Exame Ciclo Celular e Apoptose

1. A interfase ou durante a interfase:

a) Inclui a mitose
b) É um tempo de mudanças morfológicas relevantes
c) É ativado o APC/C
d) É ativada a ciclina E
e) Há destruição da cromatina por DNAses

2. O heterodímero ciclina B/cdk1:

a) Está permanentemente ativo no ciclo
b) É mais ativo na transição de G2/M
c) É menos ativo na profase
d) Funciona no núcleo, exclusivamente
e) Funciona no complexo Golgi, exclusivamente

3. As proteínas EB1 e EB3:

a) Têm funções distintas durante a mitose
b) Têm as mesmas funções celulares
c) Não são relevantes em mitose
d) Interferem diretamente com o processo de adesão das células após mitose
e) Não possuem uma elevada homologia entre si

4. Os heterodímeros promotores do ciclo celular incluem:

a) Cínase 1/cínase 2
b) Cínase/ciclina
c) Ciclina 1/ciclina
d) Ciclina/microtubule
e) Cdk/microtubule

5. A técnica TUNEL evidencia:

a) Caspases
b) Bcl-2
c) ADN oxidado
d) ADN com mutação
e) ADN com quebras na dupla cadeia

6. A condensina:
a) É multimérica
b) Promove a fosforilação da cromatina para formar os cromossomas
c) Está ativa em todas as fases da mitose
d) É uma enzima proteolítica
e) Não inclui membros da família das proteínas SMC
7. As proteínas BH3 – only da família Bcl-2:
a) São todas citosólicas
b) São todas transmembranares
c) Estabelecem homo e heterodímeros na membrana mitocondrial externa
d) Funcionam com sensores de condições pró-vida
e) Funcionam com sensores de condições pró-apoptose

8. Os fenómenos de apoptose são pouco frequentes nos seguintes tecidos tecido adulto:
a) Epitélio intestinal
b) Medula óssea
c) Linfóide
d) Conjuntivo
e) Ovárico

9. Complete as afirmações:
Na reentrada do ciclo a partir de G0, os mitogénios (sinais extracelulares) interagem
com receptores TK à superfície celular e iniciam um/uma activação da transcrição de
genes essenciais para avançar com o ciclo celular que terá de ser eficaz para
ultrapassar o/a ponto de restrição.

10. A apoptose por insuficiência de fator trópico segue habitualmente a via intrínseca. Os
sinais de morte são percebidos pelos fatores pró-apoptóticos que acionam a inserção
de dímeros Bax/Bak na membrana mitocondrial.

11. O citocromo c com papel importante na cadeia respiratória, interage com o Apaf-1 e a
pró-caspase 9 para formar um multidímero designado apoptossoma.

12. O c-Myc é um exemplo de gene de fase precoce que, uma vez ativado, agirá como
fator de transcrição ativando outros genes, de que são exemplo cdk4 e E2F.

13. A coesina liga os cromossomas até ao fim da metafase. No início da anafase, o APC/C
(ciclossoma) marca a securina com ubiquitina, o que liberta a separase para clivar a
coesina.
V/F

14. A proteína EB3 afeta a estabilidade das adesões focais. V

15. A proteína borealina é um membro do “chromossome passenger complex”.V
16. Em tumores, a disfunção mitocondrial associa-se a um aumento da proliferação celular
e a uma diminuição da capacidade invasiva das células. F

17. As alterações mitocondriais são frequentes tanto em doenças degenerativas como em

cancro. Tendo em conta o papel central da mitocôndria na apoptose, diga de que
modo esta está alterada nos tipos de doença acima referido.

Doenças degenerativas completamente Cancro parcialmente

18. Que tipo de hereditariedade têm as doenças mitocondriais resultantes de mutações

em genes da fosforilação oxidativa codificadas pelo ADN mitocondrial?

R: Materna

19. Qual o papel habitual da proteína E2F? Ativa vários genes que codificam proteínas
envolvidas na síntese de DNA e estimula a transcrição de genes que codificam a ciclina
E, A e CDK2. Assim, o fator E2F atua no fim da fase G1.

20. O que é um checkpoint? É um mecanismo para regular o ciclo e impedir erros durante
a divisão celular. Os checkpoints garantem que os cromossomas estão intactos e que
cada etapa da célula é completada antes da próxima fase. Os checkpoints são sensíveis
ao ambiente celular e a lesões no DNA.
21. Dê um exemplo (referido nas sessões) e descreva uma situação biológica ou do
desenvolvimento em que sejam ativados os mecanismos de apoptose. Células
obsoletas. Ex: embriões humanos com membranas interdigitais que depois
desaparecem.

22.
C
B A
X
22.1. Identifique as proteínas A,B,C. A - ciclina, B – cdk, C - ubiquitinas
22.2. O que aconteceu no evento X? Destruição da ciclina
22.3. Que significado tem o símbolo P, com a radiação, e que importância reveste?
Significa que está fosforilado. É importante pois permite a ativação do complexo
cdk/ciclina.
22.4. Porque motivo a C se liga a A e não a B? Porque a C é um marcador da
proteína que se pretende destruir, neste caso a A.

23. Num estudo de IHC de um folículo linfóide, proveniente da biópsia de um doente com
linfoma, encontrou-se expressão aumentada de Bcl-2. Explique que mecanismo pode
estar a ocorrer nas células marcadas.
A bcl‐2 serve de sensor que reprime a via apoptótica em resposta a estímulos
externos. Como a sua expressão está aumentada, o mecanismo a ocorrer nas células
marcadas poderá ser a inibição da apoptose, o que causará a não destruição das
células com possíveis danos no DNA e poderá estar na origem do linfoma.

24. j
24.1. Indique as mudanças observadas na expressão de Rb, p16 e p27.
Os

níveis de expressão do Rb e p16 diminuíram, enquanto que os de p27 aumentaram.

24.2. Como interpreta os achados descritos na resposta anterior?

Os níveis aumentados de p27 em resposta ao tratamento de erufosina sugerem que a
mesma atua como inibidor do ciclo celular e induz a apoptose. A perda ou défice de
Rb diminui a resposta à quimioterapia.
24.3. Descreva e interprete os efeitos da droga nas proteínas Cdk4, cyclinD3 e
cyclinE2.
Os níveis de Cdk4 mantém-se, praticamente, inalterados.
Os níveis de Ciclina D3 diminuem – inibição da expressão.
Os níveis de Ciclina E2 aumentam ligeiramente – está sobre-expressa no tumor. O que
leva à progressão do ciclo celular e à proliferação descontrolada.

24.4. Qual é para si o mecanismo de ação da erufosina na linha celular referida, que
a torna antineoplásica?
A erufosina induz a apoptose através da via intrínseca.

25.

25.1. Descreva
os

resultados encontrados na blots da pro-caspase 3 e pro-caspase 9. Faça o mesmo

para a PARP.
A expressão de pro-caspase 3 e pro-caspase 9 diminuiu nas células tratadas com Ad-
mda7, comparativamente com as células tratadas com PBS e AD-luc.
Os níveis de expressão de PARP diminuíram com Ad-mda7.

25.2. Interprete o conjunto dos resultados indicando que processo biológico estaria
em curso nas células.
Ad-mda7 induz a morte celular por ativação da pro-caspase 3 e pro-caspase 9 e PARP
nas células tumorais. O que leva à ativação das vias de sinalização celular.

25.3. Descreva a morfologia que as células provavelmente exibiriam após

administração de Ad-mda 7.
As células iriam tornar-se mais pequenas.

26.
26.1. Qual é o processo biológico que a imagem
retrata?
Apoptose
26.2. Descreva e interprete o teor das proteínas Bax e Bak ao longo da experiência.
A expressão das proteínas Bax e Bak mantém-se inalterada o que leva a uma
predominância de proteínas pró-apoptóticas – apoptose.

26.3. Indique uma proteína com teor crescente e outra com teor decrescente e
interprete o significado biológico da variação.
Proteína crescente: BAD
Proteína decrescente: Bcl-2
A BAD é uma proteína pro-apoptótica enquanto a Bcl-2 é anti-apoptótica. O aumento
da BAD e a dimunuição da Bcl-2 leva à indução da apoptose (dependente de
caspases).

26.4. Se fosse necessário complementar este estudo para convencer o editor ou

revisor a aceitar a publicação, indique um procedimento que realizaria e explique
porquê.