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Local de recolha e espécies:

- Monsanto: ​P. pinea, P. halepensis, P. canariensis
- Serra da Lousã: ​P. pinaster, P. sylvestris, P. nigra
- Melides (local 1), Herdade da Apostiça (local 2), Nazaré (local 3): ​P. pinea, P. pinaster
- Leiria: ​P. pinaster

Tipo de amostras recolhidas:

- floema da casca no tronco (recolhidas ao nível da DAP e do início dos ramos)
- floema da casca nos ramos
- agulhas dos ramos (recolhidas as agulhas de início e de fim de cada ramo)

Quantidade de amostras​:
- 6 árvores de cada espécie
- floema da casca no tronco: 6 amostras de floema de cada espécie
- floema da casca nos ramos: 3 amostras de floema (3 ramos) de cada espécie (3x6=18 amostras de cada
espécie)
- agulhas dos ramos: 2 recolhas de agulhas em cada um dos 3 ramos de cada espécie (2x3x6=32
amostras de cada espécie)

Novas recolhas irão decorrer no fim da estação quente (Outubro) e na estação fria (Fevereiro) para as
espécies dos locais Melides, Herdade da Apostiça, Nazaré e Leiria.

Objetivos principais
1. Química sumativa
2. Composição química a nível de extratos lipofílicos
3. Composição química a nível de extratos polares (Etanol:Água) por HPLC-MS e GC-MS
4. Extratos polares: determinação de flavonoides e fenóis, taninos hidrolisados e condensados e
outras famílias de compostos por cromatografia de coluna e, eventualmente por colorimetria)
5. Determinação do teor em azoto
6. Para U.Évora talvez seja interessante o estudo da ação dos extratos completos (apolares e
polares) no nemátodo devido ao possível efeito sinergético

Conclusões

Comparar a composição química específica entre espécies

Comparar a composição química dos floemas e agulhas de Pinheiro bravo saudável e atacados pelo
nemátodo, amostras recolhidas na Lousã.

Verificar se existe variabilidade significativa entre a composição das espécies ​P. pinea ​e ​P. pinaster a​ o
longo das estações do ano (clima) com as amostras recolhidas na Nazaré e Leiria a norte do Tejo, e
Melides e Apostiça a sul do Tejo.

Com as árvores da Carla Faria poderemos comparae a composição química específica entre espécies
saudáveis com a composição das que se encontram feridas e das que foram atacadas pelo nemátodo.

Comparar as que se desenvolveram em condições controladas com as recolhidas no campo e veremos a

influência do clima na composição.

Comparamos, no caso do pinheiro bravo atacado pelo nemátodo as amostras recolhidas a Lousã com as
da Carla e poderemos ver a influência do clima no ataque do nemátodo.