Cadernos da Escola de Sade, Curitiba, 03: 1-2, 2009 ISSN 1984 - 7041 Biografia *DIAGNSTICO LABORATORIAL DA LEISHMANIOSE VISCERAL AMERICANA Costa, JF (IC)** Mordaski, RYM (IC)** Souza, JCM (IC)** Pereira-Ferrari, L (PQ)** Passoni, CRM (PQ)** Freitas, KC (PQ)** *Este trabalho foi premiado em 1 Lugar como a Melhor Apresentao Painel. **Faculdades Integradas do Brasil (UNIBRASIL), Curitiba-PR/Brasil e-mail: biomedicina@ unibrasil.com.br INTRODUO A Leishmaniose Visceral uma doena crnica grave causada por espcies do gnero Leishmania pertencentes ao complexo Leishmania (Leishmania) donovani. No Brasil, o agente etiolgico a Leishmania chagasi transmitida pelo ebotomnio Lutzomyia longipalpis. O diagnstico laboratorial para L. chagasi baseia-se principalmente em exames imunolgicos RIFI, ELISA e DAT e parasitolgicos como o isolamento em meios de cultura (in vitro) alm de novos mtodos de carter molecular como a PCR. DESENVOLVIMENTO Os diagnsticos imunolgicos tm como base a reao antgeno-anticorpo onde formas promastigotas de L. donovani so utilizadas como antgenos na deteco de anticorpos anti-leishmania chagasi. O mais empregado o Imunouorescncia Indireta (RIFI) que consiste na reao inicial de soros com parasitos xados em lmina de microscopia para uorescncia. No ensaio imunoenzimtico (ELISA), os antgenos de Leishmania so adsorvidos em microplacas e assim que adicionado o soro forma-se o imunocomplexo. A visualizao ocorre na presena de uma anti-imunoglobulina marcada, gerando um produto 2 Cadernos da Escola de Sade Cadernos da Escola de Sade, Curitiba, 03: 1-2, 2009 ISSN 1984 - 7041 Diagnstico Laboratorial da Leishmaniose Visceral Americana colorido. O mtodo de aglutinao direta (DAT) incide na reao de aglutinao dos anticorpos do soro do paciente com os antgenos de Leishmania possibilitando a leitura direta. Outra tcnica que tambm utilizada a parasitolgica de isolamento em meios de cultura onde formas amastigotas, inoculadas em meios de cultura contendo gar e sangue, transformam-se em formas promastigotas que so observadas em microscopia ptica comum ou invertida. Mtodos moleculares de hibridizao com sondas especcas e amplicao de cidos nuclicos, incluindo a Reao em Cadeia da Polimerase (PCR) para deteco de DNA, esto disponveis para identicao do parasito. CONCLUSO O mtodo de diagnstico determinado assim que o paciente apresentar febre e esplenomegalia associada ou no hepatomegalia. O parasitolgico o diagnstico de certeza e apresenta especicidade de 90-100% para demonstrao do parasito. Os diagnsticos imunolgicos podem apresentar reatividade cruzada com Trypanosoma sp, quando o paciente apresenta cura clnica ou possui Leishmaniose Tegumentar. J o mtodo de anlise por PCR mostra-se um mtodo simples, especco e com 94% de sensibilidade. A PCR primer especca tambm tem sido um mtodo ecaz para detectar infeco natural de ebotomneos contaminados com L. chagasi, avaliando assim o risco que determinada populao est exposta.