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Mdulo 4 Analise de Sementes
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DIRETORIA DA ABEAS
Presidente
Jos Geraldo de Vasconcelos Baracuhy
Universidade Federal de Campina Grande - UFCG
1 Vice-Presidente
Ricardo Antonio de Arruda Veiga
Universidade Estadual Paulista - UNESP/Botucatu
2 Vice-Presidente
Helmut Forte Daltro
Universidade Federal do Mato Grosso - UFMT
1 Tesoureiro
Pedro Roberto Azambuja Madruga
Universidade Federal de Santa Maria - UFSM
2 Tesoureiro
Raimundo Pinheiro Neto
Universidade Estadual de Maring - UEM/PR
1 Secretrio
Geraldo Andrade de Arajo
Universidade Federal de Viosa - UFV
2 Secretrio
Moacir Cerqueira da Silva
Universidade Federal Rural da Amaznia UFRA
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Mdulo 4
Anlise de sementes
Tutores:
Profa. Dr. Maria ngela Andr Tillmann (FAEM/UFPel)
Prof: Eng. Agr. MSc. Denise Meza de Miranda (FAEM/UFPel)
Brasilia DF
2007
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Mdulo 4 Analise de Sementes
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Ficha Catalogrfica
Associao Brasileira de Educao Agrcola Superior ABEAS
Anlise de sementes. Tutores: Maria ngela Andr Tillmann, Denise Meza de Miranda.
Braslia, DF: ABEAS; Pelotas, RS: Universidade Federal de Pelotas/Departamento de
Fitotecnia, 2007.
102p. il. (ABEAS. Curso de Cincia e Tecnologia de Sementes. Mdulo 4).
1. Anlise - de sementes. 2. De sementes - anlise. I. Tillmann Maria ngela Andr. II.
Miranda, Denise Meza. III. T.
proibida a reproduo total ou parcial deste mdulo
Direitos reservados a ABEAS e ao autor
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Pr-Teste
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Mdulo 4 Analise de Sementes
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11. Quando temperaturas alternadas e luz so recomendadas para o teste de germinao, a luz
aplicada durante o regime de temperatura mais elevada ( ).
12. O teste de tetrazlio determina a viabilidade de um lote de sementes atravs da diferena de
colorao entre os tecidos vivos da semente que se colorem e os tecidos mortos que permanecem
descoloridos ( ).
13. No teste de verificao de espcies e cultivares, a determinao pode ser realizada sobre as
sementes, plntulas ou plantas cultivadas no laboratrio, casa-de-vegetao, cmaras de
crescimento ou no campo ( ).
14. O grau de umidade das sementes um dos fatores mais importantes a ser considerado para a
conservao da qualidade da mesma ( ).
15. O mtodo da estufa a 105C o mais utilizado no Brasil, sendo indicado para todas as espcies
de sementes, utilizando sementes modas ( ).
16. O resultado do grau de umidade das sementes obtido atravs da mdia de duas repeties por
amostra ( ).
17. O peso de 1000 sementes permite a obteno de dados para fins de densidade de semeadura (
).
18. Testes de vigor so usados, principalmente, para fornecer um ndice menos sensvel da
qualidade da semente que o teste de germinao ( ).
19. Na conduo dos testes de vigor, utilizam-se sementes provenientes da amostra mdia (
).
20. O teste de envelhecimento acelerado est baseado na relao existente entre o vigor de sementes
e a integridade do sistema de membranas celulares ( ).
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Sumrio
Introduo, 9
1. Amostragem, 10
1.1. Objetivo e importncia,10
1.2. Definies, 11
1.3. Homogeneidade do lote de sementes, 13
1.4. Peso mximo dos lotes, 14
1.5. Obteno de amostras representativas, 14
1.6. Tipos de amostradores e mtodos para amostragem dos lotes, 15
1.7. Intensidade da amostragem, 17
1.8. Pesos mnimos das amostras submetidas ou mdias, 18
1.9. Embalagem, identificao, selagem e remessa da amostra, 18
1.10. Obteno das amostras de trabalho, 18
1.11. Armazenamento das amostras, 20
2. Anlise de pureza, 21
2.1. Objetivo, 21
2.2. Definies, 21
2.3. Equipamentos e materiais, 22
2.4. Procedimento, 23
3. Determinao de outras sementes por nmero, 25
3.1. Objetivo, 25
3.2. Definies, 25
3.3. Informao dos resultados, 26
4. Verificao de espcies e cultivares, 27
4.1. Objetivo, 27
4.2. Princpios gerais, 27
4.3. Exame das sementes, 28
4.4. Exame em plntulas, 30
4.5. Exame das plantas em casa-de-vegetao ou cmara de crescimento, 31
4.6. Exame das plantas em parcelas de camp, 31
4.7. Informao dos resultados, 31
4.8. Mtodos para deteco e quantificao de sementes geneticamente modificada ,32
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Mdulo 4 Analise de Sementes
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5. Teste de germinao, 35
5.1. Objetiv, 35
5.2. Definio, 35
5.3. Condies para a germinao, 35
5.4. Materiais e equipamentos, 38
5.5. Condies sanitrias, 41
5.6. Metodologia, 42
6. Testes rpidos para determinar a viabilidade das sementes, 52
6.1. Teste de tetrazlio, 52
6.2. Teste de embries expostos, 58
6.3. Teste de raio X, 59
6.4. Teste do pH do exsudato, 60
7. Determinao do grau de umidade, 62
7.1. Objetivo e importncia, 62
7.2. Formas de gua na semente, 62
7.3. Mtodos para a determinao do grau de umidade, 63
8. Determinao do peso de 1000 sementes, 69
8.1. Objetivo, 69
8.2. Metodologia .69
8.3. Informao dos resultados, 70
9. Determinao do peso volumtrico, 71
9.1. Definio ,71
9.2. Procedimento, 71
9.3. Clculo e informao dos resultados, 71
10. Tolerncias, 73
11. Vigor, 74
11.1. Limitaes do teste de germinao, 74
11.2. Definies de vigor, 78
11.3. Objetivos bsicos dos testes de vigo, 79
11.4. Vigor e desempenho de sementes, 80
11.5. Testes de vigor, 86
12. Boletim de anlise de sementes, 92
12.1. Definies, 92
13. Laboratrio de anlise de sementes, 94
13.1. Definies, 94
13.2. planejamento e organizao, 94
Literatura consultada, 100
Respostas do Pr-Teste, 102
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Introduo
PRODUO
ARMAZENAMENTO
COLHEITA
LABORATRIO
DE SEMENTES
TRATAMENTO
SECAGEM
BENEFICIAMENTO
COMRCIO
FISCALIZAO
DO COMRCIO
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1. Amostragem
AM
AT Outras
sementes
AM
Amostra de
Arquivo
AT
Pureza
Umidade
Semente pura
TZ
Germinao
Vigor
Figura 2 - Esquema representativo da importncia da amostragem na anlise de um lote de sementes, onde AM amostra
mdia, AT amostra de trabalho e TZ teste de tetrazlio.
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1.2. Definies
1.2.1. Lote
Quantidade definida, identificada e homognea de sementes com atributos fsicos e
fisiolgicos semelhantes.
1.2.2. Amostras (Figura 3)
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12
LOTE
25.000kg (peso mximo)
Amostras simples
Amostra composta
Amostra mdia
Peso mnimo de 1000g
Amostra de trabalho
Peso mnimo de 500g
Outras
sementes
Semente
pura
Amostra de arquivo
Material
inerte
Figura 3 - Esquema representativo das etapas do processo de amostragem de um lote de sementes de soja.
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Allium cepa
Avena sativa*
Brachiaria decumbens
Daucus carota
Glycine max*
Gossypium hirsutum*
Lolium multiflorum*
Medicago sativa
Oryza sativa*
Phaseolus vulgaris*
Sorghum bicolor*
Triticum aestivum*
Zea mays*
Amostra mdia
(g)
80
1.000
100
30
1.000
1.000
60
50
400
1.000
900
1.000
1.000
Amostra de
Amostra de trabalho
trabalho para para determinao do
anlise de pureza no de outras sementes
(g)
(g)
8
80
120
1.000
10
100
3
30
500
1.000
350
1.000
6
60
5
50
40
400
700
1.000
90
900
120
1.000
900
1.000
* As indicaes para estas espcies esto em conformidade com os padres nacionais de sementes
institudos pela instruo normativa n 25 de 16/12/2005.
complementar a identificao do mesmo e disp-lo de tal modo que cada recipiente ou local do lote
possa ser amostrado. Se for evidente que o lote no homogneo, a amostragem no deve ser
efetuada.
No caso do proprietrio solicitar amostras extras para guardar, as mesmas sero retiradas por
ocasio da amostragem oficial, sendo lacradas e assinaladas com a palavra Duplicata.
As amostras simples devem ser retiradas do lote por meio de instrumentos apropriados, os
amostradores.
Quando a amostragem for realizada em sementes que deslizam com dificuldade nos
amostradores, como acontece com algumas gramneas e sementes com muita quantidade de
impurezas, a amostra poder ser extrada de forma manual.
Quando o lote est em recipientes (incluindo sacos), esses devem ser amostrados ao acaso e
as amostras simples devem ser retiradas da parte superior, mediana e inferior dos recipientes, mas
no necessariamente de mais de uma posio do mesmo recipiente.
Em lotes de sementes a serem embalados em recipientes pequenos (sacos de papel,
polietileno, latas), prefervel que a amostragem seja realizada antes da embalagem das sementes.
Para sementes j acondicionadas, um nmero suficiente de recipientes deve ser aberto e amostrado
e novamente fechado.
Em sementes armazenadas a granel, as amostras simples devem ser retiradas de diferentes
pontos do lote e em profundidades diferentes.
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N. de amostras simples
At 50
3 (mnimo)
51 a 500
5 (mnimo)
501 a 3.000
3.001 a 20.000
Acima de 20.000
N. de recipientes amostrados
= amostras simples
Todos, pelo menos 5
1 a cada 3, pelo menos 5
1 a cada 5, pelo menos 10
1 a cada 7, pelo menos 80
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2. Anlise de pureza
2.1. Objetivo
Entre os mais significativos testes para avaliar a qualidade fsica da semente esto o de
pureza fsica e ocorrncia de outras espcies cultivadas ou silvestres.
O objetivo da anlise de pureza determinar:
- a composio da amostra em exame e, conseqentemente, a do lote de sementes;
- a identidade das diferentes espcies e a natureza do material inerte que compem a
amostra.
Na anlise de pureza, consideram-se trs componentes: semente pura, outras sementes e
material inerte e a porcentagem de cada componente determinada pelo peso. Todas as espcies de
sementes e cada tipo de material inerte presente devem ser identificados tanto quanto possvel.
2.2. Definies
2.2.1. Sementes puras
So consideradas sementes puras todas as sementes da espcie em exame, indicada pelo
remetente ou identificada como predominante na amostra, devendo ainda ser includas nesta poro
todas as cultivares desta espcie.
Alm das sementes inteiras, maduras e no danificadas das espcies e cultivares em exame,
devem ser includas como puras as sementes que se encontrem nas seguintes condies:
- sementes inteiras de tamanho inferior ao normal, enrugadas, imaturas, trincadas, em incio
de germinao, desde que possam ser identificadas como sendo da espcie em exame;
- fragmentos de sementes quebrados, porm maiores do que a metade de seu tamanho
original;
- sementes levemente atacadas por molstias desde que seja possvel identific-las com
preciso como pertencentes espcie em exame.
As especificaes para as diferentes famlias e gneros esto descritas em detalhes nas RAS.
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2.4. Procedimento
2.4.1. Procedimento para uma amostra de trabalho inteira
Separao dos componentes - a mesa de trabalho dever estar completamente limpa e nela
a amostra deve ser conferida quanto autenticidade dos dados do remetente com relao espcie.
Quando se notar a presena de substncias inertes (palhas, p, antcios vazios de sementes e
pseudo-sementes de gramneas, sementes imaturas), de acordo com a espcie em exame, pode-se
usar peneiras de diversas malhas ou soprador para uma separao preliminar. Depois, com a ajuda
da esptula ou pina, inicia-se o exame criterioso e a separao em grupos distintos dos trs
componentes: sementes puras, outras sementes e material inerte.
Identificao - os laboratrios devem possuir mostrurios de sementes com amostras
devidamente catalogadas em famlias e, dentro dessas, por ordem alfabtica, em gneros e espcies.
Esse procedimento facilitar uma das mais importantes fases da anlise de pureza, que a
identificao das sementes encontradas. necessria tambm bibliografia especializada, com
chaves dicotmicas e fotografias ou outras ilustraes que permitam correta identificao das
sementes. Nessa identificao, dever ser indicada a espcie; se isso no for possvel, pelo menos o
gnero ou a famlia.
Registros na ficha de anlise - terminada a identificao, as outras sementes encontradas
so contadas e anotadas na ficha de anlise; se possvel, com o nome comum seguido do cientfico,
ou somente esse ltimo.
Pesagem - pesar os trs componentes separadamente: semente pura, outras sementes e
material inerte.
Clculo - a soma do peso total dos componentes (peso final) deve ser comparada com o
peso inicial da amostra, para verificar se no houve excessivo ganho ou perda de peso durante o
manuseio. Essa diferena no deve exceder a 5% do peso inicial. Se o ganho ou a perda for maior
do que 5%, nova anlise de pureza deve ser realizada.
A porcentagem em peso de cada componente deve ser informada com uma casa decimal. As
porcentagens devem ser baseadas na soma dos pesos dos componentes e no no peso original da
amostra de trabalho.
Componentes com menos de 0,05% devem ser considerados como trao e excludos do
clculo, as outras fraes devem somar 100%. Se a soma no igualar 100% (99,9 ou 100,1), ento
adicione ou subtraia 0,1 do maior valor (normalmente da frao semente pura).
Se uma correo maior do que 0,1% for necessria, deve ser observado se houve erro de
clculo.
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Exemplo: Trigo
g
Peso Inicial
120,5
///////
Semente Pura
119,0
98,8 (+ 0,1)
Outras Sementes
0,4
0,3
Material Inerte
1,0
0,8
Peso Final
120,4
100%
5%
6,0
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3.1. Objetivo
O objetivo dessa anlise estimar o nmero de sementes de outras espcies definidas pelos
padres (outras espcies cultivadas, silvestres e nocivas).
3.2. Determinaes
3.2.1. Outras espcies cultivadas
Outras espcies cultivadas encontradas na amostra, diferentes da espcie em anlise. Essa
determinao realizada simultaneamente anlise de pureza.
3.2.2. Sementes silvestres
Sementes invasoras silvestres encontradas na amostra. Essa determinao realizada
simultaneamente anlise de pureza.
3.2.3. Nocivas toleradas
So aquelas cuja presena na amostra permitida dentro de limites mximos especficos e
globais estabelecidos por lei. O resultado obtido pela soma das sementes nocivas toleradas
encontradas na anlise de pureza com as obtidas na anlise da amostra complementar utilizada para
atingir o peso do padro para a determinao de Outras Sementes por Nmero.
3.2.4. Nocivas proibidas
So aquelas cuja presena no permitida nos lotes de sementes, sua presena na amostra
suficiente para a recusa do lote. O resultado obtido pela soma das sementes nocivas proibidas
encontradas na anlise de pureza com as obtidas na anlise da amostra complementar utilizada para
atingir o peso do padro para a determinao de Outras Sementes por Nmero.
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4.1. Objetivo
O objetivo determinar a extenso pela qual a amostra mdia de sementes est de acordo
com a espcie ou com a cultivar indicada. Essa determinao valida somente se o remetente da
mesma identifica a espcie e a cultivar, bem como se o laboratrio dispe de uma amostra padro autntica
para efetuar a comparao. Os caracteres a serem comparados podem ser morfolgicos, fisiolgicos,
citolgicos ou qumicos e usam outros mtodos no permitidos na anlise de pureza. Essa anlise dever ser
realizada sempre que os padres de qualidade da espcie incluir tolerncias mximas de outras espcies
e outras cultivares.
Laboratrio
(g)
1.000
500
250
100
Campo e
laboratrio
(g)
2.000
1.000
500
250
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podem sofrer o processo de eletroforese ao mesmo tempo, em uma nica placa de acrilamida e
dentro de um nico processo eletrofortico. Aps a leitura ou observao das bandas, o gel por
inteiro pode ser plastificado e, assim, guardado por um determinado perodo de tempo.
J para o de forma de disco, a tcnica mais trabalhosa, requer mais tempo e mais
onerosa. realizada em equipamento onde o processo eletrofortico das diferentes cultivares ocorre
em tubos de ensaios individualizados. O princpio bsico o mesmo para ambos os processos,
mudando apenas a tcnica de preparo do teste. A vantagem desse mtodo permitir melhor
observao das bandas, possibilitando refazer apenas uma das amostras em caso de dvidas (no
sendo necessrio gastar muito gel) e de conservao, pois o processo como um todo, para cada
cultivar, pode ser armazenado por mais de um ano, sem qualquer alterao dentro do prprio tubo
de ensaio.
H pelo menos trs mtodos para avaliao das bandas de eletroforese: anlise
espectrofotomtrica, determinao do valor de Rf e zimogramas.
Nas Regras Internacionais consta, atravs da eletroforese, o mtodo padro de referncia
para a identificao de variedades de trigo, cevada, ervilha, azevm e milho.
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Na maioria das cultivares de Lolium multiflorum, os traos de razes das plntulas mostram
fluorescncia sob a luz ultravioleta, enquanto que para as cultivares de Lolium perene isso no
ocorre.
outras cultivares presentes em uma amostra exceder 15%, a informao deve adicionar que a
amostra consiste de uma mistura de diferentes cultivares.
Se, excepcionalmente, uma amostra de controle de autenticidade no foi testada para
comparao, tambm deve ser declarado.
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Bioensaios
Sero abordadas apenas as metodologias dos bioensaios indicadas para soja. O bioensaio
um mtodo de resultados diretamente quantificveis, fundamentado na caracterizao fenotpica das
plntulas, constituindo-se em alternativa prtica para uso em rotina no Laboratrio de Anlise de
Sementes por ser conduzido de forma similar ao teste de germinao..
As sementes so expostas ao herbicida durante o teste de germinao, permitindo que na
avaliao as plntulas originadas de sementes convencionais apresentem sintomas no
desenvolvimento, comprimento, cor ou outra caracterstica que as distinguem das geneticamente
modificadas. O glifosato causa anormalidade em plntulas de soja no geneticamente modificada.
As plntulas apresentam engrossamento, estrias longitudinais e amarelecimento gradativo do
hipoctilo, inibio do desenvolvimento da raiz primria e da emisso de razes secundrias, sendo
o hipoctilo proporcionalmente maior do que a raiz primria.
Podem ser conduzidos das seguintes metodologias: substrato umedecido, imerso das
sementes em soluo de herbicida, pr-embebio em substrato com herbicida, pulverizao de
plntulas em casa-de-vegetao e em sistema hidropnico.
a) Pr-embebio das sementes em substrato umedecido com soluo de herbicida
As amostras (duas subamostras de 50 sementes) so pr-embebidas em papel germitest
umedecido com soluo herbicida por 16 horas a 25C. Aps, so transferidas para substrato
umedecido com gua destilada e mantidas em germinador regulado a 25C. Este procedimento no
afeta o desenvolvimento das plntulas de soja GM e permite facilmente a diferenciao dos
gentipos GM e no-GM atravs das caractersticas morfolgicas das plntulas (Figura 4).
Plntulas
no-GM
Plntula
GM
Figura 4 - Diferenciao entre plntula de soja GM e no-GM.
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5. Teste de germinao
5.1. Objetivo
O objetivo do teste de germinao determinar o potencial mximo de germinao de um
lote de sementes, o qual pode ser usado para comparar a qualidade de diferentes lotes e estimar o
valor da semente para a semeadura.
A metodologia empregada pelos laboratrios padronizada, onde condies controladas de
alguns ou de todos os fatores externos permitem a obteno de uma germinao mais rpida, regular
e completa dentro do menor perodo de tempo para a maioria das amostras de sementes de
determinada espcie. A utilizao dessas condies padronizadas, consideradas timas, permite
tambm a obteno, reproduo e comparao dos resultados nos diferentes laboratrios.
5.2. Definio
Germinao, em teste de laboratrio, a emergncia e o desenvolvimento da plntula at
determinado estdio, onde o aspecto de suas estruturas essenciais indica se a mesma ou no capaz
de se desenvolver posteriormente em planta normal, sob condies favorveis de campo. Assim, o
resultado de germinao, relatado no Boletim de Anlise, corresponde porcentagem de sementes
que produziram plntulas normais.
perodo de tempo.
A maioria das sementes de espcies cultivadas germina sob limites relativamente amplos de
temperatura, enquanto que outras apresentam exigncias mais restritas. Em geral, a temperatura
considerada tima para cada espcie est situada sempre mais prxima temperatura mxima. A
soja, por exemplo, pode germinar de 8C a 40C, mas sua temperatura tima est situada entre
os 25 e 30C.
As temperaturas especificadas nas RAS para o teste de germinao foram estabelecidas
atravs de pesquisas, determinadas de acordo com a espcie. Observa-se que a maioria das sementes
germina bem em temperatura constante de 20C ou em temperaturas alternadas de 20-30C. Em
ambos os casos, constantes ou alternadas, elas devem permanecer to uniformes quanto possvel no
interior do germinador. No caso de temperatura constante, a variao devida ao termostato no deve
ser maior do que 1C em cada perodo de 24 horas. Para as alternadas, a temperatura mais baixa
deve ser mantida durante 16 horas (perodo noturno) e a mais alta por 8 horas (perodo diurno).
Quando a temperatura alternada a indicada para uma espcie de semente no dormente, uma
mudana gradual de at 3 horas considerada satisfatria. J para as sementes que apresentam
dormncia, essa mudana deve ser rpida, no mximo em 1 hora. Se o tipo e/ou qualidade do
termostato no permitir essa mudana rpida de temperatura, recomenda-se a troca diria das
amostras entre dois germinadores previamente regulados nas temperaturas desejadas.
5.3.3. Luz
A maioria das espcies de sementes germina tanto em presena de luz como no escuro,
sendo necessria para a germinao das sementes de muitas espcies de gramneas forrageiras e
hortalias, principalmente as recm-colhidas. Mesmo quando no indicada nas RAS, a iluminao
durante o teste, seja de fonte natural ou artificial, geralmente recomendada, a fim de favorecer o
desenvolvimento das estruturas essenciais das plntulas, facilitando sua avaliao. Com o uso da
luz, pode-se ainda evitar o aparecimento de plntulas estioladas e hialinas mais sensveis ao ataque
de microrganismos, bem como detectar certos defeitos como a deficincia de clorofila. Entretanto,
ainda que o uso da luz seja necessrio para a germinao de muitas espcies de sementes, h
tambm algumas poucas espcies, como Phacelia tanacetifolia, que podem apresentar inibio da
germinao quando em presena da luz.
A luz, quando prescrita para a germinao, deve ser bem distribuda por toda a superfcie do
substrato e empregada durante 8 horas a cada ciclo de 24 horas e, quando fornecida sob o regime de
temperaturas alternadas, deve ser proporcionada conjuntamente com a temperatura mais alta.
Podem ser utilizadas tanto a luz natural como a artificial, desde que no provoquem
alterao da temperatura dentro do germinador ou secagem excessiva do substrato. A luz
fluorescente fria e branca (com alta emisso de radiao vermelha) promove a germinao mais
efetivamente do que a luz solar ou proveniente de filamentos incandescentes (lmpada comum) que
contm radiao vermelho extrema, prxima ao infravermelho, a qual inibidora da germinao.
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outra de 0,05mm). Apesar de indicada para algumas espcies, no utilizada rotineiramente devido
s dificuldades para instalao do teste, por ocupar grande espao no interior do germinador e
apresentar problemas de manuteno da limpeza do laboratrio. , entretanto, recomendada sua
utilizao quando houver dvidas em algum teste, principalmente quanto toxidez (reanlise).
Deve ainda apresentar pH 6,0 a 7,5, ser lavada e esterilizada antes de sua utilizao. A areia
pode ser utilizada diversas vezes, mas antes de ser reutilizada, deve ser lavada, seca e reesterilizada.
Solo - pode substituir a areia, isto , ser utilizado em casos de dvidas nos testes normais.
Deve ser de boa qualidade, livre de partculas grandes, outras sementes, fungos, bactrias,
substncias txicas e nematides que possam interferir na germinao, crescimento e avaliao das
plntulas. Deve tambm apresentar pH 6,0 a 7,5 e no ser reutilizado. Esse tipo de substrato apresenta
dificuldade de padronizao, sendo dificilmente empregado pelos analistas.
Obs.: Nos testes com areia ou solo as sementes no devem ser cobertas, apenas comprimidas
contra o substrato.
5.4.2. gua
A gua utilizada nos testes deve ser livre de impurezas orgnicas e inorgnicas e apresentar
pH 6,0 a 7,5. Pode ser utilizada gua destilada ou deionizada. Quando for utilizada a gua destilada,
maior aerao das sementes necessria devido deficincia de oxignio da mesma.
5.4.3. Contadores de sementes
Normalmente dois tipos de contadores so encontrados nos laboratrios: tabuleiro contador
(placas perfuradas) e contador a vcuo.
Tabuleiro contador - utilizado para sementes maiores, como feijo, milho e soja. Seu
tamanho aproxima-se ao tamanho do substrato a ser usado e pode conter 100, 50 ou 25 orifcios de
tamanho e forma semelhantes espcie de semente a ser analisada.
Contador a vcuo - utilizado para espcies cujas sementes possuem forma regular e so
relativamente lisas, como as de cereais e espcies de Brassicas e Trifolium. As placas desse tipo de
contador contm 50 ou 100 orifcios, cujo dimetro deve estar em correspondncia com o tamanho
da semente e do vcuo aplicado.
5.4.4. Germinadores
Embora bastante variveis quanto ao tamanho, sistema empregado para acomodao das
amostras, dispositivos adotados para controle de temperaturas, luz, umidade relativa do ar interna e
outros detalhes, os germinadores mais usados na grande maioria dos laboratrios so:
Germinador de cmara - composto de uma cmara de paredes adequadamente isoladas
para diminuir as variaes bruscas da temperatura interna e um conjunto de bandejas. Seu fundo
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Mdulo 4 Analise de Sementes
39
serve como depsito para gua destilada que deve ser mantida em nvel adequado, proporcionando
umidade relativa interna de 90-95%.
Os modelos mais simples possuem apenas um sistema de aquecimento constitudo de
resistncia eltrica ligada ao termostato, o qual permite o controle de temperatura interna. Os mais
modernos consistem de uma ou duas cmaras com autonomia de isolamento, dotadas de sistema de
aquecimento, refrigerao e circulao de gua e/ou ar no seu interior. Possuem sistema de
iluminao e mecanismo para controle automtico de alternncia da temperatura. Podem
permanecer no ambiente do laboratrio e proporcionar maior diversificao de testes devido aos
seus sistemas de iluminao, controle de temperatura e circulao de gua.
Germinador de sala - seu princpio de construo e funcionamento pode ser semelhante
aos do tipo cmara, diferindo apenas na sua dimenso, podendo permitir, inclusive, a entrada de
pessoas. As amostras so colocadas em prateleiras laterais ao longo de uma passagem central e alm
do sistema de controle de temperatura e luz, equipado com sistema de ventilao e
umidificadores, proporcionando uniformizao da temperatura e umidade relativa interna elevada.
Alternativamente, as amostras podem ser colocadas em carrinhos com rodas, os quais so
empurrados para dentro do germinador durante o perodo do teste.
Germinador de cmara x sala - a combinao dos dois tipos citados anteriormente, de
modo geral, tem grande capacidade e preo mais acessvel, comparado aos germinadores automticos.
A sala construda com isolamento trmico e o ambiente mantido por meio de ar
condicionado e/ou compressores temperatura constante correspondente a mais baixa normalmente
usada nos testes de germinao, geralmente entre 15-20C. No seu interior, so colocados os
germinadores tipo cmara (modelo simples), regulados a diferentes temperaturas desejadas. Nesse
sistema, alm da temperatura constante, o mtodo da temperatura alternada pode ser empregado
pela simples troca das amostras entre dois germinadores individuais, previamente regulados s
temperaturas desejadas.
Campnula vtrea ou aparelho de Jacobsen (tanque de Copenhague) - este aparelho
consiste de um prato de germinao sob o qual os substratos de papel de filtro com sementes so
colocados. O substrato mantido continuamente mido atravs de um pavio, o qual se estende para
baixo atravs de aberturas ou orifcios no prato de germinao at um recipiente de gua.
5.4.5. Destilador de gua
Alm do umedecimento do substrato e preparo de solues (na ausncia de gua potvel de
boa qualidade), a gua destilada deve ser usada nos germinadores (umidade relativa interna) para
manter o bom funcionamento dos mesmos.
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40
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Mdulo 4 Analise de Sementes
41
5.6. Metodologia
5.6.1. Amostra de trabalho
So utilizadas 400 sementes, tomadas ao acaso da poro semente pura da anlise de
pureza, semeadas em 4 repeties de 100 sementes, 8 de 50 ou 16 de 25. O nmero de repeties
depende da espcie em exame e/ou do tamanho das sementes x tamanho do substrato.
As sementes multigrmicas, como glomrulos de beterraba e espinafre da Nova Zelndia,
no so separadas para o teste de germinao, porm so testadas como se fossem sementes
individuais.
5.6.2. Semeadura
As Regras para a Anlise de Sementes especificam o procedimento mais adequado para a
conduo dos testes de germinao, procurando estabelecer condies extremamente favorveis
espcie testada. Essas condies permitem que, aps a germinao inicial das sementes, o
desenvolvimento das plntulas ocorra normalmente at um estdio que possibilite sua correta
interpretao.
O analista deve examinar cuidadosamente as instrues encontradas nas Regras
Internacionais (Tabela 5) para a espcie de semente a ser analisada e adotar aquelas mais
condizentes com as condies de seu laboratrio. Quando a tcnica adotada apresentar falhas, o
teste deve ser repetido, usando-se um dos outros mtodos alternativos propostos.
Citando exemplos prticos, primeiramente com a espcie soja, apresentada para o teste de
germinao, a seguinte metodologia nas Regras Internacionais:
Substrato: RP; EA
Temperatura: 20-30; 25C
Contagens: 5-8 dias
Em teste normal: Em caso de dormncia: Na prtica, tal recomendao quer dizer que 8 repeties de 50 sementes devero ser
semeadas aleatoriamente em substrato de papel em forma de rolo (RP) e colocadas a germinar
temperatura alternada de 20-30C por at 8 dias. Sero utilizadas para a semeadura 4 folhas de
papel substrato (3 de base e 1 de cobertura), previamente umedecidas e de tamanho adequado
(observando-se a relao tamanho de substrato x tabuleiro contador x espaamento), em cada 8
repeties de 50 sementes. As repeties (em forma de rolos) sero identificadas, individualmente e
respectivamente, com as letras A, B, C ... e H e agrupadas formando uma amostra que, aps a
identificao correspondente ao seu nmero de registro, ser colocada em posio vertical no
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42
Allium cepa
Andropogon
gayanus
Avena sativa
Brachiaria
humidicola
Daucus carota
Glycine max
Lolium multiflorum
Medicago sativa
Oryza sativa
Substrato
Temperatura
(C)
Contagens (Dias)
1a
Final
SP;RP;EA
SP
20;15
20-35
06
07
12
14
RP;EA
20
05
10
SP
20-35
07
21
SP;RP
RP;EA
SP
SP;RP
SP;RP;EA
20-30;20
20-30;25
20-30;15-25;20
20
20-30;25
07
05
05
04
05
14
08
14
10
14
20-30;25;20
20-30;25
20-30;25;20
05
04
04
09
10
07
Para espcies de sementes como trigo, arroz, sorgo, entre outras de tamanho semelhante, o
procedimento para a montagem do teste parecido. Quatro repeties de 100 sementes so
semeadas com contador a vcuo, em substrato de papel (RP) de tamanho que corresponda metade
do tamanho do substrato utilizado para a soja. Na conduo desses testes, devem ser observados o
umedecimento adequado dos substratos e as recomendaes quanto temperatura, dias de
contagem e outras possveis exigncias da espcie.
Por outro lado, as espcies de sementes pequenas que exigem ambiente mido e no so
sensveis luz so colocadas para germinar entre duas ou mais camadas de papel mata-borro (EP),
em placas de Petri ou caixas plsticas incolores e transparentes (gerbox). Quando sensveis luz,
so semeadas da mesma forma, s que sobre uma ou mais camadas de papel, sem cobertura (SP).
A utilizao do papel mata-borro exige cuidado por parte do analista para verificar a
necessidade do reumedecimento durante a conduo do teste, principalmente aquelas espcies que
requerem altas temperaturas e muitos dias para a completa germinao das sementes. Ex: Paspalum
notatum var. Pensacola.
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44
Plntulas normais
Plntulas intactas - so aquelas que apresentam todas as suas estruturas essenciais bem
desenvolvidas, completas, proporcionais e sadias. Apresentam sistema radicular bem formado,
hipoctilo desenvolvido e intacto e/ou epictilo no lesionado, presena de um ou dois cotildones
quando se tratar de mono ou dicotiledneas, respectivamente. Devem apresentar crescimento
proporcional entre a parte area e o sistema radicular, com exceo para certas espcies florestais,
cujas razes so muito longas. Em caso de desenvolvimento desigual, o analista deve examinar as
plntulas com maior cuidado (Figura 5).
Plntulas com pequenos defeitos - so tambm consideradas como normais, as plntulas
que apresentam algumas deficincias, como: ausncia de raiz primria, mas com razes secundrias
ou adventcias vigorosas e em nmero suficiente para as leguminosas, malvceas e cucurbitceas;
leso superficial (no atingindo os vasos condutores) no hipoclito, epiclito ou cotildones;
ausncia de um cotildone, desde que o restante esteja sadio e haja uma gema normal; plmula com
comprimento maior do que a metade do coleptilo, inserida nesse, desde que o mesmo se apresente
intacto para as gramneas (Figura 6 e 7).
Plntulas com infeco secundria - plntulas atacadas por fungos ou bactrias, mesmo que
seriamente infeccionadas, se for evidente que a prpria semente no a causa da infeco (infeco
secundria) e as mesmas apresentem todas as estruturas essenciais presentes e normais.
TRIGO
SOJA
Gema apical
Folha primordial
Folha primria
Coleptilo
Epictilo
Cotildones
Hipoctilo
Raiz primria
Raiz secundria
Raizes Seminais
a)
b)
d)
c)
Figura 6 - Plntulas normais de dicotiledneas: a e b) cotildones apodrecidos, mas com metade intacta;
c) um cotildone ausente; d) sem raiz primria, mas com razes secundrias bem
desenvolvidas.
a)
b)
Figura 7 - Plntulas normais de monocotiledneas: a) razes seminais bem desenvolvidas; b) razes seminais presentes,
porm fracas.
Plntulas anormais
Plntulas danificadas apresentam danificaes como: ausncia de cotildones, leses
profundas afetando os tecidos condutores, ausncia de raiz primria (quando esta estrutura
essencial), ou sem raiz primria e com as secundrias ou adventcias muito fracas (Figura 8).
Plntulas deformadas em conseqncia do desenvolvimento geral fraco e desequilibrado
das estruturas essenciais, tais como, plmulas, hipoctilos torcidos em espiral ou atrofiados, hipoclito
e/ou coleptilos curto e engrossado, plmulas fendidas ou pouco desenvolvidas (menos da metade
do tamanho do coleptilo), coleptilo vazio, plntulas hialinas ou vtreas (Figura 9).
Plntulas deterioradas com uma ou todas as estruturas essenciais infeccionadas ou
apodrecidas por causas internas (infeco primria) (Figura 10).
De modo geral, a ocorrncia de anormalidades em plntulas pode ser causada por danos
mecnicos, ataque de microrganismos ou de insetos, vitalidade em declnio (deteriorao), danos
por produtos qumicos, danos por geadas, toxidez de substrato, contaminao do equipamento (uso de
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46
bandejas de cobre soldadas com cido durante os testes) e outras deficincias prprias das sementes
(Figura 11).
a)
b)
Figura 8 - Plntulas anormais danificadas em dicotiledneas: a) hipoctilo com fendas se estendendo aos tecidos
condutores, com constrio e com leses estriadas; b) folhas primordiais ausentes.
a)
b)
c)
Figura 9 - Plntulas anormais deformadas em dicotiledneas: a) engrossamento do hipoctilo; b) hipoctilo fraco, torcido
e enrolado; c) razes secundrias bem desenvolvidas, porm voltadas para cima ou para os lados.
Figura 10 - Plntulas anormais deterioradas em dicotiledneas, com os cotildones apodrecidos, atingindo a plmula.
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47
a)
b)
c)
d)
e)
f)
g)
Figura 11 - Anormalidades em plntulas de trigo: a) ausncia de raiz seminal, razes seminais curtas e fracas, delgadas ou
hialinas; b) parte area curta e engrossada; c) parte area apodrecida ou apodrecimento do ponto de insero entre a plntula e o
endosperma; d) coleptilo sem folhas primordiais ou hialinas; e) plntula danificada com coleptilo estriado e parte area espiralada
ou torcida; f) folhas primordiais curtas, atingindo apenas metade da altura do coleptilo; g) folhas primordiais partidas ou fendidas
longitudinalmente.
- Sementes no germinadas
Sementes duras permanecem sem absorver gua at o final do perodo do teste.
Apresentam-se intactas, isto , no-intumescidas. Esse fenmeno motivado pela impermeabilidade
do tegumento das sementes gua, sendo considerado como um tipo especial de dormncia que
ocorre em determinadas espcies, principalmente nas famlias Leguminosae e Malvaceae.
Ao final do teste de germinao, as sementes duras so contadas e relatadas como tal no
Boletim de Anlise. Quando uma maior informao requerida e algum tratamento especial
essencial, esse pode ser aplicado antes do incio do teste de germinao ou nas sementes duras que
permanecerem aps o perodo do teste.
Quando solicitado pelo interessado, o laboratrio poder usar um dos tratamentos
________________________________________________________________________________
48
especficos para superar a dureza das sementes, tais como, escarificao mecnica, escarificao
com cido sulfrico concentrado (H2SO4) ou embebio direta em gua por perodo de 24 a 48
horas.
Sementes dormentes - as sementes de muitas gramneas forrageiras, de alguns cereais e
crucferas e de muitas espcies florestais e frutferas, embora vivas, no germinam quando
submetidas a condies consideradas timas para sua germinao. Apenas absorvem gua e
intumescem, apresentam aspecto sadio e no apodrecem.
Muitas so as causas desse fenmeno e as mais comuns so:
- envoltrios do embrio ou da semente (pericarpo) impermeveis ao gs carbnico ou ao
oxignio (arroz);
- envoltrios demasiado duros que impedem a expanso do embrio e emergncia da raiz
(florestais e frutferas);
- embries fisiologicamente imaturos (gramneas forrageiras e alguns cereais);
- presena de substncias inibidoras nos frutos (acelga e beterraba).
So vrios os mtodos que podem ser utilizados para a superao da dormncia das
sementes favorecendo a germinao durante o teste.
Quando for utilizado algum desses mtodos, ele deve ser mencionado no Boletim de
Anlise. Os mais empregados so armazenagem a seco, pr-esfriamento, pr-aquecimento, luz,
nitrato de potssio (KNO3), cido giberlico (GA3) e envelopes de polietileno lacrados.
Sempre que aparecerem no teste de germinao sementes dormentes, necessrio fazer um
reteste, usando mtodos para superar a dormncia.
Se forem encontradas sementes dormentes a uma taxa de 5% ou mais, deve-se verificar se
essas sementes possuem o potencial de produzirem plntulas normais; isso pode ser feito atravs do
teste de tetrazlio, retirada do embrio ou raio X. Se existir qualquer dvida se a semente
dormente ou morta, ento deve ser classificada como morta.
J no caso de sementes de essncias florestais, todas as sementes no-germinadas devem ser
cortadas e verificado o nmero de sementes vazias, sem embrio ou danificadas por insetos.
Sementes mortas - so as sementes que ao final do teste se apresentam intumescidas, mas
no germinadas, moles e/ou apodrecidas, s vezes contaminadas por microrganismos. Se for
observado que uma semente produziu qualquer parte de uma plntula, essa contada como plntula
anormal.
Outras categorias - em algumas circunstncias, sementes vazias e no-germinadas podem
ser classificadas e relatadas em Outras Determinaes, no Boletim de Anlise.
5.6.5. Clculo
O clculo do teste de germinao realizado obtendo-se a mdia das quatro repeties de
100 sementes utilizadas, observando-se o limite mximo de variao permitido entre as mesmas em
tabelas de tolerncia contidas nas RAS.
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49
A
85
B
79
C
87
D
83
X = 84%
84,50 85%
84,25 84%
Se algum desses valores for igual a zero, ele deve ser anotado com -0,0-.
A soma das porcentagens de plntulas normais e anormais e de sementes no-germinadas
deve ser de 100.
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50
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Mdulo 4 Analise de Sementes
51
clulas vivas a reao de reduo que resulta na formao de um composto vermelho, no difusvel,
conhecido como formazan.
SOLUO DE TETRAZOLIO + H+
(incolor difusvel)
desidrogenases
FORMAZAN
(vermelho no difusvel)
Como essa reao se processa no interior das clulas e onde o pigmento se fixa, ocorre
uma ntida separao entre o tecido vivo que respira do tecido morto que no respira e que mantm
sua cor natural.
um teste rpido e como tal, cuidados especiais devem ser tomados quanto aos fatores que
podem afetar a velocidade da reao:
- pH da soluo - deve estar entre 6,5 a 7,5. Solues cidas retardam a reao;
- temperatura do teste - a reao favorecida entre os 30-40C, no devendo ultrapassar os
40C para que no ocorra a degradao das protenas;
- presso atmosfrica e luz - a vcuo e no escuro a reao mais rpida;
- pr-condicionamento da semente - o corte para expor o embrio realizado mais rpido e
facilmente em sementes previamente embebidas.
6.1.1. Material e equipamentos
Para a realizao do teste, so necessrios:
- o reagente sal de tetrazlio - o mais empregado o 2,3,5 Trifenil Cloreto de Tetrazlio;
- vidrarias tais como placas de Petri, copos de Becker e frascos de vidro de cor mbar para
armazenar a soluo;
- lminas ou bisturi para cortes e/ou estiletes para perfurar as sementes para expor o embrio
ao do TZ;
- estufas ou germinador com controle de temperatura entre 30-40C para o desenvolvimento
mais rpido da colorao;
- lupas ou binoculares com aumento de 5 a 10 vezes e com iluminao fluorescente,
principalmente em se tratando de sementes pequenas;
- refrigerador para armazenar as sementes aps a colorao e antes da avaliao;
- substrato de papel para o pr-acondicionamento das sementes.
6.1.2. Metodologia
a) Preparo da soluo
Pode ser preparada diretamente na concentrao desejada ou pode ser feita uma soluo
estoque a 1% de concentrao, misturando-se 10g de sal de tetrazlio em 1000ml de gua destilada.
Essa soluo estoque deve ser rigorosamente mantida em frasco de vidro de cor mbar e em local
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Mdulo 4 Analise de Sementes
53
fresco e escuro para evitar a auto-oxidao. Quando necessrio, partes da mesma podem ser diludas
pela aplicao de mais gua em quantidade suficiente para atender as concentraes desejadas. Com
base em experincia e devido ao alto custo do sal de tetrazlio, sugere-se o uso de concentraes de
0,075% para sementes de soja e feijo-vagem. Algumas sementes, como as de essncias florestais,
ornamentais e fruteiras requerem concentraes de 0,5%, embora para a maioria das espcies as
RAS da ISTA indicam a concentrao de 1%.
b) Amostragem e preparo das sementes
Pr-umedecimento das sementes - As sementes provenientes da poro de sementes puras
(4 x 100) so pr-acondicionadas. O pr-umedecimento necessrio preliminarmente colorao
de algumas espcies e altamente recomendado para outras. Esse procedimento provoca a ativao
do sistema enzimtico, o amolecimento das sementes, facilitando seu preparo (cortes) e o
desenvolvimento de uma colorao mais ntida e uniforme. As sementes podem ser pracondicionadas, atravs do umedecimento lento ou da embebio direta em gua.
A tcnica do umedecimento lento deve ser utilizada para aquelas espcies que so mais
propensas a sofrer fraturas se submersas diretamente na gua. Sementes velhas e secas de diversas
espcies podem, tambm, beneficiar-se desse tipo de umedecimento. As sementes so colocadas
entre duas folhas de papel substrato previamente umedecidas e mantidas em germinador a 20oC por
perodo, geralmente, de 16 horas.
Na embebio direta em gua, as sementes devem ser completamente imersas e deixadas at
a sua embebio completa. Se o perodo de embebio for maior do que 24 horas, a gua deve ser
trocada.
Preparo das sementes - O mtodo de preparo das sementes vai depender das caractersticas
da espcie em exame, sendo que os mais utilizados so: a) corte longitudinal, corte transversal ou
inciso transversal das sementes para expor o embrio diretamente ao do tetrazlio ou facilitar a
penetrao do mesmo atravs do endosperma at o embrio sendo que esse procedimento comum
para sementes de gramneas e conferas e a posio do corte vai depender do tamanho da semente e
da facilidade de sua execuo e posterior interpretao do teste; b) perfurao - geralmente
empregado em sementes de gramneas muito pequenas, onde a tentativa de um corte pode ocasionar
o esmagamento do embrio; c) remoo dos tegumentos - efetuada aps o pr-condicionamento de
forma manual ou com auxlio de pinas, para semente de algumas espcies de leguminosas
(amendoim) e sementes das famlias das compostas e cucurbitceas e d) exciso do embrio - pode
ser usada para Hordeum, Secale e Triticum. O embrio retirado (com o escutelo), se solta do
endosperma e transferido para uma soluo de tetrazlio.
Obs.: No Brasil, para sementes de soja, ervilha e feijo, utilizado o mtodo da colorao
direta; nesse mtodo, as sementes, aps o pr-condicionamento inicial, so colocadas diretamente
na soluo, sem nenhum preparo adicional.
c) Colorao
O processo de colorao se d pela imerso das sementes na soluo de tetrazlio
temperatura de 30C, no escuro. O tempo requerido para a colorao varia com a espcie, e mesmo
________________________________________________________________________________
54
entre sementes de uma mesma amostra. A colorao mais rpida em solues de TZ com
concentraes mais fortes, temperaturas mais altas e no escuro. A cada 10C de aumento na
temperatura, dobra-se a velocidade da reao. Observa-se que as sementes que apresentam os
tegumentos danificados, colorem-se mais rpida e profundamente; portanto, o contato das sementes
com a soluo no deve ser excessivo, pois h a possibilidade dos tecidos mais fracos assumirem
colorao mais escura, dificultando a avaliao. Esse comportamento observa-se tambm em
sementes com incio de deteriorao ou mais deterioradas, pois as membranas celulares nesse
estdio se tornam mais impermeveis, permitindo a entrada de quantidade maior da soluo de TZ.
Essa quantidade maior de soluo dentro das sementes somada a um processo de respirao mais
intenso (tecidos em incio de deteriorao) ocasiona reduo da soluo em proporo bem maior
no interior das clulas, originando colorao mais intensa comparada quela observada nos tecidos
sadios. Esse fator considerado inclusive como parmetro para medir o vigor dos diferentes lotes
de sementes. Durante o processo de colorao, pode ocorrer a formao de espuma rsea na
superfcie da soluo ou, ainda, um precipitado vermelho no fundo do recipiente. O primeiro caso
indica reao do sal com o exsudato das sementes ou com os microrganismos e o segundo,
evidncias de um perodo excessivo de contato entre as sementes e a soluo de tetrazlio.
Alcanada a colorao ideal, a soluo drenada e as sementes so lavadas com gua, sendo
mantidas submersas at o momento da avaliao. Se a avaliao no ocorrer de imediato, as
sementes submersas em gua podem permanecer no refrigerador por perodo de tempo de at 24
horas.
d) Interpretao
A interpretao do teste exige do analista conhecimento das estruturas essenciais das
sementes, as quais so as responsveis pelo desenvolvimento de uma plntula normal. As estruturas
da semente e da plntula de feijo e de milho so mostradas nas Figura 12 e 13. A distribuio entre
tecidos vivos deteriorados e mortos nessas reas a base para a avaliao do teste sendo, portanto, a
colorao um dos fatores que deve ser cuidadosamente observado. Ela deve permitir uma
diferenciao precisa entre os diferentes padres de colorao em que se encontram os tecidos e
identificar a possvel natureza das injrias.
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Mdulo 4 Analise de Sementes
55
2
7
1
1
II
2
III
Figura 12 - Estruturas da semente e da plntula nas dicotiledneas (feijo). I - Vista externa, tegumento removido; II Vista interna com um cotildone removido; III - Plntula: 1 - cotildone; 2 - radcula; 3 - plmula; 4 - epictilo; 5 - folha primria; 6 ponta de crescimento; 7 - hipoctilo.
1
3
5
6
7
1
2
I
8
II
9
8
III
Figura 13 - Estruturas da semente e da plntula nas gramneas (milho). I - Vista externa da cariopse; II - Vista seccionada
da cariopse; III - Plntula: 1 - pericarpo; 2 - embrio; 3 - endosperma; 4 - escutelo; 5 - coleptilo; 6 - plmula; 7 - raiz seminal; 8 radcula; 9 - coleorriza.
________________________________________________________________________________
56
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Mdulo 4 Analise de Sementes
57
Figura 14 - Corte longitudinal de duas sementes de feijo-vagem, mostrando danos no eixo embrionrio.
morna que no exceda 25oC e a gua deve ser trocada 2 vezes por dia, para retardar o crescimento
de fungos ou bactrias e a acumulao de exsudato da semente. Aps a embebio das sementes, os
embries so extrados com bisturi ou lmina, em condies mais asspticas possveis, sendo
recomendado soluo aquosa com 70% de etanol, para esterilizar os instrumentos e a mesa de
trabalho. Aps sua extrao (no devem ser danificados pelo processo e tocados o mnimo
possvel), os embries so colocados sobre papel filtro previamente umedecido e a mantidos
temperatura de 20 a 25C, por perodo de at 14 dias, com mnimo de 8 horas de luz, diariamente.
Durante esse perodo, avaliaes dirias devem ser feitas, considerando-se como viveis os
embries que apresentarem as seguintes caractersticas: a) embries germinando; b) embries com
um ou mais cotildones apresentando crescimento ou colorao esverdeada; c) embries firmes,
ligeiramente aumentados, brancos ou amarelos, de acordo com a espcie. Os considerados como
no viveis se apresentam: a) deteriorados ou envolvidos por fungos; b) deformados ou
degenerados, com forte colorao marrom, preta, de aparncia cinza ou branco hialina. Nessa
classe, so tambm computadas as sementes vazias (sem embries).
O resultado expresso em porcentagem de sementes viveis em nmeros inteiros. A
porcentagem de germinao baseada no nmero total de frutos ou sementes testadas e no no
nmero de embries extrados, sendo determinada pela frmula:
% G = nmero de embries viveis X 100
nmero de sementes testadas
________________________________________________________________________________
60
b) Procedimento
Utilizar bandeja com 100 compartimentos individuais, cada um com capacidade para
2,5ml;
Colocar gua destilada e fervida na bandeja;
Colocar uma semente em cada compartimento da bandeja;
Deixar as sementes embeberem gua por 30 minutos temperatura de 20-25C;
Aps a embebio, colocar uma gota da soluo nos compartimentos da bandeja com
gua e semente (Figura 15);
Mexer bem o exsudato e, aps 15 segundos, mexer novamente;
Fazer imediatamente a avaliao.
c) Avaliao
O exsudato rosa forte de semente vivel, enquanto que o exsudato incolor ou rosa muito
fraco de semente morta.
d) Precaues
Deixar um compartimento sem colocar semente para servir como referncia.
Colocando uma gota de soluo na gua a mesma deve tornar-se rosa forte, caso isso no ocorra,
a gua no de boa qualidade (deve ser destilada e fervida por 5 minutos);
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62
Destilao
Tolueno
Karl Fischer
Qumicos
Pentxido de fsforo
- Mtodos de estufa
Os mtodos de estufa baseiam-se na secagem de uma amostra de sementes de peso conhecido e no
clculo da quantidade de gua, atravs da perda de peso da amostra.
Os mtodos de estufa baixa e alta temperatura so adotados pelas Regras Internacionais.
Duas repeties por amostra devero ser analisadas, sendo que a variao mxima permitida entre
elas de 0,2%. Caso a variao ultrapasse esse valor, duas novas repeties devem ser avaliadas.
Esses mtodos so indicados com moagem obrigatria para algumas espcies relacionadas nas RAS
________________________________________________________________________________________________________________________
Mdulo 4 Analise de Sementes
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________________________________________________________________________________
64
Exemplo:
Identificao
da repetio
No da
cpsula
A
B
61
62
27,089
27,834
Peso da cpsula +
semente mida
(Pu)
31,666
31,929
Peso da cpsula +
semente seca (Ps)
Umidade
(%)
30,969
31,307
15,22
15,18
100
= 0,697 x 100 = 15,22
31,666 - 27,089 4,577
100
31,929 - 27,834
15,22 - 15,18 = 0,04 logo, a diferena entre as repeties no excedeu a 0,2%, portanto o
resultado a ser informado de 15,2%.
- Mtodo de destilao
Este mtodo recomendado para espcies que contm substncias extremamente volteis. A
operao simples, utilizam-se 100g de sementes inteiras, colocando-se essa poro de sementes no
frasco de vidro (Erlenmeyer), juntamente com determinada quantidade de leo de cozinha
(preferencialmente de soja), em quantidade suficiente que cubra as sementes, sob a qual se acende
uma fonte de calor (Figura 16). A gua volatilizada condensada e recolhida em proveta graduada.
Colocando-se 100g de sementes, a leitura direta do volume condensado fornece o grau de umidade
das sementes, em cerca de 20 minutos. Quando a temperatura do leo alcanar a temperatura
indicada para a espcie, desliga-se a fonte de aquecimento (Tabela 6).
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Mdulo 4 Analise de Sementes
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3
7
8
2
10
1
11
Figura 16 - Determinador de umidade por destilao. 1 - Suporte para cmara de condensao; 2 - Cmara de condensao
(30 x 13cm); 3 - Tubo de condensao; 4 - Tubo de coneco; 5 - Tubo curvo; 6 - Termmetro (200C); 7 - Rolha de borracha; 8 Frasco Erlenmeyer (500ml); 9 - Fonte de calor; 10 - Suporte para a fonte de calor; 11 - Proveta graduada.
Temperatura de desligamento
175oC
180oC
185oC
190oC
195oC
200oC
obteno dos resultados, isto , determinao do ponto de colheita, controle durante a secagem,
armazenamento, etc.
Esses determinadores apresentam como vantagens a rapidez, facilidade de operao e
permitem leitura direta. Como desvantagens, apresentam resultados menos precisos que os obtidos
com os mtodos bsicos e necessitam de constante aferio com um mtodo bsico para que os
resultados sejam confiveis, alm do alto preo do equipamento.
Os aparelhos baseados na condutividade eltrica mostram resultados satisfatrios quando
as sementes apresentam de 7 a 23% de umidade. Em nveis inferiores a 7%, a gua fortemente
retida pelos colides e, acima de 23%, a condutividade cresce consideravelmente, determinando
erros.
O determinador de umidade Universal baseado na condutividade eltrica e somente haver
indicao satisfatria da umidade quando essa estiver bem distribuda. Durante o processo de
secagem, se a umidade for determinada com as sementes ainda quentes, essas apresentam-se com a
superfcie seca e midas internamente e o determinador de umidade registra ento um baixo teor de
gua, visto que o aparelho mede a resistncia eltrica das superfcies mais secas da semente. Esse
erro ser evitado se as sementes forem mantidas em repouso por algum tempo.
Os aparelhos baseados nas propriedades dieltricas apresentam algumas vantagens sobre
aqueles baseados na resistncia eltrica. Esto menos sujeitos aos erros resultantes da m
distribuio do teor de gua nas sementes e podem testar com maior preciso as que possuem muito
alta ou muito baixa umidade.
Os fatores limitantes para o seu uso esto relacionados com o alto custo e a dificuldade na
regulagem e alinhamento entre os diversos tipos.
7.3.3. Aferio de determinadores de umidade
A aferio dos determinadores de umidade deve ser realizada em nvel de cada laboratrio e
para cada espcie, dentro da seguinte sistemtica:
- utilizar amostras com teores de gua diferentes, dentro dos limites observados, durante o
manejo das sementes (7 a 25%);
- os teores de gua podem ser obtidos atravs de secagem ou umedecimento;
- uniformizao da umidade, embalagem hermtica - 48-72 horas;
- realizar determinaes de umidade simultneas no equipamento a ser aferido e na estufa.
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Mdulo 4 Analise de Sementes
67
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68
8.1. Objetivo
Esta avaliao determina o peso mdio de 1000 sementes que geralmente utilizado para o clculo
da densidade de semeadura e a determinao do peso da amostra de trabalho para anlise de pureza de
espcies novas que no constam ainda nas RAS. Fornece uma idia tambm do estado de maturidade e
sanidade das sementes.
8.2. Metodologia
Esta determinao pode ser realizada de duas maneiras:
a) Pesa-se diretamente toda a poro semente pura da anlise de pureza e conta-se a seguir
o nmero de sementes existentes nessa poro com o auxlio de uma mquina contadora. O peso
mdio de 1000 sementes, nesse caso, ento obtido atravs da frmula:
Peso de 1000 sementes = Peso da amostra x 1000
no total de sementes
b) Contam-se ao acaso, com contadores mecnicos, 8 repeties de 100 sementes provenientes da
poro semente pura. Pesam-se, a seguir, essas repeties em separado e calcula-se a varincia, o desvio
padro e o coeficiente de variao dos valores obtidos nas pesagens, como segue:
Varincia (V) = n ( x2) - ( x)2
n (n - 1)
Desvio padro (S) = variancia
S
Coeficiente de variao (C.V.) = _ x 100
X
onde:
x = peso de cada repetio
n = nmero de repeties
= somatrio
X = peso mdio de 100 sementes
Se o C.V. no exceder de 6% para sementes consideradas como palhentas ou 4% para as
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Mdulo 4 Analise de Sementes
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no-palhentas, o resultado dessa determinao ser obtido multiplicando-se o peso mdio das 100
sementes por 10. Se, ao contrrio, exceder aos limites mencionados, pesam-se mais 8 repeties e
calculam-se novamente a varincia e o desvio padro, agora sobre 16 repeties. No necessrio
calcular novamente o coeficiente de variao. Aps o clculo da varincia e do desvio padro,
desprezam-se todas as repeties cujos pesos divergiram da mdia mais do que o dobro do desvio
padro obtido. Feito isso, calcula-se a nova mdia das repeties restantes e multiplica-se a mesma
por 10.
Exemplo: Feijo
Repeties
x1
25,23
Peso (g)
x2
25,71
x3
24,17
x4
25,00
x5
24,24
x6
24,92
x7
24,35
x8
23,83
________________________________________________________________________________
70
9.1. Definio
Corresponde ao peso de determinado volume de sementes. Se esse volume for um hectolitro
e o peso for expresso em quilograma, essa determinao denominada de peso hectoltrico.
realizada em laboratrio, principalmente para trigo, centeio, cevada, triticale, arroz.
9.2. Procedimento
Como o peso hectoltrico de uma amostra varia de acordo com seu grau de umidade, deve-se
realizar essas determinaes simultaneamente.
A determinao do peso hectoltrico realizada com o auxlio da balana hectoltrica, cuja
capacidade pode ser de de litro (Figura 17) ou de 1 litro de sementes (Figura 18). Para o primeiro
caso, utilizam-se tabelas de converso, j no segundo a leitura direta. So usadas para essa anlise
duas repeties, retiradas da amostra mdia e enviadas ao laboratrio em recipiente hermtico.
J existem disponveis no mercado balanas eletrnicas digitais para medio do peso
hectoltrico; entretanto, devido ao alto custo do equipamento, as balanas manuais, ainda, so
bastante utilizadas.
Peso (g)
Peso (kg.hl-1)
185,0
73,65
184,5
73,40
-1
________________________________________________________________________________________________________________________
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Peso (kg.hl-1)
77,0
76,5
________________________________________________________________________________
72
10. Tolerncias
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Mdulo 4 Analise de Sementes
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11. Vigor
Menor Uniformidade
Maior Sensibilidade a Adversidades
Reduo da Emergncia das Plntulas em Campo
Plntulas Anormais
Perda do Poder Germinativo
----------------------MORTE--------------------b) Resultados de emergncia das plntulas em campo so inferiores aos observados em
laboratrio
Quando as condies ambientais se desviam daquelas mais adequadas, os resultados de
emergncia das plntulas podem ser inferiores aos obtidos na germinao em laboratrio, conforme
mostra a Tabela 7.
Tabela 7 - Comparao entre resultados de germinao e de emergncia de plntulas em
campo, obtidos de 94 amostras de sementes de soja (Delouche, 1974).
Emergncia em campo
N Total
90 - 94
85 - 89
80 - 84
90 100
05
00
00
05
80 89
09
12
00
21
70 79
10
14
06
30
60 69
02
08
04
14
50 59
03
06
06
15
40 49
00
03
02
05
40
00
04
00
04
N Total
29
47
18
94
________________________________________________________________________________________________________________________
Mdulo 4 Analise de Sementes
75
9
8
4
9
8
8
0
9
3
8
0
8
9
2
6
5
6
3
0
4
8
8
9
2
6
7
8
1
6
7
8
3
Lotes
1
Germinao (%)
Emergncia em campo em condies
subtimas (%)
93
92
95
97
84
71
68
82
campo
Lotes
em
condies
1
90
2
90
3
90
4
90
71
90
66
89
Germinao (%)
90
90
Campo 1
88
87
Campo 2
80
60
Campo 3
70
40
________________________________________________________________________________________________________________________
Mdulo 4 Analise de Sementes
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78
Deteriorao
Figura 20 - Relao hipottica entre a germinao e o vigor durante a deteriorao de sementes (Delouche e Caldwell,
1960).
este perodo; na Fase III, poucas sementes permanecem vivas (Figura 21).
Os melhores testes de vigor so os que permitem detectar diferenas na qualidade dos lotes
na Fase I (lotes de sementes com germinao superior a 80%). Na Fase II, onde ocorre perda rpida
da viabilidade, qualquer teste de vigor detecta a baixa qualidade do lote.
________________________________________________________________________________
80
b) Vigor x produo
Tabela 10 - Altura mdia de plantas (cm) aos 21 dias aps a semeadura, em resposta ao
vigor de sementes de soja, em dois anos de cultivo, com condies ambientais desfavorveis no ano
1 e favorveis no ano 2.
Ano
1
12,7
11,7
1
2
Mdia
13,1A
12,3A
1
11,7
12,3
Mdia
11,4B
12,3A
Mdia
3383A
3383A
Mdia
3087B
3087B
Figura 22 - Rendimento de sementes de soja em funo de diferentes propores das sementes de alto vigor na populao.
________________________________________________________________________________
82
Vigor
Alto
Monsoy 8914
Monsoy 9350
Pintado
4559
2762
1405
Diferena no
rendimento (%)
Baixo
2296
1410
840
49,6
49,0
40,0
O rendimento de gros de arroz foi afetado pelo nvel de qualidade fisiolgica das
sementes (Tabela 13). O uso de sementes de alta qualidade fisiolgica proporcionou acrscimos no
rendimento de 8,2 e 9,0% nos anos 2000/2001 e 2001/20002, que corresponde a 622 e 660kg.ha-1,
respectivamente (Hofs et al., 2004).
Tabela 13 - Componentes do rendimento e produtividade de gros de arroz irrigado, em
funo de diferentes nveis de qualidade fisiolgica das sementes, em dois anos agrcolas.
Nveis Plantas/ Panculas/ Panculas/ Gros/ Massa
m-2
planta
pancula 1000
de
m-2
vigor
gros
2000/2001
163a
361
2,73b
76,6b
26,25a
Alto
135b
347
3,36a
81,6a
25,81b
Baixo
2001/2002
310a
466
1,64b
80,3a
26,08a
Alto
266b
432b
1,79a
85,3a
25,61b
Baixo
7588a
6966b
7346a
6686b
Figura 23 - Rendimento de gros das plantas de arroz em funo do percentual de sementes de alto vigor na amostra.
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Mdulo 4 Analise de Sementes
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Germinao
(%)
1
2
3
80
85
81
Envelhecime
nto
acelerado
(%)
24
20
58
Mudas vigorosas
Emergncia
de plntulas
(%)
50
37
74
35
23
52
6,86
4,50
9,88
________________________________________________________________________________
84
Nveis de vigor
Emergncia (%)
Davis
Alto
Mdio
Baixo
91
79
61
Envelhecimento
acelerado (%)
81
50
13
Produo (kg.ha-1
1.999
1.926
1.994
Densidade de plantas;
Algumas pesquisas indicam que o ajuste da densidade de semeadura pode corrigir as
possveis deficincias do potencial fisiolgico do lote de sementes e a ocorrncia de falhas na
lavoura.
Quando o ajuste da densidade no realizado, a reduo do estande pode afetar
negativamente a produo final, mas tambm possvel que a produo individual seja beneficiada
porque as plantas encontrariam maior espao para se desenvolver.
Na soja, o estabelecimento do estande adequado obtido com lotes de alto vigor,
independente da densidade de semeadura adotada. Porm, em lotes de baixo vigor necessria a
correo da densidade (Tabela 16) (Scheeren, 2002).
Tabela 16 - Estande final de plantas por metro linear, em resposta ao vigor de sementes de soja,
semeadas em duas densidades de semeadura (1- sem correo e 2- com correo de 15%).
Densidade
1
2
1
14,7
16,0
Mdia
14,4a
16,2a
1
13,0
15,3
Mdia
12,8b
15,0a
________________________________________________________________________________________________________________________
Mdulo 4 Analise de Sementes
85
nmero de espcies.
No teste de envelhecimento acelerado, as sementes so expostas a condies adversas de
alta temperatura (40 a 45C) e umidade relativa (prxima a 100%), por diferentes perodos,
dependendo da espcie, antes de submet-la ao teste de germinao (Tabela 17).
So utilizadas caixas plsticas como compartimentos individuais (minicmaras) para a
colocao das amostras; cada caixa possui, suspensa em seu interior, uma tela de alumnio onde as
sementes so distribudas de maneira a constiturem camada nica sobre a superfcie da tela (Figura
24). Pode-se efetuar a contagem das sementes antes de sua distribuio ou a distribuio das
sementes em camada uniforme ou a obteno de amostra de peso conhecido, de modo que contenha
pelo menos 220 sementes. Recomenda-se a conduo do teste com amostras uniformes quanto ao
tamanho das sementes, visando atenuar os efeitos do tamanho sobre a resposta das sementes ao
envelhecimento. Obtidas as amostras, so colocados 40ml de gua no fundo de cada caixa, para
garantir nvel de umidade relativa do ar prximo de 100% em seu interior. A seguir, cada
minicmara tampada e mantida em cmara, regulada entre 40 e 45C, onde permanecem durante o
perodo especificado para a espcie. Aps a retirada da cmara, conduzido teste de germinao, de
acordo com as RAS; as amostras de sementes mais vigorosas originam percentagens mais elevadas
de plntulas normais, em avaliao nica efetuada na data prevista para a primeira contagem do
teste de germinao.
Tabela 17 - Indicaes para o teste de envelhecimento acelerado (mtodo gerbox) (Tekrony,
1995).
Culturas
Peso sementes
Temperatura
Perodos
Soja
Alfafa
Feijo
Colza
Milho
Milho doce
Alface
Feijo mungo
Cebola
Pimenta
Trevo vermelho
Azevm
Sorgo
Girassol
Festuca
Fumo
Tomate
Trigo
(g)
42
3,5
42
1
40
24
0,5
40
1
2
1
1
15
20
1
0,2
1
20
(C)
41
41
41
41
45
41
41
45
41
41
41
41
43
45
41
43
41
41
(h)
72
72
72
72
72
72
72
96
72
72
72
48
72
72
72
72
72
72
Umidade das
sementes aps
envelhecimento1
(%)
27-30
40-44
28-30
39-44
26-29
31-35
38-41
27-32
40-45
40-45
39-44
36-38
28-30
23-27
47-53
40-50
44-46
28-30
O teste deve ser repetido quando as umidades das sementes forem superiores ou inferiores a essas.
________________________________________________________________________________________________________________________
Mdulo 4 Analise de Sementes
89
________________________________________________________________________________
90
No de plntulas
emergidas na linha
5
13
15
28
35
45
45
No de plntulas emergidas
no dia
5
(13 - 5) = 8
(15 - 13) = 2
(28 - 15) = 13
(35 - 28) = 7
(45 - 35) = 10
(45 - 45) = 0
ndice de velocidade
de emergncia
5 5 = 1,00
8 6 = 1,03
2 7 = 0,28
13 8 = 1,07
7 9 = 0,77
10 10 = 1,00
0 11 = 0,00
5,15
interessante salientarmos que o teste de emergncia em campo vem sendo utilizado por
um nmero cada vez maior de produtores de sementes na poca de comercializao dos lotes. A
visualizao dos estandes de campo permite ao comprador uma seleo mais adequada dos lotes,
bem como maior confiana no produto adquirido.
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Mdulo 4 Analise de Sementes
91
12.1. Definies
12.1.1. Boletim de Anlise de Sementes BAS
Documento emitido por Laboratrio de Anlise de Sementes, credenciado pelo Ministrio
da Agricultura, Pecuria e Abastecimento MAPA, que expressa os resultados de anlise de uma
amostra (Figura 25).
________________________________________________________________________________
92
________________________________________________________________________________________________________________________
Mdulo 4 Analise de Sementes
93
13.1. Definies
13.1.1. Laboratrio de Anlise de Sementes LAS
Aquele inscrito e credenciado no RENASEM (Registro Nacional de Sementes e Mudas) e
que foi submetido ao processo de avaliao e auditoria da CGAL (Coordenadoria Geral de Apoio
Laboratorial), por meio do qual recebe o reconhecimento formal de sua excelncia tcnica e de seu
Sistema de Gesto. Os resultados obtidos por meio das metodologias validadas e aprovadas tm
finalidade para controle de qualidade e identificao de lotes.
localizada prxima ao laboratrio para melhor assessoramento por parte do tcnico responsvel dos
analistas, quando frente a alguma dificuldade de realizao ou avaliao dos testes. Prximo a essa
dever estar localizada a rea administrativa, onde sero confeccionados os boletins de anlise.
Elementos como luz, fora e gua devem ser considerados tambm e a capacidade de
suprimento de cada um deles dever estar diretamente relacionada s necessidades atuais e futuras
do laboratrio. O emprego da luz fluorescente indicado, bem como a localizao estratgica do
maior nmero possvel de tomadas eltricas e interruptores em todos os setores, com vistas a
prevenir a aquisio de novos equipamentos. O piso do laboratrio dever ser de material
facilmente lavvel, o forro prova de som e as cores claras e repousantes, evitando-se assim
ambientes cansativos.
Especial ateno deve ser dada construo das cmaras frias (cmara seca para o
armazenamento de amostras e cmara de germinao). Na cmara seca necessrio controle de
temperatura e umidade relativa do ar (15 a 20C / 50% ou menos), para o armazenamento das
amostras durante certo perodo de tempo aps o teste de germinao, como garantia do resultado
fornecido pelo laboratrio. J para a cmara de germinao, apenas o controle da temperatura (
15C) necessrio. Nessa cmara, so colocados os germinadores a diferentes temperaturas, de
acordo com as exigncias especficas de cada espcie testada. O tamanho das mesmas ir variar de
acordo com as necessidades do laboratrio e devero ser construdas com paredes duplas,
isolamento trmico, sem janelas e com porta frigorfica.
O controle mecnico da umidade e da temperatura pode ser feito atravs de uma unidade
desumidificadora e uma de refrigerao, instaladas fora das cmaras (casa de mquinas), para evitar
o rudo dos motores no ambiente do laboratrio.
Em laboratrios pequenos, a utilizao do ar condicionado, como sistema de resfriamento,
tem sido satisfatria. ideal que ambas as cmaras sejam construdas uma ao lado da outra, para
melhor aproveitamento dos sistemas de refrigerao utilizados.
Quanto ao pessoal, da mais alta importncia a escolha do elemento humano que vai atuar
no laboratrio. Os trabalhos de rotina podem ser efetuados por analista com nvel de conhecimento
de grau mdio, mas que tenham passado por treinamento especializado. Reciclagem peridica
recomendada. O analista deve ter conhecimentos bsicos da morfologia dos frutos e sementes e
sobre fisiologia vegetal, bem como sobre alguns sintomas de doenas que podem ocorrer nas
plantas. Deve estar apto a desempenhar qualquer funo dentro do laboratrio, ser paciente,
meticuloso e com alto senso de responsabilidade, observao e honestidade. Possuir esprito de
trabalho em equipe fundamental. A chefia ou superviso do laboratrio e a pesquisa (quando for o
caso) devero estar a cargo de um tcnico de nvel superior, tambm com especializao na rea
(engenheiro agrnomo ou engenheiro florestal). Assim, como os analistas, ele dever reciclar-se
periodicamente, para manter-se atualizado nas diferentes metodologias empregadas na anlise de
sementes.
O desenvolvimento progressivo, por parte da iniciativa privada de programas de produo
de sementes tem demonstrado necessidade, cada vez maior, da estruturao e instalao de
________________________________________________________________________________
96
________________________________________________________________________________________________________________________
Mdulo 4 Analise de Sementes
97
13.2.3. Pessoal
Para esse tipo de laboratrio, suficiente a contratao de apenas um analista (bem
treinado), em tempo integral, que ir trabalhar sob superviso de um tcnico de nvel superior (RT),
encarregado tambm do sistema de produo. Caso necessrio poder ocorrer contratao
eventual de um auxiliar de laboratrio.
Dentro do planejamento aqui apresentado, tentamos de forma bastante simples apresentar, a
seguir, um esquema grfico do laboratrio em questo (Figura 26).
Entrada
Determinadores de gua
Recepo Amostra
Contador
a Vcuo
Balana
3.0
0m
Lavatrio
Mesa
Divisor
Divisor
de Solos
Destilador
de gua
Coleo
de sementes
Geladeira
Arquivo
Prateleiras
Germinador
Sala de
Germinao
o
20 C
Balana
de Preciso
Armazenamento
2.0
0m
Germinador
Cmara
Env. Precoce
2.50m
1.50m
Literatura consultada
ASSOCIATION OF OFFICIAL SEED ANALISTS. Seed vigour testing handbook.
Zurich, AOSA. Contribution no 32 to the handbook on seed testing. AOSA, 88 p. 1983.
BRASIL. Ministrio da Agricultura, do Abastecimento e da Reforma Agrria. Secretaria
Nacional de Defesa Agropecuria. Regras para Anlise de Sementes. Braslia, DF, 1992. 365p.
BULOW, A Garantia de qualidade no comrcio de sementes. Revista SEED News, v.6, n.4,
p.42-43. 2002.
CARVALHO, M.L.M.; OLIVEIRA, L.M. Raios x na avaliao da qualidade de sementes.
Informativo ABRATES, Pelotas, v.16, n.1,2,3, p.93-99. 2006.
CERVIERI FILHO, E. Vigor de sementes de soja e componentes de rendimento. 45f.
Tese (Doutorado em Cincia e Tecnologia de Sementes) Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel,
Universidade Federal de Pelotas, Pelotas, 2005.
COPELAND, L.O.; McDONALD, M.B. Principles of seed science and technology, v.1,
n.1. 1973.
DELOUCHE, J.C. Deteriorao de sementes. Revista SEED News, v.6, n.6, p.24-31. 2002.
DELOUCHE, J.C. Maintaining soybean seed quality. In: Tenessee Valley Authority (ed.).
Soybean production, marketing and use. Muscle Shoals, p.46-62, 1974.
DELOUCHE, J.C.; CALDWELL, W.P. Seed vigor and vigor tests. Proceedings of
Association of Official Seed Analysts, v.50, p.124-129, 1960.
DIAS, D.C.F.S.; MARCOS FILHO, J. Testes de vigor baseados na permeabilidade das
membranas celulares. I. Condutividade eltrica. Informativo ABRATES, v. 5, n.1, Londrina,
p.26-36, 1995.
FRANA NETO, J.B.; KRZYZANOWSKI, F.C.; COSTA, N.P.; BARRETO, J.N. Efeito
do vigor das sementes sobre diversas caractersticas agronmicas da soja. In: Empresa Brasileira de
Pesquisa agropecuria, Centro Nacional de Pesquisa de Soja. Resultados de pesquisa de soja
1983/1984. 1984.
GRABE, D.F. Manual do teste de tetrazlio em sementes. Trad. de Flvio Rocha.
Braslia, AGIPLAN, 1976. 85p.
HAMPTON, J.G. Conductivity test. In: Seed Vigour Testing Seminar. ISTA. Vigour Test
Committee. Copenhagen, Denmark, p.10-28, 1995.
HAMPTON, J.G. O que qualidade de sementes. Revista SEED News, v.5, n.5, p.22-26,
2001.
________________________________________________________________________________
100
HOFS, A.; SCHUCH, L.O.B.; PESKE, S.T.; BARROS, A.C.S.A. Efeito da qualidade
fisiolgica das sementes e da densidade de semeadura sobre o rendimento de gros e qualidade
industrial de arroz. Revista Brasileira de Sementes, Pelotas, v.26, n.2, p.55-62. 2004.
INTERNATIONAL SEED TESTING ASSOCIATION. Handbook of vigour test
methods. 3. ed. ISTA, 1995. 117p.
KOLCHINSKI, E.M.; SCHUCH, L.O.B.; PESKE, S.T. Vigor de sementes e competio
intra-especfica em soja. Cincia Rural, Santa Maria, v.35, n.6, p.1248-1256, 2005.
MARCOS FILHO, J. Utilizao de testes de vigor em programas de controle de
qualidade de sementes. In: Informativo ABRATES, v.4, n.2, p.33-35, 1994.
MARCOS FILHO, J. Fisiologia de sementes de plantas cultivadas. Piracicaba: Fealq,
2005. 495p.
MARCOS FILHO, J.; CICERO, S.M.; SILVA, W.R. Avaliao da qualidade das
sementes. Piracicaba, SP, 1987. 230p.
PESSIL, L. Planejamento e organizao de um laboratrio de sementes. In: MEC, Convnio
M.A. - DISEM - ESAL. I Curso de Tecnologia de Sementes. Lavras, MG, 1997. 26p.
PIANA, Z.; TILLMANN, M.A.M.; MINAMI, K. Avaliao da qualidade fisiolgica de
sementes de cebola e sua relao com a produo de mudas vigorosas. Revista brasileira de
Sementes. V.17, n.1, p.149-153, 1995.
MELO, P.T.B.S. Desempenho individual e de populaes de plantas de arroz
relacionado ao vigor de sementes. 46f. Tese (Doutorado em Cincia e Tecnologia de Sementes)
Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel, Universidade Federal de Pelotas, Pelotas, 2005.
PERRY, D.A. Manual de mtodos de ensayos de vigor. Ministrio de Agricultura, Pesca y
Alimentacin. Espaa, 1981. 56p.
SCHEEREN, B. Vigor de sementes de soja e produtividade, 45f. Tese (Doutorado em
Cincia e Tecnologia de Sementes) Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel, Universidade Federal
de Pelotas, Pelotas, 2002.
TEKRONY, D.M. Accelerated ageing. In: Seed Vigour Testing Seminar. ISTA. Vigour
Test Committee. Copenhagen, Denmark, p.53-72, 1995.
TILLMANN, M.A. Atestado de garantia de sementes. Revista SEED News, v.2, n.5, 1998.
VANDERBURG, W.J.; BEKENDAM, J.; VANGEFFEN, A.; HEUVER, M. Project seed
laboratory 2000-5000. Seed Science and Technology. Zurich, v.11, 1983. p.157-227.
VIEIRA, R.D.; CARVALHO, N.M. Testes de vigor em sementes. Jaboticabal: FUNEP,
1994. 164p.
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Mdulo 4 Analise de Sementes
101
Respostas do Pr-Teste
Questes
01
02
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04
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20
Respostas
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