51 6 1 7 1 81 92 0 n m e r o d e d e te r m in a e s

Tamanho de Partcula: 500 m

Tamanho de Partcula: 10 m

Determinao de Fe em Areia USO DE MODIFICADORES QUMICOS

1 2

Sem Mod. Quim.

Com 50 g Pd

1. Fe(s) 2. FeO(s)
Absorbncia Integrada (s )

Fe(g) Fe
Absorbancia Integrada (s )
-1

FeO(g)

(g)

+ 1/2 O2(g)
Soluo Aquosa Amostra Slida

0,8 0,6 0,4 0,2 0,0 0

Soluo Aquosa Amostra Slida

1,0 0,8 0,6 0,4 0,2 0,0 0

-1

6
Fe (ng)

10

12

14

6
Fe (ng)

10

12

Determinao de Fe em Areia

Amostra A1 A2 A3 A4 A5 n=5

Referncia 0,015 0,017 0,015 0,015 0,016

Com Mod. Quim. 0,017 0,001 0,014 0,001 0,011 0,003 0,015 0,001 0,018 0,002

Sem Mod. Quim. 0,013 0,001 0,016 0,001 0,012 0,001 0,011 0,001 0,012 0,001

APLICAES DA SS-ETAAS

Materiais de Alta Pureza

Materiais de Difcil Decomposio

Disponibilidade de Pequena Massa de Amostra

Estudo da Homogeneidade

M.A. Belarra, M. Resano, F. Vanhaecke, L. Moens, Trends in Anal.. Chem., 21 (2002) 828

APLICAO EM QUMICA FORENSE

Determinao de resduo de Sb aps disparo com arma de fogo

Massa de amostra: 1,0 2,0 mg

W. Lichtenberg, Fresenius Z. Anal. Chem, 328 (1987) 367

APLICAO EM QUMICA AMBIENTAL

Determinao de Pb, Cd e Hg em pena de aves

Cd Pb

Massa de amostra: 0,05 1,00 mg

Cd e Pb: Contaminao Exgena Hg: Contaminao Endgena

Hg

E. Hahn, K. Hahn, C. Mohl, M. Stoeppler, Fresenius J. Anal. Chem., 337 (1990) 306

APLICAO EM QUMICA AMBIENTAL

Determinao de Cd em cabelo

C. S. Nomura (Tese de Doutorado)

0,25 0,20 0,15 0,10

Lavagem: (a) Acetona (b) Acetona e HCl 0,1 M (a)

Cd (mg kg )

0,05 0,00 0,25 0,20 0,15 0,10 0,05 0,00 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18

-1

(b)

cm
RAIZ DO CABELO PONTA DO CABELO

Lavagem: (a) Acetona (b) Acetona e HCl 0,1 M

0,25 0,20 0,15 0,10 0,05 0,00 0,25 0,20 0,15 0,10 0,05 0,00 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18

(a)

Pb (mg kg )

-1

(b)

cm

RAIZ DO CABELO

PONTA DO CABELO

Separao de protenas por SDS-PAGE

97kDa 66kDa 45kDa 31kDa

86kDa 73kDa 64kDa 56kDa 50kDa 42 e 40kDa 37kDa 19kDa

SDS-PAGE: (a) padro de protenas (b) gua de coco

21kDa

(a)

(b) R. C. Siloto (Dissertao de Mestrado)

SDS-PAGE de amostras de gua de coco: (A) padres de protenas (B) amostra 1 (C) amostra 2

Determinao de Cu nas diferentes fraes obtidas por SDS-PAGE

Determinao Cu por SS-ETAAS

m = 100-1000 ug

Pesos moleculares de protenas x concentrao de Cu

j (45,6 47,3 kDa)

i (42,5 47,3 kDa) j i h g f e d c b a

g (38,2 39,6 kDa) f (33,1 34,3kDa)
Bandas

h (41,0 42,5kDa)

e (30,9 34,3kDa) d (24,1 24,9kDa) c (21,6 22,4kDa) b (18,8 19,4kDa) a (17,5 18,1kDa)

j i h g f e d c b a 0,0

0,2

0,4

0,6

0,8

1,0

1,2

Concentrao relativa de Cu (ng/mg gel)

Pesos moleculares de protenas x concentrao de Cu

j i h g f e d c b a

j (45,6 47,3kDa) i (41,0 42,5kDa) h (38,2 39,6kDa) g (36,8kDa) f (33,1 34,3kDa) e (29,8 30,9kDa) d (25,8 26,8kDa) c (24,1 24,9kDa) b (22,4 23,2kDa) a (20,9 21,6kDa)

j i h g f e d c b a 0,0

Bandas

0,1

0,2

0,3

Concentrao relativa de Cu (ng/mg gel)

APLICAES DA SS-ETAAS

Materiais de Alta Pureza

Materiais de Difcil Decomposio

Disponibilidade de Pequena Massa de Amostra

Estudo da Homogeneidade

M.A. Belarra, M. Resano, F. Vanhaecke, L. Moens, Trends in Anal.. Chem., 21 (2002) 828

APLICAO: Estudo De Microhomogeneidade

A homogeneidade dos Materiais de Referncia Certificados uma propriedade crucial especialmente quando uma mnima massa de amostra de um determinado material utilizado para anlise considerado

CRMs Representatividade: 100 - 500 mg

Baixa Disponibilidade de Amostra?

? ?
M. Rossbach, P. Ostapczuck, H. Emons, Fresenius J. Anal. Chem., 360 (1998) 380

Controle da Microhomogeneidade de CRMs Concentrao (mg/kg) Repolho Cd Cu Pb Ni < 0,5 3,0 0,3 10,8 0,5 3,5 Espinafre 1,5 12 2 1,2 0,2 6,0 Folhas de Ch 0,030 0,003 7,0 0,3 0,80 0,03 6,5 0,3
Homogeneidade matriz, analito, [analito]

Massa: Pb = 0,1 0,8 mg Cd = 0,6 2,0 mg Cu = 0,4 0,8 mg Ni = 1,5 2,5 mg

U. Bagschick, D. Quack, M. Stoeppler, Fresenius J. Anal. Chem., 388 (1990) 386

APLICAO: Estudo da Microhomogeneidade em material biolgico

LIMPEZA

QUARTEAMENTO

SECAGEM MW: 30W 15 min + ESTUFA: 60oC 48h MOAGEM

LIOFILIZAO 48h

E. Lucker, H. Konig, W. Gabriel, A. Rosopulo, Fresenius J. Anal. Chem., 342 (1992) 941 C. S. Nomura (Tese Doutorado)

MOAGEM: HOMOGENEIZAO
MOINHO DE BOLAS m=5g

Frasco de W2C

5 min

15 min

30 min

60 min

Bolas de W2C

MOAGEM: HOMOGENEIZAO
MOAGEM CRIOGNICA m = 1-2 g 3 CICLOS 5 min pr-congelamento 2 min moagem 1 min congelamento

TAMANHO DE PARTCULA: MW + ESTUFA

Volume (%)
10

10 8 6 4 2 0 10 8 6 4 2

0,1

100

1000

100 80 60 40 20

5 min

0,1 0,1

1 1

10 10

100 100

1000 1000

30 min

100 80 60 40 20

0 0,1

10

100

0 1000

Dimetro da partcula (m)

TAMANHO DE PARTCULA: Moagem 5 min

Volume (%)
10 8 6 4 2 0 10 8 6 4 2 0 0,1 1 10 100
0,1 0,1 1 1 10 10 100 100 1000 1000 0,1 1 10 100 1000

mw + estufa

100 80 60 40 20 0 100 80 60 40 20

liofilizado

0 1000

Dimetro da partcula (m)

Preciso e Exatido x Massa de amostra Bovine Liver NIST 1577b Zn 127 16 g/g
180

160

0,080 mg

140

[Zn] (mg/kg)

120

100 1: 0,001 - 0,020 2: 0,021 - 0,030 3: 0,031 - 0,040 4: 0,041 - 0,050 0 1 2 3 4 5 6 7 5: 0,051 - 0,060 9: 0,091 - 0,100 6: 0,061 - 0,070 10: 0,101 - 0,120 7: 0,071 - 0,080 11: 0,121 - 0,150 8: 0,081 - 0,090 12: 0,151 - 0,200 13: 0,201 - 0,400 8 9 10 11 12 13 14

80

60

Intervalo de massa (mg)

Preciso e Exatido x Massa de amostra Fgado Bovino Liofilizado (moinho bolas) Zn 126 11 g/g
180 160

0,040 mg

[Zn] (mg/kg)

140 120 100 80 60

1: 0,001 - 0,020 2: 0,021 - 0,030 3: 0,031 - 0,040 4: 0,041 - 0,050 5: 0,051 - 0,060 6: 0,061 - 0,070 6: 0,061 - 0,070 7: 0,071 - 0,080 8: 0,081 - 0,100 9: 0,101 - 0,150 10: 0,151 - 0,200 11: 0,201 - 0,300

10

11

12

Intervalo de massa (mg)

Preciso e Exatido x Massa de amostra Fgado Bovino Seco em Estufa (moinho bolas) Zn 128 12 g/g
200 150 100

[Zn] (mg/kg)

50 0 -50 -100
1. 0,001 - 0,010 2. 0,011 - 0,020 3. 0,021 - 0,030 4. 0,031 - 0,040

0,070 mg

5. 0,041 - 0,050 6. 0,051 - 0,060 7. 0,061 - 0,070 8. 0,071 - 0,090

9. 0,091 - 0,110 10. 0,111 - 0,160 11. 0,161 - 0,200 12. 0,201 - 0,400

10

11

12

Intervalo de massa (mg)

AGRADECIMENTOS
d
repar o eP

de

oratri o ab L

A mostra s

LAPA

Laboratrio de Espectrometria de Emisso e Absoro Atmica

Profa. Dra. Elisabeth de Oliveira