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FUNDAO UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE

PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM AQICULTURA

ARNALDO D'AMARAL PEREIRA GRANJA RUSSO

Produtividade Primria do Biolme em Cultivos dos Camares


Marinhos Farfantepenaeus paulensis e Litopenaeus vannamei

RIO GRANDE, RS
2008

Livros Grtis
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FUNDAO UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE


PROGRAMA DE PSGRADUAO EM
AQUICULTURA

Produtividade Primria do Biolme em Cultivos dos


Camares Marinhos Farfantepenaeus paulensis e

Litopenaeus vannamei

Arnaldo D'Amaral Pereira Granja Russo


Orientador: Prof. Dr. Paulo Cesar Abreu
Co-Orientador: Prof. Dr. Wilson Wasielesky Jr.
Dissertao apresentada como parte dos
requisitos para obteno do grau de
mestre em Aqicultura no programa
de PsGraduao em Aqicultura
da Fundao Universidade do Rio Grande

Rio Grande
Maro de 2008

Sumrio
1. Resumo

2. Abstract

10

3. Introduo

12

4. Objetivos

15

4.1

Objetivos especcos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15

5. Material e mtodos

16

5.1

Desenho experimental

5.2

Tratamentos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17
5.2.1

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 16

Amostragem . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18

5.3

Fatores fsico-qumicos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18

5.4

Biomassa do biolme . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19
5.4.1

Clorola a . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19

5.4.2

Peso seco . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19

5.5

Quanticao dos microrganismos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19

5.6

Produo primria e respirao do biolme . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20

5.7

Biometria dos camares . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20

5.8

Anlises estatsticas . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20

6. Resultados
6.1

22

Experimento 1 - L. vannamei . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22
6.1.1

Fatores fsico-qumicos da gua . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22

6.1.2

Nutrientes na gua . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23

6.1.3

Incremento de peso e sobrevivncia dos camares . . . . . . . . . . 23


1

6.2

6.1.4

Biomassa do biolme . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24

6.1.5

Produo Primria . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24

6.1.6

Contagem de microrganismos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28

6.1.7

Inuncia dos fatores abiticos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 34

Experimento 2 - F. paulensis . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 35
6.2.1

Fatores fsico-qumicos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 35

6.2.2

Nutrientes na gua . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37

6.2.3

Incremento de peso e sobrevivncia dos camares . . . . . . . . . . 37

6.2.4

Biomassa do biolme . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 38

6.2.5

Produo Primria . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 38

6.2.6

Contagem de microrganismos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 42

6.2.7

Inuncia dos fatores abiticos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 47

7 Discusso

49

Referncias bibliogrcas

57

Apndice

64

A. Tabela de dados gerais L. vannamei e F. paulensis

64

Lista de Tabelas
1

Regresso linear mltipla, relacionando a produo bruta e a lquida com


as variveis fsico-qumicas . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 34

Regresso linear mltipla, considerando as interaes da produo bruta e


lquida com as variveis fsico-qumicas . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 48

Produo primria e clorola-a do perifton em diferentes sistemas. . . . . 50

Consumo de oxignio dos camares, consumo total do sistema (considerando


a biomassa total de camares de cada caixa), produo primria lquida,
produo primria total (considerando toda a rea adicionada) e necessidade
metablica atendida. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 54

Lista de Figuras
1

Disposio dos tanques - Experimento 1 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17

Disposio dos tanques - Experimento 2 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17

Tela para amostragem diria . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18

Incubao de produo primria . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18

Microrganismos aderidos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18

Salinidade ao longo dos dias . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22

Temperatura ao longo dos dias . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23

Amnia em mg.L1 ao longo dos dias . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24

Mdia da Clorola a ao longo dos dias (Marcaes correspondentes s


contagens de microrganismos) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25

10

Mdia da produo bruta do perifton em mgO2 cm2 .h1

11

Mdia da produo lquida do perifton em mgO2 cm2 .h1 . . . . . . . . . 27

12

Mdia das taxas de respirao do perifton medidas como consumo de

. . . . . . . . . 26

oxignio, em mgO2 cm2 .h1 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28


13

Produtividade bruta do perifton, representada pela razo entre a produo


primria bruta e a Clorola a . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29

14

Produtividade lquida do perifton, representada pela razo entre a produo


primria lquida e a Clorola-a

15

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 30

Microalgas contadas e referidas como: A e B, famlia Cymbellaceae. A

Cymbella menor que 20m, B Cymbella maior que 20m e C diatomceas


penadas maiores 25m, penadas menores que 25m ao fundo . . . . . . . . 30
16

Nmero de microrganismos cm2 . Tratamentos: Controle, R e CR. . . . . 32

17

Logartimo da contagem de diatomceas cm2 , por grandes grupos. Tratamentos:


Controle, R e CR. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 33

18

Nmero de nematdeos por cm2 Tratamento Controle, Tratamento R e


Tratamento CR . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 35

19

Salinidade ao longo dos dias . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 36

20

Temperatura em o C, ao longo dos dias . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37

21

Amnia em mg.L1 ao longo dos dias . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 38

22

Mdia da Clorola-a ao longo dos dias (Marcaes correspondem aos dias


de contagem) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 39

23

Mdia da produo bruta do perifton em mgO2 cm2 .h1

. . . . . . . . . 40

24

Mdia da produo lquida do perifton em mgO2 cm2 .h1 . . . . . . . . . 41

25

Mdia das taxas de respirao do perifton medidas como consumo de


oxignio, em mgO2 cm2 .h1 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 42

26

Produtividade bruta do perifton, representada pela razo entre a produo


primria bruta e a Clorola a . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 43

27

Produtividade lquida do perifton, representada pela razo entre a produo


primria lquida e a Clorola a

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 44

28

Contagem microrganismos Tratamentos: Controle, R e CR . . . . . . . . . 45

29

Logartmo da contagem de diatomceas cm2 , por grandes grupos - Tratamentos:


Controle, R e CR . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 46

30

Nmero de nematdeos cm2 Tratamentos: Controle, R e CR . . . . . . . 47

Leve o pssaro:
e a sua sombra voante,
mais leve.
E a cascata area
de sua garganta,
mais leve.
E o que lembra, ouvindo-se
deslizar seu canto,
mais leve.
E o desejo rpido
desse mais antigo instante,
mais leve.
E a fuga invisvel
do amargo passante,
mais leve.
(Ceclia Meireles)

Agradecimentos

Aos meus pais e a meu irmo Gustavo, por todo o apoio, conana e carinho nessa
etapa da vida.
todos os familiares por emanarem os bons udos, mesmo distncia.
Ao professor Dr. Paulo Cesar Abreu, pelo apoio nos trabalhos realizados durante o
desenvolvimento do projeto de mestrado, pelo conhecimento trocado e pela tolerncia ao
meu insistente uso de "softwares diferentes", muito obrigado.
Aos professores, funcionrios, estagirios e vigilantes (Gato de botas (Cristiano),
Fabiano, Nero e Marcos) da E.M.A., pelas ajudas na parte experimental desenvolvida.
Aos amigos: Maurcio, Gusta e Diogo. Em especial ao professor Dr. Wilson Wasieleski,
pelas valiosas contribuies e pela descontrao.
Ao professor Dr. Paul G. Kinas, pelo incentivo ao software R e pelos valiosos esclarecimentos.
Ao qumico Sandro, pelo apoio e ajuda nas diculdades encontradas ao longo dos
experimentos.
s prestativas e ssorridentes bibliotecrias da setorial de Ocenograa, muito obrigado.
Aos amigos e companheiros do Laboratrio de Fitoplncton - FURG, em especial ao
amigo Mrcio Bighead (BH), por toda ajuda, conversas e risadas durante essa jornada.
Ao Fujita, pelas discusses de temas ans e computacionais. menina Lgia, por toda a
ajuda e ao camarada Z, pelas sugestes e camaradagens.
Aos amigos da "CAVE", por compartilharem as diculdades dirias de trabalho, o
calor e o frio (todos muito intensos).
Aos irmos de Cassino, Zaila, Lunar, "Squilo`s House", toda "Moada" que conviveu
nos dias de chuvas "ladais" do Cassino, aos amigos do surfe (Pedro, Rafa, Fernando e
Mauricio) e em especial "Manso HOLMES", na presena dos irmo de teto (Curiri,
Xia, Joca, Lol e Bob), sem palavras. Aos dog`s Cida - (Farofa, Miguel e tila - in
memorium ) e s Fridas por escutarem minha gaita em lgrimas.
Ao meu aparelho musical porttil, que se fez invariavelmente presente em todos os
momentos, deixando "sempre" a msica uir aos pavilhes auditivos.
empreitada de fazer com que esse trabalho cientco fosse todo desenvolvido em
plataforma livre - transportando um pouco da idia libertadora e de construo de caminhos
a serem trilhados, mesmo que em diculdades. GNU-Linux, R e LATEX.
Ao CNPq pelo suporte nanceiro durante o ano de 2007.
Finalmente s microalgas perifticas, que conseguem se prender s coisas e mesmo
assim manter o seu desapego (vairagya ).

1. Resumo
Cultivos de animais em meio aqutico vm utilizando h bastante tempo a produo
primria do biolme, ou perifton (comunidade de microrganismos aderidos a substratos
naturais ou articiais submersos), como estratgias para a melhoria da qualidade da
gua, ou como fonte alimentar complementar para os organismos cultivados. Apesar
da importncia da produtividade natural para sistemas de cultivo, pouco se conhece a
respeito da produtividade primria do perifton, especicamente em cultivos de camares.
Dessa forma, esse trabalho procurou avaliar os nveis de produo primria do perifton em
sistemas de cultivo com camares Litopenaeus vannamei e Farfantepenaeus paulensis e
determinar os efeitos de fatores abiticos e da predao dos camares sobre a as microalgas
do perifton. Dois experimentos foram desenvolvidos durante 38 dias com cada espcie
de camaro, em Novembro de 2006 e Abril de 2007 na Estao Marinha de Aqicultura FURG. Em cada experimento, trs tratamentos contendo adio de substratos articiais
(telas de nylon com 1 mm de malha) foram dispostos em tanques de plstico de 150 L
da seguinte forma: 1) Tratamento CR, camaro mais adio de rao; 2) Tratamento R,
apenas adio de rao e 3) Tratamento Controle, contendo somente as telas. Durante
este perodo foram coletadas amostras para incubaes de produo primria, anlises de
clorola a, peso seco e abundncia de microrganismos. O experimento com L. vannamei
foi caracterizado por apresentar altas temperaturas e salinidades, que se correlacionaram
positivamente com os nveis de produo primria. Esses camares predaram efetivamente
sobre nematdeos e diatomceas pequenas (Cymbella menores que 20 m), causando
uma substituio das diatomceas dominantes por espcies r-estrategistas. Tal sucesso
provavelmente promoveu os maiores nveis de produo primria no tratamento CR (0,0022
a 0,117 mgO2 cm2 .h1 ), em comparao com os outros tratamentos. A clorola a variou
entre (0,52 e 1,8 g cm2 ). O experimento com F.paulensis apresentou no tratamento

CR mximas biomassas em clorola a (0,19 a 8,25 g cm2 ) e valores de produo


primria iguais a (0,0015 a 0,050 mgO2 cm2 .h1 ), sendo que esses baixos valores podem
ter sido resultado de sombreamentos devido a sobreposio de microalgas. Esses camares
consumiram principalmente diatomceas maiores e nematdeos. Conhecendo a produo
lquida dos sistemas e as taxas metablicas (respirao) de L. vannamei e F. paulensis
foi possvel estimar o quanto a produo primria do perifton nos sistemas de cultivo
poderia atender demanda metablica destes camares. No caso de L. vannamei, a
produo lquida de todo o sistema poderia atender de 8 a 150% das exigncias deste
camaro, enquanto que para F. paulensis, que tem uma atividade metablica menor, a
produo primria do perifton nos tanques poderia suprir 137 a 287% das necessidade
metablicas deste camaro. Os resultados deste trabalho demonstram que a produtividade
primria do biolme pode suprir grande parte da demanda nutricional dos camares. O
incremento de superfcie submersa em sistemas de cultivo pode representar um aumento
na disponibilidade de alimentos para os camares cultivados, o que poderia resultar numa
importante reduo dos custos, uma vez que a compra de raes representa mais de 50%
do custo total de produo.

2. Abstract
The primary production of biolm, or periphyton (a microorganisms community attached
to submerged natural or articial substrates) has been used for a long time as a strategy
to improve the water quality and as a complementary food source for raised organisms.
In spite of the importance of natural productivity in aquaculture systems less atention
is given to direct measurements of periphyton primary production rates in cultivation
systems, specially in shrimp farming. Therefore, we aimed in this study to evaluate the
periphyton primary production levels in shrimp culture systems of Litopenaeus vannamei
and Farfantepenaeus paulensis, as well as to determine the eects of abiotic factors
and shrimp predation on the periphyton microalgae. Two experiments were carried out
with each species during 38 days in November 2006 and April 2007, at the Aquaculture
Marine Station - EMA/FURG. In each experiment, three treatments containing articial
substrates (nylon nets with 1 mm mesh size) in 150 L plastic tanks were arranged in the
following way: 1) Treatment CR, with shrimp and ration addition; 2) Treatment R, only
with ration addition and 3) Treatment Control, containing only the substrates. During
this period periphyton samples were collected for primary production measurements,
analysis of Chlorophyll a, dry weight and abundance of microorganisms. The experiment
with L. vannamei was characterized by high water temperatures and salinities, which
were positively correlated with the primary production levels. These shrimps grazed
eectively on nematodes and diatoms (Cymbella less than 20 m) forcing a substitution
of dominant diatom by r-strategists species. Such succession probably promoted the
high primary production rates in the CR treatment (0.0022 to 0.117 mgO2 cm2 .h1 ), in
comparison to other treatments. The chlorophyll a varied between 0,52 and 1,8 g cm2 .
In the F. paulensis experiment, higher microalgae biomass occurred at CR treatment,
with chlorophyll a values between 0.19 and 8.25 g cm2 . The lower primary production

10

rates in this treatment (0.0015 to 0.050 mgO2 cm2 .h1 ) was possibly caused by shading
of the microalgae due to the several layers of periphyton. This shrimp consumed mainly
larger diatoms and nematodes. Knowing the net production of the systems and the
metabolic rates (respiration) of L. vannamei and F. paulensis it was possible to calculate
how much of the shrimps metabolic necessity could be supplied by the periphyton primary
production. In the case of L. vannamei, net production of the whole system might provide
8 to 150 % of this shrimp demands, whereas for F. paulensis, which has a smaller metabolic
activity, the primary production of the periphyton in the tanks might provide 137,63
to 287,78 % of the shrimp metabolic necessity. The results of this work demonstrate
that biolm primary productivity can provide great fraction of the shrimp nutritional
demand. The periphyton growth in shrimp culture systems can represent an increase in
the availability of foods for the shrimps, which might represent an important reduction
of costs, since feeding represents more than 50 % of the total of production costs.

11

3. Introduo
Nos ltimos anos a produo mundial de crustceos pela aqicultura vem aumentando
cada vez mais, quando comparada com a pesca (FAO, 2006). Isto se deve, principalmente,
ao uso de metodologias e tcnicas alternativas, algumas destas muito pouco impactantes.
Vantagens econmicas tambm foram obtidas quando foi possvel se utilizar da produtividade
natural do sistema com o uso de organismos de nveis trcos inferiores, principalmente de
produtores primrios, o que diminui os custos da produo (Naylor et al. (1998); Naylor

et al. (2000); Tidwell & Allan (2002)).


Entre essas novas tcnicas destaca-se o uso de substratos articiais, que passaram a
ser adicionados aos ambientes de cultivo para que houvesse maior rea para adeso do
biolme periftico. O perifton denido por Wetzel (1983) como biolme formado por
uma comunidade frouxa ou rmemente aderida e estabelecida sobre substratos naturais ou
articiais submersos, constituda por microalgas, fungos, bactrias, proto- e metazorios e
detritos orgnicos e inorgnicos. Neste estudo, utilizaremos os termos biolme e periton
como sinnimos.
O biolme formado nos ambientes de cultivo contribui em grande parte para a melhoria
da qualidade da gua, atravs da atividade de algas e bactrias, seja pela absoro de
nutrientes nitrogenados, especialmente amnia e nitrito que em altos nveis so txicos
para os camares cultivados, ou pela atividade fotossinttica, que garante um suplemento
de oxignio para os organismos cultivados (Moriarty (1976, 1997); Abreu et al. (1998);
Azim et al. (2002, 2003, 2004); Thompson et al. (2002); Oliveira et al. (2006)). Alm
disso, o biolme representa um complemento alimentar, uma vez que microorganismos
consumidos fornecem protenas, cidos graxos e vitaminas, muitas vezes no disponibilizados
nas raes utilizadas (Thompson et al. (2002); Ballester et al. (2004); Azim et al. (2004)).
Ballester et al. (2003) analisaram a inuncia do biolme na sobrevivncia e no

12

crescimento de ps-larvas de F. paulensis em sistema de berrio no ambiente, resultando


em aumentos de at 20% no tamanho dos camares. Bratvold & Browdy (2001) mostraram
tambm um aumento na taxa de crescimento e converso alimentar de L. vannamei
quando avaliados em tanques com substratos verticais. Resultados similares foram encontrados
por Sandifer et al. (1987), que sugerem tambm a utilizao do biolme nos tanques de
larvicultura.
Apesar dessas indicaes do uso potencial dos microorganismos do biolme como
fonte alimentar, muitas dvidas ainda existem sobre como pode ser a real contribuio
destes microorganismos para a alimentao na aqicultura (Tidwell & Bratvold, 2006).
Recentemente Thompson et al. (2002) mostraram que camares F. paulensis jovens no
apresentaram seletividade na alimentao em biolme. Entretanto, Preto et al. (2005)
mostraramm que ps-larvas de F. paulensis possuem uma seletividade alimentar sobre o
perifton, procurando principalmente diatomceas cntricas.
A produo alimentar proveniente do biolme pode ser ampliada, desde que boas
condies ambientais sejam proporcionadas (Huchette et al. (2000); van Dam et al.
(2002)). Fatores como nutrientes (nitrogenados e fosfatos) (Ghosh & Chattopadhyay,
2005), temperatura, pH, oxignio dissolvido, salinidade, transparncia e luminosidade
inuenciam a composio do biolme e, consequentemente, a disponibilidade de alimentos
para os organismos cultivados (Milstein, 2006). Thompson et al. (2002) relatam um
aumento nas concentraes de clorola a do biolme quando ocorreram declnios das
concentraes de amnia, mostrando que as algas se beneciam desses nutrientes na
incorporao de biomassa.
Sabe-se que produtividade periftica e sua biomassa podem apresentar contribuies
mais expressivas que aquelas do toplncton (O'Reilly, 2006). Muitos estudos sobre a
produo primria do biolme foram realizados com a comunidade periftica principalmente
em ambientes dulccolas (Lamberti & Steinman, 1997); McCornick et al. (1998); Moschini-Carlos
13

et al. (2000); Rodrigues et al. (2003); Fernandes & Esteves (2003)), no havendo maiores
informaes sobre a produtividade primria durante os processos sucessionais do biolme,
estando este sujeito a presses de predao dos organismos cultivados. Portanto, apesar
da ressaltada importncia da produtividade primria em ambientes de cultivo no existe,
de acordo com o nosso conhecimento, medidas diretas de produo primria do periton
em sistemas de cultivo de camaro.

14

4. Objetivos
Este trabalho tem como objetivo maior determinar os nveis de produo primria do
biolme em sistemas de cultivo de camares.

4.1 Objetivos especcos


1. Avaliar os nveis de produo primria e respirao do biolme em diferentes fases
de sua formao.
2. Determinar o efeito de predao dos camares marinhos F. paulensis e L. vannamei
nos nveis de produo primria do biolme.

15

5. Material e mtodos
Dois experimentos foram desenvolvidos na Estao Marinha de Aquicultura Prof.
Marcos Alberto Marchiori (EMA) localizada na Praia do Cassino (32o 12' S e 51o 50' W),
municpio de Rio Grande-RS.
1. Experimento 1
Este experimento foi realizado com camares Litopenaeus vannamei durante o
perodo de 16 de outubro de 2006 a 23 de novembro de 2006, com 15 amostragens.
2. Experimento 2
Este experimento foi realizado com camares Farfantepenaeus paulensis durante
o perodo de 1 de abril de 2007 a 8 de maio de 2007, com 16 amostras.

5.1 Desenho experimental


Nove tanques plsticos de 150 L cada foram utilizados para o desenvolvimento dos
experimentos. Foram adicionados aos tanques substratos articiais (panagens) para aumentar
a rea de adeso do biolme. O experimento 1 foi realizado no interior de uma estufa
(Fig1) e o experimento 2 foi desenvolvido fora da estufa (Fig 2).
Para a formao de biolme foram utilizadas panagens, confeccionadas com telas de
nylon (abertura de 1 mm), dispondo-se duas panagens por caixa, posicionadas verticalmente
no tanque. Cada pedao de tela tinha rea de 0,25m2 e foi disposta verticalmente,
aumentando em 80% a superfcie vertical interna dos tanques. Como amostradores, foram
colocados em cada panagem 16 pedaos retangulares da mesma tela de nylon (10cm x
20cm), presos 5cm abaixo da superfcie da gua dos tanques.
As telas com os amostradores caram submersas em gua marinha ltrada em ltros
de areia, durante 15 dias antes do incio do experimento (Thompson et al., 2002). Durante
16

Figura 1: Disposio dos tanques Experimento 1

Figura 2: Disposio dos tanques Experimento 2

este perodo os tanques receberam aerao e no houve renovao de gua. Pores de


rao (10g/semana) foram adicionados ao tanque para servir de fonte de nutrientes para
o biolme. Aps o incio do experimento as renovaes de gua foram feitas de acordo
com a turbidez das caixas e manteve-se a aerao.

5.2 Tratamentos
Nos dois experimentos os tanques com telas foram distribudos em trs tratamentos,
com 3 repeties cada, a saber: 1) Tratamento Controle - somente com as telas; 2)Tratamento
R - telas com adio de rao; 3)Tratamento CR - telas, com adio de rao e camares.
No experimento 1, o tratamento CR recebeu juvenis de Litopenaeus vannamei em uma
densidades de 148 camares por metro quadrado (peso mdio igual a 1,4g). Os camares
R
foram alimentados duas vezes por dia com a rao comercial Purina
contendo 45%

de protena bruta. O somatrio das duas pores correspondeu a 3,5% da biomassa


dos camares em cada caixa. No experimento 2 o tratamento CR recebeu juvenis de

Farfantepenaeus paulensis em uma densidades de 309 camares por metro quadrado

17

(peso mdio igual a 0,18g) e foram alimentados ad libitum, divididas em 2(duas) pores
dirias. A quantidade de rao fornecida foi baseada no consumo vericado nas bandejas
de alimentao e com relao a 3,5% da biomassa dos camares em cada caixa.

5.2.1 Amostragem
As coletas de material biolgico e medies de produo primria foram realizadas a
cada 2 (dois) ou 3 (trs) dias, durante o perodo de cada experimento. O procedimento
de coleta consistiu na retirada aleatria de um amostrador a cada dia de coleta. Essa
tela foi recortada em 8 pedaos de 4x4cm para as anlises posteriores (clorola-a, peso
seco e contagem de microorganismos) (Fig 3), bem como para as incubaes de produo
primria (Fig 4). O material biolgico coletado foi xado em frascos de (25 mL) com
formalina 4% v /v (Fig 5).

Figura 3:
Tela
amostragem diria

para

Figura 4: Incubao de
produo primria

Figura 5: Microrganismos
aderidos

5.3 Fatores fsico-qumicos


Durante todos os dias dos experimentos 1 e 2 foram medidos a temperatura da gua,
R
salinidade e o pH atravs do medidor multiparmetro YSI
. As concentraes de amnia

foram medidas de acordo com o mtodo UNESCO (1983), enquanto as anlises de nitrito,
nitrato e fosfato seguiram as metodologias descritas em Srickland & Parsons (1972). Dados
meteorolgicas foram cedidas pelo laboratrio de Meteorologia - FURG.
18

5.4 Biomassa do biolme


5.4.1 Clorola a
Para anlise de biomassa (clorola a ) os pedaos de tela foram acondicionados em
frascos de vidro contendo 10 mL de acetona 90% para extrao por 24 horas no escuro e
no frio (-12 o C). A concentrao do pigmento foi determinada por um uormetro calibrado
Turner TD 700 (Welschmeyer, 1994).

5.4.2 Peso seco


O peso seco foi estimado a partir da secagem das telas de nylon em estufa (a 70
o

C) por 24 horas seguidos de pesagem em balana Mettler-Toledo (AB204-S) de preciso

(0,0001 g). O peso nal foi comparado com o peso das mesmas telas de nylon que foram
previamente lavadas e secas por 24 horas em estufa a 70 o C (peso inicial).

5.5 Quanticao dos microrganismos


As microalgas perifticas e os protozorios metafticos foram quanticados em microscpio
invertido Zeiss Axiovert equipado com contraste de fase. A separao do biolme foi feita
por raspagem, sendo que as telas aps a raspagem, foram observadas em microscpio
para vericao da total retirada da comunidade aderida. Aps esse procedimento a
quanticao seguiu o mtodo de termohl (1958).
A identicao das microalgas foi feita utilizando-se de bibliograa especca: Hasle
& Syvertsen (1996), Komrek & Anagnostidis (1998, 2005), Bourrelly (1968); Bourrely
(1972); Bourrelly (1985); Hustedt (1959), Patrick & Reimer (1966, 1975), Wehr & Sheath
(2003), Streble & Krauter (1988).

19

5.6 Produo primria e respirao do biolme


A produo primria e a respirao do sistema foi avaliada atravs do mtodo de
oxignio dissolvido (Wetzel & Likens, 1991). Em cada caixa foram incubadas duas garrafas
claras e uma escura (Frascos DBO de 250 mL). A concentrao de oxignio inicial foi
determinada em duas garrafas claras.
Um pedao de tela e gua proveniente do mesmo tanque foi colocado nas garrafas de
DBO. As incubaes foram realizadas em imerso nos prprios tanques experimentais, nas
horas de maior exposio luminosa (entre 10:00 e 14:00 horas) mantendo-se temperatura
ambiente. Depois do perodo de incubao o oxignio dissolvido foi xado segundo a
metodologia de Winkler e depois de acidicadas as concentraes de oxignio dissolvido
foram lidas em espectrofotmetro digital B342 II (Micronal), seguindo a metodologia
proposta por Roland et al. (1999).

5.7 Biometria dos camares


Os camares, aps o experimento, foram contados e pesados em balana de preciso,
para vericar a sobrevivncia e o incremento de biomassa aps 38 dias.

5.8 Anlises estatsticas


Para a separao das mdias foram utilizados os testes paramtricos ANOVA, e teste de
Tukey e quando no houve homoscedasticidade e normalidade dos dados, foram aplicados
os testes no paramtricos de Kruskal-Wallis para identicar diferenas estatsticas e o
teste de Mann-Whitney para a hierarquizao. Anlises de regresso linear mltipla
(Sokal & Rohlf (1987); McCullagh & Nelder (1989); Faraway (2005)) foram aplicadas para
testar a relao das variveis com a produo primria do perifton. Para a escolha das
melhores relaes entre os modelos foram utilizados os valores de AIC (Akaike Information
20

Criterion), onde as equaes dos modelos so penalizadas de acordo com o acrscimo de


variveis e pela signicncia das variveis (Wood, 2006).

21

6. Resultados
6.1 Experimento 1 - L. vannamei
6.1.1 Fatores fsico-qumicos da gua
1. Salinidade
A salinidade em todos os tratamentos apresenta as mesmas oscilaes ao longo
do tempo, sendo que os menores valores foram registrados para o tratamento CR,
ao longo de todos os dias. Os maiores valores registrados foram iguais a 40 no
tratamento R e os menores valores iguais a 20,7 no tratamento CR (Fig. 6).

Figura 6: Salinidade ao longo dos dias

2. Temperatura da gua
As temperaturas no apresentaram diferenas signicativas entre os tratamentos.
As temperaturas mximas registradas foram de 35,6 o C no tratamento R e mnima
de 22 o C no tratamento Controle (Fig. 7). Os valores mdios de temperatura nos
tratamentos foi igual a 25,7 o C.
3. pH
22

Figura 7: Temperatura ao longo dos dias


O pH de todos os tratamentos apresentou uma estabilidade ao redor do pH 8
oscilando entre 7,8 - 8,4.
4. Horas de insolao
O nmero de horas totais de insolao ao longo dos dias de experimento foi de
140 horas.

6.1.2 Nutrientes na gua


A amnia em todos os tratamentos, apresentou concentrao inferior a 0,04 mg.L1 ,
excetuando-se o nono e o ltimo dia no tratamento CR, em que os valores atingiram 0,57
mg.L1 e 0,21 mg.L1 , respectivamente (Fig. 8)
Valores de nitrito, nitrato e fosfato mantiveram-se abaixo do nvel de deteco dos
mtodos utilizados em todos os tratamentos.

6.1.3 Incremento de peso e sobrevivncia dos camares


O peso dos camares apresentaram diferenas estatsticas, quando comparados os
pesos iniciais com os nais. A mdia do peso inicial dos camares foi igual a 1,4(0,03)
23

Figura 8: Amnia em mg.L1 ao longo dos dias


e a mdia de pso nal foi igual a 1,56(0,06). O incremento de peso foi igual a 11,65%
(2,62). A sobrevivncia foi de 82%(0,07).

6.1.4 Biomassa do biolme


1. Clorola a
A clorola a nos diferentes tratamentos oscilou ao longo do tempo e apresentou
uma tendncia crescente. Os mximos valores foram encontrados no tratamento R,
oscilando entre 1,8 g cm2 e 0,52 g cm2 . No tratamento Controle os valores
mximos e mnimos foram: 1,8 g cm2 no ltimo dia e 1,5 g cm2 no quinto dia.
O Tratamento CR apresentou valores intermedirios, variando entre 0,35 g cm2 e
1,15 g cm2 . O tratamento R foi estatisticamente maior que os outros tratamentos,
entretanto no existiram diferenas entre os tratamentos Controle e CR (Fig. 9).

6.1.5 Produo Primria


1. Produo Primria Bruta
As medidas de produo bruta foram signicativamente diferentes entre os tratamentos.
24

Figura 9: Mdia da Clorola a ao longo dos dias (Marcaes correspondentes s contagens


de microrganismos)
Os maiores valores ocorreram no tratamento CR, mximo de 0,107 mgO2 cm2 h1
e mnimo de 0,023 mgO2 cm2 .h1 . O tratamento R apresentou ao longo do tempo
valores intermedirios, com mximo de 0,13 mgO2 cm2 .h1 e mnimo de 0,014
mgO2 cm2 .h1 . O tratamento Controle, com os menores valores de produo bruta
oscilou entre 0,0036 mgO2 cm2 .h1 e 0,049 mgO2 cm2 .h1 (Fig. 10).
2. Produo Lquida
A produo lquida do tratamento CR foi estatisticamente maior que o tratamento
Controle, mas no diferiu do tratamento R. Este tratamento apresentou valores
mximos no primeiro dia (0,086 mgO2 cm2 .h1 ) e mnimos de -0,024 mg O2
cm2 .h1 no dcimo oitavo dia. O tratamento R apresentou valores mximos de
0,117 mgO2 cm2 .h1 no primeiro dia e mnimo de -0,019 mg O2 cm2 .h1 no dcimo
oitavo dia de experimento. O tratamento controle apresentou a maior produo
25

Figura 10: Mdia da produo bruta do perifton em mgO2 cm2 .h1


lquida no primeiro dia (0,035 mgO2 cm2 .h1 ) e mnimo de -0,027 mgO2 cm2 .h1
no vigsimo oitavo dia (Fig. 11).
3. Respirao
A respirao do perifton, entre os tratamentos, no apresentou diferenas signicativas.
Entretanto os maiores valores foram encontrados no tratamento CR, no terceiro dia
de experimento com 0,060 mgO2 cm2 .h1 e 0,055 mgO2 cm2 .h1 no dcimo stimo
dia do tratamento R, e 0,026 mgO2 cm2 .h1 no dcimo oitavo dia do tratamento
Controle. Os menores valores encontrados foram no primeiro e vigsimo oitavo dias
do tratamento CR respectivamente 0,006 mgO2 cm2 .h1 e 0,008 mgO2 cm2 .h1
(Fig. 12).
4. Produtividade primria Bruta (Nmero de Assimilao)
A produtividade bruta do perifton no tratamento CR, isto , produo primria
26

Figura 11: Mdia da produo lquida do perifton em mgO2 cm2 .h1


padronizada por unidade de biomassa (clorola a ) foi signicativamente maior que
o tratamento R e no se diferencia do tratamento Controle, sendo que os maiores
valores foram do tratamento CR, 0,203 mgO2 g cl-a 1 .h1 , no primeiro dia; 0,216
mgO2 g cl-a 1 .h1 no dcimo quinto dia e 0,143 mgO2 g cl-a 1 .h1 no vigsimo
sexto dia. O tratamento R apresentou no primeiro dia 0,27 mgO2 g cl-a 1 .h1
e mnimo de 0,02 mgO2 g cl-a 1 .h1 no ltimo dia.

O tratamento Controle

apresentou valor mximo no dcimo quinto dia 0,256 mgO2 g cl-a 1 .h1 e mnimo
de 0,003 mgO2 g cl-a 1 .h1 no dcimo oitavo dia (Fig. 13).
5. Produtividade Lquida
As produtividades lquidas nos tratamentos no se diferiram estatisticamente.
Entretanto, os maiores valores observados no tratamento CR foram: 0,19 mgO2 g
cl-a 1 .h1 no primeiro dia, 0,16 mgO2 g cl-a 1 .h1 no nono dia, 0,206 mgO2 g
27

Figura 12: Mdia das taxas de respirao do perifton medidas como consumo de oxignio,
em mgO2 cm2 .h1
cl-a 1 .h1 no dcimo quinto dia. Os menores valores neste tratamento foram -0,05
mgO2 g cl-a 1 h1 no terceiro e dcimo oitavo dias. No tratamento R o maior
valor de produtividade lquida foi 0,246 mgO2 g cl-a 1 .h1 no primeiro dia de
experimento e o menor valor foi de -0,006 mgO2 g cl-a 1 .h1 no trigsimo quinto
dia. No tratamento controle, o maior valor foi registrado no dcimo quinto dia,
0,183 mgO2 g cl-a 1 .h1 e o menor -0,080 mgO2 g cl-a 1 .h1 no dcimo oitavo
dia (Fig. 14).

6.1.6 Contagem de microrganismos


A sucesso das microalgas perifticas ao longo do tempo foi caracterizada pelo acrscimo
na densidade de cianobactrias cocides e lamentosas, ao passo que as diatomceas foram

28

Figura 13: Produtividade bruta do perifton, representada pela razo entre a produo
primria bruta e a Clorola a
diminuindo em nmero ao longo do experimento. Nos tratamentos Controle e R foram
perceptveis a dominncia de diatomceas at o 26o dia. No ltimo dia do experimento
pde-se notar a dominncia das cianobactrias. No tratamento Controle as diatomceas
da famlia Cymbellaceae chegaram a colonizar as telas a uma densidade de 257.000 clulas
cm2 , e atingindo mnimos de 196.000 clulas cm2 ao nal do experimento. Os agelados
apresentaram densidades com menores variveis entre 18.000 a 39.000 organismos cm2
(Fig. 16 e 17).
O tratamento R apresentou tambm um aumento constante das diatomceas Cymbellaceae
at o vigsimo sexto dia, diminuindo a sua densidade no ltimo dia. Esses valores, do 26o
dia para o 38o dia, variaram de 370.000 para 210.000 organismos cm2 . As cianobactrias
cocides iniciaram com densidades de 6.384 organismos cm2 e aumentaram para 707.000

29

Figura 14: Produtividade lquida do perifton, representada pela razo entre a produo
primria lquida e a Clorola-a

Figura 15: Microalgas contadas e referidas como: A e B, famlia Cymbellaceae. A


Cymbella menor que 20m, B Cymbella maior que 20m e C diatomceas penadas maiores
25m, penadas menores que 25m ao fundo
organismos cm2 ao nal do experimento. As cianobactrias lamentosas assim como as
cocides aumentaram suas densidades ao passar do tempo. As lamentosas variaram de
26.000 organismos cm2 no terceiro dia para 686.000 organismos cm2 no ltimo dia. Os
agelados oscilaram de 20.000 organismos cm2 no terceiro dia para 65.000 organismos
cm2 no ltimo dia (Fig. 16 e 17).

30

O tratamento CR foi caracterizado principalmente pelo acrscimo de cianobactrias


cocides com densidade mnima (37.000 organismos cm2 ) no terceiro dia e densidade
mxima no ltimo dia (404.500 organismos cm2 ). A dominncia de Cymbella menores
que 20m foi alternada para a dominncia de diatomceas penadas pequenas, fato que no
ocorre nos outros tratamentos, que mantm abundncias crescentes de Cymbella menores
que 20 m (Fig. 16 e 17).

31

Figura 16: Nmero de microrganismos cm2 . Tratamentos: Controle, R e CR.

32

Figura 17: Logartimo da contagem de diatomceas cm2 , por grandes grupos.


Tratamentos: Controle, R e CR.

33

As menores abundncias de nematdeos em todas as classes de tamanho foram encontradas no tratamento CR. Os nematdeos maiores que 400m ocorrem em pequenas densidades
(3,5 nematdeos cm2 , no terceiro dia e 18 nematdeos cm2 no dcimo terceiro dia).
Os nematdeos menores que 200m foram os mais abundantes, com valores iguais a 35
nematdeos cm2 no vigsimo sexto dia e os menores valores iguais a 10 nematdeos cm2
no ltimo dia (Fig. 18). No tratamento R a maior densidade foi registrada no dcimo
terceiro dia com 276 nematdeos cm2 (menores que 200m), 214 nematdeos cm2
(entre 200m e 400m) e 100 nematdeos cm2 (maiores que 400m) (Fig. 18). Entre os
dias analisados do Controle, a maior densidade de nematdeos, menores que 200m, foi
apurada no ltimo dia com 272 nematdeos cm2 , 223 nematdeos cm2 (entre 200m e
400m) e 145 nematdeos cm2 (maiores que 400m) (Fig. 18).

6.1.7 Inuncia dos fatores abiticos


As regresses lineares mltiplas demonstram uma forte interao positiva dos valores
de produo bruta e lquida nos diferentes tratamentos.

Variveis abiticas como a

temperatura e a salinidade interagiram negativamente com a produo bruta e lquida


(Tabela 1).
Tabela 1: Regresso linear mltipla, relacionando a produo bruta e a lquida com as
variveis fsico-qumicas

34

Figura 18: Nmero de nematdeos por cm2 Tratamento Controle, Tratamento R e


Tratamento CR

6.2 Experimento 2 - F. paulensis


6.2.1 Fatores fsico-qumicos
1. Salinidade
A salinidade no apresentou diferenas signicativas entre os tratamentos ao

35

longo do tempo. Os valores mximos do tratamento CR foram 34,2 no nono dia e


o mnimo 25,6 no ltimo dia. O tratamento R apresentou valore mximo igual a
34,5 no nono dia e o mnimo valor no ltimo dia com 25 de salinidade. O Controle
apresentou no dcimo dia salinidade igual a 34,6 e no ltimo dia salinidade igual a
25 (Fig. 19).

Figura 19: Salinidade ao longo dos dias


2. Temperatura da gua
A temperatura da gua apresentou grandes diferenas entre as medidas realizadas
pela manh e tarde. As maiores temperaturas foram observadas no dcimo dia,
com 23 o C pela manh e 32,7 o C durante a tarde. Os menores valores foram
encontrados no ltimo dia, com mxima de 18,5 o C e mnima de 10,8 o C (Fig.
20). Os valores mdios de temperatura nos tratamentos foi igual a 19,7 o C.
3. pH
Em todos os tratamentos o pH manteve-se ao redor de 8. Mximos valores iguais
a 8,7 e mnimos de 8.
4. Horas de insolao

36

Figura 20: Temperatura em o C, ao longo dos dias


O nmero de horas totais de insolao ao longo dos dias de experimento foi de
101 horas.

6.2.2 Nutrientes na gua


A amnia no tratamento CR diferenciou-se estatisticamente dos outros tratamentos,
apresentando valores mximos no primeiro dia, 0,32 mg.L1 , decrescendo os valores at
o sexto dia. O Controle apresentou no dcimo oitavo dia um pico de 0,13 mg.L1 e no
vigsimo quinto dia outro pico de 0,13 mg.L1 (Fig. 21).
Valores de nitrito, nitrato e fosfato mantiveram-se abaixo dos nveis de deteco dos
mtodos utilizados para as anlises em todos os tratamentos.

6.2.3 Incremento de peso e sobrevivncia dos camares


O peso dos camares apresentou diferenas estatsticas, quando comparados os pesos
iniciais com os nais. O peso mdio inicial foi igual a 0,18 (0,01) e o peso nal foi igual
a 0,55 (0,01). O incremento de peso foi 308% ( 6,3). A sobrevivncia foi igual a 79,9%
( 4,7).

37

Figura 21: Amnia em mg.L1 ao longo dos dias

6.2.4 Biomassa do biolme


1. Clorola a
A clorola a do tratamento CR se diferenciou estatisticamente dos outros tratamentos
apresentando os maiores valores neste tratamento, que foram encontrados a partir
do vigsimo dia do experimento, com 8,25 g cm2 e mnimo valor igual a 0,19 g
cm2 , no primeiro dia. O tratamento R apresentou maior valor de clorola-a no
trigsimo quarto dia (3,5 g cm2 ) e menor valor no primeiro dia (0,36 g cm2 ).
O Controle apresentou valores mais baixos de clorola-a, mnimo de 0,16 g cm2
no primeiro dia e mximo de 1,2 g cm2 no trigsimo quarto dia (Fig. 22).

6.2.5 Produo Primria


1. Produo Bruta
A produo bruta do tratamento R apresenta os maiores valores a partir da
metade do experimento at o ltimo dia e foi signicativamente diferente dos demais
tratamentos. Apresentou valores mximos iguais a 0,041 mgO2 cm2 .h1 no dcimo
primeiro dia e mnimos valores iguais a 0,023 mgO2 cm2 .h1 no dcimo quinto
38

Figura 22: Mdia da Clorola-a ao longo dos dias (Marcaes correspondem aos dias de
contagem)
dia. O tratamento CR manteve valores intermedirios aos tratamentos Controle e
CR e signicativamente diferente do tratamento R e Controle. Apresentou picos,
de mximo valor igual a 0,050 mgO2 cm2 .h1 no dcimo oitavo dia e mnimo no
primeiro dia, 0,0015 mgO2 cm2 .h1 . O tratamento Controle apresentou os menores
valores, mximo de 0,037 mgO2 cm2 .h1 no oitavo dia e mnimo igual a 0,012 mgO2
cm2 .h1 no trigsimo quarto dia (Fig. 23).
2. Produo Lquida
A produo lquida dos tratamentos R e Controle no foram estatisticamente
diferentes, sendo que para o tratamento R os valores mximos foram registrados no
oitavo dia, iguais a 0,036 mgO2 cm2 .h1 e mnimos de 0,013 mgO2 cm2 .h1 no
trigsimo quarto dia. O tratamento Controle apresentou valores mximos iguais a
0,037 mgO2 cm2 .h1 no oitavo dia e mnimo de 0,012 mgO2 cm2 .h1 no trigsimo
39

Figura 23: Mdia da produo bruta do perifton em mgO2 cm2 .h1


quarto dia. O tratamento CR apresentou os menores valores de produo lquida,
diferenciando-se signicativamente dos outros tratamentos. Mximos valores no
oitavo dia, com 0,036 mgO2 cm2 .h1 e mnimos de -0,0077 mgO2 cm2 .h1 no
trigsimo quarto dia (Fig. 24).
3. Respirao
A respirao no tratamento CR apresentou os maiores valores e diferenciou-se
signi- cativamente do tratamento R. Os valores de respirao para o tratamento CR
foram iguais a 0,016 mgO2 cm2 .h1 no dcimo oitavo dia e 0,032 mgO2 cm2 .h1
no primeiro dia. O tratamento R com valores 0,012 mgO2 cm2 .h1 no vigsimo
nono dia e 0,0075 mgO2 cm2 .h1 no trigsimo oitavo dia. O tratamento Controle
apresentou dados de respirao prximos a zero, excetuando-se o primeiro dia, com
medidas iguais a 0,0019 mgO2 cm2 .h1 (Fig. 25).
40

Figura 24: Mdia da produo lquida do perifton em mgO2 cm2 .h1


4. Produtividade Primria Bruta
A produtividade bruta do tratamento CR apresentou diferenas estatsticas com
relao aos demais tratamentos. Apresentou os menores valores iguais a 0,022 mgO2

g cl-a 1 .h1 no quarto dia e 0,001 mgO2 g clorola-a 1 .h1 no trigsimo quarto
dia. O tratamento R apresentou valores iguais a 0,101 mgO2 g cl-a 1 .h1 no
primeiro dia e 0,067 mgO2 g cl-a 1 .h1 no trigsimo quarto dia. O Controle com
valores de 0,117 mgO2 g cl-a.h1 no primeiro dia e 0,010 mgO2 g cl-a 1 .h1 no
trigsimo quarto dia.
5. Produtividade Primria Lquida
A produtividade lquida no tratamento CR tambm foi signicativamente menor
que outros tratamentos, apresentando os menores valores iguais a -0,010 mgO2

g cl-a 1 .h1 no primeiro dia e mximo de 0,023 mgO2 g cl-a 1 .h1 no quarto
41

Figura 25: Mdia das taxas de respirao do perifton medidas como consumo de oxignio,
em mgO2 cm2 .h1
dia. O tratamento R no se diferenciou signicativamente do tratamento Controle,
apresentando valores mnimos iguais a 0,00 mgO2 g cl-a 1 .h1 no trigsimo quarto
dia e mximos iguais a 0,063 mgO2 g cl-a 1 .h1 no primeiro dia. O Controle com
valores mximos iguais a 0,10 mgO2 g cl-a 1 .h1 no primeiro dia e mnimo valor
igual a 0,010 mgO2 g cl-a 1 .h1 no trigsimo quarto dia.

6.2.6 Contagem de microrganismos


Os grupos de microalgas contadas, nos tratamentos Controle e R, apresentaram sucesses
semelhantes, onde todos os grupos apresentaram um aumento da biomassa at o vigsimo
segundo dia e diminuram seus valores at o nal do experimento. O tratamento Controle
apresentou as menores abundncias ao longo de todo o experimento, sendo que as Dinophyceae
foram as mais abundantes, com mximos valores no vigsimo segundo dia, 258.200 organismos
42

Figura 26: Produtividade bruta do perifton, representada pela razo entre a produo
primria bruta e a Clorola a
cm2 (Fig. 28 e 29). O tratamento R foi caracterizado por apresentar um declnio das
abundncias de Dinophyceae ao nal do experimento de 1.344.612,62 organismos cm2
para 6,8x105 organismos cm2 ; um crescimento de diatomceas at o vigsimo segundo
dia (11,8x105 organismos cm2 ) e um pequeno declnio da abundncia nas contagens
seguintes. As Cyanophyceae do tratamento R apresentaram um aumento da abundncia
a partir do vigsimo segundo dia (4,6x105 organismos cm2 ) e mantiveram seus valores
at o nal do experimento (Fig. 28 e 29). O tratamento CR demonstrou comportamento
distinto dos demais tratamentos, no crescimento das abundncias da maioria dos grupos
at o trigsimo quarto dia e depois apresentando uma diminuio dessas abundncias. As
diatomceas apresentaram baixas abundncias ao longo do experimento, excetuando-se
o vigsimo segundo dia (10,9x105 organismos cm2 ), caracterizado principalmente por
diatomceas penadas menores que 25 m. As Dinophyceae apresentaram as maiores

43

Figura 27: Produtividade lquida do perifton, representada pela razo entre a produo
primria lquida e a Clorola a
abundncias no trigsimo quarto dia, com 1.681.522 organismos cm2 e as Cyanophyceae
com 12,8x105 organismos cm2 (Fig. 28 e 29).
Os nematdeos nos tratamentos Controle e R apresentaram um aumento principalmente
na abundncia da menor classe tamanho. Os valores mximos para o Controle foram iguais
a 582 organismos cm2 e o tratamento R com 962 organismos cm2 . O tratamento CR
apresentou uma grande densidade no trigsimo quarto e trigsimo oitavo dias, principalmente
dos organismos da menor classe de tamanho, com contagens iguais a 3.298 organismos
cm2 e 2.738 organismos cm2 respectivamente (Fig. 30).

44

Figura 28: Contagem microrganismos Tratamentos: Controle, R e CR

45

Figura 29: Logartmo da contagem de diatomceas cm2 , por grandes grupos Tratamentos: Controle, R e CR

46

Figura 30: Nmero de nematdeos cm2 Tratamentos: Controle, R e CR

6.2.7 Inuncia dos fatores abiticos


Os resultados das regresses lineares mltiplas, caracterizadas pela relao das variveis
respostas (produo bruta e produo lquida) com as variveis fsico-qumicas. Atravs
das relaes encontradas, podemos perceber que a produo bruta e lquida sofrem uma
forte inuncia positiva da temperatura e salinidade (Tabela 2).

47

Tabela 2: Regresso linear mltipla, considerando as interaes da produo bruta e


lquida com as variveis fsico-qumicas

48

7 Discusso
O perifton vem sendo utilizado na aqicultura com a nalidade de proporcionar a
melhoria na qualidade da gua e tambm como fonte nutricional complementar para os
organismos cultivados. Esses usos potenciais vm sendo empregados desde os primeiros
sistemas de cultivos ("acadjas", "samarahs"e sistema de "katha"), proporcionando uma
fonte alimentar alternativa baseada no consumo de microorganismos da comunidade periftica
(van Dam et al. (2002), Azim et al. (2002, 2003))
Apesar de se considerar que grande parte da produo natural do perifton deve
beneciar os organismos cultivados atravs de seu consumo no existe, de acordo com
nosso conhecimento, muitas medidas de produo primria do biolme em sistemas de
aqicultura.

Algumas medidas da produo primria e biomassa do biolme foram

realizadas nos ambientes lmnicos e costeiro/ocenico (Moriarty, 1997). Estes estudos


mostram que o perifton pode apresentar valores de produo bruta e biomassa em
clorola-a que oscilam entre 0,0057 mgO2 cm2 . h1 e 0,011 g clorila-a (Flipo et al.,
2007) a 0,016 mgO2 cm2 . h1 e 1,8 g clorila-a (Moschini-Carlos et al., 2000) e 0,0334
mgO2 cm2 . h1 , com valores mdios de clorola iguais a 5,18 mg clorila-a (Boisson &
Perrodin, 2006). J em sistemas de cultivo de tilpias, Huchette et al. (2000) encontraram
valores de clorila-a iguais a 1,4 g clorila-a e produo lquida igual a 0,09 mgO2 cm2 .
h1 (Tabela 3).
As medidas de produo primria obtidas nos dois experimentos deste estudo chegam
a superar os valores estimados para o perifton de ambientes naturais em at 10 vezes.
Este um valor bastante alto, mesmo considerando-se possveis erros devido variaes
dos mtodos empregados e diferenas nas condies ambientais onde as medidas foram
realizadas. Por outro lado, as biomassas encontradas em nosso estudo foram maiores
apenas em alguns momentos da colonizao, mas mantiveram-se praticamente nos mesmos

49

Tabela 3: Produo primria e clorola-a do perifton em diferentes sistemas.

nveis daqueles encontrados nos trabalhos citados, considerando que possveis subestimativas
dos nossos dados podem ter ocorrido. Estes fatos nos levam a concluir que a adio
de rao e a presena dos prprios camares que estavam sendo cultivados geraram
um incremento da produo primria e maior acmulo da biomassa de microalgas e
outros microorganismos presentes no perifton dos tanques. O estmulo ao aumento da
produo primria em tanques de cultivo de camaro pode estar relacionado quantidade
e propores de nutrientes (especialmente N e P) presentes na excreta dos camares e na
rao fornecida e tambm predao exercida por estes sobre os microorganismos do
biolme, que pode estimular o crescimento de espcies no predadas, ou reposio rpida
dos microorganismos consumidos.
Chama ateno o fato de que as medidas de produo primria realizadas nos dois
experimentos apresentaram nveis distintos, destacando-se os maiores valores nos tanques
que havia a presena dos camares L. vannamei. possvel que diferentes espcies de
camaro inuenciem de maneiras distintas o desenvolvimento do biolme, seja pelo tipo de
predao exercida, devido a diferentes necessidades nutricionais, ou concentraes e razes
de nutrientes diferenciadas nas excretas produzidas. Fato similar foi observado em cultivos
50

de L. vannamei e F. paulensis em sistemas com agregados microbianos (Ferreira, L. com.


pess.), onde a menor quantidade de agregados produzidos em tanques com F. paulensis
foi atribuda maior quantidade de fosfato presente nas excretas deste camaro, que
inuenciaram o desenvolvimento da comunidade microbiana responsvel pela formao
de agregados. Entretanto, em nosso estudo no se vericou qualquer relao estatstica
entre os nveis de produo primria e as concentraes de nutrientes, especialmente pelo
fato de que estes elementos, exceto a amnia, se mantiveram em concentraes inferiores
aos nveis de deteco dos mtodos empregados.
As anlises estatsticas demonstraram que a salinidade e a temperatura da gua foram
os principais fatores relacionados com a variabilidade observada da produo primria.
Ressalte-se que durante o estudo de L. vannamei (experimento 1) houve um maior nmero
de horas de insolao, o que levou tambm a uma maior temperatura mdia da gua nos
tanques de cultivo (mdia L. vannamei 25 o C x mdia F. paulensis 19 o C). Alm disso, as
oscilaes das altas temperaturas no experimento 1 podem ter sido o fator limitante no
crescimento dos camares, que mantiveram altas sobrevivncias, o que poderia ter levado
a uma menor predao sobre o biolme. Possivelmente isso foi causado pelo tamanho
das caixas, que no tinham capacidade trmica suciente para dissipar o calor que era
absorvido durante todo dia, de forma a no conter as grandes oscilaes de temperatura
entre a manh e a tarde, e porque foram mantidas no interior de uma estufa, que chegou
a registrar temperaturas do ar iguais a 40 o C. J o experimento 2 com F. paulensis foi
realizado ao relento, tambm sofrendo grandes inuncias das baixas temperaturas que
alcanavam pela madrugada e das altas temperaturas pelo nal da tarde. Entretanto,
mesmo nessas condies, os camares F. paulensis no apresentaram qualquer debilidade
nem limitao do crescimento, demonstrando a alta rusticidade desta espcie.
Outra possibilidade para justicar as diferenas observadas nos nveis de produo
primria dos dois experimentos que as maiores taxas de produo, nos tanques contendo
51

os camares L. vannamei tenham ocorrido pela diferenciao do estado de desenvolvimento


das microalgas devido maior disponibilidade de luz. O maior numero de horas de luz
no experimento 1 pode ter favorecido a maior atividade fotossinttica nos tanques com L.

vannamei. De forma contrria, a alta biomassa de microalgas observadas no perifton dos


tanques do tratamento com camaro e rao (CR) do experimento 2, com F. paulensis,
pode ter provocado um efeito de sombreamento das microalgas, o que reduziria sua
capacidade de produo, como observado para os baixos valores de produo normalizados
pela biomassa de microalgas (produtividades bruta e lquida) do tratamento CR, em
comparao com os demais tratamentos (Figs. 13,14,26 e 27).
As altas biomassas de microalgas medidas nos tanques do tratamento CR, com F.

paulensis no condizem com os nveis relativamente baixos de produo primria medidos.


Tais discrepncias podem ser resultados de erros metodolgicos, principalmente no mtodo
do oxignio dissolvido. Para medidas de produo primria do toplncton, a formao de
bolhas durante a incubao e a perda destas ao se abrir os frascos de DBO, levariam a uma
sub-estimativa dos valores de produo primria medidos atravs da tcnica do oxignio
dissolvido. Entretanto, nas incubaes com perifton, o que pde ser observado foi a
formao de bolhas, mas que caram retidas entre as camadas do perifton, sem que essas
bolhas fossem desprendidas ao se abrir a garrafa, mas tambm no contribuindo para o
total de oxignio dissolvido medido. Outro fator que poderia justicar tais diferenas seria
uma maior quantidade de clorola por clula. Entretanto, esta hiptese menos plausvel,
uma vez que possvel que os dados de clorola-a na verdade estejam sub-estimados
devido ao uso de acetona como solvente para extrao deste pigmento, o qual no
muito efetivo quando da presena de cianobactrias. Para extrao de clorola destes
microorganismos deve ser empregado, principalmente o etanol (UNESCO (1983); Wetzel
& Likens (1991)).
Por ltimo, pode-se dizer que um fato importante de controle e estmulo da produo
52

primria que levou s diferenas observadas entre os dois experimentos pode estar diretamente
relacionada predao das microalgas pelos prprios camares. Devido ao fato das
microalgas estarem sendo constantemente predadas, indivduos pioneiros (r-estrategistas)
no processo de constante recolonizao do perifton podem apresentar um metabolismo
mais acelerado e tambm uma maior capacidade de produo primria. Este fato foi
observado em outros estudos sobre o biolme de cultivo (Preto et al. (2005), Ballester

et al. (2007)).
Para se vericar o quanto a produo primria do biolme poderia suprir as necessidades
metablicas dos camares estudados, buscamos na literatura informaes referentes a
medidas do metabolismo de L. vannamei e F. paulensis, realizadas em diferentes condies
experimentais. Gauquelin et al. (2007) trabalhando com camares de 21 g e distintos
nveis de protena na rao, aponta para consumos de oxignio entre 0,8 a 1,23 mgO2
g camaro1 . h1 . J Li et al. (2007), que trabalharam com diferentes salinidades,
mostraram que em menores salinidades o metabolismo de juvenis de L. vannamei se
acelera, gerando maiores consumos de oxignio . Para salinidades entre 17 e 30 o consumo
foi igual a 1 mgO2 g camaro1 . h1 , para camares juvenis. Em situaes com alterao
nos nveis de potssio e magnsio na gua, L. vannamei apresenta um consumo de oxignio
que oscila entre 0,33 a 0,43 mgO2 g camaro1 . h1 , para camares com 30 mg (Roy

et al., 2007). J o metabolismo dos F. paulensis foi estudado por Wasielesky (2000),
que encontrou valores de consumo de oxignio que variaram entre 0,19 e 0,27 mgO2 g
camaro1 . h1 , para camares de 6 g, mantidos em salinidades de 20 a 30. Menores
taxas metablicas foram determinadas por Tsuzuki et al. (2003), que mediram o consumo
de oxignio de tecidos de F. paulensis em diferentes salinidades, com camares entre 40 e
150 mg. Neste caso, os valores de consumo de oxignio variaram entre 0,04 e 0,05 mgO2
g camaro1 . h1 . De maneira geral, as taxas metablicas de F. paulensis so muito
menores do que aquelas medidas para L. vannamei e outras espcies de camaro como
53

Penaeus monodom (Wasielesky, 2000).


Considerando-se as maiores taxas metablicas para cada espcie de camaro e os
valores mnimo e mximo de produo primria liquida de todo o sistema, foi possvel
calcular o quanto da produo primria do biolme poderia atender s necessidades dos
camares. No caso de L. vannamei, a produo primria medida poderia atender de
8 a 150% de suas necessidades, enquanto que para F. paulensis, que parece ter uma
atividade metablica menor, a produo primria do biolme poderia atender muito mais
do que sua mxima necessidade (137,63 a 287,78%) (Tabela 4). importante ressaltar
que as exigncias metablicas registradas so relativas ao estgio de desenvolvimento
dos camares e tambm s condies de cada cultivo, sendo assim, estas estimativas esto
sujeitas a erros, mas j do uma boa idia do potencial alimentar da produtividade natural
dos sistemas de cultivo.
Tabela 4: Consumo de oxignio dos camares, consumo total do sistema (considerando a
biomassa total de camares de cada caixa), produo primria lquida, produo primria
total (considerando toda a rea adicionada) e necessidade metablica atendida.

Teoricamente, cou demonstrado que os nveis de produo primria do biolme


poderiam suprir parte da demanda energtica dos camares cultivados. Entretanto, a
54

questo principal saber de que forma e qual parte desta produo primria consumida
pelos camares. Os microorganismos presentes no biolme representam uma fonte extra
de protena, lipdeos e vitaminas essenciais, podendo ser aproveitada pelos camares de
forma direta. A importncia dos microorganismos do biolme como fonte complementar
de alimento vem sendo ressaltada para cultivos de F. paulensis, onde cou demonstrado
que o consumo de microorganismos pode gerar um aumento no crescimento de at 20
%, em comparao com sistemas onde no havia biolme, alm de garantir uma grande
sobrevivncia de larvas e juvenis de F. paulensis (Thompson et al. (2002), Preto et al.
(2005), Ballester et al. (2007)). Atravs do uso de istopos estveis, Abreu et al. (2007)
demonstraram que os microorganismos podem representar at 70% da demanda de nitrognio
dos camares e que o nitrognio presente na rao oferecida no incorporado por F.

paulensis. J Silva et al. (2008), encontraram que bactrias, cianobactrias, agelados


e principalmente nematdeos so uma importante fonte de lipdeo para os camares
cultivados, enquanto que diatomceas e tambm nematdeos apresentam uma relao
direta com a quantidade de protena presente no biolme.
Em nosso estudo se vericou um consumo seletivo de diatomceas pelas duas espcies
de camaro, que uma importante fonte de protena. De acordo com os resultados,
verica-se que L. vannamei possivelmente se alimentaram durante o experimento principalmente
de Cymbella pequenas, que foram substitudas por outras penadas pequenas (Figs. 16,17,28
e 29). Diferenas encontradas entre as contagens de nematdeos dos tratamentos R e
Controle quando comparados com as contagens feitas nas caixas do tratamento CR do
experimento 1 com L. vannamei sugerem que os nematdeos tambm representaram uma
importante fonte alimentar.
Substituies de diferentes grupos de microalgas tambm ocorreram no experimento 2
com F. paulensis, que pastaram as telas preferencialmente durante a noite, alimentando-se
at a metade do experimento da maioria das diatomceas. Uma possvel seletividade pelas
55

diatomceas maiores pde ser notada, j que no vigsimo segundo dia as abundncias de
diatomceas pequenas atingem os mximos valores e as diatomceas maiores que 25 m
mantm baixas abundncias. O pequeno nmero de nematdeos um indicativo de que
os F. paulensis tenham se alimentado tambm desses organismos, j que apresentaram
abundncias menores que os demais tratamentos, excetuando-se os ltimos dois dias de
experimento.
Os resultados deste trabalho demonstram que a produtividade primria do biolme
pode suprir grande parte da demanda nutricional dos camares. O incremento de superfcie
submersa em sistemas de cultivo pode representar um aumento na disponibilidade de
alimentos para os camares cultivados, o que poderia resultar numa importante reduo
dos custos da produo, onde a compra de raes representa mais de 50% do custo total
de produo (Shiau (1998), Epp (2002)).

Perspectivas de estudos futuros:


Futuros estudos para avaliao da utilizao da produtividade primria nos ambientes
de cultivo devem ser realizados com o acompanhamento dos organismos aderidos, pois a
escolha alimentar de cada organismo cultivado tende a proporcionar respostas diferentes
nos valores de produo primria, devido s abundncias de microorganismos que se
sucedem ao longo do tempo, pela retirada seletiva ou no destes pelos camares.
Para tornar as medidas de produo mais ecazes, as densidades de animais cultivados
deveriam ser acompanhadas, para se saber a real inuncia dos substratos na produo,
balanceando as necessidades metablicas desses animais, com a capacidade suporte do
perifton em proporcionar tais condies.

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A. Tabela de dados gerais L. vannamei e F. paulensis

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