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BACTERIOLOGIA GERAL
DIAGNSTICO BACTERIOLGICO DE ANAERBIOS

ADRIELE LOUISE VIANA GOMES

ANNE CAROLINE COSTA DE OLIVEIRA
HILDELENE AMLIA DANTAS
IGOR VINNICIUS DE ANDRADE BRANDO
MARCELA ALMEIDA SANTOS
TELEMACO PAULO

Elaborao
Data:

Verificao
Data:

Aprovao
Data:

N da cpia

/
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BACTERIOLOGIA GERAL
SUMRIO
1 Objetivo
2 Campo de aplicao
3 Responsabilidade
4 Principio do mtodo
5 Procedimentos
6 Material Clinico E Procedimento De Colheita Da Amostra
7 Procedimentos Gerais
8 Bactrias anaerbias e infeces associadas representativas
9 Tempo De Transporte X Volume De Amostra E/Ou Mtodo Coletado
10 Referncias Bibliogrficas

1 OBJETIVO
Este POP estabelece critrios e procedimentos cujo objetivo seja isolar e
identificar os prinipais patgenos anaerbios em diferentes processos
infecciosos e auxiliar no diagnstico dessas infeces.
.
3 CAMPO DE APLICAO
Este POP se aplica ao isolamento e identificao do patgeno causador de
patologias no sistema nervoso central (abscessos cerebrais), cabea e pescoo
(abscesso periodontal e outras infeces orais), pleuro pulmonar (pneumonia
por aspirao, abscessos pulmonares, pneumonia necrosante), intra-abdominais
(peritonites e abscessos), trato genital feminino (abscessos tubo-ovarianos,
abscessos vulvo-vaginais, aborto sptico), tecidos moles (Gangrena gasosa
(mionecroses), celulite crepitante (fascite necrosante).
4- Reponsabilidade
So responsveis por estes procedimentos:
-Farmacuticos;
-Tcnico de laboratrio;
-Biomdico
5 PRINCPIO DO MTODO
Crescimento bacteriano em meios de cultura seletivos e diferencias propiciam o
desenvolvimento das bactrias anaobias de importncia clnica. A partir disto
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possvel realizar a identificao por mtodos bioqumicos e a sorotipagem de
bactrias presentes na amostra.
6-PROCEDIMENTO
6.1-SEMEADURA PRIMRIA
1. Para todas as amostras: fazer a conferncia dos pedidos com as amostras e
verificar se as amostras esto adequadas;
2. Registrar no livro de rotina os pedidos dos pacientes;
3. Antes de iniciar a semeadura, limpar a bancada de trabalho com hipoclorito
e lcool 70 %;
4. Numerar as placas e os tubos com o nmero do laboratrio com o auxlio do
pilot;;
5. Sempre dentro da rea de segurana do bico de Bunsen, semear uma
amostra por vez seguindo o procedimento abaixo:
7-MATERIAL CLINICO E PROCEDIMENTO DE COLHEITA DA AMOSTRA
- ABSCESSOS E SECREES ABERTAS:
Remover o exsudato superficial com soro fisiolgico estril ou lcool 70GL.
Coletar dois "swabs" estreis, em profundidade. Introduzir um dos "swabs" em
meio de transporte de Stuart ou similar para fins de cultura. Com o outro
"swab" fazer um bom esfregao em lmina para Gram. Obs.: cotonetes ou
palinetes comerciais no devem ser utilizados para coletar material para fins
de cultura, pois so impregnados de substncia anti-sptica que inibe o
crescimento bacteriano. J para fazer esfregaos para bacterioscopia, podem
ser usados.
- ABSCESSOS E SECREES FECHADAS: Limpar a superfcie com soro
fisiolgico estril ou lcool 70GL. Com seringa e agulha, aspirar ao menos 1,0
ml do material e transferi-lo assepticamente para meio de transporte anaerbio.
CATETER VASCULAR: Limpar a pele circunjacente ao cateter com lcool
70GL. Remover o cateter assepticamente e cortar 5 cm da extremidade que
estava inserida no paciente. Colocar em tubo seco estril. No colocar em BHI
ou Soro fisiolgico!
- ESCARAS: Limpar a superfcie com soro fisiolgico estril. Coletar bipsia,
fragmento desbridado, aspirado com seringa e agulha ou "swab". Colocar em
meio para anaerbios ou Stuart.
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FLUIDOS: Desinfetar o local da puno com lcool iodado. Com seringa e
agulha, aspirar o material e transferir ao menos 1,0 ml para meio de
transporte
para
anaerbios.
MATERIAL DO TRATO RESPIRATRIO INFERIOR: Coletar para recipiente
seco
e
estril.
Escarro:
ver
coleta
no
ttulo
"BAAR".
MATERIAL DO TRATO RESPIRATRIO SUPERIOR: Oral: utilizar um "swab"
estril para limpar a leso e outro para coletar o material. Tambm pode ser
fragmento biopsiado ou material aspirado com seringa e agulha. Nasal
anterior para pesquisa de portador de estril. Semear imediatamente em
gar sangue e gar chocolate. Naso, orofaringe e tonsilas: coletar com
"swab" estril e semear imediatamente em gar sangue e gar chocolate.
FRAGMENTO DE TECIDO: coletado por desbridamento, por bipsia ou por
pea cirrgica meio de cultura realizado na embalagem formadora de
anaerobiose. GENITAIS FEMININOS: Lquido amnitico: aspirar com
seringa
e
agulha
e
inocular
em
meio
para
anaerbios.
Secreo de Glndula de Bartholin: aspirar o fluido com seringa e agulha
e
inocular
em
meio
para
anaerbios.
Cervix: introduzir espculo vaginal procedendo como para coleta de
Papanicolau; com uma gaze limpar o muco ou secreo superficial do colo do
tero e depois coletar com um "swab" material do canal cervical e inclu-lo
em meio de transporte de Stuart ou similar.
Fundo de saco vaginal e endomtrio: aspirar o material e inclu-lo em
meio para anaerbios.
Secreo Vaginal: limpar o excesso de secreo e coletar dois "swabs".
Um dever ser colocado em meio de transporte de Stuart ou similar e com o
outro fazer esfregaos em lmina para pesquisa de Gardnerella vaginalis.
GENITAIS MASCULINOS: Prstata: coletar como descrito no ttulo "Cultura
seriada de Stamey". Uretra: coletar com "swab" urogenital especial de
Dacron. Introduzi-lo 2 a 4 cm na uretra distal e gir-lo 5 vezes no sentido
horrio, colocando-o, em seguida, em meio de Stuart.

8-PROCEDIMENTOS GERAIS
Placas: esgotar o material do swab em um ponto da placa e com a ala
comum de nquel-cromo flambada e fria, realizar a semeadura com estrias
para isolamento a partir do ponto de aplicao da amostra (semeadura
direta) (Fig 1 a 4);
Caldos: passar o swab no tubo com o meio de Selenito de Sdio e esgotar
o algodo molhado nas paredes internas do tubo (Fig 5);
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8.1-MATERIAL DE PROCEDIMENTO
Placas: com a ala comum de nquel-cromo flambada e fria, retirar uma
pequena amostra e esgotar em um ponto da placa para depois realizar a
semeadura com estrias para isolamento (semeadura direta) (Fig 1 a 4);
Caldos: com a ala comum de nquel-cromo flambada e fria, retirar uma
pequena amostra e esgotar no tubo com o meio de Selenito de Sdio (Fig
5);

Fig 1

Fig 2

Fig 3

Fig 4

Fig 5

1. Incubar as placas e tubos semeados por 18 24 horas 35 37C;

2. Ao final do trabalho: flambar as alas, deixar esfriar e guardar. Limpar
a bancada com hipoclorito e lcool 70%;
3. O mtodo indicado para transporte de amostras aspiradas o meio de
cultura slido pr-reduzido.
4. Aps semeado o meio de cultura colocar na:
- Jarra contendo vela; ou
- Embalagem formadora de CO2; ou
- Jarra de anaerobiase; ou
- Cmara de anaerobiose;
5. os meios mais utilizados para cultura de anaerbios so:
- Agar Sangue
- Agar Chocolate
-Agar Thayer martin
- Caldo BHI

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9-Bactrias anaerbias e infeces associadas representativas

1. Abscessos no crebro
-Peptostreptococos, Fusobacterium nucleatum e outros
2. Infeces de orofaringe
-Anaerbios de orofaringe; Actinomyces, Prevotella melaninogenica, espcies de
Fusobacterium
3. Infeces de pleura e pulmes
-Peptostreptococos, espcies de Fusobacterium, Prevotella melaninogenica,
Bacteroides fragilis em 20 a 25% dos casos e outros
4. Infeces intra-abdominais
-Abscesso de fgado: anaerbios
microrganismos facultativos
-Abscessos abdominais:
gastrintestinal

mistos

Bacteroides

em

fragilis

40
e

90%

outros

da

dos

casos,

microbiota

5. Infeces do trato genital feminino

-Abscessos vulvares: Peptostreptococos e outros
-Abscessos plvicos e tubos ovarianos: Prevotella bivia e P. disiens,
peptostreptococos, outros
6. Pele, tecidos moles e infeces de medula
-Microbiota anaerbica mista; Propionibacterium acnes
7. Bacteriemia
-Bacteroides fragilis; peptostreptococos; Propionibacterium; Fusobacterium;
Clostridium e outros
8. Endocardite
-Bacteroides fragilis; Actinomyces

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10-TEMPO DE TRANSPORTE X VOLUME DE AMOSTRA E/OU MTODO

COLETADO
Amostras

Tempo
timo
laboratrio

para

transporte

ao

Aspirados:
-inferior a 1ml

15 min- temperatura ambiente

-superior a 1ml

30 min- tempertura ambiente

Meio de transporte anaerbio

2 horas temperatura ambiente

Tecido ou material de bipsia:

30 minutos temperatura ambiente

-recipiente estril
-meio
de
anaerbica

transporte

ou

bolsa 2 horas temperatura ambiente

Swabs anaerbios
- em tubo com atmosfera anaerbica

1 hora temperatura ambiente

-em meio de transporte anaerbio

2 horas temperatura ambiente

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11 REFERNCIAS BIBLIOGRAFICAS
- Manual da Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria- Procedimentos
laboratoriais: da Requisio do Exame Anlise Microbiolgica Mdulo III
- Diagnstico da Amrica de analises clnicas de microbiologia Cultura para
anaerbios - 2006
12 ANEXOS
NO POSSUI