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MICROSCOPIA

A microscopia tem a maior importncia no estudo das clulas. Muitas


caractersticas importantes de interesse nos sistemas biolgicos so
demasiado pequenas para serem vistas a olho nu, s podendo, portanto, ser
observadas com o microscpio.
Nos anos mais recentes, tem-se observado um grande desenvolvimento
em microscpios, corantes, protocolos de colorao e tcnicas de preparao
para ajudar a esclarecer melhor a estrutura e funo das clulas.
Descreveremos as capacidades e aplicaes das vrias tcnicas de
microscopia usadas para visualizar as clulas, as suas estruturas subcelulares
e ainda as suas molculas.
As estruturas celulares que necessitamos estudar tm dimenses que,
em regra, so invisveis vista desarmada. 1mm (milmetro) = 1 000 m
(micrmetro) = 1 000 000 nm (nanmetro) = 10 000 000 (Angstrom). O olho
humano s consegue formar imagens de objetos com dimenses superiores
a cerca de 0,2mm. Para observar objetos menores necessrio formar deles
uma imagem ampliada. Os microscpios so os aparelhos utilizados para
formar essas imagens.

RESOLUO E AMPLIAO

H um limite mnimo para a dimenso dos objetos que podem ser


observados com um determinado sistema ptico, limite esse que se denomina
resoluo do sistema. Por exemplo, a resoluo do olho humano de cerca de
0,2mm, e determinada pela estrutura celular da retina. A de um microscpio
ptico de 0,2mm e limitada pelo comprimento de onda da luz visvel. A
ampliao da imagem produzida pelo sistema ptico permite observar objetos
de dimenses inferiores a 0,2 mm (resoluo do olho humano), mas apenas
at ao limite de resoluo do sistema ptico. Objetos menores que este limite
no podem formar imagens, por maior que seja a ampliao utilizada.
A ampliao til a ampliao necessria para que a imagem do objeto
se torne visvel, ou seja, para que atinja dimenses iguais ou superiores ao
limite de resoluo do olho humano. Para conforto do observador, as imagens
so ampliadas at dimenses que tornam a sua observao confortvel. O
fator de ampliao adicional a ampliao vazia.

Exemplo: Para que um objeto no limite de resoluo do microscpio


ptico se torne visvel necessrio ampli-lo: 0,2mm / 0,2 m = 200 m / 0,2
m = 1000 x. Para uma observao confortvel, podemos ampli-lo at 1mm,
utilizando um fator de ampliao adicional de 1mm/0,2mm=5. V-se assim que
a ampliao til de um microscpio ptico no excede as 1000x.

TIPOS DE MICROSCPIO

O limite de resoluo de um microscpio depende do comprimento de


onda da radiao eletromagntica usada para formar a imagem e de
aberraes das lentes. Deste modo, pode-se melhorar a resoluo construindo
microscpios que utilizem radiaes de comprimento de onda menor que o da
luz visvel. A construo deste tipo de microscpios depende da capacidade de
produzir lentes para a radiao em causa. A radiao ultravioleta permite
algum ganho de resoluo, mas usada principalmente nos microscpios de
fluorescncia.
Os raios-X comeam a poder ser usados com lentes especiais, e raios-
gama no foram ainda usados por falta de dispositivos que possam funcionar
como lentes. Os raios catdicos (feixes de eltrons) utilizam eltrons
carregados e so usados nos microscpios eletrnicos. Nos microscpios mais
comuns, o feixe de radiao esttico e irradia simultaneamente toda a rea
observvel da amostra. Em outros aparelhos (microscpios de varredura), o
feixe possui dimenses muito reduzidas irradiando apenas um ponto da
amostra, e dotado de um movimento, irradiando em seqncia todos os
pontos do objeto (varredura). O microscpio ptico usa a luz visvel como
radiao eletromagntica.

Os componentes principais do microscpio ptico so:


Fonte luminosa:
Condensador
Diafragmas de campo e do condensador
Platina
Objetiva
Tubo
Oculares

MICROSCPIO PTICO FOTNICO COMUM

No microscpio ptico de transmisso a luz emitida pela fonte luminosa


e concentrada pelas lentes condensadoras, atravessa a amostra e penetra na
objetiva. A objetiva forma uma imagem real, ampliada, do objeto e as oculares
formam uma imagem virtual, tambm ampliada, da imagem real produzida pela
objetiva. A imagem virtual situa-se distncia de 25cm do olho do observador,
e a imagem que pode ser observada. A ampliao total o produto dos
fatores de ampliao da objetiva e das oculares, podendo existir outros
dispositivos no trajeto da luz que introduzam fatores multiplicativos adicionais.
O feixe luminoso que atravessa a amostra modificado por interaes
com esta, que consistem na absoro de certos comprimentos de onda
produzindo cor, difrao, refrao, reflexo, diferena de fase etc. Estas
interaes vo-se traduzir na produo de diferenas de cor ou de intensidade
luminosa na imagem do objeto, que podem ser percebidas pelo olho humano.

PRTICA 01

Tema: Observao do Microscpio ptico Comum (M.O.C.)

Material: Microscpio, lminas prontas.

Construo do Microscpio ptico

O microscpio um aparelho destinado a ampliar a imagem das micro-


estruturas observadas, utilizando para isso, a luz.
1. Base ou p: d ao instrumento boa estabilidade e usado para o repouso
do aparelho na mesa de trabalho. Nele est um boto que d controle
intensidade luminosa.
2. Brao: sustenta a parte ptica (lentes) e serve para o transporte do
aparelho.
3. Tubo ou canho: contm em uma das extremidades a lente e na outra, o
revlver que uma pea giratria a qual se prendem as lentes objetivas.
4. Platina: sobre esta se coloca a lmina preparada, exatamente sobre uma
abertura central que d passagem aos raios de luz.
5. Charriot: serve para locomover a lmina para a direita ou esquerda e para
cima ou para baixo.
6. Parafuso macro e micromtrico: abaixam e elevam a platina. O
micromtrico permite um ajuste grosseiro da imagem. O micro permite uma
melhor focalizao.
7. Revlver: local onde so inseridas as objetivas.
8. Objetivas: Conjunto de lentes que ampliam a imagem. Esto presas ao
revlver, que ao ser girado vai mudando as objetivas. Ela projeta uma imagem
real, ampliada e invertida. O aumento da objetiva gravado na sua lateral.
Para uso da objetiva de imerso (100 x) utilizar, inicialmente, o menor aumento
e focalizar. Colocar ento uma gota de leo de cedro sobre o centro iluminado
da lmina lateralmente e controlando o abaixamento at que a objetiva toque o
leo. Observar pela ocular e girar o micro at que a focalizao seja ntida.
Terminando o estudo, limpar a lmina e a lente usando um pano macio
molhado em xilol, em seguida com flanela limpa.
9. Ocular: Conjunto de lentes sobre as quais voc coloca o olho. D imagem
virtual, ampliada e direta. O aumento est gravado na sua extremidade
superior. Para clculo da ampliao total, multiplica-se a ampliao da ocular
pela da objetiva. Exemplo: ocular = 10x e objetiva = 40x --- ampliao total de
400x.
10. Condensador: est por baixo da platina. o conjunto de lentes cuja
funo concentrar a luz.
11. Lmpada
Recomendaes

O M.O.C. deve ser transportado cuidadosamente com as duas mos, pelo


brao e pela base. Aps o uso, o microscpio deve ser guardado livre de poeira
e/ou leo. Sempre com a menor objetiva e a platina totalmente levantada.

Como utilizar o microscpio

1. Coloque a lmina com o material a ser observado no orifcio da platina.


2. Gire o boto que est no p do microscpio e d a intensidade luminosa.
No precisa girar at o fim e no force o boto.
3. Olhando por fora e nunca pela ocular, e com a objetiva de menor capacidade
gire o parafuso macromtrico, at que a objetiva se aproxime da lmina.
4. Com os olhos na ocular, gire o macro no sentido inverso, bem devagar at
ver o material no campo com relativa nitidez.
5. Focalize melhor com o micro, para conseguir uma boa imagem. Para uma
ampliao maior, gire o revlver e utilize imediatamente uma objetiva mais
poderosa. Corrija o foco com o micromtrico. Cada vez que mudar a objetiva,
repita essa operao.
6. Para pessoas destras, a mo esquerda deve estar presa ao macro e a direita
livre para desenhar, escrever, etc.

Unidades de Medida

O estudo das estruturas celulares exige a utilizao de medidas adequadas ao


material estudado. Na tabela seguinte, fornecemos algumas dessas
dimenses.
O olho humano capaz de distinguir dois pontos distantes 0,1 mm um
do outro. Se a distncia for menor, eles sero vistos como um ponto apenas. A
capacidade de distinguir dois pontos muito prximos chamada poder de
resoluo. O poder de resoluo de um microscpio ptico de cerca de
225 nm e do eletrnico de at 0,5 nm.

Procedimento

1. Reconhea cada pea do microscpio, colocando os nomes de suas partes.


2. Utilize uma lmina fornecida pelo professor para ter o mecanismo de
focalizao em 40x, 100x e 400x. No precisa esquematizar.
PRTICA 02

Tema: Utilizao do Microscpio ptico Comum (M.O.C.)

Material: M.O.C., lminas, lamnulas, letras recortadas de jornal, gua e papel


de filtro.

Procedimento: Limpe bem a lmina, coloque a letra, duas gotas de gua e a


lamnula por cima.

Observaes:

Para evitar a formao de bolhas de ar, coloque a lamnula com o


polegar e indicador da mo direita de maneira a formar um ngulo entre lmina
e lamnula de 45. Deixe a lamnula cair sobre a letra de uma s vez. Enxugue
o excesso de gua com papel de filtro.
Esta aula tem como objetivo exercit-lo para o uso do M.O.C. bem como
provar o que foi dito no roteiro anterior sobre as objetivas. Portanto, se voc
enxergar a imagem invertida, desenhe-a como a v.

Esquematizar: a letra em aumento de 40x, 100x e 400x. Atente para as


sensveis diferenas de detalhes. No se esquea que isso um trabalho
cientfico, por isso, merece uma boa observao e um bom relato.
PRTICA 03

Tema: Diversidade Celular

Os antigos filsofos e naturalistas chegaram concluso de que "todos


os animais e vegetais, por mais complicados que fossem, eram constitudos
por uns poucos elementos que se repetiam em cada um deles". Referiam-se s
estruturas macroscpicas de um organismo, tais como as razes, os caules ou
os segmentos de rgos que se repetem no mundo animal. Muitos sculos
mais tarde, graas ao invento e posterior aperfeioamento dos microscpios,
foi descoberto que por detrs desta estrutura macroscpica, existe tambm um
mundo de dimenses microscpicas.
As clulas so as unidades estruturais e funcionais dos seres vivos.
Apesar da grande diversidade existente entre os seres vivos consideram-se
apenas dois tipos celulares bsicos: as clulas procariotas e as eucariotas. As
clulas procariotas apresentam menores dimenses e caracterizam-se por no
possurem um sistema de membranas que divida a clula em compartimentos
funcionais. Nestas o genoma est em contacto direto com a poro plasmtica.
As clulas eucariotas apresentam-se divididas em compartimentos funcionais
graas presena de um complexo sistema de membranas. Os principais
componentes das clulas eucariotas so o ncleo, o invlucro nuclear, o
retculo endoplasmtico, o aparelho de Golgi, os lisossomas, as mitocndrias e,
nas clulas vegetais, os cloroplastos.
Atendendo diversidade existente entre os seres vivos, desde muito
cedo houve a preocupao de classific-los em grupos de identidade. O
sistema de classificao de cinco Reinos foi proposto por Whittaker em 1969,
baseando-se no s nos diferentes nveis de organizao celular, mas tambm
nos principais tipos de nutrio. Assim, enquanto o Reino Monera inclui o nvel
de organizao procaritico, o Reino Protista corresponde ao nvel eucaritico
unicelular e os Reinos Plantae, Fungi e Animalia traduzem o nvel eucaritico e
multicelular.
2. MATERIAL

- Microscpio - Infuso de palha


- Lminas e lamnulas - Tradescantia sp.
- Lminas escavadas - Cebola
- Pinas e bisturis - Preparaes definitivas de bactrias
- Azul de metileno Iogurte
- Varetas de vidro - leo de imerso
- Lamparina

3. TCNICA

3.1 - Observaes de clulas da epiderme do bulbo da cebola (Allium cepa L.)


1. Retire com uma pina, uma poro da epiderme interna de uma escama do
bolbo da cebola.
2. Coloque-a sobre uma lmina com uma gota de gua.
3. Cubra com lamnula.
4. Observe ao microscpio e registre.
5. Deite uma ou duas gotas de azul de metileno ao longo de um dos bordos da
lamnula. Com papel de filtro, aspire na margem oposta at infiltrao do
corante.
6. Observe ao microscpio e registre.

3.2 - Observao de clulas da epiderme do caule de Tradescantia sp.


1. Corte um fragmento de caule com cerca de 3 cm.
2. Com a ajuda de uma pina retire uma poro da pelcula epidrmica.
3. Coloque-a sobre uma lmina com cuidado por forma a no dobrar.
4. Adicione uma gota de gua.
5. Coloque a lamnula.
6. Observe e registre.

3.3 - Observao de clulas do epitlio bucal


1. Desinfete o dedo indicador com lcool.
2. Raspe a parte interna da bochecha com a ponta do dedo.
3. Esfregue a ponta do dedo numa lmina e cubra-a com a lamnula.
4. Observe ao microscpio.
5. Deite uma ou duas gotas de azul de metileno ao longo de um dos bordos da
lamnula. Com papel de filtro, aspire na margem oposta at a infiltrao do
corante.
6. Observe ao microscpio e registre.

3.4 - Observao de bactrias do iogurte


1. Coloque um pouco de iogurte sobre uma lmina com o auxlio de uma vareta
de vidro.
2. Passe a lmina trs ou quatro vezes sobre a chama da lamparina. Deixe
arrefecer.
3. Deite uma ou duas gotas de azul de metileno e deixe atuar durante alguns
minutos.
4. Lave a lmina com gua destilada e deixe secar.
5. Coloque uma gota de leo de imerso e cubra com lamnula
6. Observe e registre (utilize a objetiva de imerso - 100 X - colocando uma
gota de leo de imerso sobre a lamnula).

Nota: No final desta sesso dever ficar completamente elucidado sobre o


significado dos termos como clulas procariotas e eucariotas, seres
unicelulares e pluricelulares, seres unicelulares procariotas e eucariotas, seres
pluricelulares eucariotas, clulas animais e vegetais, entre outros, bem como
ficar com uma viso global sobre a grande diversidade celular que constitui o
mundo vivo.
PRTICA 04

Tema: Observao de clulas vegetais.

Material: Elodea (planta aqutica), lmina, pina, lamnula, conta-gotas,


microscpio.

Procedimento:

1. Destaque uma folha inteira da planta, coloque-a no centro de uma lmina


bem limpa.
2. Pingue uma gota de gua sobre a folha, ento a lamnula por cima sem
deixar bolhas (vide aula Utilizao do M.O.C.).
3. Focalize em 40x, 100x e 400x.
4. Note as clulas, seu formato, tamanho, membranas, cloroplastos.
5. Observe o movimento dos cloroplastos. O movimento realizado pelos
orgnulos e hialoplasma uma das propriedades do citoplasma que recebe o
nome de ciclose.

Esquematizar: Desenhe em 100x e 400x. No caso de dvidas, solicite o


professor.
PRTICA 05

Tema: Dissociao do epitlio da mucosa oral.

Material: esptulas, lminas, lamnula, azul de metileno, conta-gotas.

Procedimento:

1. Com uma esptula especial, raspe a mucosa de dentro da bochecha.


2. Espalhe o material sobre o centro da lmina.
3. Acrescente uma gota de azul de metileno.
4. Coloque a lamnula (siga a mesma tcnica da aula anterior).

Esquematizar:
Voc vai fazer esquemas nos crculos correspondentes em 100x e 400x.
No se esquecer de colocar legendas. Seu desenho deve se aproximar o
mximo do real. No desenhe o que voc no v.

Observaes:
Voc notar a presena de clulas epiteliais vistas de perfil, frente,
isoladas e aglomeradas. Em todas, possvel identificar o ncleo como uma
pequena esfera intensamente corada em azul de posio central. O citoplasma
apresenta-se corado de azul mais claro e com presena de minsculas
granulaes. Quando voc for esquematizar, procure um grupo de clulas onde
voc possa isolar algumas para poder observar bem os detalhes citados acima.
PRTICA 06

Tema: Observao dos componentes em clula vegetal viva.

Material: Cebola, vermelho neutro, gilete, vidro de relgio, pina, gua


destilada, bequer, lmina, lamnula, leo de imerso, M.O.C.

Procedimento:
1. Cortar longitudinalmente uma cebola.
2. Separar uma das camadas internas.
3. Retirar a epiderme externa (pelcula que envolve a camada).
4. Dividir a epiderme em 4 pedaos quadrados de mais ou menos 3 mm de
lado.
5. Mergulhar os cortes em 1 ml de soluo de vermelho neutro contido em um
vidro de relgio.
6. Passando um minuto, com a pina, retirar um dos pedaos da epiderme.
7. Lave-o em gua destilada dentro do bquer.
8. Coloc-lo entre lmina e lamnula.
9. Observe em 400x.
10. Passados cinco, dez e quinze minutos, observar, sucessivamente os
cortes.

Esquematizar: Desenhe em 1000x os 4 cortes. Responda as questes.

Observao:
* Corantes vitais so utilizados para observao de clulas vivas.
* Neste relatrio voc poder identificar parede celular, citoplasma, vacolo e
ncleo.
PRTICA 07

Tema: Observao de vacolo e leucoplastos.

Material: Folha de Zebrina pndula, lmina, lamnula, conta-gotas, gua e


M.O.C.

Procedimento:
1. Retire a epiderme inferior de uma folha de Zebrina e coloque-a numa lmina
com 1 (uma) gota de gua. Cubra com a lamnula.
2. Observe e esquematize utilizando as objetivas de 40x e 400x.

Observao:
Nas clulas de razes de plantas, por exemplo, as molculas de glicose
provenientes das folhas (sede da fotossntese) penetram nos leucoplastos,
onde se transformam em amido. Os leucoplastos repletos de amido passam a
ser chamados de amiloplastos ou de gros de amido. Sua funo servir de
organela armazenadora de alimento para situaes de necessidade.
PRTICA 08

Tema: Observao de clulas de Eldea

Material: Folha de eldea, lmina, lamnula, conta-gotas, lugol, microscpio

Procedimento:
1. Tome uma folha nova de eldea do pice do ramo, e coloque-a numa
lmina.
2. Core com Lugol, espere alguns minutos
3. Observe no microscpio com aumento de 40x a 400x.
PRTICA 09

Tema: Movimento da gua atravs da membrana.

Material: Ramo de Eldea, gua destilada, 5 g de sal em 100 ml de gua (5%),


lmina, lamnula, papel de filtro, microscpio.

Procedimento:
1. Retire uma folha jovem de eldea (da ponta onde h crescimento).
2. Coloque sobre uma lmina com uma gota de gua e cubra com a lamnula.
3. Observe a folha em aumento de 40x, focalizando prximo nervura central,
coloque em 400x e desenhe a clula.
4. Pingue uma gota de soluo salina a 5% em um dos lados da lamnula e
absorva com papel de filtro no lado oposto. Observe pela ocular o que
acontece s clulas. Aguarde alguns minutos e desenhe a clula nesta
situao.
5. Repita o experimento usando gua destilada no lugar da soluo.
6. Aguarde e desenhe.
PRTICA 10

Tema: Prova de permeabilidade seletiva na membrana.

Material: Suspenso de levedo em gua, soluo de vermelho congo, formol a


40%, 3 tubos de ensaio, e lmina, conta-gotas, pina de madeira, bico de
bunsen, M.O.C.

Procedimento:
1. Colocar 2 ml de suspenso de levedo em cada um dos 3 tubos de ensaio.
2. Adicionar seis gotas de vermelho congo em cada um dos 3 tubos.
3. Somente no segundo adicionar 8 gotas de formol.
4. Somente o terceiro levar chama do bico de bunsen at ferver.
5. Preparar 3 lminas com uma gota do material sendo uma para cada um dos
tubos preparados.

Esquematizar: Observar em 400x cada lmina.


PRTICA 11

Tema: Permeabilidade Diferencial em Clulas Vivas

1. INTRODUO

A permeabilidade diferencial fundamental para a fisiologia da clula e


para a manuteno de condies fisiolgicas intracelulares adequadas, pois
condiciona a entrada de certas substncias, muitas das quais so necessrias
para manter os processos vitais e a sntese de novas substncias vivas, para
alm de regular a sada de gua e de produtos de excreo, que devem ser
eliminados da clula. Os estudos da permeabilidade so baseados na
composio qumica e na organizao molecular da membrana plasmtica, a
qual estabelece uma clara diferenciao entre o lquido intracelular e o
extracelular, no qual a clula est imersa. A membrana plasmtica e de uma
maneira geral todas as membranas celulares so constitudas por uma
bicamada lipdica e por protenas que apresentam uma organizao vetorial.
Os lpidios das membranas so molculas anfipticas com as regies
polares ou hidrfilas orientadas para as superfcies interna e externa, enquanto
que as regies apolares ou hidrfobas se localizam no interior das membranas.
As membranas apresentam natureza fluda gozando molculas proticas de
mobilidade lateral, no plano da membrana. As protenas so os principais
componentes funcionais das membranas celulares.

Modelo de organizao das membranas biolgicas em mosaico fluido.


2. MATERIAL

- Folhas de Elodea sp. - Vermelho de Congo


- Lminas - Lamparinas
- Lamnulas - Pinas
- Papel de filtro - Copos de precipitao com gua
- Soluo de cloreto de sdio a 5% - Vidro de relgio
- Suspenso de leveduras - Tubos de ensaio

3. TCNICA

Exp.1
1. Coloque uma folha de Elodea sp. numa gota de gua numa lmina.
2. Coloque a lamnula e observe ao microscpio.
3. Coloque um pedao de papel de filtro em contacto com uma aresta da
lamnula.
4. Adicione na outra extremidade da lamnula uma soluo de cloreto de sdio
(NaCl) a 5%.
5. Observe ao microscpio e registre.
6. Retire a folha de Elodea sp. e coloque-a num copo de gua durante 5
minutos.
7. Volte a observ-la ao microscpio e registre as alteraes que observar.
8. Coloque agora a folha de Elodea sp. num vidro de relgio com uma soluo
de NaCl a 5% durante 15 minutos.
9. Retire a folha e coloque-a numa lmina com uma gota da mesma soluo.
10. Observe e registre.

Exp.2
1. Coloque 1 ml de uma suspenso de leveduras em dois tubos de ensaio.
2. Adicione trs gotas de uma soluo de vermelho de Congo a cada um dos
tubos.
3. Aquea at a fervura a soluo de um dos tubos (faa esta operao com
muito cuidado). para no deixar "espirrar" a soluo).
4. Coloque uma gota de cada uma das solues em duas lminas e cubra com
lamnula.
5. Observe ao microscpio e registre.

4. TPICOS DE DISCUSSO

Exp.1
1. Como explica as alteraes registradas nas clulas da folha de Elodea at
ao passo 4?
2. Como explica as alteraes registradas no passo 6?
3. Como explica as alteraes registradas nas clulas da folha da Elodea aps
15 minutos na soluo de cloreto de sdio a 5% ? (passo 9)

Exp.2
1. Que diferenas observaram nas duas suspenses?
2. Como explica esses resultados?
PRTICA 12

Tema: Observao de estmatos

Material: Folhas de Rhoeo ou Zebrina (planta terrestre), pina, lmina,


lamnula, conta-gotas, gua destilada e soluo salina.

Procedimento I:
1. Destaque uma folha, e retire com auxlio de pina um delgado fragmento da
epiderme inferior.
2. Coloque-a na lmina limpa, pingue uma gota de gua destilada e coloque a
lamnula.

Esquematizar:
Desenhe em 400x. Responda as questes depois de ler as observaes e ver
o material no microscpio.

Observaes:
Observe o contorno poligonal das clulas e o contedo avermelhado devido
antocianina. Atente para a disposio regular das clulas que no seu conjunto
constituem o tecido epitelial de revestimento.
Os estmatos so estruturas da epiderme especfica das folhas, responsveis
pelas trocas gasosas e transpirao. Cada estmato tem duas clulas guarda
onde fica o ostolo cuja abertura depende da turgescncia celular.

Mecanismos de abertura e fechamento dos estmatos

Os estmatos permanecem abertos quando a folha est em presena de


luz e h um bom suprimento de gua. noite, ou quando h deficincia de
gua, os estmatos se fecham. Existe um mecanismo dependente do
suprimento de gua (hidroativo) e outro dependente da luz (fotoativo). Em
qualquer caso, sabe-se que os estmatos abrem-se quando as clulas-guardas
esto trgidas, fechando-se quando elas perdem gua.
Quando est trgida, a clula-guarda fica arqueada devido ao reforo
existente apenas na parede interna (voltada para o ostolo). O aumento do
volume da clula provoca a expanso da parede oposta ao ostolo, o que puxa
a parede interna pouco elstica, abrindo o estmato. A sada de gua das
clulas-guardas leva ao fechamento do estmato.
O mecanismo hidroativo devido ao suprimento hdrico disponvel,
quando houver um bom suprimento os estmatos estaro abertos Se houver
deficincia estaro fechados. Esse mecanismo protege o vegetal de uma
transpirao excessiva, porm quando fechados fotossntese prejudicada
devido a maior dificuldade para absoro de gs carbnico.
O mecanismo fotoativo est ligado a fotossntese. De todas as clulas da
epiderme, as nicas que possuem cloroplastos so as clulas-guardas dos
estmatos.
Quando a luz incide sobre as clulas-guardas, ocorre a realizao de
fotossntese. Os cloroplastos presentes nessas clulas retiram o CO2 dissolvido
no suco celular, o que o torna mais alcalino (bsico). Assim as enzimas
transformam o amido (insolvel) armazenado em glicose (solvel), aumentando
a concentrao celular. Logo a clula-guarda passa a absorver gua das
clulas anexas vizinhas, aumentando seu volume e abrindo os estmatos.
No escuro ocorre a respirao celular, conseqentemente h a eliminao de
CO2 e o processo que ocorre o contrrio do citado acima, o que leva a
diminuio da concentrao das clulas-guardas e a perda de gua para as
clulas anexas vizinhas.

Procedimento II:
1. Introduza uma gota de soluo salina, encostando um papel de filtro do lado
oposto. Observe ao microscpio e anote o que acontece.
2. Substitua a soluo salina por gua destilada. Observe e anote o que
acontece.
PRTICA 13

Tema: Observao de mitocndria em clulas vivas.

Material: Leveduras, lmina, lamnula, verde janus, conta-gotas, leo de


imerso, , M.O.C.

Procedimento:
1. Preparar uma soluo de leveduras (fermento de po) e colocar uma gota
sobre a lmina
2. Colocar uma gota de verde janus,
4. Cobrir com a lamnula.

Esquematizar: Desenhar o conjunto de clulas, observe no aumento de


1000x.

Observaes:
As mitocndrias so orgnulos citoplasmticos importantssimos (vide
apostila de teoria ou livro). Esta observao feita com corante vital (no mata
a clula) especfico: o verde janus. As mitocndrias so muito pequenas e a
observao de tais orgnulos relativamente difcil e vai precisar de muito
empenho e boa vontade. Esta aula muito bonita. Vai valer pena. Boa aula!