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Cultivo de microrganismos
Disciplina: Microbiologia Geral
1) Inoculao
2) Isolamento
CULTIVO DE MICRORGANISMOS
EM LABORATRIO
3) Preservao
Inoculao
Isolamento
Consiste na obteno da sua cultura pura;
essencial para se ter o microrganismo disponvel
para estudos de morfologia, taxonomia, reproduo
e fisiologia.
(A)
(B)
27/11/2013
ISOLAMENTO DE MICRORGANISMOS
IMPORTNCIA
Diversidade de microrganismos
ISOLAMENTO DE MICRORGANISMOS
-Importante: conhecimento prvio da
necessidades nutricionais do microrganismo
ecologia
Procedimentos:
a.) Flambar a ala;
b.) remover o tampo de algodo;
c.) introduzir a ala na cultura de bactria;
Procedimentos:
d.) Mergulha a ala na cultura de bactria;
e.) Flamba a boca do tubo;
f.) Introduzir a ala no tubo contendo meio de cultura;
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Condies de incubao
- Sucesso do isolamento depende das condies de incubao
(temperatura, luminosidade e umidade);
- Temperatura: entre 20-25C favorece a maioria dos fungos
fitopatognicos; TC tima varia com a espcie envolvida;
MTODOS DE ISOLAMENTO DE
MICRORGANISMOS
-Cmara mida para induo da esporulao;
-Isolamento de microrganismos do ar;
-Isolamento de microrganismos do solo;
-Isolamento direto;
-Isolamento monosprico;
-Isolamento de tecidos e rgos de plantas
infectadas;
Isolamento de microrganismos do
ar (anemfilos)
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Tcnica da semeadura
A escolha da tcnica de cultivo de
microrganismos varia de acordo com o tipo de
meio de cultura e a finalidade do cultivo
Tcnica de semeadura em meio lquido
Colnia bacteriana
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Importncia
Preservao
-Manuteno de uma coleo de microrganismos
-Permite que a pesquisa cientfica possa ser
realizada em qualquer poca do ano
-Armazenamento da cultura por longos perodos e
utilizao peridica
-Garantia da sobrevivncia, estabilidade e pureza
Evitar Contaminao
Perda de viabilidade
Mutao (perda das caractersticas fisiolgicas)
Mtodo adequado para um microrganismo pode no ser
adequado para outro;
Meios usados para um grande nmero de fungos (BDA,
malte-gar, V8-gar, aveia-gar, Czapeck, cenoura
gar).
MTODOS DE PRESERVAO DE
MICRORGANISMOS
Curto prazo
repique contnuo
Mdio prazo
Longo prazo
Liofilizao
Congelamento a -70C
Criopreservao em nitrognio lquido
27/11/2013
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Geladeira
Preservao em gua
Vantagens
- boa taxa de viabilidade
- evita contaminao por
caros
Desvantagens
- dificuldade da retirada
dos cubos na reativao
(Castellani)
- requer espao p/
armazenamento
- riscos de contaminao
armazenamento em geladeira
Vantagens
Permitir longos perodos de preservao (ao redor de 5 ou mais anos);
Modificaes morfolgicas ou fisiolgicas so reduzidas ou praticamente
eliminadas;
Obteno de inculo por longos perodos, repicando-se pequenas pores
de solo quando se necessita reativar a cultura;
Manter a capacidade esporulao do fungo.
Desvantagens
Funciona apenas para um nmero reduzido de fungos (capacidade de
produzir esporos, ex. esclerdios, clamidsporos, microesclerdios, etc)
Dificuldade de se perceber contaminaes (so notadas quando se repica
o inculo para obteno de subculturas.
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Desvantagens
Processos:
precongelamento;
centrifugao-desidratao-congelamento e
desidratao a vcuo;
Tecnicamente mais complicado (habilidade e equipamento
dispendioso).
tipo de microrganismo
idade da cultura
agente crioprotetor
condies de estocagem
mtodo de descongelamento
desvantagens
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CONSIDERAES FINAIS
O trabalho com microrganismos:
-Identificao
-Diagnose
-Caracterizao
Conhecimento prvio de caractersticas
Leitura, referncias bibliogrficas, busca por
mais informaes
Adequao dos mtodos com a estrutura do
laboratrio