1- Objetivo Determinar a quantidade de Acares redutores totais, como sacarose e glicose, presentes na amostra.

2- Materiais Balo volumtrico de 100 ml Balo volumtrico de 1000 ml Banho-maria Balana Analtica Balana de Preciso Esptula de ao inox Copo griffin de 50 ml Copo griffin de 100 ml Copo griffin de 500 ml Copo griffin de 1000 ml Erlenmeyer de 250 ml Estufa Suporte completo para bureta Bureta graduada com torneira de teflon, de 25 ml Prolas de vidro Basto de vidro Pisseta Pipeta volumtrica de 15 ml Pipeta volumtrica de 20 ml Proveta graduada de 50 ml Proveta graduada de 1.000 ml Bico de Bunsen Tela de amianto

2.1- Reagentes Soluo de Azul de Metileno 1% Soluo de Glicose 0,5% Licor de Causse-Bonnas Soluo de cido Clordrico 1:3 Soluo de Hidrxido de Sdio 2N Soluo de Fenolftalena 1%

2.2- Procedimento -Inverso e neutralizao da amostra Transferir com pipeta volumtrica, 20 ml da amostra prviamente homogeneizada, para um balo volumtrico de 100 ml. Adicionar cerca de 30 ml de gua destilada e agitar. Juntar 4 ml da soluo de cido Clordrico 1:3, agitar e levar o balo ao banho-maria, com temperatura regulada para 65 a 70 oC, por 20 minutos. Decorrido o tempo, esfriar a amostra e adicionar 3 gotas da soluo de Fenolftalena 1%.

Com uma pipeta, adicionar soluo de Hidrxido de Sdio 2N, gota a gota, agitando, at a viragem para cor rsea. Completar o volume do balo com gua destilada para 100 ml e homogeneizar bem. -Titulao da Amostra Preparar 1 erlenmeyer de 250 ml com 50 ml de gua destilada e 5 prolas de vidro em cada frasco. Com pipeta volumtrica, adicionar 15 ml do licor de Causse-Bonnas nos respectivos frascos e agitar. Enxaguar e encher a bureta com a amostra invertida e neutralizada, acertando o menisco no ponto "0". Fixar a bureta no suporte. Colocar o primeiro erlenmeyer para aquecer at a ebulio no bico de Bunsen, instalado sob a bureta. No momento que iniciar a fervura, iniciar a titulao, acrescentando a soluo da bureta, at a mudana da cor da soluo do erlenmeyer de azul para cor esverdeada. Adicionar 3 gotas da soluo de Azul de Metileno 1% e aguardar 30 segundos. Decorrido o tempo, continuar a titulao at viragem da cor azul para cor amarelo claro (transparente). Anotar o volume gasto. 2.3- Clculos

A.R.T . =

41 xFd FxVm

A.R.T.= gramas de acares redutores totais por litro da amostra F= fator de correo do licor de Causse-Bonnas Vm= volume mdio em ml, gastos nas 3 titulaes Fd= fator de diluio 2.4- Observaes O tempo fator muito importante nesta determinao, devendo ser controlado muito bem. O tempo partir do incio da fervura at o final da titulao, dever ser de no mximo 3 e no mnimo de 2 minutos. O volume gasto de amostra nas titulaes dever estar entre 8 e 10 ml, e caso gaste menos que 8 ml, a amostra dever ser diluda, quantas vezes for necessrio para que a mesma fique com 4 a 5 gramas de acares por litro. O volume de amostra indicado nesta anlise, para amostras que contenham aproximadamente 20 gramas de acares por litro, devendo ser alterado caso necessrio. Ao fazer a determinao em uma amostra desconhecida, fazer uma titulao prvia para verificar a necessidade de diluies posteriores. 3- Anexos: No aplicvel. 4- Referncias Mtodos Analticos do Ministrio da Agricultura .

5- Registros Os resultados devem ser registrados juntos aos demais resultados analticos da amostra. 10- Solues para Anlises de Acares Totais 10.1- Soluo de Azul de Metileno 1% Em um copo griffin de 50 ml, pesar 1 grama de Azul de Metileno P.A.. Transferir para balo volumtrico de 100 ml, enxaguando o copo com gua destilada, colhendo-a no balo. Dissolver o Azul de Metileno, agitando o balo, e completar o volume a 100 ml com gua destilada. Homogeneizar e armazenar em frasco mbar, identificando-o. 10.2- Soluo de Glicose 0,5% Transferir para uma capsula de porcelana, aproximadamente 3 gramas de Glicose P.A.. Levar a capsula para uma estufa previamente aquecida 60 C, deixando durante 1 hora. Aps o tempo, esfriar em dessecador. Em um copo griffin de 50 ml, pesar 1 grama de Glicose P.A. seca. Transferir para balo volumtrico de 200 ml, enxaguando o copo com gua destilada, colhendo-a no balo. Dissolver a Glicose, agitando o balo, e completar o volume a 200 ml com gua destilada. Homogeneizar e armazenar em frasco mbar em local refrigerado, identificando-o. Esta soluo no dever ser armazenada pr mais de 5 dias. 10.3- Soluo de cido Clordrico 1:3 Em uma proveta graduada de 1.000 ml, medir 500 ml de gua destilada. Com cuidado, adicionar 250 ml de cido Clordrico Fumegante P.A., misturando com basto de vidro. Aguardar a soluo esfriar e completar o volume para 1.000 ml com gua destilada. Homogeneizar e armazenar em frasco mbar, identificado. Preparar esta soluo dentro da capela de exausto de gases. 10.4- Soluo de Hidrxido de Sdio 2N Em um copo griffin de 250 ml, pesar 80 gramas de Hidrxido de Sdio P.A. Transferir rapidamente para um balo volumtrico de 1.000 ml, contendo aproximadamente 500 ml de gua destilada. Enxaguar o copo, colhendo a gua no balo. Dissolver, agitando o balo, e esfriar a soluo temperatura ambiente. Completar o volume para 1.000 ml com gua destilada. Homogeneizar e armazenar em frasco mbar, identificando-o. 10.5- Licor de Causse-Bonnas Em copos separados, pesar os seguintes reagentes: - 130 gramas de Tartarato duplo de Sdio e Potssio P.A. - 110 gramas de Hidrxido de Sdio P.A. - 24 gramas de Sulfato de Cobre P.A. - 16,8 gramas de Ferrocianeto de Potssio P.A.

Dissolver primeiramente, o Tartarato com 200 ml de gua destilada e em seguida o Hidrxido de Sdio, adicionando a gua destilada e cerca de 100 ml da soluo de Tartarato, para esfriar a soluo. Em seguida, dissolver os demais reagentes utilizando cerca de 150 ml de gua destilada para cada um. Transferir as solues para balo volumtrico de 1.000 ml, enxaguando os copos com gua destilada, colhida no balo. Completar o volume a 1.000 ml com gua destilada e homogeneizar. Armazenar esta soluo em frasco mbar. 10.5.1- Padronizao do licor de Causse-Bonnas Preparar 3 erlenmeyers de 250 ml com cerca de 50 ml de gua destilada e 5 prolas de vidro em cada frasco. Com pipeta volumtrica, adicionar 15 ml do licor de Causse-Bonnas nos respectivos frascos e agitar. Enxaguar e encher a bureta com a soluo de Glicose 0,5%, acertando o menisco no ponto "0". Fixar a bureta no suporte. Colocar o primeiro erlenmeyer para aquecer at a ebulio no bico de Bunsen, instalado sob a bureta. No momento que iniciar a fervura, iniciar a titulao, acrescentando a soluo da bureta, at a mudana da cor da soluo do erlenmeyer de azul para cor esverdeada (aproximadamente 3 ml da soluo de Glicose 0,5%). Adicionar 3 gotas da soluo de Azul de Metileno 1% e aguardar 30 segundos. Decorrido o tempo, continuar a titulao at viragem da cor azul para cor amarelo claro (transparente). Anotar o volume gasto. Dever ser gasto cerca de 8,2 ml da soluo de Glicose 0,5%. Repetir o procedimento com os demais erlenmeyers. Caso o volume gasto seja diferente de 8,2 ml, calcular o fator de correo como descrito a seguir:

Fc =

8,2 Vm

onde: F = fator de correo do licor de Causse-Bonnas Vm= Volume gasto, em ml, mdia das 3 titulaes do licor