Faculdade de Medicina da Universidade de Lisboa O Mdulo II.

III Fisiologia Tema da Aula: Sntese das Hormonas Derivadas do Colesterol Docente: Prof. Nuno Correia Santos Data: 25/11/2008 Nmero da Aula Previsto: 13 Desgravador: David Cabrita Roque Corrector: Maria So Pedro www.comissaodecurso0713fml.blogspot.com

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Bibliografia: Murray, R. et alt. Harper: Bioqumica, 9 Edio Editora Lange. Cap 48: Pgs. 575- 580; Cap 50: Pgs. 594-601

Bioqumica do Sistema Endcrino

Sntese de Hormonas Derivadas do Colesterol
O precursor destas hormonas o colesterol, que , num primeiro passo, convertido a pregnenolona. Este o precursor directo ao nvel de todas as clulas das diferentes snteses, especficas de cada tecido, de hormonas derivadas do colesterol. de denotar que, alguns compostos qumicos funcionam como produto final em alguns orgos e intermedirio noutros. Este o caso da progesterona (fig. 1), que aparece em diferentes tecidos como intermedirio, mas ao nvel do corpo lteo o produto final, ocorrendo, por isso, a sua secreo essencialmente neste tecido. A progesterona funciona como intermedirio de: cortisol, produzido no cortx da glndula supra-renal; testosterona (androstenediona intermedirio), secretada pela clulas de Leydig dos testculos, no caso do homem. No corpo feminino a testosterona no se apresenta como produto final, sendo transformada em estradiol, que secretado pelos folculos ovricos.
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ainda de referir que: O colesterol poder no ser transformado em pregnenolona, mas sim em calcitriol (fig. 1); Na sintese de hormonas derivadas do colesterol, ao longo das transformaes qumicas, o nmero de carbonos dos compostos vai diminuindo.

Fig. 1 - Colesterol e seus derivados em diversos tecidos

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1.Esteroidognese Supra-Renal

As hormonas esterides supra-renais so sintetizadas a partir do colesterol, que provm essencialmente de lipoprotenas plasmticas. Grande parte do colesterol que se encontra na glndula supra-renal esterificado e armazenado em gotculas lpidicas citoplasmticas. Aquando da ocorrncia da estimulao pelo ACTH, vai ocorrer a activao de uma esterase, e o colesterol que se apresentava no citoplasma ir ser encaminhado para as mitocndrias. A protena StAR (steroidogenic acute regulatory protein) essencial para o transporte do colesterol (proveniente do citosol) do espao intermembranar para a matriz mitocondrial. A, uma enzima de clivagem da cadeia lateral contendo citocromo P450 (P450scc), ir converter o colesterol em pregnenolona (fig.2). A pregnenolona ir depois deixar a mitocndria para originar os seus diferentes produtos finais.

Fig. 2 - Converso de Colesterol em Pregnenolona (na matriz mitocndrial)

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A glndula supra-renal pode ser considerada (mesmo embriologicamente) como duas glndulas separadas a zona do crtex e a zona da medula. A esteroidognese ocorre ao nvel do crtex supra-renal. Dentro do crtex, existem diferenas funcionais e bioqumicas, principalmente enzimticas, que

determinam que diferentes hormonas sejam produzidas na zona glomerulosa, fasciculada e reticular. (fig.3)

Fig. 3 - Glndula Supra-Renal e produo hormonal diferencial

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1.1 Sntese dos Mineralocorticides

A sntese da aldosterona (principal mineralocorticide) ocorre na zona glomerulosa. duas A pregnenolona convertida em progesterona pela aco de do retculo endoplasmtico liso 3-hidroxiesteroide

enzimas

desidrogenase e a 5,4 isomerase. A zona glomerulosa no possui a enzima P450c17, responsvel pelas actividades enzimticas de 17-hidroxilase e 17,20liase. A progesterona ento transformada em 11-

desoxicorticosterona (DOC), um mineralocorticide activo na reteno de Na+, pela enzima 21Hidroxilase. A passa 11a

desoxicorticosterona

corticosterona pela aco da 11hidroxilase. Esta hormona

apresenta uma actividade, ainda que fraca, de mineralocorticide e actividade de glicocorticide ( o principal glicocorticide em animais que no produzem cortisol). A corticosterona pela

aco da enzima 18-hidroxilase ou aldosterona sintase (funciona como hidroxilase e hidroxidesidrogenase), que est presente unicamente na zona glomerulosa, origina aldosterona.
Fig. 4 Sintese de Aldosterona

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1.2 Sntese dos Glicocorticides

A sntese do cortisol, o principal glicocorticide humano, requer a presena (assinaladas de a 3 hidroxilases verde e

violeta,

laranja na fig. 5) que se podem encontrar na zona fasciculada e reticular do crtex da glndula supra-renal. actuam Estas hidroxilases nos

sequencialmente,

carbonos C17, C21 e C11. Se a posio C11 for a primeira a sofrer hidroxilao, a aco da 17-hidroxilase (a violeta na fig.5) j no ser possivel, e o composto seguir para a formao de aldosterona. A encontra-se 17-hidroxilase no (fig.5) retculo

endoplasmtico liso e actua sobre a sobre a pregnenolona, formando 17hidroxipregnenolona. Este

Fig. 5 - Sintese de Cortisol

composto , depois, transformado em 17-hidroxiprogesterona e este

ltimo em 11-deoxicortisol, pela enzima 21-Hidroxilase (fig. 5), uma enzima do retculo endoplasmtico liso. O 11-deoxicortisol sofre, ento, aco da 11hidroxilase (fig.5), na matriz mitocondrial, originando-se cortisol. Pela aco da enzima 17,20-liase, a 17-hidroxipregnenolona poder, tambm, ser convertida a diidroepiandrosterona. Apesar de tal passagem ocorrer s para uma pequena fraco da 17-hidroxipregnenolona disponvel, esta a forma, que a zona reticular (e por vezes tambm a zona fasciculada)
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utiliza, para originar um precursor da testorena (sntese de andrognios). No entanto esta sntese de andrognios pelo crtex supra-renal pouco significativa.

2. Esteroidognese testicular

Os andrognios testiculares so sintetizados no tecido intersticial pelas clulas de Leydig. O precursor imediato dos esterides gonadais , tambm, o colesterol. Tal como acontece na glndula supra-renal, a etapa limitante da taxa de sntese, a transferncia do colesterol para a membrana mitocondrial interna, pela StAR. A passagem de colesterol a pregnenolona igual nas suprarenais e nas gnadas, porm essa reaco agora estimulada pela LH.
via 5 - via da dihidroepiandrosterona via 4 - via da progesterona

Mesma protena

Mesma protena

Fig. 6 - Esteroidognese Testicular: Via da esquerda Via 5; Via da direita Via 4

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A converso da pregnenolona em testosterona depende das actividades enzimticas desempenhadas pelas 3 protenas marcadas na fig.6 a azul, amarelo, e rosa. A pregnenolona pode ser convertida em progesterona pela via 4 (via da progesterona) ou pela via 5 (via da dihidroepiandrosterona). No caso da espcie humana, a via principal a via 5.

A dihidrotestosterona (DHT) sintetizada a partir da testosterona nos tecidos perifricos

A testosterona metabolizada principalmente ao nvel dos tecidos perfericos (como a prstata, a genitlia externa e algumas reas da pele) e gera DHT (fig.7). Nestes tecidos, a DHT a forma activa da hormona, pelo que, nestes casos, podemos considerar a testosterona uma pr-hormona. Este processo realizado por uma redutase e necessita da presena de NADPH.

Fig. 7 - Passagem de testosterona a dihidrotestosterona (DHT) nos tecidos perifricos

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3. Esteroidognese Ovariana O 17-estradiol o principal estrognio ovariano. Os estrognios so formados pela aromatizao de andrognios, num processo complexo que envolve 3 etapas de hidroxilao, as quais dependem de O 2 e NADPH. O complexo enzimtico das aromatases parece incluir uma P450 monooxigenase. A androstenediona e a testosterona so produzidas pelas clulas da teca interna, sendo, depois, convertidas pela enzima aromatase, nas clulas da granulosa (fig.8), em estrona e estradiol, respectivamente. A progesterona, precursor de todas as hormonas esterides, sintetizada e secretada pelo corpo lteo como um composto hormonal final, pois tais clulas no possuem as enzimas necessrias para converter a progesterona noutras hormonas.

Produzida e secretada pelo corpo lteo, cujas clulas no tm as enzimas necessrias para a continuao da via.

Complexo enzimtico responsvel pela sntese de estrognios pela aromatiao de andrognios, atravs de 3 hidroxilaes, com Fig.8 consumo de O2 e NADPH

Esteroidognese Ovariana

Fig. 8 - Esteroidognese Ovariana

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Produo Perifrica de Estrognios A enzima aromatase tambm se encontra presente no tecido adiposo, fgado e pele; Homem 80% do estradiol produzido por aromatizao da testosterona; Mulher 50% do estradiol produzido durante a gravidez, origina-se por aromatizao de andrognios adrenais; a converso da androstenediona em estrona a maior fonte de estrognios ps-menopausa; Estrogenizao em situaes fisiopatolgicas: o

Obesidade: O excesso de tecido adiposo faz com que o nmero

de aromatases, que se encontram presentes neste tecido, esteja aumentado, pelo que ocorre maior produo de estrognios a nvel perifrico; o Cirrose heptica: no fgado cirrtico a clearance do estrognio

endgeno encontra-se diminuida. Isto, aliado menor produo de SHBG (glicoprotena transportadora de hormonas sexuais), leva a um aumento dos nveis de estrognio livre, o que vai permitir um maior grau de aromatizao perifrica. o Hipertiroidismo: O excesso de hormonas tiroideias estimula a

produo exagerada de SHBG pelo fgado e a converso de androstenediona em estrognios e testosterona, pelo que os nveis de estrognio se encontram aumentados. o Envelhecimento: a produo de estrognios a nivel perifrico

encontra-se aumentada de forma a tentar compensar a diminuio da sua produo a nvel gonadal. No entanto estes valores no so suficientes para atingir os niveis de estrognio pr-envelhecimento.

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4. Calcitriol

O calcitriol no uma hormona esteride, mas , tambm, um derivado do Colesterol. Calcitriol o nome dado forma activa da vitamina D encontrada no corpo.

Protena de ligao da vitamina D

Fig. 9 - Produo de Calcitriol

- PELE Pequenas quantidades de vitamina D (na realidade uma pr-hormona e no uma vitamina), percursor da sntese de calcitriol, esto presentes em alguns alimentos (sobre a forma de vitamina D2), mas a maior parte deste precursor formado na camada de Malphigi da epiderme, a partir do 7-dehidrocolesterol, por fotlise, como se pode ver na fig.9, sob a forma de vitamina D3. - FGADO A protena de ligao Vitamina D, liga-se vitamina D3 e transfere-a para o fgado, onde esta sofre hidroxilao formando-se 25-hidroxivitamina D3. Esta hidroxilao catalizada pela 25-hidroxilase, uma enzima presente no retculo endoplasmtico, dependente de magnsio, NADPH, O 2 e um factor citoplasmtico ainda no identificado.
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- RINS A 25-hidroxivitamina D3 um agonista fraco, pelo que, nos rins, sofre hidroxilao na posio C1. Esta reaco ocorre nas mitocndrias dos TCPs, atravs de uma actividade de monooxigenase que requer NADPH, Mg2+, O2 e trs protenas: flavoprotena (ferredoxina redutase renal), protena com enxofre e ferro (ferredoxina renal) e citocromo P450. O calcitriol vai depois para os seus tecidos alvos (osso, intestino e rins).

5. Sntese de Derivados do cido Araquidnico

Usando a definio mais lata de hormona, h, ainda, a considerar o cido araquidnico e principalmente os seus metabolitos prostaglandinas, prostaciclinas, trombocesanos e leucotrienos. O cido araquidnico, um cido gordo composto por 20 carbonos e trs ligaes duplas, obtido atravs da alimentao. includo em fosfolpidos e disponibilizado mais tarde por lise desses mesmos fosfolpidos. Atravs da aco da Prostaglandina Sintase (que origina o primeiro intermedirio - Prostaglandina H2), o araquidonato convertido nos seus produtos finais - prostaciclinas, restantes prostaglandinas e trombocesanos. Atravs de uma outra reaco, catalisada pela Lipooxigenase, so formados os leucotrienos. Estes compostos, com aco autcrina e parcrina, tm vrios efeitos, como a estimulao da contraco do msculo liso, a biossntese de hormonas esterides, a secreo de suco gstrico, resposta inflamatria, agregao plaquetria, entre outros.

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Fig. 10 - Derivados do cido Araquidnico

6. Armazenamento

Algumas hormonas so armazenadas no rgo secretor. O tempo de armazenamento varivel. A T3 e T4, armazenada em quantidade suficiente para semanas ou meses; a insulina, para alguns dias; as catecolaminas e a PTH para algumas horas. As hormonas esterides e o calcitriol no so armazenados. Assim, concluiu-se que as hormonas hidrfobas no so armazenadas, exceptuando o caso da T3 e T4.
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Fig. 11 - Armazenamento e disponibilidade das diferentes classes de hormonas

7. Transporte (J foi referido na aula anterior.)

As hormonas do Grupo I, ou seja, as hormonas esterides, as iodotironinas, o calcitriol e os retinides, sendo lipoflicas, necessitam de protenas de transporte e tm uma semi-vida longa no plasma, pois esto mais protegidas da degradao pelas suas protenas de transporte. Pelo contrrio, as hormonas do Grupo II, como os polipptidos, as protenas, as glicoprotenas e as catecolaminas, sendo hidroflicas, no necessitam de protenas de transporte e tm uma semi-vida curta no plasma.

Protenas Plasmticas Envolvidas no Transporte de hormonas Lipoflicas Transcortina ou CBG (corticoesteroid binding globulin) Cortisol SHBG (sex hormone-binding globulin) ou TEBG (testosteroneestrogen-binding-globulin) Testosterona, dihidrotestosterona (DHT) e estrognios TBG (thyroid-binding globulin) T4 e T3 Transtirretina; antes designada pr-albumina ou TBPA (thyroxinebinding pre-albumin) T4 Vitamin D binding protein Vitamina D e seus metabolitos Albumina Vrios ligandos, incluindo hormonas lipoflicas, bilirrubina, cidos-gordos livres e ies metlicos (Ca2+ , Cu2+, Zn2+).

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Ao contrrio das protenas de transporte, que existem em quantidade elevada, a quantidade de receptores proteicos que existe na clula diminuta. No entanto, a afinidade destes receptores, para as hormonas transportadas por aquelas, muito superior, pelo que a ligao das mesmas ao receptor elevada, possibilitando-se assim a sua aco/funo biolgica. Em termos de especificidade, os receptores membranares tm elevada especificidade, o que possibilita uma resposta fisiolgica correcta perante um determinado sinal hormonal. A saturabilidade, uma caracterstica que, apenas, est presente nos receptores. Uma nica protena de transporte pode levar mais do que uma molcula. O processo de ligao reversvel nos dois casos, e o processo de transduo de sinal, apenas ocorre em alguns receptores (est dependente do tipo de hormona e de receptor).

Fig. 12 - Distino entre a ligao aos receptores e s protenas de transporte do plasma

8. Receptores e Sinalizao Celular

Recapitulando o que j foi falado na aula passada, os receptores das hormonas do Grupo I so intracelulares, envolvendo o seu mecanismo de aco a formao de um complexo hormona-receptor. Antagonicamente, o receptor para as hormonas do Grupo II, encontra-se na membrana citoplasmtica e

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portanto o seu mecanismo de aco envolve segundos mensageiros e cascatas de sinalizao (o que tambm permite uma aco de amplificao do sinal). As hormonas, de acordo com a localizao do seu receptor (intra ou extra celular) e tipo de segundo mensageiro, dividem-se em: Hormonas que se ligam a receptores intracelulares; Hormonas que se ligam a receptores da superfcie celular: o O segundo mensageiro o cAMP; o O segundo mensageiro o cGMP; o O segundo mensageiro o clcio, fosfatidilinositol ou diacilglicerol (ou combinaes destes); o O segundo mensageiro uma cinase ou fosfatase activada sequencialmente.

8.1 Hormonas que se ligam a receptores intracelulares

Fig. 13 - Modo de aco das hormonas esterides, que incluindo-se no Grupo I tm receptores intracelulares

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As hormonas lipoflicas do Grupo I difundem-se atravs da membrana plasmtica de todas as clulas, mas encontram os seus receptores intracelulares especficos de alta afinidade apenas nas clulas-alvo. Tais receptores podem estar localizados no citoplasma ou no ncleo dessas clulas. Inicialmente, o complexo hormona-receptor passa por uma reaco de activao. A activao do receptor ocorre, no minmo, por dois mecanismos.

Glicocorticides

Os glicocorticides difundem-se atravs da membrana plasmtica e encontram os seus receptores no citoplasma das clulas-alvo. O acoplamento do ligante com o receptor provoca a dissociao da protena de choque trmico 90 (hsp90), que faz parte do receptor. Esta etapa parece ser essencial localizao nuclear subsequente do complexo receptor-ligante. O receptor possui, tambm, uma sequncia especfica para ligao ao ncleo, que possibilita a transferncia do complexo receptor-ligante do citoplasma para o ncleo. Uma vez no ncleo o receptor liga-se com grande afinidade a uma sequncia especfica do DNA conhecida como elemento de resposta hormonal (HRE). O complexo ligante-receptor acoplado ao DNA, funciona como local de ligao de alta afinidade, para uma ou mais protenas co-activadoras. Em geral, quando esta ligao ocorre, inicia-se uma transcrio gentica acelerada.

Hormonas tiroideias e retinides

As hormonas tiroideias e os retinides difundem-se do lquido extracelular, pela membrana plasmtica, e dirigem-se directamente ao ncleo ou ligam-se transientemente a protenas do citosol antes de entrarem no ncleo (de novo na forma livre). Neste caso, o receptor encontra-se ligado ao HRE. Contudo, no consegue activar a transcrio do DNA, pois o seu(s) coComisso de Curso 07/13 2 ano Pgina 17 de 18

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repressor(es) encontra(m)-se simultaneamente presente(s). Na verdade, o complexo receptor/co-repressor funciona como repressor activo da transcrio gentica. A combinao do ligante com o complexo receptor/co-repressor leva dissociao do(s) co-repressor(es). O complexo ligante-receptor, , assim, capaz de se ligar, com alta afinidade, a uma ou mais protenas co-activadoras, o que resulta na activao da transcrio gnica.

A transcrio gnica selectiva (e a produo subsequente de mRNA apropriados), mediada hormonalmente, permite alterar a quantidade proteica celular e modificar os processos metablicos. A aco de cada uma das hormonas muito especfica: em geral, uma hormona actua em menos de 1% dos genes, do mRNA ou das protenas da clula-alvo.

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