MINISTRIO DA EDUCAO UNIVERSIDADE FEDERAL DE PELOTAS INSTITUTO DE BIOLOGIA DEPARTAMENTO DE ZOOLOGIA E GENTICA TEXTO DIDTICO 2006

MEIOSE, GAMETOGNESE E FERTILIZAO EM ANIMAIS E VEGETAIS Texto da Prof Dr Judith Vigas - DZG/IB/UFPel Reedio e reviso do Texto Didtico: Meiose, gametognese e fertilizao de Vigas, J., 2003. Introduo A diviso meitica evolutivamente posterior mitose, apresentando-se como um processo longo e complexo. A meiose pode durar desde vrios dias e at vrios anos, dependendo do organismo, no entanto, muito semelhante em todos os eucariotes. Devido esta semelhana, provavelmente este processo tenha surgido no incio da evoluo dos seres vivos, mas antes destes separarem-se nos reinos Planta, Animalia, Fungi e Protista. A meiose, atravs da qual ocorre reduo do nmero cromossmico na formao dos gametas dos animais e plantas, garante a manuteno do nmero cromossmico caracterstico da espcie quando ocorre a fecundao. Cada clula me diplide (2n) d origem a quatro clulas filhas haplides (n), as quais tm tanto a metade do nmero cromossmico da clula me, quanto combinaes gnicas e cromossmicas novas, devido permuta gnica e segregao ao acaso dos cromossomos homlogos, respectivamente. Esta recombinao gentica, ocorrida durante a meiose, somada propiciada pela fecundao aumenta a variabilidade da espcie e torna cada indivduo, originado de reproduo sexuada, geneticamente nico (com exceo de gmeos monozigticos). . Reforando a definio, a meiose um mecanismo que, em conjunto com a fertilizao, regula, entre outras coisas, o nmero de cromossomos de um organismo. Uma segunda caracterstica do mecanismo meitico a redistribuio do material gentico em ncleos filhos, que acontece devido aos processos de recombinao gnica e segregao cromossmica. A base para todos os eventos da meiose depende, em parte, da ao de sistemas de genes especficos, que eles prprios (os cromossomos) contm. A simplicidade dos movimentos mitticos contrasta com a complexidade dos movimentos dos cromossomos na meiose. Os fatores principais responsveis por esta diferena so que: na mitose, cada cromossomo condensa e movimenta-se independentemente dos outros, sem levar em conta sua homologia. Durante a prfase da primeira diviso da meiose, por outro lado, os homlogos comportam-se em conjunto (sinapse ou pareamento dos cromossomos homlogos) e as cromtides homlogas trocam partes e passam a possuir padres novos (permuta e recombinao gnica); na metfase da mitose, os cromossomos ficam posicionados com os centrmeros na placa equatorial da clula. Durante a metfase da primeira diviso da meiose, os cromossomos homlogos ficam com os telmeros, que esto presos pelos quiasmas terminais, na placa equatorial e os centrmeros homlogos orientados para plos opostos; na mitose, ocorre uma diviso nuclear e uma citocinese, precedidas de uma duplicao cromossmica, que ocorre na fase S da interfase. Na meiose, ocorrem duas divises nucleares

e duas citocineses; precedidas de uma nica duplicao cromossmica, que ocorre na fase S da interfase. Semelhante mitose, a meiose precedida por uma interfase com uma fase S, durante a qual os cromossomos so replicados em cromtides irms, que permanecem juntas devido s protenas coesinas. Observao: Em organismos cujas clulas somticas so haplides, como os fungos filamentosos, por exemplo, a meiose ocorre aps a formao do zigoto, que diplide e necessita transformar-se em haplide para manter o nmero cromossmico caracterstico da espcie. portanto uma meiose ps-zigtica, diferente da meiose de vegetais e animais que pr-zigtica. 1. MEIOSE Como no processo meitico ocorrem duas divises nucleares sucessivas, este processo foi didaticamente dividido em duas fases maiores: Meiose I ou Primeira Diviso Meitica e Meiose II ou Segunda Diviso Meitica. Assim como na mitose, a meiose precedida pela duplicao dos cromossomos na fase S da Interfase. A Interfase pr-meitica geralmente uma interfase bem mais longa que as interfases pr-mitticas. 1.1. Meiose I ou Primeira Diviso Meitica Caracteriza-se por uma prfase complexa e longa (Prfase I), bastante diferente da prfase mittica, onde acontece condensao cromossmica progressiva (cujo mximo alcanado, apenas, na fase de Metfase I); pareamento dos cromossomos homlogos (sinapse); troca de partes entre os cromossomos homlogos (permuta); aparecimento dos quiasmas (evidncia citolgica da permuta, que ocorre devido separao dos homlogos); rompimento do envelope nuclear; desaparecimento do nuclolo; formao do fuso. O posicionamento ao acaso dos cromossomos homlogos na placa metafsica (Metfase I), a separao dos cromossomos homlogos (Anfase I) e a chegada dos homlogos aos plos da clula me (Telfase I), tambm, so caractersticos da Meiose I. 1.1.1. Prfase I 1.1.1.1. Leptteno (= filamento fino): apesar de marcar o incio do processo de condensao cromossmica, a fase de leptteno apresenta os cromossomos como filamentos muito longos e finos. As cromtides irms, que esto presas pelo centrmero, permanecem muito prximas de tal maneira que, apesar da duplicao cromossmica j ter ocorrido (na fase S da Interfase) e j estarem formadas as cromtides irms, os filamentos cromossmicos parecem nicos. Os filamentos cromossmicos apresentam, nesta fase, regies em que ocorre maior espiralizao e que, conseqentemente, apresentam-se mais engrossadas e coram mais fortemente que o restante do cromossomo. Estas regies tm padro de distribuio e nmero especfico para cada cromossomo e so denominadas de crommeros. 1.1.1.2. Zigteno (= filamento emparelhado ou filamento unido): nesta fase inicia o processo de aproximao e pareamento dos cromossomos homlogos, que denominado de sinapse. A sinapse, geralmente, parece ter incio nas extremidades e prossegue, maneira de um zper, ao longo do comprimento de cada par de cromossomos homlogos at que se completa e no restam mais regies desemparelhadas. Este pareamento ocorre entre as regies estritamente homlogas do par cromossmico; ocorre gene por gene. A sinapse dos cromossomos homlogos acompanhada pela formao de um complexo de natureza protica que se forma entre os homlogos pareados, que denominado

de complexo sinaptonmico. O complexo sinaptonmico formado por dois elementos laterais (ligados, cada um, a um homlogo) e um elemento central. Os elementos laterais conectam-se ao central atravs de fibras proticas transversais. Ao longo do complexo sinaptonmico, ocorrem ndulos de recombinao, formados por grandes complexos proticos. No final do zigteno, devido sinapse, todos os cromossomos homlogos acham-se pareados, formando os bivalentes. Cada bivalente est, portanto, constitudo de dois cromossomos homlogos pareados, estando cada homlogo duplicado em duas cromtides irms, que ainda se mantm presas pelos seus centrmeros. 1.1.1.3. Paquteno (= filamento grosso): esta fase inicia logo aps o trmino do processo de sinapse. de maior durao, sendo que o processo de condensao iniciado no leptteno e continuado no zigteno, acentua-se, tornando os filamentos cromossmicos bem mais espessos. Nesta fase, os crommeros esto bem mais evidentes, podendo-se realizar a contagem e a diferenciao dos pares cromossmicos em algumas espcies, principalmente as que possuem cromossomos grandes e pouco numerosos (ex: tomate). Durante o paquteno, ocorre o fenmeno de permuta, ou seja, o processo de troca de partes cromossmicas entre cromtides homlogas. O processo de permuta (sobrecruzamento ou crossing-over) consiste de quebra, em pontos especficos, das duplas cadeias de DNA de duas cromtides homlogas por ao de uma endonuclease meitica, e reunio (fuso) cruzada entre estas duas cromtides. Este processo parece ocorrer, principalmente, em nvel dos ndulos de recombinao do complexo sinaptonmico. O processo de permuta permite que os genes de um par de cromossomos homlogos sejam rearranjados em novas combinaes, aumentando a variabilidade gentica, propiciando a recombinao gentica. aumentada a probabilidade de novas combinaes favorveis entre os genes ligados num mesmo cromossomo. Permite, tambm, a separao entre genes mutantes deletrios e genes favorveis que por acaso estejam ligados em um mesmo cromossomo. Em material animal ou vegetal adequado, no final do paquteno, j se consegue distinguir os bivalentes como sendo formados por quatro filamentos (duas cromtides irms de um cromossomo e duas cromtides irms de seu homlogo). O nuclolo bem evidente nesta fase, podendo-se verificar com facilidade quais os pares cromossmicos formadores de nuclolo, isto , que possuem a regio organizadora de nuclolo, chamada RON (NOR=nucleolar organizer region) 1.1.1.4. Diplteno (= filamento duplo): caracteriza-se pelo desaparecimento da atrao sinptica entre os homlogos, iniciando-se a separao dos mesmos. Desfaz-se, tambm o complexo sinaptonmico. Esta separao entre os homlogos, que formavam o bivalente, no total, pois em alguns locais duas das quatro cromtides permanecem unidas formando um X. Esta configurao recebe o nome de quiasma e a evidncia citolgica de que ocorreu a permuta. Os cromossomos homlogos, dependendo de sua morfologia e do nmero de permutas que ocorreram, apresentam formas variadas: basto, cruz, elos de corrente, etc... Conforme vai progredindo a separao entre os cromossomos homlogos, os quiasmas vo escorregando para as extremidades dos braos dos cromossomos (processo de terminalizao dos quiasmas). O processo de condensao cromossmica continua progredindo ao longo do diplteno. O nuclolo ainda pode ser visualizado nesta fase. 1.1.1.5. Diacinese (= movimento ao redor, movimento para a periferia): caracteriza-se por marcante acentuao do processo de condensao cromossmica e pelo prosseguimento

da terminalizao dos quiasmas. Os cromossomos tomam formas que so muito caractersticas, tais como basto, cruz, anel ou rosquinha, chapu, lao, etc. Inicia a movimentao dos bivalentes para perto do envelope nuclear e, posteriormente, da para a placa metafsica. uma fase propcia para a contagem dos bivalentes, pois os mesmos encontram-se bem espalhados dentro do ncleo. No final desta fase, ou seja, no final da Prfase I, desaparece o nuclolo e rompe-se o envelope nuclear e as fibras do fuso ligam-se aos cinetocoros. Alguns autores consideram este final de prfase como outra fase, a pr-metfase I. 1.1.2. Metfase I Caracteriza-se pela formao final do fuso e alinhamento dos cromossomos no equador da clula. Os cromossomos atingem seu grau mximo de condensao. Os cromossomos homlogos dispem-se na placa metafsica de maneira que as extremidades de seus braos (a maioria ainda ligada ao brao do seu homlogo pelos quiasmas terminais) ficam voltadas para o equador da clula e os centrmeros para os plos (os centrmeros homlogos de um bivalente ficam orientados um para cada plo da clula). As fibras do fuso prendem-se aos cinetocoros e puxam os homlogos para plos opostos, de maneira que, por exemplo, o anel observado em diacinese, apresenta extremidades afiladas nos locais do centrmero. 1.1.3. Anfase I Inicia o movimento dos cromossomos homlogos, que formavam o bivalente, um para cada plo da clula, puxados pelas fibras do fuso. Os centrmeros, que prendem as duas cromtides irms de cada cromossomo no se separam. Cada centrmero homlogo desloca-se para um plo da clula, puxando junto suas duas cromtides. Isso fora os quiasmas a se deslocarem ao longo dos bivalentes, para as suas extremidades, at que os homlogos se separam totalmente. Os cromossomos que se separam na Anfase I no so geneticamente iguais aos cromossomos paterno e materno que entraram em sinapse, pois trocaram segmentos atravs do processo de permuta, de modo que os cromossomos que se separam na primeira diviso meitica so formados, na verdade, por novas combinaes de segmentos de origem paterna e materna. Ainda mais, a distribuio dos homlogos que formam os bivalentes ocorre ao acaso, sendo a distribuio de um bivalente independente do outro. A distribuio independente e ao acaso dos cromossomos paternos e maternos permite a formao de combinaes cromossmicas diferentes (recombinaes cromossmicas) nos gametas de um nico indivduo. Este tipo de distribuio mais a recombinao gnica provocada pela permuta aumenta, ainda mais, o nmero de combinaes gnicas diferentes nos gametas. 1.1.4. Telfase I A telfase I caracteriza-se pela chegada dos cromossomos aos plos da clula. refeito o envelope nuclear. Ocorre descondensao cromossmica em graus variados, dependendo da espcie. Tambm, dependente da espcie, a citocinese pode ou no ocorrer nesta fase. Nesta fase, o nmero de cromossomos em cada plo celular est reduzido metade, mas cada cromossomo ainda est constitudo por duas cromtides irms, presas pelas coesinas em nvel do centrmero. 1.2. Intercinese.

Em alguns organismos, entre a Meiose I e a Meiose II, ocorre uma fase em que os cromossomos descondensam totalmente, alongam-se e tornam-se difusos. Tomam uma aparncia semelhante interfase, mas diferentemente desta fase, na intercinese no ocorre fase S, ou seja, no ocorre duplicao cromossmica. Em outros organismos, este perodo entre a Primeira e a Segunda Diviso Meitica suprimido e os dois ncleos em anfase I ou telfase I passam diretamente para a metfase II da Segunda Diviso Meitica. 1.3. Meiose II ou Segunda Diviso Meitica 1.3.1. Prfase II uma fase curta, sem as complicaes da Prfase I. Os cromossomos, ainda duplicados em cromtides irms, mas em nmero reduzido pela metade, recomeam a condensar novamente e, no final desta fase, inicia a organizao de dois novos fusos (em posio perpendicular do fuso formado na Meiose I). A prfase II uma fase que, semelhante intercinese, pode ser suprimida em alguns organismos e a clula passa diretamente de Telfase I para Metfase II. 1.3.2. Metfase II semelhante metfase mittica, com a diferena de que o nmero de cromossomos a metade do nmero somtico. As cromtides, bem mais delgadas do que na Metfase I, apresentam-se ainda duplicadas em cromtides irms com os centrmeros localizados no equador da clula e os braos cromossmicos espalhados para fora da placa equatorial. As fibras dos dois fusos ligam-se aos cinetocoros centromricos, observando-se duas placas metafsicas, principalmente em vegetais, onde os produtos meiticos permanecem juntos, envoltos pela cpsula da clula me de plen (CMP) ou pelos tegumentos do vulo. 1.3.3. Anfase II Tambm, semelhante anfase mittica, ocorre o processo de separao dos centrmeros, que uniam as cromtides irms. As cromtides irms, agora cromossomos filhos, iniciam a migrao para os plos, puxadas pelas fibras do fuso. 1.3.4. Telfase II A telfase da segunda diviso meitica no difere de uma diviso mittica, exceto pelo nmero haplide de cromossomos e pelo resultado final que a formao de quatro clulas filhas. Estas quatro clulas filhas haplides podem ficar juntas (ttrades dos vegetais superiores) ou separadas (espermtides de mamferos). 2. Gametognese A gametognese o processo de formao de gametas maduros a partir das clulas germinativas primordiais, processo este que inclui a diviso meitica. Nos animais, os gametas formados so os vulos e os espermatozides, pelos processos de ovognese e espermatognese, respectivamente. Nos vegetais superiores, os gametas formados so os sacos embrionrios e os gros de plen, pelos processos de megasporognese e de microsporognese, respectivamente. Segundo Raven et al. (1999), nas plantas, a meiose no resulta na produo de gametas, mas na produo de esporos ou meisporos. Meisporos so clulas haplides que podem dividir mitoticamente para produzir um organismo haplide. Isto contrasta com os gametas, que somente podem desenvolver depois de fusionar-se com outro gameta.

Organismos haplides multicelulares, que ocorrem em alternncia com formas diplides, so encontrados em plantas, em muitas algas (algumas entre as algas marrons, vermelhas e verdes) e em outros poucos organismos. Estes organismos possuem um tipo de ciclo vital conhecido como alternncia de geraes. Entre plantas e algas, a gerao haplide, produtora de gameta, chamada de gametfito, e a gerao diplide, produtora de esporos, chamada de esporfito. Em algumas algas na maioria das algas vermelhas, muitas algas verdes e poucas algas marrons as formas ou geraes diplides so similares em aparncia externa, apresentando, portanto, uma alternncia de geraes isomrficas. Nas plantas, em algumas algas marrons e vermelhas, ocorre uma alternncia de geraes heteromrficas, ou seja, diferentes uma da outra. Nas brifitas (musgos e hepticas), o gametfito a forma dominante, nutricionalmente independente e usualmente maior que o esporfito, que pode ser mais complexo estruturalmente. Nas plantas vasculares (ex: conferas e plantas com flores), o esporfito a forma dominante (a rvore ou a prpria planta florida), muito maior e mais complexa do que o gametfito (o saco embrionrio constitudo de 7 clulas e o gro de plen com 3 clulas), que nutricionalmente dependente do esporfito em quase todos os grupos. 2.1. Gametognese e fecundao animal Sero apresentados os processos de espermatognese e ovognese humanos como processos representativos da gametognese animal. No ser humano, as clulas germinativas primordiais ou clulas sexuais primitivas so observadas j na 4 semana de desenvolvimento embrionrio (no endoderma do saco vitelino) e migram para o local das cristas genitais, associando-se a clulas somticas, formando as gnadas primitivas durante a 6 semana. Estas diferenciam-se rapidamente em testculos ou ovrios, dependendo do sexo cromossmico do embrio. No ser humano, a combinao e segregao ao acaso dos cromossomos maternos e paternos durante a meiose (posio na placa equatorial durante a metfase I e, conseqente, separao ao acaso dos homlogos paternos e maternos na anfase I) resulta em 223 ou 8.388.608 diferentes combinaes de cromossomos nos gametas de cada progenitor (pai ou me). Assim, existiro 246 combinaes possveis no zigoto. Levando em conta, ainda, a variao produzida pela permuta (paquteno da prfase I), o nmero de zigotos diferentes exceder 6 x 1043, se considerarmos somente uma permuta por cromossomo, com apenas 10% de diferena allica entre os genomas parentais (genoma materno e genoma paterno possuindo 90% de alelos idnticos, o que rarssimo). Este nmero maior do que o nmero de humanos que j existiram e enfatiza a bagagem gentica nica de cada indivduo. 2.1.1. Espermatognese As clulas germinativas primordiais, depois de um grande nmero de mitoses, do origem s espermatognias, que ficam situadas na periferia dos tbulos seminferos. A espermatognese inicia na puberdade e continua, apesar de que com menor intensidade, at idade avanada. Na puberdade, as espermatognias iniciam um processo de proliferao intensa. Depois de cerca de 30 divises mitticas, algumas espermatognias cessam sua multiplicao, crescem e sofrem um processo de maturao, dando origem aos espermatcitos de primeira ordem ou espermatcitos primrios. Os espermatcitos primrios sofrem a primeira diviso meitica (meiose I), dando origem aos espermatcitos de segunda ordem ou espermatcitos secundrios. Os espermatcitos secundrios, atravs da segunda diviso meitica (meiose II), originam as espermtides.

As espermtides sofrem um processo de maturao, chamado de espermiognese e originam os espermatozides. O processo de espermatognese, desde a espermatognia, que origina o espermatcito primrio, at a formao do espermatozide maduro dura cerca de 60 a 65 dias, sendo que o processo meitico (meiose I e II) ocupa aproximadamente metade deste tempo. Aps o incio do processo de espermatognese, o mesmo contnuo, ou seja, as espermatognias, que no entram em processo meitico, esto sempre aumentando de nmero, via mitose, originando os espermatcitos primrios, que vo sofrer o processo meitico (meiose I e meiose II) originando as espermtides, as quais se transformaro, sem ocorrncia de nenhuma outra diviso celular, em espermatozides maduros. Cada espermatognia (2n) diferencia-se em 1 espermatcito primrio (2n) que, duplica seus cromossomos na fase S da Interfase pr-meitica (2nd) e, aps meiose I, d origem a 2 espermatcitos secundrios (nd), os quais, aps a meiose II, iro originar 4 espermtides (n) que, depois do processo de espermiognese, transformar-se-o em 4 espermatozides (n). Observao: o expoente d indica duplicado em cromtides irms. O espermatozide maduro possui duas regies distintas, contidas numa mesma membrana plasmtica: a cabea, onde est localizado seu ncleo haplide e, sobre este, o acrossomo ou vescula acrossomal (= lisossomo especializado, formado pela fuso de vesculas do complexo de Golgi, cheias de enzimas hidrolticas) e a cauda formada por um longo flagelo, cuja parte anterior rodeada por mitocndrias altamente especializadas em gerar ATP para a movimentao desta cauda, que impulsionar o espermatozide. Os cromossomos que esto nos espermatozides so constitudos de DNA e protaminas, no lugar das histonas. Normalmente, cerca de 100 a 300 milhes de espermatozides (50-100 x 106) esto presentes numa ejaculao, destes, apenas 200 alcanam o stio de fertilizao no oviduto e somente um fertilizar o vulo. A produo total de espermatozides, durante a vida de um homem, excede 1012. 2.1.2. Ovognese Durante os primeiros meses de vida embrionria, as clulas germinativas primordiais do origem s ovognias, aps um processo que envolve de 20 a 30 mitoses. A ovognese inicia no perodo embrionrio, por volta do 2 a 3 ms de vida intrauterina, devido ao da substncia indutora de meiose (difundida das clulas dos cordes que unem os mesonefros ao ovrio fetal). um processo que pode consumir de 12 a cerca de 50 anos, em mdia, dependendo do perodo reprodutivo de cada mulher. Aproximadamente, no 2 ms de vida intra-uterina, as ovognias iniciam processo de proliferao intensa. J, no 3 ms da gestao, encontram-se embries femininos com ovcitos de primeira ordem ou ovcitos primrios, que iniciaram a primeira diviso meitica (fases do leptteno, zigteno e paquteno da prfase I). No 4 ms, j so encontrados alguns no estgio de diplteno. Em torno do 3 e 4 ms de vida intra-uterina, o embrio feminino apresenta, alm dos ovcitos primrios nos estgios da meiose I, citados anteriormente, ainda muitas ovognias em grande atividade mittica. Por volta do 7 ms de vida fetal, todas a ovognias j se transformaram em ovcitos de primeira ordem. Cada ovcito primrio a clula central de um folculo em desenvolvimento. As clulas foliculares produzem um polipeptdeo de baixo peso molecular que tem a capacidade de inibir a meiose. Desta maneira, os cromossomos, em vez de continuarem a se condensar e prosseguir da fase de diplteno para diacinese, distendem-se formando um emaranhado cromatnico e ficando neste estado, chamado de dictiteno, desde a fase pr-natal at o momento de ovulao (desde a primeira ovulao, em torno de 11 a 16 anos, at a ltima, cerca de 45 a 50 anos).

Durante o dictiteno, os cromossomos dos ovcitos descondensam e so transcritos ativamente, com isto os ovcitos crescem tremendamente durante este perodo (ovcitos humanos tm cerca de 100 m de dimetro, mais de cem vezes o tamanho de uma clula somtica padro; ovcitos de sapos tem aproximadamente 1 mm de dimetro). Durante este perodo, os ovcitos acumulam material de reserva, incluindo RNAs e protenas necessrios para a manuteno dos primeiros estgios do embrio. A partir da puberdade, em cada ciclo menstrual o ovcito primrio, do folculo que amadurece, reinicia sua diviso meitica. Originam-se, aps o trmino da meiose I, duas clulas de tamanhos diferentes: uma maior, com praticamente o mesmo tamanho da clula original, chamada de ovcito de segunda ordem ou ovcito secundrio, e uma menor, que fica aderida ao ovcito de segunda ordem, chamada de primeiro corpsculo polar ou primeiro glbulo polar ou, ainda, primeiro polcito. O ovcito secundrio inicia, imediatamente, a meiose II e, quando est em metfase II, expelido para a trompa uterina, juntamente com o primeiro corpsculo polar, no perodo de ovulao. Se este ovcito de segunda ordem, que est em metfase II, for penetrado por um espermatozide, ele prosseguir para anfase II e telfase II, originando novamente duas clulas de tamanhos diferentes: o vulo, que fica com quase todo o material citoplasmtico, tendo praticamente o mesmo tamanho do ovcito de segunda ordem, o segundo corpsculo polar ou segundo glbulo polar ou, ainda, segundo polcito. O primeiro corpsculo polar pode, tambm, ter continuado sua diviso meitica dando origem a dois outros corpsculos polares, desta maneira o vulo fica associado a trs corpsculos polares. Se o ovcito secundrio no for penetrado pelo espermatozide, no prazo de 10 a 12 horas aps a ovulao, ele perder a capacidade de ser fertilizado e degenerar junto com o primeiro corpsculo polar. No feto feminino, o nmero mximo de clulas germinativas de 6,8 x 106 aos 5 meses. Na poca do nascimento existem cerca de 2,5 milhes de ovcitos (2 x 106). J na puberdade, este nmero menor que 200.000, mas a maioria degenera e apenas, aproximadamente, 400 tornar-se-o maduros e sero ovulados.

2.1.3. Fecundao Apesar do grande nmero de espermatozides, ocorre a penetrao de apenas um, e este processo desencadeia uma srie de eventos bioqumicos que impedem a entrada de outro espermatozide. Para isso, este espermatozide precisa chegar ao local de fertilizao no oviduto, migrar atravs da camada de clulas foliculares, que cercam o vulo liberado; atravessar o invlucro do vulo (zona pelcida) com o auxlio das proteases e hialuronidases do acrossomo, e ligar-se e fundir-se com a membrana plasmtica do vulo. O espermatozide toca a extremidade das microvilosidades da superfcie do ovcito e as microvilosidades vizinhas alongam-se e agregam-se ao redor do espermatozide, fazendo com que ele se fusione com a membrana plasmtica, sendo sugado para dentro do ovcito. Seu ncleo comea a crescer, enquanto seus cromossomos unifilamentosos duplicam, cada qual ficando constitudo por duas cromtides. Desenvolve-se, assim, no citoplasma do ovcito secundrio, o pr-ncleo masculino. Enquanto isso, o ovcito de segunda ordem completa a meiose II, isto , entra em anfase II e telfase II, transformando-se, desse modo, em vulo e dando origem ao segundo polcito ou segundo corpsculo polar. Quando isso acontece, os cromossomos no interior do ncleo do vulo, que so unifilamentosos, sofrem duplicao, denominando-se esse ncleo de pr-ncleo feminino. Os glbulos polares, eventualmente, desintegram-se. Cerca de uma

hora aps a fertilizao, os pr-ncleos masculino e feminino migraram para o centro do ovo e seus envelopes nucleares fazem contato. Est formado o zigoto diplide. Na espcie humana, do mesmo modo que em outros mamferos, os dois pr-ncleos no se fundem diretamente, como em muitas outras espcies animais; eles se aproximam, mas permanecem distintos at que a membrana de cada pr-ncleo fragmentada, os centrolos replicados e os cromossomos dos dois gametas so finalmente integrados em um fuso mittico nico, que medeia a primeira diviso do zigoto. De fato, no momento em que as membranas dos pr-ncleos desagregam, os cromossomos dos dois conjuntos haplides (paterno e materno) esto duplicados e condensados e se prendem ao fuso que se forma entre os centrolos. Em conseqncia disso pode-se dizer que na espcie humana e em mamferos no existe propriamente um ncleo de zigoto, pois o material nuclear do ovo fica em metfase, dividindo-se a clula zigtica, em seguida, em dois blastmeros. Na maior parte dos animas, incluindo os homens, o espermatozide contribui mais do que apenas com seu DNA para o zigoto: ele tambm fornece o centrolo (que curiosamente no existe no vulo no fertilizado, que possui o centrossomo, mas no o centrolo). O centrolo do espermatozide entra no vulo junto com o ncleo e a cauda do espermatozide e, em algumas espcies, ele replica e auxilia na organizao do primeiro fuso mittico no zigoto. Por uma srie de divises mitticas, o zigoto produz uma estimativa de 2 x 1012 clulas encontradas no recm-nascido as subseqentes 5 x 1012 clulas encontradas no adulto. Na verdade, segundo Alberts et al. (2002) a fertilizao marca o incio de um dos fenmenos mais admirveis em toda a biologia o processo de embriognese, no qual o zigoto desenvolve-se em um novo indivduo. 2.2. Esporognese e Fecundao Vegetal Sero apresentados os processos de microsporognese, que consiste na formao dos micrsporos dentro dos sacos polnicos ou microsporngios das anteras, e de megasporognese, que a formao do megsporo no interior do nucelo ou megasporngio. Estes processos so seguidos, respectivamente, pelos de microgametognese, que o desenvolvimento do micrsporo em um microgametfito ou gro de plen, e pelo de megagametognese, que o processo de desenvolvimento do megsporo em um megagametfito ou saco embrionrio. Estes processos e o de fecundao descritos neste texto so os de angiospermas, devendo-se ressaltar que existem diferenas para outras plantas. 2.2.1. Microsporognese e microgametognese Na antera em diferenciao, observa-se a epiderme e uma massa de clulas que ir formar quatro grupos de clulas frteis ou esporgenas, cada um destes rodeado por algumas camadas de clulas estreis, que formam o tapete (camada mais interna da parede da antera), que tem funo de nutrir os micrsporos em desenvolvimento. As clulas esporgenas, aps divises mitticas, tornam-se microsporcitos ou clulas me de plen (CMP), que sofrem diviso meitica. Aps a meiose I, formada uma dade, onde pode ter ocorrido citocinese, com a formao de membrana plasmtica e parede celular, separando os dois ncleos formados (j com reduo cromossmica, mas ainda com os cromossomos duplicados em cromtides irms, presas pelos centrmeros). Este tipo de dade mais comum em monocotiledneas. Nas dicotiledneas, geralmente, os dois ncleos ficam em um citoplasma comum, pois no h formao de parede entre os mesmos. Aps a meiose II originada uma ttrade, ou seja, uma CMP que contm os quatro micrsporos haplides, separados entre si pela membrana plasmtica e parede celular. Tanto em mono como em dicotiledneas, ao final da diviso meitica sempre ocorre a citocinese. Os micrsporos liberam-se da ttrade e cada um ir sofrer o processo de microgametognese, ou seja, de diferenciao em gro de plen. Uma das etapas deste

processo o desenvolvimento de uma camada interna pecto-celulsica, a intina, e uma externa muito resistente, tanto decomposio quanto a qumicos, a exina, formada por um biopolmero conhecido como esporopolenina. A outra etapa a diviso mittica sofrida pelo micrsporo haplide, que dar origem a duas clulas haplides no interior da parede do gro de plen: a clula vegetativa ou clula do tubo e a clula geradora ou clula generativa. Alguns autores chamam de ncleo vegetativo e ncleo generativo, respectivamente. Em cerca de 2/3 das angiospermas, os gros de plen ou microgametfitos esto neste estgio binucleado, quando ocorre a deiscncia das anteras. No restante, o ncleo da clula generativa sofre outra mitose, dando origem a dois gametas masculinos haplides ou anterozides. Os gros de plen diferem em tamanho (20 a 250 micrmetros em dimetro), nmero de poros (atravs dos quais germina o tubo polnico) e ornamentao da exina (que serve de proteo), caractersticas que podem servir para diferenciao taxonmica entre quase todas as famlias e muitos gneros de plantas com flores, inclusive fsseis. 2.2.2. Megasporognese e Megagametognese As placentas das paredes dos ovrios originam um ou mais vulos, que so inicialmente constitudos inteiramente de nucelo. Este se desenvolve rapidamente em uma ou duas camadas envolventes, os tegumentos, que possuem uma pequena abertura, chamada micrpila. Cada vulo ir transformar-se em uma estrutura relativamente complexa, que ser suportada por uma haste, o funculo. Inicialmente, no nucelo, surge um nico megasporcito ou clula me de megspora (CMM). Este megasporcito diplide sofre meiose, sendo que ao final da diviso meitica (meiose I e meiose II), formam-se quatro megsporos haplides, arranjados em uma ttrade linear. Trs megsporos degeneram e o megsporo mais afastado da micrpila sobrevive, acumulando a maior parte do citoplasma da CMM e desenvolvendo-se em um megagametfito. O megagametfito cresce s custas do nucelo e o ncleo haplide sofre trs ciclos de diviso mittica, dando origem a oito ncleos, dispostos em dois grupos de quatro ncleos haplides. Um grupo fica prximo micrpila e outro no lado oposto, na regio da chalaza. Um ncleo, de cada grupo de quatro ncleos, migra para a clula central desta estrutura. Estes dois ncleos, que se posicionam centralmente, passam a ser chamados de ncleos polares. Os ncleos da regio da micrpila originaro a oosfera ou clula ovo e as sinrgidas. As duas sinrgidas posicionam-se ao lado da oosfera, rodeando-a. Os trs ncleos da regio da chalaza so conhecidos como antpodas. Esta estrutura multicelular, que contm 7 clulas e 8 ncleos, (oosfera + sinrgidas + clula central com ncleos polares + antpodas), conhecida por saco embrionrio ou megagametfito (corresponde ao vulo animal). Este o tipo mais comum de ovognese, sendo encontrado em 2/3 das plantas com flores. 2.2.3. Polinizao e Fecundao Polinizao o processo de deiscncia ou abertura das anteras e a transferncia dos gros de plen para os estigmas das flores. Este processo pode ocorrer por ao da gravidade, no caso de plantas autgamas, ou por uma srie de vetores, como o vento, insetos, pssaros e o prprio ser humano. Em contato com o estigma, o gro de plen absorve gua, hidratando-se e germinando, atravs de um de seus poros, iniciando assim a formao do tubo polnico. O ncleo vegetativo direciona a formao do tubo polnico, que cresce por dentro do estilete. Se a clula generativa s possui um ncleo, neste momento que ele sofre mitose, formando os dois ncleos espermticos ou gamticos. Os dois ncleos gamticos j

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formados ou recm-formados escorregam pelo tubo polnico, ultrapassando o ncleo vegetativo. O tubo polnico alcana o vulo e, normalmente, entra pela micrpila, penetrando em uma das sinrgidas. Nas sinrgidas, que j haviam comeado a degenerar quando da polinizao, so liberados os dois ncleos espermticos e o ncleo do tubo, atravs do poro subterminal do tubo polnico. Um ncleo espermtico penetra na oosfera e o outro, penetra na clula central. O primeiro funde-se com o ncleo da oosfera, dando origem ao zigoto diplide. O segundo funde-se com os dois ncleos polares (que j poderiam, inclusive, ter-se fusionado anteriormente), num processo de fuso tripla, formando um ncleo triplide, chamado de ncleo primrio do endosperma, que dar origem ao endosperma da semente. O ncleo do tubo, as sinrgidas e as antpodas degeneram. Esta dupla fecundao caracterstica das angiospermas e de Ephedra e Gnetum (filo Gnetophyta). Nas gimnospermas, s um dos ncleos espermticos funcional e funde-se com a oosfera, o outro degenera.
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