Disciplina: Animais de Laboratrio

Depto. Imunobiologia
Professora: Carla Eponina de Carvalho Pinto
Monitora: Ceclia !ocha " aluna do curso de #iomedicina
$tulo Animais na pes%uisa e no ensino: aspectos &ticos e t&cnicos
Autores Anamaria 'ei() Luisa Maria *omes de Macedo #raga) Paulo M+rcio
Condessa Pitre,
Editora EDIP-C!.) /010
I.#2 3456708/31) 8533456708/39
2um. p+gs. 6/1 p+ginas
Dados biolgicos das espcies mais utilizadas em laboratrio
Macacos Rhesus
A ltima etapa do teste pr-clnico ser realizada na colnia de macacos
Rhesus do Instituto utantan ! uma parceria "ue en#ol#e as pes"uisadoras
$usan Ribeiro% &lizabeth 'alentini e 'ania Mattaraia( A #antagem de )azer
testes em primatas a semelhan*a com o sistema imunolgico humano e o
)ato de eles serem suscet#eis ao $I'% #rus "ue deu origem ao +I'(
Camundongos de &stirpes &ndog,micas Camundongos de Linhagens
Consanguneas Camundongos de Linhagens &ndog,micas(
I - Introdu*-o
As esp&cies mais utili,adas em laboratrio s:o:
Camundongo ;Mus musculus<
!ato ;Rattus novergicus<
Cobaia ;Cavia porcellus<
=amster ;Mesocrisetus auratus<
Coelho ;Oryctolagus cuniculus<
> animal de laboratrio deve ser visto como um reagente biolgico. $udo o %ue o circunda) de
uma ou outra forma) pode e?ercer influ@ncias nas caractersticas deste reagente. Assim) &
importante %ue se tenha conhecimento da biologia das esp&cies mais utili,adas) pois desta forma &
possvel criar um ambiente mais ade%uado para a esp&cie em %uest:o) evitando ao m+?imo
1
alteraABes de sua homeostasia) fa,endo com %ue estes animais se(am modelos e?perimentais
confi+veis.
Camundongo ;Mus musculus<
>rdem Rodentia " 'amlia Muridae
>s camundongos (+ eram conhecidos pelo homem cerca de 9.000 anos antes de serem
utili,ados em pes%uisa. As primeiras informaABes %uanto ao uso desta esp&cie na e?perimentaA:o
datam do inicio do s&culo passado. > camundongo &) sem dCvida) o animal mais utili,ado em
pes%uisa e ensino. .ua grande prolificidade e ampla variabilidade gen&tica despertaram os
interesses em biologia e?perimental) enfocando a gen&tica) embriologia e nutriA:o. . as
pes%uisas sobre cDncer recorrem a milhBes de camundongos a cada ano. .:o tamb&m) muito
usados em pes%uisas farmacolgicas) principalmente na investigaA:o de efeitos t?icos nas
triagens de compostos %umicos.
Esta ampla utili,aA:o dos camundongos se deve principalmente a sua prolificidade) f+cil
mane(o) biologia e genoma conhecidos e manutenA:o n:o muito cara. Estas %ualidades)
acrescentando a similaridade dos resultados a humanos) recomendam essa esp&cie como bom
modelo animal para a e?perimentaA:o.
'oram desenvolvidas apro?imadamente 400 diferentes variedades ou linhagens) muitas delas
especficas para determinadas pes%uisas. Linhagens de camundongos consangEneos pertencem
a uma categoria especial de animais para pes%uisa. *eralmente estes animais t@m ndice de
mortalidade mais alto e ta?a de crescimento mais bai?a %ue camundongos n:oFconsangEneos.
.:o su(eitos ao canibalismo) t@m temperamento muito vari+vel) e algumas ve,es mau formaA:o
cong@nita. Mas eles v@m contribuindo para o entendimento de importantes funABes biolgicas e de
diferentes enfermidades. *eneticistas desenvolveram variedades consangEneas de camundongos
suscetveis G distrofia muscular) uma doenAa humana de nature,a debilitante) cu(a cura ainda &
desconhecida. >utras variedades s:o geneticamente selecionadas para %ue apresentem
2
problemas metablicos natos) au?iliando os bilogos a obter e aprofundar seus conhecimentos sob
certas reaABes anormais.
Alguns e?emplos dos principais usos do camundongo: pes%uisa gen&tica) transplante de
tecidos) biologia molecular) imunologia) embriologia) estudos sobre cDncer) virologia) enfermidades
infecciosas) diagnstico de enfermidades como a raiva e controle de %ualidade de produtos
biolgicos e farmac@uticos.
Mane.o
>s animais devem estar alo(ados em cai?as prprias) %ue proporcione comodidade.
*eralmente estas cai?as s:o de polietileno) %ue s:o duradouras e de f+cil higieni,aA:o. >s
comedouros e bebedouros dever:o ser funcionais) com uma dimens:o de acordo com o tamanho
da cai?a e com uma forma ade%uada %ue facilite o acesso do animal G +gua e comida) de material
esterili,+vel e f+cil de limpar.
> alimento & elaborado comercialmente de acordo com as necessidades nutricionais dos
camundongos e em geral esta raA:o & em forma de pellet) o %ue redu, o desperdcio e torna o
alimento f+cil de ser manuseado e oferecido em comedouros locali,ados nas tampas das gaiolas.
*eralmente o alimento e +gua s:o oferecidos G vontade) sendo %ue a +gua deve ser fresca)
pot+vel e trocada periodicamente durante a semana. -m camundongo adulto) macho) deve
consumir) em m&dia) 4 gramas de raA:o e 9 ml de +gua por dia.
>s camundongos s:o facilmente mane(ados %uando reali,ado da forma correta. Huando for
mane(ar por curtos perodos) como mudar de uma cai?a para a outra) a forma mais comum de
conter o animal & pela base da cauda. $odo m&todo de contenA:o deve permitir a livre respiraA:o e
evitar comprimir muito o pescoAo ou %ual%uer outra regi:o %ue pre(udi%ue a circulaA:o de ar ou
sangue. .e for necess+rio manipular o animal por mais tempo colocaFse o animal em uma
superfcie irregular ;como a tampa das cai?as< onde possam se agarrar. DeveFse segurar a pele da
base do pescoAo com os dedos indicador e polegar) virandoFse a m:o de maneira %ue ele fi%ue
com o abdImen voltado para cima. PrendeFse ent:o a cauda entre o terceiro e %uarto dedo. 2esta
posiA:o podem ser feitas) por e?emplo) in(eABes intraperitoneais ;'iguras 1F/<.
3
Figura 1
Figura 2
E?istem diferentes m&todos para identificaA:o dos lotes de animais) %ue devem ser escolhidos
de acordo com a pes%uisa desenvolvida e o m&todo deve ser seguro e de leitura clara. Podem ser
feita por marcas naturais) onde s:o identificados por cores individuais ou se?oJ por tingimento dos
p@los com fucscina ;vermelho<) violeta de metileno ou violeta de genciana ;violeta<) verde brilhante
;verde< ou a,ul de tripan ;a,ul<) s:o marcaABes tempor+rias usadas em estudos de curta duraA:oJ
ou ainda as permanentes) por perfuraABes na orelha) obedecendo a um modelo pr&Fdefinido e
conhecido internacionalmente ;'igura 7<.
'igura 7
4
> transporte destes animais deve ser feito com cuidado) pois o estresse causado nos animais
afetar+ a fisiologia e o estado imunolgico do animal. Huando chegar ao seu destino) recomendaF
se %ue o animal descanse por) no mnimo) 63hs antes de ser utili,ado em trabalho de
e?perimentaA:o) pois neste tempo ir+ adaptarFse ao novo macroambiente e estabili,ar suas
respostas imunes. .e o transporte for durar algumas horas deveFse fornecer alimento e +gua
fresca aos animais.
Reprodu*-o
> programa reprodutivo & estabelecido levando em conta o espaAo disponvel) fecundidade da
raAa utili,ada) es%uema de consangEinidade) implicaABes epi,oticas e necessidades produtivas
programadas. >s sistemas reprodutivos mais utili,ados incluem as colInias) os casais
monogDmicos) ou os con(untos poligDmicos. 2o sistema de colInias & suficiente um macho para
cada /F9 f@meas %ue se mant@m unidos permanentemente) retirando as crias aps desmame. >
sistema de casais monogDmicos se caracteri,a pela manutenA:o de casais permanentes) e as
crias obtidas s:o retiradas uns dias antes do pr?imo parto. K+ o sistema poligDmico agrupa um
macho para cada /F9 f@meas. Imediatamente antes do parto as f@meas s:o levadas a cai?as
individuais) n:o aproveitando o cio psFparto e com isso o intervalo entre partos fica sendo de 5F3
semanas.
> camundongo de laboratrio est+ apto para a reproduA:o aos 90 dias de idade. Alguns sinais
de estro podem ser observados (+ aos /1 dias) conforme a linhagem do animal. 2esta &poca
podemos observar certa abertura da vagina) mas o estro completo se inicia alguns dias mais tarde.
2as f@meas) os ov+rios apresentam a produA:o de alguns vulos por ve,) de acordo com um
ritmo funcional definido pelo sistema reprodutivo) o Ciclo Estral ;$abela 1<. Este ciclo divideFse em
%uatro fases: proestro) estro) metaestro e diestro. .endo a fase do estro na %ual a f@mea aceita o
macho e est+ apta para acasalar
> perodo de gestaA:o dura 18F/1 dias) e?ceto para as f@meas %ue est:o amamentando.
2esta fase) a gestaA:o pode ser alongada em 9F19 dias) mas esta pr+tica n:o & recomendada
%uando se pretende manter uma colInia de reprodutores.
>s rec&m nascidos %ue podem ser identificados %uanto G idade ;$abela /<) comeAam a mamar
imediatamente aps o parto e isto fica evidente atrav&s da mancha branca observada na regi:o
abdominal) %ue nada mais & %ue o estImago cheio de leite. Esta observaA:o pode servir de crit&rio
para a seleA:o dos animais mais fortes. .e o estImago n:o se apresentar cheio) o animal pode ser
considerado fraco e) ent:o) eliminado.
2ormalmente o canibalismo & raro) mas recomendaFse n:o mane(ar a f@mea nem os filhotes
at& 63hs aps o parto e lhes oferecer +gua e alimentaA:o ade%uadas) mantendo as cai?as em
timas condiABes de higiene.
5
$abela 1 " Ciclo estral
/iclo &stral ! /amundongos
0ases /aractersticas do es)rega*o /aractersticas
)isiolgicas
DI&$1R2
Maioria de leuccitos s:o
Polimorfonucleares ;PM2<)
pouco ou nenhum muco.
!egress:o do
corpo lCteo.
3R2&$1R2
4tardio5
3recoce
EsfregaAo vaginal apresenta
c&lulas epiteliais conificadas)
leuccitos PM2) c&lulas
nucleadas e muco pega(oso. >vulaA:o
1ardio .omente c&lulas nucleadas.
&$1R2
Predominam c&lulas epiteliais
conificadas) raras c&lulas
nucleadas.
'@mea aceita o
macho.
M&1A&$1R2
C&lulas conificadas diminuem) e
linfcitos aumentam.
'ormaA:o do corpo
lCteo.
6
$abela / " Idade
Identi)ica*-o da idade em camundongos recm nascidos
Dias
/aractersticas anatmicas
6
ColoraA:o rsea) marca de leite abdominal) sem p@los) somente vibrissas
;bigode<) olhos fechados e orelhas coladas. Pesam em torno de 1)4g.
7 >relhas descolam da cabeAa.
7-8 ComeAam a nascer os p@los.
9 Corpo todo coberto de p@los.
: Lisuali,aA:o das mamas nas f@meas.
Aps ;6 >lhos comeAam a abrir.
;; Dentes comeAam a nascer.
;< Incio da alimentaA:o slida.
;=->; Desmame. ;Perodo mais prolongado para animais imbred<
76-86 Lisuali,aA:o do se?o: abertura da vagina e descida dos testculos.
<6-?6 Maturidade se?ual. Aptos para acasalamento. Pesam de 13F/0g ;outbred<.
.e?agem: ainda %ue os testculos se(am evidentes em animais (ovens) a forma de se?ar o
macho & observando a distDncia anoFgenital: maior em apro?imadamente / ve,es em relaA:o G
f@mea ;'igura 6<. >s testculos t@m coloraA:o p+lida) visveis atrav&s da parede abdominalJ na
f@mea com 8 dias de idade podemFse observar as mamas.
'igura 6
;AFDnusJ PFp@nisJ .Fsaco escrotalJ -FuretraJ LFvagina<.
7
!ato ;Rattus novergicus<
>rdem Rodentia " 'amlia Muridae
2o comeAo do s&culo MM) os pes%uisadores americanos e ingleses) ao iniciarem suas
pes%uisa com re%uerimento de vitaminas) se utili,aram de ratos. =o(e em dia os ratos s:o muito
utili,ados em outros tipos de pes%uisas como testes biolgicos e psicolgicos) por%ue s:o de f+cil
manuseio. > seu bai?o custo alimentar tornaFos econImicos aos laboratrios.
2os ratos & possvel avaliar o efeito de %uantidades mnimas do material em e?peri@ncia " um
teste bem mais difcil em animais de grande porte. 'isiologicamente) os ratos s:o semelhantes aos
outros animais monog+stricos) e?ceto pelo fato de n:o possurem vescula biliar e seu pDncreas
ser difuso. $r@s dutos biliares partem diretamente do fgado para o duodeno.
>s melhores resultados de pes%uisa s:o obtidos a partir de lotes de ratos com tamanho
uniforme e %ue s:o produ,idos em NcolInias fechadasO. -tili,ando ratos de uma mesma origem) o
pes%uisador ir+ assegurar uniformidade de tamanho) boa reproduA:o e menores variaABes
gen&ticas.
> manuseio fre%Eente com os animais far+ com %ue eles se tornem dceis e f+ceis de
controlar. Esse manuseio permitir+ notar %uais%uer defeitos fsicos e a presenAa de ectoparasitas.
-ma compress:o firme e suave ao redor da cavidade tor+cica restringe os movimentos do rato
sem tra,er sensaA:o de desconforto. !atos (ovens devem ser acostumados ao manuseio
gradualmente) (+ %ue s:o muito ativos e brincalhBes. $estes psicolgicos provaram %ue os ratos
s:o e?tremamente inteligentes e sensveis. 2ecessitam de atenA:o e) geralmente) encaminhamFse
para frente da gaiola %uando um ser humano se apro?ima.
2os biot&rios as colInias de ratos comumente est:o representadas pelas seguintes raAas ou
variedades:
.pragueFDaPleQ: Albina) cabeAa fina e cauda larga) bastante prolfera) mas menos resistente a
enfermidades respiratrias.
Ristar: Albina) de cabeAa larga) com a cauda mais curta %ue o seu corpo) de orelhas largas)
resistente a certas enfermidades respiratrias) por&m menos prolferas.
Long Evans: menor %ue as albinas) de pelo escuro ou negro em algumas partes da cabeAa e
do tronco dorsal. Mais resistentes a enfermidades respiratrias %ue as albinas. Al&m disso) tem os
olhos pigmentados) o %ue lhes permite filtrar a lu, de maneira diferente %ue as albinas.
>s ratos t@m um papel muito importante nas pes%uisas na +rea de nutriA:o) como) por
e?emplo) estudos de metabolismo e a aA:o de vitaminas e hormInios. Esses animais s:o usados
em pr+ticas acad@micas dos estudantes) em ci@ncias biom&dicas) fisiologia) farmacologia e
to?icologia. $amb&m s:o utili,ados em: oncologia) induA:o de enfermidades) patogenias)
%uimioterapias e avaliaA:o de drogas e f+rmacos.
8
Mane.o
Como os camundongos) os ratos tamb&m devem estar alo(ados em cai?as ade%uadas para a
esp&cieJ +gua e alimentaA:o devem estar sempre disponveis) com trocas peridicas.
Em casos de manipulaA:o r+pida) & aconselh+vel %ue s pegue o animal %uando a e%uipe eSou
material %ue vai ser utili,ado estiver preparado. $al cuidado evita o estresse do animal por contnuo
mane(o e tamb&m %ue o rato morda o manipulador. .e o animal ser+ utili,ado em e?perimentaA:o
mais longa) recomendaFse manipul+Flo diariamente para %ue se(a um pouco mais dcil e se
acostume ao mane(o. $odo m&todo de contenA:o deve permitir a livre respiraA:o e evitar comprimir
demais o pescoAo ou outra regi:o) pre(udicando a circulaA:o normal de ar ou sangue ;'igura 4<.
'igura 4
A vo, alta) rudos estranhos ou movimentos bruscos podem levar o rato a morder. .e for
mane(ar por um perodo curto) como na troca de cai?a) deveFse segur+Flo pela base da caudaJ se
precisar de um maior tempo de manipulaA:o) deveFse conter o animal colocando os dedos ao redor
do pescoAo) tronco e patas dianteiras) com os dedos polegar e indicador imediatamente atr+s das
mandbulas.
$odos os animais de uma colInia devem estar marcados de uma forma clara e seguros.
Podendo ser feita por colares ;n:o s:o seguros) pois os ratos t@m grande habilidade para retir+F
los<) corantes ;preferencialmente de origem vegetal< ou marcaABes na orelha ;igual a dos
camundongos<.
Reprodu*-o
>s principais m&todos de reproduA:o nos ratos s:o:
9
Cru,amento por pares monogDmicos: > macho e a f@mea ficam (untos durante toda a sua vida
reprodutiva. A cru,a & reali,ada aps o parto e as crias s:o desmamadas antes %ue nasAa a
ninhada seguinte.
Cru,amento por har&m ;poligDmico<: 2este sistema) at& 6 f@meas s:o cru,adas com um
macho. Huando a gestaA:o & detectada) a f@mea & colocada em uma cai?a individual. > cio psF
parto n:o & aproveitado) ent:o o intervalo entre as ninhadas & de 5F3 semanas.
Cru,amento por outros sistemas ;poligDmico<: A produA:o de um grande nCmero de f@meas
gestantes & obtida (untandoFse um macho com at& 10 f@meas. A gestaA:o & confirmada com
esfregaAo vaginal e as f@meas s:o transferidas para cai?as individuais. >s machos podem ser
trocados semanalmente ou em intervalos mais curtos.
.e?agem: ainda %ue os testculos se(am evidentes em animais (ovens) a forma de se?ar os
ratos & observando a distDncia anoFgenital) sendo esta distDncia um pouco mais curta nas f@meas.
Entre o 3T e o 14T dia & possvel distinguir as mamas nas f@meas.
As f@meas est:o aptas G reproduA:o a partir do 30TF100T dia de idade. AconselhaFse n:o
cru,+Flas antes dos 80 dias) o %ue d+ a elas tempo suficiente para completar seu desenvolvimento
fsico) assegurando o nascimento de ninhadas fortes e saud+veis. $:o logo a rata & coberta) formaF
se um tamp:o na vagina) %ue & e?pelido durante as /6hs aps a cobertura. Este fato tamb&m &
observado em outros membros da famlia dos roedores. > tamp:o pode ser notado facilmente
entre as fe,es) na forma de um cilindro branco seroso. .ua observaA:o & indicativo de %ue uma
ninhada ir+ nascer dentro de 13F/0 dias. Por&m) o tamp:o seca rapidamente e escurece) tornandoF
se indistinto entre as fe,es) sendo mais bem observado tampando a vagina nas 1U horas aps o
coito.
As f@meas produ,em 7 ou 6 ninhadas sucessivas e depois se tornam pouco confi+veis para a
reproduA:o. Contudo) algumas f@meas chegam a produ,ir de 10 a 14 ninhadas.
Durante os primeiros dias psFparto assim como no desmame) os incImodos %ue a f@mea
pode sofrer na manipulaA:o e?cessiva ou alto nvel de rudos) assim como a car@ncia de materiais
para a construA:o do ninho) podem condu,ir ao abandono ou destruiA:o da ninhada. !ecomendaF
se) ent:o: retirar o macho da cai?a depois de 4 dias) evitar a troca de cama no primeiros dias psF
parto ou apenas transferir o ninho para a nova cai?a) a alimentaA:o e +gua devem ser
permanentes e em timas condiABes.
Cobaia ;Cavia porcellus<
10
>rdem Rodentia " 'amlia Caviidae
.:o origin+rios da Am&rica do .ul) e foram introdu,idos na Europa pelos espanhis no s&culo
MLI) sendo estes mascotes de marinheiros %ue os trou?eram do PeruJ e sua primeira utili,aA:o
como animal de laboratrio %ue se conhece com certe,a) foi no princpio do s&culo MIM. Em
liberdade) as cobaias vivem em grupos redu,idos de 4 a 10 indivduos. .:o muito tmidos e
geralmente s saem ao anoitecer pra ir aos lugares onde v:o obter seus alimentos) %ue consistem
em uma ampla gama de vegetais com particular predileA:o pela alfafa.
.:o conhecidas tr@s raAas principais de cobaias: a variedade inglesa ou americana) %ue tem o
p@lo curtoJ a peruana) de p@lo longoJ e a Abissnea) %ue se caracteri,a por um padr:o de p@los em
rosetas.
As linhagens utili,adas em pes%uisas s:o cinco: o p@lo curto) DunVanF=artleQ) =artleQ) cepa /
e cepas 17. As cepas p@lo curto) DunVanF=artleQ e =artleQ s:o de cru,amento aberto. Atualmente)
a variedade peruana & raramente usada em pes%uisa.
$amb&m chamado de pre+ ou por%uinhoFdaFndia) & sem dCvida o mais dcil e inofensivo dos
animais utili,ados na e?perimentaA:o) por&m s:o nervosos e agitados.
As cobaias s:o animais de grande valor em pes%uisa) devido a grande variedade de
e?perimentos nos %uais podem ser utili,adas. A pele das cobaias & muito semelhante G pele
humana e) por isso) foi muito usada para testar cremes e loABes) atualmente este uso esta
condenado pelas leis de proteA:o) pois e?istem Vits farmac@uticos %ue substituram os animais. A
ampla utili,aA:o de cobaias em pes%uisas bacteriolgicas e sorolgicas resultou no acCmulo de
consider+vel %uantidade de informaABes sobre valores sangEneos) contagem celular) an+lise de
elementos e constantes fsicas. .:o amplamente utili,ados nos campos da nutriA:o) farmacologia)
imunologia) alergologia e radiologia. W importante nos laboratrios de produtos biolgicos) para
provas de to?icidade) DL40 ;dose 40X letal< e outras provas de controle de %ualidade. W o animal
apto para o diagnstico da tuberculose) enfermidade %ue & altamente susceptvel) e por isso &
muito utili,ado.
Mane.o
As cobaias podem alo(arFse em colIniasJ diretamente no solo) em cai?as ou gaiolas
convencionais. >s adultos devem dispor de uma superfcie de apro?imadamente 94/cmYSanimal.
As camas geralmente s:o formadas por maravalha.
Assim como os macacos e o homem) a cobaia necessita de doses di+rias de vitamina C. Mas
como este animal n:o & capa, de produ,ir esta vitamina em %uantidade suficiente para suprir suas
necessidade) & necess+rio %ue se ofereAa uma fonte e?gena. A vitamina C pode ser oferecida
atrav&s da suplementaA:o na alimentaA:o ;capim<) mas nos biot&rios se usa +cido ascrbico na
11
+gua. Em geral) um consumo di+rio de 10 mg de +cido ascrbico & suficiente para manter o animal
sadio. .em a vitamina C) o escorbuto aparece em 5F10 dias.
.e mane(ada corretamente) a cobaia & um animal dcil) %ue raramente morde ou arranha. A
cobaia & manipulada com facilidade) contendoFa pelo tronco com uma das m:os) en%uanto apia
as patas posteriores com a outra ;'igura 9<. A contenA:o cuidadosa & especialmente importante
%uando se trata de f@meas gestantes.
'igura 9
Principais m&todos de identificaA:o: por corantes) %uando se trata de identificaABes
tempor+riasJ brincos numerados) %ue s:o colocados na orelhaJ ou ainda marcaA:o na orelha) como
em ratos e camundongos.
Reprodu*-o
As cobaias s:o poli&stricas contnuas) n:o estacionais) de ovulaA:o espontDnea) ciclo estral e
perodo de gestaA:o relativamente longos. .:o particularmente ade%uadas para estudos de
fisiologia reprodutiva por seu f+cil mane(o e seus sinais caractersticos de cio. De todos os
pe%uenos mamferos de laboratrio) o sistema reprodutor das cobaias & o mais parecido com o
humanoJ tem um ciclo estral longo e ovula espontaneamente com atividade secretora do corpo
lCteo.
> m&todo de reproduA:o mais utili,ado & o cru,amento por har&m ;poligDmico<. -saFse um
macho para duas f@meas) onde o cio psFparto & aproveitado e) machos e f@meas permanecem
(untos por toda a vida reprodutiva.
> diagnstico de gestaA:o pode ser feito na %uarta ou %uinta semana de gestaA:o por
palpaA:o abdominal.
.e?agem: o macho tem uma abertura genital entre o orifcio uretral e o Dnus. A f@mea possui
uma abertura em forma de - ;a membrana vaginal< no espaAo dito. Para e?por esta membrana
devemFse colocar os dedos indicador e polegar de cada m:o em ambos os lados da protuberDncia
12
urogenital e separar suavemente os dedos e?ercendo certa press:o) revelando assim a
membrana. 2os machos se palpam facilmente os testculos e o p@nis. Este Cltimo pode ser
e?teriori,ado mediante uma ligeira press:o digital.
As cobaias s:o muito precoces) nascem com p@los) dentes e olhos abertos) podendo ingerir
alimentos slidos poucas horas aps o parto. > canibalismo & raro) e?ceto %uando as crias forem
anormais ou houver uma alta densidade populacional entre os adultos ou se e?citados em
demasia. .e a f@mea abandonar a ninhada) esta pode sobreviver ainda %ue a viabilidade este(a
muito diminuda.
=amster ;Mesocricetus auratus<
>rdem Rodentia " .ubfamlia Cricentinae
> Dr. Israel Ahoroni) m&dico do Museu Zoolgico da -niversidade de Kerusal&m) encontrou em
uma gruta nas pro?imidades da cidade de Allepo) na .ria) uma f@mea com 1/ crias as %uais levou
ao seu laboratrio e sobreviveram 1 macho e / f@meas) %ue s:o os %ue t@m povoado os biot&rios
com seus descendentes.
Em 1870 foram levados aos laboratrios da InglaterraJ em 1871 foram feitas as primeiras
investigaABes com estes animais em lepra e leishmanioseJ em 1878 e?perimentaA:o com
tuberculose bovina ;*riffith e Pagel<J 186/ leptospirose ;Morton<) vrus de aborto de &gua
;Anderson e *oodpisture<) influen,a ;$aQlor e Parodi<.
A sua anatomia & semelhante em geral com a dos ratos) mas o estImago destes animais se
encontra divididos em duas partes devido a uma esp&cie de uma prega. Possuem glDndulas
seb+ceas pigmentadas) locali,adas nos flancos) atr+s do arco costal) %ue originam uma secreA:o
de odor especfico. .:o especialmente caractersticas as bolsas laterais %ue formam uma parte
das bochechas) a composiA:o especial dos tecidos %ue as formam ;epitelial muito vasculari,ado<
fa,em com %ue se(am utili,ados para estudos relacionados com a micro circulaA:o e os
transplantes) especialmente de tecidos cancerosos.
.:o conhecidas) atualmente) 46 diferentes esp&cies) variedades e subesp&ciesJ as mais
utili,adas s:o: Dourado ou .rio " =amster Dourado ;Mesocricetus auratus<) o Europeu " =amster
2egro ;Crisetus crisetus<) o chin@s " =amster *ris ;crisetus griseus<.
W empregado e?tensivamente em ci@ncias biom&dicas) para provas de 2eP Castle) encefalite
e%Eina) varola) raiva e mais comumente em leptospirose) enfermidades bacterianas) estudos
imunolgicos) c+rie dental) assim como tamb&m s:o utili,adas nas +reas de citogen&tica e
13
imunogen&tica. 2os Cltimos anos sua utili,aA:o tem se baseado na fisiologia da reproduA:o) (+ %ue
o vulo desta esp&cie est+ desprovido da ,ona pelCcida) pode ser fecundado por %ual%uer outra
esp&cie permitindo a reali,aA:o de provas de fertilidade. .:o muito propensos a tumores
cancerosos e oft+lmicos.
Mane.o
Devem ser alo(ados em cai?as de pl+stico transparente. Conv&m lembrar %ue o hamster ri o
pl+stico) a madeira e inclusive metais fracos) de forma %ue at& certo ponto de vida & relativamente
f+cil %ue escapem de cai?as deficientemente construdas ou n:o seguras.
>s hamsters devem se alimentar com uma raA:o comercial de boa %ualidade) a +gua deve
estar fresca e limpa) sendo ambos oferecidos G vontade. Apesar de se recomendar colocar o
alimento nos comedouros das cai?as para evitar a contaminaA:o com e?cretas) no hamster
encontramos uma e?ceA:o (+ %ue seu alimento & colocado no fundo da cai?a em pouca %uantidade
e o animal o utili,ar+ desde muito (ovem ;5F10 dias de idade<. Al&m disso) estes animais s:o
coprfagos.
.e no momento da manipulaA:o o animal se assustar ou for mane(ado sem cuidado ele pode
chegar a morderJ ent:o) para conter ou levantar) & suficiente pegar pela pele do pescoAo ou com
ambas as m:os. 2:o & necess+rio usar luvas %uando se mane(a estes animais) mas se estiver
usando luvas e os animais n:o estiverem habituados com o mane(o & conveniente ter cuidado para
n:o machuc+Flos) pois eles podem associar com as luvas e automaticamente tendem a morder. A
temperatura das m:os acalma e rela?a o animal.
E?ceto durante o cio) %ue ocorre a cada 6 dias) a f@mea ataca os machos podendo chegar a
machuc+Flos.
Para a marcaA:o e identificaA:o do hamster pode se usar a tatuagem) %ue & um m&todo
seguro e permanente) geralmente feita na superfcie interna da orelha) onde ser:o utili,ados
corantes negros ou ro?os na pele despigmentada e brancos ou amarelos %uando a pele for
pigmentada. $amb&m podem ser utili,adas perfuraABes e marcas na orelha) como nos ratos e
camundongos.
Reprodu*-o
Podem ser poligDmicos ou monogDmicos) mas se recomenda um sistema n:o intensivo e
monogDmico (+ %ue a f@mea geralmente & mais agressiva %ue o macho e fre%Eentemente o ataca)
podendo castr+Flo ou) pior ainda) mat+FloJ portanto) dei?aFse o macho 3 dias com a f@mea para
cobrir nos ciclos e assegurar a gestaA:o) cumprindo este tempo se retira o macho. Huando for
acasalar podeFse colocar o macho meia hora antes em uma cai?a limpa para %ue ele reconheAa o
terreno e tenha maior dominDncia sobre a f@mea.
.e?agem: a margem perineal do macho tem uma forma arredondada devido G presenAa do
saco escrotal) en%uanto a f@mea apresenta esta mesma regi:o pontiaguda. >utra distinA:o & G
14
distDncia anogenital %ue se apresenta maior no macho e a e?ist@ncia de uma papila genital
protuberante.
As f@meas gestantes constroem ninhos) especialmente se a temperatura estiver bai?a. Como
as crias nascem muito pouco desenvolvidas e e?igem temperaturas elevadas) as f@meas desde
antes do parto constroem um ninho mais protegido %ue o habitual chamado de ninho maternal.
Entre as f@meas %ue parem pela primeira ve, se registra um alto ndice de canibalismo com
suas crias. Isto & muito comum nesta esp&cie %uando se mane(a a m:e) se destri o ninho) a raA:o
& inade%uada ou as ninhadas s:o e?cessivamente grandes. Para diminuir a incid@ncia de
canibalismo & recomendado mane(ar a m:e e sua ninhada s %uando as crias atingirem 10 dias de
idade) adicionar maAa ou alfafa em sua dietaJ diminuindo em %uase 80X os casos de canibalismo.
Coelho ;Oryctolagus cuniculus<
>rdem Lagomorpha " 'amlia Leporidae
W uma das primeiras esp&cies utili,adas na e?perimentaA:o biolgica. Claude #ernard em
1341 estudou a atividade dos nervos vasomotoresJ Pasteur) [och e colaboradores fi,eram v+rios
e?perimentos em relaA:o G raiva e conseguiram preparar a vacina antiFr+bica) utili,ada pela
primeira ve, em 1334. 'riemann utili,ou f@meas na reali,aA:o de diagnstico de gestaA:o %ue
levou o seu nome.
A American !abbit #redders Association ;A!#A< lista 70 raAas e cerca de 30 variedades de
Oryctolagus cuniculus. As raAas variam em tamanho) coloraA:o de p@lo) assim como as %ue t@m
sido selecionadas para a produA:o de p@lo) carne ou fins laboratoriais. As principais diferenAas se
referem ao tamanho) %ue vai desde o gigante de 'landes ;mais de 4 Vg< ao minCsculo da =olanda.
> mais popular & o 2ova ZelDndia.
W importante salientar %ue o coelho n:o & um roedor) mas um lagomorfo) pela presenAa de
%uatro incisivos superiores e n:o dois como nos roedores. Este conhecimento & importante) pois &
determinado por lei %ue os e?perimentos dever:o ser repetidos) antes de serem aplicados ao
homem em tr@s animais mamferos) um dos %uais n:o roedor. PodeFse) ent:o) usar o coelho para
atender essa e?ig@ncia.
> uso dos coelhos nos laboratrios & para diagnstico de enfermidades infecciosasJ na
imunologia tem papel muito relevante graAas a sua capacidade de produ,ir ttulos elevados de
anticorposJ recorreFse ao seu soro no diagnstico e provas de soroneutrali,aA:o. A prova de
pirog@nio & um dos usos mais comuns em laboratrios farmac@uticos %ue produ,em medicamentos
parenterais. > pes%uisador em ci@ncias biom&dicas o prefere como modelo e?perimental pelas
15
seguintes caractersticas %uando comparados com outras esp&cies produtoras de soro: espaAo
redu,ido de alo(amento) comparando) docilidade) f+cil reproduA:o) bai?o consumo de alimentos)
bai?o risco de ,oonoses) vias acessveis de inoculaA:o) produA:o elevada de anticorpos em
%uantidade e %ualidade.
Mane.o
> aAo ino?id+vel & o material mais resistente e higi@nico para o alo(amento dos animais de
e?perimentaA:o. As gaiolas ou cai?as utili,adas para alo(ar os coelhos devem ser fortes) f+ceis de
limpar) situadas em locais onde os animais este(am protegidos de variaABes e?tremas e bruscas de
temperatura) f+ceis de transportar) providos de comedouros e bebedouros. >s animais com mais
de tr@s meses devem estar alo(ados individualmente para evitar agressBes) pseudogestaABes e
gestaA:o n:o programada. > espaAo necess+rio para cada animal & determinado de acordo com
seu peso. Al&m disso) deveFse proporcionar um alo(amento confort+vel) as gaiolas ou cai?as
devem ser lavadas) desinfetadas e se possvel esterili,ada por m&todos fsicos ou %umicos.
> coelho & um animal monog+strico e herbvoro. >s re%uerimentos de energia s:o estimados
em /.400 [cal de energia digestvel por Vg de dieta para crescimento) gestaA:o e lactaA:o) e /.100
[cal para manutenA:o. Deve se oferecer +gua e raA:o G vontade a n:o ser %ue e?ista caso de
obesidade) onde se recomenda oferecer raA:o uma ve, ao dia. E a %uantidade de alimento vai
variar com o tamanho do animal ;4g de alimentoS100g de peso vivo<) sendo a e?ig@ncia de coelhas
em lactaA:o & /F7 ve,es maior.
Para transportar um coelho em um curto tra(eto & suficiente peg+Flos pela pele do pescoAo e
apoi+Flo com a outra m:o pelos membros traseirosJ para tra(etos mais longos deveFse coloc+Flo
sobre o antebraAo com a cabeAa do animal dirigida para seu cotovelo ;'igura 5<. .e forem
mane(ados de forma inade%uada) estes animais relutam e podem sofrer uma fratura de coluna ou
mesmo machucar %uem o est+ manipulando. Conv&m lembrar %ue as orelhas do coelho s:o
fr+geis e sensveis) ent:o n:o se deve segur+Flas para levantar ou conter os animais.
16
'igura 5
'igura 3
>s coelhos %uando alcanAam a puberdade se tornam agressivos com outros de sua esp&cie)
de tal forma %ue se machos forem alo(ados (untos podem agredir gravemente uns aos outros. E
17
f@meas em agrupamento homosse?ual podem produ,ir pseudogestaA:o. Ent:o) a partir dos tr@s
meses de idade & aconselh+vel %ue se(am alo(ados em gaiolas individuais.
> m&todo mais utili,ado para inoculaA:o & atrav&s de inoculaA:o auricular ;'igura 3<. E o
m&todo de identificaA:o mais utili,ado nesses animais & a tatuagem) %ue & feita com uma pinAa
%ue possui nCmeros e letras removveis em sua pontaJ ao fa,er press:o da pinAa sobre a orelha) a
tinta se introdu,ir+ nas pe%uenas feridas.
Reprodu*-o
E?istem basicamente tr@s sistemas de cru,amento:
2atural: uma ve, %ue se diagnostica na f@mea sinais de receptividade) esta & levada G gaiola
do macho) o corte(o & breve e & seguido da monta) a f@mea ir+ levantar o trem posterior e desvia a
cauda) facilitando assim a cpula. > macho em algumas ocasiBes morde o dorso e a cabeAa da
f@mea) posteriormente reali,a movimentos copulatrios %ue podem ser de 3 a 1/) com intromiss:o
e e(aculado) o ato geralmente & breve.
'orAado: em ocasiBes em %ue a f@mea resiste G monta) o encarregado ter+ %ue sustent+Fla na
nuca e levantar o trem posterior com a m:o apontando para o ventre do animal) e desta forma se
e?pBe a vulva ao macho e facilita a monta.
InseminaA:o artificial: consiste na obtenA:o do s@mem dos melhores machos. DiluiFse para se
obter v+rias doses %ue s:o inoculadas nas f@meas por via vulvar) n:o sem indu,ir antes a ovulaA:o
por meios hormonais ou fsicos.
.e?agem: ao nascimento) a Cnica forma de se fa,er uma diferenciaA:o se?ual & por meio da
distDncia anogenital) %ue no macho & maior %ue na f@mea ;'igura 8<. Ao desmame ;70F64 dias< a
diferenciaA:o & muito notria e se reali,a pelas diferenAas dos genitais) %ue no macho apresenta
uma forma cilndrica e na f@mea tem forma de espiga. 2a maturidade se?ual se fa, evidente a
diferenciaA:o por simples observaA:o dos testculos) p@nis e prepCcio no macho) e as f@meas
apresentam uma vulva perfeitamente formada.

'igura 8
;AFDnusJ PFp@nisJ .Fsaco escrotalJ -FuretraJ LFvagina<.
18
Durante a Cltima semana de gestaA:o de colocarFse no interior da gaiola da f@mea uma cai?a
com um pouco de palha) %ue servir+ de base para %ue a f@mea deposite seu prprio p@lo para
formar o ninho.
> canibalismo & relativamente raro no coelho. Mas o abandono de crias & bastante fre%Eente)
sendo as causas determinantes: ninhos defeituosos) l+paros ;filhotes< %ue abandonam o ninho)
f@mea %ue apresenta agala?ia ou mastite ou %uando & maltratada pelos criadores.
II - Di)eren*as biolgicas
Caractersticas Anatomofisiolgicas
F Em rec&m nascidos: 191;31F/61<. Y !aAas de grande porte) \ !aAas de m&dio porte.
/amundongo Rato /obaia +amster /oelho
Peso ao nascer ;gr< 1F/ 4F9 50F100 / 70F130
Incio da alimentaA:o slida
;dias<
1/F17 1/ 6F4 5F8 6F19
Desmame ;dias< Aps o /1T /1 16F/1 /0F/4 6/F99
Peso ao desmame ;gr< 10F1/ 70F40 130F/60 70F60
300F
1400
$amanho do adulto ;cm< 1/F14 60F66 F F F
Peso da f@mea adulta ;gr< /4F80 /40F600 500F800 84F140
9)6F5)7
Vg Y
1)3F9)6
Vg \
Peso do macho adulto ;gr< /0F60 700F300 800F1/00 34F170
Longevidade ;anos< /F7 7F6 6F4 1)4F/ 4F9
#atimentos cardacosSmin 900;7/3F570< 73/;/91F900<] /30;/90F600< 640;700F900<
/04;1/7
F706<
're%E@ncia respiratria 197;36F/70< 86;54F114< 80;98F106< 56;77F1/5<
41;71F
90<
$emperatura corprea ;^C< 74)4;74)/F75)8< 74)8F75)4 75)/F78)4 75F73
73)4F
60)0
19
Caractersticas !eprodutivas
_ Com 90 " 30X de prenhe,.
Caractersticas Ambientais e 2utricionais
2:o costuma ser controlado
I@I2ARA0IA
/amundongo Rato /obaia +amster /oelho
Incio da vida
reprodutiva na `
40F90 dias 94F110 dias 7F4 meses 9F10 6F8 meses
Incio da vida
reprodutiva no a
40 dias 94F110 dias 7F6 meses 10F16 9F10 meses
DuraA:o do ciclo estral
;dias<
6F4 6F4 1/F13 6 Irregular
DuraA:o da
receptividade se?ual
10F1/ h 10F/0 h 9F16 dias 9F/0 h Lari+vel
$empo de gestaA:o
;dias<
18F/1 /1F/7 48F5/ 14F19 /8F74
Cio psFparto '&rtil '&rtil '&rtil_ Inf&rtil Ausente
2Cmero de filhotes por
ninhada
9F1/ 9F1/ 1F9 4F8 6F10
Lida Ctil reprodutiva 5F3 meses 740F660 dias
a 4 anos ou b
` 6F4 anos
10F1/ meses 1F7 anos
/amundongo Rato /obaia +amster /oelho
$emperatura ambiente /0F/4^C /0F/6^C /0F/4^C /1^C /0F/4^C
-midade relativa 60F90X 60F90X 64F44X 64F44X 40X _
Lu, 1/F16 hSdia 1/ hSdia 10F1/ hSdia 10F1/ hFdia 16 hSdia
Consumo di+rio de +gua
/)4F7 ?
%uantidade de
alimento seco
ingerido
c / mlS gr de
raA:o
d vontade d vontade d vontade
Consumo di+rio de
alimento
6F4 gSdia /0F70 gSdia 74 gSdia
` 10F14g
a 3F1/g
` 154F1000g
a 110F154g
20
1F Andrade) Antenor ;org<. Animais de Laboratrio) /00/.
/F C>MI..e> DE E2.I2> C>#EA. Manual para tcnicos em bioterismo) 7:18F/4) 1880.
7F .ite do Col&gio #rasileiro de E?perimentaA:o Animal: PPP.cobea.org.br
6F .ite da 'undaA:o >sPaldo Cru,: PPP.fiocru,.br
4F .ite da -niversidade 'ederal do !io *rande do .ul: PPP.ufrgs.br
9F .ite do Conselho 'ederal de Leterin+ria PPP.cfmv.org.br
5F .ite da -niversidade do Estado de .:o Paulo: PPP.usp.br
21