Métodos Ópticos

Espectro Electromagnético
INTERACÇÕES Comp. de onda
RADIAÇÃO
COM A MATÉRIA (λ)
Raios Gama Transições nucleares <1A
Trans. electrónicas
Raios X 1- 10 A
camadas internas

Trans. electrónicas
U.V. vácuo 1 - 200 nm
camada externa
U.V. Trans. electrónicas
camadas externas
200 – 400 nm
próximo
Trans. electrónicas
400 – 800 nm
Visível camadas externas
IV. próximo Vibrações moleculares 800 - 2500 nm
IV. fundamental Vibrações moleculares 2.5 - 25 µm
IV. longínquo Vibrações moleculares 25 - 400 µm
Microondas Rotações moleculares 0.04 -25 cm
Ondas de rádio Spin dos núcleos 0.6-10 m

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 Espectroscopia de Absorção Molecular no UV-Vis
EAM UV-Vis

I0 I

• Moléculas em solução
M

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 EAM UV-Vis: Espécies Absorventes

• Moléculas orgânicas, inorgânicas e biológicas, neutras e/ou carregadas

• Espectros de bandas (porquê?)

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 EAM UV-Vis: Lei de Beer

Lei de Beer:

Absorvância, A = abc
I0 I
Solução com
a (absortividade) cm-1 (unidades concentração) -1

concentração c

b
A = bc
 (absortividade molar ) cm-1 (moles/L) -1

Transmitância, T = I/I0

A = logT = log I0/I

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 EAM UV-Vis: Lei de Beer e Análise Qualitativa

Absorvância vs 

 variável  a () variável

bc = constante

 (nm)

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 EAM UV-Vis: Lei de Beer e Análise Quantitativa

Absorvância vs c
I0  I A = abc
Solução com
concentração c ab = constante
b (a  constante, radiação monocromática, I0)

A 



c (unidades de concentração)
Recta de calibração: ordenada na origem nula (dentro do erro experimental) e declive=ab

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 EAM UV-Vis: Lei de Beer e Análise Quantitativa

Diagrama de blocos de um espectrofotómetro de UV-Vis

Fonte Monocromador Porta Detector/ Registador/

amostra amplificador Computador
I0 I0 I
∆I0s ∆Is

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 EAM UV-Vis: Lei de Beer e Análise Quantitativa

Selecção do comprimento de onda de trabalho

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 EAM UV-Vis: Lei de Beer e Análise Quantitativa

Selecção do comprimento de onda de trabalho

 1?

 2?

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 EAM UV-Vis: Lei de Beer e Análise Quantitativa

Problema : Doseou-se o nióbio existente numa liga metálica fazendo-o reagir com o composto
8-quinolinol e usando o método da recta de calibração. Sabendo que o complexo formado, de
cor amarela esverdeada, apresenta o espectro que se mostra na figura, comente os valores
obtidos para as absorvâncias das diferentes soluções padrão lidas nas diferentes condições de
comprimento de onda. Determine a percentagem de nióbio na amostra inicial sabendo que a
absorvância lida para a amostra (3 g de liga / 1L solução) usando o  óptimo foi de 0.40.
0
 20(g/L) 40(g/L) 60(g/L) 100(g/L) 150(g/L) 200(g/L)

370 nm 0.13 0.25 0.35 0.57 0.8 0.95

385 nm 0.15 0.3 0.45 0.75 1.13 1.5

435 nm 0.02 0.04 0.07 0.09 0.15 0.2

370 385 435

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 EAM UV-Vis: Lei de Beer e Análise Quantitativa

Absorvâncias vs Concentração para Equação recta de calibração:

os diferentes comprimentos de
onda A = 2.58x10-4 + 7.51x10-3 CNióbio (g/L)
1,6
1,4
Com Aamostra = 0.40
1,2
Absorvância

1 385 CAmostraNióbio (g/L) = 53.3

0,8 370
0,6
0,4
0,2 435 Percentagem de nióbio na liga:
0
0 50 100 150 200 250 [53.3x10-6/3] 100 = 1.8x10-3 %

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 EAM UV-Vis: Aditividade das Absorvâncias

A absorvância total de uma solução a qualquer comprimento de onda

é igual à soma das absorvâncias dos componentes individuais na
solução.

Exemplo: Para cada  tem-se:

AMix =  ACr3+ +  ACo2+

 AMix =  aCr3+bCCr3+ +  aCo2+bCCo2+

Vantagens e inconvenientes ?

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 EAM UV-Vis: Aditividade das Absorvâncias

Problema: Determinou-se simultaneamente cobre e zinco num efluente por espectrofotometria

de absorção molecular a partir de soluções dos complexos corados ML daqueles elementos.
Obtiveram-se os seguintes valores de absorvância, lidos a dois comprimentos de onda, para as
soluções padrão (só com cobre ou só com zinco) de cada complexo, em células quadradas
com 1cm de lado

Padrões: 1 mg de ião metálico/50 mL

Metal 335 nm 580nm

Cu 0 0.38
Zn 0.26 0.44

Quanto à amostra, o Cu e Zn presentes em 500.0 mL de efluente foram extraídos na forma de

complexos para 85 mL de uma solução não aquosa. Os valores lidos para a absorvãncia aos
dois comprimentos de onda foram.

A (335 nm) = 0.35 A (580 nm) = 0.73

Determine a concentração de Cu e Zn no efluente em mg/L.

R: Cu 1.2 ppm; Zn 4.6 ppm

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 EAM UV-Vis: Titulações Espectrofotométricas

Curvas de titulação espectrofotométrica: absorvância (corrigida para a

variação de volume, se necessário) em função do volume de titulante:

Analito (A) +Titulante (T) → Produto (P)

Tipo de reacção envolvida ?

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 EAM UV-Vis: Titulações Espectrofotométricas

Vantagens Titulações Espectrofotométricas :

• Maior aplicabilidade (só necessita de uma espécie absorvente: titulante (T),
titulado (analito, A) ou produto de reacção (P));
• Menores interferências de matriz. Inclusivamente pode existir um interferente
que absorva ao  de trabalho desde que seja inerte;
• Maior Precisão (<1%).

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 EAM UV-Vis: Titulações Espectrofotométricas

Problema: Nanoparticulas de ouro podem ser determinadas na presença de um excesso de

iões brometo por titulação espectrofotométrica usando o agente oxidante TCNQ
(tetracioanoquinodimetano) e seguindo variações de absorvância a 856 nm, comprimento de
onda ao qual absorve o radical aniónico TCNQ. formado de acordo com a equação:

Au(0) + TCNQ +2Br → AuBr2 + TCNQ.

Na figura apresenta-se a curva de titulação obtida quando 0,700 mL de uma solução de TCNQ
1,00x104 M é titulada com uma solução de nanopartículas com a concentração de 1,43 g/L.
Com base nos dados apresentados calcule o número de milimoles de ouro por 1,00 g de
nanopartículas.

MIA-Espectroscopia de Absorção Molecular UV-Vis 16

 EAM UV-Vis: Titulações Espectrofotométricas

Volume do ponto de equivalência estimado através do gráfico = 0,02 mL

Condição do ponto de equivalência:

VTCNQ(mL) * ConcTCNQ (moles/L) = Vsolução NPs(mL) * ConcAu(0)(moles/L)

ConcAu(0)(moles/L)= (0,700 * 1,00x104)/0,02= 3,50x103M

milimoles de ouro por 1,00 g de nanopartículas = 3,50/1,45=2,45

MIA-Espectroscopia de Absorção Molecular UV-Vis 17

EAM UV-Vis: Limitações à Lei de Beer

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EAM UV-Vis: Limitações à Lei de Beer

• Limitações reais

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 EAM UV-Vis: Limitações à Lei de Beer

• Desvios Químicos Aparentes: Ocorrem quando o analito se

dissocia ou se associa originado um produto com características
de absorção diferentes, como se ilustra no exemplo:

HIn
HIn H+ + In-

HIn absorve a  =430 nm

In-
In- absorve a  =570 nm

Problema: Demonstrar que a relacção A430 vs CHIntotal só é linear se pH, força Iónica e
temperatura forem constantes.
MIA-Espectroscopia de Absorção Molecular UV-Vis 20
 EAM UV-Vis: Limitações à Lei de Beer

Demonstração:

Admitindo b=1:

A430 = 430HiIn [HIn] (1)

Balanço de massas:CHIntotal = [HIn] + [In-] (2)

Constante de ionização: KHIn = [H+][In-]/[HIn] (3)

Usando 2 e 3 para escrever 1 em função de CHIntotal

A430 = 430HiIn(1+K/[H+])-1CHIntotal

(1+K/[H+])-1 só é constante se T , força iónica e pH o forem

MIA-Espectroscopia de Absorção Molecular UV-Vis 21

 EAM UV-Vis: Limitações à Lei de Beer

• Desvios instrumentais aparentes com radiação policromática

MIA-Espectroscopia de Absorção Molecular UV-Vis 22

 EAM UV-Vis: Alguns aspectos práticos

• Na comparação de espectros usar as mesmas condições de

solvente, meio iónico e temperatura.
• As soluções dos padrões devem ter uma composição (matriz)
semelhante à da solução da amostra e devem abranger uma
gama razoável de concentrações de analito.

MIA-Espectroscopia de Absorção Molecular UV-Vis 23

 EAM UV-Vis: Alguns aspectos práticos

Tipos de espectrofotómetros e seus componentes

(a detalhar nas aulas de laboratório)

Os espectrofotómetros podem ser de feixe simples ou feixe duplo

dependendo do arranjo espacial e número dos seus componentes:
- Fontes de radiação
- Sistema monocromador
- Porta amostras
- Detectores de radiação
- Processadores de sinal e dispositivos de leitura

MIA-Espectroscopia de Absorção Molecular UV-Vis 24

 EAM UV-Vis: Características Gerais

• Ampla aplicabilidade a moléculas orgânicas, inorgânicas e

biológicas, neutras e/ou carregadas;
• Fácil manuseamento (não requer formação específica);
• Facilmente automatizada;
• Rápida;
• Selectividade moderada que pode ser melhorada recorrendo a
reacções de derivatização, como por exemplo acontece na
determinação do anião fosfato:

P043- + sal de Mo(VI)  PMo12O403−

Redução de PMo12O403− por ácido ascórbico ou SnCl2
conduz ao produto azul corado PMo12O407−

MIA-Espectroscopia de Absorção Molecular UV-Vis 25

 EAM UV-Vis: Características Gerais

• Análise Qualitativa: Pouco usada embora permita a identificação

de grupos funcionais.

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 EAM UV-Vis: Características Gerais

• Análise Semi-quantitativa (colorimetria) o que permite

determinações in situ.

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 EAM UV-Vis: Características Gerais

• Análise Quantitativa: das técnicas mais usadas em análise

química (muito usada na detecção em cromatografia líquida);
- Limite de detecção 10-6M (Discutir)
- Gama de resposta linear grande; 10-5-10-7 a 10-2-10-3 M (Discutir)
- Boa precisão : < 5%) (Discutir)

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 EAM UV-Vis: Bibliografia

• “Principles of Instrumental Analysis” , D.A.Skoog, F.J.Holer,

S.R.Crouch 6th Edition, 2007 (7th Edition, 2018) , International
Student Edition: capítulos 6, 13 e 14
• “Métodos Instrumentais para a Análise de Soluções” M.L.Simões
Gonçalves, 4ª Edição, 2001, Fundação Calouste Gulbenkian:
capítulo 2, pags 15-49 e 60-86
• “Quantitative Chemical Analysis”, D.C.Harris, 6th Edition,
W.H.Freeman and Company, New York, 2003, capítulos 18, 19 e 20

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