NOTA CIENTÍFICA

Conteúdo Relativo de Água, Teor de Prolina e

Carboidratos Solúveis Totais em Folhas de Duas
Cultivares de Milho submetidas a Estresse Hídrico
Patrícia Surama Parise Maia1, Cândido Ferreira de Oliveira Neto1, Diana da Silva Castro2,
Joze Melisa Nunes de Freitas3, Allan Klynger da Silva Lobato3e Roberto Cezar Lobo da Costa4

Introdução calor e salinidade. Como variações genotípicas na

Em condições naturais e agriculturáveis, as plantas
estão freqüentemente expostas ao estresse ambiental.
Alguns fatores dessa natureza, como a temperatura do ar,
por exemplo, podem se tornar estressantes em poucos
minutos; enquanto outros, como conteúdo de água no
solo, podem levar dias ou até semanas. Além disso, o
estresse desempenha um papel importante na
determinação de como o solo limita a distribuição de
espécies vegetais, Taiz & Zeiger [1].
A deficiência hídrica é considerada a maior causa de
redução na produtividade agrícola em clima tropical.
Porém, como existe uma variabilidade na adaptação à
seca entre espécies e dentro da espécie, deve-se avaliar o
comportamento de diferentes materiais genéticos, em
condições de seca, para a recomendação de cultivo de
acordo com Blum [2]. Com o milho na região tropical
verifica-se que 95% do cultivo são feitos em áreas
sujeitas a um déficit hídrico, que causa uma queda de
10% a 50% da produção, em 80% da área cultivada,
Bolaños & Edmeades [3]. Um dos mecanismos de
adaptação à seca no milho é o acúmulo de solutos
osmoticamente ativos na célula, em relação às plantas
bem hidratadas. Tal fenômeno, chamado de ajustamento
osmótico, permite a manutenção da turgescência,
crescimento e fotossíntese, sob baixos valores de
potencial hídrico de folha, Morgan [4].
Durante períodos de déficit hídrico, muitas mudanças
ocorrem na planta. Essas mudanças dependem da
severidade e da duração do estresse, do genótipo, do
estádio de desenvolvimento e da natureza do estresse,
Kramer [5]. A maioria dessas modificações visa a manter
o crescimento e a reprodução da planta em ambientes
com limitações na disponibilidade de água. Uma das
mais bem documentadas respostas
fisiológicas/moleculares ao déficit hídrico em plantas é a
habilidade de algumas espécies de ajustar osmoticamente
suas células. Durante a seca, plantas superiores
ativamente acumulam açúcares, ácidos orgânicos e íons
no citosol para diminuir o potencial osmótico e,
conseqüentemente, manter o potencial hídrico e o turgor
de suas células próximo do nível ótimo, Bray
[6]. Acúmulos de prolina foram observados por Aspinall
& Paleg [7] em tecidos foliares de diversas espécies
quando submetidos às condições de estresse hídrico,
________________
1. Mestrando em Biologia Vegetal Tropical, UFRA, Universidade Federal Rural da Amazônia, Belém, PA, Brasil.
E-mail: neto.fsvegetal@hotmail.com.
2. Acadêmica do Curso de Agronomia. UFRA, Universidade Federal Rural da Amazônia, Belém, PA, Brasil
3. Bolsista de Iniciação Científica PIBIC/UFRA, UFRA, Universidade Federal Rural da Amazônia, Belém, PA, Brasil.
4. Professor e pesquisador da UFRA, Universidade Federal Rural da Amazônia, Belém, PA, Brasil.
capacidade de acumular prolina foram também
constatadas, observadores estabeleceram correlações
entre estas alterações e os níveis de tolerância ao estresse
ambiental. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito
da desidratação sobre teor de prolina, carboidratos
solúveis totais e conteúdo relativo de água em tecidos
foliares de duas cultivares de milho [Zea mays L. (cv.
Pontinha e cv. Dente de Cavalo)].
Material e métodos
O experimento foi conduzido em condições de Casa
de Vegetação do Instituto de Ciências Agrária (ICA) da
Universidade Federal Rural da Amazônia (UFRA) sem
controle de condições locais e ambientais. O substrato
utilizado para o crescimento das plantas foi constituído
de terra preta e esterco de pato curtido na proporção de
3:1, utilizando-se vasos de 2(dois) kg com o substrato
citado. As sementes de milho (Zea mays L. cv. Pontinha
e cv. Dente de Cavalo), foram fornecidas pela
Universidade Federal Rural da Amazônia. O
delineamento experimental foi inteiramente casualizado
em fatorial tipo 2 x 2 (condições hídricas x cultivares)
com 6 repetições, totalizando 24 parcelas. Foram
utilizados, um tratamento controle (mantido na
capacidade de campo) e um tratamento com estresse
hídrico de 5(cinco) dias.
O desbaste foi feito 14 dias após a germinação das
sementes, deixando-se 2(duas) plantas por vaso. As
plantas ficaram em Casa de Vegetação durante
40(quarenta) dias, incluindo os cinco dias de estresse.
Após esse período, as mesmas foram levadas para o
laboratório de Fisiologia Vegetal da UFRA, onde foram
realizadas as análises dos teores de prolina segundo o
método de Bates, Waldren e Teare [8], os níveis de
carboidratos solúveis totais foram obtidos de acordo com
Dubois, Gilles, Hamilton, Rebers, Smith [9] e o conteúdo
relativo de água pelo método de Slavick [10]. Os
resultados foram submetidos à análise de variância e as
médias dos tratamentos foram comparadas por Tukey ao
nível de 5% de probabilidade segundo Gomes [11].
Resultados e Discussão
Houve diferença significativa entre os tratamentos, no

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qual verificou-se um incremento nos teores de prolina
nas folhas para ambas cultivares (Figura 1), os teores de
prolina na cultivar dente de cavalo variaram e 0,179
μmol de prolina/g MS nas túrgidas a 0,591 μmol de
prolina/g MS nas plantas sob estresse hídrico, revelando
um acréscimo de 230,17%, enquanto que na cultivar
pontinha, o acréscimo foi de 103,13%, variando de 0,192
μmol de prolina/ g MS no tratamento controle para 0,390
μmol de prolina/g MS nas plantas sob déficit hídrico
(Tabela 1). Resultados semelhantes foram obtidos com
trigo por Strauss & Agenbag, [12]. O aumento dos teores
de prolina nas plantas de trigo sob déficit hídrico poderia
ser atribuído ao aumento das atividades das enzimas
envolvidas na síntese deste aminoácido Kandpal & Rao
[13] ou à inibição da oxidação da prolina Kiyosue,
Yoshiba, yamaguchi-shinozaki, Shinozaki [14]. Este
experimento demonstrou que a diminuição do potencial
hídrico da folha aumentou os níveis de prolina devido o
mesmo ter a função de ajustador osmótico em plantas
sob desidratação, segundo Costa [15].
O acréscimo deste aminoácido, está relacionado com a
diminuição conteúdo relativo de água nos tecidos
foliares (figura 3), confrontando os resultados verificou-
se que a variedade de milho dente de cavalo obteve
maior acúmulo de prolina em suas folhas quando
comparada a variedade pontinha, este aumento nos níveis
de prolina (Figura 1) ocorreu, provavelmente, através do
aumento da atividade e/ou concentração de enzima P-
5CR e/ou diminuição da degradação mitocondrial desse
iminoácido, Costa [15].
Nos carboidratos solúveis totais verificou-se a elevação
de sua concentração nas folhas, o déficit hídrico de cinco
dias aumentou significativamente os teores de
carboidratos solúveis totais para ambas variedades, no
qual os teores de carboidratos solúveis totais variaram na
cultivar dente de cavalo de 0,754 mmol de GLU/ g MS
nas túrgidas a 0,923 mmol de GLU/ g MS nas plantas
sob estresse hídrico, portanto, houve um acréscimo de
80,74%. Nos teores de carboidratos solúveis totais da
variedade Pontinha o aumento foi de 76,51% (Figura 2),
tal aumento está relacionado à finalidade de se manter o
nível de água da folha e induzir um ajustamento
osmótico na planta, visando o equilíbrio osmótico da
célula, Kerbauy [16].
Com relação ao conteúdo relativo de água observa-se
que as cultivares mostraram comportamento semelhante
(Figura 3), confrontando os resultados verificou-se que a
variedade de milho Dente de Cavalo obteve maior
acúmulo de carboidratos em suas folhas. Isto se deve ao
fato de que com a diminuição do nível de água do solo, a
planta responde osmoticamente com o aumento dos
teores desses carboidratos, no sentido de se adaptar ou se
ajustar ao ambiente com falta de água, concordando com
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Bray [17], durante a seca. Plantas adaptadas acumulam
açúcares, ácidos orgânicos e íons no citosol para
diminuir o potencial osmótico e, conseqüentemente,
manter o potencial hídrico e o turgor de suas células
próximo do nível ótimo, Bray [17].
Referências
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molecular biological analysis. Dordrecht: Kluwer Academic.
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[4] MORGAN, J.M. 1984. Osmoregulation and water stress in
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[5] KRAMER, P. J. 1983. Water relations of plants. Academic
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[9] DUBOIS, M. GILLES, K. A. , HAMILTON, J. K. , REBERS, P.
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ragi (Eleusine coracana) leaves. Biochemistry International,
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dehydration in Arabidosis. Plant Cell, Rockville, v. 8, p. 1323-
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[15] COSTA, R.C.L. da. 1999. Assimilação de nitrogênio e
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[16] KERBAUY,G.B. 2004. Fisiologia vegetal. ed. GUANABARA
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[17] BRAY, E. A. 1997. Plant responses to water deficit. Trends in
Plant Science. 2:48-54.
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Tabela 1 – Conteúdo Relativo de Água (CRA), teor de carboidratos solúveis totais e teor de prolina em folhas milho [Zea mays L.
(cv. Pontinha e cv. Dente de Cavalo)] submetidas ao estresse hídrico durante 5 (cinco) dias.

Cultivar Tratamento Variáveis

Carboidratos (mmol de GLU/ g MS ) Prolina (μmol/ g MS) CRA(%)
Pontinha Controle 0,40 Aa 0,19 Aa 90,3 A*
Estresse 0,75 Bb 0,39 Bb 64,1 B*

Dente de Controle 0,52 Aa 0,18 Aa 91,0 A*

cavalo
Estresse 0,92 Ba 0,59 Ba 60,6 B*
CV(%) 2,26 2,75 3,80
Médias seguidas pelas mesmas letras maiúsculas na coluna e minúsculas na linha não diferem significativamente entre si, com relação as mesmas
variáveis, pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. * significa que não houve diferença significativa entre os tratamentos.

Teor de Prolina Controle

Estresse Conteúdo Relativo de Água Controle
0.7 Estresse
100
0.6 90
0.5 80
mmo l P ro /g MS

70
0.4
C R A (% ) 60
0.3
50
0.2 40
0.1 30
20
0
Milho Pontinha Milho Dente de Cavalo
10
0
Milho- pontinha Milho dente de cavalo

Figura 1. Teor de prolina em folhas milho [Zea mays L. (cv.

Figura 3. Conteúdo relativo de água em folhas milho
Pontinha e cv. Dente de Cavalo)] submetidas a estresse hídrico
[Zea mays L. (cv. Pontinha e cv. Dente de Cavalo)]
durante 5 (cinco) dias.
submetidas a estresse hídrico durante 5 (cinco) dias.

Controle
Teor de Carboidratos Solúveis Totais
Estresse

0,9

0,8

0,7
mmol de GLU/ g MS

0,6

0,5

0,4

0,3

0,2

0,1

0
Milho- pontinha Milho dente de cavalo

Figura 2. Teor de carboidratos solúveis totais de folhas

milho [Zea mays L. (cv. Pontinha e cv. Dente de Cavalo)]
submetidas à estresse hídrico durante 5 (cinco) dias.

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