UNIVERSIDADE ESTADUAL DO CENTRO-OESTE, UNICENTRO - PR

EFEITO DO THIOBACILLUS THIOOXIDANS NA

CORROSO DO AO 430
DISSERTAO DE MESTRADO





PRISCILA APARECIDA ANUNZIATO





GUARAPUAVA-PR
2008



























Catalogao na Publicao
Biblioteca Central da UNICENTRO, Campus Guarapuava

Anunziato, Priscila Aparecida
A636 Efeito do Thiobacillus Thiooxidans na corroso do ao 430./ Priscila Aparecida
Anunziato. Guarapuava, 2008
ix, 73 f. : il. ; 28 cm

Dissertao (mestrado) - Universidade Estadual do Centro-Oeste, Programa de
Ps-Graduao em Qumica Aplicada, 2008
Orientador: Paulo Rogrio Pinto Rodrigues
Co-orientadora:Cynthia Furstenberger
Banca examinadora: Isolda Costa, Fauze Jac Anaissi, Paulo Rogrio Pinto
Rodrigues
Bibliografia

1. Corroso microbiolgica. 2. Ao inoxidvel 430. 3. Thiobacillus
Thiooxidans. I. Ttulo. II.Programa de Ps-Graduao em Qumica Aplicada .

CDD 542





PRISCILA APARECIDA ANUNZIATO







EFEITO DO THIOBACILLUS THIOOXIDANS NA CORROSO DO AO 430



Dissertao apresentada Universidade
Estadual do Centro-Oeste, como parte das
exigncias do Programa de Ps-Graduao em
Qumica Aplicada, para a obteno do ttulo de
Mestre.




Prof. Dr. Paulo Rogrio Pinto Rodrigues
Orientador
Cynthia Furstenberger
Co - orientadora

GUARAPUAVA-PR
2008

























PRISCILA APARECIDA ANUNZIATO
EFEITO DO THIOBACILLUS THIOOXIDANS NA CORROSO DO AO 430
Aprovada em 15 de dezembro de 2008.
ProF. ora. Isolda Costa - IPEN/CNEN
- UNICENTRO

Prof. Dr. Paulo Rogrio Pinto Rodrigues
Orientador
Dissertao apresenta9a Universidade Estadual do
Centro Oeste, como parte das exigncias do Programa de
Ps Graduao em Qumica, rea de concentrao em
Qumica Aplicada para obteno de ttulo de Mestre.
GUARAPUAVA-PR
2008



















A humildade nos ajuda a reconhecer esta
coisa bvia: ningum sabe tudo; ningum ignora
tudo. Todos sabemos algo; todos ignoramos algo.
Sem humildade dificilmente ouviremos com
respeito a quem consideramos demasiadamente
longe de nosso nvel de competncia.
Paulo Freire

AGRADECIMENTOS
Vitoriosa com a luz e sabedoria que me deste, agradeo a Deus por confiar em mim.
Nos momentos de certeza ou dvida, pude sentir Tua mo na minha a me guiar.

A meu querido orientador professor Dr Paulo Rogrio Pinto Rodrigues, que com suas
palavras me fez refletir e buscar um ideal. As alegrias de hoje tambm so suas, pois seu
carinho, estmulo, confiana e compreenso so a alma desta vitria. Voc foi Professor, meu
mestre, mas acima de tudo, foi meu amigo, meu guia, meu anjo da guarda.

Agradeo a minha querida me Isabel. me, quantas e quantas vezes, motivada por
minha fragilidade tive inteno de parar e desistir. Mas, amparada por voc, conclumos, hoje,
mais uma etapa de nossas vidas. Voc foi presena em solido, sua companhia, seu sorriso,
suas palavras, foram expresses de amor profundo. Se a senhora se orgulha de ser minha me,
eu me orgulho muito mais de ser sua filha.

A voc Pai (in memorian)...Agora me lembro de voc, e tenho certeza de que voc
est compartilhando a felicidade da minha vitria. Posso sentir voc me abraando. Voc
estar sempre comigo. Mesmo que tenhamos sido privados dos beijos, olhares, abraos,
carinho, o amor subsiste!

Agradeo tambm a meu companheiro Eduardo por todas aquelas vezes que me ouviu
e me deu apoio. Nos mritos de minhas conquistas, h muito de sua presena.

Agradeo minha irm Fabiola, meu cunhado Vilson que estiveram comigo nos
momentos mais difceis desta caminhada, que sofreram a minha ausncia quando o dever e o
estudo me chamaram, que compreenderam as minhas falta de tempo, minha tenso durante
as provas, meu nervosismo. O meu sorriso e o meu obrigada! Na validade dessa luta, nos
mritos desta conquista, h muita presena de vocs.

A meu querido sobrinho Mateus que sendo apenas uma criana ficava quietinho do
meu lado falando que estava olhando a Dada ( assim que ele me chama) estudar.

A professora Doutora Isolda Costa pelas anlises por MEV.

No posso deixar de agradecer tambm a minha co-orientadora Professora Dra
Cynthia, as minhas colegas Rebeca e Martha que doaram um pouco do seu tempo a me dar
ateno e ajudar quando precisei. Juntos nos completamos e trabalhamos melhor. Que fique
aqui registrada minha carinhosa gratido.

SUMRIO

Lista de Smbolos e Abreviaturas .................................................................................. I
Resumo ............................................................................................................................. II
Abstract ............................................................................................................................ III

1. Introduo .................................................................................................................... 1

2. Objetivos ....................................................................................................................... 4
2.1. Objetivo Geral ............................................................................................................ 4
2.2.Objetivos Especficos .................................................................................................. 4

3. Referencial Terico ..................................................................................................... 5
3.1. Materiais Ferrosos ...................................................................................................... 5
3.2. Corroso ..................................................................................................................... 7
3.3. Corroso Microbiolgica ............................................................................................ 9
3.4. Microorganismos ........................................................................................................ 16
3.5. Estruturas das Bactrias............................................................................................... 19
3.5.1. Tipos Nutritivos das Bactrias ................................................................................. 27
3.5.2. Meios Bacteriolgicos ............................................................................................. 28
3.5.3.Condies Fsicas Necessrias ao Crescimento ....................................................... 30
3.5.4. Principais Grupos de Bactrias ................................................................................ 32
3.5.5. Bactrias Patognicas .............................................................................................. 33

4. Materiais e Mtodos .................................................................................................... 36
4.1. Solues Empregadas ................................................................................................. 36
4.2. Eletrodos ..................................................................................................................... 36
4.3. Clulas de Trabalho .................................................................................................... 36
4.4. Equipamentos ............................................................................................................. 37
4.5. Temperaturas de Trabalho .......................................................................................... 37
4.6. Procedimento Experimental ....................................................................................... 37
4.6.1. Preparao dos Eletrodos de Trabalho .................................................................... 37

4.6.2. Anlise Gravimtrica ............................................................................................... 38
4.6.3. Potencial de Circuito Aberto (Eca) .......................................................................... 38
4.6.4. Polarizao Potenciosttica Andica ....................................................................... 38
4.6.5. Espectroscopia de Impedncia Eletroqumica (EIE) ............................................... 38
4.6.6. Anlise ptica ......................................................................................................... 43
4.6.7. Microscopia Eletrnica de Varredura (MEV) ......................................................... 43
4.6.8. Caracterizao do microorganismo ......................................................................... 43

5. Resultados e Discusso ................................................................................................ 45
5.1. Anlise qumica do ao inoxidvel ferrtico tipo ABNT 430 ..................................... 45
5.2. Ensaios de identificao microbiolgica .................................................................... 45
5.3. Ensaios gravimtricos e de microscopia ptica .......................................................... 47
5.4. Ensaios Eletroqumicos .............................................................................................. 54
5.5. Ensaios de microscopia eletrnica de varredura ........................................................ 60

6. Concluses .................................................................................................................... 67

7. Anexos I ........................................................................................................................ 68

8. Referncias Bibliogrficas .......................................................................................... 69


I
LISTA DE SMBOLOS E ABREVIATURAS


a.a. aminocidos
ABNT Associao Brasileira de Normas Tcnicas
BRS Bactrias Redutoras de sulfato
Cr Cromo
E.C. Meio de cultura
Eca Potencial de circuito aberto
E
corr
Potencial de corroso
EDAX Anlise de Energia Dispersiva de Raios-X
EIE Espectroscopia de Impedncia Eletroqumica
Fe Ferro
H
2
S Gs sulfidrco
j
corr
Densidade de corrente de corroso
J
ox
Corrente de oxidao
J
red
Corrente de reduo
m Microorganismo
MEV Microscpio eletrnico de varredura
MnS Sulfeto de Mangans
PAC Polarizao andica cclica
pH Potencial hidrogeninico
SRB
TT
PA
PC
MEV
EIE
Bactrias redutoras de sulfato
Thiobacillus Thiooxidans
Andica potenciosttica
Potenciodinmica cclica
Microscopia ptica e eletrnica de varredura
Espectroscopia de impedncia eletroqumica


II
RESUMO

Autores: Priscila Aparecida Anunziato e Paulo Rogrio Pinto Rodrigues
Ttulo da dissertao: Estudo do Comportamento eletroqumico de microorganismos na
oxidao do ao 430

de conhecimento que metais imersos em sistemas aquosos so facilmente
colonizados por microorganismos. Como conseqncia desta colonizao, a superfcie
metlica se torna coberta por um biofilme. Estes Biofilmes microbianos so muito complexos
devido as suas diferentes populaes microbianas. Normalmente so em forma polimricas
separados por canais e espaos vazios, que se desenvolvem em praticamente todas a
superfcie metlica. Os acidentes mais graves ocorrem na biocorroso de ambientes
anaerbios, como em solos e com espessos biofilmes. A corroso microbiolgica um dos
grandes problemas industriais da atualidade, dada a variedade de ambientes que podem
apresentar colnias de bactrias, muitos so os equipamentos que podem sofrer esse tipo de
corroso. As indstrias petrolferas e de lcool so as que mais sofrem com este tipo de
oxidao. Existem poucos trabalhos na literatura que utilizam a bioeletroqumica como
monitoramento ou ao protetora da superfcie metlica.O objetivo deste trabalho estudar a
influncia da Thiobacillus Thiooxidans (TT) na corroso do ao inoxidvel 430 em H
2
SO
4

1mol L
-1
. Neste trabalho foram empregadas as tcnicas de: medidas gravimtricas,
polarizao andica potenciosttica (PA) e potenciodinmica cclica (PC), espectroscopia de
impedncia eletroqumica (EIE), microscopia ptica e eletrnica de varredura (MEV). Os
resultados gravimtricos mostraram que em 180 minutos de imerso do ao no meio contendo
TT h a formao de biofilme, o qual inicialmente bloqueia a corroso do metal. A PA
mostrou que o TT atua catalisando a reao de oxidao do ao 430 neste meio. Resultados
semelhantes foram obtidos pela EIE. A aplicao da PC na regio passiva do ao 430, neste
meio, causa a inibio da gerao de biofilmes em sua superfcie, resultado este comprovado
pela MEV.

Palavras-Chave: corroso microbiolgica, ao inoxidvel 430, Thiobacillus Thiooxidans.
III
ABSTRACT

Author`s: Priscila Aparecida Anunziato and Paulo Rogrio Pinto Rodrigues
Title: Study of electrochemical behavior of microorganisms in the oxidation of steel 430



It is known that metals immersed in aqueous systems are easily colonized by microorganisms.
As a result of colonization of microorganisms in metal, the metal surface becomes covered
with a biofilm. These microbial Biofilms are very complex due to their different microbial
populations, usually in the form polymer separated by canals and empty spaces, which
develop in virtually all the metal surface. The most serious accidents occur in biocorrosion of
anaerobic environments, as in soil and thick with biofilms. The microbiological corrosion is a
big problem of today , given the variety of environments that may have colonies of bacteria,
many equipment that can suffer this type of corrosion. The oil and alcohol industries are the
biggest sufferers with this type of oxidation. The objective of this work is the influence of
Thiobacillus Thiooxidans (TT) in the corrosion of 430 stainless steel (SS) in H
2
SO
4
1 mol L
-1
.
In this study of the techniques were employed: measures of mass loss, cyclic potentiodynamic
polarization (CPP) and potentiostatic anodic polarization (PAP), electrochemical impedance
spectroscopy (EIS), optical (OM) and scanning electron microscopy (SEM). The results
showed that gravity in 180 minutes of immersion of steel in the solution containing TT there
is the formation of biofilms, which initially blocks the corrosion of the metal. The PAP has
shown that the TT works catalysing the reaction of oxidation of 430 SS in this solution,
similar results were obtained by the EIS. The implementation of the CPP in the region passive
steel 430, in this solution, inhibit the generation of biofilms on the surface, which was
confirmed by SEM.




Keywords: Microbiological corrosion , 430 Stainless Steel, Thiobacillus Thiooxidans.


1

1. INTRODUO

A adio de elementos de liga (ex. carbono e cromo) ao ferro, pode gerar algumas
ligas ferrosas como [1]:

Aos : Ligas de ferro - carbono, com teor de carbono inferior a 2,1%;

Ferros Fundidos : Ligas de ferro - carbono com teor de carbono superior a 2,1 %;

Aos inoxidveis : Adio de no mnimo 10 % de Cr, com ou sem adio de outros
elementos.

De acordo com esta classificao, os aos inoxidveis so ligas de ferro (Fe) e cromo
(Cr) com um mnimo de 10 % de Cr e a adio de outros elementos, os quais permitem a
obteno de uma extensa classificao do tipo de ao inoxidvel (ex.: sries 300, 400, duplex,
etc) e conseqentemente diferentes aplicaes [1-2].
Os aos inoxidveis tambm so caracterizados por uma elevada resistncia
corroso, mas dependendo do ambiente ao qual estaro sujeitos, podero corroer. Assim
apesar de serem classificados como inoxidvel, esta classificao pode-se tornar irreal para
este tipo de ao [3].
A classificao dos aos inoxidveis divida em dois grandes grupos: 400, 300. A
srie 300 engloba os aos inoxidveis austenticos, no magnticos e com estrutura cbica de
face centrada, so basicamente ligas Fe, Cr e Ni. A srie 400 a dos aos inoxidveis
ferrticos, aos magnticos com estrutura cbica de corpo centrado, basicamente ligas de Fe e
Cr, esta srie pode ser dividida em: ferrticos e martensticos [3].
O ao utilizado nesse trabalho foi o ao inoxidvel ferrtico 430. Este possui
quantidade superior a 16% de cromo. um material com tima resistncia corroso e uma
boa capacidade de estampagem, utilizado na fabricao de talheres, pias, foges etc [4].
Nota-se que a corroso um importante tpico cientifico e tecnolgico de estudo dos
aos inoxidveis, principalmente quando esta corroso provocada por microorganismos [5].
Os microorganismos induzem, aceleram ou mantm a reao de corroso, em uma
interface metal/soluo, biologicamente condicionada pelos biofilmes [6]. Os mecanismos
associados corroso microbiologicamente induzida se devem presena fsica das clulas


2

microbianas na superfcie do metal ou pelas suas prprias atividades metablicas [7-13]. A
corroso microbiolgica pode ocasionar uma passivao do metal base, causando uma
minimizao da velocidade de corroso (corroso uniforme) ou mesmo ocasionar uma
espcie de corroso localizada (alveolar ou pite), seja por gerao de uma oxidao mais
intensa na parte inferior dos biofilmes devido gerao de meios cidos ou mesmo por
aerao diferencial [14].
Uma das alternativas utilizar a biotecnologia para solucionar os problemas causados
por microorganismos, como os que possuem a capacidade de formar biofilmes. Os
microrganismos apresentam uma imensa diversidade e desempenham funes nicas e
cruciais na manuteno de ecossistemas, como componentes fundamentais de cadeias
alimentares e ciclos biogeoqumicos [15-16]. Apesar de sua grande importncia na
manuteno da biosfera, estima-se que menos de 10% dos micro-organismos existentes no
planeta tenham sido caracterizados e descritos [17].
Na dcada de 90, verificou-se que as bactrias em biofilme so metablica e
morfologicamente diferentes das bactrias em suspenso e das isoladas em culturas puras,
alm de possurem maior resistncia a antibiticos e desinfetantes, tambm chamados de
biocidas. Estima-se que mais de 90% dos microrganismos vivem sob a forma de biofilmes e
praticamente no existe nenhuma superfcie que no possa ser ou vir a ser colonizada por
bactrias [18-20]. A composio dos biofilmes dependente das condies do meio, tais
como a temperatura, minerais dissolvidos, presso, pH e oxignio dissolvido e no
necessariamente uniforme, podendo at englobar partculas slidas (argilas, areias, partculas
orgnicas) provenientes do meio aquoso onde est imerso [19-21].
Em meios industriais, a formao de biofilmes pode levar a um processo de corroso
das ligas metlicas e polmeros e conseqentemente, obstruo de tubulaes e
contaminao dos produtos finais [22].
O gnero Acidithiobacillus sp composto por bactrias Gram negativas em forma de
bastonete (~0,5 x 1,0-4,0m) com algumas espcies mveis por meio de flagelos polares. No
possuem formas de resistncia conhecidas, so capazes de obter energia atravs da catlise
oxidativa de compostos sulfurados, utilizando o oxignio como o ltimo aceptor eletrnico.
As bactrias do Gnero Acidithiobacillus so aerbias, com crescimento timo em meio com
pH cido. Estas espcies so encontradas em diversos ambientes, como locais de minerao,
rios com elevada carga de dejetos orgnicos, reas de tratamento de esgoto e esturios, alm


3

de estruturas da construo civil, provocando danos mesma. A biodeteriorao da qualidade
da gua, gerao de cido sulfrico e a precipitao de xidos de ferro so problemas srios
associados a estes microrganismos.
O enxofre elementar um substrato essencial para as espcies Acidithiobacillus sp
que permite a gerao de cido sulfrico [23-24]. Nos aos inoxidveis, a presena de MnS
pode permitir a alimentao deste microorganismo, levando gerao de H
2
S que com a gua
produz o cido sulfrico. Este processo reduz o pH das superfcies metlicas permitindo a
nucleao do biofilme. O Thiobacillus Thiooxidans so acidofilicos e crescem em pH 2 3. O
cido sulfrico produzido por este microorganismo agressivo e ataca a superfcie metlica
[23-25].
Neste trabalho ir observar que o Thiobacillus Thiooxidans alm do pH 2 e 3 crescem
tambm em pH = 0.
Na literatura so encontradas diversas propostas de criao de barreiras para se evitar a
gerao deste tipo de biofilmes. Barreiras estas entre o meio e o metal, so uma das solues
mais comum encontrada pela indstria de transporte e saneamento de guas residuais contra a
corroso microbiolgica [26-28]. A pulverizao com hidrxido de magnsio, tambm foi
relatada com o intuito de se aumentar o pH da superfcie [29]. Mais recentemente, o uso de
biocidas tem sido investigado [30-31]. Entretanto deve-se ressaltar que o uso de biocidas
ecologicamente errado devido contaminao do meio ambiente por espcies organocloradas
ou fosforadas.
O objetivo deste trabalho estudar o tido de corroso microbiolgica provocada pelo
Thiobacillus Thiooxidans no ao inoxidvel 430 em H
2
SO
4
1 mol L
-1
.










4

2 - OBJETIVOS


2.1 Objetivo Geral

Estudar a corroso microbiolgica provocada pelo Thiobacillus Thiooxidans no ao
inoxidvel 430 em H
2
SO
4
1 mol L
-1
.


2.1 Objetivos Especficos


(1) Caracterizar e classificar o tipo de corroso microbiolgica que o Thiobacillus
Thiooxidans provoca no ao 430 em meio de cido sulfrico 1 mol L
-1
;

(2) Aplicar a polarizao cclica na tentativa de inibio do crescimento dos
biofilmes de Thiobacillus Thiooxidans na superfcie do ao 430 em meio de
H
2
SO
4
1 mol L
-1
.













5

3. REFERENCIAL TERICO

Esta reviso bibliogrfica ser minuciosa quanto ao aspecto dos microorganismos e
minoritria quanto aos materiais ferrosos e os tipos de corroso. Por se tratar da primeira
dissertao em bioeletroqumica do grupo GPEL-UNICENTRO a inteno de que a mesma
sirva de referencial para os futuros alunos de iniciao cientifica, mestrandos ou doutorandos.

3.1 MATERIAIS FERROSOS

Os materiais ferrosos compreendem o ferro e suas ligas. Constituem cerca de 95% da
produo mundial de metais.
Originalmente o ao foi obtido com a fundio do ferro, elemento qumico abundante
na natureza, que em alta temperatura se ligou ao carbono, originando o ao carbono ou ferro
fundido.
O ao inoxidvel originou-se por volta de 1912, atravs da adio de no mnimo 11%
de cromo ao ao carbono, mas sua utilizao na indstria s se intensificou na dcada de 50.
Esta liga resultou em um ao de extremo brilho e beleza com a caracterstica particular que
deu origem a sua designao [1].
Uma camada passiva impermeabiliza a ao impedindo o contato do ferro com o
oxignio do ar, vide figura 3.1. Aparentemente, nos aos inoxidveis, o filme passivo forma-
se pela reao entre a gua e o metal base, constituindo-se assim por um filme de
oxihidrxido dos metais Cr e Fe. O filme passivo dos aos inoxidveis muito fino e
aderente. Os filmes formados em meios oxidantes, como o caso do cido ntrico usado em
banhos de decapagens, so os mais resistentes.


6


Figura 3.1 Diagrama representativo do efeito do aumento da concentrao de oxidante
[oxid.] na velocidade de corroso dos aos inoxidveis.

De acordo com Associao Brasileira de Normas Tcnicas, ABNT, existem diferentes
classificaes para os aos inoxidveis, tais como: austenticos, ferrticos, martensticos,
duplex, especiais, etc [1-4, 32].
Os aos inoxidveis de srie 300 so os aos inoxidveis austenticos, aos no
magnticos com estrutura cbica de face centrada e basicamente ligas de Fe Cr - Ni. A srie
400 a dos aos inoxidveis ferrticos, aos magnticos com estrutura cbica de corpo
centrado e basicamente ligas de Fe-Cr.
Neste trabalho ser empregado o ao inoxidvel da srie 400, especificamente o ao
inoxidvel ferrticos 430, desta forma dar-se- uma pequena introduo sobre estes tipos de
liga metlica.
O ao ferrtico 430 um dos mais conhecidos, possui uma quantidade superior a 16%
de cromo, a qual lhe confere uma tima resistncia corroso e uma boa capacidade de
estampagem, por exemplo, na fabricao de talheres, baixelas, pias, foges, moedas, etc.
A maior limitao para a utilizao do ao 430 a soldabilidade do mesmo. Ressalta-
se que o ao 430 tem excelente propriedade para estampagem, o que o leva a ser utilizado em
dutos das indstrias petrolferas. Alm de se verificar pela figura 3.2, que o ao 430 a liga
base de criao da srie 410 S, muito utilizada em colunas de destilao. Estes fatores levaram


7

a escolha desta liga neste trabalho nos estudos de corroso microbiolgica, uma das mais
prejudiciais a este tipo de indstria [2].

Figura 3.2 - Tipos de aos inoxidveis ferrticos da srie 400 [2].

3.2 CORROSO

A corroso metlica a oxidao do material metlico, causada pela interao qumica
ou eletroqumica a um determinado meio corrosivo (condutor), processo termodinamicamente
espontneo ( G < 0). Pode-se classificar a corroso em dois tipos especficos:
(1) Corroso generalizada ou uniforme o metal em presena de meio oxidante, se
oxida com perda de espessura uniforme, podendo possuir nos primeiros instantes uma
velocidade de corroso menor ou maior e depois de um certo tempo passar a ter uma
velocidade de oxidao constante. Na figura 3.3 (a) e (b) so mostradas apenas duas
esquematizaes deste comportamento de corroso uniforme [1-6, 33-36].
(2) Corroso localizada - como a designao sugere, ocorre em determinados pontos
da superfcie metlica e to mais provvel quanto maior a heterogeneidade da liga. Diversos
tipos de corroso localizada so abordados na literatura, entretanto para este trabalho ser


8

abordado dois tipos clssicos, por Pite e Frestas [1, 14, 37]. Nas figuras 3.3 (c) e (d) so
mostradas dois possveis comportamentos da variao na medida da velocidade corroso
dentre os diversos existentes, quando a mesma ocorre de forma localizada.


Figura 3.3 Esquematizao de quatro possveis medidas de velocidade de corroso de um
material metlico exposto a meio oxidativo, sendo:
(A) Velocidade inicial menor e (B) velocidade inicial maior, quando comparadas velocidade
de estabilizao devido corroso uniforme (generalizada).
(C) Velocidade inicial menor e (D) velocidade inicial maior, quando comparadas
velocidade de pseudo-estabilizao devido corroso localizada.




9

Corroso por Pite

O pite uma forma localizada de corroso que pode ocorrer como resultado da
exposio do metal base em ambientes especficos, por exemplo, meios contendo cloretos
[14,37]. Na maioria das aplicaes, a extenso dos pites provavelmente s superficial e a
reduo da seco de um componente considerada desprezvel, entretanto existem exemplos
que a profundidade deste tipo de oxidao perfura o material base, provocando srios danos
[38-39]. Na figura 3.4 possvel se verificar e comparar corroso generalizada e a por pite,
normalmente gerada em ligas passivadas, como aos inoxidveis e alumnio.


Figura 3.4 Representao esquemtica da corroso generalizada (uniforme) e a por pites


Corroso em frestas

Se h uma fresta na juno de duas peas de ao e o eletrlito e o oxignio conseguem
penetrar, forma-se uma clula de oxigenao diferenciada, esta diferena de concentrao de
oxignio produz a corroso por frestas, tambm chamada corroso por aerao diferencial.
Justamente onde a quantidade de oxignio menor, ou seja, no interior da fresta, por
causa da dificuldade de acesso para o oxignio, a rea andica e o ferro passa para a soluo
na forma de ons. Este tipo de corroso tambm designado de corroso por aerao
diferencial. Na rea externa, h maior concentrao de oxignio e gua e por isso esta parte se


10

comporta como catodo e no sofre corroso. J na rea intermediria, entre o anodo e o
catodo h a formao da ferrugem, vide figura 3.5 [17,40].



Figura 3.5 Representao esquemtica da corroso em frestas.


Aps esta dissertao sobre os dois tipos de corroso localizada deve-se ressaltar que
um dos objetivos especficos deste trabalho o estudo da corroso microbiolgica do ao 430
em H
2
SO
4
1 mol L
-1
, desta forma este ser o prximo tpico a ser dissertado.


3.3 CORROSO MICROBIOLGICA

Os microorganismos induzem, aceleram ou mantm a reao de corroso, em uma
interface metal/soluo, biologicamente condicionada pelos biofilmes [6, 7, 14, 28, 38-43]. Os
mecanismos associados corroso microbiologicamente induzida se devem presena fsica
das clulas microbianas na superfcie do metal ou pela sua prpria atividade metablica. A
corroso microbiolgica pode ocasionar uma passivao do metal base, causando uma
minimizao da velocidade de corroso (corroso uniforme) ou mesmo ocasionar uma
espcie de corroso localizada (alveolar ou pite). Esta corroso localizada pode ocorrer pela
ruptura do biofilme ou pela alimentao dos microorganismos existentes nos mesmos,


11

podendo levar a uma oxidao mais intensa do metal, devido gerao de meios cidos ou
mesmo por aerao diferencial [41-42], vide figura 3.6.[14]

Figura 3.6 Esquematizao da corroso microbiolgica em um material metlico exposto a
meio oxidativo, onde ocorre uma corroso generalizada (A) ou localizada (B).

De acordo com as caractersticas do crescimento e do metabolismo dos
microorganismos, podemos citar os seguintes tipos de biocorroso:

Pilhas de aerao diferencial
Neste caso vrios microorganismos como algas, bactrias e fungos formam depsitos
insolveis que ficam aderidos na superfcie metlica sob a forma de biofilmes ou tubrculos.
Abaixo desse depsito, pode ocorrer a corroso por aerao diferencial ou o desenvolvimento
de bactrias anaerbias, que tambm causaro corroso no metal.
A rea coberta pelo biofilme, ou seja, a rea menos aerada, funcionar como anodo,
provocando a oxidao do metal. Enquanto isso, a rea limpa em contato com a gua, ser o
catodo.
A rea abaixo do biofilme, deficiente de oxignio, favorece a proliferao de seres
anaerbios. Estabelece-se assim uma relao de simbiose entre bactrias aerbias e anaerbias
sobre a superfcie do metal.


12

Corroso por bactrias oxidantes de ferro
Essas bactrias, de grande diversidade estrutural, apresentam em comum a capacidade de
oxidar o ferro ferroso a frrico, produzindo depsitos de Fe(OH)
3
ou Fe
2
O
3
. H
2
O, insolveis.
Entre as bactrias oxidantes de ferro normalmente associadas ao processo de corroso,
podemos citar os gneros Gallionella e Siderocaspa. Essas bactrias desenvolvem-se em uma
faixa de temperatura de 0 a 40C e em valores de pH em torno de 5,5 e 8,2 [14].

Corroso por bactrias redutoras de sulfatos (BRS)
As BRS constituem um grupo taxonomicamente variado de bactrias, relacionadas por
aspectos fisiolgicos e ecolgicos. Originalmente foram classificadas em dois gneros: o
Desulfovibrio (cinco espcies) e o Desulfotomaculum (sete espcies), segundo a capacidade de
formar esporos, respectivamente [43].
O gnero Desulfovibrio consiste em um pequeno grupo de bactrias estritamente
anaerbias, que so caracterizadas pela sua capacidade de reduzir sulfato a sulfeto. O
crescimento dessas bactrias depende de um pH normalmente entre 5,5 e 8,5, presena de
sulfato e nutrientes, incluindo matria orgnica e temperatura entre 25 a 44C [44].

Corroso por bactrias oxidantes de enxofre
Trata-se de um grupo de bactrias do gnero Thiobacillus que oxidam enxofre ou
compostos de enxofre a sulfato, com simultnea produo de cido sulfrico, que funciona
como agente corrosivo. Os compostos de enxofre envolvidos so geralmente: sulfito (SO
3
2-
),
tiosulfato (S
2
O
3
2-
) e diversos politionatos como o tetrationato (S
4
O
6
2-
).
As trs espcies mais envolvidas nos processos de corroso so: Thiobacillus
thioparus, Thiobacillus thiooxidans, Thiobacillus concretivorus e Thiobacillus ferroxidans.
Essas bactrias so qumiolitotrficas, acidfilas, mesoflicas, aerbias e autotrficas,
sintetizando seu material celular de compostos inorgnicos e nitrognio. A energia para essa
sntese proveniente da oxidao do enxofre, ou seus compostos. A temperatura tima para
crescimento dessas bactrias est na faixa de 25C a 30C. Seus processos metablicos
ocasionam diminuio do pH, que s vezes chega prximo do pH = 2 [45].
As bactrias do gnero Acidithiobacillus ferrooxidans tm sido ativas na dissoluo de
sulfetos de cobre na extrao comercial desse elemento desde 1670. Tal espcie pode utilizar


13

como fonte de energia, alm do on ferroso, enxofre e seus derivados, a reao de oxidao de
ligas ferrosas muito controversa [5].

4Fe(s) + SO
4
-2
+ 4H
2
0 FeS + 3Fe(OH)
2
+ 20H
-


As bactrias da espcie Acidithiobacillus ferrooxidans e Acidithiobacillus thiooxidans
so organismos unicelulares, quimiossintetizantes, autotrficos, Gram-negativos e com
formato em basto. Algumas tm flagelos, e possuem tamanho de clula de 0,3 a 0,5 m de
dimetro e 1,0 a 1,7 m de comprimento [46-47].
A espcie Acidithiobacillus ferrooxidans e Acidithiobacillus thiooxidans crescem no
intervalo de pH 1,0 a 6,0, sendo o pH timo para alcanar a mxima velocidade de
crescimento de 2,0 a 2,5. De modo anlogo, sobrevive em um intervalo de temperatura de 2 a
40C, mas o intervalo de 28 a 35C o mais favorvel. Entretanto, o Acidithiobacillus
ferrooxidans cresce em pH baixo, sendo seu pH citoplasmtico interno prximo da
neutralidade, e o gradiente de pH atravs da sua membrana citoplasmtica um dos maiores
de todos os organismos [46].
As bactrias do gnero Acidithiobacillus so encontradas em diversos ambientes, como
locais de minerao, rio com elevada carga de dejetos orgnicos, reas de tratamento de
esgoto e esturios, alm de estruturas da construo civil, provocando danos mesma. A
biodeteriorizao da qualidade de gua, gerao de cido sulfrico e a precipitao de xidos
de ferro so problemas srios associados a estes microrganismos.
A corroso microbiolgica um processo que afeta principalmente a indstria do
petrleo, particularmente a de extrao de hidrocarbonetos, transporte e armazenagem. Este
tipo de corroso tem sido avaliado normalmente por testes microbiolgicos, e apenas algumas
referncias mencionam outros mtodos, como as tcnicas bioeletroqumicas.
Gayosso et al utilizaram duas tcnicas diferentes: resistncia de polarizao e rudo
eletroqumico para estudar a corroso de um consrcio de microorganismos de um gasoduto
que transportava gs no sudeste do Mxico [55].
As tcnicas eletroqumicas utilizadas apresentaram uma tendncia similar no
comportamento da taxa de corroso, e valores de velocidade de corroso acima de 0,3 mm
ano
-1
foram observados. Um tipo de corroso localizada foi observado sobre a superfcie
metlica, e foi associada bactria Desulfovibrio Vietnamensis. Consideraram que a taxa de


14

corroso aumentava durante os experimentos, figura 3.7, e que isto significa que
diretamente proporcional a espcie sssil que induz a corroso metlica. Devido a esta
situao, muito importante para determinar cintica do crescimento sssil quando se
estuda processo de corroso microbiolgica.


Figura 3.7 - Velocidade de corroso utilizando-se a tcnica de resistncia de polarizao para
o ao API XL 52, exposto a condies na ausncia e presena de microorganismos [55].


Os resultados da figura 3.7 mostram uma oscilao na velocidade de corroso na
presena dos microorganismos nos primeiros instantes, ora menor e depois maior velocidade
de corroso em relao ao sistema na ausncia dos microorganismos,
Os autores salientam que o uso da tcnica de rudo eletroqumico pode identificar em
qual momento em que o processo tornar-se corroso localizada [55].
Paul Linhardt em seu trabalho mostrou que a corroso microbiolgica influenciada por
microorganismos oxidantes do mangans um fenmeno que ocorre em gua doce,
normalmente em sistemas contendo aos inoxidveis [56].
Zs. Keresztes et al [57] estudaram a influncia dos biocidas na corroso
microbiolgica do ao doce e ligas de bronze. A ao das bactrias anaerbicas de reduo de
sulfato na corroso do ao e do bronze, foi estudada. O uso de biocidas, em diferentes


15

concentraes, fora testado para inibir a eficincia metablica atividade destas bactrias: N-
hidroximetilglicina (GLY) e N-hidroximetilfenilalanina (PHE).


FIGURA 3.8 Velocidade de corroso para op ao doce em meio na ausncia (----) e
presena de Desulfovibrio Desulfuricans sem ( ) e com biocidas: () GLY e () PHE
[57].

De acordo com os resultados, figura 3.8 , os biocidas aplicados tm diferente
eficincia inibidora sobre a bactria.
Kuang et al estudaram as influncias do processo crescente de bactrias redutoras de
sulfato em sistemas de guas salgadas. Os resultados indicam que as mdias da taxa de
corroso do ao no dependem do nmero de microorganismos, mas do acmulo de produtos
de metabolismo destas bactrias redutoras de sulfato [58]. Os autores apresentam na figura
3.9, as bactrias redutoras de sulfato aumentam a taxa de corroso do ao carbono em
comparao com a gua do mar sem bactrias.



16


FIGURA 3.9 Curvas de polarizao potenciodinmicas para o ao carbono D 36 em gua
do mar sem bactrias redutoras de sulfato (SBR) ou na presena de diferentes concentraes
de SBR [58].


3.4 MICROORGANISMOS

A palavra Microbiologia provm do grego, onde:

Mikros = pequeno
Bios = vida
Logos = cincia

Desta forma, Microbiologia o estudo dos organismos microscpicos. Cincia esta
que se estuda a forma, a estrutura, a reproduo, a fisiologia, o metabolismo e a identificao
dos seres microscpicos. Incluindo o estudo da sua distribuio natural, suas relaes


17

recprocas e com outros seres vivos, seus efeitos benficos e prejudiciais sobre os homens e as
alteraes fsicas e qumicas que provocam em seu meio ambiente [48].
Em sua maior parte, a Microbiologia trata com organismos microscpicos
unicelulares. Nas chamadas formas superiores de vida, os organismos so compostos de
muitas clulas, que constituem tecidos altamente especializados e rgos destinados a exercer
funes especficas. Nos indivduos unicelulares, todos os processos vitais so realizados
numa nica clula. Independentemente da complexidade de um organismo, a clula , na
realidade, a unidade bsica da vida [48].
Todas as clulas vivas so basicamente semelhantes. Conforme j foi visto, elas
compem-se de protoplasma (do grego: a primeira substncia formada), um complexo
orgnico coloidal constitudo principalmente de protenas, lipdeos e cidos nuclicos; o
conjunto circundado por membranas limitantes ou parede celular, e todos contm um ncleo
ou uma substncia nuclear equivalente [48].
Todos os sistemas biolgicos tm as seguintes caractersticas comuns: habilidade de
reproduo, capacidade de ingesto ou assimilao de substncias alimentares,
(metabolizando-as para suas necessidades de energia e de crescimento), habilidade de
excreo de produtos de escria, capacidade de reagir a alteraes do meio ambiente (algumas
vezes chamada de "irritabilidade"), e suscetibilidade mutao [48].
Os princpios da Biologia podem ser demonstrados atravs do estudo da
Microbiologia, pois os microrganismos tm muitas caractersticas que os tornam instrumentos
ideais para a pesquisa dos fenmenos biolgicos. Os microrganismos fornecem sistemas
especficos para a investigao das reaes fisiolgicas, genticas e bioqumicas, que so a
base da vida. Eles podem crescer, de maneira conveniente, em tubos de ensaio ou frascos,
exigindo, assim, menos espao e cuidados de manuteno do que as plantas superiores e os
animais. Alm disso, crescem rapidamente e se reproduzem num ritmo muito alto; algumas
espcies bacterianas demonstram quase 100 geraes num perodo de 24 horas. Os processos
metablicos dos microrganismos seguem os padres que ocorrem nos vegetais superiores e
nos animais. As leveduras, por exemplo, utilizam a glicose, basicamente do mesmo modo que
as clulas dos tecidos de mamferos, revelando que o mesmo sistema enzimtico est presente
nestes organismos to diversos [48].
Em Microbiologia pode-se estudar os organismos em grande detalhe e observar seus
processos vitais durante o crescimento, a reproduo, o envelhecimento e a morte.


18

Modificando-se a composio do meio ambiente, possvel alterar as atividades metablicas,
regular o crescimento e, at alterar alguns detalhes do padro gentico, tudo sem causar a
destruio do microrganismo [48].
Os principais grupos de microrganismos so os protozorios, fungos, algas e bactrias.
Os vrus, apesar de no serem considerados vivos, tm algumas caractersticas de clulas
vivas e por isso so estudados como microrganismos [48].
A palavra bactria vem do termo bacterium, derivada da palavra grega que significa
"pequeno basto".
A forma das bactrias diversificada, vide figura 3.10, as esfricas so chamadas
cocos; quando alongadas, recebem o nome de bacilos; e, em formas helicoidais, em geral
mveis, so denominadas espirilos. Muito freqentemente, as clulas bacterianas aparecem
em grupos, e no isoladas. Os cocos em pares formam os diplococos; dispostos em fileiras,
so chamados estreptococos; e, quando aparecem como cachos de uvas, denominam-se
estafilococos.


Figura 3.10 - Principais formas das bactrias [49].


19

3.5 Estruturas das bactrias

O estudo da estrutura das bactrias, figura 3.11 mostra que elas apresentam,
envolvendo o seu citoplasma, uma membrana plasmtica em torno da qual se encontra uma
espessa e rgida camada, a parede bacteriana. Por fora da parede, pode ocorrer uma terceira
camada, viscosa, que, em algumas espcies, espessa, constituindo a cpsula. No interior da
clula procarionte, alm do citoplasma, encontra-se uma regio correspondente ao ncleo,
chamada nucleide, alm de grnulos diversos. Freqentemente partem da superfcie
bacteriana prolongamentos filamentosos de dois tipos: os flagelos, responsveis pela
movimentao das bactrias, e as fmbrias, estruturas que participam da transferncia
unidirecional de DNA entre clulas bacterianas.
A Figura 3.11 apresenta esquematicamente uma clula bacteriana tpica com as
principais estruturas externas e internas membrana plasmtica.

Figura 3.11 -Estrutura tpica das bactrias [50].

A membrana plasmtica das bactrias tem a mesma estrutura trilaminar da membrana
plasmtica das clulas eucariontes. Nela se situam molculas receptoras, as protenas
relacionadas com o transporte transmembrana e as molculas da cadeia respiratria anloga
cadeia respiratria existente na membrana interna das mitocndrias das clulas eucariontes.
s vezes, observam-se invaginaes da membrana, formando um complexo ao qual se
deu o nome de mesossomo (meso, meio, e soma, corpo). Essas estruturas aumentam a
quantidade de membrana plasmtica, aumentando tambm o nmero de molculas que


20

participam dos processos funcionais importantes, como a respirao. Os mesossomos tambm
participam da formao dos septos e da parede, que aparecem quando a bactria se divide.
Cada bactria contm um ou mais nucleides, regies arredondadas ou alongadas bem
visveis nas micrografias eletrnicas. O nucleide contm o cromossomo da bactria e muitas
vezes se localiza nas proximidades ou mesmo ligado membrana plasmtica. O DNA do
cromossomo bacteriano um filamento circular, constitudo por duas cadeias dispostas em
hlice, mede cerca de 1 mm de comprimento e sua molcula se dobra muito para caber na
clula bacteriana. O cromossomo bacteriano diferente dos cromossomos das clulas
eucariontes, que so estruturas muito mais elaboradas e constitudas de DNA e maior
variedade de protenas. Numa mesma espcie bacteriana, o nmero de cromossomos, por
clula, varivel, porm geralmente existe mais de um. Como as bactrias no se dividem por
mitose, seus cromossomos no apresentam a condensao cclica observada nos cromossomos
das clulas eucariontes durante a diviso celular. No existe ciclo celular nas bactrias.
Alm dos cromossomos do nucleide, as bactrias podem apresentar outros, tambm
circulares, muito menores. Esses pequenos cromossomos, localizados fora do nucleide,
tambm veiculam informao gentica e so denominados plasmdios. Os plasmdios se
multiplicam independentemente dos cromossomos principais. Esses elementos possuem genes
para a prpria replicao e genes que influenciam favoravelmente a bactria. Todavia, no so
essenciais para a vida da bactria. Os plasmdios geralmente ocorrem em cpias mltiplas, o
que aumenta muito a eficincia dos genes neles contidos. Um plasmdio capaz de se integrar
no cromossomo da bactria recebe o nome de epissomo.
Os plasmdios apresentam caractersticas que os tornam muito teis aos estudos de
biologia molecular, sendo muito utilizados nas tcnicas de DNA recombinante ( engenharia
gentica) para transferir genes entre organismos diferentes.
Tambm nas clulas procariontes, como nas eucariontes, pode haver transferncia de
genes para locais diferentes no DNA da mesma clula, pelos transposons, que so segmentos
de DNA dotados da capacidade de se transferirem entre plasmdios e cromossomos,
saltando de um local para outro. Os transposons aumentam as variaes genticas entre as
bactrias, facilitando muito a transferncia de resistncia a antibiticos e a outras substncias
txicas para elas. Essa propriedade aumenta em muito a sobrevivncia das bactrias, quando
elas enfrentam condies adversas. Tanto as bactrias como nos demais seres vivos, os
transposons so elementos importantes no processo evolutivo.


21

Todas as bactrias, exceto os microplasmas, apresentam uma parede rgida,
responsvel pela forma da clula e que a protege contra a ruptura e contra a penetrao de
bacterifagos (bacterigrafo o nome dados aos vrus que atacam as bactrias). Pelo
transporte ativo de molculas e ons, a maioria das bactrias mantm presso osmtica interna
de 5 a 20 atmosferas, muito mais elevadas do que a presso osmtica de certos ambientes
onde elas vivem na natureza. A parede que essas bactrias se rompam, possibilitando sua
sobrevivncia e multiplicao e meio hipotnico (ambiente com presso osmtica inferior
do citoplasma bacteriano). Apesar de ser rgida e resistente, a parede permevel, o que
essencial para a nutrio da clula e a eliminao de molculas diversas produzidas pelas
bactrias. A parede contm molculas antignicas (capazes de provocar uma resposta
imunitria e de reagir com os respectivos anticorpos) que podem ser utilizadas para a
identificao das bactrias.
Devido s propriedades de suas paredes, as bactrias so divididas em dois grandes
grupos: as Gram-positivas e as Gram-negativas. A colocao de um determinado tipo de
bactria num desses grupos depende de seu comportamento diante da colocao de Gram. As
bactrias que, aps aplicao da tcnica de Gram, aparecem coradas em roxo so chamadas
Gram-positivas. As que no retm a cor roxa so as Gram-negativas. Para facilitar sua
visualizao ao microcpio, as ltimas so geralmente coradas em vermelho com safranina ou
fucsina, que no altera a cor roxa das Gram-positivas.
A parede das clulas Gram-positivas, figura 3.12 simples, sendo formada apenas
por uma espessa camada de peptidoglicanas (sinnimos: murena, mucopeptdeo) situada
entre a membrana plasmtica e a cpsula, que fica mais externamente. As peptidoglicanas so
compostos tpicos das paredes bacterianas, constitudos por cadeias de aminocidos ligadas a
uma cadeia de hidratos de carbono. So responsveis pela rigidez e pela resistncia da parede
das bactrias. A parede das clulas Gram-positivas geralmente possui molculas de cidos
teicicos. Esses cidos so polmeros constitudos de vrios tipos de molculas como glicerol,
hidratos de carbono e aminocidos.



22


Figura 3.12 : Parede celular de bactrias Gram-positivas [50].


A parede celular das bactrias Gram-negativas muito complexa, figura 3.13,
sendo formada pelas seguintes camadas, de dentro para fora: 1) uma camada de
peptidoglicanas, mais delgada do que das bactrias Gram-positivas; 2) uma camada de
lipoprotenas; 3) a membrana externa, de estrutura trilaminar, como as das demais membranas
celulares; 4) a camada de lipopolissacardeos (LPS).



23


Figura 3.13: Parede celular de bactrias Gram-positivas [50].

A membrana externa uma estrutura peculiar. Embora localizada na parte externa da
parede, tem estrutura semelhante s membranas celulares em geral. A membrana externa tem
a arquitetura de um mosaico fluido, mas os fosfolipdios de seu folheto externo so
substitudos pro abundantes molculas de lipopolissacardeos (LPS), que chegam a constituir
uma verdadeira camada, formando uma forte barreira em volta da clula. Entre outras
funes, os lipopolissacardeos tm um papel protetor, como, por exemplo, nas bactrias
entricas que resistem s enzimas hidrolticas e aos sais biliares do trato digestivo. A
membrana externa das bactrias Gram-negativas contm molculas proticas, denominadas
porinas, que formam canais por onde penetram diversas substncias, como aminocidos e
hidratos de carbono. Como a camada de lipopolissacardeos impermevel, praticamente
todas as molculas que penetram na parede, para atingirem a membrana plasmtica, o fazem
pelos canais de porinas.
A cpsula, presente em muitas bactrias, figura 3.11, tanto Gram-positivas quanto
Gram-negativas, uma camada de espessura e constituio molecular variadas e de
consistncia mucosa. Costuma conter antgenos potentes, conferindo bactria propriedades
imunolgicas bem definidas. Apesar da presena da cpsula no estar sempre relacionada
capacidade da bactria em agredir o hospedeiro, essa estrutura confere s bactrias


24

patognicas (pathos, doena, e genos, gerar) certa resistncia a fagocitose e ao ataque de
outros elementos de defesa dos organismos, explicando assim, em parte, sua atividade
patognica.
A hidrlise da parede bacteriana ou o bloqueio de sua sntese podem gerar os
protoplastos ou os esferoplastos. A remoo da parede deve ser feita em meio de cultivo de
presso osmtica adequada, para prevenir a ruptura das clulas sem parede. Geralmente, os
protoplastos so derivados das bactrias Gram-positivas, e os esferoplastos, das Gram-
negativas. Ambos so esfricos. A principal diferana entre os dois que os protoplastos so
totalmente desprovidos de constituintes da parede e, por isso, osmoticamente muito mais
frgeis do que os esferoplastos, que retm alguns materiais da membrana externa da parede
bacteriana.
As clulas sem parede e que so capazes de proliferar nos cultivos ou nos organismos
hospedeiros recebem o nome de formas L. Algumas dessas formas L podem voltar a sintetizar
paredes, revertendo sua forma normal. Outras perdem definitivamente a capacidade de
voltar a fabricar novas paredes.
Certas bactrias produzem formas L espontaneamente, muitas vezes causando doenas
crnicas e de tratamento difcil, porque as formas L so mais resistentes a muitos antibiticos.
Sendo desprovido de organelas membranosas, o citoplasma das clulas bacterianas e
formada essencialmente pelo citossol, contendo moderada quantidade de riobossomos, que se
prendem a molculas de RNA mensageiro (mRNA) para formar polirribossomos. Nas
bactrias fotossintticas, o pigmento captador da luz solarse localiza em lamelas paralelas
situadas prximo membrana plasmtica e que, vezes, se dobram e formam corpsculos
isolados.
As bactrias podem acumular material de reserva em grnulos osmoticamente inertes,
no envolvidos por membrana. Na falta de nitrognio, quando no podem sintetizar protenas
nem cidos nuclicos, as bactrias acumulam o carbono excedente sob a forma de polmeros
do cido hidroxibutrico ou de polmeros de glicose, como o amido e o glicognio. Esses
grnulos so usados como fonte de carbono para a sntese de protenas e cidos nuclicos,
quando as clulas obtm nitrognio suficiente. So muito freqentes os grnulos de
metafosfato polimerizado, que foram denominados grnulos de volutina, antes de sua
caracterizao qumica.


25

As clulas procariontes no apresentam citoesqueleto, ao contrrio das clulas
eucariontes, que exibem um citoesqueleto responsvel pela constituio e manuteno da
forma das clulas e que participa dos movimentos celulares. A forma das clulas das bactrias
determinada pela parede, que uma estrutura rgida.
Certas bactrias fotossintticas (usam a luz do Sol como fonte de energia) que vivem
em meio aqutico possuem vesculas cilndricas contendo gs que controlam a flutuao do
microrganismo. Essas vesculas alongadas so limitadas por membranas proticas e, portanto,
diferentes das membranas em geral, onde predominam lipdios. Por meio do controle de sua
flutuao essas bactrias procuram, no meio lquido, a profundidade mais conveniente no que
se refere concentrao de nutrientes, concentrao de oxignio e intensidade luminosa.
Os prolongamentos observados na superfcie das bactrias so de dois tipos os
flagelos e as fmbrias, figura 3.11. Os flagelos so rgos de locomoo filamentosos,
medindo geralmente de 3 a 12 microm de comprimento e 12 a 30 nm de dimetro. Porm, em
certas bactrias, o flagelo pode atingir algumas centenas de micrmetros de comprimento. Na
base do flagelo existe uma dilatao, principal responsvel pela rotao do flagelo, que se
encontra imersa na parede e na membrana plasmtica da clula bacteriana. O flagelo um
polmero da protena flagelina, caracterstica de cada espcie de bactria. Os monmeros de
flagelina se organizam em 11 protofilamentos para constituir o flagelo.
No h indcios de que o ATP participe do movimento flagelar. Os dados disponveis
sugerem que a energia fornecida por um fluxo de prtons. Os flagelos so rotores semi-
rgidos aos quais a clula imprime um movimento de rotao. O flagelo pode girar num
sentido algum tempo e, em seguida, girar no sentido contrrio, alterando a direo do
movimento bacteriano.
As fmbrias, figura 3.11, so filamentos rgidos, de natureza protica, mais numerosos
do que os flagelos e no associados locomoo. As fmbrias so mais finas e mais curtas do
que os flagelos. Como estes, as fimbrias tambm so compostos de subunidades proticas. H
duas classes de fmbrias: as fmbrias comuns, que podem promover a aderncia das bactrias
s clulas eucariontes agredidas, tendo assim relevante papel na patogenicidade (capacidade
de produzir doena) bacteriana, e as fmbrias sexuais, mais longas, que so responsveis pela
fixao das bactrias durante o processo de conjugao. Nesse processo, h passagem
unidirecional de DNA da clula bacteriana doadora para a clula receptora, atravs de
comunicaes que se formam entre os citoplasmas das duas clulas (no por dentro das


26

fimbrias). As fmbrias sexuais esto presentes apenas nas bactrias doadoras, enquanto as
clulas receptoras possuem, na sua superfcie, macromolculas que facilitam a fixao das
fmbrias. O papel das fmbrias sexuais apenas fixar temporariamente a clula doadora e a
receptora.
A figura 3.14 resume a estruturao dos principais componentes da clula bacteriana.

Figura 3.14 - Estruturao dos principais componentes da clula bacteriana [50].

O cultivo dos microrganismos, em condies laboratoriais, um pr-requisito para
seu estudo adequado. Para que isto possa ser realizado, necessrio o conhecimento de suas
exigncias nutritivas e das condies fsicas requeridas.







27

3.5.1. Tipos Nutritivos das Bactrias

As bactrias podem ser divididas em grupos com base em suas exigncias nutritivas. A
principal separao corresponde aos grupos:

Fototrficos: Organismos que utilizam a energia radiante como fonte de energia.
Existem bactrias que utilizam o CO
2
como principal fonte de carbono; so as
fotolitotrficas. Outras exigem um composto orgnico (lcoois, cidos graxos,
aminocidos) e so ditas fotorganotrficas.
Quimiotrficos Organismos incapazes de utilizar a energia radiante; dependem da
oxidao de compostos qumicos para a obteno de energia. Bactrias que utilizam o
CO
2
como fonte de carbono e oxidam compostos inorgnicos (como por exemplo os
nitritos), ou elementos qumicos (como por exemplo o enxofre) para obteno da
fonte de energia so chamadas quimiolitotrficas. As que utilizam compostos
orgnicos para obter energia, so chamadas quimiorganotrficas.

Tabela 3.1 - Principais tipos nutritivos das bactrias [50]. (*) aa = aminocidos.
Bactrias
Sais
Inorgnicos
Carbono
Orgnico
Nitrognio
Inorgnico

1 aa
2 ou +
aa
Uma
Vitamina
Duas ou +
vitaminas
Escherichia coli
X X X
Salmonella typhi
X X X X
Proteus vulgaris
X X X X X
Staphylococcus aureus
X X X X X
Lactobacillus
Acidophilus
X X X X X

As bactrias fotolitotrficas e quimiolitotrficas so conhecidas, comumente, como
autotrficas, ao passo que as espcies fotorganotrficas e quimiorganotrficas so designadas
heterotrficas. Os principais nutrientes e exigncias para estes tipos de bactrias so
apresentados nas tabelas 3.1 e 3.2 [50].




28



Tabela 3.2 - Exigncias nutritivas mnimas de algumas bactrias heterotrficas [50].
Tipo Fonte de Energia
Para Crescimento
Fonte de Carbono
Para Crescimento
Exemplo de
Gnero
Fototrficos:
Fotolitotrfico
(autotrfico)

Fotorganotrfico
(heterotrfico)

Luz


Luz

CO
2



Composto orgnico

Chromatium


Rhodopseudomonas
Qumitrfico:
Qumiolitotrfico
(autotrfico)

Qumiorganotrfico
(heterotrfico)

Oxidao de composto
inorgnico

Oxidao de composto
orgnico

CO
2


Composto orgnico

Thiobacillus


Escherichia

3.5.2 Meios Bacteriolgicos

Para o cultivo rotineiro de microrganismos heterotrficos, utilizam-se certas matrias-
primas complexas, tais como as peptonas, os extratos de carne e de levedura, tabela 3.3, da
resultando um meio que promove o desenvolvimento de grande variedade de bactrias e de
outros microrganismos. Quando se deseja um meio slido, adiciona-se o agar-agar como
agente solidificante. O caldo e o agar-agar nutritivos so exemplos de meios lquidos e
slidos, relativamente simples, indicados para a cultura de microrganismos heterotrficos
comuns [50].
Alguns microrganismos no se desenvolvem bem nestes meios, pois demonstram
exigncias de nutrientes especficos, como vitaminas e outras substncias estimulantes. Tais
microrganismos so chamados de heterotrficos fastidiosos, e necessitam de meios especiais
para seu cultivo, isolamento e reconhecimento [50].
Os meios de cultura, de acordo com a sua aplicao ou funo, podem ser
classificados, entre outros, como:


29

Meios Enriquecidos: a adio de sangue, soro ou extratos de tecidos animais ou
vegetais ao caldo ou agar-agar nutritivos proporciona nutrientes acessrios, de modo
que o meio possa permitir o crescimento de heterotrficos [50];
Meios Seletivos: a adio de certas substncias qumicas especficas ao agar-agar,
nutritivo previne o crescimento de um grupo de bactrias sem agir sobre outras. O
cristal violeta, por exemplo, em uma dada concentrao, impede o crescimento de
bactrias gram-positivas, sem afetar o desenvolvimento das bactrias gram-negativas
[50];
Meios Diferenciais: a incorporao de certos reagentes ou substncias qumicas no
meio pode resultar num tipo de crescimento ou modificao, aps a inoculao e a
incubao, que permite ao observador distinguir os tipos de bactrias. Por exemplo,
inoculando-se uma mistura de bactrias num meio de agar-agar sangue, algumas das
bactrias podem hemolisar (destruir) as clulas vermelhas e outras no. A zona clara
ao redor da colnia a evidncia de ter ocorrido hemlise. Assim, pode-se
estabelecer a distino entre bactrias hemolticas e no-hemolticas, de acordo com o
seu desenvolvimento [50].



30

Tabela 3.3 - Caractersticas de vrios produtos complexos, usados como ingredientes dos
meios de cultura [50].

MATRIA
PRIMA
CARACTERSTICA VALOR NUTRITIVO

Extrato de carne

Extrato aquoso de tecido muscular, concentrado
sob a forma de pasta.

Contm as substncias solveis dos
tecidos animais, incluindo
carboidratos, compostos orgnicos
de nitrognio, vitaminas
hidrossolveis e sais.

Peptona Produto que resulta da digesto de materiais
proticos como carne, casena e gelatina; a
digesto protica realizada por meio dos
cidos ou de enzimas; existem muitas peptonas
diferentes (dependendo da protena usada e do
mtodo de digesto) para uso de meios
bacteriolgicos; as peptonas diferem em suas
propriedades de promover o crescimento.
Principal fonte de nitrognio
orgnico; pode conter algumas
vitaminas e, s vezes, carboidratos,
dependendo do tipo de material
protico digerido.
Agar-agar Carboidratos complexos, obtidos de certas algas
marinhas; tratado para a remoo de substncias
estranhas.
Usado como agente solidificante
dos meios; o agar-agar, dissolvido
em solues aquosas, gelifica
quando a temperatura reduzida a
menos de 45 C; no considerado
como fonte nutritiva para as
bactrias.
Extrato de levedo Extrato aquoso de leveduras comercialmente
apresentado sob a forma de p
Fonte muito rica de vitamina B,
tambm contm compostos
orgnicos de nitrognio e de
carbono










31

3.5.3. Condies Fsicas Necessrias ao Crescimento

Assim como as bactrias variam com relao s exigncias nutritivas, tambm
demonstram respostas diversas s condies fsicas do ambiente.

Temperatura: o crescimento bacteriano pode ter seu ritmo e quantidade, determinados
pela temperatura, uma vez que esta influencia as reaes qumicas do processo de
crescimento. Cada espcie de bactria cresce sob temperaturas situadas em faixas
caractersticas e, sendo assim, so classificadas nos seguintes grupos [50]:

1. Bactrias psicrfilas: so capazes de crescer a 0 C ou menos, embora seu timo
seja entre 15 C ou 20 C.
2. Bactrias mesfilas: crescem melhores numa faixa de 25 a 40 C.
3. Bactrias termfilas: crescem melhores a temperaturas de 45 a 60 C.
A temperatura tima de crescimento a temperatura de incubao que possibilita o
mais rpido crescimento, durante curto perodo de tempo (12 a 24 horas).

Exigncias atmosfricas: os principais gases que afetam o crescimento bacteriano so
o oxignio e o dixido de carbono. Como as bactrias apresentam grande variedade de
resposta ao oxignio livre, elas so divididas em:

1. Bactrias aerbias: crescem na presena de oxignio livre.
2. Bactrias anaerbias: crescem na ausncia de oxignio livre.
3. Bactrias anaerbias facultativas: crescem tanto na presena como na ausncia do
oxignio livre.
4. Bactrias microaerfilas: crescem na presena de quantidades pequenas de oxignio
livre.

Acidez e alcalinidade (pH): para a maioria das bactrias, o pH timo de crescimento
localiza-se entre 6,5 e 7,5. Embora poucos microrganismos possam desenvolver-se nos limites
extremos de pH, as variaes mnimas e mximas, para a maior parte das espcies, esto entre
pH 4 e pH 9 [50].


32

3.5.4. Principais Grupos de Bactrias

A referncia padro para a classificao e taxonomia bacterianas o Bergey's manual
of determinative bacteriology [53]. Este manual divide as bactrias em 19 grupos, vide tabela
3.4.

Tabela 3.4 Grupos de bactrias [53].


Recentemente, Lynn Margulis e Karlene Schwartz [45] propuseram um sistema de
classificao til que divide as bactrias em 16 filos de acordo com algumas de suas
caractersticas mais significantes. A tabela 3.5 mostra algumas caractersticas de 11 destes
grupos.
Grupo 1 Bactrias fototrficas Grupo 2 Bactrias deslizantes
Grupo 3 Bactrias com bainha Grupo 4 Bactrias gemulantes e/ou pedunculadas
Grupo 5 Espiroquetas Grupo 6 Bactrias espiraladas e encurvadas
Grupo 7 Coco e bacilos gram-negativos aerbicos Grupo 8 Bacilos gram-negativos facultativos
Grupo 9 Bactrias gram-negativas anaerbicas Grupo 10 Cocos e cocobacilos gram-negativos
Grupo 11 Cocos gram-negativos anaerbicos Grupo 12 Bactrias gram-negativas
quimiolitotrficas
Gripo 13 Bactrias produtoras de metano Grupo 14 Cocos gram-positivos
Grupo 15 Bacilos e cocos esporulados Grupo 16 Bacilos gram-positivos no-esporulados
Grupo 17 Actinomicetos e microrganismos afins Grupo 18 Rickettsias
Grupo 19 Micoplasmas


33

Tabela 3.5 - Caractersticas de alguns grupos de bactrias [45].

(a) B = bacilo, C = coco, E = espirilo, M = filamentos ou agregados;
(b) F = flagelada, N = no-mvel, D = deslizante;
(c) H = heterotrficas, Q = quimiossintticas, F = fotossintticas;
(d) Mais ou menos esfricas ou alongadas e retorcidas;
(e) Flagelo inserido embaixo da membrana lipoprotica mais externa da parede celular.



3.5.5. Bactrias Patognicas

Muitas doenas de plantas esto associadas com bactrias; quase todos tipos de
plantas so suscetveis a um ou mais tipos de doenas bacterianas. Os sintomas destas doenas
variam, mas elas geralmente se manifestam como manchas de vrios tamanhos nos caules,
NOME DO GRUPO
FORMA
(a)
MOTILIDADE
(b)
METABOLISMO
(c)
PAPEL ECOLGICO
METANOGNICAS B, E, C N, F Q, F Algumas digerem celulose; outras
utilizam metano; outras reduzem
enxofre.
OMNIBACTRIAS B N, F H Saprfitas, patgenas,
decompositoras.
CIANOBACTRIAS B, C, M D, N F Fixadoras de carbono e
nitrognio.
CLOROXIBACTRIAS C N F Simbiose com tunicados.
MICOPLASMAS,
ESPIROPLASMAS
sem
parede
(d)
N H Patgenos de plantas e animais.
ESPIROQUETAS E F
(e)
H Decompositores e patgenos.
PSEUDOMONADCEAS B F H, Q Decompositores e patgenos de
plantas.
ACTINOMICETOS M, B N H Solo, plantas, decompositores e
fixadores de nitrognio.
MIXOBACTRIAS B D H Solo, animais.
AERBIAS FIXADORAS
DE NITROGNIO
B N, F H Vida livre e em mdulos ou
razes de plantas.
QUIMIOAUTOTRFICAS B, C N, F Q Estgios no ciclo do nitrognio;
oxidam compostos do enxofre;
oxidam metano ou metanol.


34

folhas, flores ou frutos; murchido, definhamento e razes moles; necrose, ferrugem e cancros
tambm so sintomas observados. Os gneros descritos a seguir compreendem as bactrias
fitopatognicas:
Pseudomonas - causa manchas e estrias nas folhas, definhamento e doenas similares.
Xanthomonas - as espcies deste gnero so principalmente fitopatognicas,
responsveis por processos de necrose. Produzem colnias amarelas, ao lado de outras
espcies esbranquiadas ou de colorao creme.
Agrobacterium ssp. - suas espcies vivem no solo ou nas razes ou caules de plantas,
onde desenvolvem galhas.
Corynebacterium - um gnero que compreende espcies parasitas do homem e dos
vegetais. As espcies fitopatognicas so encontradas no solo e nos vegetais doentes, sendo
responsveis por doenas vasculares da alfafa, pela podrido das batatas, dos pastos, dos
tomates e doenas de muitas outras plantas.
Erwinia - as espcies deste gnero invadem os tecidos das plantas vivas e provocam
necroses, galhas, definhamentos e apodrecimentos.
Streptomyces - encontram-se espcies responsveis pela escara da batata e por uma
doena das razes e radicelas da batata-doce.
Xilella fastidiosa responsvel pela clorose variegada dos ctricos (ou Amarelinho,
como a doena conhecida popularmente no Brasil), que afeta os tecidos vasculares de
plantas ctricas, especialmente as laranjeiras, danificando folhas e frutos.
Bactrias tambm causam muitas doenas humanas, incluindo clera, lepra, ttano,
pneumonia bacteriana, coqueluche e difteria.
Vrios gneros de bactrias patognicas so de importncia particular para o homem.
Espcies do gnero Streptococcus esto associadas com a escarlatina, febre reumtica e outras
infeces. A bactria da escarlatina produz seus sintomas e toxinas fatais somente se ela
estiver infectada com o bacterifago apropriado. O gnero Staphylococcus um dos
principais responsveis pela infeces hospitalares.
A sndrome do choque txico causada por algumas linhagens de Staphylococcus
aureus. Esta doena caracteriza-se por febre, erupes cutneas, que aparecem primeiro nas
palmas das mos e nas solas dos ps e depois espalham-se para outras partes do corpo, e
queda brusca de presso. Aproximadamente 85% dos casos de sndrome do choque txico
registrados nos Estados Unidos ocorreram em mulheres menstruadas, que estavam usando


35

absorventes internos na poca em que apareceram os sintomas. No entanto, homens e
mulheres podem contrair esta doena.
Muitas doenas bacterianas so dispersas pelo alimento ou gua, como por exemplo a
disenteria bacilar, e as febres tifide e paratifide. A disenteria bacilar causada por algumas
espcies do gnero Shigella. As febres tifide e paratifide so doenas intestinais infecciosas
agudas causadas pelas bactrias Salmonella typhi e Salmonella enteridis, respectivamente.
A bactria Brucella abortus causa a doena chamada brucelose, tambm conhecida
como febre ondulante, no homem, e aborto contagioso, no gado. O contgio se d atravs da
ingesto de leite oriundo de gado contaminado. Como as bactrias so destrudas pelo
processo de pateurizao do leite, esta doena est se tornando rara.
O clera uma gastroenterite causada pela bactria Vibrio cholerae, que transmitida
pelo contato com guas ou alimentos contaminados pelas excrees de pacientes ou de
portadores convalescentes. Os sintomas compreendem vmitos e fezes IFSC / LCE /
diarricas profusas (aspecto de gua de arroz), os quais do lugar a uma severa desidratao,
com perdas de eletrlitos e acidose, muitas vezes fatal.
A legionelose (ou doena dos Legionrios) uma das doenas bacterianas mais
recentemente detectadas, afetando um grande nmero de pessoas nos Estados Unidos.
causada pela bactria Legionella pneumophyla e desenvolve-se como uma forma severa de
pneumonia.
A bactria Clostridium botulinum a causadora do botulismo, uma intoxicao
alimentar grave, e s vezes fatal. A doena contrada pela ingesto de alimentos contendo a
toxina botulnica (principalmente enlatados, em conserva ou defumados).
A crie dentria provocada por bactrias, principalmente pela espcie Streptococcus
mutans. As leses cariosas se desenvolvem sob densas massas de bactrias, conhecidas como
placas dentais, aderentes superfcie do dente.
Algumas doenas bacterianas so sexualmente transmitidas e so chamadas de
doenas venreas. Entre as mais comuns esto a gonorria, causada pela bactria Neisseria
gonorrhoeae, e a sfilis, causada pela Treponema pallidum, uma espiroqueta.
Ambas doenas so facilmente controladas com penicilina. A gonorria muito mais comum
e menos sria que a sfilis, que pode ser fatal.


36


4 - MATERIAIS E MTODOS

Todos experimentos foram feitos em triplicatas.

4.1 Solues Empregadas

Todos os reagentes Utilizados para as solues aqui descritas foram de grau analtico. A
gua utilizada foi bidestilada.
Eletrlito:
1. [H
2
SO
4
] = 1 mol L
-1
;
2. 10% v/v de meio de cultura (E.C.) + 90% de gua bidestilada, acertado a
concentrao do eletrlito para H
2
SO
4
1 mol L
-1
;
E.C.: 20 g de triptose, 5 g de lactose, 1,5 g de sais biliares, 5 g de cloreto
de sdio e q.s.p. 100 mL de gua bidestilada.
4.2 Eletrodos

Eletrodos de Trabalho: Ao inoxidvel 430 com rea mdia de 1 cm
2
.
Eletrodo Auxiliar: Platina com rea mdia de 20 cm.
Eletrodos de Referncia: sulfato mercuroso.

4.3 Clulas de trabalho

Para as medidas de polarizao e impedncia eletroqumica utilizou-se como
clula um bquer de 100 mL e sua montagem verificada na figura 4.1.



37


Figura 4.1 Esquematizao da clula de trabalho eletroqumica.

4.4 Equipamentos

o Termmetro escala: -10 a 100C preciso 0,1C;
o Potenciostato / impedncimetro marca: Gamry PC4/EIS 400;
o Microscpios pticos marca Olimpus, modelo metalogrfico BX 44 e
trinocular BX51;
o Microscpio Eletrnico de Varredura, marca Shimadzu, modelo SS 550;
o Balana Analtica, marca Metler, preciso de 8 x 10
-4
g.

4.5 Temperaturas de Trabalho

Os experimentos foram conduzidos temperatura ambiente de 30 2C.






38

4.6 Procedimento Experimental

4.6.1 Preparao dos eletrodos de trabalho

Lixa-se a pea metlica utilizando lixas de SiC de granas 220, 400 e 600,
sucessivamente. Aps se limpar a superfcie metlica a mesma lavada e seca com ar
frio.

4.6.2 Anlise gravimtrica

Amostras retangulares do ao 430, com dimenso de (2 cm x 3 cm)x 0,2 cm de
espessura foram polidas e imersas na soluo de cido sulfrico 1 mol L
-1
, com e sem
microorganismos, por diferentes intervalos de tempo ( 5, 10, 15, 30, 45, 60, 120, 180,
240 e 300 segundos) e registrada a perda de massa.

4.6.3 Potencial de Circuito Aberto (Eca).

Ao investigar os processos de eletrodo expressamente importante fazer o
controle do potencial de equilbrio. Quando a corrente nula em medidas eletroqumicas
de sistema fechado, tem-se o potencial de pseudo-equilbrio, tambm chamado de
potencial de corroso (E
corr
). No E
corr
, a velocidade de oxidao igual velocidade de
reduo, portanto a corrente J
ox
= J
red
. Estas medidas foram repetidas no mnimo trs
vezes.

4.6.4 Polarizao potenciosttica andica

Na polarizao potenciosttica andica, as reaes de corroso so controladas
predominantemente por polarizao nas reas andicas. A polarizao permite a
obteno de parmetros cinticos importantes, para avaliao do desempenho de diversos
materiais frente corroso, atravs da polarizao de um eletrodo, obtm-se dados
experimentais de densidade de corrente, por unidade de rea do eletrodo estudado.



39

4.6.5 Espectroscopia de Impedncia Eletroqumica (EIE)

Envolve a aplicao de uma perturbao de potencial ou de corrente no sistema sob
investigao. A perturbao do sistema feita mediante a aplicao de um potencial contnuo
(potencial central aplicado) sobre a qual imposta uma variao senoidal de potencial com
pequena amplitude. Este mtodo de aplicao do potencial possibilita que o sistema seja
perturbado empregando poucos milivolts, de forma a tornar possvel a investigao de
fenmenos eletroqumicos prximos ao estado de equilbrio. Alm disto, possvel perturbar
o sistema usando diferentes valores de freqncia, pois a onda de potencial senoidal. Uma
vez que a perturbao no sistema sob investigao de pequena amplitude possvel
empregar a tcnica para a anlise de etapas de um mecanismo reacional [51].
Na EIE surge uma corrente de natureza senoidal como resultado da aplicao de um
potencial senoidal ao sistema. Mediante um monitoramento das relaes entre o potencial
aplicado e a corrente so obtidas a impedncia do sistema e o ngulo de fase (defasagem da
corrente em relao ao potencial aplicado).
O conceito de impedncia, originalmente introduzido para descrever a resposta de
sistemas compostos por capacitncias, resistncias e indutncias, estendeu-se aos sistemas
eletroqumicos, uma vez que inmeros processos podem contribuir para a relao entre a
corrente e o potencial do sistema. Assim, a partir das medidas da impedncia e ngulo de fase
possvel avaliar processos como transporte de carga (incluindo estimativa de velocidade de
transferncia), condutividade de filmes, capacitncia redox e de dupla camada, coeficientes de
difuso de portadores de carga, entre outros. A obteno de informaes a partir dos dados de
impedncia eletroqumica pode ser conduzida mediante a utilizao de diferentes modelos de
medida, como circuitos equivalentes ou modelos matemticos. A aplicao de circuitos
equivalentes tem como fundamento as similaridades entre o comportamento da clula
eletroqumica apresentada na figura 4.2. [51]



40


Figura 4.2 - (a) Clula eletroqumica tpica de trs eletrodos para uso em EIE: (1) eletrodo
auxiliar, (2) eletrodo de referencia, (3) eletrodo de trabalho. (b) diagrama esquemtico de um
circuito Randles super imposto interferncia eletrodo/eletrlito. (c) diagrama de EIE do
circuito (b) [51].

Uma equivalncia tpica entre um circuito equivalente e um sistema eletroqumico
apresentado na Figura 4.2. O comportamento similar da dupla camada eltrica a um capacitor
de placas paralelas, modelo de Helmholtz [51], e a resistncia transferncia de carga na
interface eletrodo/soluo a um resistor possibilita uma representao da interface por uma
associao em paralelo entre um resistor (Rct) e um capacitor (Cd), devido contribuio dos
processos faradicos e capacitivos. Uma vez que a corrente que passa na interface
eletrodo/soluo conduzida pelos ons em soluo, o efeito resistivo na soluo sobre a
migrao dos ons representado por uma resistncia R
W
. Por outro lado, a introduo de
elementos capacitivos em um circuito promove uma defasagem entre a corrente e o potencial.
Desta forma, uma representao comum para a impedncia em sistemas compostos por
resistores e capacitores atravs de um diagrama no qual a impedncia apresenta uma
componente real (resistiva) e imaginria (capacitiva).
A medida de impedncia eletroqumica pode ser feita de modo potenciosttico ou
galvanosttico, sendo que o potenciosttico da seguinte forma:


41

1: Ao se imergir o eletrodo de trabalho na soluo problema, inicia-se a
medida do potencial de circuito aberto. Aps um certo tempo de experimento perceber-se- a
estabilizao do potencial de circuito aberto, tambm chamado de potencial de corroso. A
partir deste potencial de corroso se escolhe uma + ou - para se aplicar no eletrodo de
trabalho, normalmente uma onde a curva de polarizao potenciosttica (E vs j) apresenta
linearidade.

2: Aps a escolha de a ser aplicado, escolhe-se a perturbao do potencial,
por exemplo, E
pert
(potencial de perturbao) de 10mV em relao ao potencial de
equilbrio, o potencial ser perturbado entre -10 a +10mV, ou seja, senoidalmente, como
apresentado na figura 4.3.

Figura 4.3 - Perturbao senoidal do potencial E.

A corrente ser perturbada senoidalmente na mesma freqncia que o potencial,
figura 4.4.


42


Figura 4.4 - Representao da perturbao do potencial (E) e da densidade de corrente (j).

O resultado das medidas ser registrado na faixa de freqncia estudada, por
exemplo, de 6 kHz a 1 mHz, resultando em um diagrama de impedncia eletroqumica, que
pode ser feito em relao ao substrato sem o filme depositado e com o filme. A apresentao
deste diagrama de EIE pode ser representado na forma Nyquist, como na figura 4.5.

Figura 4.5 - Diagrama de Nyquist representativo de EIE.


43

Nota-se na figura 4.5 a existncia de duas resistncias, R

e R
TC
, chamadas de
resistncia de soluo e de transferncia de carga. A resistncia de soluo distancia-se do
zero quanto menor a condutividade da soluo, enquanto a resistncia de transferncia de
carga pode aumentar quanto mais resistivo for o filme gerado na superfcie do eletrodo de
trabalho, ou seja, quanto mais passivo for o metal.

4.6.6 Anlise ptica

Aps o polimento e imerso das amostras metlicas no eletrlito com e sem
microorganismo, se registra a imagem microscpica da superfcie com diferentes aumentos
(ex. 50 x, 100 x) por meio de um microscpio ptico com intuito de se analisar a morfologia
da superfcie e comparar com os resultados gravimtricos e de polarizao.


4.6.7 Microscopia Eletrnica de Varredura (MEV)

O Microscpio Eletrnico de Varredura (MEV) um instrumento muito verstil
para a anlise microestrutural de materiais slidos. Apesar da complexidade dos mecanismos
para a obteno da imagem, o resultado uma imagem de muito fcil interpretao.
A grande vantagem do MEV em relao ao microscpio tico sua alta resoluo,
na ordem de 2 a 5 nm (20 50 ). Entretanto, no apenas esta caracterstica que faz do
MEV uma ferramenta to importante e to usada na anlise dos materiais. A elevada
profundidade de foco (imagem com aparncia tridimensional) e a possibilidade de combinar a
anlise microestrutural com a microanlise qumica so fatores que em muito contribuem para
o amplo uso desta tcnica [52].


4.6.8 Caracterizao do microorganismo

Neste trabalho empregou-se gua de um crrego com alta descarga orgnica (esgoto
domstico) para a obteno de amostras bacterianas. Uma alquota de 1mL da amostra foi
inoculada em um meio nutritivo composto por triptose, lactose, sais biliares, fosfato


44

monopotssico, fosfato dipotssico, cloreto de sdio e gua destilada, sendo incubado por um
perodo de 48 horas em estufa bacteriolgica a uma temperatura de 40C. Esta temperatura foi
mantida para a seleo de bactrias extremfilas (a maioria das bactrias preferem
temperaturas de crescimento de 37C). Aps este perodo, foram preparadas culturas desta
amostra em meio cido (pH=1) em uma diluio de 10% nas seguintes concentraes: 30% de
cido sulfrico a 0,5 mol L
-1
, 10% do meio nutritivo, 59% de gua destilada e 1% de
concentrado de bactrias, a qual foi colocada para incubar por 24 horas a 40C.
Para as primeiras identificaes das bactrias que cresceram em meio de pH 1, foi
utilizado o Manual BERGEY [53], sendo inicialmente pr-selecionados dois possveis
organismos, na forma de bacilos, sendo os dois Gram negativos e que poderiam crescer nestes
parmetros de pH e temperatura onde se realizaram os experimentos.
A identificao final se deu por meio de caldo especfico para o bacilo Acidithiobacillus
thiooxidans, composto dos seguintes sais: KH
3
PO
4
, MgSO
4
7H
2
0, (NH
4
)
2
SO
4
, CaCl
3
2H
2
O,
FeCl
3
6H
2
O diludo em gua destilada. J para o bacilo Acidithiobacillus ferrooxidans,
utilizou-se o meio composto dos seguintes sais: (NH
4
)
2
SO
4
, KCl, K
2
HPO
4
, MgSO
4
7H
2
0,
Ca(NO
3
)
2
, H
2
SO
4
a 10N e gua destilada para a diluio.
Os dois meios foram distribudos em tubos de ensaio e inoculados com 1mL do
concentrado obtido do meio nutritivo e incubados em estufa bacteriolgica a uma temperatura
de 36C por um perodo de trs a cinco dias. Caso um dos meios oferecer resultado positivo,
soluo ficar turva, indicando o resultado para o bacilo especificado.











45

5 - RESULTADOS E DISCUSSES


5.1 - Anlise qumica do ao inoxidvel ferrtico tipo ABNT 430

Na tabela 5.1 relatada a composio qumica do ao inoxidvel ferrtico tipo ABNT
430 utilizado no desenvolver deste trabalho.

TABELA 5.1 - Composio qumica em percentagem em peso do ao inoxidvel ferrtico tipo ABNT 430.
Elemento C Cr Ni Mn Si Co Mo S V
% m/m 0,30 17,60 0,23 0,50 1,23 0,50 0,28 0,25 0,40

Esta anlise qumica foi realizada pela Villares Metals.


5.2 Ensaios de identificao microbiolgica

O preparo da soluo concentrada de micro-organismos observado na figura 5.1.


Figura 5.1 - Tubo de concentrado de micro-organismos.

Conforme descrito no procedimento experimental: duas alquotas de 1 mL do
concentrado da figura 4.1, foram retiradas e colocadas em dois outros tubos para anlise e
inoculao de Acidithiobacillus Thiooxidans (TUBO 1) ou ferrooxidans (TUBO 2).


46

Aps o perodo de inoculao de 48 horas o resultado foi positivo para a bactria
Acidithiobacillus Thiooxidans, atravs da degradao do enxofre e a turvao do meio de
cultura, vide figura 5.2.

Figura 5.2 - Inoculao do micro-organismos para: TUBO 1 - Acidithiobacillus thiooxidans e
TUBO 2 - Acidithiobacillus ferrooxidans.

Para uma identificao mais precisa, foram preparadas quatro lminas para microscopia,
sendo todas coradas com a utilizao de azul de metileno a 1%, e visualizado em microscpio
ptico trinocular com captura de imagens em tempo real, atravs de cmara digital em um
aumento de 1000x, vide figuras 5.3.

Figuras 5.3: Bactria Acidithiobacillus Thiooxidans em aumento de 1000x com leo de
imerso.


47


Nota-se nas figuras 5.3, que as bactrias da espcie Acidithiobacillus Thiooxidans
so organismos unicelulares e com formatos de basto, com valor estimado de 1,0 a 1,5
m de comprimento. [53]

5.3 Ensaios gravimtricos e de microscopia ptica

Aps realizao dos ensaios gravimtricos na ausncia e presena de
microorganismos, executou-se o clculo mdio da perda de massa se calculou a
velocidade corroso do material em diferentes intervalos de tempo de imerso da amostra
do ao, a partir da equao I.


t A
m
V
corr
.

=
(equao I)
Onde:
V
corr
= velocidade de corroso (g. cm
-2
.min
-1
);
m = variao da massa (m
i
m
f
), ou seja m
i
= massa em gramas antes da
imerso e m
f
= massa final da placa em grama aps ensaio gravimtrico;
A = rea mdia da placa de ao (cm
2
);
t = tempo de imerso da placa (min).

Os resultados das medidas gravimtricas so apresentados na figura 5.4.


48


Figura 5.4 - Curvas gravimtricas para o ao inoxidvel 430 imerso em H
2
SO
4
1 mol L
-1
,
() sem e () e com microorganismos

Verifica-se na figura 5.4 que para o ao inoxidvel 430 imerso em H
2
SO
4
1 mol L
-1
, na
presena e ausncia de microorganismos, percebe-se que generalizando h uma oscilao da
velocidade de corroso na presena dos microorganismos em relao ao sistema sem os
mesmos, sendo melhor representada na figura 5.5.


Figura 5.5 - Curvas gravimtricas para o ao inoxidvel 430 imerso em H
2
SO
4
1 mol L
-1
,
() sem e () com microorganismos.



49


Fase I: Nos primeiros instantes, at aproximadamente 25 minutos h uma reduo da
velocidade de corroso do sistema com microorganismos em relao ao sem
microorganismos, isso pode ser provavelmente devido presena de
microorganismos na superfcie do ao;
Fase II: Entre 25 e 38 minutos h um aumento da velocidade de corroso em relao ao
sistema sem microorganismos, isso pode ser provavelmente devido nucleao do
biofilme em reas preferenciais da superfcie do ao, gerando como se fossem
micro-pilhas e acelerando o processo corrosivo do metal base;
Fase III: Dos 38 aos 75 minutos a velocidade de corroso volta a diminuir na presena de
microorganismos, provavelmente o biofilme seja gerado por quase toda superfcie
do metal causando um bloqueio em relao ao eletrlito minimizando a
velocidade de corroso;
Fase IV: Aps 75 minutos nota-se que a velocidade de corroso oscila, provavelmente
devido ruptura do biofilme em certas regies da superfcie do metal e em
seguida volta a se estabilizar.


O comportamento da velocidade de corroso averiguado para o sistema contendo
microorganismos ser menor do que o observado para o sistema sem m, pode ser por que o
procedimento de pesagem das placas de ao 430 nas medidas gravimtricas, eram feitos
apenas de lavagem com gua e secagem, e possivelmente o biofilme gerado ficava na
superfcie gerando um ganho de massa. Novos experimentos gravimtricos foram executados
em um tempo superior a 5 horas, ou seja 300 minutos, os corpos de prova aps este tempo de
imerso foram enxaguados com hipoclorito 10 %, gua e aps secos com ar frio, os resultados
so apresentados na figura 5.6.




50

0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
V
c
o
r
r
*
1
0
-
6

/

g
c
m
-
2
m
i
n
-
1

s
e
m
c
o
m

m
Meios

Figura 5.6 Velocidade de corroso para o para o ao inoxidvel 430 aps 5 horas de
imerso em H
2
SO
4
1 mol L
-1
., sem () e com () microorganismos.

Os resultados apresentados na figura 4.6 mostram que na presena de m h uma
acelerao do processo oxidativo do ao 430 em meio de H
2
SO
4
1 mol L
-1
. Outra importante
anlise sobre os resultados das figuras 5.4 e 5.6. verificado que a dissoluo do ao aumenta
como tempo, ou seja na ausncia ou presena do microorganismo a corroso deste ao em
H
2
SO
4
1 mol L
-1
de ordem zero, sugerindo que o mecanismo de gerao do biofilme do
microorganismo na superfcie do ao 430 tambm seja de ordem zero.
Ensaios pticos foram realizados para amostras do ao 430 e so mostradas na figura
5.7 (A) a (C).



51


(5.7 A) Aumento de 200 x.


(5.7 B) Aumento de 200 x.


52


(5.7 C) Aumento de 200 x.

Figura 5.7 - Fotomicrografias pticas da amostra de ao 430 polida (A), com imerso de 180
minutos em meio de H
2
SO
4
1 mol L
-
, sem (B) e com microorganismos (C).

Verifica-se atravs das fotomicrografias pticas apresentadas na figura 5.7, que as
amostras de ao 430 no meio com e sem microorganismos, esto bem oxidadas. Deve-se
ressaltar que os microorganismos aderem inicialmente superfcie criando um biofilme que
no pode ser visto com esta tcnica ptica.
A nucleao de biofilmes na superfcie do ao 430 em H
2
SO
4
1,0 mol L
-1
registrada na
Figura 5.8.



53


Figura 5.8 - Micrografias pticas de 5 em 5 segundos, da nucleao de biofilme na superfcie
do ao inoxidvel 430 aps imerso em H
2
SO
4
1 mol L
-1
com microorganismos, aumento de
200x: () ponto inicial de uma nucleao, () ponto aps 30 segundos.



Na figura 5.8 nota-se que na regio do crculo amarelo, nos primeiros segundos no
existe nucleao de biofilme na superfcie do ao 430, aps 30 segundos no circulo verde,
observa-se a nucleao do biofilme.



54

5.4 Ensaios Eletroqumicos

Medidas de potencial de circuito aberto foram levantadas para os sistemas em estudo e
so apresentadas na figura 5.9 e na tabela 5.2.

-0,96
-0,95
-0,94
-0,93
-0,92
-0,91
-0,9
-0,89
-0,88
-0,87
-0,86
0 10 20 30 40 50 60 70
t / min
E

/

V

v
s
.

E
S
M

Figura 5.9 Curva de potencial de circuito aberto para o ao 430 em H
2
SO
4
1 mol L
-1
, sem
microorganismos.

Nota-se na figura 5.9 que a evoluo do potencial de circuito aberto para o ao 430 em
H
2
SO
4
1 mol L
-1
no sentido catdico. Tal comportamento semelhante para o sistema
contendo m e o valor de Ecorr para os dois sistemas muito parecido, vide tabela 5.2.


Tabela 5.2 - Potenciais de corroso do ao 430 em meio de H
2
SO
4
1 mol L
-1
sem e com microorganismos.

H
2
SO
4
1 mol L
-1
com E.C. E
corr
(V) vs. ESM
Sem m -0,949 5
Com m -0,943 5



55

A tabela 5.2 mostra que com a adio de microorganismos em meio de H
2
SO
4
1 mol
L
-1
, o valor do potencial de corroso no sofreu alterao significativa.
Curvas de polarizao potenciosttica andica foram levantadas para os sistemas em
estudo e so apresentadas nas figuras 5.10 a 5.12.
0
0,01
0,02
0,03
0,04
0,05
-1 -0,5 0 0,5 1 1,5
E vs. ESM / V
j

/

A
c
m
-
2

Figura 5.10 Curva de polarizao potenciosttica andica para o ao 430 em H
2
SO
4
1 mol
L
-1
, com microorganismos.

Analisando a curva de polarizao potenciosttica andica para o ao 430 em H
2
SO
4
1
mol L
-1
sem microorganismos, nota-se a existncia de regio ativa, passiva e transpassiva,
regies estas citadas na figura 3.1.
Nas figuras 5.11 e 5.12 so apresentadas as regies ativa e transpassiva das curvas de
polarizao potenciostticas andica para o ao 430 em H
2
SO
4
1 mol L
-1
, com e sem
microorganismos, nota-se a existncia de regio ativa.


56

0,00E+00
1,00E-02
2,00E-02
3,00E-02
4,00E-02
5,00E-02
6,00E-02
-1 -0,9 -0,8 -0,7 -0,6 -0,5
E/ V Vs. ESM
j

/

A
.
c
m
-
2

Figura 5.11 - Regio ativa de curvas de polarizao potenciosttica andica do ao inox 430
em de H
2
SO
4
1 mol.L
-1
,. () sem e () com microorganismos.


Verifica-se na figura 5.11 que a adio de microorganismos ao sistema aumenta a
densidade de corrente, mostrando que os microorganismos possuem um efeito cataltico na
oxidao do ao inox 430 em meio de H
2
SO
4
1 mol L
-1
nos primeiros potenciais. Entretanto,
ao se atingir o potencial de pico nota-se a reduo da densidade de corrente em relao ao
sistema sem microorganismos, possivelmente o biofilme facilite o processo de passivao do
ao 430, regio para a qual a curva andica se direciona.
Curvas de polarizao potenciosttica andica na regio transpassiva para os sistemas em
estudo so apresentadas na figura 5.12.


57


-1,00E-04
4,00E-04
9,00E-04
1,40E-03
1,90E-03
2,40E-03
2,90E-03
0,35 0,45 0,55 0,65 0,75
E / V vs. ESM
j

/

A
.
c
m
-
2

Figura 5.12 - Regio transpassiva das curvas de polarizao potenciosttica andica do ao
430 em meio de H
2
SO
4
1 mol L
-1
, () sem e () com microorganismos.


Na figura 5.12 verifica-se que na regio transpassiva, que o sistema contendo
microorganismos apresenta maior densidade de corrente.
Os resultados das figuras 5.10 a 5.12 sugerem que o biofilme formado na superfcie do
ao 430 em H
2
SO
4
1 mol L
-1
, pode acelerar o processo de oxidao do ao, provavelmente
devido gerao de micro-pilhas geradas pela nucleao, (incio da regio ativa) ou pelo
desplacamento do biofilme (regio transpassiva).

Diagramas de impedncia eletroqumica tipo Nyquist e de ngulo de fase de Bode so
apresentados nas figuras 5.13 e 5.14.


58


Figura 5.13 - Diagramas de Nyquist no E
corr
para o ao inoxidvel 430 em H
2
SO
4
1 mol L
-1
,
() sem microorganismos e () com microorganismos.

Os valores de impedncia da figura 5.13 mostram que o material no est passivo, uma
vez que se registra um arco capacitivo completo. Nota-se a existncia de um arco indutivo,
que atribudo a uma corroso intensa no material metlico. [59]
O arco indutivo normalmente atribudo a meios que tem adsoro ou a meios
agressivos, impedncias baixas normalmente justificam o efeito indutivo de dissociao.
Verifica-se que no meio contendo microorganismos houve uma diminuio no
tamanho do arco em relao ao meio que no os continha, mostrando que a corroso mais
acentuada para o meio com microorganismos.


59



Figura 5.14 - Diagramas de ngulo de fase Bode no E
corr
para o ao inoxidvel 430 em H
2
SO
4

1 mol L
-1
, () sem e () com microorganismos.


Observa-se na Figura 5.14 uma constante de tempo em freqncias prximas de 100
Hz a 10Hz, indicando transferncia de carga na superfcie. Os maiores ngulos de fase foram
medidos para o sistema sem microorganismos.
A presena do arco indutivo de Nyquist pode ser confirmada pela obteno de ngulos
de fase negativo em freqncias abaixo de 0,1 Hz.



60

5.5 Ensaios de microscopia eletrnica de varredura

Anlises por microscopia eletrnica de varredura da superfcie do ao 430 polida, aps
imerso nos diferentes meios estudados e aps a execuo da polarizao cclica, foram
executadas e so apresentadas nas figuras seguintes.


Figura 5.15 Imagem gerada por microscpio eletrnico de varredura para o ao inoxidvel
430 com a superfcie polida at pasta diamante de 1 m.



Na figura 5.15 nota-se a presena de incluses brancas, poucas alongadas
caractersticas de MnS e muitas arredondadas caractersticas de xidos [54]. Para se
evidenciar qual o tipo de xido fez uma anlise via EDAX de uma das incluses, figura 5.16,
o resultado apresentado na figura 5.17.


61


Figura 5.16 Imagem gerada por microscpio eletrnico de varredura para o ao inoxidvel
430 com a superfcie polida at pasta diamante de 1 m.


Figura 5.17 Anlise por EDAX da incluso da figura 5.16.

Verifica-se na figura 5.18 que a incluso parece ser de um xido misto de cromo e ferro.


62


Figura 5.18 Imagem gerada por microscpio eletrnico de varredura para o ao inoxidvel
430 aps imerso por 1 hora em H
2
SO
4
1 mol L
-1
sem
microorganismos.

Figura 5.19 Imagem gerada por microscpio eletrnico de varredura para o ao inoxidvel
430 aps imerso por 1 hora em H
2
SO
4
1 mol L
-1
com microorganismos.


63


Verifica-se na microscopia da figura 4.19 em relao figura 4.18 que na presena de
microorganismos, o metal base apresenta-se bem oxidado com a gerao de um biofilme na
superfcie do ao.
Novas imagens da superfcie por MEV do ao 430 foram geradas aps dois tipos
diferentes de polarizaes andica na regio passiva:

1
o
Polarizao andica Esttica: aplica-se um potencial (E) fixo de 0 V, por 3000
segundos, ao eletrodo de trabalho de ao 430 em relao ao eletrodo de referncia sulfato
mercuroso (ESM), imerso em H
2
SO
4
1 mol L
-1
, () com microorganismos. Para melhor
entendimento a esquematizao desta polarizao apresentada na figura 4.20.

Figura 5.20 Representao esquemtica da polarizao andica esttica para o ao 430
imerso em H
2
SO
4
1 mol L
-1
, () com microorganismos.

2
o
Polarizao andica cclica (PAC): aplica-se um potencial varivel de + 100 mV,
por 3000 segundos, ao eletrodo de trabalho de ao 430 em relao ao eletrodo de referncia
sulfato mercuroso (ESM), imerso em H
2
SO
4
1 mol L
-1
, () com microorganismos. Velocidade
de varredura de 0,2 mVs
-1
. Para melhor entendimento a esquematizao desta polarizao
apresentada na figura 5.21.



64


Figura 5.21 Representao esquemtica da polarizao andica cclica para o ao 430
imerso em H
2
SO
4
1 mol L
-1
, () com microorganismos.

As imagens geradas do ao 430 aps as polarizaes citadas anteriormente so
apresentadas nas figuras 5.22 a 5.24.

Figura 5.22 - Microscopia eletrnica de varredura da superfcie do ao 430 aps imerso em
H
2
SO
4
1 mol L
-1
com microorganismos, e polarizao andica esttica.


65


Figura 5.23 - Microscopia eletrnica de varredura da superfcie do ao 430 aps imerso em
H
2
SO
4
1 mol L
-1
com microorganismos, e polarizao andica esttica.


Figura 5.24- Microscopia eletrnica de varredura da superfcie do ao 430 aps imerso em
H
2
SO
4
1 mol L
-1
com microorganismos, e polarizao andica cclica. Aumento de 2500x.


66



Verifica-se nas figuras 5.22 e 4.23, que na polarizao andica esttica, a nucleao do
biofilme no substrato metlico continua a ocorrer, enquanto que na figura 4.24 nota-se que a
polarizao andica cclica, PAC, impede a nucleao dos microorganismos na forma de
biofilme na superfcie do ao 430, imerso em H
2
SO
4
1 mol L
-1
, desta forma agindo como um
processo inibidor da corroso microbiolgica para este ao no meio estudado. Outra
importante observao em relao a figura 5.24 em relao a existncias de buracos na
superfcie do metal, aps a PAC, isto provavelmente ocorre devido a dissoluo de algumas
incluses pr-existentes no cido 430.



67

6 - CONCLUSES


O microorganismo retirado do rio e empregado nas medidas experimentais deste
trabalho o Thiobacillus Thiooxidans;

O Thiobacillus Thiooxidans gera biofilmes na superfcie do metal, sendo que nos
primeiros 25 minutos h a diminuio da velocidade de corroso do ao 430, imerso em
H
2
SO
4
1 mol L
-1
, mas aps esse tempo a intensidade de corroso aumenta e depois volta
a diminuir. Esta oscilao atribuda a gerao e rompimento do biofilme na superfcie
do ao 430;

Nas medidas de espectroscopia de impedncia eletroqumica h uma diminuio da
resistncia de polarizao do ao inoxidvel 430 em H
2
SO
4
1 mol L
-1
com Thiobacillus
Thiooxidans , sugerindo uma acelerao do processo corrosivo;

A polarizao andica potenciosttica do ao inoxidvel 430 em H
2
SO
4
1 mol L
-1
com
Thiobacillus Thiooxidans favorece a formao de um biofilme na superfcie metlica;

A polarizao andica cclica (PAC) do ao inoxidvel 430 em H
2
SO
4
1 mol L
-1
com
Thiobacillus Thiooxidans, dificulta a formao do biofilme, podendo ser utilizada
como processo inibidor de corroso microbiolgica para este ao neste meio;

A corroso do ao 430 em H
2
SO
4
1 mol L
-1
com Thiobacillus Thiooxidans, do tipo
generalizada, entretanto quando se aplica a PAC nota-se a dissoluo de pontos
preferenciais, ou seja, localizados. Esses pontos de corroso localizados so atribudos a
dissoluo das incluses presentes no material metlico.



68

7 - SUGESTES DE TRABALHOS FUTUROS


Trabalhar com diferentes microorganismos e com variao de pH (6, 7 e 8);

Estudar a aplicao de biocidas e a eficincia da bioeletroqumica aplicada inibio de
biofilmes em superfcie de metais;

Estudar ps-aplicao da bioeletroqumica e do biocida a contagem de microorganismos
em diferentes diluies.


69

8 - REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

1- Rodrigues, P. R. P. O Benzotriazol como inibidor de corroso para ferro e ligas
ferrosas em meios de cido sulfrico, Tese de doutorado apresentada ao IQUSP, 2007;
2- Mrio Carb, H.. Catlago Acesita. Ao Inoxidvel Aplicaes e especificaes, volume
nico, 2001;
3- Noemi. Gonalves, I. Catlago Acesita, 3. ed. Caractersticas Bsicas e Cuidados dos
Aos Inoxidveis, volume nico, 2001;
4- CUNHA. M.T , Dissertao de mestrado, Universidade de So Paulo, Brasil, 2003;
5- RAINHA, V. L. e FONSECA, I. T. E.; Corrosion Science, Vol. 39, N. 4, pp. 807-813,
1997;
6- JONES, Denny A. Principles and prevention of corrosion. 2
a.
Ed. New Jersey: Prentice
Hall, 1996;
7- W. P. Iverson, Adv. App. Microbial. 32, 1,1987;
8- W. Sand, Werkstoffe und korrosion 45, 10, 1994;
9- C.A.H. Von Wolzogen Kuhr and L.S. Van der Vlugt, Water (The Hague) 18, 147,1934;
10- B. Little, P. Wagner and F. Mansfeld, Eleclrochim. Acta 37, 2185, 1992;
11- T. Ford and R. Mitchell, Adv. Microbial. Ecology,11, 231, 1990;
12- R.A. King and J.D.A. Miller, Nature 233, 491, 1971;
13- J.A. Costello, South Afr. J. Sci.,70, 202, 1974;
14- V. Gentil, Corroso. 4 Edio. Rio de Janeiro: LTC, 1987;
15- Myers et al, Environmental services of biodiversity. Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 93(7):
2764-2769, 1996;


70

16- Schimel et al, Ecosystem consequences of microbial diversity and community structure.
Ecol. Stud., 113: 239-254, 1995;
17- Staley, J. T. & Gosink, J.J.. Poles apart: biodiversity and biogeography of sea ice
bacteria. Annual Review of Microbiology, 53: 189215,1999;
18- Costerton, J. W.; Lewandowski, Z.; Caldwell, D. E.; Korber, D. R.; Lappin Scott, H. M.
Microbial biofilms. Annu. Rev. Microbiol. 45, 711-745, 1995;
19- Characklis, W. G., Marshall, K. C. Biofilm: A basis for an interdisciplinary approach.
In: Characklis, W. G., Marshall, K. C (eds) Biofilms. John Wiley and Sons Inc. New
York, 1990;
20- Characklis, W. G., Wilderer, P. A. Structure and Function of Biofilms. New York: John
Wiley & Sons, 1989;
21- Flemming, H. C. Biofouling in water treatment. In: Flemming, H-C e Geesey, G. G. eds.
Biofouling and Biocorrosion in Industrial Water Systems. Heidelberg, Springer-Verlag,
47-80, 1991.
22- Nascimento T., Taveira N. Os Biofilmes Microbianos como Agentes Causais de
Doenas Humanas, Revista o Bilogo, Ed. Universidade de Lisboa , Instituto Superior
de Cincias da Sade Sul 2003.
23- R.A. Atlas, R. Bartha, Microbial Ecology: Fundamentals and Application, fourth ed.,
Addison Wesley Longman, pp. 425437, 1998;
24- E. Vincke, E.V. Wanseele, J. Monteny, A.N.D. Belie, Influence of polymer addition on
biogenic sulphuric acid attack of Beeldens concrete, International Deterioration and
Biodegradation, 49, 283292, 2002;
25- A.F. Idriss, S.C. Negi, J.C. Jofrier, G.L. Hayward, Effect of hydrogen sulphide emissions
on cement mortar specimens, Canadian Biosystem Engineering, 43, 2528, 2001;


71

26- TPC 12 NACE International, Coal tar epoxy coating a state of the art review, Houston,
TX [8] Ameron International, T-Lock PVC sheet liner for concrete pipe and
structures R9-96, Brea, 1996;
27- A. Beeldens, J. Monteny, E. Vincke, N. De Belie, D. Van Gemert, L. Taerwe, W.
Verstraete, Resistance of biogenic sulphuric acid corrosion of polymer-modified mortars,
Cement and Concrete Composites, 23, 4756, 2001;
28- N. De Belie, J. Monteny, A. Beeldens, E. Vincke, D. Van Gemert, W. Vestraete,
Experimental research and prediction of the effect of chemical and biogenic sulphuric acid
on different types of commercially produced concrete sewer pipes, Cement and Concrete
Research, 34, 22232236, 2004;
29- J. James, Controlling sewer crown corrosion using the crown spray process with
magnesium hydroxide, in: Underground Construction Technology Conference,
Houston, TX, 2003;
30- S.Vaidya, C. Montes, E.N. Allouche, Use of Nanomaterials for Concrete Pipe
Protection, in: International Pipelines Conference, The Westin Boston Waterfront,
Boston, MA, 2007;
31- E. Hewayde, Investigation on degradation of concrete sewer pipes by sulphuric acid
attack, PhD Thesis. Faculty of Engineering, University of Western Ontario, 2005;
32- Calandra, P. F. - "O desenvolvimento de novas ligas inoxidveis resistentes corroso
para as indstrias de processamento", II o. Simpsio Sul-americano de corroso
metlica, A.B.C., I.B.P., 175-192, R.J., 1971.
33- D. Weng et al, Surface and Coatings Technology, 88, 147-156, 1996;
34- B Muller et al, Corrosion Science, V. 38, No. 7, p.1103-1108, 1996;
35- P. R. P. Rodrigues et al, Anais do International Symposium on Electrochemical
methods in Corrosion Research EMCR97, Trento Itlia, 25 a 29 de agosto, 1997;


72

36- Paulo R. P. Rodrigues et al, XI SIBEE Simpsio Brasileiro de Eletroqumica e
Eletroanaltica, P 054, p. 547-550, 05 a 09/ 04/, Maragogi - Alagoas, Brasil, 1999;
37- Tseng, Chuan-Ming e Tsai, Wen-Ta, Materials Chemistry and Physics, Volume 84,
Issue 1, March, p. 162-170, 2004;
38- Dagbert, C. ; Meylheucb, J.; Bellon, M. E; Fontaineb, Electrochimica Acta, 54, p. 3540,
2008;
39- Ernst, P. , Newman, R. C.; Pit growth studies in stainless steel foils. I. Introduction and pit
growth kinetics, Corrosion Science, 44 (5), p. 927, 2002;
40- Song, F. M. And Sridllar, N. , Corroson Science, Volume 50, p. 70-83, 2008;
41- Eric, J.R.; Eletech Research., p. 625,1998;
42- Lipp, L.; Pletcher, D.; Electrochim. Acta, 42, p.1091, 1997.
43- Sharma, A. P., Battersby, N. S, and Stewart, D. J.; rapid method for determining the
sensitivity of sulphatereducing bacteria to biocides, GERBAM Deuxime Colloque
International de Bactriologie marine CNRS, Brest, 1-5 octobre 1984, IFREMER,
Actes de Colloques, 3, pp. 617-619, 1986;
44- Lovley, D. R., and E. J. P. Phillips. Novel mode of microbial energymetabolism: organic-
carbon oxidation coupled to dissimilatory reduction of iron or manganese. Appl. Environ.
Microbiol., 54, p. 14721480, 1988;
45- DAVIS, P.W.; SOLOMON, E.P.; BERG, L.R. The World of Biology. Saunders College
Publishing, p. 928, 1990.
46- BREWIS, T. Extracin de metales por oxidacin bacteriana. MINING, Abril 1996;
47- ESTEBAM, M; DOMIC, M Em: Hidrometalurgia Fundamentos, Processos y
Aplicaciones. Cap. 11,Miguel & Mihovilovic. Santiago, 2001;


73

48- Bossolan, N. R. S.; Introduo microbiologia, apostila da disciplina Biologia 3,
Universidade de So Paulo, Instituto de Fsica de So Carlos, So Carlos So Paulo,
Brasil, 2002.
49- Fonte pesquisada na rede internet em 28/08/2008:
http://www.infoescola.com/imagens/faecimg_monera5.gif;
50- Pelczar, M. J. Jr; Chan, E. C. S. e Krie, N. R., Microbiologia, Ed. MacGraw Hill, v.1,
p.1072 , 1980;
51- Bard, A. J. e FAULKNER, L. R., Electrochemical Methods: Fundamentals and
Applications, New York: Wiley, p. 520, 1980;
52- Reed, S. J. B., Electron Microprobe Analysis and Scanning Electron Microscopy in
Geology, New York: Cambridge University Press, p. 201, 1996;
53- Bergey, D. H. and Holt, J. G. - Bergey's Manual of Determinative Bacteriology, Ed.
Lippincott Williams & Wilkins, p. 787, 1994.
54- Colpaert, H. , Metalografia dos produtos siderrgicos comuns, Ed. Edgard Blucher, 3a
edio, 186, (1974);
55- Gayosso, M. J. H,; Olivares, G. Z.; C. Jurez Ramirez, N. R. O.;Esquivel, R. G. e
Viveros, A. P. - Electrochimica Acta, 49, p. 42954301, 2004;
56- Linhardt, P. - Electrochimica Acta, 51, p. 60816084, 2006;
57- Keresztes, Zs.; Telegdi, J.; Becznerb, J. and Kilmham, E. -Ekctrochimica Acta, Vol. 43,
Nos. 1-2, pp. 77-85, 1998;
58- Kuang, F.; Wang, J.; Yan, L. and Zhang, D.- Electrochimica Acta, 52 , p. 60846088,
2007.
59- Keddam, M., Mattos, O. R. and Takenoutti, H., J. Electrochem. Soc.,
128:257, 266, ( 1981).