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PROBLEMA 1 CONTROLE DA SITUAO

Sandra, caloura do curso de Medicina, comentou com seu irmo que tem muito o que estudar para a prxima aula de Biologia Celular, pois haver uma discusso sobre taxas de proliferao celular em diferentes tipos celulares e sobre os mecanismos que regulam este processo. O irmo ficou muito interessado, pois havia acabado de ler uma reportagem mostrando que o crescimento desenfreado de diferentes tipos de tumores se deve, em parte, desregulao de protenas reguladoras do ciclo celular, como as ciclinas. Objetivos Estuda a mitose e os mecanismos que regulam este processo; Conhecer as diferentes taxas de crescimento para diferentes tipos celulares; Estudar as possveis causas que alteram a diviso celular; Conceituar neoplasia.

Ciclo Celular
- O ciclo celular possui uma fase M, composta pela mitose e citocinese, e a interfase, um perodo entre duas fases M. A fase M completa leva cerca de 1h em clulas de mamferos. Interfase - Durante a fase S (8 horas), a clula replica seu DNA nuclear, de forma semiconservativa. As fases G1 e G2 proporcionam um perodo adicional para a clula crescer e duplicar suas organelas citoplasmticas: se a interfase durasse apenas o tempo suficiente para a replicao do DNA, a clula no teria tempo de dobrar sua massa antes da diviso e, consequentemente, tornar-se-ia menor a cada diviso (clulas do ovo). - No perodo G1 (11 horas) que se reinicia a sntese de RNA e protenas, que estava interrompida durante a mitose. Em G2 (4 horas) continua a sntese de protenas e RNA sendo que a condensao dos cromossomos marca o final da G2. Mitose - No final do perodo G2 ocorre a montagem do fuso mittico, composto por microtbulos, que ter a funo de separar os cromossomos replicados e alocar uma cpia de cada cromossomo em cada clula. - Outra estrutura do citoesqueleto, que formada ao fim da mitose, o anel contrtil, composto por filamentos de actina e miosina. Este anel forma um plano perpendicular clula, exatamente abaixo da membrana plasmtica, e, ao se contrair, puxa a membrana para dentro dividindo a clula em duas. - Organelas como mitocndrias dobram a cada ciclo celular, sendo repartidas com as clulas-filhas. J organelas como o complexo de Golgi e o retculo endoplasmtico se fragmentam durante a mitose, aumentando a chance de serem mais ou menos distribudos igualmente. - As fases da mitose com seus respectivos eventos so os seguintes: PRFASE - Os cromossomos se condensam e o fuso mittico comea a se formar do lado de fora do ncleo. - Os microtbulos so organizados por centrossomos, um de cada lado da clula. PROMETFASE - Nesta etapa o ncleo celular se rompe, permitindo que o fuso de microtbulos entre em contato com os cromossomos e se liguem a eles, atravs dos cinetcoros (formados no fim da prfase). METFASE - Os cromossomos alinham-se no fuso equatorial. necessrio manter uma quantidade constante de tubulina para manter o fuso. ANFASE

- As duas cromtides irms em cada cromossomo replicado separam-se (clivadas por enzimas proteolticas) sincronizadamente e o fuso as direciona para as extremidades opostas da clula. - O movimento dos cromossomos consequncia de dois processos: anfase A, quando os microtbulos do cinetcoro encurtam por despolimerizao e os cromossomos a eles ligados movem-se em direo ao plo; na anfase B, os prprios polos do fuso separam-se formando dois grupos de cromossomos. TELFASE - Nesta etapa o envoltrio nuclear se refaz ao circundar cada um dos dois grupos de cromossomos separados para formar dois ncleos. - Os ncleos se expandem e os cromossomos se descondensam e a transcrio dos genes retomada. Citocinese - A citocinese geralmente comea na anfase (presena de um sulco na membrana plasmtica), mas no completada at os dois ncleos-filhos terem se formado. - O anel contrtil composto principalmente de uma rede de filamentos de actina e miosina, sendo formado na anfase e ficando preso a protenas associadas membrana na face citoplasmtica da membrana plasmtica. Desmonta-se completamente assim que a clula dividida em duas.

Taxas de proliferao celular - Clulas lbeis: clulas com alta taxa de diviso celular, dividindo-se continuamente por toda a vida do indivduo. Substituem clulas destrudas fisiologicamente e ocorrem em tecidos onde a regenerao derivada de uma populao de clulas-tronco, com ilimitada capacidade de diviso. Ex: clulas hematopoiticas, epiteliais colunares do TGI e TU e epiteliais da superfcie mucosa e ductos e glndulas. - Clulas estveis: dividem-se ocasionalmente, permanecendo em um estgio quiescente (G0), metabolicamente ativo. Proliferam somente se induzidas por sinais externos adequados. Ex: clulas parenquimatosas de todos os rgos do corpo (fgado, pulmo, pncreas) e clulas mesenquimais como as musculares lisas, fibroblastos e astrcitos. - Clulas perenes: clulas que terminam o ciclo, no se reproduzem nos adultos e no podem ser repostas. Ex: clulas musculares cardacas e nervosas. * Na ausncia de estmulos externos, o ciclo celular permanece no ponto de checagem em G 1 e entra no estado G0, podendo permanecer nesta situao por muito tempo antes de sofrerem nova diviso. Portanto, o ponto de checagem de G1 muitas vezes denominado de incio/parada, pois a passagem por ele representa a capacidade de completar o ciclo celular.

* Os tipos celulares que mantm sua capacidade de sofrer divises durante a vida do animal enquanto esto no organismo intacto iro, normalmente, cessar sua atividade de diviso aps um nmero limitado de divises em cultura, mesmo havendo espao, estmulos e nutrientes. Este processo chamado de senescncia celular e auxilia na determinao do tamanho do indivduo.

Controle do Ciclo Celular

- O sistema de controle do ciclo celular deve ativar as enzimas e outras protenas responsveis por um processo no tempo correto e desativ-las logo aps o trmino de tal processo. Tambm deve assegurar que cada estgio do ciclo tenha terminado antes de ser iniciado o prximo: deve haver certeza, por exemplo, que a replicao do DNA foi completada antes do incio da mitose e a mitose deve estar terminada antes da diviso da clula em duas e que outro processo de replicao do DNA no ocorra at que a clula tenha sofrido mitose e atingido um tamanho apropriado. - Na G1 um ponto de checagem de tamanho permite a suspenso do sistema e a clula pode continuar crescendo, se necessrio, antes do desencadeamento de mais um ciclo de replicao do DNA. Este ponto de checagem tambm avalia se o ambiente favorvel para a proliferao celular, antes de iniciar a fase S. - Uma segunda checagem do tamanho acontece em G2, permitindo a pausa do sistema antes do incio da mitose, caso alguma falha na replicao do DNA tenha ocorrido, por exemplo. Proteino-quinases dependentes de ciclina (CDKs) - O sistema-controle governa a maquinaria do ciclo celular pela fosforilao de protenas-chave que iniciam ou regulam a replicao, a mitose e a citocinese. - As reaes de fosforilao que controlam o ciclo celular so executadas por um grupo especfico de proteino-quinases, enzimas que catalisam a transferncia de um grupo fosfato do ATP a uma cadeia lateral de um aminocido particular presente na protena-alvo. Os efeitos da fosforilao podem ser prontamente revertidos pela desfosforilao realizada pelas proteino-fosfatases. - As proteino-quinases esto presentes durante todo o ciclo celular, mas so apenas ativadas em determinados momentos, sendo desativadas quando no mais necessrias. Quem regula esta ativao so as ciclinas (subunidade reguladora) que ao se ligarem s proteino-quinases (subunidade cataltica), ajuda a torn-las ativas. As ciclinas no tm atividade enzimtica sozinhas e recebem esse nome por sua concentrao variar durante o ciclo celular. - O Complexo CiclinaB-CDK2 ou fator promotor de maturao/mitose (MPF), pela fosforilao de protenas especficas, provoca a condensao dos cromossomos, fragmentao da membrana nuclear (fosforilao de protenas da lmina nuclear), alm de fosforilar tambm as protenas associadas dos microtbulos (formao do fuso mittico). O MPF aumenta rapidamente um pouco antes do incio da mitose e cai rapidamente a zero no final da mitose. - O aumento gradual da concentrao de ciclina auxilia no estabelecimento da mitose, enquanto sua subsequente reduo rpida auxilia o trmino da mitose. Sua rpida destruio durante a mitose feita pelo sistema proteoltico dependente de ubiquitina, que as marcam (ubiquitinao) para se degradarem nos proteassomas. Essa ubiquitinao um resultado indireto da ativao da prpria quinase MPF, que desativada em consequncia disso. funo do complexo promotor da anfase (APC) adicionar ubiquitina ciclina e a outras protenas envolvidas na regulao da mitose - A quinase para ser ativada, alm da ligao com a ciclina, necessita sofrer fosforilao em alguns stios e desfosforilao em outros. A remoo dos grupos fosfato inibitrios pela ao de uma proteino-fosfatase o evento que a ativa a quinase no final da interfase. - Uma vez ativado, o complexo ciclina-CDK capaz de ativar outros complexos ciclina-CDK. Esta retroalimentao positiva produz um aumento repentino, explosivo na atividade da quinase da MPF que promove uma passagem abrupta para a fase M. Diferentes complexos ciclina-CDK - Ciclinas distintas, chamadas de S-ciclinas e G1/S-ciclinas (SPFs) se ligam a uma protena CDK distinta no final de G1 para formar S-CDK e G1/S-CDK, respectivamente, que acionam a entrada na fase S. Outras ciclinas, chamadas de G1-ciclinas (D e E), atuam mais cedo em G1 e se ligam a outras protenas CDK para

formar G1-CDKs, que ajudam a conduzir a clula por G1 em direo fase S. A S-CDK inicia a replicao do DNA e impede que haja uma rerreplicao. - O aumento da concentrao de cada tipo de ciclina auxilia na ativao da CDK correspondente, enquanto sua queda faz com que a CDK correspondente retorne ao seu estado inativo. Assim, o lento acmulo de ciclina at o nvel crtico um modo do sistema-controle medir o tempo entre um estado do ciclo e o prximo.

- O ciclo celular pode ser suspenso por meio de pelo menos dois mecanismos: (1) protenas inibidoras de CDKs podem bloquear a montagem ou atividade de um ou mais componentes dos complexos ciclina CDK ou (2) suspenso da produo de componentes do sistema-controle. - Em alguns casos, surgem protenas inibidoras de CDK especficas, que bloqueiam a montagem ou a atividade de um ou mais complexos de ciclina-CDK. Por meio de um mecanismo ainda no conhecido, uma leso do DNA provoca um aumento tanto na concentrao como na atividade de uma protena de regulao gnica, denominada p53 que, quando ativada, estimula a transcrio de um gene que codifica uma protena inibidora de CDK, denominada p21. Com isso, h um aumento da concentrao de p21, que se liga ao complexo ciclina-CDK de fase S, responsvel pelo avano para a fase S, bloqueando sua ao e, desta forma, permitindo que a clula tenha tempo para executar o reparo da leso do DNA antes da replicao. - Na mitose, h um ponto de checagem que determina se todos os seus cromossomos esto aproximadamente ligados ao fuso mittico. O cromossomo no ligado emite um sinal que inativa a APC. Controle do nmero de clulas - Para a proliferao de uma clula animal, a presena de nutrientes no por si s suficiente. A clula deve receber tambm um sinal qumico estimulador de outras clulas, geralmente das clulas vizinhas. Estes sinais atuam transpondo os mecanismos intracelulares de frenagem, que tendem a restringir o crescimento celular e bloquear a progresso pelo ciclo celular. - Estes sinais qumicos so geralmente fatores de crescimento proteicos, que se ligam superfcie celular, ativando vias de sinalizao intracelular. Um nmero relativamente pequeno de fatores de crescimento pode participar em diferentes combinaes para controlar seletivamente a proliferao de vrios tipos celulares. - Os sinais externos provenientes de mitgenos liberam o freio Rb, ativando as vias de sinalizao intracelular que conduzem para a ativao dos complexos G1-CDK e G1/S-CDK que fosforilam a Rb, ativando-a para que libere suas protenas reguladoras de genes (desinibe E2F), que ativam genes necessrios proliferao celular. - As clulas animais tambm necessitam de sinais provenientes de outras clulas para sobreviverem. Na ausncia de tais fatores de sobrevivncia, as clulas atingem um programa de suicdio intracelular e morrem pelo processo celular denominado morte celular programada. A necessidade desses fatores ajuda a garantir que as clulas sobrevivam apenas onde e quando so necessrias. - As clulas naturalmente morrem, mesmo estando em bom estado, para modelar estruturas, quando no so mais utilizadas e para auxiliar no controle do nmero celular. - Quando est em apoptose, a clula sofre uma condensao seguida de encolhimento. O citoesqueleto destrudo, o envelope nuclear degradado e o DNA nuclear, fragmentado. Alm disso, a superfcie celular alterada e comea a apresentar propriedades que provocam sua fagocitose imediata. Neoplasia - No organismo, verificam-se formas de crescimento celular controladas e no controladas. A hiperplasia, a metaplasia e a displasia so exemplos de crescimento controlado, enquanto que as neoplasias correspondem s formas de crescimento no controladas e so denominadas, na prtica, de "tumores". A primeira dificuldade que se enfrenta no estudo das neoplasias a sua definio, pois ela se baseia na morfologia e na biologia do processo tumoral. Com a evoluo do conhecimento, modifica-se a definio. A mais aceita atualmente : "Neoplasia uma proliferao anormal do tecido, que foge parcial ou totalmente ao controle do organismo e tende autonomia e perpetuao, com efeitos agressivos sobre o hospedeiro" (Prez-Tamayo, 1987; Robbins, 1984).