Disciplina: Combustíveis e Biocombustíveis

Tópico: Energia Renovável

Profª: Grace Ghesti/Juliana Petrocchi/Sandra Luz

Roteiro para Aula Prática: Hidrólise e Caracterização de Materiais Lignocelulósicos

Introdução

Materiais  lignocelulósicos  ou biomassa são compostos de carboidratos  poliméricos

(celulose e hemicelulose), lignina e pequena quantidade de extrativos, ácidos, sais e minerais.

A celulose e a hemicelulose, são polissacarídeos que podem ser hidrolisados a açúcares e

eventualmente fermentados a etanol. A lignina não pode ser usada para a produção do etanol.

A celulose (40­60%), é a macromolécula mais abundante de todas as plantas, constitui

de um terço a metade dos tecidos da planta e é constantemente reposta pela fotossíntese, com

estimativa de biossíntese anual mundial de 1011  ton. Em particular, a celulose é o principal

componente da maior parte das plantas, incluindo a madeira, algodão, linho, cânhamo, juta,

bagaço de cana, rami, palha de cereais, etc. Quimicamente, a celulose é um polímero linear

de unidades de anidroglicose ligadas aos átomos de carbono 1 e 4 por ligações glicosídicas.

Isto   é   confirmado   pela   presença   de   3   grupos   hidroxilas   com   diferentes

acidicidade/reatividade, OH secundário ligado ao C­2, OH secundário ligado ao C­3, e OH

primário   ligado   ao   C­6.   Durante   hidrólise,   esse   polissacarídeo   é   quebrado   em   moléculas

livres de açúcar pela adição de água. Entretanto a hidrólise é difícil devido a estrutura rígida e

cristalina. O produto, glicose, é um açúcar de seis carbonos ou hexose. 

A   hemicelulose   (20­40%)   consiste   em   cadeias   curtas   de   vários   açúcares:

principalmente   xilose   (cinco   carbonos),   arabinose   (cinco   carbonos),   galactose,   glicose   e

maose (todos com seis carbonos). E ainda contém pequenas quantidades de grupos acetil. A

hidrólise da hemicelulose é relativamente fácil devido a estrutura amorfa.
 Já a lignina (10­25%) é presente em toda biomassa lignocelulósica. Portanto, qualquer

produção de etanol terá a lignina como resíduo. A lignina é um polímero complexo composto

por grupos fenilproprano  e metoxil  e  é responsável para juntar  as  células  das  plantas.  A

lignina pode ser degradada por microorganismos gerando produtos de alto valor agregado,

assim como ácidos orgânicos, fenóis e vanilina.

Objetivos: Esta aula prática tem por objetivo capacitar o aluno da disciplina Combustíveis e

Biocombustíveis a separar e caracterizar materiais lignocelulósicos. Este processo fornecerá

ao   aluno   informações   extremamente   importantes   com   relação   as   reações   dos   compostos

lignocelulósicos, familiarizando com técnicas  de pré­tratamento e hidrólise, nas quais são

etapas necessárias para a obtenção do etanol de segunda geração.

Parte experimental

Materiais e reagentes a serem utilizados
 Fibra moída de bagaço de cana (massa real: _______________g)
 Solução de ácido sulfúrico 72% (m/m)
 Água destilada
 Béqueres de 150 mL
 Béqueres de 500 mL
 Pipeta de 10 mL
 Bastão em vidro
 Proveta de 100 mL
 Papel alumínio
 Papel de filtro (massa do papel de filtro: _________________g)
 Funil simples
 Erlenmeyer de 250 mL
 Balão volumétrico de 250 mL
 Cronômetro
 Banho Maria (45ºC)
 Garras metálicas
 Balança analítica
 Estufa
 Autoclave
Procedimento:  O   material   lignocelulósico   moído   (bagaço   de   cana)   será   submetido   à

hidrólise ácida em banho termostatizado (temperatura controlada) a 45 oC. Uma (1) grama de

fibras (umidade: _______%) serão colocados em béquer de 150 mL juntamente com 10 mL

de H2SO4 a 72% (m/v). A mistura será agitada com um bastão de vidro por 7 min. Após os 7

minutos de agitação constante, serão adicionados à mistura, 25 mL de água destilada para

parar a reação.  E então a mistura será transferida quantitativamente para um Erlenmeyer de

250 mL com mais 100 mL de água destilada. A boca do Erlenmeyer deve ser coberta com

papel alumínio e devidamente identificada. Depois o Erlenmeyer contendo a mistura será

levado ao autoclave a 1,05 atm por 30 min. O hidrolisado será filtrado utilizando um funil e o

papel de filtro (previamente pesado) e o material insolúvel quantificado posteriormente. O

filtrado será coletado diretamente em um balão volumétrico de 250 mL. O volume deve ser

completado até o minisco com água destilada.

Nota:  O filtrado é rico em açúcares (celobiose, glicose, xilose, arabinose e grupos acetil)

provenientes das reações de hidrólise. O filtrado é amarelado pois resta ainda um pouco de

lignina que apresenta menor massa molar e é solúvel. É possível determinar a quantidade de

lignina solúvel por medidas em equipamento de UV/Visível, entretanto ainda não temos em

nosso laboratório. A quantidade de açúcares presentes no hidrolisado pode ser determinada

facilmente utilizando um cromatógrafo líquido de alta eficiência e padrões de açúcares.

Determinação de lignina insolúvel

Após a coleta do filtrado no balão volumétrico. O material retido no papel de filtro será

lavado com cerca de 500 mL de água destilada, suficiente para remover o ácido sulfúrico

aderido ao papel. Depois disso o material será levado à estufa a 105 oC até peso constante. A

porcentagem de lignina insolúvel proveniente da separação deve ser calculada com base na

massa inicial de bagaço de cana seco (descontando a massa do papel de filtro).

Orientações para os Pré e Pós­Relatórios
1. O pré­relatório terá que ter um esquema (fluxograma com figuras, setas, pequenas

explicações, etc) da parte experimental, contendo explicações do que acontece a cada

etapa;

2. Já o pós­relatório deverá conter os Resultados e Discussão que deverá ser escrita de

uma maneira dissertativa e fluída. Ao longo do texto indicar:

a. Todas   as   reações   envolvidas   de   hidrólise   tanto   da   celulose   como   polioses

resultando em celobiose, glicose, xilose, arabinose e grupos acetil;

b. Indicar observações como coloração do hidrolisado, material retido no filtro e

dificuldade   ou   não   de   filtração,   ou   quaisquer   outras   informações   que

considerarem importantes;

c. Tente explicar a função do ácido sulfúrico (alta e baixa concentração) nas duas

etapas da hidrólise;

d. Indicar tabela sobre o bagaço: massa inicial, teor umidade (%), massa real,

teor de lignina insolúvel (%), indicar provável teor (%) de polioses e celulose

(somatório das duas) e comparar esses dados com a literatura;

3. Conclusões: conclusão não é uma nova discussão dos resultados, mas a conclusão real

sobre o resultado do experimento.