11.1.
2011 PT Jornal Oficial da União Europeia
REGULAMENTO (UE) N.o 15/2011 DA COMISSÃO
de 10 de Janeiro de 2011
que altera o Regulamento (CE) n.o
2074/2005 no que respeita aos métodos de análise reconhecidos
para detectar biotoxinas marinhas em moluscos bivalves vivos
(Texto relevante para efeitos do EEE)
A COMISSÃO EUROPEIA,
Tendo em conta o Tratado sobre o Funcionamento da União
Europeia,
Tendo em conta o Regulamento (CE) n.o 853/2004 do Parla­
mento Europeu e do Conselho, de 29 de Abril de 2004, que
estabelece regras específicas de higiene aplicáveis aos géneros
alimentícios de origem animal (1), nomeadamente o
artigo 11.o, n.o 4,
Tendo em conta o Regulamento (CE) n.o 854/2004 do Parla­
mento Europeu e do Conselho, de 29 de Abril de 2004, que
estabelece regras específicas de organização dos controlos ofi­
ciais de produtos de origem animal destinados ao consumo
humano (2), nomeadamente o artigo 18.o, n.o 13, alínea a),
Considerando o seguinte:
(1) O Regulamento (CE) n.o 854/2004 estabelece regras es­
pecíficas de organização dos controlos oficiais de produ­
tos de origem animal e o Regulamento (CE)
n.o 853/2004 estabelece regras específicas de higiene
aplicáveis aos géneros alimentícios de origem animal.
As medidas de execução desses regulamentos, no que
respeita aos métodos de análise reconhecidos para detec­
tar biotoxinas marinhas, encontram-se estabelecidas no
Regulamento (CE) n.o 2074/2005 da Comissão, de
5 de Dezembro de 2005, que estabelece medidas de
execução para determinados produtos ao abrigo do Re­
gulamento (CE) n.o 853/2004 do Parlamento Europeu e
do Conselho e para a organização de controlos oficiais
ao abrigo dos Regulamentos (CE) n.o 854/2004 do Par­
lamento Europeu e do Conselho e n.o 882/2004 do
Parlamento Europeu e do Conselho, que derroga o Re­
gulamento (CE) n.o 852/2004 do Parlamento Europeu e
do Conselho e altera os Regulamentos (CE) n.o 853/2004
e (CE) n.o 854/2004 (3). Atendendo aos novos dados
científicos, torna-se necessário alterar essas medidas de
execução.
(2) Em Julho de 2006, a Comissão solicitou à Autoridade
Europeia para a Segurança dos Alimentos (AESA) que
formulasse um parecer científico sobre a avaliação dos
actuais limites máximos e métodos de análise definidos
para determinadas biotoxinas marinhas, conforme estabe­
lecidos na legislação comunitária, incluindo novas toxinas
emergentes, e a sua relação com a saúde humana. O
último de uma série de pareceres foi publicado em
24 de Julho de 2009.
(3) O bioensaio em ratos (MBA) e o bioensaio em ratazanas
(RBA) são os métodos oficiais para a detecção de bioto­
xinas lipofílicas. O Painel Científico dos Contaminantes
(1) JO L 139 de 30.4.2004, p. 55.
(2) JO L 139 de 30.4.2004, p. 206.
(3) JO L 338 de 22.12.2005, p. 27.
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da Cadeia Alimentar da AESA referiu que estes bioensaios
apresentavam lacunas e não eram considerados um ins­
trumento adequado para efeitos de controlo, devido à
elevada variabilidade dos resultados, à insuficiente capa­
cidade de detecção e à especificidade limitada.
(4) Desenvolveram-se recentemente alguns métodos alterna­
tivos aos métodos biológicos para determinar as toxinas
marinhas com limites de detecção (LOD) inferiores, tendo
esses métodos alternativos sido testados, com resultados
positivos, em estudos de pré-validação.
(5) Num estudo interlaboratorial de validação, realizado pe­
los Estados-Membros e coordenado pelo laboratório de
referência da União Europeia para as biotoxinas marinhas
(LR-UE), validou-se um método de cromatografia líquida
associado à espectrometria de massa (LC-MS/MS). Este
método está disponível ao público, para consulta, na
página Web do LR-UE (http://www.aesan.msps.es/en/
/CRLMB/web/home.shtml). Esta técnica validada de cro­
matografia líquida (LC) e espectrometria de massa (MS)
deve ser aplicada como método de referência na detecção
de toxinas lipofílicas e utilizada, por rotina, tanto para
efeitos de controlos oficiais em qualquer fase da cadeia
alimentar, como pelos operadores das empresas do sector
alimentar nos seus auto-controlos.
(6) Pode aplicar-se na detecção de toxinas lipofílicas qualquer
outro método reconhecido, diferente da cromatografia
líquida (LC) e da espectrometria de massa (MS), desde
que preencha os critérios de desempenho estabelecidos
pelo LR-UE para o método. Esses métodos devem ser
validados intralaboratorialmente e obter resultados posi­
tivos nos testes realizados no âmbito de um esquema
reconhecido de testes de proficiência. Em caso de con­
testação dos resultados, o método de referência deve ser
o método LC-MS/MS do LR-UE.
(7) Devem continuar a utilizar-se os métodos biológicos du­
rante um certo período, a fim de permitir que os Estados-
-Membros adaptem os seus métodos ao método químico.
Após este período, os métodos biológicos devem ser
utilizados, não por rotina, mas apenas durante a moni­
torização periódica de zonas de produção para detecção
de toxinas marinhas novas ou desconhecidas.
(8) O Regulamento (CE) n.o 2074/2005 deve, pois, ser alte­
rado em conformidade.
(9) As medidas previstas no presente regulamento estão em
conformidade com o parecer do Comité Permanente da
Cadeia Alimentar e da Saúde Animal,
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ADOPTOU O PRESENTE REGULAMENTO: Artigo 2.o

Artigo 1.o O presente regulamento entra em vigor no vigésimo dia se­
guinte ao da sua publicação no Jornal Oficial da União Europeia.
n.o
O anexo III do Regulamento (CE) 2074/2005 é alterado em
conformidade com o anexo do presente regulamento. É aplicável a partir de 1 de Julho de 2011.

O presente regulamento é obrigatório em todos os seus elementos e directamente aplicável em

todos os Estados-Membros.

Feito em Bruxelas, em 10 de Janeiro de 2011.

Pela Comissão
O Presidente
José Manuel BARROSO
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ANEXO

No anexo III do Regulamento (CE) n.o 2074/2005, o capítulo III passa a ter a seguinte redacção:

«CAPÍTULO III
MÉTODOS DE DETECÇÃO DAS TOXINAS LIPOFÍLICAS
A. Metodologia química
1. O método LC-MS/MS do LR-UE é o método de referência a utilizar na detecção das toxinas marinhas referidas no
anexo III, secção VII, capítulo V, ponto 2, alíneas c), d) e e), do Regulamento (CE) n.o 853/2004. Este método deve
determinar, pelo menos, os seguintes compostos:

— toxinas do grupo do ácido ocadaico: OA, DTX1, DTX2, DTX3 e respectivos ésteres,

— toxinas do grupo das pectenotoxinas: PTX1 e PTX2,

— toxinas do grupo das iessotoxinas: YTX, 45 OH YTX, homo YTX e 45 OH homo YTX,

— toxinas do grupo dos azaspirácidos: AZA1, AZA2 e AZA3.

2. Deve calcular-se a equivalência da toxicidade total, utilizando os factores de toxicidade equivalente (TEF) recomen­
dados pela AESA.

3. Caso sejam descobertos novos análogos significativos para a saúde pública, os mesmos devem ser incluídos na
análise. Deve calcular-se a equivalência da toxicidade total utilizando os factores de toxicidade equivalente (TEF)
recomendados pela AESA.

4. Podem utilizar-se, alternativa ou complementarmente ao método LC-MS/MS do LR-UE, outros métodos, como o
método de cromatografia líquida (LC) associado à espectrometria de massa (MS), a cromatografia líquida de alta
resolução (HPLC) com detecção adequada, os imunoensaios e os ensaios funcionais, como o ensaio de inibição de
fosfatase, desde que:

a) Individualmente ou combinados, sejam capazes de detectar, pelo menos, os análogos identificados na parte A,
ponto 1, do presente capítulo; devem definir-se, se necessário, critérios mais adequados;

b) Cumpram os critérios de desempenho estabelecidos para o método pelo LR-UE. Esses métodos devem ser
validados intralaboratorialmente e apresentar resultados positivos em ensaios realizados no âmbito de um
esquema reconhecido de testes de proficiência. O LR-UE deve apoiar as actividades conducentes à validação
interlaboratorial da técnica, de modo a permitir uma normalização formal;

c) A sua aplicação proporcione um nível equivalente de protecção da saúde pública.

B. Métodos biológicos
1. Pode ainda utilizar-se, até 31 de Dezembro de 2014, um conjunto de procedimentos de bioensaio em ratos, que
diferem na parte submetida a teste (hepato-pâncreas ou corpo inteiro) e nos solventes utilizados na extracção e
purificação, na detecção das toxinas marinhas referidas no anexo III, secção VII, capítulo V, ponto 2, alíneas c), d) e
e), do Regulamento (CE) n.o 853/2004, a fim de permitir que os Estados-Membros adaptem os seus métodos ao
método LC-MS/MS definido na parte A, ponto 1, do presente capítulo.

2. A sensibilidade e a selectividade dependem da escolha dos solventes utilizados na extracção e na purificação, o que
deve ser tido em consideração ao decidir-se sobre o método a utilizar, por forma a abranger toda a gama de
toxinas.

3. Pode utilizar-se um único bioensaio, em ratos, recorrendo à extracção com acetona para detectar o ácido ocadaico,
as dinofisistoxinas, os azaspirácidos, as pectenotoxinas e as iessotoxinas. Este ensaio pode ser complementado, se
necessário, com uma operação de partição líquido-líquido com acetato de etilo/água ou diclorometano/água, a fim
de remover potenciais interferentes.

4. Devem utilizar-se três ratos para cada teste. Se dois dos três ratos morrerem no prazo de 24 horas após a
inoculação com um extracto equivalente a 5 g de hepato-pâncreas ou a 25 g de corpo inteiro, o resultado deve
considerar-se positivo quanto à presença, a níveis superiores aos estabelecidos, de uma ou mais toxinas referidas no
anexo III, secção VII, capítulo V, ponto 2, alíneas c), d) e e), do Regulamento (CE) n.o 853/2004.
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5. Pode utilizar-se um bioensaio, em ratos, recorrendo à extracção com acetona seguido de uma operação de partição
líquido-líquido com éter dietílico para detectar o ácido ocadaico, as dinofisistoxinas, as pectenotoxinas e os
azaspirácidos, mas este bioensaio não pode utilizar-se para detectar as iessotoxinas, dado que podem ocorrer
perdas destas toxinas durante a fase de partição. Devem utilizar-se três ratos para cada teste. Se dois dos três
ratos morrerem no prazo de 24 horas após a inoculação com um extracto equivalente a 5 g de hepato-pâncreas ou
a 25 g de corpo inteiro, o resultado deve considerar-se positivo quanto à presença de ácido ocadaico, dinofisis­
toxinas, pectenotoxinas e azaspirácidos a níveis superiores aos estabelecidos no anexo III, secção VII, capítulo V,
ponto 2, alíneas c), e e), do Regulamento (CE) n.o 853/2004.

6. Pode utilizar-se um bioensaio, em ratazanas, para detectar o ácido ocadaico, as dinofisistoxinas e os azaspirácidos.
Devem utilizar-se três ratazanas para cada teste. Uma reacção diarreica em qualquer uma das três ratazanas é
considerada como um resultado positivo à presença de ácido ocadaico, dinofisistoxinas e azaspirácidos a níveis
superiores aos estabelecidos no anexo III, secção VII, capítulo V, ponto 2, alíneas c), e e), do Regulamento (CE)
n.o 853/2004.

C. Após o período estabelecido na parte B, ponto 1, do presente capítulo, deve utilizar-se o bioensaio em ratos apenas
durante a monitorização periódica de zonas de produção e de afinação para detecção de toxinas marinhas novas ou
desconhecidas, com base nos programas de controlo nacionais elaborados pelos Estados-Membros.»