Apostila de Estudo Dirigido em Biotecnologia Molecular- Prof ª Cristiane Alves da Fonseca

DIRETRIZES TRABALHO ANTI-SENSO

A tecnologia do anti-senso é utilizada para bloquear ou diminuir a produção de certas proteínas. Isto é feito
utilizando pequenos ácidos nucléicos (oligonucleotídeos) que evitam a tradução da informação contida no DNA,
em proteína. Esta tecnologia é muito empregada no controle de doenças virais, inflamatórias, asma, câncer e
talassemia. Portanto, tem uma importância crescente na área farmacêutica.

- Você irá criar uma droga/medicamento hipotético baseado na tecnologia do anti-senso:

1- O trabalho deve seguir a estrutura de um projeto de pesquisa com:

* introdução/justificativa,
* objetivos (geral e específico)
* metodologia (a parte mais importante do trabalho):
1- escolha da doença e a proteína que se quer inibir;
2- Identificação da sequência genômica (genbank)
3- desenvolvimento da molécula anti-senso,
4- Escolha do veículo (Lipossomas, nanopartículas etc; sugestão: ler o artigo de revisão: os DNA
sintéticos anti-sentido);
5- Composição do medicamento e via de administração
6- Confecção da embalagem (como foi feito o layout? Qual programa usou?) e da bula (em qual se
baseou? Sugestão: ver bula vitravene®)
7- preço sugerido
*resultados esperados
*referências bibliográficas
* anexos (bula, página do genbank, layout da caixa e outros se necessário).

2- Escolher uma doença que pode ser usado a tecnologia do anti-senso (explicar a técnica) –
somente doenças gênicas, cromossômicas não!

3- Descrever a gênese da doença e a proteína que se quer inibir a síntese e explicar porque a
inibição desta proteína gera um tratamento efetivo para a doença (descrever na introdução).

4- Ir ao genBank (http://www.ncbi.nlm.nih.gov) e ver se já existe postado a sequência nucleotídica

da proteína. Criar o anti-senso a partir dessa sequência (ver aula de bioinformática).

5- Parear a sequência (encontrada no genBank) com o anti-senso pela extremidade 5’ do gene.

Colocar cores diferentes. Lembre-se e revise a tradução do mRNA (ver apostila biomol) para que
o pareamento realmente iniba a tradução e seu medicamento hipotético funcione.

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 Apostila de Estudo Dirigido em Biotecnologia Molecular- Prof ª Cristiane Alves da Fonseca

Exemplo:
Figura 1: Criação Hipotética do antisenso
(inicio do gene)
1 GACAAACTTA GTAGTGTTTG TGAGGATTTT GAACAATTAA CACAGTGCGA GCTGTTTCTT
CUUGUUAUU GUGUCACGCU CGACAAAGAA
61 AGCACGAAGA TCTCGATGTC TAAGAAACCA GGAGGGCCCG GCAAAAGCCG GGCTGTCAAT
UCGUGCUUCU AGAGCUACAG AUUCUUUGGU
121 ATGCTAAAAC GCGGAATGCC CCGCGTGTTG TCCTTGACTG GACTGAAGAG GGCAATGTTG
181 AGCCTGATTG ACGGTAGGGG GCCCACACGG TTTGTGTTGG CTCTCTTGGC GTTTTTTAGG
241 TTCACGGCAA TTGCTCCGAC CCGGGCAGTG CTGGATCGAT GGAGAAGTGT GAACAAACAA
301 ACAGCGATGA AACATCTCCT GAGTTTCAAG AAGGAACTAG GAACCTTGAC CAGTGCTATC
361 AACCGGCGGA GCTCAAAACA GAAGAAGAGA GGAGGAAAGA CCGGAATTGC ATTCATGATT
421 GGCTTGATTG CTGGCGTGGG AGCAGTCACT CTCTCCAACT TTCAAGGGAA GGTGATGATG
481 ACGGTGAACG CTACTGACGT CACAGACATT ATCACGATAC CACCGGCCGC TGGAAAGAAC
541 CTGTGCATTG TCAGAGCTAT GGATGTGGGG CACATGTGTG ATGATACTAT CACCTATGAA
601 TGTCCAGTGT TGTCGGCCGG AAATGATCCA GAAGACATTG ACTGCTGGTG ATTGTAAATA
.....10621 (final do gene)

LEGENDA: CÓDON DE INICIAÇÃO

SEQUENCIA DO ANTI-SENSO

SEQUENCIA A SER TRANSCRITA

FONTE: Adaptado - GENBANK – disponível em: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/D00246.1- acesso em: 12

de maio de 2019.

6- Criar um medicamento hipotético para a doença com todas as características farmacológicas

(pegar a bula de um medicamento injetável ou outro já existente para se basear), inclusive o
Lyout da caixa/embalagem (nome comercial, nome genérico, responsável técnico, lote, validade,
fabricante etc) e o excipiente adequado para que o “fármaco” chegue dentro da célula!
(pesquisar: lipossomas? Nanopartículas? Modificações químicas? Outros?)
7- Colocar o preço sugerido.

► Fazer o trabalho em dupla e preparar para apresentação oral na forma de seminário.

►Entregar o trabalho escrito impresso uma semana antes da apresentação.

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