FACULDADE DE FILOSOFIA, CINCIAS E LETRAS DE

RIBEIRO PRETO

UNIVERSIDADE DE SO PAULO
Microscopia de Fora Atmica Aplicada a
Membranas Biolgicas
RIBEIRO PRETO -
2014
Aluno: Lus Eduardo Bernardes
Docente: Prof. Dr. Pietro Ciancaglini
MFA Microscopia de Fora
Atmica
Microscopia de varredura por sonda: no existem lentes
que focalizam a luz ou feixes de eltrons.

Fornece uma imagem tridimensional com resoluo
atmica


Microscopia Interaes Resoluo Aplicaes
Microscopia de Fora
Atmica
Van der Waals 1 Qualquer
superfcie
Microscopia de Fora
Magntica
Magnticas 250 Superfcies
magnticas
Microscopia de
Tunelamento
Eltron-eltron 0,1 Superfcies
condutoras
Princpio da tcnica
A tcnica e o funcionamento do microscpio
tomam por base as interaes atrativas e
repulsivas existentes entre partculas
microscpicas a pequenas distncias

Elementos do Microscpio
Suporte piezoeltrico

Cantilever

Ponta de prova (tip)

Laser

Detector fotodiodo
Modos de Operao
Modo contato: o tip varre a superfcie da
amostra. Um dos principais problemas a
susceptibilidade da amostra deformao
plstica.
Modos de Operao
Modo no contato: o tip no toca a superfcie
da amostra. Um dos principais problemas a
perda de resoluo da imagem obtida.
Modos de Operao
Modo tapping: o tip varre a superfcie da
amostra com contato intermitente, danificando
menos a amostra.
Aplicaes para Membranas
Biolgicas
Microscopia de fora atmica pode ser utilizada
para determinar propriedades de membrana:

a. Morfologia da superfcie

b. Distribuio e tamanho de poros

c. Adeso (protenas de adeso), dureza e
elasticidade
Observao de Mudanas
Conformacionais Promovidas por
Ligantes
MlotiK1: protena canal presente em
procariontes (Mesorhizobium loti)

Mudana conformacional mediante
ligao com cAMP.
A, B e C Arranjo da protena
canal na presena do ligante
cAMP
D, E e F Arranjo da protena
canal na ausncia do ligante
cAMP
Desdobramento Mecnico de
Protenas de Membranas
Permite o estudo das interaes moleculares

possvel estimar a estabilidade relativa de cada
regio da protena
As duas imagens comparam a membrana antes e
aps a remoo da protena bacteriorrodopsina
Referncias Bibliogrficas
Allison M. Whited and Paul S.-H. Park, Atomic force
microscopy: a multifaceted tool to study membrane
proteins and their interactions with ligands, Biochimica
et Biophysica Acta 1838 (2014) 56-58
AFM: Anlise de materiais por Microscopia de Fora
Atmica. Disponvel em:
http://www.ebah.com.br/content/ABAAABjfsAC/afm-
analise-materiais-por-microscopia-forca-atomica-por-
rodrigo-pasiani-costa
Microscopia de Fora Atmica. Disponvel em:
http://www.ebah.com.br/content/ABAAAANOIAJ/micros
copia-forca-atomica
Vdeo aula:
http://www.youtube.com/watch?v=QZLda253cYE

Obrigado pela
ateno