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MICROBIOLOGIA VETERINARIA 1 PROVA

Abiognese: origem espontnea atravs de matria orgnica ou


inorgnica.
Biognese: um ser vivo s se origina de outro ser vivo.
Needham x Spallanzani: fizeram experincia com frascos com carne
abertos e lacrados. S o aberto deu larvas/microorganismos, portanto
concluram que o ar era a fora vital (ainda teoria da gerao espontnea de
vida).
Pasteur: aceitao da biognese. Fermentao da beterraba e do vinho
(pasteurizao).
Lister: cido fnico (fundamentos da assepsia em processos cirrgicos).
Henle: doenas infecciosas causadas por organismos vivos.
Koch: microbiologia mdica / isolamento de colnias bacterianas individuais
em meio slido.
Ivanosvki: espremia e fazia caldo com folha de tabaco e passava por um
filtro: os que passavam = microorganismos filtrados (futuramente chamados
de vrus).
Fleming: Descobrimento da penicilina.
Venter: 1995 descoberta do genoma completo.
Teoria microbiana doena - Postul. de Koch x patgenos
os organismos devem ser isolados regularmente em caso de doena
devem crescer in vitro como culturas puras
tal cultura deve produzir a doena tpica quando inoculada em
animais susceptveis
o mesmo organismo deve ser isolado da doena induzida
experimentalmente
*falhas do postulados:
Ricketissiales no crescem em meios artificiais
enfermidades causadas por sinergismo de microrganismos como
podermatite
um mesmo microrganismo pode causar diferentes enfermidades.
Diferenas entre vivo e inanimado:
Vivo
Inanimado
Molculas complexas de C, N, O, H,
Mistura de compostos qumicos.
P e S unidas covalentemente.
Utilizam energia (extrai/transforma)
Degenerao no sentido do
energia do meio ambiente.
equilbrio com o meio ambiente.
Auto replicao e auto montagem
No ocorre

- Os vrus ficam no meio disso, no sendo considerados vivos, mas sim


cadeias de nucleotdeos com capacidade de replicao.
- Tem ainda os prons, protenas capazes de induzir outras protenas (alterar
metabolismo de outras clulas), mas que no pode ser considerada como
vrus.
Tringulo epidemiolgico
HOSPEDEIRO

AGENTE
AMBIENTE
- O rompimento desse equilbrio causa doena.
- O conceito de patgeno varia com o hospedeiro e com o rompimento do
equilbrio. Por exemplo, em cirurgias qualquer microorganismo patgeno,
pois vai estar no lugar errado.
CLASSIFICAO DOS ORGANISMOS VIVOS
Cepas: descendentes de uma nica colnia em cultura pura.
Vrus: funcionalmente no vivos, somente acido nuclico. Parasitos
intracelulares obrigatrios, utilizam a maquinaria celular do
hospedeiro.
Classificao atual:
presena ou ausncia de membrana nuclear (eucariontes TEM e
Procariontes NO TEM)
anlise do RNA ribossmico 16 S que diferencia claramente os
ancestrais comuns
concentrao de G + C ( figura 2.1 e 2.5 do Pelczar, transparncia
Lenninger )
CLULA PROCARITICA
Arqueobacterias, eubacterias
Geralmente com menos de 5 micro
m de comprimento
Membrana limitante de organelas
ausente
Ribossomos 70S

Acido nuclico ocorre como

CLULA EUCARITICA plantas,


algas, fungos, protozorios,
animais.
Geralmente com mais de 10 micro
m de dimetro
Membrana limitante de organelas
presentes
Ribossomos 80S no citoplasma e
70S nas mitocndrias e nos
cloroplastos
Acido nuclico distribudo em

molcula nica, frequentemente


circular
Membrana nuclear e nuclolos
ausentes
Replicao por fisso binria

cromossomos
Membrana nuclear e nuclolos
presentes
Replicao

EUBACTRIAS: so o maior grupo, com todos os procariotos de importncia


na medicina. Habitat: o solo, superfcie das guas e tecidos de outros
organismos (vivos ou em decomposio). Algumas espcies so
fotossintticas. Nenhuma espcie produz metano.
ARQUEOBACTERIAS: menor grupo, com pequeno nmero de espcies que
habitam em ambientes de condies extremas. Nenhuma espcie de
importncia na medicina. Habitat ambientes em condies extremas:
halfilas (Mar Morto), termoacidfilas (60
a 80C, sulfobactrias) e metanognicas (pntanos, tubo digestivo de
insetos (cupins)
e herbvoros). Nenhuma espcie fotossinttica. Todas produtoras de
metano por reduo de CO2.
Definies e diferenciao de eucariontes e procariontes:
Hiptese da endossimbiose onde clulas TORNAM-SE eucariontes aps
fagocitarem
outras clula que passa a fazer atividade respiratria (cloroplasto em
vegetais,
mitocndria em animais).
Tcnicas microscpicas usados na microbiologia:
Microscopia ptica comum: permite apenas diferenciar os
diferentes tipos de bactrias, pela colorao.
Microscopia de contraste de fase: usada para exame de clulas
no coradas em suspenso.
Microscopia de campo escuro: deixa o campo escuro e reflete
apenas o microorganismo. Usado para bactrias como as
espiroquetas, que no se coram em suspenso.
Microscopia de fluorescncia: o anticorpo marcado localiza a
bactria e se liga a ela.
Microscopia eletrnica de transmisso: permite a visualizao de
vrus e identificao de detalhes ultra-estruturais em bactrias.
Microscopia eletrnica de varredura: estrutura tridimensional dos
microorganismos (inclusive vrus).

BACTRIAS
Organismos mais abundantes e diversificados;
Participam de ciclos de reciclagem de elementos;
Fazem a degradao de matria orgnica;
So base da cadeia alimentar no solo e na gua;
Produo de O2;

Fixao de N2;
So sempre os primeiros colonizadores de um ambiente,
Apresentam interaes intimas com outros microorganismos.

As bactrias e o homem

origem de mitocndrias;
constituintes da microbiota do corpo humano;
produo de alimentos e produtos de interesse industrial;
produo de inseticidas naturais;
aplicao na agricultura;
produtores de antibiticos. vacinas e medicamentos diversos;
degradao de compostos txicos no ambiente (bioremediao);
instrumento para o advento da biologia molecular e descobertas
subseqentes;
apodrecimento de alimentos;
agentes causadores de doenas infecciosas.
Microbioma: individual
Microbiota: ecossistema

- A maioria das bactrias podem crescer em meios apropriados inertes


(algumas requerem suplementos especiais e condies atmosfricas
prprias para o crescimento).
- Riqutsias e clamdias so incapazes de se multiplicar em meios inertes,
requerem clulas vivas para seu crescimento in vitro.
- O inicio da vida provavelmente passou pela formao de membrana
lipdica que envolveu molculas hidrossolveis em grande concentrao,
iniciando uma longa jornada onde um ser vivo jamais est em equilbrio com
o meio ambiente, apenas quando morre.
Principais tipos morfolgicos:
Esfrico (coco) diplococos, estreptococos (colar), estafilococos
(cacho de uva), ttrades, sarcinas (amontoado).
Bacilos diplobacilos, estreptobacilos ou filamentosas.
Vibries.
Espirilos
Espiroquetas
ESTRUTURA DAS CELULAS BACTERIANAS
Cpsula: a maioria composta por polissacardeos, algumas so de
polipeptdio (alguns Bacillus). A funo da cpsula proteger a
bactria contra condies ambientais adversas. No organismo do
hospedeiro, a cpsula de bactrias patognicas podem facilitar a
aderncia a superfcies, interferindo na fagocitose.

Parede celular: protege a bactria contra danos mecnicos e lise


osmtica. O peptidioglicano proporciona rigidez parede celular. Os
micoplasmas no possuem parede.

1. Bactrias Gram positivas: se coram de azul, tem uma parede


relativamente espessa e uniforme. Composta de
peptidioglicanos e cidos teicicos.
2. Bactrias Gram negativas: se coram de vermelho, tem parede
celular com estrutura mais complexa, tendo uma membrana
externa e um espao periplasmico. A membrana externa uma
bicamada lipdica assimtrica contendo protena. A parte
interna da membrana se assemelha a membrana celular, e a
superfcie externa tem lipopolissacardeos. A membrana
externa possui porinas pelas quais passam substancias de
baixo peso molecular, como aucares e aminocidos. Por conta
de sua composio, a membrana externa exclui molculas
hidrofbicas e confere a bactrias gram-negativas resistncia a
alguns detergentes que so letais para gram-positivas.

Membrana celular: so estruturas flexveis compostas de


fosfolipdios e protenas. Diferentes das clulas eucariticas no
contem esteris (com exceo do micoplasma). As faces internas e
externas da membrana so hidroflicas, enquanto o interior
hidrofbico. Um nmero pequeno de molculas passa pela clula
bacteriana por difuso passiva (gua, oxignio, dixido de carbono e
alguns compostos lipossolveis). Tem funo de transporte ativo de
nutrientes para o interior da clula e a eliminao de catablitos
com gasto de energia. Essa energia proveniente da adenosina
trifosfato. Tambm local de transporte de eltrons para a respirao
bacteriana. Muitos desinfetantes agem nessas membranas

Citoplasma: fluido aquoso contendo material nuclear, ribossomos,


nutrientes, enzimas e outras molculas envolvidas em sntese,
manuteno celular e metabolismo. Pode possuir tambm grnulos
de reserva.

Ribossomos: responsvel pela sntese protica.consiste em duas


subunidades: a 50S (maior) e a 30S (menor).

Material nuclear: genoma bacteriano com um nico cromossomo


circular, haplide, contendo DNA de fita dupla. Associados, temos
tambm pequena quantidade de protenas e RNA. Os plasmdeos
pequenos fragmentos de DNA circular separado do genoma so
capazes de replicao autnoma. Vrios plasmdeos diferentes podem
estar presentes em clulas bacterianas individuais. Copias de
plasmdeos podem ser transferidos de clula pra clula durante a
fisso binria ou a conjugao. O DNA do plasmdeo pode codificar
caractersticas como resistncia a antibiticos e produo de
exotoxinas.

Flagelos: as bactrias que possuem so mveis. Muitas gramnegativas tem e raramente esto presentes em cocos. So
geralmente mais longos que a bactera e compostos por uma protena
chamada flagelina. Consistem em: filamento, gancho e corpo basal.
Pili (ou fmbrias): apndices finos e retos. Constitudos de protena
pilina e presos na parede celular de varias bactrias. So mais
comuns em bactrias gram-negativas (pilus F clulas-macho). Em
bactrias patognicas funciona como adesina para receptores de
clulas de mamferos.
Endsporos: corpos dormentes altamente resistentes. So formados
por algumas bactrias como forma de garantir a sobrevivncia em
condies adversas. A resistncia desses endsporos se d por sua
estrutura em camadas, a seu estado desidratado, baixa atividade
metablica e a seu alto contedo de cido dipicolnico. Tem alto
contedo de clcio, portanto, em solos ricos em clcio sua
sobrevivncia melhor. J em solos pobres em clcio, o solo pode
puxar o clcio do endsporo, o que diminui o tempo de sobrevivncia.
Somente podem ser destrudos em temperatura de 121C por 15
minutos. Quando os endsporos so reativados, ocorre germinao
em 3 estagios: ativao, iniciao e crescimento.

Gram positiva x gram negativa


Negativas: membrana citoplasmtica, espao periplasmatico,
peptideoglicano, membrana externa, flagelos, fimbrias e cpsula.
Positivas: no tem espao periplasmatico nem membrana externa.
- A pencilina age diretamente sobre a parede da bactria, atinge o
citoplasma, interferindo a sntese da nova parede.
- Tcnicas de colorao simples, diferenciais ou especiais:
Simples, por exemplo o azul de metileno, que cora todo mundo na
mesma tonalidade, individualizando microorganismos quanto a sua
estrutura externa. Para fungos o azul de metileno interessante, j
que individualiza estruturas.
A colorao de gram uma colorao diferencial. As gram positivas
se coram de azul e as negativas se coram de vermelho.
- Gram negativas e sua camada externa: sua parede composta por
lipopolissacarideos. Esses LPS possuem como representante de
polissacardeo: glicose, galactose, no sendo um nico carboidrato. Alem
dos polissacardeos temos o lipdeo A um acido graxo saturado imerso na
membrana externa, agindo como endotoxina causadora de febre, diarria e
hemlise. J o antgeno O um polissacardeo que ultrapassa a membrana
extera como se fosse um pelo, tendo importante funo antignica. Essa
membrana externa, sendo uma bicamada de fosfolipideo, possui uma face
apolar para seu lado interno, sendo ento, uma barreira hidrofbica e
macromolculas como sais biliares e enzimas. Possui ainda uma parte polar
para o ado externo em contato com o meio externo e o espao

periplasmtico. Obviamente que a passagem de substancias nutritivas


feita pelas porinas, alem disso ainda existem alguns outros receptores para
bacterifagos e bacteriocinas.

GENTICA BACTERIANA
- haplides com cromossomo circular composto de dupla fita de DNA.
REPLICAO DO DNA BACTERIANO
- Fisso binria: clulas filhas geneticamente idnticas.
- Replicao semiconservativa.
TRANSCRIO E TRADUO
A enzima RNA-polimerase DNA dependente se liga a regio promotora
(seqncia especial de nucleotdeos). As duas fitas de DNA so separadas e
uma fita de RNAm complementar sintetizada. Cessa quando a enzima
alcana a regio terminadora do gene. A informao codificada no RNAm
traduzida em protena o ribossomo com envolvimento do RNAt. Cada
molcula de RNAt tem uma trinca de trs bases, o anticdon, que
complementar ao cdon do RNAm. Cada trinca de RNAt transporta um
aminocido especifico para o RNAm, e esses aminocidos se ligam
formando uma cadeia polipeptdica. A sntese para quando um Cod sem
sentido encontrado pelo ribossomo.
PLASMDEOS
- Pequenos elementos genticos.
- Localizados no citoplasma.
- Replicam-se independentemente, podendo utilizar enzimas celulares NO
EST DIRETAMENTE LIGADO MULTIPLICAO BACTERIANA.
- Podem codificar fatores de virulncia e de resistncia a antibiticos.
BACTERIFAGOS
- Vrus que infectam bactrias.
- Possuem DNA ou RNA, podendo realizar ao ltica bacteriana para
(prognese) de novos fagos. Ou eles podem ser temperados (fagos
temperados) e no causam lise bacteriana, sendo ento incorporado ao
DNA bacteriano ou mais raramente formando um DNA circular no
citoplasma.
- A especificidade do fago est relacionada entre afinidade qumica de
estruturas de ligao do fago e receptores especficos bacterianos. Um fago
no infecta qualquer clula, assim como os vrus, que tem uma preferncia
por alguma clula. A produo de neurotoxinas por certos tipos de
Clostridium botulinum est associada a presena de fagos nesses clostrdios
(se voc retirar o fago, o Clostridium pode no produzir a toxina).
- Ciclo ltico geralmente realizado de forma virulenta com lise de bactrias.
J no lisognio ou de fago temperado, h integrao do fago com o genoma
bacteriano, sendo passado ao longo das geraes, fazendo com que seja
expressa uma toxina diferente.

Mecanismos para a variao gentica


Geralmente implica na alterao de sequencias de cidos nuclicos,
ou seja, no gentipo, que pode expressar alteraes de fentipo. As
alteraes do gentipo podem ser por mutao ou por recombinao.
- MUTAO: geralmente envolve a alterao do genoma de um mesmo ser,
com alterao na sequencia de nucleotdeos de um gene podendo ou no
resultar em alteraes do fentipo.

-TIPOS DE MUTAO:
Substituies pontuais de pares de bases
Mudana da fase de leitura (frame shift), por micro inseres ou delees de
pares de bases
Delees mltiplas de pares (o que pode inviabilizar um gene, pois no
mais pontual)
Inseres durante a recombinao (quando voc tem recombinao,
podemos ter insero)
Inverses e translocaes de segmentos do DNA (transposons e operons)
um segmento do sna sai de uma parte do DNA e se liga em outro ponto.
-RECOMBINAO: Quando sequencias de DNA de duplas fitas tem origem de
duas fontes diferentes e ocorre uma integrao entre essas duas duplasfitas, resultando em conjugao, transduo ou transformao.
- Conjugao: transferncia de material gentico cromossmico ou de
plasmideo, atravs de pilus F.
- Transduo: feita por bacterifagos transdutores que acabam
levando clula infectada fragmentos de cidos nuclicos de outra clula.
- Transformao: geralmente d-se ela absoro de fragmentos de
DNA em suspenso, mais comumente por mtodos artificiais como choque
trmico, ou eltrico.
-OPERON: conjunto de genes na sequencia do cromossomo que codifica
enzimas de uma mesma via metablica (em certos casos so alvos de ao
de antibiticos).
-TRANSPOSONS: chamados de genes saltadores, movem-se de um lugar
para outro no genoma. Esses genes fazem translocaes podendo ocasionar
mutaes e at mesmo acabar integrando DNA plasmideal. Ocorre somente
quando na replicao bacteriana ou plasmideal. A insero de um
transposon em um gene essencial para a asobrevivencia bascteriana pode
resultar em morte da mesma.
-INTEGRONS: so genes de integrases (enzimas) para exciso ou insero
de outros genes. Ento, um dos exemplos disso a resistncia a antibiticos
de algumas bactrias pode ocorrer pela ao de integrons (bem como
outras alteraes bioqumicas podem ocorrer pela ao do mesmo).
ANTIBIOTICOS X MICROORGANISMOS
- Podem ter ao bactericida ou bacteriosttica.

- Classificao de acordo com a estrutura e mecanismo de ao:


-lactmicos: so inibidores da sntese de peptdeoglicanos da
parede celular bacteriana, ou ativam enzimas da prpria bactria que
destroem a parede por ligao a receptores celulares conhecidos
como protenas de ligao penicilina. Existem bactrias produtoras
de uma enzima chamada beta-lactamases (codificadas por
plasmideos em estafilococos ou no prprio cromossomo bacteriano no
caso das gram negativas), que cliva o anel beta-lactmico. EX:
penicilina, cefaloporias, vancomicina e etc.
Grupos que atuam na inibio de funes da membrana
plasmtica: so geralmente polipeptideos que ocasionam a morte
celular por alteraes na permeabilidade da membrana, quanto a sua
funcionalidade, com perda de ons e macromolculas. EX: bacitracina
(txica para a membrana do hospedeiro, uso apenas tpico assim
como a maioria dos antibiticos que agem na membrana), polimixina
B, colistina.
Grupo que atua inibindo ou alterando a sntese protica:
- DE FORMA REVERSIVEL SOBRE O RIBOSSOMA:
1. Tetraciclina: produz compostos quelantes que captam metais
vitais para a reao enzimtica bacteriana, e ligam-se a 30S
bloqueando a unio da molcula de RNAtransportador ao seus
stios receptores.
2. Cloranfenicol (proibido), tianfenicol, florfenicol: ligam-se
a parcela 50S.
3. Macroldeos: ao primariamente bacteriosttica, ligando-se
a unidade 50S e alguns deles eram/so utilizados em rao
aimal. Ex: tiamulina, espiramicida, alicomicina e eritromicina.
-DE FORMA IRREVERSIVEL AO RIBOSSOMA: aminoglicosideos:
estreptomicina, neomicina, gentomicina, canamicina, micacina e
trombamicina.
Grupos que atuam sobre cidos nuclicos:
o Quinilonas: atuam sobre a DNA girase.
o Rifamicina: inibe a RNA polimerase DNA dependente.
o Metronidazolis: usado principalmente para anaerbios,
cirurgias entricas (apendicite). Ele cliva a fita de DNA.
o Sulfonamidas: atuam sobre a sntese protica do acido flico. O
acido para-aminobenzonico (PABA) precursor da coenzima
acido tetrahidrofolico necessaria para a sntese de aminocidos
e timidina, essencial para a sntese de DNA. Atuam de forma
que as sulfas se assemelham ao PABA, atuando por competio
dentro de bactrias, que utilizam esta via, inviabilizando a
sntese de aminocidos e timidina (que participa da sntese de
cidos nuclicos). Em outras clulas, como a clula humana,
procarionte e outros microorganismos, o PABA pode ser obtido
a partir do acido flico de alimentos.
o Trimetropim: classicamente associado as sulfas. Bactrim: sulfa
+trimetropim. Anlogo da pitiridina do acido dihidrofolico

bacteriano (todos eles cooperam para a formao de cidos


nuclicos).
o Nitrofuranos: furacin, usado para cistite. Causam leso no DNA.
Ex: nidrofurazona, furazolidona, furalpradona.
-no se usam drogas de uso humano para leishmaniose por conflito.
Resistncia bacteriana aos antibiticos:
-Resistncia natural: no suscetveis ao frmaco por sua fisiologia ou sua
morfologia.por exemplo, a penicilina age sobre a parede, e o micoplasma,
no tem parede.
-Resistncia adquirida:
Alterao da molcula alvo por alterao cromossmica
Alterao no transporte de antibiticos atravs da membrana celular.
Ex: tetraciclinas, que so impedidas de penetrar devido a informao
transmitida por plasmideos.
Inativao do antibitico diretamente por plasmideos do citoplasma
bacteriano modificando a droga por acetilao e fosforotransferases.
Ex: aminoglicosdeos.
Utilizao de via metablica alternativa, induzida por plasmideos. Ex:
sulfas e trimetropinas.
Reduo de exigncias de nutrientes ou substancias para o
metabolismo bacteriano.
- Mecanismos genticos de formao de resistncia:
Mecanismos de origem cromossmica: resultado da alterao casual
ou espordica na sequencia de bases do DNA, geralmente no
induzida pelo frmaco. Entretanto, exercem presso de seleo (s as
que tiverem essa alterao que subexistem). pouco freqente e
geralmente a um nico frmaco.
Mecanismos de origem extracromossomica:
o Transformao: por absoro do DNA de um doador com
sequencias que induzam resistncia, geralmente para grampositivas.
o Transduo: transferncia de DNA cromossmico ou plasmdeo,
atravs de bacterifagos, tanto para gram positivas como
negativas, no sendo geralmente de multi resistncia.
o Conjugao: codificada por plasmideos e transferida pelos
chamados fatores R (de resistncia), exigindo a existncia de
pili de conjugao ou sexual. Sendo a prpria pili tambm
transmitida por plasmideos. multiresistente (geralmente a
todo um grupo de antibiticos).