Aclimatizao de Mudas de

Flores
Prof. Paulo Hercilio Viegas Rodrigues
LPV ESALQ - USP

Cultivo in vitro
Produo em grande escala, pequeno espao, durante o
ano todo
Propagao de espcies de difcil propagao por
sementes
Produo clonal de plantas, alta qualidade fitossanitria
Conservao de germoplasma
Manipulao gentica
Estudos de desenvolvimento

Etapas de desenvolvimento no processo

de propagao in vitro
T0

Preparo do material (planta matriz) para coleta

do explante.

T1

Seleo, coleta e desinfestao dos

explantes e sua introduo in vitro em
condies asspticas.

T2

Propagao dos propgulos atravs de

subculturas sucessivas, em meio de cultura
apropriado.

T3

Alongamento e enraizamento das partes

areas produzidas.

T4

Transplante das plntulas obtidas para

substrato ou solo e aclimatizao em casade-vegetao.

PROPAGAO PLANTAS ORNAMENTAIS

NOVIDADE

VELOCIDADE
QUALIDADE
COMPETITIVIDADE

EFICINCIA NO PROCESSO DE PROPAGAO

CONHECIMENTO
ESTRUTURA FSICA ADEQUADA
MO OBRA QUALIFICADA
CAPACIDADE DE GERENCIAMENTO

Aclimatizao
Aclimatizao e aclimatao so termos que apresentam
conotaes diferentes.
O primeiro trata dos processos para a passagem da
planta que est in vitro para o ambiente e definido
como a adaptao climtica de um organismo,
especialmente uma planta, que transferida para um novo
ambiente, sendo todo esse processo realizado
artificialmente.
O termo aclimatao tem um significado similar, mas um
processo no qual as plantas ou outros organismos se
tomam ajustados a um novo clima ou situao, como
resultado de um processo essencialmente natural.
Preece & Sutter (1990); Kozai (2000)

CONDIES IN VITRO:
ELEVADA UMIDADE (90 100%)
FONTE DE CARBONO (SACAROSE)

QUAIS SO AS
CONSEQUNCIAS
PARA AS PLNTULAS
MICROPROPAGADAS?

LUMINOSIDADE REDUZIDA
TROCAS GASOSAS LIMITADAS
CONDIES ASPTICAS
TEMPERATURA CONTROLADA

ANORMALIDADES:
ANATMICAS
MORFOLGICAS
FISIOLGICAS

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[O2]

[C2H4]

Temperatura ar
Transferncia calor

Trocas C2H4

Temperatura ar
Transf. calor
condutiva

Produo C2H4

Transpirao
Potencial hdrico

Culturas
Meio

Temperatura meio

[Minerais
]
Condutividade
trmica
Absoro minerais
Coeficiente
[Minerais]
de difuso
[PGRs]

Fotossntese

Massa seca

[Vitaminas], etc...

Transmissividade

Potencial hdrico (UR)

[CO2]

Respirao

Coeficiente
de difuso

Evaporao

Contedo clorofilas

[Acares]

Potencial hdrico

Absoro acares
[Acares]
pH

DFF

Evapotranspirao

Velocidade ar

[O2]

[C2H4]

Potencial hdrico (UR)

Trocas CO2

Trocas O2

Frasco

Volume ar

[CO2]

Mov. H2O

Absoro gua
Potencial hdrico

O2 dissolvido
Firmeza

Volume meio

Adaptado de Kozai, 2000; 2005)

 ESTAQUIA / ACLIMATIZAO PLNTULAS MICROPROPAGADAS

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FOTOS MICROSCOPIA ELETRONICA DE VARREDURA (Barra = 20 m)

Chrysanthemum morifolium

PLANTA DE ESTUFA

PLANTA IN VITRO

Fonte: Debergh P.C. & Zimmerman R.H. 1991

Micropropagation Technology and Application

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ANORMALIDADES: ANATMICAS / MORFOLGICAS / FISIOLGICAS

CUTCULA (CAMADA DE CERA)
FOLHAS MAIS FINAS / TENRAS / FOTOSSNTESE
PARNQUIMA PALIDICO MENOR E COM MENOS CLULAS
PARNQUIMA ESPONJOSO MAIOR
ESTMATOS NO FUNCIONAIS
CONEXES VASCULARES DEFICIENTES
RAZES POUCO OU NO FUNCIONAIS (MEIO SLIDO)

PLNTULAS EXTREMAMENTE SENSVEIS AO AMBIENTE EXTERNO

GRANDE VARIAO UMIDADE
GRANDE VARIAO TEMPERATURA
ELEVADA LUMINOSIDADE
PRESENA MICRORGANISMOS
PRESENA DE PRAGAS

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LUZ
Cultivo in vitro:
Nveis de Luminosidade muito baixos
Folhas Finas / Similares as de ambiente sombreado
Falta de clulas especializadas para nveis elevados de luz
Ausncia de Pigmentos de Proteo
Mecanismos inadequados para Fotossntese
Controle precrio da Transpirao
Sombreamento:
Reduz a demanda de transpirao
Evita destruio da Clorofila
90% (Vero) 50% (dependente espcie / condies ambientais)

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TCNICAS DE ACLIMATIZAO:

FOCO: MAIOR GRADUALIDADE POSSVEL NA TRANSIO:

Estrutura Fsica Planejamento Prvio

Pessoal: Treinamento / Gerenciamento

16

17

SISTEMA DE MIST
DISPERSO GOTCULAS DE GUA: 50 (40-50 PSI = 2,8-3,5 Kg/cm2)

18

19

20

 VANTAGENS DO SISTEMA MIST:

Sistema relativamente simples

Reduzidas Presses de Trabalho (40 50 psi)

Relativamente econmico
Ajuda manter Temperatura das Plntulas ( +/- 1C )
Contribui manuteno do turgor
Mdia exigncia de Qualidade de gua
DESVANTAGENS DO SISTEMA MIST:
gotas grande elevadas vazes elevado consumo de gua

No forma filme na epiderme inferior das folhas

Maior variao nos nveis de umidade
Lixiviao Nutrientes ( Folhas / Substrato )
Encharcamento do Substrato

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SISTEMA FOG
Finssimas Gotculas de gua 15 (500 PSI = 35 Kg/cm2)
Umidade constante 93 100%

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VANTAGES DO SISTEMA FOG:

Gotculas gua ( 15 ) em suspenso at evaporar

Aumenta Umidade do ar (93-100%) e reduz Temperatura
Finssimo filme de gua em ambas faces foliares plntulas trgidas

Distribuio mais homognea de umidade

NO ENCHARCA O SUBSTRATO (< INCIDNCIA DOENAS)
No lixivia Nutrientes das Folhas
Reduz Stress das plntulas micropropagadas
Melhor pegamento e enraizamento das mudas
Pode reduzir o tempo para aclimatao das mudas
Consome 25 vezes menos gua que o sistema Mist
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 DESVANTAGENS DO SISTEMA FOG:

Exige gua de excelente qualidade
Essencial o uso de filtros
Conjunto moto-bomba e tubulaes Altas Presses ( 500 PSI)
Necessita de Sistema de Irrigao em paralelo
Custo mais elevado

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FOG ULTRASSNICO ( FOG SECO )

Gotculas de gua com entre 1 e 10

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SOBRETUNEL DENTRO DA ESTUFA

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27

28

TECNOLOGIA VITRO-PLUG - LABORATRIO / ESTUFA

1 PRMIO INOVAO TECNOLGICA HORTIFAIR NOV 2008 HOLANDA
VITRO-PLUS / VISSER / JIFFY

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VITRO-PLUG
Bandejas Plsticas 48 ou 126 Clulas com Jiffy-Pellet- 7C
Esterelizadas por Raios Gama

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VITRO-PLUG
SUBSTITUIR O ESTGIO III IN VITRO
CONJUNTO DEVE SER MANUSEADO NA CAPELA FLUXO LAMINAR
CADA BANDEJA 400 ml MEIO CRESCIMENTO (50 C) SEM GAR
MESMO pH E COMPOSIO DO MEIO DE CRESCIMENTO (ESTGIO III)
JIFFY-PELLETS-7C SE EXPANDEM PRONTOS PARA REPICAGEM
BANDEJAS COM PLNTULAS DEVEM SER SELADAS COM FILME

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VITRO-PLUG
VANTAGENS:
Mecanizao da maioria dos processos do Laboratrio
Plntulas j saem do Laboratrio com Razes ativas em Substrato
Menor choque de transplantio

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Mudas de H.bihai

enraizadas e aclimatizadas
com 80% de sombreamento

25

mudas sobreviventes

20
15
10
b

5
0
0

15

30

45

60

75

90

sombreamento (%)
plant

areia

vermiculita

yPlantmax = - 22,563 + 1,0576x 0,0061x2

R2 = 0,92

yAreia = -19,906 + 0,9704x 0,0054x2

R2 = 0,92

yVermiculita = -2,6857 + 0,1343x

R2 = 0,88

Figura 1 Efeito dos nveis de sombreamento e dos substratos na sobrevivncia

de mudas de helicnia durante a aclimatizao, 28 dias de cultura ex vitro.
Tratamentos seguidos de letras distintas diferem entre si, pelo teste de Tukey. (P<0,05)

Aclimatizao Curau - CBA