28-09-2011

MTODOS INSTRUMENTAIS DE ANLISE I

Mestrado integrado em Cincias Farmacuticas

ANLISE INSTRUMENTAL
Licenciatura em Cincias Bioanalticas

1. Anlise qumica 1.1 Anlise qumica Farmacutica e Biolgica 1.2 Processo analtico 1.2.1 Mtodo analtico

1. Anlise qumica
Caracterizao qualitativa ou quantitativa de um material ou materiais. - Anlise qumica qualitativa
- Identificao das espcies (moleculares, atmicas ou inicas) - Identificao de grupos (funcionais ou cromforos)

- Anlise qumica quantitativa

- Quantificao de uma ou mais espcies - Estabelecimento de caractersticas de desempenho do mtodo analtico
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1. Anlise qumica
Termos utilizados - Amostra
- Analito - Matriz

- Padro - Branco

1.1 Anlise qumica Farmacutica e Biolgica

Anlise qumica Farmacutica - Anlise qumica qualitativa
- Anlise estrutural de novas molculas com potencial actividade teraputica obtidas por sntese ou de origem natural. - Verificar se o frmaco se encontra na forma farmacutica correctamente identificado. - Verificar se se encontram na forma farmacutica impurezas adicionais ou se s o frmaco est presente. - Verificar se a identidade e pureza do frmaco na matria-prima esto de acordo com as especificaes na preparao da forma farmacutica. - Verificar se a identidade e pureza dos excipientes esto de acordo se encontram de acordo com as especificaes na preparao da forma farmacutica. 4

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1.1 Anlise qumica Farmacutica e Biolgica

Anlise qumica Farmacutica - Anlise qumica quantitativa
- Determinar a percentagem do contedo estabelecido do frmaco na forma farmacutica (dosagem). - Avaliar a estabilidade do frmaco na forma farmacutica e consequentemente qual o prazo de validade da forma farmacutica. - Determinar velocidade de libertao do frmaco da sua forma farmacutica e ser assim absorvido pelo organismo. - Determinar a concentrao de impurezas especificadas do frmaco na matria-prima. - Determinar a concentrao do frmaco numa amostra de tecido ou fluido biolgico. - Determinar o valor ou valores de pKa, coeficientes de partio, 5 solubilidades e estabilidade do frmaco em desenvolvimento.

1.1 Anlise qumica Farmacutica e Biolgica

Anlise qumica Biolgica - Anlise qumica qualitativa e quantitativa
- Anlise de biomolculas (amino cidos, pptidos, protenas, cidos nucleicos, DNA, RNA, glcidos, lpidos, Imunoglobulinas, et). - Genmica. - Protemica. - Metabolmica. - Anlises em amostras biolgicas (toxicolgicas, forenses, clnicas, drogas de abuso, compostos farmacuticos, bioqumicas e de produtos naturais).

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1.2 Processo analtico

Fases e procedimentos
Amostragem Pr-tratamento Material a Amostra Amostra estudar tratada Problema Informao Resultado qumica ou sinal Processamento de resultados Optimizao Mtodo analtico Interpretao Calibrao e Medida

Deciso

1.2 Processo analtico

Resultado analtico
- Anlise qualitativa - Sinal analtico - Anlise quantitativa - Concentrao - Molaridade, normalidade, % (m/V, V/V ou m/m) ou molalidade . - Massa de composto por massa de soluo total ou mistura (ppm ou ppb)
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1.2 Processo analtico

Resultado analtico
- Erros - Grosseiros - Fortuitos () - Instrumentais - Humanos - Sistemticos ( = x ) - Instrumentais - Mtodo - Humanos
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1.2 Processo analtico

Distribuio do erro
x = + + + Efeito da anlise (+ Erro grosseiro)
Funo de densidade de probabilidade y=normal(x;0;1) 0,60 1,0 Funo de distribuio da probabilidade y=inormal(x;0;1)

0,8 0,45

0,6 0,30 0,4

0,15 0,2

0,00 -3 -2 -1 0 1 2 3

0,0 -3 -2 -1 0 1 2 3

f ( x ) = f ( x; ; ) =

1 2

1 x 2 ( ) 2

com < x < +

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1.2 Processo analtico

Fontes de erro
- O procedimento analtico no seu todo no adequado ao sistema em estudo; - A amostragem e a preparao da amostra efectuadas de forma incorrecta; - O instrumento de medio no quantifica convenientemente o sinal (varivel) analtico; - O operador executa as operaes do instrumento analtico de uma forma incorrecta; - A calibrao no efectuada correctamente - A interpretao e avaliao dos resultados realizada de forma incorrecta.
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1.2.1 Mtodo analtico

Hierarquia da metodologia analtica
Tcnica Mtodo Procedimento Protocolo

- Tcnica Princpio cientfico til para a obteno da informao. - Mtodo Distinta adaptao da tcnica para uma anlise qumica especfica. - Procedimento Instrues escritas necessrias para a utilizao do mtodo. - Protocolo Instrues escritas definitivas que devem ser seguidas sem excepo. 12

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1.2.1 Mtodo analtico

Hierarquia da metodologia analtica

Analytical Protocol

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MTODOS INSTRUMENTAIS DE ANLISE I

Mestrado integrado em Cincias Farmacuticas

ANLISE INSTRUMENTAL
Licenciatura em Cincias Bioanalticas

1. Anlise qumica 1.2.1 Mtodo analtico 1.3 Mtodos Instrumentais de Anlise

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1.2 Processo analtico

Fases e procedimentos
Amostragem Pr-tratamento Material a Amostra Amostra estudar tratada Problema Informao Resultado qumica ou sinal Processamento de resultados Optimizao Mtodo analtico Interpretao Calibrao e Medida

Deciso

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1.2.1 Mtodo analtico

Tipos de mtodos

- Mtodos no englobados

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1.2.1 Mtodo analtico

Comparao

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1.3 Mtodos instrumentais de anlise

Vantagens e desvantagens
- Vantagens
- Menos sujeito a erros do operador e a critrios de avaliao subjectivos - Maior rapidez da anlise - Maior sensibilidade, selectividade, exactido e preciso - Possibilidade de utilizao de pequenas quantidades de amostra - Alguns mtodos so no destrutivos - Grande facilidade de automao e controlo

- Desvantagens
- Custo elevado - Necessidade de padres de elevada pureza - Complexidade da instrumentao analtica

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1.3 Mtodos instrumentais de anlise

Classificao
- Mtodos electroqumicos Envolvem a medio de uma propriedade elctrica. - Mtodos espectroscpicos Envolvem a medio da radiao aps a interaco da radiao com a matria. - Mtodos separativos Os mtodos separativos baseiam-se na separao prvia e resoluo de compostos proximamente relacionados. - Mtodos no englobados
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1.3 Mtodos instrumentais de anlise

Classificao
- Mtodos electroqumicos
- Potenciometria - Voltametria - Polarografia - Condutimetria - Coulometria - Electrogravimetria

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1.3 Mtodos instrumentais de anlise

Classificao
- Mtodos espectroscpicos
- Ultra Violeta - Visvel - Fluorescncia e Fosforescncia - Absoro atmica - Emisso atmica - Infravermelho - Raman - Ressonncia magntica nuclear (RMN) - Ressonncia para magntica electrnica (RPE) - Raios X - Polarimetria (dicrosmo circular) - Refractometria - Turbidimetria e nefelometria

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1.3 Mtodos instrumentais de anlise

Classificao
- Mtodos separativos
- Cromatografia de fase lquida (HPLC) - Cromatografia de fase gasosa - Cromatografia de troca inica - Cromatografia de camada fina (TLC) - Electroforese (convencional e capilar)

- Mtodos no englobados
- Mtodos trmicos - Espectroscopia de massa - Mtodos cinticos - Mtodos automticos - Mtodos de activao ou diluio isotpica - Imunoensaios (RIA e ELISA)

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