Jornal internacional do produto farmacutico 454 (2013) 599-610

Li st a de ndi ces di sponvei s no verso Sci enceDi rect de Sci

Jornal internacional do produto farmacutico
ho nal do ur de j o mi m pgi na: www. el s ev i er . c om/ l oc at e/ i j phar m


Lquidos de Nanostructured das misturas do pluronic
Zhanga mnimo
, b
, Madeleine Djabourovb, Claudie Bourgauxa, Kawthar Bouchemala
,
^
um Universit Paris - Sul, Sul de Institut Galien Paris, UMR CNRS 8612, Facult de Pharmacie, 5, rua J.B. Clment, cedex de 92296 Chtenay-Malabry, France
b Laboratoire de Fsico Thermique, ESPCI, quelin de Vau de 10 ruas, cedex 05 de 75231 Paris, France

um r t i c l e i N-F o uma A.A. t de b s t r
Histria do artigo:
10 de dezembro de 2012 recebido
Recebido formulrio no 14 de janeiro de
2013 aceitado 10 de janeiro de 2013 revisado
28 de janeiro de 2013 acessvel em linha
Micellization e a gelificao de misturas binrias de E O 9 9 P O 6 9 E O 9 9 (pluronic F127) e de
EO80PO27EO80 (pluronic F68) em solues aquosas foram investigados por meio da calorimetria e
do rheology da explorao do micro-diferencial e para uma concentrao total do copolmero reparada
em 20 WT %. O alvo desta investigao determinar a interao entre o mi cellization e a gelificao
macroscpica das solues misturadas. Micro-DSC revela a formao de duas populaes distintas
nas misturas F127/F68 durante o aquecimento e refrigerar subseqente das solues. As entalpia do
micellization de cada copolmero e das temperaturas respetivas do incio permaneceram constantes
aps a mistura indicando a predominncia de dois processos independentes de micellization nas
misturas. O F127 exibe uma transio da cristalizao, em uma temperatura distinta que persista,
mas aumenta nas misturas com concentraes mais altamente de 10 WT %. As medidas
Rheological foram executadas durante rampas do aquecimento ou aps perodos da maturao
contra a freqncia. Mostraram dois tipos de transies da gelificao: qualquer um um aumento
ngreme do armazenamento e dos mdulos da perda, que corresponde temperatura da cristalizao
dos micelles F127 ou de uma transio de bloqueio progressiva quando nenhum cristal puder dar
forma. O processo de maturao tem um efeito principal nas propriedades rheological dos geles
misturados, possivelmente relacionadas aos rearranjos locais das duas fases micellar. Esta
investigao destaca as caratersticas originais das misturas binrias do pluronic, comparadas aos
efeitos da diluio de nicas solues aquosas componentes.
Palavras-
chaves:
Pluronic
Micellization
Calorimetria
Rheology
Nanostructure

2013 Elsevier B. V. . Todos os direitos reservados.
I n t r o d u o
Os copolmeros Amphiphilic do triblock com Eternidade-POm-
Eternidade das composies do bloco (onde o EO refere o xido de
etileno e o PO ao xido do propylene) so estudados
extensivamente. Concorda-se bem que durante o aquecimento da
ruptura de ligaes de hidrognio de poli (propyleneoxide) (PPO)
conduz a um aumento do hydrophobicity quando (ethyleneoxide)
(PEO) as correntes polis permanecerem hidrfilas (Alexandridis e
outros, 1994). Quando a relao n/m maior de 0. 5 e acima dos
micelles esfricos de uma concentrao crtica do micelle esto
dados forma com um ncleo hydrophobic e uma corona hidrfila
(Wanka e outros, 1994). Estes copolmeros de bloco atualmente
so produzidos com vrios comprimentos de seqncias do EO ou
do PO e sabidos sob seus nomes de comrcio do pluronic ou do
poloxamer. So teis como materiais biocompatible para aplicaes
do cuidado biomedicvel e pessoal principalmente por causa de suas
propriedades da gelificao. Certamente, em concentraes elevadas
de copolmeros as solues aquosas exibem uma mudana
dramtica dos mdulos viscoelastic e transformam-se slidos ou
geles macios. A habilidade de ajustar t emperat uras da formao
do gel para sistemas de entrega da liberao da droga atraiu a
ateno considervel.
Autor correspondente do ^. Telefone.: +33 01 46 83 55 81; fax: +33 01 46 61
93 34. Email address: kawthar.bouchemal@u-psud.fr (K. Bouchemal).
0378-51 73/$ - ver o do exame preliminar Elsevier 2013 B.V. Todos os
direitos reservados. http://dx.doi.org/10.1016/j.ijpharm.2013.01.043
O uso das misturas de copolmeros de bloco do pluronic
considerado como uma estratgia modular propriedades estruturais
e rheological sem a necessidade de sintetizar molculas novas.
Interessante, ns demonstramos nos trabalhos anteriores que a
t emperat ura de coagulao ( T g e l ) pode ser modulada variando a
concentrao de E O 9 9 P O 6 9 E O 9 9 (pluronic F127) mas igualmente variando
a proporo entre dois o pluronics F127 e F68 (
E O 8 0 P O 2 7 E O 8 0
) (Aka-
Algum-Grah e outros, 2010). A diminuio de T g e l com aumento da
concentrao do polmero F127 para o pluronics um resultado
previsto. Certamente, quando F127 est sozinho na soluo aquosa,
sua gelificao explicada pela organizao dos micelles do
pluronic para dar forma a um gel altamente viscous e elstico
(Pham Trong e outros, 2008). Entretanto, ns igualmente
observamos que T g e l estve diminudo quando a proporo de F68 foi
aumentada na formulao compor de F127/F68 (Aka-Algum-Grah e
outros, 2010).
Basicamente, duas vistas de oposio foram suportadas quando
as misturas do pluronics dois foram est udadas: micellization
coperativo dos dois copolmeros (formao misturada do micelle)
com as interaes favorveis entre os componentes desiguais ou
coexistncia de duas populaes distintas dos micelles que montam
cada componente independente.
No primeiro caso, o micellization coperativo foi relatado para
misturas de dois copolmeros que contm os comprimentos chain da
corona similar, mas blocos do ncleo com comprimentos chain
diferentes. Este o argumento para


Newby e outros (2009) quem i nvesti garam misturas binrias dos
copol meros P85 (
E O 2 6 P O 4 1 E O 2 6
) e P123 do pluronic ( E O 2 0 P O 7 2 E O 2 0 ) . As
dimenses do Mi cel l e foram sondadas pela di sperso de luz
dinmi ca. Os aut ores encont raram que o rai o hidrodinmico dos
micelles para a mistura de 50/50 mai or do que aquel e para P85
ou P123 sozi nho, devi do formao de micelles mi sturados com
um nmero de associao mais elevado. Em uma out ra vei a,
Gai sford e out ros (1997) est udou as mi st uras bi nri as do
pluroni c selecionadas de uma srie que contem a mesma relao
de PEO:PPO (70% PEO, 30% PPO) e peso moleculares polymeric
de variao. As amost ras do pluronic para seu estudo era m F77,
F87, e F127. Por causa das diferenas nos peso moleculares, cada
copolmero teve um nmero diferente de unidades de PPO. Os
dados demonstraram que as misturas binrias 50%/50% de F77/F87
mostraram a agregao coperativa sobre a escala de concent rao
experi ment al. Est es doi s polmeros t m a composio simi lar do
bloco do ncleo e um PPO:Relao de PPO de 0.96. Entretanto, 1: 1
das mi st uras bi nri as de F77/ F127 e de F87/ F127 que t m
PPO:Relaes de PPO de 0. 54 e de 0.56 mostrados respetivamente
a agregao non-cooperative porque a composi o dos pol meros
era marcada diferente. Conseqentemente, a diferena no
micelli zati on parece ser dependent e de PPO: os pol meros que
t m part es si mi lares de PPO most raram a agregao coperativa e
as aquelas que t m o emperrament o non-cooperat i ve das part es
di ferent es de PPO.
Embora o mi celli zat i on e a geli ficao de copol meros
i ndi viduais do pluroni c sejam investi gados ext ensi vament e,
distant e poucos estudos so sabidos em mi sturas das solues
F127 e F68 do pl uroni c. O al vo dest a i nvest i gao
det ermi nar a i nt erao ent re o micelli zati on e a geli ficao
macroscpica das solues mi st uradas de F127 e o F68. As
solues t m uma concent rao t otal fi xa de 20 WT % e cont m
vrias propores do pluronics est es doi s. So int ei ramente
t ransparent e dent ro da escala das t emperaturas e das propores
i nvest i gadas. As experi nci as so baseadas pri nci pal ment e no
microcalorimet ry e no rheology. Diversos aspet os que levantaram
cont rovrsi as em out ros si st emas so exami nados :
Ant es de mai s nada, se est e si st ema gera mi cel l es mi st urados
ou i ndi vi duai s quando aqueci do.
Como carat eri zar as propri edades el st i cas do gel com uma
aproxi mao ri gorosa?
Que a est rut ura do gel em si st emas mi st urados?
Em linhas gerai s, import ant e i denti ficar as carat er sti cas
espec ficas associ adas aos l quidos nanost ructured, com as
fraes do volume alt o dos micelles, comparadas s solues de
molculas pequenas ou s suspenses concentradas das esferas
contnuas cujo o comportamento foi rel at ado mai s
si st emat i cament e na li t erat ura.
M a t e r i a i s e m t o d o s
Mat eri ai s
Os copol meros F127 (pol oxamer P407, E O 9 8 P O 6 9 E O 9 8 ) e F68 de
Pl uroni cs (pol oxamer P188, E O 8 0 P O 2 7 E O 8 0 ) d a classe farmacut i ca foram
comprados da BASF. De acordo com o fornecedor, os peso
mol ecul ares da mdi a de peso so 13. 498 mol (9840 -14. 600
g/ mol ) para o pluroni c F127 e 8902 g/ mol (7680 -9510 g/ mol )
para o pl uroni c F68. A gua de Mi l l i Q usada para a
preparao das solues foi obtida usando o si st ema da
puri fi cao do mi llipore (mi l li pore, France).
Preparao da amost ra
As solues das formulaes foram preparadas using
o
mt odo
fri o previament e descri t o

mas usando um agi t ador magnt i co
em vez do mecnico (Koffi e outros, 2006; Aka-Algum-Grah e
outros, 2010; Bouchemal e out ros, 2009) .
Para a preparao dos hydrogels que contm F127 ou F68 sozinho,
o p do pluronic foi adici onado gradualment e sob a agi tao
magnt ica fase da fri o-gua conti da em um banho de gelo ( ^C)
0-5. A concent rao final de pluroni c no hydrogel foi vari ada
como 10, 16, 17 e 20 WT %.
Para a preparao dos hydrogels compor das misturas F127 e
F68, a concent rao fi nal de pluroni c foi mant i da const ant e
(20 WT %) quando a proporo de F127/ F68 na prepa rao foi
vari ada como 0/ 20, 3/ 17, 5/ 15, 10/ 10, 17/ 3, 18/ 2, 19/ 1 e 20/0
de WT %. As preparaes diferent es foram denominadas por
dois nmeros que indicam a porcentagem do peso do pluronic
F127 e do pl uroni c F68 respet i vament e.
Mt odos da carat eri zao
Mi cro-DSC
As Mi cro-DSC experi ncias foram reali zadas com um
calormet ro Micro-DSC III Setaram (Caluire, France) (Aka-Alguns-
Grah e outros, 2010; Pham Trong e out ros, 2008). As pilhas usadas
eram o tipo de grupo (1 mL). Duas pi lhas vazi as com os tampes
foram pesadas aps a secagem completa e as junes foram
escolhidas obter a mesma massa (magnsio 0.2). A referncia
(gua destilada) e a amostra foram introduzidas s pilhas na
temperatura ambi ente e pesadas para a massa idntica (magnsi o
0.3). Aps sua i nt roduo no forno na t emperatura ambi ent e, a
t emperat ura do forno foi abai xada at 5^C com
1 ^C/min, e foi mantido ento nesta t emperatura constante para
estabi li zar o fluxo de calor. Aps o esse, uma varredura da
temperatura foi executada em +0.1 ^C/min at 70^C. Finalmente, as
amostras foram mantidas 1 h em 70^C para balanar outra vez o
fluxo de calor antes do comeo do derretimento com
0. 1 ^C/min a 5^C.
Rheol ogy
Rampa da t emperat ura: t odas as medi das rheol ogi cal foram
execut adas em um rheomet er controlado do esforo AR-G2
(instrument os de Ta) using uma geometria da cone-placa (o
dimetro 6 cm, ngulo 2^, abre o ^m) 54. Uma armadi lha solvente
manteve uma atmosfera solvente-saturada em t orno da pilha, e a
evaporao no era significativa para as t emperaturas e as
escal as de t empo i nvest i garam.
As experi ncias osci lat rias (ou dinmicas) foram reali zadas.
Uma t esoura sinusoidaa foi apli cada amost ra, onde o esforo (t)
e a t e n s o ( t ) foi defi ni do como segue:
(t ) 0 cos (t )
=
(t ) cos (t - )
=0
0 a n d 0 so, respetivamente, as amplitudes mximas do esforo
e a t enso, o = 2f, com f a freqncia, o a pulsao e o so
o ngul o de perda.
Do ngulo de fase, poss vel defi ni r vrias quantidades
viscoelastic di nmi cas e especi alment e (ou o armazenamento) a
modificao elstica
ulus G^ (3) e (ou perda) o mdul o vi scous G^^ (4).
0

G^ = de cos (3)
0
0
G^^ = do pecado (4)
0
Os mdulos de G^ e de G^^ foram gravados sob uma tenso
constante de 0.5% para estar no regime viscoelastic linear em que
os mdulos so independente da tenso, em uma freqncia de 1
hertz. O mdulo elstico uma medida da energia armazenada e
recuperada por o ciclo da deformao e reflete contnuo-como o
comportamento componente ou elstico.


A rampa da t emperat ura t eve o mesmo prot ocol o t rmi co que
para Micro-DSC com uma taxa de +0. 1 ^C/min, salvo que o comeo
comeado em 5^C e aquele as et apas i sothermal em 5^C e em
70^C foram reduzidos ao minut o 10 desde que no havia
nenhuma necessidade por uns per odos mai s longos de
est abi li zao ao usar as t cni cas rheol ogi cal .


Experi nci as resolved do t empo: as amost ras eram heat ed de
5^C temperatura required antes e depois da temperatura de
transio sol-gel da mistura em uma taxa de +0.1 ^C/min. O
armazenamento G^ e os mdulos G^^ da perda foram gravados em
funo do t empo (durant e 12 h) nesta temperatura constante em 1
hertz de freqncia e em 0.5% tenses.
Varredura de freqncia: aps a maturao durant e 12 h, os
mdul os vi scoelast ic G^ e G^^ foram gravados em funo de
uma freqnci a ent re 10-3 e 10 hert z em uma t emperat ura
const ant e com uma ampl i t ude de t enso pequena (0. 5%).
Experi nci as da di sperso de rai o X
As experi nci as da di sperso de rai o X foram execut adas no
synchrot ron de SOLEIL (St Aubin, France) no beamline do
BALANO operado em 11 keV. A i nt ensidade di spersada foi
relat ada em funo do vetor da disperso q = 4 pecados/onde 2 so o
ngulo de disperso e o compriment o de onda do fei xe de
i ncident e. Os dados foram coletados por um det et or
bi di mensi onal do CCD.
A calibrao da q-escala foi realizada com behenate de prata.
Os val ores da i nt ensi dade foram normali zados para escl arecer a
i nt ensi dade do fei xe, o t empo da aqui si o e a t ransmi sso da
amost ra. Cada um p-como o teste padro de difrao, indicando
uma srie de anis concntricos, foi int egrado ento ci rcular para
render a int ensidade em funo do Q. As amost ras foram
carregadas em capi lares finos de quart zo do dimetro de 1. 5
milmet ros (Muller de GLAS W., Berlim, Alemanha). As amostras
thermostated em um mi crocalori met er, MICROCALIX, proj etado
permiti r medidas si mult neas da difrao de DSC e de raio X, que
foi coloc no cami nho do fei xe.
Geralment e, a int ensidade dispersada por si st emas colloidal
pode ser consi derada como o produt o de doi s t ermos, o fat or de
formulri os P (q) e o fat or de est rut ura S (q): I (q) ^ P (q) S (q)
P (q) carat eri zar o tamanho e a forma das uni dades da
disperso, quando S (q) relacionado s correlaes espaciais entre
estas unidades. Para as part culas esfri cas homogneas P (q)
pode ser escri t o como
^ ^3 (pecado (qR) - qR cos (qR))
P (q) = (qR)
3

onde R o rai o da part cul a.
O fat or de formulri os pode ser obt i do experi ment a l dos t estes
padres di lu dos das amost ras, onde a cont ribui o do fat or de
est rutura insi gni ficant e. Enquanto a frao de volume das
partculas aumenta o t est e padro da disperso evolui, devi do
cont ribui o do fat or de est rut ura. Se os cristais colloi dal so
dados forma o fat or de estrutura indica os picos cuj as as
posi es est o em rel aes carat er st i cas.
R e s u l t a d o s e d i s c u s s o
Os resultados so apresentados para misturas de F127 e de F68.
Os resultados para a nica soluo F127 t m sido relat ados
previament e (Aka-Al gum-Grah e out ros, 2010; Pham Trong e
outros, 2008) e no so descrit os conseqent ement e em det alhe.
Os result ados apresent ados obtidos de F127 serem como uma
refernci a para as experi nci as F127/ F68.
Experi nci as Mi cr o-DSC e de SAXS
Mi cel l i zat i on e cri st al i zao carat er st i cos
t emperat uras
Um exemplo de Micro-DSC traos para F127 em uma
concentrao de 20 WT % dado no figo. 1A durante o
aquecimento e rampas refrigerando. O pico endothermi c afi ado e o
pico exot rmico correspondente tm uma simetria perfeita quase
como um espelho durante o aquecimento e os processos refrigerando
subseqentes. Estes picos afiados correspondem formao e ao
derretimento progressivos dos micelles F127 na soluo com o
aument o e as t emperaturas decreasing. O processo do
micelli zat i on endothermic e pode ser analisado como usual
pela t emperat ura do inci o ( T o n s e t ) , p e l a t emperat ura mxi ma ( T p e a k ) e
pel o endset

Fi g o . 1 . (a) fluxo trmicos durante o aquecimento (1) e refrigerar (2) em funo da
temperatura para F127 (20 WT %) e definio de Tonset, d e
T p e a k
, d e
T e n d s e t
e de Tc. (b)
Uma ampliao de
a escala de temperatura onde a cristalizao ocorre. (c) Fluxo trmicos durante o
aquecimento (1) e refrigerar (2) em funo da temperatura para F127/F68 (10/10 de
WT %).
t emperat ura ( T e n d s e t ) d a formao e do derret i ment o. O i n ci o est a
uma temperatura onde os micelles comecem dar forma e o endset
esteja a uma temperatura onde o mi celli zati on est ej a compl et o.
T p e a k corresponde temperatura do mximo do fluxo de calor (figo.
1A). A t emperatura crtica do micelle foi definida como a
temperatura
T o n s e t d o
incio identificado como a t emperat ura
resultando da interseo do tangent do primeiro ponto da inflexo
do pico com a linha de base (figo. 1A) (Pham Trong e outros, 2008;
Hecht e Hoffmann, 1995). A temperatura do incio nesta
concentrao 12.5^C, que somente 7^C aci ma da t emperat ura
da di ssoluo, si gni fi cando que a temperatura do mi cel li zat i on
prxima ao limite de solubility nesta soluo). Das medidas
enthalpic, o processo do micellization de F127 i nt ei rament e
revers vel .
Um pi co fraco secundri o aparece no fi m do mi cel li zat i on.
Corresponde t emperatura da cri st ali za o (fi go. 1B) onde os
micelles arranjam em uma estrutura cristalina (Pham Trong e
outros, 2008; Jain e outros, 1997). Em 60^C, bem acima do Tc =
23^C, experincias do raio X mostraram que (20 WT %) os
micelles F127 arranjaram em uma estrutura close-packed
sextavada bidimensi onal (2D hcp) com um parmet ro de ^21
nanmet ro (ver o mat eri al de apoi o).
Poucos relatri os so encontrados para o pico da cri stali zao
de solues aquosas do pluronic. A maioria dos autores no
relataram nenhuma mudana enthalpic aps T e n d s e t para o pl uroni c
F127 usi ng DSC clssi co ou uma bai xa concent rao de
copolmero (Wanka e out ros, 1994; Jai n e out ros, 1997). Pham
Trong e outros (2008) estudou o micelli zati on de F127 nico


Fi g o . 2 . Micro-DSC curvas que mostram os picos da agregao nas misturas F127/F68
para: (a) concentraes de F127 mais altamente de 17 WT %; (b) as concentraes
de F127 abaixam do que 10 WT %. (a) no micellization e nos picos da cristalizao
de F127 aparecer. As temperaturas da cristalizao (seta) aumentam com
concentrao F68.
sol ues e most rado que um pi co endot hermi c secundri o
pequeno pareceu no fim do micellization para a concentrao F127
mais altamente de 15 WT %. Lau e out ros (2004) relat ou o
micelli zat i on e a gel i fi cao para solues aquosas do
pluroni c F108 (
E O 1 3 3 P O 5 0 E O 1 3 3
) com Mi cro- DSC. Encont raram o pi co
pequeno secundri o para concent raes mais altament e de 20
WT % e atriburam-no gelificao de F108.
Em nosso estudo, di versas propores das mi sturas F127/ F68
com uma concent rao t otal fixa do pluroni c 20 WT % foram
anali sadas depoi s do mesmo protocolo que para as nicas solues
F127 e F68 (Fig. 2). Ns podemos observar do fi go. 2A que as
mi st uras 19/ 1, 18/ 2, e 17/3 de WT % tiveram o mesmo
enthalpogram que a soluo que cont em somente 20 WT % F127
salvo que o pico da cristalizao estve desloc a umas mais altas
temperaturas e se tornou menor (figo. 3A). Somente um pico do
micelli zat i on foi observado para est es si st emas que i ndi cam que
soment e F127 podia dar forma a micelles porque, nest as
ci rcunstnci as, F68 t eve as concent raes mai s bai xas do que o
CMC ou que a cont ribuio enthalpi c no micellization era
demasiado pequena ser detetada (ver abaixo). No fi go. 2B, F68 20
WT % no escolhem mostras da soluo um pi co endothermic
desobst rudo devi do formao do micelle, mas nenhum pico da
cri stali zao. O pico do micell i zati on menor do que o F127 na
mesma concent rao e mai s l argo na t emperat ura.
Os resultados de experincias de SAXS mostram que F127
escolhem a soluo, 10 WT % em 60^C, micelles esfricos dos
formulrios com raio de ^1 1 nanmetro. Em 60^C, F68 solues de
10 WT % so compor de micelles esfricos deinterao com raio
de ^6.4 nanmetro (ver o mat erial de apoio). Em 60^C, o t est e
padro de F68 20 WT % i ndi cou um pi co da correlao
i ndi cat i vo
da ordem short range. A di stncia mdia da correlao ent re os
micelles era ^13.4 nanmetro. SAXS experimenta conseqentemente
estabelece claramente que as nicas solues dest es mi cel les do
formulri o do pluronics nas concentraes similares a essas usadas
em Micro-DSC experincias; a temperatura estava acima das
temperaturas do micellization determinadas pelos t raos
ent halpi c.
No fi go. os picos di st int os do micelli zat i on 2B dois apar eceram
para as misturas F127/ F68 10/10 e 5/15 de WT % que corresponde
formao do micelle dos dois copolmeros em escalas de
t emperat ura distintas. O pri mei ro pi co no aqueci mento
at ribudo a F127 e ao segundo a F68 que fornece a evidncia direta
da formao separada do micelle dos dois copolmeros. Ambos os
copolmeros podem dar forma a micelles porque t m grandes
bastant e concent raes na mi st ura, vi st o que soment e um pico
considerado nas misturas de 19/1, 18/2 e 17/3 de WT % que
corresponde formao original ou a qualquer uma do micelle F127
a um efeit o enthalpic pequeno (nenhum det etvel) para F68. Para
concentraes 19/ 1 e 17/3 de WT %, aumenta na concentrao F68
desloc a temperatura da cristalizao de F127 a uns valores mais
elevados. A caraterizao de SAXS de F127/ F68 17/ 3 de WT %
most rou que em 25^C ( T e n d s e t ) a di st nci a da correl ao ent re os
mi cel l es era o ^ 14. 3 nanmet ro de d. Em 60^C uma estrutura
2D-hexagonal compata foi observada. Esta estrutura era similar a
esse de F127 20 WT % na mesma temperatura, mas o parmet ro da
est rut ura era mai s el evado para F127/ F68 17/ 3 de WT % ^22
nanmet ro.
O pi co da cristali zao de F127 no aparece para as mi sturas
F127/ F68 10/ 10 e 5/15 de WT % porque era demasiado pequeno
(a frao cri st ali na di minui com a concent rao F127) ou
qualquer um porque a estrutura intricada que contem micelles de
dois tamanhos diferentes no permite a cristalizao. Nenhuma toda
a estrutura requisitada entre micelles foi considerada em
experincias de SAXS. As concentraes elevadas de micelles
conduzem para fechar a embalagem dos micelles um pouco do que
formao de cristal. As medidas rheological devem poder indic a
diferena entre estes dois estados (ver abaixo).
Em Fig. 3 e em tabela 1, a variao da t mpera caraterstica
atures obtidos das Micro-DSC experi ncias (
T o n s e t
,
T p e a k
,
T e n d s e t
,
e o Tc) da formao do micelle F127 relatado cont ra a
concent rao de F127 na soluo. Em mi sturas binrias do
pluroni c os dados mostram que as temperaturas de transio e
os traos enthalpic so inteiramente reversveis como considerado
previamente para nicas solues componentes, sugerindo que os
micellizations sejam para as misturas investigadas no equilbrio
thermodynamic contra a temperatura. Para o melhor de nosso
conheciment o, esta observao no tem sido relatada claramente
at agora na l i t erat ura.
Os efei t os pri nci pai s devi do mi st ura do copol mero so
evi denci ados no figo. 3. Em uma nica soluo component e de
F127, as t emperat uras do micelli zati on (
T o n s e t
,
T p e a k
e T e n d s e t )
aument aram fi rmement e quando a concentrao diminuiu. Por
exemplo, entre 20 WT % e 10 WT %, o T o n s e t aument ou de 12. 5 a
18. 8 ^C. No bi nri o est as t emperat uras das mi st uras F127/F68
permaneceram constant es quando a

di luio
d e
F127 ocorre com
do aumento da proporo de F68 (figo. 3A). O T p e a k desloc somente
li gei rament e em ci ma da mi stura com o F68. Est e t ipo de efei t o
da

di lui o

i nesperado. Ns queremos emfat i zar que est as
solues so compl et ament e t ransparent es e separao de fase
associada normalment e ao ponto de nuvem no est suspeitada
para ocorrer. As medidas da entalpia so inteirament e
revers veis, como indic ant es. A t emperatura do endset nas
mi sturas binrias do pluroni c (fi go. 3B) aumentado por alguns
graus, o ^C 21.3 a 26.4, em cima da mistura com o F68.
Conseqent ement e, a mi stura de F127 com o F68 alarga a escala
de temperaturas do micelli zati on de F127 comparado s nicas
solues, mas sae unchanged das t emperat uras do i n ci o.
Nas solues de F127, a posio do Tc devido cristalizao do
micelle aumenta em cima da adio de F68, de 22. 4 a 26.6^C
(figo. 3C) quando as concent raes de F127 diminu rem 20 a 17
WT %. A mudana para o Tc mai or do que para T e n d s e t , segundo
as i ndi caes do fi go. 3B. Em cima da diluio de F127 escolhir
as solues componentes, a abertura entre o endset e as
temperaturas da cristalizao so aumentadas de +1.1 (20 WT %) ao
^C +5.1 (16 WT %). Nas misturas binrias F127/F68, este efeito est
muito


Fi g o . 3 . Temperaturas caratersticas T o n s e t
( a ) ,
T p e a k ( b), Tc, T g e l (c) e T e n d s e t (d) em funo da concentrao F127 nas solues compor de F127 sozinho (smbolos pretos) e solues
F127/F68 misturadas do micellization e da cristalizao (smbolos cinzentos). Os dados circundados indicam que a preciso em T e n d s e t baixa porque os dois picos so sobrepor.
mai s ampli fi caram porque o Tc muda de 22. 4^C a 36. 2^C ( +
pelo ^C) 13. 8 quando a concent rao F127 diminuiu 20 a 17 WT %,
vi st o que o T e n d s e t const ant e nest a escal a das concent raes (fi go.
3D).
O T o n s e t d o mi celle F68 comporta-se em uma manei ra si mi lar a
F127; ent ret ant o, por causa da sobreposio dos picos do
micellization de F127 e de F68, as t emperaturas do inci o so
mai s di fcei s de locali zar precisament e.
O pluronics dois em solues misturadas comporta-se como se
mantm seu prpri o ambi ent e quando o mi celli zati on ocorre como
se as concent raes eram localmente idnticas quelas onde o
copolmero foi dissolvido. Ist o sugere que aquele durant e (ou
i mediatament e ant es de) a segregao da formao do micell e
ocorra nas mi st uras porque cada copol mero cercado por sua
prpria fam li a. O inci o do micelli zat i on de F127 comea em
uma temperatura perto da t emperat ura da dissoluo da sol uo
do grupo, si gni fi cando i gualment e que a composi o prxi ma
ao l i mi t e do solubi li t y.
Ent alpi a do mi cel l i zat i on
Dos traos do fluxo de calor, a rea de grandes picos pode ser
atribuda ent alpi a do ^ H d o mi celli zat i on para cada
component e i ndependent e, que em conformidade com a sugesto
de doi s mi celli zati ons separados. Por causa da presena de
sobreposio repica nos funcionamentos t rmicos, a contribuio
de cada copolmero, em particular para
as concentraes 10/10 e 5/15 de WT % so mais difceis de avaliar.
Ns escolhemos definir a linha de base por um procediment o da
interpolao das medi das faraway das posi es mxi mas, com os
ci nco pont os i nt ermedi ri os que conduzem a uma l i nha de base
com uma i ncli nao monot oni c.
A entalpia do micelli zation de F127 pela massa total na soluo
como ni co component e ou nas mi sturas most rada no fi go. 4. A
entalpi a do micelli zati on normali zada pela massa de PPO
deri vou-se ou dos picos da entalpia de F127 ou F68 mostrado na
tabela 2.
Dest es dados, a entalpia do mi celli zation pela massa de F127
na soluo foi encont rada aproxi madament e proporci onal
concent rao do copol mero. Da inclinao do aj ust e da
regresso li near da curva deduz-se que a entalpia do
micelli zat i on de F127 em nicas ou solues misturadas igual a
^HF127 = 26 o 1 J/g com uma barra de erro pequena.
Adicionalmente, a entalpia do micellization de F68 foi derivada
igualmente ^HF68 = 13 o 2 J/g de F68. A barra de erro aqui


maior. A literatura relata em diversos valores para a entalpia do
micellization de F68. Tsui e outros (2008) coletou tais dados para
amostras dos vrios fabri cant es, das concent raes e das
t emperaturas. As concent raes so 5 g/l (0. 5 w/v%) ou 1-5 WT %
em sua prpria investigao. Nossa medida da entalpia do
micellization por o grama de F68 corresponde a qualquer valor
entre 76 kJ/mol e 162 kJ/mol porque h uma grande incert eza no
peso molecular da amost ra F68 de acordo com o fornecedor. Alm
disso, Borbely e Pedersen (2000) encontraram em 40^C, que uma
quantidade considervel de polmero ainda


F i g o . 4 . A entalpia do primeiro pico do micellization para F127 escolhe a soluo
(smbolos enchidos) e solues misturadas F127/F68 (smbolos abertos). Os
resultados so expressados em funo da concentrao F127 na soluo. A entalpia
expressada por o grama da soluo.
no formulri o do monmero e em 60^C como a agregao
progride mais, a maioria das correntes esto no estado agregado,
mas ainda h uma pequena quantidade de monmeros na soluo.
Os autores igualmente mostraram que o nmero mdi o da
agregao aument ou substancialment e ambos com concent rao e
t emperat ura (4 a 50^C), quando a poli di spersi dade dos micelles
diminui u com o progresso da agregao. Conseqentemente, a
amostra F68 tem uma t ransi o menos coperativa do micellization
do que F127, conseqent ement e induzindo uma propagao
adici onal dent ro
entalpia associada ao nmero do micellization ou da agregao. Em
nossa investigao, a entalpia total do micellization de F68 parece
ser i ndependent e na concent rao assi m que supor que dent ro da
escala prolongada da rampa da temperatura, at 70^C, quase todos
os copolmeros esto incorporados nos agregados micellar e que a
ent alpi a por a massa de uni dade de F68 const ant e.
As ent alpi a normali zadas pela massa de PPO podem ser
deri vadas do ^H destas medi das = 96 o 8 J/ g PPO. No papel por
Beezer e out ros (1994) relat a-se que a ent alpia do micelli zat ion
depende do pes o mol ecular de PPO e do ndice de PEO. Ns
usamos em nossos clculos os peso moleculares dados pelo
fabricant e. Nossos resultados most ram, dent ro da preci so
experi ment al, um val or const ant e para a ent al pi a por o grama
de PPO.
Experi nci as Rheol ogi cal em mi st uras
Em termos rheological, um gel definido como um estado onde
o mdulo G^ do armazenament o e o mdulo G^^ da perda sejam
freqncia independente e o do ngulo de fase ( tan = G^^/ G^)
seja baixo em todas as freqncias (Wei e outros, 2002). O mtodo
inverso do tubo usado igualmente como um mtodo cru para
discriminar entre o lquido e contnuo-como o comportamento
(Chaibundit e outros, 2007). As propriedades thermosensitive dos
hydrogels so avaliadas geralmente pela temperatura de transio
do solenide/gel. As medidas oscilatrias da tesoura so usadas
principalmente a fim determinar a temperatura de transio sol -
gel, identificando a temperatura para que G^ se submete a uma
variao crtica e caraterizar o mdulo da tesoura do gel alm do
ponto de gel. A dependncia da freqncia usada para estabelecer
as contribuies relativas de G^ e de G^^ ao mdulo final da
tesoura do gel. Mais elevado o valor de G^, mais pronunciado o
cart er elsti co e inversament e, mais elevado o G^^, mai s
pronunciadas as propri edades viscous. O mdulo elstico uma
medida
T a b e l a 1
O Tc, Tonset,
T e n d s e t
,
T p e a k d o
pico do micellization F127 foi obtido das Micro-DSC experincias. Temperatura de coagulao, T g e l , G^ elstico e mdulos viscous (G^^) (f = 1
hertz) para formulaes de F127-based.
WT % Dados de Micro-DSC Dados do rheology

Tonset (^C) (CMT)
T p e a k ( ^ C ) T e n d s e t
(^C)
Tc (^C) T g e l
(^C) G^ ( 1 0 3 P a )
G^^ (103Pa)
(^)
F 1 2 7

20 12.47 15.13 21.29 22.39 21.90 21.60 0.993 2.63
17 14.36 17.03 23.04 26.64 26.64 10.67 1.89 10.04
16 15.45 17.50 23.85 28.98 29.00 5.70 1.38 13.60
10 18.77 21.18 27.86 - - - -
F 1 2 7 / F 6 8

20/0 12.47 15.13 21.29 22.39 21.9 21.58 0.99 2.63
19/1 12.78 15.18 21.66 24.87 24.7 16.56 1.73 5.97
18/2 12.56 15.2 21.41 29.00 29.3 13.63 1.99 8.33
17/3 12.79 15.22 21.46 34.43 34.0 8.80 1.47 9.50
10/10 13.10 15.93 22.85 - 51.0 -
5/15 13.59 17.14 24.51 - - -
3/17 14.73 17.99 26.34 - - -
0/20 2.05 35.21 51.32
- -

-

- , nao mensurvel na escala das temperaturas investigadas.
T a b e l a 2
Entalpia normalizadas como a funo da concentrao F127, F68 e PPO.
F127/F68 WT % ^HF127 do pico (J/g F127) ^HF68 do pico (J/g PPO) ^HF68 do pico (J/g F68) ^HF68 do pico (J/g PPO)
20/0 25.07 93.92 8.43 a a
18/0 25.77 96.55 8.66 a a
19/1 24.68 92.46 8.29 a a
18/2 26.53 99.39 8.92 a a
17/3 26.21 98.19 8.81 a a
10/10 25.98 97.33 8.73 14.94 82.99 12.25
5/15 27.37 102.54 9.20 13.71 76.16 11.24
3/17 a a 13.17 73.16 10.80
0/20 a a 13.86 76.99 1.37
0/10
a a
13.80 76.66 11.32




Fi g o . 5 . Mdulos Viscoelastic contra o trao do fluxo da temperatura e de calor
para F127/F68 17/3 de WT % (a) e 10/10 de WT % (b) durante o aquecimento.
da energia armazenada e recuperada por o ci clo da deformao e
refl et e cont nuo-como o comport ament o component e ou
el st i co.
Aqueci ment o na t axa const ant e
Os mdul os da t esoura e as medi das da ent al pi a so most rados
em l ot es combi nados no fi go. 5A e B para duas mi st uras do
pluroni c, 17/ 3 de WT % e 10/ 10 de WT %, cont ra a
t emperat ura com prot ocolos t rmi cos i dnt i cos. As medidas
rheologi cal so execut adas em uma freqnci a fi xa 1 hert z. Em
ambos os casos, G^ era mui t o bai xo no est ado do soleni de
apesar da formao do micell e e aument ado drsti ca junt o com
G^^ quando a t emperat ura da

geli ficao

alcangada (Koffi e
outros, 2006; Aka-Algum-Grah e outros, 2010). Nas nicas
solues F127, as mudanas de G^^ durant e a formao do
mi cel l e podem ser rel aci onadas frao de volume dos
micelles, fornecendo algumas suposi es simples (Pham Trong e
out ros, 2008). A t emperat ura da

geli ficao

definida
geralment e como a int erseo das duas curvas G^ e G^^. No fi go.
5A que o pico pequeno da cri st ali zao obtido das Micro-DSC
medidas combinou perfeitamente com a t ransio sol -gel
observada por medidas rheologi cal . Conseqent ement e, em
solues de 17/3 de WT % (fi go. 5A) a temperatura de transio
sol-gel Tg coincidiu com a t emperat ura Tc da cristalizao do
micelle do component e F127.
No h nenhum pico da cristalizao no t rao do fluxo de calor
para a mistura 10/10 de WT % (figo. 5B); dois processos sucessivos
do micellization para F127 e F68 i nduzi ram soment e um aument o
li gei ro do mdulo da perda na escala t rmi ca de 5 a 45^C, mas o
mdulo do armazenament o pequeno (Pa <10-1) e permanece
const ant e. Na ext remi dade do segundo pico do mi celli zati on, um
pode ver que G^ e G^^ aumentado agudament e e o mdul o G^ da
t esoura alcan o mdul o G^^ da perda . Entretanto, a amplit ude
da mudana do mdulo da tesoura no fi m da

t ransi o

menos
i mport ant e e mai s progressi va dent ro
a mistura 10/10 de WT % do que na soluo de 17/3 de WT %.
A

transio rheological

observada na mistura 10/10 de WT % em
torno de 50^C no pode ser atribuda formao de cristal dos
micelles F127. O estado do solenide um lquido que contem
grandes fraes de volume dos micelles dos dois t amanhos. Em
t orno de 50^C, um aument o repenti no dos mdulos observado,
que podem ser comparveis a uma transio ou a uma formao de
bloqueio de um estado glassy. O volume ocupado pelos micelles
alcanga um valor crtico, onde o fluxo seja fortemente afetado,
similar frao de volume crtico das partculas em suspenses das
esferas duras ( embalagem prxima aleat ria), quando a
viscosidade aumenta assinttica.
Todos os result ados de experi nci as do rheol ogy so
sumari ados na tabela 1 junto com Micro-DSC experincias. Em
F127 escolhir solues e as mi sturas com concent raes 18/2, 17/3
e 16/4 de WT % a t emperat ura da geli ficao coincidem com o
pico da cri stali zao de F127 e aumentam de 22. 4^C a 29^C em
cima da mistura com o F68. Nenhuma gelificao foi observada
para 5/15 de WT % e para F68 puro sol ues de 20 WT % na
escal a das t emperat uras at 70 ^C.
Geralment e, as t emperat uras da geli fi cao de formulaes
farmacuti cas esto consideradas ser apropriadas se so mais
bai xas do que a t emperatura de corpo humano ( ^C) 37. Se a
t emperat ura da geli fi cao mai s elevada do que 37^C, os geles
perdero suas propri edades elsticas tendo por resultado um
escapament o das formulaes do local da administrao. De acordo
com esta parte do trabalho, parece que 17/3 de WT % (
Tge l
= o ^C) 35.4
uma mi st ura apropriada para apli caes farmacuti cas porque o T g e l
era mai s bai xo do que 37^C e mai s altament e do que a
t emperatura ambi ent e, que permit e a administrao no formulrio
lquido. Os resultados apresentaram na tabela 1, nas
concentraes F127 que diminuem uma most ra de 20 a 16 WT %
que o mdulo G^ do armazenament o do hydrogel medi do
i mediatament e depois da geli fi cao di minuda do kPa 21. 6 ao
kPa 5. 7. Alm, o ngulo de fase () aumentou de 2. 63^ a 13.6^.
Para a mesma concentrao total de pluroni c, a adio de F68
aos hydrogels conduziu a uma di minuio do mdulo do
armazenament o e a um ganho no mdulo da perda. A
contribuio viscous provvel ser relacionada fase no
cristalina compor principalmente pelos unimers F68 ou pelos
micelles. Esta fase ocupa provavelmente um volume pequeno
(alguns por cent o do volume t otal da soluo). Igualmente
espera-se que o ganho no mdulo da perda facilitar o
espalhamento do hydrogel aps sua administrao in-vivo, que
pode ser uma cont ri buio favorvel.
Experi nci as resol ved do t empo e espet ros di nmi cos
O Rheology uma aproximao complementar ao
microcalorimet ry para compreender o diagrama de fase complexo
das misturas binrias do pluronic. interessante estabelecer das
experincias rheological quantitativas ou pelo menos das
diferenas qualitativas entre geles com uma fase cristalina
dominante (tal como a mistura de 17/3 de WT %) e aqueles com
uma distribuio bimodal das esferas, como a mistura de 10/10 de
WT %.
Sugere-se do exame de nossos resultados, de que que as
mi sturas bi nri as pert o do ponto de gel cont m um nanost ructure
complexo. A entalpia inteiramente reversvel com varreduras da
temperatura, que normalmente carat er stica das t ransformaes
da fase que seguem um trajeto do equilbrio. importante
confirmar se o rheology igualmente mostra a tempo estados
independentes em temperaturas fixas, em conformidade com o
microcalorimetry. Com este alvo na vista, ns projetamos as
experi ncias rheological que i ncluem experi nci as resolvidas
t empo e provam etapas da caraterizao em temperaturas fixas. As
amostras pri mei rament e foram aqueci das sob uma rampa
const ant e (+0. 1 ^C/min) como ant es, at uma determinada
temperatura e mantidas nesta temperatura por di versas horas no
rheomet er. As experi ncias resolvi das t empo foram executadas
em uma freqncia de 1 hertz durante perodos de 12 H. Duas
misturas foram estudadas com est e prot ocolo: misturas de 18/ 2
de WT % e de 10/ 10 de WT % com duas t emperaturas fi nai s,
uma abai xo da transio rheologi cal T <
Tg e l
e um segundo acima da
transio T >
Tg e l .
A t emperatura da gelificao para a mistura de
18/2% encont rada para o fi go de 29. 3 ^C. 6A i ndi ca a
dependnci a do t empo dos mdulos G^ e G^^ em 27^C para a
mi st ura 18/ 2 de WT %. Evi denci a-se que aproxi mando a
t emperatura da

geli fi cao

, as solues que cont m grandes

quant idades de



Fi g o . 6 . (a) o tempo resolveu medidas dos mdulos da tesoura e da perda. (b).
Cortar mdulos contra a freqncia aps uma maturao de 12 h e (c) o delta do
tangent em funo da freqncia antes e depois da temperatura da gelificao no ^C
27 ((^) G^ e (^) G^^) e no ^C 37 ((^) G^ e (^) G^^) para a mistura F127/F68 18/2 de WT %.
os mi celles, mas no ainda no est ado do gel , evoluem lent ament e
para uns sistemas mai s elsticos. Inicialment e, G^ < G^^ nest a
temperatura, ambos os mdulos aumentaram lentamente com
tempo, mas aps 2 h, o mdulo do armazenamento alcan o mdulo
da perda e aument ou-o continuament e. O aumento dos mdulos
nesta freqncia est sobre mai s do que uma dcada, que seja um
efeito completamente significativo. Tal sistema no estabilizado
inteiramente aps 12 H. H uma estruturao lenta na soluo na
temperatura fixa, que pode ser i nt erpret ada como uma di fuso
l ent a e requi si t ar l ocal dos micelles para a formao de arranjos
cristalinos locais principiantes. Se pode chamar estes efeitos
estados pretransitional. No cont rri o, o t empo resol veu a
experi nci a execut ada em 37^C dent ro
a fase predomi nant e cri st al i na most ra um est ado est vel , sem
nenhuma mudana contra o tempo. O mdulo do armazenamento
elevado, o kPa ^13, comparado ao mdul o do armazenament o
aps 12 h em 27^C ( Pa 280) . Conseqent ement e, a est rutura
cri stalina responsvel para um mdulo el evado em T > Tgel e
um val or est vel durant e 12 h, comparado s medidas na
suspenso micellar concentrada, antes da cr i st al i zao.
Uma outra carat erstica importante fornecida pelo espet ro
dinmico dos si st emas ant es e depoi s da

gel i fi cao

. A
varredura de f reqnci a ent re 0. 002 hert z e 10 hert z pode ser
executada aps 12 h da maturao na t emperat ura fi xa (fi go.
6B).
Fi go. 6B most ra os espet r os nas duas t emperat uras em 27^C
e em 37^C aps 12 H. Em 27^C o espet ro corresponde a um
lquido vi scoel ast i c com um fc da freqncia caraterstica = 0.016
hertz onde G^ = G^^ = Pa 140. Toda a medida em uma freqncia
acima deste limite f > f c mostra um

slido como
o
comportamento,
como G^ > G^^. Em particular, este o argumento para f = 1 hertz,
que uma freqncia frequentemente preferred em muitas
experi ncias. Em umas mais baixas freqncias, abaixo do f c =
0. 016 hert z, o mat erial aparecem

lquido como

, porque G^ < G^^.

Espera-se que G^ e G^^ di mi nuem com a freqnci a. O f c da
freqnci a carat er st i ca o inverse de uma estadia caraterstica:
em horas longas, mais por muito tempo de 50 s = 1/fc que (inverse
do fc da freqncia) o sistema est lquido-como, ele pode flui r,
por rearranj os das est rut uras mi cel lar. De um lado, segundo as
i ndi caes do fi go. 6B em 37^C a dependnci a da freqnci a
dos mdul os no est ado cri st ali no do gel mui t o menos
pronunci ado: a freqncia caraterstica onde G^ = G^^ no esto
aparecendo nesta escala de freqncia. encont rada
provavelment e uma ou dois dcadas abai xo (um t empo
carat er st i co ent re 500 e 5000 s), onde os mdulos do
armazenament o e da perda parecem convirgir, significando que o

cristal

pde i gualment e flui r ou rast ej ament o, mas mui t o mai s
l ent ament e do que a suspenso dos mi cel l es di st ri bu dos
al eat ri a.
Fi go. 6C sumari a a dependnci a da freqnci a do t an para a
mi st ura de 18/ 2 de WT % aps 12 H. O do ngulo de perda na
est rut ura mi cel lar at olada em 27^C mai s fort ement e
dependent e da freqnci a; os grandes valores so considerados no
baixo das freqncias = ( tan = 1.32) em mostrar 53^ lquido-
como a tendncia. Quando o = 45^, tan = 1 corresponderem a
G^ = G^^.
O gel cri st al i no t em um ngul o de pequenas perdas ( em
t orno do ^ 12^ do , do ^ tan 0.21 do ) sobre a escala inteira das
freqncias, com um aument o muito ligeiro em bai xas
f r eqnci as.
Ns exami namos agora as solues de 10/ 10 de WT % em
50^C e em 60^C. Para esta mistura, a transio da gelificao foi
observada em 51 ^C. O tempo resolveu experi ncias dura para 12 H.
Em ambas as temperaturas, os mdulos da tesoura mudam contra o
tempo (figo. 7A). Ao cont rrio do caso onde o gel teve uma
estrutura cristalina, o armazenamento e mdulos da perda depois
que 12 h se t ornaram pert o de se em 50 e em 60^C. Os mdulos
da perda so i nt ei rament e i dnt i cos nest a freqnci a (Pa do ^ 161
de G^^) e o mdulo do armazenament o mai or no kPa mai s
elevado do ^ 4 de G^ da t emperatura no kPa de 50^C e de ^ 17 de
G^ em 60^C), mas a diferena menos grande comparada ao 18/2
de WT %. Entre estas duas temperaturas, uma pequena alterao
aparece em diagramas da entalpia, ns podemos esperar
conseqent ement e mais micelles F68 dar forma ou um aumento de
seu nmero da agregao. Se os micelles novos so nucl eat ed,
est o embalados mai s prxi ma; conseqent ement e os mdul os
da t esoura podi am s er mai s el evados.
A f i m mel horar s eparado est es est ados de doi s ge l es, as
varreduras de f r eqnci a foram execut adas i gual ment e aps o
fi go de 12 H. 7B most ra que os espet ros dos mdulos da t esoura
so agora muit o si mi lares. A temperatura mai s alt a (o ^C) 60 t em o
mdul o mai s el evado na escal a de freqnci a i nt ei ra, mas a
di f er ena no demasi ado grande.
Finalmente, no figo. 7C o tan traado contra a freqncia. Alm
disso, os valores so muito prximos entre eles para as duas
temperaturas; em todo o de 0.004 hertz a 10 hertz) tan dos casos
(escala de freqncia < 1 que significa um slido gost a do
comportament o. Ent retant o, o tan aument a rpi da com
freqnci as decreasing e t ende para o li mi t e onde o tan poderi a
ser >1 em ambas as t emperaturas que eventualmente um lquido
como o estado, com os mdul os predomi nant e elevados da perda
em freqnci as mui t o bai xas (ou



Fi g o . 7 . (a) o tempo resolveu medidas dos mdulos da tesoura e da perda. (b) Cortar
mdulos contra a freqncia aps 12 h da maturao antes e depois da temperatur a da
gelificao no ^C 50 (^) de G^ e (^) de G^^ e no ^C 60 (^) de G^ e (^) de G^^ para a mistura
F127/F68 10/10 de WT %. (c) Tangent do ngulo de perda em funo da freqncia ^C
50 no ^C(^) e 60 (^) para a mistura F127/F68 10/10 de WT %.
pocas longas). As est ruturas ainda esto evoluindo a t empo para
ambas as t emperaturas aps di versas horas.
As medi das Rheol ogi cal execut adas durant e uma rampa
cont nua do aqueci ment o no permi t em que as sol ues
mi st uradas al canguem um est ado independent e do t empo.
Quando ns paramos a rampa, ns observamos que os mdulos
aumentaram, provavelment e at ravs dos rearranjos locais lentos da
est rutura. Ist o sugere que a t emperat ura da

t ransi o
n o
fi go. 5B
depende da taxa de aqueci mento das solues. Tal hora
e as transies dependentes da temperatura so sabidas no vidro
que d forma a sistemas. Na mistura do pluronic, os estados
rheological abaixo e acima do ^C 51 so lquidos viscoelastic em
ambos os casos. Inicialmente durante as rampas, no era poss vel
medi r o espet ro i nt ei ro da freqnci a no estado do

solenide

porque o sistema no estvel. De acordo com comportamento
conhecido do polmero derrete na transio de vidro, ns podemos
supr que o fc da freqncia caraterstica inicialmente elevado e que
diminui com tempo, durante rearranjos estruturais. As freqncias
caratersticas aps perodos longos da maturao so prximas ao ^ do
fc 0.003 hertz de acordo com o figo. 7B em ambas as temperaturas
com uma est adi a caraterstica ^330 S. Est a vez carat er st i ca
ent ret ant o mui t o mais curta que o estado predominant e cristalino
discutiu antes.
Micellization e as encenaes da gelificao para F127/F68
misturaram sol ues
A combi nao Mi cro-DSC e as experi nci as do rheology
permit em o micellization e as encenaes da gelificao para que
as solues misturadas F127/F68 sejam expli cadas. Como
apresentadas em Fi g. 8, t rs regi es foram i dent i ficadas. A
seguint e encenao sugerida: em bai xas t emperaturas, o
pluroni cs F127 e F68 exi st em sob a forma dos unimers na soluo
aquosa (regio (i)). Olhando fi xament e em baixas t emperaturas em
torno de 5^C para a dissoluo do pluroni cs e em ci ma do
aqueci ment o, pri mei rament e a desidrat ao dos unimers F127
ocorre e comeam a associar junto para dar forma a micelles (figo.
8A, regio (ii)). A t emperat ura do micellization do incio de nicas
solues do componente F127, em uma concentrao de 20 WT %
T o n s e t
= 12.5 Micelles de ^C. compor de um ncl eo hydrophobi c dado
forma pelos blocos de PPO cercados pel os blocos hidrfi los de
PEO. Seu rai o hidrodinmi co aproxi madament e 11 nanmet ro
medidos pela di sperso de luz dinmica em solues di ludas
homme e outros, 1996 (de Prud
'
) e com nossas prprias medidas de
SAXS em 10 WT % em 60^C.
Em nicas solues, quando a t emperatura aument ada aci ma
de Tc = 22.4^C, os micelles F127 arranjam-se em uma estrutura
cristalina (figo. 8A (iii)). A mesma encenao descrita para a
soluo F127 em concent raes 16 e 17 WT % da presena do pi co
endot hermi c secundri o pequeno.
O micellization de F68 comea em uma temperatura mais baixa
comparada a F127, T o n s e t ^ 28^C para uma concent rao de 20 WT %
como expli cado. Os micelles F68 em 60^C, 10 WT %, t m um
rai o de 6. 4 nanmet ro medidos por SAXS, mas de acordo com
Borbely (1998), o raio de rotao medido pela disperso de nutron
pequena do ngulo em 3.1 nanmetro. No se espera que os dois
raios devem ser idnticos como SEM deteta na maior parte o ncleo,
visto que SAXS pode ver a relao de PEO/water. O raio
hidrodinmico pode ser comparado ao raio determinado por SAXS.
F68 consi derado como o component e mai s hi drfi lo na
mi stura, sua t emperat ura do micelli zati on mai s elevado
(Kozlov e out ros, 2000).
As Mi cro-DSC experi nci as demonst ram inequ voca que os
micelles misturados de F127 e de F68 no esto dados forma. O
pluronics foi dissolvido inicialmente individualmente na baixa
temperatura (5^C) e em cima da mistura das solues do grupo
homogneas, formulrio desobstrudo, fluido da fase. Entretant o, a
nucleao dos micelles individuais comea na mesma
t emperat ura que nas solues i ni ci ai s do grupo. Observa-se bem
que T o n s e t para F127 permanece const ant e em ci ma de uma
mi st ura de duas solues do gr upo de concentraes de 20 WT %,
com as fraes de volume variveis. Est e comportament o
complet ament e di ferent e do que observado pela di luio
si mples de F127 na gua. As duas populaes coexi stem
altamente em bastante temperaturas. Em solues diludas de
pluronics, soube-se que a diferena do comprimento de blocos
hydrophobic de PPO impede geralmente formao misturada dos
micelles. Nossas experi ncias most ram que est a verdadei ra em
uma grande escala de concent rao.
Fi go. 8B most ra uma mistura com baixa concent rao de F68.
Em cima do aquecimento, F127 mostra claramente o pico
endothermic do micellization, com pouca mudana comparada s
nicas solues. Acima do ^C28, l



Fi g o . 8 . (a) mecanismo propor para a organizao F127 do micelle (20, 17 e 16 WT %). (b) Mecanismo propor para a organizao do micelle para solues misturadas de
F127/F68 (19/1, 18/2 e 17/3 de WT %). Micellization de F68 pode igualmente ocorrer nas misturas segregadas. A fase F127 cristalina predominante na alta temperatura. (c)
Mecanismo propor para a organizao do micelle para soluo misturada de F127/F68 (10/10 e 5/15 de WT %) quando as concentra es F68 eram mais elevadas do que o CMC na
escala da temperatura investigada.
so provavelmente igualmente os micelles de F68 dado forma. A
transio da cristalizao dos micelles F127 atrasada a umas mais
altas t emperat uras pela presena dos micelles F68 e corresponde
geli fi cao, regio (i ii ) no figo. 8B. As experincias Rheological
na regio (ii) mostram igualmente uma estruturao lenta em T <
Tg quando o tempo reservado (efeitos pre-transitional) qual pode
ser relaci onado formao de domni os cristalinos locali zados
dos mi celles F127. A presena dos micelles F68 cria um
mecanismo lent o da difuso dos micelles que rearranjam em t al
manei ra de aumentar os mdulos da t esoura e de gerar umas
estruturas mai s estvei s. As quantidades pequenas de F68 (<10 WT
% nas misturas) desloc progressivamente as temperaturas da
cristalizao ou da gelificao. F68 tem um efeito negativo na
formao da estrutura cristalina de F127 aumentando a temperatura
da cristalizao. Com cuidado comparando o aumento dos mdulos
da tesoura contra a t emperatura durante a t ransi o em Fi g. 4 a
Fi g. 2 em Pham Trong e out ros (2008) uns pode ver que a
t ransi o menos ngreme na t emperatura e os mdulos da
t esoura do gel cri stalino so mai s dependent e da t emperat ura
dent ro
as misturas de 17/3 de WT %, do que em 20 WT % escolhem as
solues F127. Uma cristalizao dependente do tempo deve ser
observada nos sistemas misturados no est ado pret ransi t i onal e
aps a t ransi o da gel i fi cao.
Quando as concent raes i guai s de F127 e de F68 esti verem
dissolvidas, e as solues do grupo com volumes i guai s forem
mi sturadas, fi go. 8C, (10/ 10 de WT %) nenhuma formao de
cri stal det et ado durant e a varredura da t emperatura. As
experincias rheological no figo. exibio 5B uma transio em t orno
do ^C 51 que no pode ser at ribudo formao de cri stal e no
corresponde ao endset do micelli zati on de F68. Esta soluo
complexa cont em volumes i guais de fases nanostructured, onde
quase t odos os copol meros est o nos formulri os mi cellar. As
experi nci as Rheologi cal execut aram abai xo de
d a
mostra da
t emper at ura t ransi o
u m
abrandamento estrutural lento contra o
tempo. Acima da t emperatura de transio, o aument o do t empo
dos mdulos li mi tado. Eventualment e, um espetro viscoelastic
similar dos mdulos da tesoura observado nas duas t emperat uras.
As experi ncias do rheology sugerem que a geli fi cao

t ransio

sej a simi lar a um si st ema de formao de vidro.


mdul os do armazenament o e da perda de gel es cri st ali nos e
no cri st ali nos (figos. 6B e 7B respetivamente) diferem
significativamente. Os mecanismos que so a base do
abrandament o est rutural lent o ant es ou depois da geli ficao
podem corresponder a uma nucleao lenta de cri stais micellar de
F127. O desenvol vi ment o ext ensi vo da fase cri st al i na deve
i mpli car uma apreenso estrutural, por causa dos tempos de
abrandamento caratersticos muito longos dos cristais colloidal.
Ns no tentamos detetar estas mudanas por Micro-DSC
experi ncias, aps t empos longos da maturao em temperaturas
fi xas. A sensibilidade do Micro-DSC poder para no ser
suficientemente elevado. A difrao pequena do rai o do ngulo X
podia ser uma soluo alt ernativa para evidenciar o
desenvolvimento dos ncleos cristalinos, da embal agem al eat ri a
dos mi cel l es.
Na li t eratura, a t ransio de vi dro das suspenses modelo de
esferas col l oi dal foi anali sada nas pri mei ras obras de Pusey e
de cami onet e Megen (1987) que rel at aram a evi dnci a
experi ment al para a apreenso est rut ural. Mai s t arde, a
t ransi o e os di agramas de fase de vi dro de misturas colloi dal
binrias fortemente de interao foram investigados pela
espet roscopi a da onda da difuso por Meller e por Stavans
(1992). Mais recentemente, Williams e camionete Megen (2001)
executaram experincias lightscattering dinmicas em misturas
binrias de suspenses colloidal da duro-esfera com uma rel ao
do tamanho de part cula de 0. 6. Observaram os moviment os em
mi sturas bi nri as com as fraes de volume t ot ais ent re 0. 51 e
0. 58 e most raram que na i ntroduo das esferas menores, o
abrandament o est rut ural est l i berado. Chamaram est e efei to o

vidro que derret e

. Em sua i nvesti gao, as suspenses das

part culas menores no cri st ali zam devi do a sua
poli di spersi dade mai or , vi st o que as part culas mai ores mostram
a t ransi o da cri stali zao esperada para esferas duras. Os
aut ores rel at aram que a

di luio por part culas menores em vez

do solvent e, desloc a posi o do mximo preliminar a uma
disperso mais elevada vectors

(di st nci as menores).
Em seu t rabalho, out ras di ferenas aparecem no fat or de
est rutura comparado a uma

diluio si mples

. No deslocamento
do pico principal do fator de est rutura e no realce, superiores
daquele obtido pela di luio simples, da ampli tude mean-squared
de flutuaes do longo-compriment o de onda, vem os efeit os
d o
potencial atrati vo da prostrao da fora mdia que emerge ent re
as part culas mai ores em cima da introduo das partculas
menores

. Discutem que a relao do tamanho entre as esferas (0.6)

em seu caso demasiado grande para que os efeitos da prostrao
i ncorram uma separao de fase do l quido-lquido. Biben e
Hansen est abeleceram t eri ca que as mi st uras bi nri as densas da
fase das esferas duras separam quando a relao do t amanho de
seus di met ros menos de 0. 2 e as fraes de embalagem
parci ai s das duas espci es so comparvei s . Em nossa mistura
micellar, esta relao prxi ma a 0. 5, que similar ao caso
relatado por Williams e camionete Megen (2001) e Meller e
St avans (1992). Alm, ns observamos nas mi sturas F127/ F68,
que a presena dos micelles menores em 60^C (17/3) muda o
parmet ro sext avado compat o da fase da fase F127 cri st ali na de
21 o nanmetro a 22 nanmetro que um aumento ligei ro. A
presena de al guns mi cel l es pequenos pode di st orcer a est rut ura
das grandes.
Sumri o e concl uses
Esta i nvest i gao sugere que as solues aquosas que cont m
doi s o pluroni cs F127 e F68 em uma concent rao el evada t ot al
de formulri o de 20 WT %, em ci ma do aqueci ment o,
nanost ruct ured as fases que i ndi cam uma di st ri bui o bi modal
dos mi cel l es. As sol ues e os gel es so t otalmente
t ransparent es. As t emperat uras do mi celli zat i on e os t raos do
calor so aqueci ment o inferi or int ei rament e revers vel e
refri gerar subseqent e em t axas const ant es de 0.1 ^C/min, que
usual para si st emas no equilbrio thermodynamic. Entretanto, o
comportamento rheological muit o mais complexo e most ra que
os abrandament os int ernos e as reorgani zaes lent as ocorrem na
escala t rmi ca que precede ou que segue as t emperat uras da

gel i fi cao

. Nas mi st uras F127 ri cas

os mi cel l es podem arranj ar em dom ni os cri st al i nos vi st o que
em 10/10 o gel F127/F68 similar a um sistema de formao de
vidro que possa se submet er a uma reorgani zao cont nua.
Nas mi sturas, ao cont rri o das ni cas solues do pluronic,
as duas fases mi cellar que coexi st em na alta t emperat ura
submet em-se a uma reorganizao cont nua: na fase F127 rica, os
micelles devem poder arranj ar-se lent ament e em domni os
cri stalinos; a fase da mai oria deve dar forma a um t raj et o
conetado durant e t odo a soluo, quando a minori a pr em fase
i ncluses dos formulri os de t amanhos varivei s. O mdulo
elevado da elasticidade da fase cri stalina (ri cos F127) i mpede o
processo para chegar concluso, e o nanost ructure prendido em
uma maneira similar a um estado glassy. Os estudos pequenos da
difrao de raio X do ngulo seriam muito tei s revelar os
mecanismos locais nos est udos fut uros.
Dados supl ementares do apndi ce A.
Os dados supl ement ares associ aram com est e art i go podem
ser encontrados, na verso em linha, em
http://dx.doi. org/10.1016/j.ijpharm. 2013. 01. 043.
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