estudos epidemiolgicos tambm apontaram diferenas entre o amianto crisotila e o anfiblio.

No presente estudo, foram avaliados a dinmica e o ndice de eliminao da crisotila oriunda da mina de Cana Brava (na regio centro-oeste do Brasil) em um estudo de biopersistncia por inalao em ratos. Eles so normalmente descritos como sendo uma fibra resistente, que, se inalada, poderia permanecer no pulmo e causar doenas. E foi apenas com o recente desenvolvimento de um protocolo padronizado para a avaliao da biopersistncia de fibras minerais no pulmo (Bernstein & RiegoSintes, 1999) que se demonstrou que a cintica de depurao da crisotila completamente diferente da apresentada pelos anfiblios, sendo a crisotila rapidamente eliminada do pulmo (Bernstein et al., 2003 a & b). As fibras de crisotila usadas neste estudo foram obtidas na Mina de Cana Brava, localizada em Minau, no estado brasileiro de Gois. Em relao estrutura cristalina, essa fibra monoclnica, alm de possuir uma estrutura cilndrica singular a ser descrita posteriormente. Na mina, h fibras de todos os tamanhos, indo de longas (maiores do que 10 mm: classificaes 4T, 4K, 4A e 3T na Escala de Screening Canadense de Quebec (QSS), Cossette & Delvaux, 1979), passando por mdias (fibras entre 5 e 9 mm: classificadas pela QSS como 4X, 4Z e 5K) at curtas (com menos de 5 mm: de acordo com a QSS, 5R, 6D, 7M e 7T). Antes do incio da exposio, realizou-se um Teste de Gerao de Aerossol (Projeto RCC 634048) nas amostras de 4 classificaes comerciais de crisotila todas das principais produes. Os objetivos desse teste eram o de escolher a classificao de fibra de crisotila que tivesse a maior frao de fibras com mais de 20 m e o de assegurar que a amostra pudesse receber o aerossol de maneira uniforme. Os resultados desses testes encontram-se na Tabela 2. Os valores para CA300 foram escolhidos para o estudo sobre biopersistncia como os que mais bem atendiam aos critrios indicados acima. Exposio Animal: Grupos de 56 ratos machos (Fischer 344), de 4 at 8 semanas de vida (qualidade SPF), foram expostos a uma concentrao de fibras, por aerossol (somente por vias respiratrias), de 450 fibras/cm
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L>20 m durante 6 horas dirias por 5 dias consecutivos. Os animais foram

expostos a um sistema de inalao apenas por vias respiratrias. Esse sistema foi derivado de Cannon, et al. (1983), sendo diferente dos sistemas de exposio respiratrios convencionais na medida em que o aerossol fresco com as fibras aplicado a cada animal individualmente e o ar exalado, imediatamente exaustado. Distribuio da fibra: Examinaram-se de dois a cinco pedaos do tecido pulmonar do lobo apical direito de cada animal. Em cada um dos pedaos, foram selecionados campos de viso que contivessem perfis de tecido linftico e, em seguida, fizeram-se as imagens. Os perfis da fibra em cada microgrfico foram contados e expressos em termos de nmeros de fibra por rea do tecido pulmonar identificado. Tendo em vista o objetivo deste estudo, o tecido foi dividido em diversos compartimentos. Os perfis das vias respiratrias com dimetros luminais inferiores a 300 m foram includos no compartimento das vias respiratrias. Os campos pulmonares que apresentavam septos alveolares e/ou perfis de dutos alveolares foram includos no compartimento alveolar. J o compartimento linftico foi identificado de forma separada do interstcio. Foram realizados dois tipos de anlise: uma para determinar o nmero de fibras por pulmo e o respectivo tamanho mdio e outra para identificar a distribuio das fibras nos compartimentos linfticos e no-linfticos. Para determinar o nmero de fibras por pulmo, estimou-se o comprimento da fibra a partir de anlise da seo. Com base nos comprimentos mdios, o nmero de fibras foi estimado a partir desses volumes. Como a avaliao de fibras pulmonares no pulmo muito suscetvel ao local em que ela se encontra em relao ao foco, o nmero de perfis de fibra foi estimado e multiplicado pelo comprimento mdio medido em bloco, usando-se tcnicas de anlise por seo. A partir desses clculos,determinou-se o nmero de fibras por pulmo (<5 m, 520 m e >20 m) para cada um dos grupos de exposio. RESULTADOS: Biopersistncia por inalao: O Protocolo de Biopersistncia por Inalao da CE especifica que a atmosfera de exposio qual os animais so expostos deve ter pelo menos 100 fibras/cm
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com mais de 20 m. Neste estudo, o nmero de fibras com mais de 20 m na atmosfera de exposio foi proporcionalmente aumentado at atingir 465 fibras com L>20 m/cm
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, para que se pudesse maximizar qualquer possvel efeito dessas fibras sobre a depurao no pulmo. Os nmeros referentes concentrao e distribuio do grupo de controle de ar e do exposto crisotila esto na Tabela 3. Esses resultados so diferentes daqueles apresentados no pr-teste (Tabela 2), em que se optou pela amostra CA300 usada neste estudo. Fibras com mais de 20 m depositadas no pulmo desaparecem mais rapidamente, como mostra a Figura 5, com um tempo mdio de depurao dessas fibras de 1,3 dias. Nenhuma fibra maior de que 20 m foi observada aps 91 dias da exposio. Aps 182 dias, encontrou-se uma fibra longa em um rato e em 365 dias, j haviam sido encontrado um total de 1, 3 ou 4 fibras longas a partir das 250 avaliadas nas amostras do filtro. Esse nmero de fibras, quando extrapolado para o pulmo inteiro, corresponde a 900 fibras L>20 m/pulmo em 182 dias e a 13.500 fibras L>20 m/pulmo em 365 dias. Aps exposio similar da amosita (fibra de anfiblio insolvel), haveria aproximadamente 2.000.000 fibras L>20 m/pulmo restantes em 182 dias e 1.300.000 fibras L>20 m/pulmo remanescente em 365 dias (Retirado de Hesterberg et al., 1998). Anlise Confocal Microscpica: O estudo sobre biopersistncia clssico, conforme definio dos protocolos da CE, envolve a digesto completa do pulmo do rato para que se determinem o nmero e a distribuio das fibras a cada momento. A anlise TEM das amostras apresenta um valor que conta apenas com o nmero e o tamanho das fibras removidas do pulmo. No possvel determinar em que locais do pulmo as fibras se encontram. Para poder determinar a disposio dessas fibras remanescentes no pulmo, foi realizada uma anlise microscpica confocal nos lobos pulmonares colocados em plsticos. Praticamente todas as fibras observadas estavam na camada do surfactante e, por isso, estavam sujeitas a uma dissoluo mais rpida com a biodegradao da crisotila sendo o fator dependente (26).Alm disso, Etherington et al. (1981) observou que os macrfagos podem gerar um pH muito baixo na superfcie da membrana do macrfago e as partculas ligadas com valores de pH to baixos quanto os 3,5 encontrados. A crisotila mais solvel nesse nvel de acidez. Ao entrar em contato com cidos diludos ou mesmo meios aquosos pH<10, o magnsio mostrou dissociao imediata da superfcie da fibra (Atkinson, 1973; Hargreaves &Taylor 1946; Nagy & Bates, 1952) o que resulta em uma fibra

lixviada (Atkinson, 1973).

No pulmo, trabalhos extensos sobre a forma de dissoluo de fibras vtreas sintticas (SVF) usando tcnicas de dissoluo in-vitro e biopersistncia por inalao demonstraram que o pulmo possui uma vasta capacidade de armazenamento Alm disso, a crisotila mais solvel em pH cido e, assim, pode ser afetada por uma fagocitose completa (ou mesmo parcial) das fibras pelos macrfagos.

H claramente uma grande diferena entre as biopersistncias dos amianto do tipo serpentina e dos anfiblios. Alm disso, como a serpentina uma fibra extrada da natureza, parece que h algumas diferenas na biopersistncia de acordo com o local em que ela extrada. No entanto, o ponto positivo da crisotila sua solubilidade, alm de variar da fibra menos biopersistente at uma com biopersistncia similar a de vidros e ls de pedra. Ela continua sendo menos biopersistente do que a cermica e vidros especiais (Hesterberg et al., 1998), alm de ser muito menos biopersistente do que os anfiblios. Conforme vimos em nosso estudo, as fibras longas de crisotila so depuradas mais rapidamente do que as fibras curtas acumuladas no pulmo e nos linfticos.

Estudos sobre inalao crnica: Os estudos sobre biopersistncia demonstram claramente as diferenas entre a crisotila de serpentina e os anfiblios tremolita e amosita. Essas diferenas aparentam estar relacionadas s variaes na estrutura qumica entre as serpentinas e os anfiblios e possivelmente influenciam o pH cido associado ao macrfago na fibra de crisotila. No entanto, os estudos sobre inalao crnica da crisotila e dos anfiblios chegaram concluso de que essas diferenas nem sempre so aparentes. Em anlise feita por Berman e Crump (1995) a respeito dos estudos sobre a resposta dos animais s doses no mbito do amianto, concluiu-se que: fibras menores (menos do que algo em torno de 5 e 10 m) aparentemente

no contribuem para o risco de cncer; alm de um padro, mnimo, o potencial aumenta na medida em que o tamanho aumenta, pelo menos at 20 m (e possivelmente at algo em torno de 40 m); thinner grande parte das fibras que contribuem para o risco de cncer fina e possui dimetros inferiores a 0,5 m; e o maior potencial deve ser das fibras ainda mais finas. Na verdade, parece que as fibras com maior potencial so consideravelmente mais finas do que o limite mximo aceito como respirvel; componentes identificveis (fibras e feixes) de estruturas complexas (agrupamentos e matrizes) que apresentam o tamanho necessrio podem contribuir para o risco de cncer porque essas estruturas ficam normalmente separadas no pulmo. Por isso, elas devem ser identificadas individualmente durante a anlise, para se determinar a concentrao de amianto; para anlise adequada da atividade biolgica, preciso preparar as amostras por meio de um procedimento de transferncia direta; e com base nos estudos sobre a resposta dos animais s doses, o tipo de fibra (por exemplo, mineralogia da fibra) tem aparentemente apenas um efeito modesto no risco de cncer (pelo menos entre os vrios tipos de amianto).

Demonstrou-se que altas concentraes de poeiras patognicas insolveis comprometem os mecanismos de depurao do pulmo, causam inflamaes e respostas tumorignicas no rato, em um fenmeno normalmente conhecido como sobrecarga pulmonar