Dogma Central da Biologia Molecular

Replicao
Duplica todo o
material gentico
Objetivo duplicar
para depois haver a
diviso celular

Transcrio
Transcreve para RNA
apenas genes
especficos

Objetivo transcrever
os genes necessrios
para o funcionamento
da clula

Quantos genes temos?

30.000 genes

Transcrio em momentos especficos

Como ocorre a transcrio

Transcrio do DNA

Genes especficos
Procariotos
DN
A

E. coli
+1

-35

Gene

+ 10

-10

Regio promotora
Ocorre antes do gene
Sequncia de nucleotdeos reconhecidos pela RNA polimerase

-35 3-AACTGT5
-10 3-ATATTA5

Sequncias de
consenso

Transcrio do DNA - Procariotos

Iniciao

RNA polimerase

Subunidades 2
Fator

RNA polimerase 2'

Holoenzima
Verso de uma enzima

Transcrio do DNA - Procariotos

Iniciao

RNA polimerase

Subunidades 2

Fator

Fator

Reconhece os promotores
Posiciona a RNA polimerase

+1

-35

-10

5
Gene

DN
Fator reconhece os stios -35Ano DNA

Transcrio do DNA - Procariotos

A transcrio vai ser iniciada em um local aleatrio...

Transcrio do DNA - Procariotos

Iniciao
RNA polimerase + DNA
Complexo promotor fechado

Bolha de
transcri
o
18 pb

Complexo promotor aberto

Quebra da dupla fita de DNA na
posio -10

Apenas um filamento de DNA usado como molde por vez

Transcrio do DNA - Procariotos

Iniciao

Bolha de
transcri
o
5
3 18 pb

Fator se solta do stio 35

RNA
polimerase
L a fita molde de
DNA no sentido 3- 5

Por que no precisa de

primer????

Faz insero dos

primeiros 8
ribonucleotdeos
(A, C, U, G) na nova
molcula de RNA

Transcrio do DNA - Procariotos

Iniciao

5
3

Depois de 8 nucleotdeos
inseridos na nova fita de
RNA
Fator se solta da RNA
polimerase

5
Cerne da enzima

Elongamento

Cerne da
RNA polimerase

Transcrio do DNA - Procariotos

Migra pela fita molde

de DNA (sentido 35)

Desenrola a dupla hlice

Insere ribonucleotdeos na
extremidade 3da nova
molcula de RNA
Ligao fosfodister liga os
ribonucleotdeos
Nova molcula de RNA
cresce no sentido 5- 3

RNA se solta do DNA

Dupla fita de DNA

recuperada

Transcrio do DNA - Procariotos

Elongamento
Rifampina, rifamicina, rifampicina

Atuam na RNA
polimerase
E. coli

50
nucleotdeos/se
gundo
a 37 o C

Energia
Energia

Ribonucleosdeos
trifosfatados

Ribonucleosdeos
monofosfatados

Leitura: 3- 5
Sntese: 5- 3

Como acaba a transcrio dos genes nos procariotos?

Como acaba a transcrio do gene nos procariotos?

DN
A

-35

Gene

-10
Trmino
Ocorre aps o gene

Finalizadores
independentes de R

Finalizadores
dependentes de R

Transcrio do DNA - Procariotos

Trmino Independente de R

DNA 3-5(aaaa
)

Regio rica em C-G

Estrutura em
grampo

GCCGCCA
G
CGGCGGU
C

RNA 5-3
Gene GCCGCCAGUUCCGCUGGCGGCAUU
UU

Sequncia palindrmica +
5 a 10 As no DNA

UUUUU
3

Sequncias espelhadas
Haste-ala no RNA
Cauda A tem fraca
ligao com os U do
RNA
Solta o RNA

Transcrio do DNA - Procariotos

Trmino Finalizador dependente de r

3
5

5
GGGG

5
Protena
5-CCCCCCAUUCCCCUCCCCCCC
r

DNA 3-5: Sequncia rica em

G
RNA 5-3: Sequncia rica em C
Protena r
Solta o RNA

Propriedades do RNA

RNA

DNA

Sempre lido no
sentido 3-5

Transcrito

RNA

Sequncia do RNA
transcrito quase igual
do filamento de DNA no
molde
Quase igual?

Propriedades do RNA
RNA

DNA

Transcrito

RNA

No RNA no existe Timina, existe Uracila

O acar do RNA a Ribose e no a Desoxirribose
O RNA fita simples (ele se desliga do DNA aps a transcrio)

RNA

Sempre fita simples????

Nucleotdeos do RNA podem se parear entre

si
Pontes de
H

Arcabouo de acarfosfato

Exemplo de RNAt

Exemplo de RNAr

Existe diferena na transcrio dos procariotos e eucariotos?

Principais diferenas na transcrio dos procariotos e eucariotos

No citoplasma
No ncleo

Tipo de RNA polimerase

Genes transcritos

RNA Polimerase

Transcreve todos os genes

RNA Polimerase I

Genes ribossomais
5,8S; 18S e 28S

RNA Polimerase II

Todos os genes codificados de protena, genes dos

pequenos RNAs nucleolares, genes dos micro RNAs

RNA Polimerase III

Genes do RNA transportador, DNA ribossomal 5S,

alguns genes dos pequenos RNAs nucleares, todos os
genes para RNA pequenos

Tipos de RNAs em eucariotos

Tipo de RNA

Funo

Mensageiro (RNAm)

Codifica protenas

Ribossomal (RNAr)

Forma a estrutura bsica dos ribossomos , que catalizam a

sntese de protenas

Transportador
(RNAt)

Adaptador entre RNAm e aminocidos no processo de

traduo

Pequenos RNAs
nucleares (RNAsn)

Atuam em vrios processos nucleares, incluindo o

processamento do RNAm

Pequenos RNAs
nucleolares
(RNAsno)

Atuam no processamento e modificaes qumicas dos

RNAr

Pequenos RNAs cajal

(RNAsca)

Usados na modificao dos RNAsno e RNAsn

Micro RNA (miRNA)

Regulam a expresso gnica bloqueando seletivamente a

traduo de RNAm

Pequenos RNAs de
interferncia (RNAsi)

Inativa a expresso gnica por degradao seletiva de

RNAm e pelo estabelecimento da heterocromatinizao

Outros RNAs no
codificantes

Atuam em diversos processos celulares, incluindo sntese

do telmero e inativao do cromossomo X

Mais enzimas e fatores de

transcrio envolvidos

Transcrio do DNA - Eucariotos

Iniciao RNA polimerase II
Tata boxe
ATATTTT

DNA

Incio da
+ transcrio
1

TATAAA
A

Regio promotora
Funo:
posicionar
a
maquinaria para incio da
transcrio

Elemento cis-atuante

Gene

Transcrio do DNA - Eucariotos

Iniciao RNA polimerase II

TFIIA
Tata boxe
DNA

A
TFIID

ATATTTT
TATAAA
A

Incio da
+ transcrio
1

TFIID reconhece o TATA box

Gene

TFIIA ajuda o TF IID

a se ligar ao DNA

Transcrio do DNA - Eucariotos

Iniciao RNA polimerase II

TFIIA

TFIIB
Tata boxe

DNA

A
TFIID

ATATTTT
TATAAA
A

Incio da
+ transcrio
1

Gene

TFIIB = posiciona a
RNA polimerase II no
stio de incio da
transcrio

Transcrio do DNA - Eucariotos

Iniciao RNA polimerase II

TFIIA

TFIIB
Tata boxe

DNA

A
TFIID

ATATTTT
TATAAA
A

Incio da
+ transcrio
1
Gene
E

TFIIF
TFIIE

TFIIF faz a
deselicoidizao
Regula a TFIIF

Transcrio do DNA - Eucariotos

Iniciao RNA polimerase II

TFIIA

TFIIB
Tata boxe

DNA

A
TFIID

ATATTTT
TATAAA
A

Incio da
+ transcrio
1
Gene
E

RNA polimerase II

TFIIF
TFIIE
RNA polimerase II

S transcreve na
presena do TATA box?

Transcrio do DNA - Eucariotos

Iniciao RNA polimerase II
Outros promotores da RNA polimerase II

Transcrio do DNA - Eucariotos

Elongamento
RNA polimerase
Mecanismo similar ao dos procariotos

Migra pelo DNA

Insere ribonucleotdeos na
extremidade 3da nova
molcula de RNA
Ligao fosfodister liga os
ribonucleotdeos
Nova molcula de RNA
cresce no sentido 5- 3
Dupla fita de DNA
recuperada

Transcrio do DNA - Eucariotos

Trmino dos genes transcritos pela RNA polimerase
II

Aps o gene
Sequncia
conservada
Gene

Sequncia rica em
GU

AAUAAAGUUACACUUUAAGUGUG
UGU

Sequncia conservada
AAUAAA
Sequncia rica em
GU

Transcrio do DNA - Eucariotos

Trmino dos genes transcritos pela RNA polimerase
II

Clivagem do RNA

Solta RNA
Sequncia
conservada
Gene

Sequncia rica em
GU

AAUAAA
GUUACACUUUAAGUGUGUGU
Clivagem do RNA por
endonuclease

Mas como a RNA polimerase II migra se o DNA pode estar associado a

histonas?

Transcrio do DNA - Eucariotos

Complexo FACT
(Facilitador de
transcrio da
cromatina)
Remove histonas H2A e
H2B dos nucleossomos

Vdeo

Recoloca as histonas
aps a transcrio do
fragmento

Eucariotos

Transcrio

Ncleo

Processamento
RNAm

Processamento do RNAm de
eucariotos
Extremidade 5 =
Revestimento Cap

Extremidade 3 =
Cauda poli A

Remoo de ntrons

Revestimento Cap

Adio de revestimento
de 7-metilguanosina na
extremidade 5 (Cap)

3
5

Protege o RNA da degradao

So reconhecidos por fatores

proticos durante a traduo

Cap = capuz,
bon, boina

Adio da cauda poli A

Aps clivagem
Poli A polimerase
Gene

AAUAAAAAAAAAAAAAAAAA
AAA

Enzima poli A
polimerase
Adiciona cauda poli A
(poliadenilao)

Estabilidade ao RNA
Auxiliam no transporte do
RNA para o citoplasma

E os outros RNAs?????
Tipo de RNA Genes transcritos
polimerase
I
III

Genes ribossomais
5,8S; 18S e 28S
Genes do RNA transportador, DNA ribossomal 5S,
alguns genes dos pequenos RNAs nucleares, todos os
genes para RNA pequenos

No apresentam capeamento e poliadenilao

Podem necessitar de remoo de ntrons

Sequncias no codificadoras
(ntrons)

RNA

RNA com ntrons

Precisam ser removidos

Remoo de ntrons

S RNAm tem cauda poli

A

Revestimento de 7metilguanosina
Gene
5

AAUAAAAAAAAAAAAAAAAA
AAA

PrRNAm

xon

ntron

xon

xon = Sequncia Expressa

ntron = Sequncia Intercalar

Remoo dos ntrons

Remoo dos ntrons

Depende de sequncias sinalizadoras

Sequncias de consenso nas junes xon-ntron

Transcrio do DNA - Eucariotos

Processamento do RNA

3 tipos de remoo de ntrons

Splicing

Spliceossomo
s
RNAs nucleares +
protenas

Nucleases e ligase
Autocataliticamente
enzimas
co-fator guanina

Ligaes qumicas transferncia de ligaes

Remoo de ntrons
Spliceossomo

Pequenos RNAs nucleares + protenas

Remoo de ntrons
Spliceossomo

Primeira transesterificao

Remoo de ntrons
Spliceossomo

Remoo de ntrons
Recomposio autocataltica co-fator guanina (transferncia de ligaes)

Remoo de ntrons
Nuclease e ligase

xon

ntron

Endonuclease de recomposio

Ligase de
recomposio

xon

Splicing alternativo

Splicing alternativo

Sumarizando

Transcrio do DNA - Eucariotos

Iniciao com muitos fatores

de transcrio

Elongao e adio da 7metil-guanosina em RNAm

Sumarizando

Transcrio do DNA - Eucariotos

Remoo dos ntrons

Adio da cauda poli A em

RNAm

E a cauda poli A?

Permanece ligada ao RNAm final

Facilita o transporte para o citoplasma

Exerccio

Complete o quadro seguinte, inclusive o sentido das fitas de DNA.

G
T
U G

T A
A

Fita de DNA sentido

T G A Fita de DNA sentido

mRNA transcrito

Referncias bibliogrficas

GRIFFITHS, A.J.F.; WESSLER, S.R.; LEWONTIN, R.C.; CARROLL, S.B. 2008. Introduo
Gentica. 9 Edio. Editora Guanabara Koogan S.A. Rio de Janeiro. 712 p.
SNUSTAD, D.P.; SIMMONS, M.J. 2008. Fundamentos da Gentica. 4 a Ed. Editora
Guanabara Koogan S.A. Rio de Janeiro. 903p.
KLUG, W.S.; CUMMINGS, M.R.; SPENCER, C.A.; PALLADINO, M.A. 2010. Conceitos de
gentica. 9a Edio. Editorea Artmed, Porto Alegre. 863 p.