Difuso

Difuso Difuso
Difuso de frmacos em soluo
Difuso Difuso de de f f rmacos rmacos em em solu solu o o
1
As partculas movem-se das regies de alto para baixo
potencial qumico com vista homogeneidade espacial
das solues.
Difuso de frmacos em soluo
Difuso Difuso de de f f rmacos rmacos em em solu solu o o
18T 10P
Difuso de frmacos em soluo
Difuso Difuso de de f f rmacos rmacos em em solu solu o o
Primeira lei de Fick
Primeira Primeira lei de lei de Fick Fick
J = dn/(Adt) = D(c/x)
J/mol m
2
s
-1
; (dn/dt)/mol s
-1
; A/m
2
; (dc/dx)/mol m
-4
; D/m
2
s
-1
1 fick=10
-11
m
2
s
-1
(O sinal indica que o transporte por difuso J tem o sentido
oposto do gradiente de concentrao, ie, dc/dx <0)
18T 10P
dn/dt = DA(dc/dx)
O fluxo J a quantidade de soluto que se difunde atravs
da unidade de rea e por unidade de tempo, e proporcional
ao gradiente de concentrao (dc/dx).
A relao entre a velocidade de difuso (dn/dt) e o
gradiente de concentrao (dc/dx) :
2
Difuso: 1Lei de Fick
0 1
1
0
m

m
J
x
= Fluxo na direco de x
Fluxo tem unidades de #molculas / rea
(e.g. mol/cm
2
)
O movimento browniano pode conduzir a um
fluxo resultante de molculas numa dada direco
de concentrao no constante.
1 Lei de Ficks :
J
x
D
c
x




Difuso de frmacos em soluo
Difuso Difuso de de f f rmacos rmacos em em solu solu o o
A segunda Lei de Fickindica uma relao da variao
da concentrao de soluto com o tempo (velocidade da
variao da concentrao) e com o deslocamento
(gradiente de concentrao), ou seja, dois factores
importantes na determinao do coeficiente de difuso
de qualquer soluto em diferente sistemas.
Segunda lei de Fick
Segunda Segunda lei de lei de Fick Fick
(c/t) = D(
2
c/x
2
)
Lquidos e solues so isotrpicos
Slidos anisotrpicas
3
A Equao de Difuso
Segunda lei de Fick
Segunda Segunda lei de lei de Fick Fick
Veloc. em
Veloc. em
Consideremos uma pequena regio do espao (volume 3D, rea 2D)
A Equao de Difuso
Segunda lei de Fick
Segunda Segunda lei de lei de Fick Fick
A velocidade das molculas de soluto que entram no elemento de volume :
t
|

\
|

x
c
DA
A velocidade das molculas de soluto que deixam o elemento de
volume, depois de terem percorrido a distncia dx :
(

\
|

+
|

\
|

x
x
c
x
c
DA d
2
2
A Equao de Difuso
Segunda lei de Fick
Segunda Segunda lei de lei de Fick Fick
A velocidade de acumulao de soluto no elemento de volume a
diferena das 2 quantidades:
Velocidade de acumulao
de soluto no elemento
de volume
Velocidade de soluto
que entra no elemento
de volume
Velocidade de soluto
que deixa o elemento
de volume
=
x
x
c
DA d
2
2
|
|

\
|

=
(

|
|

\
|

+
|

\
|

+
|

\
|

= x
x
c
x
c
DA
x
c
DA d
2
2
A Equao de Difuso
Segunda lei de Fick
Segunda Segunda lei de lei de Fick Fick
|
|

\
|

=
|

\
|

2
2
x
c
D
t
c
A concentrao de soluto no elemento de volume aumenta regularmente como
resultado da difuso.
A velocidade deste aumento de concentrao obtida do produto do elemento
de volume pela variao da concentrao com o tempo [(c/t) Adx].
Ao igualar estas 2 velocidades de acumulao de soluto vem:
x
x
c
DA x A
t
c
d d
2
2
|
|

\
|

=
|

\
|

Segunda Segunda lei de lei de Fick Fick

Segunda lei de Fick
Segunda Segunda lei de lei de Fick Fick
O fluxo em cada ponto neste gradiente de concentrao pode ser calculado da 1 lei de Fick.
Mas o que acontece quando as molculas se difundem?
Considere-se a posio (x) e (x+dx). Na posio (x) o gradiente de concentrao (dC/dx)
mais inclinado do que em (x+dx) e ento o fluxo maior. O fluxo resultante entre o volume
(x) e (x+dx) positivo e a concentrao cresce com o tempo.
A 2 lei de Fick da difuso descreve a variao da concentrao com o tempo como funo do
gradiente de concentrao. A velocidade da variao da concentrao (dC/dt) num
ponto x pode ser pensada como a diferena entre o fluxo que entra e o fluxo que sai de
um pequeno elemento de volume entre (x) e (x+dx).
Conc.
x x+dx
A segunda Lei de Fick indica uma relao da variao
da concentrao de soluto com o tempo (velocidade da
variao da concentrao) e com o deslocamento
(gradiente de concentrao), ou seja, dois factores
importantes na determinao do coeficiente de difuso
de qualquer soluto em diferente sistemas.
Segunda lei de Fick
Segunda Segunda lei de lei de Fick Fick
( c/ t) = D(
2
c/ x
2
)
Lquidos e solues so isotrpicos
Slidos anisotrpicas
Determinao do coeficiente de difuso
Determina Determina o o do do coeficiente coeficiente de de difuso difuso
Soluo (com agitao) de concentraes c
1
e c
2
separadas por uma
membrana porosa de espessura l. No estado estacionrio a
concentrao na membrana varia linearmente de c
1
para c
2
Diagrama esquemtico de um aparelho para a medida de coeficientes de difuso
18T 10P
Medida da
velocidade de difuso (dn/dt)
-(dc/dx) = (c
1
- c
2
)/l
(dn/dt) = DA(c
1
- c
2
)/l
Determinao do coeficiente de difuso
Determina Determina o o do do coeficiente coeficiente de de difuso difuso
18T
Valor do coeficiente de difuso
O coeficiente de difuso ento calculado da medida
da velocidade de difuso
6
Coeficientes de difuso

Substncia D.10
10
/m
2
s
-1

Anfetamina 7,2
Efedrina 5,2
cido saliclico 11,3
Sacarose 5,7
Insulina 0,8

Determinao do coeficiente de difuso

Determina Determina o o do do coeficiente coeficiente de de difuso difuso
18T
Coeficientes de difuso a 20 C

Substncia Massa molar Solvente D/m

2
s
-1

CH
3
OH 32 H
2
O 13.7

10
-10
Glicerol 92 H
2
O 8.3

10
-10
Insulina 41000 H
2
O 8.2

10
-11
Hemoglobina
de cavalo 68000 H
2
O 6.3

10
-11
Urease 470000 H
2
O 3.5

10
-11

Determinao do coeficiente de difuso

Determina Determina o o do do coeficiente coeficiente de de difuso difuso
7
O coeficientede difusode umamolculaparticular depende
dos seusparmetrosmoleculares.
1) Tamanho
2) Forma
3) Solvatao
4) Flexibilidade
Determinao do coeficiente de difuso
Determina Determina o o do do coeficiente coeficiente de de difuso difuso
18T
Dt cdx x
N
x 2
1
2 2

Distncia mdia quadrtica
Distncia mdia quadrtica
2
2
] [ ] [
x
C
D
dt
C d

Segunda lei de Fick

Distncia mdia quadrtica
<x
2
> = 2Dt
18T
8
Distncia mdia quadrtica
Distncia mdia quadrtica
x
2
= 2Dt
Representao do movimento ao acaso
Movimento browniano
Movimento Movimento browniano browniano
Cadavrticerepresentaumamedidade posio
Intervalosde tempo entre medidasconstantes
Aotempo (t) a molculamove-se a distncia(d)
Difusoa 1-dimenso:
<d
2
> = <x
2
> = 2Dt
Difusoa 2-dimenses:
<d
2
> = <x
2
> + <y
2
> = 4Dt
Difusoa 3-dimenses:
<d
2
> = <x
2
> + <y
2
> + <z
2
> = 6Dt
Trajectriabrowniana
0 1
1
0
m

m
t = 0
t = 0.5 s
Movimentoaoacaso
d
18T 10P
9
Movimento browniano
Movimento Movimento browniano browniano
Se um potencial de aco comeando no corpo da clula do
neurnio continua por difuso de Na
+
e K
+
para a sinapse,
quanto tempo necessrio para que os ies atravessem 1m?
(Tratar como um problema de difuso a 1D. <x
2
> = 2Dt)
D
25C
(Na
+
) =1,5*10
-5
cm
2
/s
D
25C
(K
+
) =1,9*10
-5
cm
2
/s
Resoluo:
t =x
2
/2D
t =(100)
2
/(2*1,5*10
5
) =3,3*10
8
s
t =(100)
2
/(2*1,9*10
5
) =2,6*10
8
s
10P
10
Osmose
Osmose Osmose
18T
Fora generalizada
Fora generalizada
Fora generalizada (e.x. S, V,,
i
):
f
gen
= cG/cx
i
ondex
i
- coordenadageneralizada(e.x. T, p, A, n
i
).
f
mec
Ax
W = f
mec
.Ax ou f
mec
= W/Ax
18T
11
Fora de difuso
For For a a de de difuso difuso
Fora directora de difuso
Fora de difuso
18T
Difuso atravs da distncia dx
em que a concentrao varia de (c) para (c+dc)
Fora de difuso
For For a a de de difuso difuso
Fora de difuso
A fora que actua nas molculas do soluto com
vista sua deslocao para uma regio mais
diluda pode ser calculada da variao da
energia de Gibbs entre c e (c+dc).
12
Fora de difuso
For For a a de de difuso difuso
18T
dG = G
c
- G
c + dc
= -RT dc/c
Energia de Gibbs dG correspondente deslocao das molculas
do soluto para uma regio mais diluda
dG = -(RT/N
A
) dc/c
dG = -k
B
T dc/c
Energia de Gibbs dG correspondente deslocao de uma
molcula do soluto para uma regio mais diluda
G
c + dc
- G
c
= RT ln[(c + dc)/c] = RT ln(1 + dc/c)
G
c + dc
- G
c
= RTdc/c
Energia de Gibbs dG correspondente deslocao das molculas
do soluto entre c e (c+dc)
Fora de difuso
For For a a de de difuso difuso
18T
dG = F
d
dx
A energia necessria para transferir uma molcula
do soluto de uma distncia dx :
dG/dx = F
d
= -(k
B
T/c) (dc/dx)
A fora de difuso (F
d
) aplicada molcula do soluto :
A fora de frico (F
f
) devido deslocao da molcula do soluto
F
f
= f v = f (dx/dt) (A=1)
f - o coeficiente de frico
13
c(dx/dt) = -(k
B
T/f) (dc/dx)
n = cV (V = Ax e A=1) n = cx
(J = cv) (A=1)
Fora de difuso
For For a a de de difuso difuso
18T
f (dx/dt) = -(k
B
T/c) (dc/dx)
A velocidade da molcula do soluto aumenta at que
a fora de difuso igual fora de frico
dn/dt = c(dx/dt)
Derivar a expresso (n=cx) em ordem a t
D = k
B
T/f
Fora de difuso
For For a a de de difuso difuso
18T
-D (dc/dx) = -(k
B
T/f) (dc/dx)
De acordo com a 1 lei de Fick [dn/dt=D(dc/dx)]
c(dx/dt) = -(k
B
T/f) (dc/dx)
como
dn/dt =-(k
B
T/f) (dc/dx)
ento
14
Difuso e mobilidade inica
Difuso Difuso e e mobilidade mobilidade i i nica nica
D = (RT/F
2
,z
i
,)
F a constante de Faraday e
,z
i
, o n de carga do io
18T
Relao entre o coeficiente de difuso e a mobilidade inica
Stokes mostrouqueera possvel calcular f para
umapartculaesfrica.
f=6tqr
r =raiodaesfera
q =viscosidadedo meio
Estes clculospermitemrelacionar as medidas
macroscicascom osparmetrosmicroscpicos.
Coeficiente friccional
18T
15
Difuso e coeficiente de frico
D = k
B
T/(6trq)
equao de Stokes-Einstein
Lei de Stokes
Lei de Stokes Lei de Stokes
18T 10P
A medio de D de um soluto num solvente de q
conhecido permite calcular o r.
f = 6trq
F
f
= fv
A fora de frico
em que o coeficiente de frico
Lei de Stokes
Lei de Stokes Lei de Stokes
Partculas esfricas e solvente contnuo.
As molculas podem no ser esfricas e
apresentar solvatao.
16
Energia de Gibbs de transferncia entre duas fases
Energia Energia de Gibbs de de Gibbs de transferncia transferncia entre entre duas duas fases fases
Transferncia de um soluto entre dois solventes diferentes

A
(slido) =
A
(soluo saturada 1)

A
(slido) =
A
(soluo saturada 2)

A
(soluo heptano) -
A
(soluo aquosa)
AG =
A
(fase 2) -
A
(fase 1) = RT ln [a
A
(fase 2)/a
A
(fase 1)]
18T 10P
AG de transferncia de um cido gordo da gua para o heptano
Adio de um soluto A ao solvente 1 e ao solvente 2
(Aplica-se a molculas sem carga e a molculas
na ausncia de um campo elctrico.)
AG =
A
(fase 2) -
A
(fase 1) + FZV
AG= RT ln [a
A
(fase 2)/a
A
(fase 1)] + FZV
Z = carga do io 1 ; 2 ; 3 ; F = 96, 485 J(eV)
-1
; V = |
2
|
1
AG = (
A
+ ZF|)(fase 2) - (
A
+ ZF|)(fase 1)
Energia de Gibbs de transferncia entre duas fases
Energia Energia de Gibbs de de Gibbs de transferncia transferncia entre entre duas duas fases fases
18T
Transferncia de um soluto entre dois solventes diferentes
por aplicao de uma diferena de potencial entre as 2 fases
Transporte activo emclulas biolgicas
Transporte de ies e metabolitos atravs de membranas
17
Equilbrio de Donnan
Equil Equil brio brio de de Donnan Donnan
a. Ies de sdio e cloro separados pela membrana
b. Condies iniciais: lado 1 (Na
+
P

) e lado 2 (Na
+
Cl

)
separados pela membrana.
Os anies P
-
no se difundem atravs da membrana
c. Equilbrio final de Donnan nas condies de c.
(c
2
- x)
2
= (c
1
+ x)x
x = c
2
2
/(c
1
+ 2c
2
)
18T
[Na
+
]
1
[Na
+
]
2
[Na
+
]
1
c
1
[Cl
-
]
1
[Cl
-
]
2
[P
-
]
1
c
1
[Na
+
]
2
c
2
[Cl
-
]
2
c
2
[Na
+
]
1
c
1
+x
[Na
+
]
2
c
2
-x
[P
-
]
1
c
1
[Cl
-
]
2
c
2
-x
[Cl
-
]
1
x
a b c
1 2 1 2 1 2
Explicar a igualdade de concentraes
dos ies entre o lado1 e o lado 2
([Na
+
]
2
[Cl
-
]
2
)/([Na
+
]
1
[Cl
-
]
1
) = 1
Equilbrio de Donnan
Equil Equil brio brio de de Donnan Donnan
AG = AG
Na
+ + AG
Cl
- = 0
No equilibrio
AG
Na
+ = RT ln ([Na
+
]
2
/ [Na
+
]
1
)
AG
Cl
- = RT ln ([Cl
-
]
2
/ [Cl
-
]
1
)
Energia de Gibbs inica
18T
AG =RT ln ([Na
+
]
2
/ [Na
+
]
1
) + RT ln ([Cl
-
]
2
/ [Cl
-
]
1
) = 0
A energia de Gibbs de transferncia
dos ies entre o lado1 e o lado 2
18
[Na
+
]
1
= [Cl
-
]
1
e [Na
+
]
2
= [Cl
-
]
2
[Na
+
]
1
= [Na
+
]
2
= [Cl
-
]
1
= [Cl
-
]
2
De acordo com a De acordo com a electroneutralidade electroneutralidade
([Na
+
]
2
[Cl
-
]
2
)/([Na
+
]
1
[Cl
-
]
1
) = 1
Equilbrio de Donnan
Equil Equil brio brio de de Donnan Donnan
18T
(c
2
- x)
2
= (c
1
+ x)x
x = c
2
2
/(c
1
+ 2c
2
)
Equilbrio de Donnan
Equil Equil brio brio de de Donnan Donnan
18T
(c
2
- x) (c
2
- x) = (c
1
+ x)x
([Na
+
]
2
[Cl
-
]
2
)/([Na
+
]
1
[Cl
-
]
1
) = 1
([Na
+
]
2
[Cl
-
]
2
) = ([Na
+
]
1
[Cl
-
]
1
)
Lado2 Lado1
19
Equil Equil brio brio de de membrana membrana de de Donnan Donnan
(zc
p
+ x)(x) = (c
s
x)(c
s
x)
x = c
s
2
/(zc
p
+ 2c
s
)
x ~ (1/2)c
s
Compartimento
Salino (CS)
Compartimento
Proteico (CP)
Espcies
Na
+
Cl

Na
+
Cl

P
z
Concentrao inicial
c
s
c
s
zc
p
0 c
p
Variao da concentrao
para atingir o equilbrio x x +x +x
Concentrao no equilbrio
(c
s
x) (c
s
x) (zc
p
+x) +x c
p
A conc. salinas elevadas
18T 10P
A protena P
z
no se difunde atravs da membrana
Cintica de Ligao
Lei de aco das massas
+
[P] + [D] [PD]
K
a
K
d
Plasma gua extracelular
] ].[ [
] [
D P
PD
K
a
=
Baixo K
a
= maioria livre (no ligado)
Alto K
a
= maioria ligado
Reaco de ligao entre uma protena P e um frmaco (droga D)
19T 11P
20
] [ ] ][ [
] ][ [
P D P K
D P K
r
a
a
+
=
] [ 1
] [
D K
D K
r
a
a
+
=
] ][ [ ] [ D P K PD
a
=
] [ ] [
] [
P PD
PD
r
+
=
] ].[ [
] [
D P
PD
K
a
=
Cintica de Ligao
19T 11P
r =nde moles de protenaligada
ntotal de moles de protena
r fraco de protena ligada
...
] [ 1
] [
] [ 1
] [
2
2 2
1
1 1
+
+
+
+
=
D K
D K n
D K
D K n
r
] [ 1
] [
D K
D nK
r
a
a
+
=
Cintica de Ligao
19T 11P
[P] + n[D] [PD
n
]
K
a
K
d
n o nde stios de ligao por protena
r a fraco de protena ligada
21
| | n D nK r
a
1 1 1
+ =
Langmuir / Klotz
Isotrmicade
adsorpode
Langmuir
] [ 1
] [
D K
D K
r
a
a
+
=
] [ 1
] [
D K
D nK
r
a
a
+
=
Grfico recproco de Klotz
(dupla reciprocidade)
1 / [D]
1
r
1/n
1/nK
a
r
[D]
20T
Equao de Scatchard
20T
A equao de Scatchard uma equao para calcular as constantes
de afinidade (K
a
) de um ligando com uma protena e o nmero
de stios de ligao (n) por molcula.
| |
a a
rK nK
D
r
=
22
Equao de Scatchard
r
r
[D]
-K
a
nK
a
Mtodo preferido de
tratamento de dados
Curvatura indica mais
do que um tipo de
stios de ligao
] [ 1
] [
D K
D nK
r
a
a
+
=
] [ ] [ D nK D rK r
a a
= +
| |
a a
rK nK
D
r
=
] [ ] [ D rK D nK r
a a
=
20T 11P
y =-x +1
R
2
=1
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2
v
v
/
[
A
]

(
x

1
0
E
6

M
-
1
)
r
r
/[
D
]
(
1
0
E
6
M
-
1
)
Grfico de Scatchard
Um declive de 110
6
M
-1
= K
a
, e uma intercepo de
110
6
M
-1
, correspondente a K
d
= 1 Me n = 1.
Abaixo est um grfico de Scatchard de uma reaco de
ligao simples. Os dados formam uma linha recta
perfeita (no so dados reais, claramente!) com um
declive de 110
6
M
-1
e uma intercepo de 110
6
M
-1
.
11P
23
Difuso atravs de membranas
Difuso Difuso atrav atrav s s de de membranas membranas
20T 11P
A velocidade de difuso das molculas e
iesatravs das membranas um assuntode
grandeimportnciaemBiologia.
Nos trabalhos com membranas define-se o
coeficiente de permeabilidade P
Difuso atravs de membranas
Difuso Difuso atrav atrav s s de de membranas membranas
(P/ms
-1
)
20T 11P
Coeficiente de permeabilidade P
l
D
c c A
t n
P

) (
d / d
2 1
l
c c
DA
t
n 2 1
d
d

A velocidade de difuso
(Gradiente de concentrao)
l
c c
x
c 2 1
d
d

1
Difuso atravs de membranas
Difuso Difuso atrav atrav s s de de membranas membranas
Solues (com agitao) de concentraes c
1
e c
2
separadas por uma
membrana porosa de espessura l. A solubilidade do soluto
diferente na membrana e no solvente
20T 11P
1
(c
1,m
)
(c
2,m
)
Difuso atravs de membranas
Difuso Difuso atrav atrav s s de de membranas membranas
20T 11P
Coeficiente de permeabilidade aparente
l
DKp
Coeficiente de difuso aparente
DK
p
s
m
p
c
c
K
Coeficiente de partio
l
c c K
l
c K c K
x
c ) (
d
d 2 1 p 2 p 1 p

Gradiente de concentrao
l
c c
DAK
t
n 2 1
p
d
d

Velocidade de difuso
2
Difuso atravs de membranas
Difuso Difuso atrav atrav s s de de membranas membranas
20T 11P
A maior ou menor solubilidade do soluto na
membrana em relao soluo pode ser
representada por Kp
Se a membrana lipdica e o soluto no polar,
ento o soluto pode ser mais solvel na membrana
do que na soluo aquosa
Os valores de K
p
determinam a velocidade
de difuso atravs da membrana
20T
Difuso atravs de membranas
Difuso Difuso atrav atrav s s de de membranas membranas
s
m
p
c
c
K
s
m
p
c
c
K
s
m
p
c
c
K
s
m
p
c
c
K
3
O efeito de partio K
p
pode conduzir a velocidades de
difuso dn/dt mais elevadas do que na sua ausncia
20T
Difuso atravs de membranas
Difuso Difuso atrav atrav s s de de membranas membranas
s
m
p
c
c
K
O soluto sacarose menos solvel na membrana lipdica
do que na soluo aquosa
A velocidade de difuso da sacarose na membrana lenta
O soluto pode ligar-se a molculas transportadoras e
aumentar a velocidade de difuso na membrana
bicamadas
Difuso atravs de membranas
Difuso Difuso atrav atrav s s de de membranas membranas
lipossomas micelas
Misturas de sais de cidos
gordos formam micelas:
agregados esfricos de 10 a
1000 molculas
Dimetro <200
Fosfolpidose glicolpidos
formam bicamadasou
lipossomas.
As bicamadasso estruturas
planares relativamente
instveis.
Lipossomasso vesculas com
gua dentro. Resultam do fecho
da bicamadasobre si prpria.
Dimetro varivel de 500 a 104
Na presena de gua os glicerofosfolpidos, esfingolpidose
esteris agregam-se espontaneamenteelevada hidrofobicidade
Dependendo das condies experimentais e da natureza dos lpidos
podem formar-se 3 tipos de agregados:
Unidade
individual
Unidade individual
Cavidade
aquosa
4
Permeabilidade da camada bilipdica
Permeabilidade P (cm s
1
) da BicamadaLipdicaa molculas pequenas
aumenta com a fludez da bicamada e proporcional Solubilidade dessas
molculas em lpidosK (constante de partio, adimensional), ao coeficiente de
difuso D (cm
2
s
1
) atravs da bicamadae inversamente proporcional
espessura l (cm) . (P = DK/l)
Impermeveis grande maioria das molculas polares e ies (excepo H
2
O)
Polaridade de um soluto
A medida simples da polaridade (ou apolaridade) de uma
substncia o seu coeficiente de partio
Coeficiente de partio: uma medida diferencial de
solubilidade de compostos qumicos em dois solventes
(geralmente octanol ou um leo vegetal e gua)
Difuso simples atravs da bicamada de lpidos
5
Difuso atravs de membranas
Difuso Difuso atrav atrav s s de de membranas membranas
20T 11P
Difuso simples
Molculas
Hidrfobas
Oxignio
Nitrognio
Benzeno
Pequenas molculas
polares e sem carga
gua, ureia
Glicerol,
Dixido
carbono
Grandes molculas
polares e sem carga
Ies
Glucose
Sacarose
H
+
Na
+
HCO
3
-
K
+
Ca
2+
Cl
-
Mg
2+
Molculas lipfilas
Frmacos ionizados
Difuso
No h
difuso
Bicamada
lipdica
Relao entre o coeficiente de partio e a permeabilidade
da membrana
Tamanho da substncia
Molculas com coeficientes de partio equivalentes:
a menor molcula tende a penetrar na bicamadalipdica
mais rapidamente do que a maior molcula.
Molculas muito pequenas e sem carga penetram
muito rapidamente
As membranas so altamente permeveis s pequenas
molculas inorgnicas como O
2
, CO
2
, N
2
e H
2
O que
deslizam entre os fosfolpidosadjacentes .
Grandes molculas polares, como acares e aminocidos
tem uma permeabilidade pobre
6
Difuso da gua atravs das membranas
As molculas de gua movem-se muito mais rapidamente
atravs de uma membrana celular do que ies dissolvidos
ou pequenos solutos orgnicos polares, que so
essencialmente no penetrantes
Devido a essa diferena na permeabilidade da gua,
quando comparada de solutos, as membranas so
chamadas semipermeveis
Osmose
Transporte passivo
Transporte Transporte passivo passivo
Transferncia do composto do meio
extracelular para a fase membrana
Difuso do composto atravs da
bicamada lipdica
Transferncia do composto da fase
membrana para o citosol
20T
Transporte de um composto por difuso livre:
7
Compostos transportados por difuso passiva
CO
2
, O
2
, NH
3
, cidos gordos e alcois
Os cidos orgnicos na forma dissociada
so insolveis na membrana lipdica
P(cido lctico) = 5,010
-7
m s
-1
P(cido actico) = 6,910
-5
m s
-1
O transporte total sensvel ao grau de dissociao
e ento ao pH
Transporte passivo
Transporte Transporte passivo passivo
Os cidos orgnicos na forma no dissociada
so solveis na membrana lipdica
difundem-se rapidamente atravs membrana plasmtica
20T 11P
No transporte passivo o fluxo J tem
o mesmo sentido que o gradiente
de concentrao (dc/dx)
O transporte passivo ocorre
espontneamente dG < 0
(sentido descendente do gradiente de concentrao)
Transporte passivo
Transporte Transporte passivo passivo
20T
8
Difuso facilitada
Difuso Difuso facilitada facilitada
Muitos compostos so transportados por
difuso livre a velocidades baixas,devido
baixa solubilidade na membrana plasmtica
O transporte de compostos pode aumentar
pela mediao de molculas transportadoras
20T
Transporte activo
Transporte Transporte activo activo
O transporte activo no ocorre
espontaneamente dG > 0
requerida energia (ATP)
No transporte activo o fluxo J tem o
sentido contrrio ao gradiente de
concentrao (dc/dx)
(sentido ascendente do gradiente de concentrao)
20T
9
Transporte activo pode ocorrer contra
o gradiente de concentrao
Transporte activo
Transporte Transporte activo activo
HCl flui [H
+
] = 10
-7
mol l
-1
para [H
+
] = 10
-1
mol l
-1
Formao do suco gstrico
AG = (8,314 JK
-1
mol
-1
)(310 K)
ln (1,010
-3
M/1,010
-5
M) J mol
-1
= 12 kJmol
-1
Transporte do composto X do exterior para o interior
de uma clula (1,010
-5
1,010
-3
)
Processo no espontneo
20T 11P
Transporte passivo
e transporte activo
Transporte passivo
e transporte activo
Molcula transportada
Bicamada
lipdica
Protena
transportadora Bicamada
lipdica
Canal
proteico
Gradiente de
concentrao
Difuso
simples
Transporte passivo Transporte activo
Difuso
facilitada
Canal de
transporte
11P 20T
(EtOH; CO
2
; O
2
)
10
DINMICA DE MEMBRANA
DINMICA DE MEMBRANA DINMICA DE MEMBRANA
O fluxo resultante do soluto
na membrana depende:
Temperatura
Massa molar
rea superficial
Densidade do meio
A difuso atravs de membranas
determinada por:
Gradiente da concentrao
(quanto maior for a diferena de [ ] maior o fluxo resultante)
rea
(quanto maior for a rea maior o fluxo resultante)
Coeficiente de permeabilidade
DINMICA DE MEMBRANA
DINMICA DE MEMBRANA DINMICA DE MEMBRANA
11
O coeficiente de permeabilidade (P=D/l) depende de:
Tipo de molcula
Massa molar
Temperatura
Caractersticas da membrana
DINMICA DE MEMBRANA
DINMICA DE MEMBRANA DINMICA DE MEMBRANA
20T
Unidades elctricas
Unidades elctricas
F = (Q
1
Q
2
)/(4tc
0
r
2
) E = Q/(4tc
0
cr
2
)
o = Q/A
V = E.r E = V/r E = -d|/dr
| = -} Edr = Q/(4tc
0
cr) | = Ao/(4tc
0
cr) = or/(4tc
0
c)
c = c
m
/c
0
c
m
= c
0
c
| = or/(4tc
0
c)
20T
12
Duas vias para visualizar a Dupla Camada Elctrica
O lado esquerdo mostra a variao da densidade de carga
em volta do colide. O lado direito mostra a distribuio de
ies positivos e negativos em volta do colide negativo.
Dupla Camada Elctrica Dupla Dupla Camada Camada El El ctrica ctrica
Colide
negativo
Camada Stern
Camada Difusa
Ies em equilbrio
com a soluo
Contra-ies positivos
Co-ies negativos
Dupla Camada Elctrica de cargas superfcie de
uma partcula aninica (membrana biolgica)
Dupla Camada Elctrica Dupla Dupla Camada Camada El El ctrica ctrica
17T 9P
13
Dupla Camada Elctrica Dupla Dupla Camada Camada El El ctrica ctrica
17T 9P
Carga negativa
Plano de deslize
Distncia superfcie
Potencial zeta
(a) Modelo de Helmholtz (dupla camada fixa)
(b) Modelo de Gouy e Chapman (dupla camada difusa)
(c) Modelo de Stern
A dupla camada elctrica
A dupla camada elctrica
11P 21T
14
A dupla camada elctrica
A dupla camada elctrica
| = [(od)/(c
0
c)] e
k(a - x)
O potencial distncia x
|
a
= o/(c
0
ck) = (od)/(c
0
c)
O potencial distncia x=a
11P 21T
Distribuio inica que se estende a uma dada
distncia da superfcie
(1/k = d -espessura efectiva da dupla camada)
(a-distncia mnima de aproximao dos ies
superfcie)
, = (od)/(c
0
c)
Potencial zeta
Efeitos Electrocinticos
Efeitos Electrocinticos

Fase mvel Potencial aplicado Potencial produzido

Lquida Electroosmose Potencial de fluxo

Slida Electroforese Potencial de sedimentao

, = (od)/(c
0
c)
A diferena de potencial entre o interior da soluo e a
posio mnima de aproximao dos ies superfcie
Modelo da dupla camada elctrica
(partcula cilndrica)
21T
Os efeitos electrocinticos devem-se existncia de diferenas
de potencial nas interfaces slodo-lquido
15
Electroosmose atravs de um poro da membrana
Electroosmose
Electroosmose
Electroosmose
Electroosmose
Fora friccional
(v/d)q
Fora de electroosmose
(V/d)o = Eo
(partcula cilndrica)
11P 21T
Aplica-se um potencial de electroosmose na membrana e
resulta um fluxo de lquido atravs dos poros da membrana
Um lquido forado a passar por electroosmose atravs dos poros da
membrana e a velocidade determinada por dois factores opostos:
A fora de electroosmose e a fora friccional
No estado estacionrio as duas foras igualam-se e atinge-se
uma velocidade uniforme de fluxo
16
Electroosmose
Electroosmose
[, = (o d)/(c
0
c)]
A mobilidade electroosmtica
u = (,c
0
c)/q
u = v/E
Eo = (qv)/d
Estado estacionrio
v = [(,c
0
c)/q]E
Pela eliminao de d
(partcula cilndrica)
11P 21T
A mobilidade electrofortica
u = (,c
0
c)/q
(partcula cilndrica)
Electroforese
Electroforese
21T
Por aplicao do potencial electrofortico soluo uma
partcula cilndrica slida desloca-se atravs do lquido
17
Electroforese
Electroforese
(partcula esfrica)
11P 21T
Um campo elctrico E aplicado atravs da soluo.
A fora que actua nas molculas do soluto com carga ezE,
onde e a carga electrnica e z o n de cargas na molcula.
No estado estacionrio a fora electrosttica equilibrada pela
fora friccional exercida pelo solvente
Electroforese
Electroforese
u = ze/6tqr
A mobilidade electrofortica
(partcula esfrica)
v = ezE/f
u = v/E = ze/f
Fora friccional
fv = 6tqrv
Fora de electroforese
ezE
ezE= fv = 6tqrv
Estado estacionrio
11P 21T
18
Determinao do ponto isoelctrico de uma protena
Carga das protenas
Carga das protenas
22T
Carga das protenas
Carga das protenas
Valores de pH elevados
Protenas carga resultante () (COO

; NH
2
) nodo
Valores de pH baixos
Protenas carga resultante (+) (COOH ; NH
3
+
)ctodo
Ponto isoelctrico
Protenas carga resultante zero; estacionrias
A carga resultante funo do pH. As diferentes protenas
podem ser separadas pela escolha adequada do pH.
A mobilidade das protenas depende da carga resultante
e do coeficiente friccional.
22T
19
Focagem isoelctrica
Focagem isoelctrica
Amostra no lado do pH elevado (prximo ctodo)
Protenas carga () nodo
Amostra no lado do pH baixo (prximo nodo)
Protenas carga (+) ctodo
Mistura de protenas no meio
Aplicado um campo elctrico
cada protena migra para o ponto isoelctrico
Formao de bandas separadas umas das outras
para a sua caracterizao
So usados tampes (pH elevado no ctodo e pH baixo no nodo)
para estabelecer um gradiente de pH no gel.
22T
Focagem isoelctrica
Focagem isoelctrica
Diagrama de electroforese, em gel a 2 dimenses, de protenas
acdicas (os pontos isoelctricos esto entre pH 7,5 e 4,5), separadas
por focagem isoelctrica (IEF) na 1 dimenso e SDS na 2 dimenso.
20
Determinao da massa molar de
protenas por electroforese
Determinao da massa molar de
protenas por electroforese
log M= a - bx
Mobilidade
M
a
s
s
a

M
o
l
a
r

1
0
4
As concentraes de acrilamida so: 15% () , 10%( ) , 7, 5%( ) e 5%( ) . Os n
os
1 a 11 referem-se
s seguintes protenas: |-galactosidase, fosforilase a, albumina srica, catalase, fumarase, aldolase,
gliceraldedo fosfato dihidrogenase, anidrase carbnica, tripsina, mioglobina e lisozima.
l
o
g
M
11P 22T
Curvas de electroforese para o plasma humano
Curvas de electroforese para o plasma humano
21
Efeitos Electrocinticos Inversos
Efeitos Electrocinticos Inversos
Potencial de fluxo
Potencial de sedimentao
22T
22