UNIVERSIDADE FEDERAL DE LAVRAS

DQI - Departamento de Qumica

CROMATOGRAFIA GASOSA
Qumica Analtica Instrumental II Discentes: Mara dos Santos Pires Vincius Tanganeli Professor: Mrio Csar Guerreiro Lavras/2013

CG- Cromatografia gasosa Conceito

A Cromatografia Gasosa (CG) uma tcnica para separao e anlise de misturas de substncias volteis. A amostra vaporizada e introduzida em um fluxo de um gs adequado denominado de fase mvel ( FM) ou gs de arraste . Este fluxo de gs com a amostra vaporizada passa por um tubo contendo a fase estacionria FE (coluna cromatogrfica), onde ocorre a separao da mistura. A FE pode ser um slido adsorvente (Cromatografia Gs-Slido) ou, mais comumente, um filme de um lquido pouco voltil, suportado sobre um slido inerte (Cromatografia Gs-Lquido com Coluna Empacotada ou Recheada) ou sobre a prpria parede do tubo (Cromatografia Gasosa de Alta Resoluo). Na cromatografia gs-lquido (CGL), os dois fatores que governam a separao dos constituintes de uma amostra so: - a solubilidade na FE: quanto maior a solubilidade de um constituinte na FE, mais lentamente ele caminha pela coluna. - a volatilidade: quanto mais voltil a substncia (ou, em outros termos, quanto maior a presso de vapor), maior a sua tendncia de permanecer vaporizada e mais rapidamente caminha pelo sistema. As substncias separadas saem da coluna dissolvidas no gs de arraste e passam por um detector; dispositivo que gera um sinal eltrico proporcional quantidade de material eludo. O registro deste sinal em funo do tempo o cromatograma, sendo que as substncias aparecem nele como picos com rea proporcional sua massa, o que possibilita a anlise quantitativa. A cromatografia pode ser utilizada para a identificao de compostos, por comparao com padres previamente existentes, para a purificao de compostos, separando-se as substncias indesejveis e para a separao dos componentes de uma mistura.

Equipamento
A amostra transportada por uma corrente de gs atravs de uma coluna empacotada com um slido recoberta com uma pelcula de um lquido. Devido a sua simplicidade, sensibilidade e efetividade para separar os componentes de misturas, cromatografia de gs uma das ferramentas mais importantes em qumica. amplamente usada para anlises quantitativas e qualitativas de espcies qumicas e para a determinao de constantes termoqumicas tais como calores de soluo e vaporizao, presso de vapor e coeficientes de atividade. A cromatografia de gs tambm usada para monitorar os processos industriais de forma automtica: analisam-se as correntes de gs periodicamente e realizam-se reaes de forma manual ou automtica para compensar variaes no desejadas.

1- Reservatrio de Gs e Controles de Vazo /Presso. 2- Injetor (Vaporizador) de Amostra. 3- Coluna Cromatogrfica e Forno da Coluna. 4- Detector. 5- Eletrnica de Tratamento (Amplificao) de Sinal. 6- Registro de Sinal (Registrador ou Computador).

O mtodo consiste primeiramente na introduo da mistura de prova ou amostra em uma corrente de gs inerte, normalmente hidrognio, hlio, nitrognio ou argnio, que atuaro como gs de arraste. As amostras lquidas vaporizam-se antes da injeo no gs de arraste. O fluxo de gs passa pela coluna empacotada atravs da qual os componentes da amostra se deslocam a velocidades influenciadas pelo grau de interao de cada componente com a fase estacionria no voltil. As substncias que tm a maior interao com a fase estacionria so retidas por mais tempo e, por tanto, separadas daquelas de menor interao. medida que as substncias eluem da coluna, podem ser quantificadas por um detector e/ou tomadas para outra anlise. Muitas anlises de rotina so realizadas rapidamente no campo medicinal e outros. Por exemplo, por meio do uso de apenas 0.1 centmetros cbicos (0.003 onas) de sangue, pode-se determinar as porcentagens de oxignio dissolvido, nitrognio, dixido de carbono e monxido de carbono. A cromatografia de gs til tambm na anlise de contaminantes do ar, lcool no sangue, leos essenciais e produtos alimentcios.

Tipos de cromatografia de gs
Existem dois tipos de cromatografia de gs: cromatografia Gs - Slido (CGS) e cromatografia Gs - Lquido (CGL). A cromatografia Gs-Slido se baseia na base slida estacionria, na qual a reteno das substncias analisveis a conseqncia da absoro fsica. A cromatografia Gs-Lquido til para separar ons ou molculas dissolvidas em um solvente. Se a soluo de amostra estiver em contato com um segundo slido ou fase lquida, os diferentes solutos interagem com a outra fase em diferentes graus, devido a diferenas de adsoro, intercmbio de ons, partio, ou tamanho. Estas diferenas permitem que os componentes da mistura se separem usando estas diferenas para determinar o tempo de reteno dos solutos atravs da coluna.

Gs de arraste (fase mvel)

A escolha do gs de arraste depende do tipo de detector que utilizado e dos componentes a determinar. Os gases de arraste para cromatgrafos devem ser de alta pureza e quimicamente inertes, por exemplo, hlio (He), argnio (Ar), nitrognio (N2) e hidrognio (H2). O sistema de gs arraste pode conter um filtro molecular para a remoo de gua e outras impurezas. He o gs de arrasto mais usado boa condutividade trmica (detector),consegue obter-se com elevada pureza sem grandes dificuldades. H2 um bom gs de arraste mas mais reativo e explosivo mas pode ser produzido por eletrlise (experincias espaciais) ,evita H2 adicional nos detectores FID. Gases mais pesados (Ar, N2) requerem menores fluxos / menores custos. Deve ser eficaz em fazer avanar os analitos na coluna, o fluxo de gs (regulvel) deve manter-se constante durante toda a anlise 30 a 150 ml/min (colunas de enchimento) e 1 a 25 ml/min (colunas capilares) .

Fase estacionria
Deve apresentar caracterstica qumica prxima das substncias a serem separadas, seletividade , ser inerte, pouco viscoso , possuir alto grau de pureza ,volatilidade baixa

(ponto de ebulio 200 C acima da temperatura mxima a utilizar) e estabilidade trmica. -Fases estacionrias utilizadas: Parafinas apolares Poliglicis polares Polisteres polares Silicones cobrem ampla faixa de polaridade FASE ESTACIONRIA LQUIDA O fenmeno fsico-qumico responsvel pela interao analito + FE lquida a ABSORO. A absoro ocorre no interior do filme da FE lquida (fenmeno INTRAfacial). OCORRER MAIOR ABSORO: Filmes espessos de FE lquida Grande superfcie lquida exposta ao gs de arraste. Interao forte entre a FE lquida e o analito (grande solubilidade)

FASE ESTACIONARIA SLIDA O fenmeno fsico-qumico responsvel pela interao analito + FE slida a ADSORO. A adsoro ocorre na interface entre o gs de arraste e a FE slida. MAIOR ADSORO OCORRER: Slidos com grandes reas superficiais (partculas finas, poros). Solutos polares. Slidos com grande nmero de stios ativos (hidroxilas, pares de eltrons...)

Sistema de injeo da amostra

A amostra tem de estar em forma de vapor ao entrar na coluna (exceto nos injectores on-column) pequeno volume e tempo curto, sem decomposio e sem alterar as condies da coluna. A injeo exige um elevado grau de preciso e a rapidez da

evaporao essencial para evitar a descriminao. Para uma evaporao total dos componentes da amostra o injetor deve estar a cerca de 50 C acima do menos voltil. Deve-se usar quantidade de amostra to pequena quanto possvel (<1l) ,a temperatura no injetor dever ser controlvel e constante. A amostra deve vaporizar instantaneamente e a temperatura do injetor controlada. O sistema de injetor freqentemente fonte de assimetria dos picos: sujidade / demasiada amostra / temperatura insuficiente. A amostra no deve conter resduos no volteis. Injeo: banda nica e estreita, quantidade injetada no deve ultrapassar a capacidade da coluna ,deve ser reprodutvel. A eficincia na coluna afetada pelo volume injetado: menor volume, maior eficincia. Os sistemas de injeo mais comuns para a introduo de amostras de gs so vlvula amostradora e seringa. -Injeo direta com seringa

As amostras gasosas e lquidas podem ser injetadas com uma seringa. Na forma mais simples a amostra injetada primeiro em uma cmara aquecida, onde se evapora antes de ser transferida para a coluna. Quando so utilizadas colunas empacotadas, a primeira parte da coluna, em geral, serve como cmara de injeo, aquecida separadamente a uma temperatura adequada. Para colunas capilares utiliza-se uma cmara de injeo separada onde somente uma pequena parte da amostra vaporizada/ gasosa transferida coluna, este mtodo conhecido como split-injecton. Isto necessrio para no sobrecarregar a coluna com volume de amostra. Quando se encontram traos da amostra, a injeo chamada on-column-injection pode ser usada para CG capilar. A amostra lquida injetada diretamente na coluna com uma seringa. Deixa-se ento que o solvente se evapore para produzir a concentrao dos componentes da amostra. Se a amostra for gasosa, a concentrao efetuada por meio do mtodo criognico. Os componentes da amostra se concentram e separam da matriz por condensao em uma cmara de esfriamento antes da separao cromatogrfica.

-Injeo com vlvula de amostragem/ loop

A injeo com vlvulas de amostragem e Loop muitas vezes utilizada no controle de processos, onde as amostras gasosas ou lquidas fluem continuamente atravs de uma espiral. A espiral de amostra enche em posio off-line com uma seringa ou uma bomba automtica. Portanto, o loop conectado em srie com a coluna e a amostra transferida fase mvel. s vezes necessrio concentrar a amostra.

Detectores
O detector um dispositivo conectado na sada da coluna que percebe a presena de componentes e emite um sinal eltrico a ser registrado na forma de um pico cuja rea proporcional a quantidade do componente analisado. Um detector ideal deve possuir as seguintes caractersticas: -Alta Sensibilidade; -Estabilidade mudanas de temperatura e vazo de fase mvel no devem alterar o sinal; -Reprodutibilidade; -Resposta Linear a resposta do detector deve variar linearmente com a concentrao do analito numa extensa faixa de concentrao; -Resposta rpida aos analitos; -No contribuir para o alargamento do pico o volume da cela do detector deve ser o menor possvel para evitar a perda de eficincia do sistema. Celas de baixo volume contribuem positivamente com a sensibilidade; -Confiabilidade; -Facilidade de manuseio;

-No destrutivo condio necessria para cromatografia preparativa; -Seletividade habilidade relativa de um detector medir um composto e no outro.

Tipos de Detectores
Os principais detectores utilizados em Cromatografia Gasosa so:

- Detector por ionizao de chama

Um detector de ionizao de chama (FID ou DIC) consiste em uma chama de hidrognio (H2)/ ar e um prato coletor. O efluente passa da coluna do CG atravs da chama, a qual divide em molculas orgnicas e produz ons. Os ons so recolhidos em um eletrodo negativo e produzem um sinal eltrico. O FID extremamente sensvel com uma faixa dinmica grande. Sua nica desvantagem que destri a amostra. Os detectores por ionizao de chama so usados para detectar hidrocarbonetos (HC) como o metano (CH4), etano (C2H6), acetileno (C2H2), etc.

A amostra a ser analisada mistura-se com hidrognio (H2), hidrognio mais hlio (He) ou hidrognio mais nitrognio (N2). Os ons e eltrons que se formaram na chama ficam presos em um eletrodo coletor permitem que uma corrente flua no circuito externo. A corrente proporcional aos ons formados, o que depende da concentrao

de hidrocarbonetos nos gases e detectada por um eletrmetro e mostrado na sada anloga. O FID oferece uma leitura rpida, precisa e contnua da concentrao total de HC para nveis to baixos como ppb.

-Detector de condutividade trmica

universal, detecta matria orgnica e inorgnica mas pouco sensvel (60% FID), no destrutivo e baseia-se na alterao da condutividade trmica de um fluxo de gs na presena da amostra (filamento de Ag / Pt / W e bloco de dissipao metlico). O gs de arraste tem uma condutividade trmica conhecida. A resistncia do filamento muda com a condutividade do gs e a presena de analitos altera a condutividade trmica do gs de arraste (H ou He). A sensibilidade aumenta com a diminuio da temperatura, do fluxo e da corrente. Os filamentos queimam na presena de oxignio.

- Detector fotomtrico de chama

O detector fotomtrico de chama (FPD) permite medies sensveis e seletivas de enxofre voltil e compostos de fsforo. O princpio de deteco a formao de espcies de enxofre excitado (S2*) e HOP* em uma chama .Um tubo fotomultiplicador mede a emisso de quimiluminescncia caracterstica dessas espcies. O filtro ptico pode ser trocado para permitir ao fotomultiplicador visualizar luz de 394 nm para a

medio de enxofre ou 526 nm para fsforo. A resposta do detector ao fsforo linear, ao passo que a resposta ao enxofre depende da concentrao.

-Aquisio de dados Atualmente utilizam-se softwares que permitem: Processar os dados de cromatograma; Armazenar e registrar; Controlar a composio da fase mvel (isocrtica e por gradiente), vazo da bomba, amostrador automtico, temperatura da coluna; Realizar clculos para System Suitability Test (SST).

Aplicaes prticas da Cromatografia Gasosa

Qumica: Determinao de antioxidantes, nutrientes ou contaminantes em alimentos.

Indstria: Monotorizao de processos industriais.

Sade: Anlises dos constituintes do sangue. Anlise forense.

Ambiente:

Determinao de resduos de pesticidas em produtos alimentares, guas ou

esgotos. Determinao de gases e solventes orgnicos na atmosfera, solos ou rios.

Cromatografia gasosa de alta resoluo (CGAR)

O principal mecanismo de separao da cromatografia gasosa est baseado na partio dos componentes de uma amostra entre a fase mvel gasosa e a fase estacionria lquida. A utilizao de fases estacionrias slidas, as quais levariam separao por adsoro, apresenta poucas aplicaes. A diferena entre CG e CGAR est na coluna (tubos longos de metais como ao ou cobre, vidro ou teflon). Colunas de CGAR so maiores em comprimento, menores em dimetro, possuem a fase lquida como um filme aplicado diretamente s paredes do tubo da coluna e so mais eficientes.

Referncias