Deteco eletroqumica direta de um oligonucleotdeo especfico para

Staphylococcus aureus
Rafaela C. S. Peres1 (PR)*, Jos M. R. Flauzino 1 (PG), Joo M. Madurro 2 (PQ), Ana G. B.
Madurro1(PG).
* rsan.peres@gmail.com
LaboratriodeBiossensores,InstitutodeGenticaeBioqumica,,Bloco3OUniversidadeFederaldeUberlndia
CampusSantaMnicaAv.JooNavesdevila,2121BairroSantaMnicaUberlndiaMGCEP38400902.
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Laboratrio de Filmes Polimricos e Nanotecnologia Instituto de Qumica, Bloco 3O Universidade Federal de
UberlndiaCampusSantaMnicaAv.JooNavesdevila,2121BairroSantaMnicaUberlndiaMGCEP
38400902.
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Palavras Chave: Staphylococcus aureus, genossensor eletroqumico, biossensor.

Introduo
Staphylococcus aureus uma bactria gram
positiva, presente na microbiota natural humana e
de animais. Em situaes especficas pode causar
infeces graves e intoxicaes, pois de fcil
disseminao atravs das mos e apresenta
capacidade de adquirir resistncia a antibiticos,
sendo assim uma das bactrias mais virulentas 1.
Mtodos tradicionais de deteco desse patgeno
como o ensaio de imunoabsoro ligado a enzima
(ELISA) e a reao em cadeia de polimerase (PCR)
so de alto custo e elevado tempo de preparo 2. Os
genossensores apresentam vantagens sobre esses
mtodos tradicionais, pois detectam patgenos em
tempo real, so de baixo custo, apresentam maior
estabilidade, especificidade, sensibilidade, so
portteis e necessitam de pouco volume de
amostra3. O DNA apresenta atividade eletroqumica,
sendo possvel a obteno de bons resultados sem
a necessidade de utilizar indicadores ou
marcadores4. Dessa forma, esse trabalho teve
como objetivo a deteco direta de um
oligonucleotdeo especfico para S. aureus

Resultados e Discusso
Um oligonucleotdeo especfico para S. aureus foi
utilizado como sonda (5'-GCGATTGATGGTGAT
ACGGTT-3', 6,3 x 10-5 mol L-1), e sua fita
complementar como alvo (5'-AACCGTATCACC
ATCAATCGC-3', 1,8 x 10-4 mol L-1). Foi observada
uma diminuio significativa nos valores de
corrente de pico e de carga eltrica na regio de
potencial correspondente oxidao da base
nitrogenada adenina aps a incubao com o alvo
(Figura 1). A formao das ligaes de hidrognio
da dupla hlice dificulta a oxidao dos resduos de
bases
nitrogenadas
presentes
nos
oligonucleotdeos, promovendo uma diminuio dos
valores de corrente5, evidenciando assim que houve
a hibridizao e a deteco da fita de DNA
complementar.

Figura 1 Voltamogramas de pulso diferencial do

eletrodo de grafite em soluo de tampo fosfato
(0,1 mol L-1). Em () apenas com a sonda, (
) aps a incubao com o alvo. No grfico de
barras inserido est representada a carga eltrica
resultante do processo de oxidao. Intervalo de
pulso = 0,2 s, v = 20 mV.s-1.

Concluses
Os resultados obtidos indicam a aplicabilidade
deste novo bioeletrodo para a deteco de S.
aureus, visando o futuro desenvolvimento de
biossensores.

Agradecimentos
Os autores agradecem a FAPEMIG, CAPES e
CNPQ pelo apoio financeiro.
____________________
Lopes, V. K. et al. J. bras. Med. 2014, 4, 102.
So, H. M. et al. Small. 2008, 4, 197.
Sun, Y. et al. Talanta. 2015,141,300.

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UNIVERSIDADE FEDERAL DE
UBERLNDIA

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Peng, H. et al. Biomaterials. 2009, 30, 2132.

Oliveira-Brett, A. M. et al, Anal Biochem, 2004 332, 321-329.

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