PROGRAMA INSTITUCIONAL DE BOLSAS DE

INICIAÇÃO CIENTÍFICA - PIBIC/CNPq-FA-UEM

RELATÓRIO SEMESTRAL
1. PERÍODO DE ABRANGÊNCIA DESTE RELATÓRIO: 01/08/2018 a 31/01/2019

2. TÍTULO DO PROJETO: Parâmetros clínicos de camundongos Swiss e Balb/c como método de

escolha de modelo experimental no estudo da giardíase

3. ORIENTADOR: Profª. Drª. Mônica Lúcia Gomes 4. DEPARTAMENTO: Ciências Básicas da

Saúde (DBS)

5. CO-ORIENTADOR: 6. DEPARTAMENTO:

7. BOLSISTA: Juliana Miki Nakanishi

8. O BOLSISTA ENCONTROU DIFICULDADES QUANTO AO DESENVOLVIMENTO DO PROJETO?

EM CASO AFIRMATIVO, DESCREVA-AS.

9. AVALIAÇÃO DO ORIENTADOR SOBRE O DESEMPENHO DO BOLSISTA NO PROJETO.

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INICIAÇÃO CIENTÍFICA - PIBIC/CNPq-FA-UEM
RELATÓRIO SEMESTRAL
10. CONSIDERANDO OS OBJETIVOS PROPOSTOS, BEM COMO O PLANO DE TRABALHO E O
CRONOGRAMA DE EXECUÇÃO DO PROJETO, DESCREVA DETALHADAMENTE OS RESULTADOS
ALCANÇADOS NO PERÍODO DE 01/08/2018 A 31/01/2019.

Giardia spp. é o protozoário intestinal que mais acomete o homem e outros animais. Por
apresentar potencial zoonótico, tem despertado grande interesse e alavancado o surgimento de novas
pesquisas. Os modelos experimentais mais utilizados em pesquisas são os roedores, principalmente os
camundongos da espécie Mus musculus. As diferentes linhagens, como Swiss e Balb/c podem responder
diferentemente frente aos experimentos, visto que apresentam diferenças genéticas e comportamentais,
além de poderem divergir em relação ao sexo dentro da mesma linhagem.

A maior parte dos animais advindos de biotérios encontra-se naturalmente infectados. É importante
garantir que estes animais estejam livres de infecções, que possam interferir no seu comportamento,
assegurando maior exatidão e confiabilidade dos resultados, uma vez que estes animais são utilizados
para estudo de diversas patologias humanas.

Visando facilitar a execução, os experimentos com cada uma das duas diferentes linhagens de
camundongos foram conduzidos em momentos distintos. Inicialmente foram utilizados 20 camundongos
Swiss, sendo 10 fêmeas e 10 machos, divididos em grupos de cinco animais cada. Após ambientação, foi
coletado um pool de amostra de fezes, para realização da análise coproparasitológica e molecular, por
três dias consecutivos. Imagens videográficas dos animais foram obtidas para análise comportamental.

Para análise coproparasitológica, foi processado um grama de fezes pelo método de Ritchie
modificado, em que o formol foi substituído pela água destilada. Do sedimento resultante foi realizado
quantificação dos cistos de Giardia muris em câmera de Neubauer e extração do DNA. A quantificação foi
feita em triplicata, e os resultados, obtidos pela média simples. A extração do DNA foi realizada com a
utilização do Kit comercial “PureLink PCR Purification®”, conforme as recomendações do fabricante. O
DNA extraído foi amplificado a partir dos iniciadores G18S2 e G18S3 que amplificaram um fragmento de
470 pb. Os produtos amplificados foram visualizados pela eletroforese em gel de poliacrilamida a 4,5%
revelados com sais de prata.

A média de cistos de G. muris, obtidos através da quantificação, para os camundongos Swiss foi de
1 x 106 cistos/g de fezes machos e 7,8 x 105 cistos/g de fezes para as fêmeas, sendo classificadas como
amostras com alta carga parasitária de acordo com os parâmetros já descritos na literatura. Ao observar
os produtos amplificados pela PCR no gel de poliacrilamida foi possível a visualização de bandas de 470
pb para as amostras dos quatro grupos animais, que confirmam a presença do parasito. As imagens
obtidas para análise comportamental estão em fase de interpretação por meio do Software X-Plo-Rat.

A segunda fase dos experimentos, com os camundongos Balb/c ainda está sendo conduzida. A
construção do banco de dados utilizando a Planilha do Microsoft Excel 2010 está em andamento, para
posterior análise com auxílio do Software Statistica 8.0.
DATA: 26/03/2019

ESTE RELATÓRIO DEVERÁ SER ANEXADO, EM PDF, NO SGPEX ATÉ 31/03/2019.