UNIVERSIDADE ESTADUAL DE SANTA CRUZ PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM CINCIA ANIMAL

PROJETO DE PESQUISA
TUMOR MAMRIO EM CADELAS: ABORDAGEM CITOGENTICA

TUMOR MAMRIO EM CADELAS: ABORDAGEM CITOGENTICA

orientador: Prof. Amauri A. Wenceslau co-orientador: Prof. Paulo Affonso de Mello (PPGGBC-UESB/Jequi) aluna: Cntia Suzane Dias de Morais

Introduo e Justificativas
Neoplasias mamrias 50% dos casos (Daleck et al.,

1988; Benjamin et al.; 1999; Merck, 2001)

Predisposio fmeas (Strandberg & Goodman,1974; Queiroga &

Lopes, 2002a) maiores de 2 anos de idade (Moulton, 1978)

Patologia multifatorial (Oliveira et al., 2003; Pawlowski et

al., 2009)

Tumor mamrio canino

Introduo e Justificativas
Diagnstico

anlise histopatolgica (Daleck et al.,1998a; Queiroga &

Lopes, 2002; Vidales & Mocha, 2007)

Tratamento

remoo cirrgica do tumor mamrio (Queiroga & Lopes,

2002ab; Egenvall et al., 2005)

Prognstico varivel de acordo com vrios critrios clnicos

associados ao tumor (Queiroga & Lopes, 2002b; Silva et al., 2004).

Mastectomia regional (mastectomia radical modificada)

Introduo e Justificativas
Citogentica rea que pesquisa os cromossomos ferramenta para compreenso do comportamento das

neoplasias (Peterson & Freeman, 2009)

contribuio para aprimoramento das tcnicas

diagnsticas e prognsticas (Sargan et al., 2005; Breen, 2008; Devitt, 2009)

Metfase e caritipo canino (2n=78)

Introduo e Justificativas
Alteraes cromossmicas

numricas
estruturais Neoplasias caninas apresentam mais aberraes numricas que estruturais (Devitt et al.,

2009) mais aberraes cromossmicas nos tumores mesenquimais que nos epiteliais (Reimann et al., 1999)

Metfase e caritipo de tumor mamrio misto benigno canino trissomia 1.2n=79

Introduo e Justificativas
Co: modelo de estudo semelhana entre doenas genticas humanas e

caninas, inclusive entre vrios tipos de tumores (Strandberg & Goodman,1974; Ostrander et al.,2000; Winkler et al.; 2005)
estudos citogenticos em ces agregam benefcios ao

homem e ao animal

Objetivos
Observar as possveis alteraes cromossmicas

numricas e/ou estruturais entre o caritipo observado em linfcitos perifricos e o caritipo visualizado em clulas tumorais de glndula mamria de cadelas.
Avaliar tanto as possveis alteraes cromossmicas de

carter numrico quanto estrutural em clulas tumorais de glndula mamria de cadelas utilizando diversos tipos de bandeamento cromossmico.

Material e Mtodos
Animais

fmeas caninas atendidas no Hospvet/UESC e em clnica

veterinria da cidade de Jequi clinicamente portadoras de neoplasia mamria com indicao cirrgica como tratamento da doena
Material biolgico fragmentos do tumor para histopatologia e anlise

citogentica sangue para anlise citogentica

Material e Mtodos
Coleta tumor para anlise histopatolgica imediatamente aps retirada cirrgica, obedecendo

normas bsicas de coleta

acondicionamento em frasco com formol 10% tamponado

para fixao do material

identificao do material e preenchimento do formulrio
encaminhamento ao Laboratrio de Histopatologia/UESC

Material e Mtodos
Coleta tumor para anlise citogentica imediatamente aps retirada cirrgica, remoo de

fragmento com aproximadamente 1cm3, obedecendo normas bsicas de coleta

acondicionamento em meio de cultura RPMI 1640

refrigerado
processamento imediato para obteno da suspenso

celular utilizando a tcnica descrita por Netto et al. (2007) com modificaes

Material e Mtodos
Coleta sangue para anlise citogentica durante pr-operatrio, coleta de 3mL atravs de puno

da veia ceflica
utilizao de tubo com anticoagulante heparina

Vacutainer mantido sob refrigerao

processamento para obteno de cromossomos mitticos

utilizando a tcnica descrita por Moorheard et al. (1960) com modificaes

Material e Mtodos
Anlise das metfases provenientes do tecido neoplsico

e sanguneo
tcnica convencional (Giemsa) para estabelecer nmero

diplide e frmula cariotpica

bandeamento G (Seabright, 1971) para pareamento e

eventual identificao de rearranjos microestruturais

Material e Mtodos
Anlise das metfases provenientes do tecido neoplsico

e sanguneo
bandeamento C (Sumner, 1972) para deteco de

heterocromatina constitutiva nos cromossomos das clulas normais ou neoplsicas

Ag-Nor (Howell & Black, 1980) para identificao das

regies organizadoras de nuclolos ativas nos cromossomos das clulas normais ou neoplsicas

Tcnica convencional (Giemsa) metfase de clula neoplsica de TMC

Bandeamento G (Akodon arviculoides)

Bandeamento C (Artibeus lituratus)

Tcnica Ag-Nor (Clyomys laticeps)

Material e Mtodos
Foto documentao

Microscpio Olympus BX51 sob aumento 1000x acoplado

com sistema digital de captura de imagem Image ProPlus (Media Cybernetics)

Montagem e anlise dos caritipos dos linfcitos

perifricos e das clulas neoplsicas

COMIT DE TICA NO USO DE ANIMAIS - CEUA/UESC Nmero de protocolo 019/2012

Viabilidade
Animais provenientes de atendimento veterinrio de

rotina
Cirurgia como recomendao de tratamento da patologia Anlise histopatolgica no laboratrio de

Histopatologia/UESC
Processamento e anlise do material nos laboratrios de

Gentica/UESC e Citogentica/UESB

Resultados esperados
Verificar diferenas entre os caritipos obtidos a partir de

linfcitos perifricos e caritipos visualizados em clulas tumorais de glndula mamria de cadelas

Observar as alteraes cromossmicas numricas e

estruturais entre os caritipos das clulas do tecido neoplsico mamrio canino atravs das diferentes tcnicas de bandeamento

PLANO DE TRABALHO E CRONOGRAMA

Atividades 1 2012 quadrimestre 2 2012 quadrimestre 3quadrimestre 2012 1 trim 2013

Coleta do material

Processamento material

do

Anlise do material

Confeco
dissertao

da

Preparo de artigos

OBRIGADA

CIMOVET@YAHOO.COM.BR