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Nutrição Clínica
Disponível online 23 setembro 2017
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Artigo original
Effects of leucine-enriched essential amino acid and whey protein bolus dosing upon skeletal
muscle protein synthesis at rest and after exercise in older women
Autor ligações painel aberto sobreposiçãoDaniel J. Wilkinson um 1Syed SI Bukhari um 1Bethan

E. Phillips umMarie C. Membro umJessica Cegielski umMatthew
S. Brook umDebbie Rankin umWilliam K. Mitchell umHisamine Kobayashi bJohn
P. Williams umJonathan Lund umPaul L. Greenhaff umKenneth Smith umPhilip J. Atherton um
uma
MRC / ARUK Centro de Excelência em Pesquisas em Envelhecimento Musculoesquelético,

Instituto Nacional de Pesquisa em Saúde Nottingham, Centro de Pesquisas Biomédicas,
Universidade de Nottingham, Derby DE22 3DT, Reino Unido
Ajinomoto Co., Inc., Tóquio 104-8315, Japão
Recebido em 9 de abril de 2017, Aceito em 19 de setembro de 2017, Disponível online em 23 de

setembro de 2017 .
Mostre menos
https://doi.org/10.1016/j.clnu.2017.09.008Obtenha direitos e conteúdo
Acesso aberto financiado pelo Conselho de Pesquisa Médica
Sob uma Creative Commons licença
acesso livre
Resumo
Antecedentes e Objetivos
Respostas anabólicas prejudicadas à nutrição e ao exercício contribuem para a perda

de massa muscular esquelética com o envelhecimento (sarcopenia). Aqui, nós testamos as
respostas da síntese de proteína muscular (MPS), no sub-representado grupo de mulheres
idosas, para aminoácidos essenciais enriquecidos com leucina (EAA), em comparação com um
grande bolus de proteína de soro de leite (WP).
Métodos
Vinte e quatro mulheres mais velhas (65 ± 1 ano) receberam ( N = 8 / grupo) 1,5 g de
suplementos de EAA enriquecidos com leucina (LEAA_1,5), 6 g de LEAA (LEAA_6) em
comparação com 40 g de WP. Uma infusão intramuscular constante de 13 C 6 -fenilalanina foi
usada para determinar a MPS no início e em resposta a alimentação (FED) e alimentação-mais-
exercício (FED-EX; extensões unilaterais de perna 6 × 8; 75% 1-RM) . Nós quantificamos as
concentrações plasmáticas de insulina / AA, fluxo sanguíneo femoral da perna (LBF) / fluxo
sanguíneo microvascular muscular (MBF) e sinalização anabólica via immunoblotting.
Resultados
A insulinemia plasmática e a presença de EAA foram maiores e mais prolongadas com o WP do

que com o LEAA, embora o LEAA6 tenha alcançado níveis semelhantes aos do WP. Nem o LEAA
nem o WP modificaram o LBF ou o MBF. O FED aumentou a MPS de forma semelhante nos
grupos LEAA_1.5, LEAA_6 e WP ( P <0,05) ao longo de 0-2 h, com a MPS significativamente
maior do que a basal nos grupos LEAA_6 e WP apenas acima de 0–4 h. No entanto, FED-EX
aumentou MPS similarmente em todos os grupos de 0 a 4 h ( P <0,05). Apenas p-p70S6K1
aumentou com WP às 2 h em FED ( P <0,05), e às 2/4 h em FED-EX ( P <0,05).
Conclusões
Em conclusão, LEAA_1.5, apesar de fornecer apenas 0,6 g de leucina , robustamente (talvez no
máximo) estimulado MPS, com vantagem trófica desprezível de doses maiores de LEAA ou
mesmo a 40 g de WP. Destacando que a composição de EAA, em particular a presença de leucina
em vez de quantidade, é mais crucial para o anabolismo.
Palavras-chave
Síntese de proteína muscular
Leucina
Envelhecimento
Suplementação de aminoácidos de baixa dose
Exercício
Metabolismo humano
Abreviaturas
MPS
síntese de proteína muscular
EAA
Aminoácidos essenciais
WP
proteína de soro
LEAA
aminoácidos essenciais enriquecidos com leucina
LBF
fluxo sanguíneo da perna
MBF
fluxo sanguíneo microvascular
IMC
índice de massa corporal

SMI
índice de músculo esquelético
1-RM
1 repetição máxima
PVDF
difluoreto de polivinilideno
TBST
Solução salina tris tamponada / Tween 20
CEUS
ultra-som reforçado com contraste
1 . Introdução
Os cuidados de saúde para o envelhecimento das populações representam um importante

desafio socioeconómico, por exemplo, aproximadamente 7% do PIB da UE é atualmente
utilizado para prestar cuidados de saúde a idosos. Com o envelhecimento da população a
continuar a aumentar nos próximos anos, prevê-se que este número aumente para mais de 8%
até 2060 [1] . De maior preocupação clínica é a perda muscular associada à idade,
denominada sarcopenia , que ocorre a uma taxa de ∼1% / y em homens e ∼0,5% / y em
mulheres com idade superior a 50 anos [2] . Essa perda significativa de massa muscular é um
fator influente no comprometimento funcional relacionado à idade, má qualidade de vida, o
aparecimento de doenças metabólicas / cardiovasculares e um aumento do risco de
mortalidade [3–5] .
Tanto a atividade física quanto a nutrição parecem ser fatores reguladores fundamentais no
controle da massa muscular [6] . Está bem estabelecido que após a ingestão de proteínas /
aminoácidos há um aumento transitório na MPS (com pico de h2h; [7,8] ), o que ajuda a repor a
proteína perdida durante os períodos de jejum e, portanto, mantendo a massa muscular estável
em adultos jovens. Esta “janela anabólica” para aumentar a MPS com nutrição é estendida
quando a nutrição é combinada com exercícios [9–11] . É importante ressaltar que a resposta
aos estímulos anabólicos foi significativamente reduzida em adultos mais velhos. Por exemplo,
os aumentos pós-prandiais na MPS em idosos são atenuados em comparação com os jovens
adultos [12-15]., com reduções de até 40% naqueles que consomem a mesma quantidade de
EAA [13] . De fato, um estudo recente sugere que adultos mais velhos podem requerer uma
quantidade maior (± 0,4 g / kg vs. ± 0,24 g / kg em jovens) de nutrição para obter respostas
anabólicas equivalentes às dos adultos jovens [16,17] . O mesmo embotamento anabólico
também é observado em resposta ao treinamento de exercícios resistidos [18,19] e
crônicos [20,21] .
As CEA, em particular a leucina , têm papéis importantes na regulação do maquinário sintético

de proteínas [22-26] . De facto, 3 g de leucina sozinha na ausência de outros AA podem estimular
a MPS para níveis próximos do máximo (equivalentes aos observados a partir de um grande
bolus de proteína de soro) em machos adultos jovens [24] . Com isso em mente, foi
recentemente levantada a hipótese de que doses mais baixas de EAA enriquecidas com leucina
podem fornecer uma alternativa anabólica robusta e menos saciante (ou calórica) às maiores
quantidades de proteína que são sugeridas como necessárias para serem consumidas na idade
mais avançada para maximizar MPS [27,28]. Em apoio a essa hipótese, mostramos
recentemente que, apesar de fornecer mais substrato de EAA, um único bolus de 20 g de WP
não fornece nenhum benefício anabólico adicional àquele proporcionado por uma EAA
enriquecida de baixa dose (3 g), baixa caloria e leucina (40%). suplemento (Amino L40,
Ajinomoto) [27] . Estudos como este em mulheres mais velhas são importantes, uma vez que o
dimorfismo sexual no metabolismo protéico tem sido demonstrado na idade avançada [14,29] e
a maioria dos pesquisadores estuda apenas populações masculinas mais velhas. Portanto, como
uma extensão de nossos estudos anteriores, quantificamos os efeitos de 1,5 g ou 6 g de AEA
enriquecida com leucina (LEAA) [40% LEU] nutrição (nota: essas doses são 50% e 200% das doses
que testamos anteriormente [27]em comparação com 40 g de WP (uma dose que provoca um
efeito de teto superior na MPS em homens jovens [30] ) sob condições de repouso e exercitadas
em músculos de mulheres mais velhas.
2 . materiais e métodos
2.1 . Características do sujeito e ética
Todos os estudos foram realizados de acordo com a Declaração de Helsinque e registrados

no clinicaltrials.gov (número de registro NCT02053441 ). Após a aprovação ética concedida pelo
Comitê de Ética da University of Nottingham Medical School, 24 mulheres na pós-menopausa
mais velhas (8 em cada grupo) pareadas por idade e IMC (ver Tabela 1 para informações
demográficas) foram recrutadas da área local de Derbyshire por meio de anúncio através do
correio. Para minimizar as variáveis de confusão, os critérios de exclusão incluíram: mobilidade
prejudicada, história de diabetes , doenças cardiovasculares , pulmonares, hepáticas ou renais,
aquelas com medicações contraindicadas (AINEs, paracetamol)., HRT) e aqueles atualmente em
tratamento ativo contra o câncer. Após o recrutamento e antes da inclusão no projeto, todos os
voluntários foram adicionalmente examinados por um médico (pelo menos uma semana antes
do dia do estudo) por meio de um questionário médico, exame físico e ECG de repouso, para
exclusão de quaisquer alterações metabólicas, respiratórias, cardiovasculares /
cardiovasculares. vascular ou claudicaçãodistúrbios relacionados ou outros sintomas de
problemas de saúde. Todos os voluntários apresentavam química sanguínea normal, eram
normotensos (PA <140/90), realizavam atividades de vida diária e recreativas, mas não estavam
envolvidos em nenhum regime de exercícios formais e não faziam dieta com controle de
peso. Durante a triagem, a força dos extensores do joelho foi avaliada via 1-RM, usando a perna
dominante do voluntário (Technogym, Gambettola, Itália). Além disso, a massa corporal magra
foi avaliada via Absorciometria por Raios X Dupla (DXA), e usada para medir a massa muscular
apendicular e calcular o índice de músculo esquelético (SMI) de acordo com a seguinte
equação [31]:
Índice de Músculo Esquelético(SMI)=(Massa Muscular Total do Corpo Esquelético/Massa

Corporal Total)×100
Tabela 1 . Dados demográficos do assunto para cada grupo de intervenção. Os valores são
apresentados como média ± SEM.
LEAA_1.5 LEAA_6 WP
Era 65 ± 1 y 63 ± 1 y 66 ± 1 y
Altura (m) 1,62 ± 0,02 1,64 ± 0,02 1,60 ± 0,02
Peso (kg) 65,4 ± 3,5 68,4 ± 5,4 65,0 ± 4,6
IMC (kg m −2 ) 25,1 ± 1,3 25,1 ± 1,3 25,0 ± 1,5
SMI 6,32 ± 0,11 6,18 ± 0,13 6,13 ± 0,35
Todos os indivíduos forneceram consentimento informado por escrito para participar depois
que todos os procedimentos e riscos foram explicados. Após o rastreio, os voluntários foram
aleatoriamente designados para um dos três grupos que receberam um dos dois; 1) 40 g
de protea de soro de leite (WP, N = 8), 2) 1,5 g de aminoidos essenciais enriquecidos
com leucina (LEAA_1,5, N = 8) ou 3) 6 g de LEAA (LEAA_6, N = 8). Solicitou-se aos voluntários
que não modificassem sua dieta normal ou regime de atividade antes do dia do estudo e que se
abstivessem de qualquer forma de atividade física extenuante por 48 horas antes da visita de
estudo aguda.
2.2 . Procedimentos de estudo
Os procedimentos do estudo seguiram nossos protocolos padrão conforme descrito

anteriormente por Bukhari et al., [27] . Na manhã do estudo (08:00 h) após um jejum noturno
de 2000 h no dia anterior, os voluntários tiveram uma cânula inserida na veia antecubital de um
braço para a infusão de um traçador l - [anel- 13 C 6 ] -fenilalanina (Isotec, Sigma Aldrich; prime:
0,3 mg.kg −1 , constante: 0,6 mg.kg −1 h −1 ), com uma cânula retrógrada inserida para amostrar
sangue arterializado do leito capilar dorsal da mão. Biópsias muscularesforam tomadas 1 h e 3
h após o início da infusão do traçador para permitir a avaliação da MPS basal (pós-absortiva). Os
voluntários realizaram um exercício unilateral de resistência à extensão do joelho previamente
demonstrado [18] para estimular ao máximo a MPS (6 × 8 repetições a 75% da sua pré-
determinada 1-RM utilizando a perna dominante do voluntário com um intervalo de descanso
inter-conjunto de 2 minutos). Se o voluntário não conseguiu completar 8 repetições, então uma
pausa inter-set foi permitida antes de passar para o próximo set. Isso aconteceu regularmente
com os conjuntos 5 e 6. Imediatamente após o exercício, cada voluntário consumiu seu
suplemento designado, 40 g de proteína de soro de leite (WP), 1,5 g (LEAA_1,5) ou 6 g (LEAA_6)
de LEAA (“Amino L40”). Ajinomoto Inc.,) preparado em água (250 ml). A composição AA de cada
suplemento é mostrada na Tabela 2. Este desenho de estudo unilateral significou que a perna
não exercitada foi exposta ao efeito de alimentação sozinha ('FED'), enquanto a perna exercitada
foi exposta à combinação de alimentação e exercício ('FED-EX'). Mais biópsias musculares foram
realizadas 2 e 4 horas após a alimentação para permitir a avaliação da MPS nos períodos
intermediários. Biópsias musculares foram coletadas de m. vasto lateral usando a técnica
conchotome [32] após a indução da anestesia local por infiltração de 5 ml de lidocaína a 1% ,
lavada com solução salina tamponada com fosfato gelada antes de ser congelada em N 2 líquidoe
armazenado a -80 ° C até a análise. Amostras de sangue e fluxo sanguíneo / medidas vasculares
foram coletadas conforme delineado no esquema do estudo ( fig. 1 ).
Tabela 2 . Essencial de aminoácidos composição de cada tipo de ração (inclusive de dados de

Bukhari et al. [27] Nota): L -lisina e monocloridrato l histidina mono-hidrato foram usadas
como L-lisina e L -histidina respectivamente em LEAA.
LEAA (1,5 g), g LEAA (3 g), g LEAA (6 g), g WP (20 g), g WP (40 g), g
l- leucina 0,6 1,2 2,4 2 4
l- isoleucina 0,16 0,32 0,64 1,4 2,8
l -Valino 0,165 0,33 0,66 1,2 2,4
l- treonina 0,14 0,28 0,56 1,4 2,8
l- lisina 0,25 0,5 1,0 1,8 3,6
l- Metionina 0,05 0,1 0,2 0,4 0,8
l- histidina 0,025 0,05 0,1 0,4 0,8
l- fenilalanina 0,1 0,2 0,4 0,6 1,2
l- triptofano 0,01 0,02 0,04 0,4 0,8

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A Fig. 1 . Protocolo do estudo: efeitos de aminoácidos enriquecidos com leucina (LEAA)

e proteína de soro de leite (WP) em repouso e após exercício de resistência (RE) em mulheres
idosas. 1-RM, 1-repetição máxima; CEUS, ultra-som com contraste .
2.2.1 . Medição de insulina plasmática e concentrações de AA
Mediu-se a concentração plasmática de insulina utilizando um ensaio imunoabsorvente ligado

a uma enzima humana de alta sensibilidade (ELISA) (DRG Instruments GmbH, Marburg,
Alemanha). Para análises de AA, 10 μl de uma mistura de padrões internos isotopicamente
estáveis foram adicionados a 100 μl de plasma, tratados com urease e desproteinizados com 1
ml de etanol gelado em gelo por 20 min. Após a centrifugação (17.000 × g; 10 min), o
sobrenadante foi decantado e evaporado até à secura sob azoto. Após ressuspensão em HC1
a 0,5M , os lípidos foram extraídos com 2 ml de acetato de etilo antes da evaporação da fase de
HCl inferior e a AA foi derivatizada nos seus ésteres de tBDMS. As concentrações de AA foram
quantificadas contra uma curva padrão de concentrações conhecidas usando CG-EM (Trace
1300-ISQ, Thermo Scientific, Hemel Hempstead, Reino Unido).
2.2.2 . Medição do fluxo sangüíneo da perna (FSB) e do fluxo sanguíneo microvascular muscular
(FMM)
O fluxo sanguíneo da perna (BF) foi medido pelo ultra-som Doppler , com uma sonda de 9-3 mHz
posicionada sobre a origem da artéria femoral comum , e estimada como produto da área
transversal do vaso e velocidade média ao longo de seis ciclos cardíacos. O fluxo sanguíneo
microvascular foi medido com ultra-som reforçado com contraste (CEUS) como descrito
anteriormente [33]. Resumidamente, as microbolhas Sonovue ™ (Bracco, Milão, Itália) foram
infundidas através de uma veia antecubital. Um scanner de ultra-som iU22 com sondas de 40
mm lineares de 9 a 3 MHz (Phillips Healthcare, Reigate, Reino Unido) fixado em ambas as coxas
foi usado para registrar a aparência do micro-bolha no músculo quadríceps em repouso e em
resposta ao FED e EX (pernas medidas individualmente). O índice mecânico alto (MI)
intermitente "pisca" micro-bolhas interrompidas enquanto a gravação contínua com baixo IM
mede a taxa de reabastecimento de microbolhas. A infusão foi a 2 ml min -1 por 1 min e 1 ml
min -1por 3 minutos subseqüentes Durante os últimos 90 s deste protocolo de medição, foram
feitas gravações de flash / reabastecimento de 3 × 30 s. Análise de região de interesse fora de
linha usando o software Q-Lab (Phillips Healthcare, Surrey UK) foi usada para medir
a intensidade acústica linear do platô ( "valor A ") e também a constante de taxa ( valor " β "); o
produto do qual é proporcional ao volume do volume de sangue do tecido −1 s −1 e, portanto,
atua como uma medida do fluxo sanguíneo microvascular do tecido muscular. No total, dois
estudos foram realizados por participante: primeiros 50 a 60 minutos antes do exercício e os
segundos 50 a 60 minutos após a sessão de exercícios ( fig. 1 ).
2.2.3 . Medição de MPS
As proteínas miofibrilares foram isoladas, hidrolisadas e derivadas usando nossas técnicas

padrão [24] . Resumidamente, ~ 25 mg de tecido de biopsia muscular foi homogeneizado em
tampão de homogeneização arrefecido em gelo (50 mM Tris-HCl (pH 7,4), 50 mM de NaF, β-
glicerofosfato 10 mM de sal dissódico, EDTA 1 mM, EGTA 1 mM, 1 mM Na 3 VO 4 activado (todos
Sigma-Aldrich, Poole, Reino Unido)) e um comprimido completo de cocktail inibidor de
protease (Roche, West Sussex, Reino Unido) a 10 μl −g −1de tecido. Após a centrifugação a 13000
x g durante 5 min a 4 ° C, o sedimento insolúvel resultante foi lavada três vezes com tampão de
homogeneização para remover o excesso de AA livre e solubilizadas em NaOH 0,3 M para auxiliar
a separação da fracção miofibrilar solúvel a partir da fracção de colagénio insolúvel pela
centrifugação subsequente. A fraco miofibrilar solel foi precipitada utilizando ido perclico 1 M
(PCA), sedimentada por centrifugao e lavada duas vezes com etanol a 70%. Os AA ligados a
proteína foram libertados por hidrólise ácida utilizando HCl 0,1 M e 1 ml de resina de permuta
iónica Dowex (50W-X8-200) durante a noite a 110 ° C. O AA livre foi purificado, derivado e as
taxas de síntese fracional (FSR) das proteínas miofibrilares foram calculadas usando a equação
produto-precursor abaixo:
FSR(%/h)=[ΔEmEp·t]×100
onde Δ E m representa a mudança no processo de enriquecimento de limite l -

[ anel- 13 C 6 ] fenilalanina em duas biópsias sequenciais, t é o intervalo de tempo entre duas
biópsias em horas, e E p é a livre média l - [anel- 13 C 6 enriquecimento] fenilalanina
no intramuscular piscina.
2.2.4 . Imunotransferência para atividade da via de sinalização de AKT-mTORc1 (ou seja,

fosforilação)
O immunoblotting foi realizado como descrito anteriormente [26] usando a fração

sarcoplasmática isolada da preparação do MPS. Sarcoplasmáticas concentrações de proteína
foram analisadas utilizando um espectrofotetro NanoDrop ND1000 (NanoDrop Technologies,
Inc., Wilmington, DE-EUA) e amostras concentrações ajustado para 2? L? G -1em tampão 3 ×
Laemmli para assegurar o carregamento de proteína equivalente em géis Bis-Tris Criterion XT
de 12% pré-moldados (BioRad, Hemel Hempstead, Reino Unido) de 20 μg / pista. As amostras
foram separadas eletroforeticamente a 200 V por 1 h, seguidas por transferência úmida de
proteínas para a membrana PVDF a 100 V por 45 min e subsequentemente bloqueadas em leite
desnatado a 2,5% em solução salina tamponada 1x Tris / Tween 20 (TBST) por 1 h. As
membranas foram incubadas em anticorpos primários (diluição de 1: 2000 em 2,5% de BSA em
TBS-T) durante a noite a 4 ° C; p70S6K1 Thr389, 4EBP1 Ser65 / 70 , eEF2 Thr56(New England Biolabs,
Hertfordshire, Reino Unido). As membranas foram subsequentemente lavadas e incubadas em
anticorpo secundário conjugado com HRP (New England Biolabs, Hertfordshire, Reino Unido; 1:
2000 em 2,5% BSA em TBST) à temperatura ambiente durante 1 h, antes de serem expostas ao
Substrato Chemiluminescent HRP (Millipore Corporation, Billerica , MA-US) durante 5 min e
bandas quantificadas por Chemidoc XRS (BioRad, Hertfordshire, UK). Todos os sinais estavam
dentro da faixa linear de detecção; anomalias de carga foram corrigidas para coomassie [34] .
2.3 . análise estatística
Os dados são apresentados como média ± SEM, exceto se indicado. Os dados foram verificados
para distribuição normal usando um teste de Kolmogorov-Smirnov. Quando a suposição de
normalidade não foi atendida, os dados foram transformados em log antes de análises
adicionais. Os dados de MPS foram analisados usando uma ANOVA de duas vias (tipo de
alimentação × tempo) com um teste de Tukey Post Hoc. Os dados de plasma e imunoblotting
foram analisados usando medidas repetidas de duas vias ANOVA (tipo de alimentação × tempo)
com uma correção de Bonferroni. Toda a análise de dados foi realizada utilizando GraphPad
Prism (GraphPad Software Inc., San Diego, CA); o nível alfa de significância foi estabelecido
em P <0,05.
3 . Resultados
3.1 . Concentrações plasmáticas de AA e insulina
As concentrações de EAA no plasma ( Fig. 2 B), BCAA ( Fig. 2 C) e leucina ( Fig. 2D) aumentaram
rapidamente nos grupos LEAA-6 e WP com um pico a -40-60 min. No grupo LEAA_1.5 não houve
aumento significativo nas concentrações plasmáticas de leucina, BCAA ou EAA acima da linha de
base. Como esperado, o WP mostrou maior disponibilidade de AA no plasma do que os grupos
LEAA com concentrações de EAA, BCAA e leucina remanescentes significativamente acima da
linha de base até 220 min, enquanto as concentrações no grupo LEAA_6 retornaram à linha de
base em 80 min. Plasma NEAA só aumentou significativamente no grupo WP ( Fig.
2 A). Insulina plasmáticaa concentração aumentou em relação aos valores pós -absorvíveis em
todos os grupos, com pico em 11,5 ± 1,8 uU / mL, 12,8 ± 1,6 uU / mL e 21,0 ± 3,6 uU / mL, para
LEAA_1.5, LEAA_6 e WP respectivamente ( Fig. 2 E). No entanto, enquanto a insulina plasmática
voltou à concentração basal 40 min após a ingestão de 1,5 g e 6 g da LEAA, as concentrações de
insulina em resposta a 40 g de WP foram significativamente elevadas até 60 min, com
concentrações de insulina significativamente maiores a 20, 40 e 60 min em comparação com o
LEAA. A área sob a curva para insulina foi significativamente maior em resposta ao WP (AUC:
1358 ± 199,4 (WP) vs. 486 ± 92,1 (LEAA_1,5), 494 ± 41,4 (LEAA_6)).
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Fig. 2 . Efeitos no decurso do tempo de 1,5 g, 6 g de LEAA ou 40 g de WP

em aminoácidosplasmáticos (AA) e concentrações de insulina : AA não essencial (NEAA; A), AA
essencial (EAA; B), AA de cadeia ramificada (BCAA; C), leucina (D), insulina (E) e insulina AUC
(F). a: significativamente diferente vs. basal ( P <0,05). b: significativamente diferente entre os
grupos ( P <0,05).
3.2 . Fluxo sanguíneo da perna (FSB) e fluxo sanguíneo microvascular (FSM)
Devido a problemas técnicos com a coleta dessas medições, os dados de MBF e LBF só puderam
ser coletados para n = 6 / grupo. Nenhum aumento significativo na MFM ou LBF foi evidente
em resposta ao FED, ou FED-EX ( Fig. 3 ); No entanto, não se pode descartar que a falta de um
efeito pode ter sido devido à diminuição dos números dentro de cada grupo.
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Fig. 3 . O efeito de 1,5g, 6g de LEAA ou 40g de WP no músculo esquelético de mulheres idosas
nas respostas do fluxo sanguíneo da perna (LBF: A, C & E) e fluxo sanguíneo microvascular (MBF:
B, D & F) no descansar e exercitar as pernas.
3.3 . Efeitos do WP e LEAA dose resposta na MPS
Na perna FED, a MPS aumentou de forma semelhante em resposta a LEAA_1.5 (0,061 ± 0,003
vs. 0,086 ± 0,005% / h, P <0,05), LEAA_6 (0,066 ± 0,006 vs. 0,090 ± 0,007% / h, P <0,05) e WP
(0,056 ± 0,004 vs. 0,084 ± 0,011% / h, P <0,01) ao longo de 0-2 h, com a MPS significativamente
maior do que a basal nos grupos LEAA_6 e WP apenas acima de 0–4 h ( Fig. 4 A). No entanto, na
perna FED-Ex, a MPS aumentou significativamente em todos os grupos de 0 a 4 h (LEAA-1,5,
0,061 ± 0,003 vs. 0,091 ± 0,007% / h, P <0,01; LEAA-6, 0,066 ± 0,006 vs . 0,097 ± 0,007% /
h, P <0,01 e WP, 0,56 ± 0,004 vs 0,104 ± 0,011% / h, P <0,001; A Fig. 4B). Não houve diferenças
entre os grupos na MPS em nenhum momento.

Fig. 4 . Os efeitos de 1,5 g, 6 g de LEAA ou 40 g de WP na síntese de proteína miofibrilar
do músculo esquelético em A) FED e B) FED + EX. a: significativamente diferente vs. basal
( P <0,05).
3.4 . Efeitos na sinalização anabólica muscular
A sinalização anabólica relativa ao controlo da MPS foi avaliada medindo o alvo mecanicista
dos substratos de iniciação da tradução do complexo de rapamicina 1 (mTORC1); p70S6K1 e 4E-
BP1, e o fator de alongamento eEF2. No estado FED, apenas p-p70S6K1 foi significativamente
elevado no grupo WP em 2 h e 4 h ( Fig. 5A), no entanto, com FED-EX fosforilação de p70S6K1
foi elevada em ambos os grupos LEAA_6 e WP em 2 h, com a fosforilação permanecendo elevada
apenas às 4 h no grupo WP ( Fig. 5 B).
Fig. 5 . Os efeitos de 1,5 g, 6 g de LEAA ou 40 g de WP nas respostas de sinalização muscular ao

FED e FED-EX. As respostas foram log transformadas e normalizadas para a biópsia em jejum
basal (representada por linha pontilhada). a: significativamente diferente vs. basal ( P <0,05).
4 . Discussão
A presença de resistência anabólica no envelhecimento tornou-se cada vez mais bem

documentados nos últimos anos, com relatos de aumentos de MPS sendo significativamente
atenuada em idosos em comparação com os mais jovens em resposta a estímulos anabolizantes
(ou seja, o exercício; [18,19] , nutrição; [13 , 35] , nutrição e exercício; [36] , bem como os efeitos
anti-catabólicos da insulina [37] ). De fato, evidências mais recentes sugerem que indivíduos
mais velhos necessitam de maior consumo de proteína (vs. jovens) para alcançar aumentos
semelhantes na MPS [16,17,38] . No entanto, pouco se sabe de como os regimes nutricionais e
o impacto exercido sobre o músculo esqueléticoanabolismo em mulheres mais velhas (que
permanecem relativamente pouco estudadas vs. homens). No presente estudo, investigamos,
em mulheres mais velhas, os efeitos e a interação entre os dois principais fatores extrínsecos da
manutenção muscular: nutrição e exercício. Expandindo nosso achado anterior de que uma
dose de 3 g de LEAA estimula a MPS de forma semelhante a um bolus de 20 g de WP [27] ,
relatamos os novos achados de que parece não existir uma dose-resposta de boa-fé na MPS
para AA alimentação (± exercício), em mulheres idosas. As mulheres mais velhas são uma
população frequentemente sub-representada na pesquisa nutricional, apesar do dimorfismo
sexual bem estabelecido que existe em termos de turnover de proteína muscular, por exemplo,
a MPS mostrou ser menos responsiva à alimentação em mulheres mais velhas do que homens
mais velhos [29]. Portanto, não se pode supor que os achados do sexo masculino, no que se
refere ao impacto na MPS durante intervenções nutricionais ou baseadas em exercícios, sejam
representativos do sexo feminino, daí o interesse e a importância dos achados aqui
apresentados.
Sabe-se há cerca de 25 anos que os EAA são os principais responsáveis pelas estimulações na
MPS através da alimentação [22,23] - sendo a leucina central para isso. De fato, a AA
enriquecida com leucina (10 g com 3,5 g de Leu) prolonga a estimulação de MPS com RE em
homens idosos [39] , com uma alta proporção de leucina sugerida como importante para a
estimulação ótima de MPS por EAA em idosos [40] . Além disso, também relatamos
anteriormente que apenas 3 g de leucina por si só estimulam a MPS para níveis próximos
do máximo (equivalentes àqueles de um grande bolo de proteína) em homens jovens [24].e
também que 3 g de um novo suplemento LEAA (1,2 g de leucina) levaram a uma estimulação de
MPS em mulheres mais velhas que foi equivalente a 20 g de WP [27] . Com base nessas
descobertas anteriores, descobrimos que fornecer apenas 1,5 g de LEAA (equivalente a 0,6 g de
leucina e 0,9 g de EAA) estimulou a MPS de estado para uma extensão semelhante à de 40 g de
WP, uma quantidade sugerida para maximamente estimular MPS pelo menos em homens mais
velhos [30] . No entanto, apesar de 1,5 g de LEAA fornecer estimulação idêntica de MPS em 0-2
h na perna descansada, esta dose foi incapaz de sustentar aumentos significativos na MPS
durante as 4 h pós-prandiais.período de medição, enquanto MPS ainda foi levantada em 6 g
LEAA e 40 g WP neste momento. Isto sugere que 6 g de LEAA (e 40 g de WP) podem
ser ligeiramente mais anabólicas do que 1,5 g de LEAA e 3 g de LEAA [27] em mulheres mais
velhas (ver Fig. 6 para resumo), particularmente quando se trata de sustentar a MPS e, portanto,
anabolismo geral por longos períodos. No entanto, com base nesses achados (e outros; [27] ), o
LEAA (com 1,5 g) poderia, portanto, atuar como um suplemento a cada refeição para garantir
que a estimulação robusta (talvez máxima) da MPS seja alcançada em populações mais velhas (
particularmente como o LEAA é menos saciante que o WP), onde a RDA para proteína muitas
vezes não é satisfeita [41] .
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Fig. 6 . Relação dose-resposta resumida entre MPS e AA (± RE) em mulheres mais velhas
(incluindo dados de Bukhari et al. [27] ). Mais de 0-2 h, alimentando MPS aumentada com pouco
realce com RE (A). Durante todo o período de medição pós-prandial de 4 h (B) , a MPS foi
elevada, embora diminuída com a alimentação, enquanto a ER manteve a MPS elevada. Todos
os grupos apresentaram MPS semelhante em resposta à alimentação (± exercício de resistência)
sugerindo apenas uma pequena dose de leucinae / ou EAA são necessários em combinação com
exercícios para manter elevações na MPS após a nutrição, pelo menos nas primeiras 4 horas. O
eixo Y esquerdo mostra FSR para cada avanço (círculos abertos FED, quadrados abertos FED +
RE) enquanto linhas pontilhadas mostram FSR médio de todos os grupos para linha de base, FED
e FED + RE. O eixo Y direito mostra carga total de AA e conteúdo de leucina, EAA e NEAA.
Também foi proposto que o perfil de entrega do AA influencia a resposta anabólica à nutrição,
com sugestões de que a rápida aminoacidemia associada a grandes bolus de proteína de
absorção rápida (como o WP) é a chave para maximizar a MPS [42,43] . No entanto, apesar de
haver um pico rápido de 3 vezes nas concentrações plasmáticas de leucina, EAA e BCAA com 6
g de LEAA e uma manutenção de maiores concentrações por mais tempo com 40 g de WP, a
resposta MPS foi semelhante entre os grupos. Isso apóia as descobertas anteriores em que a
alimentação em bolus de uma dose fixa de EAA (15 g), que resultou em rápida aminoacidemia
plasmática, não forneceu efeitos anabólicos adicionais quando comparada com alimentação por
pulso / espalhamento da mesma dose total, [8]. Os presentes dados sugerem que é a
composição da ração (por exemplo, quantidade de leucina), em vez de a dose ou o padrão de
alimentação serem os principais impulsionadores do anabolismo.
O exercício resistido continua sendo uma busca para combater a perda de massa muscular com
o envelhecimento [44] , mesmo apesar do fato de que as respostas anabólicas agudas ao
exercício são diminuídas na idade avançada [18,36].. A adição de exercício à alimentação (ou
seja, FED-EX) leva a uma extensão da janela anabólica além da nutrição sozinha até 4 h. Como
isso ocorre em todos os grupos, isso indica que apenas uma pequena dose de leucina e / ou EAA
é necessária em combinação com o exercício para manter elevações na MPS após a nutrição,
pelo menos nas primeiras quatro horas. O que não se sabe de nossos dados é se essas pequenas
doses de LEAA são suficientes para i) estender a janela anabólica, por exemplo, 40g WP, e ii)
estimular a supressão de MPB para criar um saldo positivo líquido (como o exercício é conhecido
levar a um aumento da MPB na ausência de nutrição [9] ). Em termos deste último, com base
em pesquisas anteriores mostrando que tão pouco um aumento na insulina circulante de 5 a 15
uU / ml é suficiente para suprimir ao máximo MPB[45] , e o fato de que nos dados atuais, mesmo
com apenas 1,5 g de LEAA, a insulina atingiu um pico de ∼12 uU / ml (potencialmente
impulsionada pela leucina sendo um potente secretagogo de insulina), pode-se especular que o
balanço líquido é positivo em esta instância. No entanto, deve-se levar em consideração que há
um enfraquecimento induzido pelo envelhecimento na supressão mediada por insulina da MPB
(em homens mais velhos [37] ), portanto, os efeitos da LEAA no balanço líquido requerem
investigação adicional.
O estudo do fluxo sanguíneo da perna e do músculo através do CEUS foi realizado para avaliar
se doses maiores de EAA ou WP podem provocar maiores respostas do fluxo sanguíneo. Apesar
de WP fornecer A 3 vezes maior AUC para insulina, não houve diferenças observadas em LBF, o
que está de acordo com o trabalho anterior, sugerindo a presença de resistência vascular de
estado de alimentação em adultos mais velhos [33,46] . Em contraste com nossos achados
prévios [27] , não houve aumento significativo do FML em nenhum grupo nas pernas FED ou
FED-EX; esta diferença é provavelmente devida a questões técnicas com as medidas do presente
estudo (apenas o MBF em n = 6 puderam ser coletados por grupo). No entanto, apesar disso, já
mostramos anteriormente que o aumento farmacológico do fluxo sanguíneo da perna e do
músculo acima da resposta alimentada não aumenta a MPS [33] , portanto, qualquer aumento
no fluxo sanguíneo perna / músculo é improvável de ter qualquer influência adicional
significativa no músculo anabolismo proteico.
Nossos achados confirmam o crescente corpo de evidências na literatura para o potente papel
anabólico in vivo da leucina [24,27,28,39,47,48] , com dados in vitromostrando que a leucina
fornece a estimulação mais robusta da leucina. mTORc1 de todos os EAA [26] . No presente
estudo, a fosforilação de p70S6K1 foi o único alvo anabólico aumentado no estado FED ou FED-
EX, com 40 g de WP proporcionando o aumento mais robusto e sustentado da fosforilação,
embora 6 g de LEAA também tenham aumentado a fosforilação em 2 h no FED. Estado -
EX. Apesar dessa falta de aumento na sinalização anabólica, houve uma estimulação robusta da
MPS para todos os grupos. Discordância entre MPS e sinalização anabólica foi relatada
anteriormente [7,45]mostrando novamente que as medições do sinal anabólico usando
abordagens padrão de immunoblotting não são biomarcadores quantitativos sensíveis da MPS
em resposta à nutrição e ao exercício, e neste caso provavelmente refletem diferenças entre os
grupos nas concentrações séricas de insulina. Isso, além da observação do embotamento das
vias de sinalização anabólica na velhice [12,13],pode explicar os presentes achados. No entanto,
é possível que os eventos de sinalização de pico possam diferir entre regimes de alimentação
tão distintos, que os pontos-chave da estimulação da sinalização anabólica em resposta a cada
alimento possam não ter sido capturados pelos nossos tempos de biópsia - essa é uma limitação
inerente a tais estudos.
Como uma dose tão baixa de EAA pode levar a uma estimulação tão robusta de MPS e onde os
EAAs necessários para suportar o aumento de MPS derivam, se não forem fornecidos na
dieta? O aumento da MPS na ausência de EAA exógena não é um fenômeno incomum durante
períodos agudos de mensuração, isto é, 90–120 min. De fato, os estudos de dose de inundação,
realizados há mais de 20 anos, mostraram claramente que era possível estimular a MPS
agudamente através do fornecimento de um único bolo de EAA (∼3 g Leu ou Phe) sem a adição
de outros EAA [22,23, 49]. Para que isso ocorra, o EAA deve ser derivado de outros pools, isto é,
plasma, intracelular ou proteína (via quebra de proteína de todo o corpo ou tecido). Nós e outros
temos demonstrado que, claramente, há disponibilidade suficiente de EAA para sustentar
aumentos de curto prazo no MPS. Nestes estudos, mostrámos diminuições noutras EAA, isto
é, a valina intramuscular diminuiu em 30% [22] , a treonina em 20% [23] e, de facto, após a
administração de uma dose baixa de proteína whey (6,25 g - equivalente a apenas 3 g EAA)
suplementar a valina sanguínea, a isoleucina e a queda das concentrações de EAA total (os níveis
musculares não foram medidos), mas a MPS ainda é estimulada [50]. Claramente essas quedas
são o resultado do aumento da demanda devido ao elevado MPS. Além disso, um metabólito da
leucina: β-hidroxi-β-metilbutirato (HMB: que não fornece valor nutricional adicional), estimulou
a MPS (ao mesmo tempo que suprimiu a MPB) em homens jovens, apesar de não fornecer EAA
adicional [24] . Esta resposta aguda estimulada da MPS também foi demonstrada durante o
fornecimento de insulina (pelo que a MPB também será significativamente suprimida) na
ausência de EAA exógena adicional [51]. Logo, fica claro na literatura que, no curto prazo, a
ausência de EAA adicional não limita de forma aguda a MPS. Este estudo foi conduzido
agudamente por 4 h, como parte de um estudo maior investigando a resposta à dose da MPS ao
EAA (enriquecido com leucina) como uma alternativa potencialmente menos saciante (e menos
calorífica) ao consumo de maiores quantidades de proteína sugeridas na velhice, para maximizar
a MPS [52] . De fato, os achados do presente estudo apóiam evidências recentes dos benefícios
positivos de uma suplementação similar de AA em baixas doses (em conjunto com exercícios)
no apoio ao anabolismo em idosos [53]. No entanto, a eficácia da suplementação de LEAA com
as refeições, para manter a massa muscular e a função crônica, ainda precisa ser totalmente
testada. Além disso, resultados contraditórios para os efeitos benéficos da suplementação de
leucina crônica no envelhecimento foram relatados no passado, com 2,5 g de leucina
administrada ao lado de cada refeição principal por dia, sem melhora na massa muscular ou
força em homens idosos saudáveis [54] . No entanto, deve-se considerar que existem diferenças
metodológicas e de design distintas entre os estudos de Verhoeven [54] e Kim [53], que
dificultam a comparação. Em primeiro lugar, a suplementação crônica de leucina no trabalho de
Verhoeven [54]foi realizado em homens saudáveis, não sarcopênicos, enquanto o trabalho de
Kim [53] foi realizado especificamente em adultos idosos sarcopênicos pré-definidos , onde a
suplementação pode ser mais benéfica. Em segundo lugar, a suplementação de leucina de
Verhoeven [54] foi fornecida juntamente com as refeições principais, onde a MPS já pode estar
próxima do máximo e qualquer efeito benéfico poderia ter sido insignificante. Finalmente e mais
importante, como destacado em nossos principais objetivos, o trabalho de Verhoeven [54] foi
realizado em um grupo de homens mais velhos, aqui e no trabalho de Kim [53] estamos
especificamente investigando intervenções em mulheres, onde conhecido dimorfismo sexual
particularmente em resposta à nutrição são bem definidas [14], potencialmente explicando por
que as diferenças são observadas nos resultados dos dois estudos.
Em resumo, nossos dados atuais expandem as descobertas de nosso trabalho anterior de que
um suplemento de aminoácido de baixa dose enriquecido com leucina proporciona estimulação
aguda (talvez máxima) da MPS em mulheres idosas, com nossos dados atuais mostrando apenas
1,5 g de LEAA MPS para níveis equivalentes a 40 g de WP (uma dose conhecida por estimular ao
máximo a MPS em homens adultos) tanto em repouso como após o exercício. Isto suporta as
evidências potenciais e de longo prazo [53]para a eficácia de suplementos de baixa dose de LEAA
como estratégias para apoiar a manutenção da massa muscular no envelhecimento da
população feminina. Com base nesses achados, seria prudente investigar a eficácia em coortes
maiores para verificar se essas respostas agudas à LEAA de baixa dosagem são traduzíveis e
reprodutíveis em períodos de suplementação mais crônicos.
Declaração de autoria
PJA, HK, KS, PLG, JW e JL conceberam e projetaram o estudo. SB, WKM & ML realizaram toda a
coleta de dados. DJW, BEP, JC, ML, MSB e DR realizaram o processamento de amostras, análise
de dados e construção de figuras. Todos os autores contribuíram para a elaboração e redação
do manuscrito final.
Declaração de conflito de interesse
Hisamine Kobayashi é funcionário da Ajinomoto Co., Inc. Todos os outros autores declaram não
haver conflitos de interesse.
Fontes de financiamento
Este trabalho foi apoiado pela Ajinomoto Co., Inc .; o Conselho de Pesquisa Médica[número de
concessão MR / K00414X / 1 ]; e Arthritis Research UK [número de concessão 19891 ]. DJ
Wilkinson era um pesquisador de pós-doutorado financiado pelo Centro MRC-ARUK de Pesquisa
em Envelhecimento Musculoesqueléticoconcedido às Universidades de Nottingham e
Birmingham.
Agradecimentos
Gostaríamos de agradecer a Margaret Baker e Amanda Gates por sua assistência técnica
especializada na realização desses estudos.
Referências
[1]
Relatório sobre o envelhecimento de 2012 - Projeções econômicas e orçamentárias para os

países membros da UE27 (2010–2060) ( 2012 )
[2]
WK Mitchell , J. Williams , P. Atherton , M. Larvin , J. Lund , M. NariciSarcopenia, dinapenia e o

impacto do avanço da idade no tamanho e na força do músculo esquelético humano: uma
revisão quantitativa
Front Physiol , 3 ( 2012 ) , p. 260
[3]
VE Arango-Lopera , Arroyo P. , LM Gutiérrez-Robledo , Mu Pérez-

Zepeda , M. CesariMortalidade como um resultado adverso da sarcopenia
J Nutr Health Ageing , 17 ( 2013 ) , pp. 259 - 262
CrossRefView Record no Scopus
[4]
RA Fielding , B. Vellas , WJ Evans , S. Bhasin , JE Morley , AB Newman , et al.Sarcopenia: uma

condição não diagnosticada em idosos. Definição atual de consenso: prevalência, etiologia e
consequências. Grupo de trabalho internacional sobre sarcopenia
J Am Med Dir Assoc , 12 ( 2011 ) , pp. 249 - 256
ArtigoDownload PDFVer Record in Scopus
[5]
P. Srikanthan , AL Hevener e AS Karlamangla Asarcopenia exacerba os achados de resistência à
insulina e disglicemia associados à obesidade do National Health and Nutrition Examination
Survey III
PLoS One , 5 ( 2010 ) , p. e10805
CrossRef
[6]
MS Brook , DJ Wilkinson , BE Phillips , J. Pérez-Schindler , A. Philp , K. Smith , et ai.Homeostase

do músculo esquelético e plasticidade na juventude e no envelhecimento: impacto da nutrição
e do exercício
Acta Physiol (Oxf) ( 2015 ) , 10.1111 / apha.12532
[7]
PJ Atherton , T. Etheridge , PW Watt , D. Wilkinson , A. Selby , D. Rankin , et al.Efeito total do

músculo após a proteína oral: concordância dependente do tempo e discordância entre a
síntese protéica muscular humana e a sinalização mTORC1
Am J Clin Nutr , 92 ( 2010 ) , pp. 1080 - 1088
[8]
WK Mitchell , BE Phillips , JP Williams , D. Rankin , J. N. Lund , K. Smith , et al.Um mecanismo

dependente da dose, em vez de dependente do perfil, regula o efeito “músculo-completo” em
resposta à ingestão oral de aminoácidos essenciais em homens jovens
J Nutr , 145 ( 2015 ) , p. 207 - 214
[9]
SM Phillips , KD Tipton , A. Aarsland , SE Lobo , RR WolfeSíntese de proteína de músculo

misturada e desarranjo depois de exercício de resistência em humanos
Am J Physiol , 273 ( 1997 ) , pp. E99 - E107

[10]
BF Miller , JL Olesen , M. Hansen , S. Døssing , RM Crameri , RJ Welling , et al.Síntese

coordenada de colágeno e proteína muscular no tendão patelar humano e no músculo
quadríceps após o exercício
J Physiol , 567 ( 2005 ) , pp. 1021 - 1033
[11]
DJ Cuthbertson , J. Babraj , K. Smith , E. Wilkes , MJ Fedele , K. Esser , et al.Sinalização

anabólica e síntese protéica no músculo esquelético humano após encurtamento ou
alongamento dinâmico
Am J Physiol Endocrinol Metab , 290 ( 2006 ) , pp. E731 - E738
[12]
C. Guillet , M. Prod'homme , M. Balage , P. Gachon , C. Giraudet , L. Morin , et ai.Resposta

anabólica prejudicada da síntese de proteína muscular está associada à desregulação da S6K1
em humanos idosos
FASEB J , 18 ( 2004 ) , pp. 1586 - 1587
Visualizar registro no Scopus
[13]
D. Cuthbertson , K. Smith , J. Babraj , G. Leese , T. Waddell , P. Atherton , et al.Os déficits de

sinalização anabolizantes são a base da resistência de aminoácidos ao envelhecimento,
envelhecimento muscular
FASEB J , 19 ( 2005 ) , pp. 422 - 424
[14]
GI Smith , Reeds DN , AM Hall , Câmaras KT , BN Finck , B. MittendorferEfeito sexualmente

dimórfico do envelhecimento na síntese de proteínas do músculo esquelético
Biol Sex Differ , 3 ( 2012 ) , p. 11
[15]
E. Volpi , B. Mittendorfer , BB Rasmussen , RR WolfeA resposta do anabolismo de proteína

muscular a hiperaminoacidemia combinada e hiperinsulinemia induzida por glicose é
prejudicada em idosos
J Clin Endocrinol Metab , 85 ( 2000 ) , pp. 4481 - 4490
[16]
DR Moore , TA Churchward-Venne , O. Witard , L. Breen , NA Burd , KD Tipton , et al.Ingestão

de proteína para estimular a síntese de proteínas miofibrilares requer maior ingestão relativa
de proteína em idosos saudáveis versus homens mais jovens
J Gerontol Ser Uma Biol Sci Med Sci , 70 ( 2015 ) , pp. 57 - 62
[17]
B. Shad , J. Thompson , L. BreenA resposta sintética da proteína muscular ao exercício e à

nutrição baseada em aminoácidos diminui com o avançar da idade? Uma revisão sistemática
[18]
V. Kumar , A. Selby , D. Rankin , R. Patel , P. Atherton , W. Hildebrandt , et ai.Diferenças

relacionadas à idade na relação dose-resposta da síntese protéica muscular ao exercício
resistido em homens jovens e idosos
J Physiol , 587 ( 2009 ) , pp. 211 - 217
[19]
V. Kumar , PJ Atherton , A. Selby , D. Rankin , J. Williams , K. Smith , et ai.Respostas sintéticas
da proteína muscular ao exercício: efeitos da idade, volume e intensidade
J Gerontol Ser Uma Biol Sci Med Sci , 67 ( 11 ) ( 2,012 novembro ) , pp. 1170 - 1177
[20]
MS Brook , DJ Wilkinson , Mitchell WK , Lund JN , BE Phillips , NJ Szewczyk , et al.Déficits

síncronos na síntese cumulativa de proteína muscular e biogênese ribossômica subjacentes à
resistência anabólica relacionada ao envelhecimento ao exercício em humanos
J Physiol , 594 ( 24 ) ( 2016 15 de dezembro ) , pp. 7399 - 7417
[21]
CA Greig , C. Gray , D. Rankin , A. Young , V. Mann , B. Noble , et al.Blunting de respostas

adaptativas ao treinamento de resistência em mulheres com mais de 75 anos
Exp Gerontol , 46 ( 2011 ) , pp. 884 - 890
[22]
K. Smith , JM Barua , PW Watt , Scrimgeour CM , MJ RennieInundação com L- [1-13C] leucina

estimula a incorporação de proteína muscular humana de L- [1-13C] valina continuamente
infundida
Am J Physiol , 262 ( 1992 ) , pp. E372 - E376
[23]
K. Smith , Reynolds N. , S. Downie , A. Patel , Rennie MJEfeitos de inundação de aminoácidos

na incorporação de aminoácidos marcados em proteína muscular humana
Am J Physiol , 275 ( 1998 ) , pp. E73 - E78
[24]
DJ Wilkinson , T. Hossain , DS Hill , BE Phillips , H. Crossland , J. Williams , et al.Efeitos da
leucina e do seu metabolito β-hidroxi-β-metilbutirato no metabolismo proteico do músculo
esquelético humano
J Physiol , 591 ( 2013 ) , pp. 2911 - 2923
[25]
W. Mitchell , D. Wilkinson , B. Phillips , J. Lund , K. Smith , P. AthertonRespostas do

metabolismo das proteínas do músculo esquelético humano à nutrição de aminoácidos
Adv Nutr , 7 ( 2016 ) , pp. 828S - 838S
CrossRef
[26]
PJ Atherton , K. Smith , T. Etheridge , D. Rankin , MJ RennieRespostas de sinalização anabólicas

distintas a aminoácidos em células do músculo esquelético C2C12
Aminoácidos , 38 ( 2010 ) , pp. 1533 - 1539
[27]
SSI Bukhari , BE Phillips , DJ Wilkinson , membro MC , D. Rankin , WK Mitchell , et al.A ingestão

de aminoácidos essenciais ricos em leucina em baixas doses estimula o anabolismo muscular
de forma equivalente à proteína de soro de leite em bolus em mulheres idosas em repouso e
após o exercício
[28]
P. Atherton , V. Kumar , A. Selby , D. Rankin , W. Hildebrandt , B. Phillips , et al.Enriquecer uma

bebida proteica com leucina aumenta a síntese de proteína muscular após o exercício de
resistência em homens jovens e idosos
Clin Nutr , 36 ( 3 ) ( 2017 junho ) , pp. 888 - 895

[29]
GI Smith , P. Atherton , DT Villareal , TN Frimel , D. Rankin , MJ Rennie , et al.Diferenças na

síntese protéica muscular e na sinalização anabólica no estado pós-absortivo e em resposta a
alimentos em homens e mulheres de 65 a 80 anos
PLoS One , 3 ( 2008 ) , p. e1875
CrossRef
[30]
TB Symons , M. Sheffield-Moore , RR Wolfe , D. Paddon-JonesUma porção moderada de

proteína de alta qualidade estimula a síntese proteica de músculo esquelético em indivíduos
jovens e idosos
J Am Diet Assoc , 109 ( 2009 ) , pp. 1582 - 1586
[31]
PT Merriwether , HH Host , DR SinacoreÍndicessarcopênicosem idosos da comunidade
J Geriatr Phys Ther , 35 ( 2012 ) , pp. 118 - 125
[32]
P. Dietrichson , J. Coakley , Smith PE , RD Griffiths , TR Helliwell , RH EdwardsConchotome e

biópsia percutânea de agulha do músculo esquelético
J Neurol Neurosurg Psychiatry , 50 ( 1987 ) , pp. 1461 - 1467
[33]
BE Phillips , PJ Atherton , Varadhan K. , DJ Wilkinson , M. Limbo , AL Selby , et al.O realce

farmacológico do fluxo sanguíneo microvascular da perna e do músculo não aumenta as
respostas anabólicas no músculo esquelético de homens jovens sob condições de alimentação

[34]
C. Welinder ,coloração deL. EkbladCoomassie como controle de carregamento na análise de

Western blot
J Proteome Res , 10 ( 2011 ) , pp. 1416 - 1419
[35]
Parede BT , ML Dirks , T. Snijders , FB Stephens , JMG Senden , M.-L. Verscheijden , et al.Atrofia

de desuso muscular em curto prazo não está associada com aumento da deposição de lipídios
intramusculares ou um declínio na atividade máxima de enzimas mitocondriais importantes
em machos jovens e mais velhos
Exp Gerontol , 61 ( 2015 ) , pp. 76 - 83
[36]
CS Fry , MJ Drummond , EL Glynn , Dickinson JM , DM Gundermann , KL Timmerman , et

al.Envelhecimento prejudica sinalização mTORC1 no músculo esquelético humano induzido
por contração e síntese de proteínas
Skelet Muscle , 1 ( 2011 ) , p. 11
CrossRef
[37]
EA Wilkes , AL Selby , PJ Atherton , R. Patel , D. Rankin , K. Smith , et al.Blunting da inibição de

insulina de proteólise em pernas de idosos pode contribuir para a sarcopenia relacionada à
idade
Am J Clin Nutr , 90 ( 2009 ) , pp. 1343 - 1350
[38]
I.-Y. Kim , S. Schutzler , A. Schrader , H. Spencer , P. Kortebein , N. Deutz , et al.A quantidade de
ingestão de proteína na dieta, mas não o padrão de ingestão, afeta o balanço líquido de
proteínas, principalmente por meio de diferenças na síntese protéica em adultos mais velhos
[39]
JM Dickinson , DM Gundermann , Walker DK , Reidy PT , MS Borack , MJ Drummond , et

al.Ingestão de aminoácidos enriquecidos com leucina após exercício resistido prolonga a
síntese proteica miofibrilar e a expressão de transportadores de aminoácidos em homens
idosos
J Nutr , 144 ( 2014 ) , pp. 1694 - 1702
[40]
CS Katsanos , H. Kobayashi , M. Sheffield-Moore , A. Aarsland , RR WolfeUma alta proporção de

leucina é necessária para a estimulação ideal da taxa de síntese protéica muscular por
aminoácidos essenciais em idosos
[41]
VL Fulgoni III Consumoatual de proteína na América: análise do Inquérito Nacional de Saúde e

Nutrição, 2003-2004
Am J Clin Nutr , 87 ( 2008 ) , pp. 1554S - 1557S
[42]
SB Wilkinson , MA Tarnopolsky , MJ Macdonald , JR Macdonald , D. Armstrong , SM PhillipsO

consumo de leite desnatado fluido promove uma maior acumulação de proteína do músculo
após o exercício de resistência do que o consumo de uma bebida de soja-proteína
isonitrogenadas e isoenergética
Am J Clin Nutr , 85 ( 2007 ) , pp. 1031 - 1040

[43]
DW West , NA Burd , VG Coffey , Baker SK , LM Burke , Hawley JA , et al.Aminoacidemia rápida

aumenta a síntese proteica miofibrilar e as respostas de sinalização intramuscular anabólica
após o exercício resistido
Am J Clin Nutr , 94 ( 2011 ) , pp. 795 - 803
[44]
G. Parise , KE YarasheskiA utilidade do treino de resistência e suplementação de aminoácidos

para reverter osdecréscimosassociados à idade na massa e função das proteínas musculares
Curr Opin Clin Nut Metab Care , 3 ( 2000 ) , pp. 489 - 495
[45]
PL Greenhaff , Karagounis LG , N. Peirce , Simpson EJ , M. Hazell , R. Layfield , et

al.Desassociação entre os efeitos de aminoácidos e insulina na sinalização, ligase de ubiquitina
e turnover protéico no músculo humano
[46]
WK Mitchell , BE Phillips , JP Williams , D. Rankin , K. Smith , JN Lund , et al.O desenvolvimento

de uma nova abordagem de ultra-som com contraste Sonovue ™ revela características
temporais e relacionadas à idade das respostas microvasculares musculares à alimentação
Physiol Rep , 1 ( 2013 ) , p. e00119
[47]
A. Hernandez-Garcia , D. Colombo , R. Manjarin , H. Nguyen , A. Suryawen , RA Orellana , et

al.Suplementação de leucina estimula a síntese protéica e reduz a ativação do sinal de
degradação no músculo de porcos recém-nascidos durante endotoxemia aguda
[48]
Y. Luiking , NE Deutz , R. Memelink , S. Verlaan , R. Wolfe Asíntese protéica muscular pós-

prandial é maior após um suplemento enriquecido em leucina com alta proteína de soro do
que após um produto lácteo em idosos saudáveis: um estudo randomizado controlado
Nutr J , 13 ( 2014 Jan 22 ) , p. 9
[49]
PJ Garlick , J. Wernerman , MA McNurlan , P. Essen , GE Lobley , E. Milne , et al.Medição da

taxa de síntese proteica no músculo de homens jovens pós-absortivos por injeção de uma
“dose de alagamento” de leucina [1-13C]
Clin Sci (Lond) , 77 ( 1989 ) , pp. 329 - 336
[50]
TA Churchward-Venne , L. Breen , DM Di Donato , AJ Hector , CJ Mitchell , DR Moore , et

al.Suplementação de leucina de uma bebida de macronutrientes de baixa proteína aumenta
a síntese de proteínas miofibrilares em homens jovens: um estudo duplo-cego randomizado
Am J Clin Nutr , 99 ( 2014 ) , pp. 276 - 286
[51]
KL Timmerman , Lee JL , HC Dreyer , Dhanani S. , EL Glynn , CS Fry , et al.A insulina estimula a

síntese proteica de músculo esquelético humano através de um mecanismo indireto
envolvendo vasodilatação dependente do endotélio e alvo de rapamicina em mamíferos alvo
1 sinalização
J Clin Endocrinol Metab , 95 ( 2010 ) , pp. 3848 - 3857
[52]
J. Baum , I.-Y. Kim , R. WolfeConsumo de proteína e idosos: qual o nível ótimo de ingestão?
Nutrientes , 8 ( 2016 ) , p. 359
CrossRef
[53]
H. Kim , T. Suzuki , K. Saito , H. Yoshida , H. Kobayashi , H. Kato , et al.Efeitos do exercício e da

suplementação de aminoácidos sobre a composição corporal e a função física em idosas
japonesas idosas da comunidade: um estudo controlado randomizado
J Am Geriatr Soc , 60 ( 2012 ) , pp. 16 - 23
ArtigoDownload PDFCrossRefView Record no Scopus
[54]
S. Verhoeven , K. Vanschoonbeek , LB Verdijk , R. Koopman , WKWH Wodzig , P. Dendale , et

al.Suplementação de leucina a longo prazo não aumenta a massa ou força muscular em
homens idosos saudáveis
Am J Clin Nutr , 89 ( 2009 ) , pp. 1468 - 1475
Autores contribuíram igualmente.
© 2017 os autores. Publicado pela Elsevier Ltd.
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Nutrição Clínica

Disponível online 23 setembro 2017

Em Pressione, Prova Corrigida Quais são os artigos de Prova Corrigida?

Autor ligações painel aberto sobreposiçãoDaniel J. Wilkinson um 1Syed SI Bukhari um 1Bethan

MRC / ARUK Centro de Excelência em Pesquisas em Envelhecimento Musculoesquelético,

Ajinomoto Co., Inc., Tóquio 104-8315, Japão

Recebido em 9 de abril de 2017, Aceito em 19 de setembro de 2017, Disponível online em 23 de

https://doi.org/10.1016/j.clnu.2017.09.008Obtenha direitos e conteúdo

Acesso aberto financiado pelo Conselho de Pesquisa Médica

Sob uma Creative Commons licença

Respostas anabólicas prejudicadas à nutrição e ao exercício contribuem para a perda

A insulinemia plasmática e a presença de EAA foram maiores e mais prolongadas com o WP do

Síntese de proteína muscular

Suplementação de aminoácidos de baixa dose

síntese de proteína muscular

aminoácidos essenciais enriquecidos com leucina

fluxo sanguíneo da perna

fluxo sanguíneo microvascular

índice de massa corporal

índice de músculo esquelético

Solução salina tris tamponada / Tween 20

ultra-som reforçado com contraste

Os cuidados de saúde para o envelhecimento das populações representam um importante

As CEA, em particular a leucina , têm papéis importantes na regulação do maquinário sintético

2.1 . Características do sujeito e ética

Todos os estudos foram realizados de acordo com a Declaração de Helsinque e registrados

Índice de Músculo Esquelético(SMI)=(Massa Muscular Total do Corpo Esquelético/Massa

Altura (m) 1,62 ± 0,02 1,64 ± 0,02 1,60 ± 0,02

Peso (kg) 65,4 ± 3,5 68,4 ± 5,4 65,0 ± 4,6

IMC (kg m −2 ) 25,1 ± 1,3 25,1 ± 1,3 25,0 ± 1,5

SMI 6,32 ± 0,11 6,18 ± 0,13 6,13 ± 0,35

2.2 . Procedimentos de estudo

Os procedimentos do estudo seguiram nossos protocolos padrão conforme descrito

Tabela 2 . Essencial de aminoácidos composição de cada tipo de ração (inclusive de dados de

l- leucina 0,6 1,2 2,4 2 4

l- isoleucina 0,16 0,32 0,64 1,4 2,8

l -Valino 0,165 0,33 0,66 1,2 2,4

l- treonina 0,14 0,28 0,56 1,4 2,8

l- lisina 0,25 0,5 1,0 1,8 3,6

l- Metionina 0,05 0,1 0,2 0,4 0,8

l- histidina 0,025 0,05 0,1 0,4 0,8

l- fenilalanina 0,1 0,2 0,4 0,6 1,2

l- triptofano 0,01 0,02 0,04 0,4 0,8

2. Baixar imagem em tamanho real

A Fig. 1 . Protocolo do estudo: efeitos de aminoácidos enriquecidos com leucina (LEAA)

2.2.1 . Medição de insulina plasmática e concentrações de AA

Mediu-se a concentração plasmática de insulina utilizando um ensaio imunoabsorvente ligado

2.2.3 . Medição de MPS

As proteínas miofibrilares foram isoladas, hidrolisadas e derivadas usando nossas técnicas

onde Δ E m representa a mudança no processo de enriquecimento de limite l -

2.2.4 . Imunotransferência para atividade da via de sinalização de AKT-mTORc1 (ou seja,

O immunoblotting foi realizado como descrito anteriormente [26] usando a fração

2.3 . análise estatística

3.1 . Concentrações plasmáticas de AA e insulina

2. Baixar imagem em tamanho real

Fig. 2 . Efeitos no decurso do tempo de 1,5 g, 6 g de LEAA ou 40 g de WP

3.2 . Fluxo sanguíneo da perna (FSB) e fluxo sanguíneo microvascular (FSM)

2. Baixar imagem em tamanho real

3.3 . Efeitos do WP e LEAA dose resposta na MPS

2. Baixar imagem em tamanho real

3.4 . Efeitos na sinalização anabólica muscular

2. Baixar imagem em tamanho real

Fig. 5 . Os efeitos de 1,5 g, 6 g de LEAA ou 40 g de WP nas respostas de sinalização muscular ao