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DEPARTAMENTO DE FITOSSANIDADE.
DISCIPLINA DE FITOPATOLOGIA
270077994.doc
MICROSCOPIA
NLG.
Fig.1. Microscpio simples ou lente de aumento usada por Antoine von Leeuwenhoek
Apostila de Microscopia
03/2005
Fig. 2. Microscpio inventado pelo britnico Robert Hooke por volta de 1670.
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1nm
10nm
Bactria
Cl
Animal
10um
100nm
1um
Microscpio Eletrnico
Microscpioptico
Cl Vegetal
100um
1mm
1cm
Olho Nu
Conceitos e Fundamentos:
A menor dimenso percebida pelo olho humano a vista desarmada de
10-2 mm. Os microscpios pticos so divididos em simples e composto.
Microscpio simples: Composto de uma lente biconvexa com distncia focal
muito curta, mantida prxima do olho. A capacidade de ampliao de 300 X.
Microscpio composto: um instrumento ptico no qual se v dupla
ampliao. Uma lente da primeira imagem ampliada do objeto, a qual
vista e novamente ampliada por uma segunda lente.
Di
st
n
ci
a
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Partes do microscpio:
a) Mecnica :
Base ou p - estativo - canho ou tubo - controle macro e micromtrico revlver ou tambor - charriot - platina ou mesa.
b) tica:
Primas - refletores - filtros - diafragma - condensador polarizadores - espelhos.
objetivas - oculares -
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Condensador
Tipos de objetivas:
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Lente ideal
As Aberraes so refraes desiguais que sofrem os raios luminosos
que atravessam um sistema de lentes. Quanto mais acentuadas forem as
superfcies curvas das lentes, maiores sero as aberraes. Os instrumentos de
alta qualidade como o microscpio costuma ser projetados de forma a minimizar
estas aberraes. No entanto, erros na montagem, m regulagem ou
combinaes de objetiva e ocular incompatveis podem gerar aberraes.
Aberrao cromtica - Ocorre quando o ndice de refrao do material no o
mesmo para todas as cores. Isto faz com que o raio de luz azul seja desviado
em um ngulo diferente do que o raio de luz vermelho, logo a distncia focal
depender da cor. Um instrumento com Aberrao cromtica, produzir imagem
com cores borradas e as bordas coloridas. Acromatismo o nome dado para o
processo de correo desta aberrao.
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Curvatura de campo
Aberrao de distoro Uma imagem perfeita o aumento uniforme em
todo campo. Se uma regio na borda do campo de viso tem uma ampliao
diferente da do centro, isto causa uma distoro na imagem. O termo distoro
refere-se troca da representao geomtrica de um objeto no plano da
imagem. Por exemplo, um retngulo pode aparecer como uma figura geomtrica
curvada para dentro (almofadinha) ou curvada para fora (barril).
Aberrao de distoro
Tipos de oculares
Aumento
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Microscopia de fluorescncia
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Microscopia Ultravioleta.
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650
620
589
550
517
467
423
390
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.
NA = n. sen (u)
PR =
05 .
PR =
____________
2.NA
_____________
NA
Exemplo:
a) Calcular o PR de um microscpio que apresenta as seguintes caratersticas:
objetiva = 40X, NA = 0.75, ocular = 6X, comprimento de onda de luz 540nm
(entre o espectro do o verde e amarelo). O que significa o resultado?
0.5 .
Pr =
_______________
NA
0.5 . 540
=
_________________
= 360nm ou 0.36
0.75
O resultado significa que 0.36 a menor distncia entre dois pontos que o
microscpio consegue distinguir.
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b) Dispondo de filtros azul (430 nm), verde (540 nm), vermelho (620 nm ) qual
filtro usaria para obter o melhor PR ?
0.5 . 430
PR = __________________ =
0.75
0.5 . 430
___________________
= 0.28
0.75
.
.
.
.
.
40
40
40
40
40
=
=
=
=
=
se:
240
320
400
600
800
Cobrir o microscpio.
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Limpeza:
Componentes pticos:
Componentes mecnicos:
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Anexos:
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diatomceas
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Bibliografia Recomendada
ptica Geral:
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Microscopia:
Olliver, C.W. The intelligent use of the Microscope.
London - 1951
Cooke,Troughton &
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