Biossegurana em

laboratrios de
Anlises Clnicas

O que
biossegurana?
um conjunto de aes voltadas
para preservao, minimizao ou
eliminao de riscos.

Tipos de riscos:
Fsico
Qumico
Biolgicos
Acidentes
Risco 1
O risco individual e para a comunidade e baixa,so agentes
biolgicos, que tem a probabilidade nula ou baixa de provocar
infeces no homem ou em animal sadio.
Risco 2
O risco individual moderado, aplica-se a agentes biolgicos que
provocam infeces no homem, onde o risco de propagao na
comunidade limitado.
Risco 3
Agentes biolgicos que provocam infeces, graves.
Risco 4
O risco da comunidade elevado,de fcil propagao.

Nveis de biossegurana:
Nvel 1

adequado ao trabalho que envolva agentes bem

caracterizados e conhecidos por no provocarem
doenas em seres humanos e que possuam mnimo
risco pessoal do laboratrio e meio ambiente.
Nvel 2

semelhante ao nvel 1 de biossegurana e

adequado ao trabalho que envolva agentes de risco
moderado para as pessoas e para o meio ambiente.

Nvel 3

aplicvel para laboratrios clnicos,de

diagnstico,ensino e pesquisa ou de produo onde o
trabalho com agentes exticos possa causar doenas
serias com potencialmente fatais como resultando de
exposio para inalao.
Nvel 4

indicado para o trabalho que envolve agentes

exticos e perigosos que exponham o indivduo a um
alto risco de contaminao de infeces que podem
ser fatais,alm de apresentarem em potencial
relevado de transmisso por aerossis.

Classes de Riscos
Biolgicos

Nveis de biossegurana

Prticas microbiolgicas exigidas

Prticas laboratoriais especiais
Equipamentos de conteno exigidos
Instalaes laboratoriais

Nvel 1 de Biossegurana (NB-1)

Adequado ao trabalho que envolva agente com menor grau de risco (Classe de Risco I) para
profissionais do laboratrio e para o meio ambiente:
Aplicao das BPLs e utilizao de EPIs.
O trabalho geralmente e conduzido em bancadas abertas, no exigindo equipamentos especiais de

conteno.
Os profissionais devero ter treinamento especifico nos procedimentos realizados e trabalhar sob
superviso.
O acesso ao laboratrio ser limitado ou restrito de acordo com definio do responsvel e no
ser permitida a entrada de animais e crianas.
Procedimentos tcnicos e administrativos descritos.
O laboratrio no esta separado das demais dependncias do edifcio.
Deve possuir uma pia especifica para lavar as mos.
Nvel 2 de Biossegurana (NB-2)

Adequado ao trabalho que envolve agentes de risco moderado para os profissionais e para o meio
ambiente, em geral agentes causadores de doenas infecciosas (Classe de Risco II).
As instalaes exigidas devem atender as especificaes estabelecidas para o NB-1 acrescidas das
seguintes exigncias:

Autoclave disponvel para descontaminao no interior ou prxima ao laboratrio de modo a

permitir a descontaminao de todo o material antes do seu descarte;
Cabine de Segurana Biolgica Classe I ou II e centrifuga com caapa protegida sempre que houver
manipulao de materiais em que possa existir a formao de aerossis.
Os profissionais devero ter treinamento especifico no manejo de agentes patognicos, ser

Nvel 3 de Biossegurana (NB-3)

Adequado ao trabalho com microrganismos com elevado risco infeccioso (Classe de Risco III)
podendo causar doenas sistmicas serias e potencialmente letais como Mycobacterium
tuberculosis, Coxiella burnetti e Brucella spp, entre outros:
Barreiras de proteo individual devem ser utilizadas e toda manipulao realizada em cabine

de segurana biolgica classe II ou III, com filtro HEPA.

Oferecer treinamento especifico aos funcionrios no manejo de agentes patognicos e
potencialmente letais, orientar sobre os possveis riscos e trabalhar sob superviso.
Quando no houver condies especificas para o NB-3 e instalaes laboratoriais sem rea de
acesso especificam, com ambientes selados ou fluxo de ar unidirecional, as atividades de rotina
e operaes repetitivas podem ser realizadas em laboratrio com instalao NB-2, acrescidas de
equipamentos de conteno e das praticas recomendadas para NB-3.
Cabe ao pesquisador principal a deciso de programar essas modificaes, comunicando-as a
CIBio e CTNBio (Biosseguranca em Laboratrio de Sade Publica Oda, Leila, Avila, Suzana et al.
Brasilia).
O acesso ao laboratrio ser controlado. Menores de idade no sero permitidos dentro do
laboratrio.
Nvel 4 de Biossegurana (NB-4)

Representa o nvel Maximo de segurana. Adequado ao manuseio de agentes infecciosos que

possuem alto risco de infeco individual e de transmisso pelo ar e sempre que o trabalho
envolver OGM resultante de organismo receptor ou parenteral classificado como classe de risco
NB-4.
Responsvel tcnico tem a responsabilidade final no controle do acesso ao laboratrio

Equipamentos de
Proteo

EPI exemplos:

Jaleco

culos de Proteo

Luvas de ltex (Borracha)

Luvas de vinil

Luvas de alta temperatura (Kevlar)

Mscaras de Proteo

Mscara KSN

Respirador
descartvel

equipamento est aprovado

para classe PFF1 (poeiras e
nvoas)

- PFF2 VO C/ Vlvula
Indicado para proteo das vias
respiratrias contra odores incmodos
de vapores orgnicos, poeiras txicas
como: poeiras de gros, nvoas, e

EPC: exemplos
Cabines de segurana biolgicas:
Classe I
Classe II
Classe III

 Classe I, o ar que sai passa atravs de um

filtroespecial denominado de HEPAe eliminado no

ambiente livre das partculas contaminadas, esse
tipode cabine protege o manipulador e o ambiente,
porm no evita a contaminao domaterial que est
sendo manipulado.

Classe II, o ar filtrado em filtros HEPA, antes

deentrar e antes de sair da cabine, protegendo o
manipulador, o ambiente e o material; essas duas
cabines possuem abertura frontal

Classe III o ar estril, essa cabine completamente

fechada, o que impede a troca de ar com o ambiente
e funciona com presso negativa, ela oferece total
segurana ao manipulador, e osrecipientes e o
material a serem manipulados entram e saem por
meio de cmaras dedesinfeco.

Chuveiro e lava olhos de emergncia

Autoclave

Conduta dentro dos

laboratrios

 Programa de Preveno de Risco Ambiental (PPRA)

avaliado anualmente (NR-32 MTE).

Exame pr-admissional e peridico (Clnico e
Laboratorial) Programa de Controle
Mdico de Sade Ocupacional (PCMSO) anual.
Programa de Vacinao atualizado.
Registro de doenas e acidentes de trabalho.
BPLCs (Boas Prticas em Laboratrio Clnico)
implantadas e seguidas.
Acesso limitado ao laboratrio.

BPLCs. .

Proibido comer, beber, fumar, guardar alimentos e aplicar cosmticos na

rea tcnica.
Prender os cabelos e evitar o uso de bijuterias.
vedado o uso de calados abertos (chinelos e sandlias).
Toda amostra biolgica deve ser considerada potencialmente
contaminada.
Obrigatrio o uso de EPIs.
Proibido pipetar com a boca.
Obrigatria a descontaminao das bancadas de trabalho antes e aps o
desenvolvimento das atividades.
Proibido reencapar e entortar agulhas aps o uso.
Nunca manipular materiais no identificados.
Segregar e acondicionar adequadamente resduos biolgicos, qumicos e
ionizantes.
Depositar todo material contaminado em recipientes apropriados para
autoclavao.
Higienizar sempre as mos.

Transporte de Amostras.

Utilizar caixas rgidas preferencialmente providas de tampas

higienizveis, contendo estantes que permitam que os frascos
permaneam na posio vertical, evitando acidente por
derramamento. Devem ser resistentes a desinfetante qumico
ou calor.
Devem ser lavadas frequentemente sempre que derramada.

Utilizao de Cabines de Segurana.

Ligar a cabine e a luz 10 a 15 minutos antes do uso

Fechar as portas do laboratrio e evitar circulao de pessoas durante o uso
da cabine.
Colocar os equipamentos, meios de cultura, vidrarias etc. no plano de
atividade da rea de trabalho.
Limpar todos os objetos antes de introduzi-los na cabine e organizar os
materiais de modo que no se misturem os itens limpos e contaminados.
Bicos de Bunsen no devem ser utilizados dentro da cabine, pois o calor pode
acarretar danos ao filtro HEPA e interromper o fluxo laminar de ar, causando
turbulncia.
Usar pipetador automtico.
Conduzir as manipulaes no centro da cabine e minimizar os movimentos
dentro da mesma.
Ao termino, a superfcie de trabalho da cabine deve ser limpa com
desinfetante apropriado.
Deixar a cabine ligada 10 a 15 minutos antes de deslig-la.
Fazer controle da contagem de tempo do uso das lmpadas UV, e de utilizao
da cabine para fim de manuteno e troca do pr-filtro.

Controle da Gerao de Aerossis.

A manipulao de microrganismos, sangue, fludos orgnicos, p e

substncias qumicas poder levar formao de aerossis, podendo
contribuir para ocorrncia de enfermidades ocupacionais. Algumas
operaes contribuem para formao de aerossis.
Uso de agitadores.
Remoo de tampas de borracha, de rosca ou de algodo de tubos

de ensaio.
Flambagem de alas de maneira inadequada.
Inoculao de culturas com pipeta ou ala de forma inadequada.
Remoo de meio de cultura lquido com seringa e agulha.
Destampar frasco de cultivo ou suspenso de lquidos
imediatamente aps agit-lo.
Romper clulas com ultrassom.
Soprar a ltima gota de cultivo ou substncia qumica de uma
pipeta.
No vedar adequadamente frascos de substncias txicas volteis.

Regras gerais para preparao de aulas prticas nos laboratrios

Uso obrigatrio de bata branca (gola de padre, manga longa com punho sanfonado) e

calado fechado;
As mos devem ser lavadas antes e aps a realizao dos procedimentos;
Observar as rotinas e procedimentos do respectivo laboratrio;
Nunca levar nada boca ou inspirar produtos; a pipetagem deve ser realizada com
dispositivo apropriado, nunca com a boca;
Descartar o material segundo as normas legais tcnicas vigentes usar
apropriadamente os depsitos para material biolgico e prfuro-cortantes;
Recomenda-se a utilizao de luvas em caso de rachaduras ou ferimentos na pele das
mos, ou quando houver contato com material infeccioso;
culos protetores devero ser usados na execuo de procedimentos que produzam
borrifos de microorganismos ou de materiais perigosos;
Todos os procedimentos devem ser realizados cuidadosamente a fim de minimizar a
criao de borrifos ou aerossis;
Deve-se sempre tomar uma enorme precauo em relao a qualquer objeto cortante,
incluindo seringas e agulhas, lminas, pipetas, tubos capilares e bisturis, nos
laboratrios em que ocorre manipulao de materiais ou substncias com elevado
potencial de criao de aerossis ou borrifos infecciosos como centrifugao, triturao,
homogeneizao, agitao vigorosa, misturas, ruptura por sonificao, abertura de
recipientes contendo materiais infecciosos, entre outros, dever ser utilizada cabine de
segurana ou capela para tais procedimentos;
As batas/jalecos utilizados durante os procedimentos no laboratrio devem ser retirados
antes de sair para locais de convivncia (alimentao, biblioteca, escritrios, etc.).

Regras gerais para uso dos laboratrios durante as aulas prticas.

Usar sempre culos de proteo ao trabalhar no laboratrio.
obrigatrio o uso de avental nos trabalhos de laboratrio e expressamente proibido o

uso de bermudas, chinelos e roupa de tecido sinttico. Usar de preferncia calados

fechados de couro ou similar.
Em casos de cabelos compridos, prend-los para evitar. No usar lentes de contato e /
ou adornos.
Durante a permanncia no laboratrio deve-se evitar passar os dedos na boca, nariz e
ouvidos.
No consumir alimentos ou bebidas, no fumar nem mascar chicletes;
No aplicar cosmticos ou perfumes (maquiagem, cremes, ou outros).
No superlotar o laboratrio respeitar a capacidade mxima de cada laboratrio
definida pelo Responsvel do setor.
No pegar em vidrarias ou outros materiais do laboratrio, nem ligar ou manusear
equipamentos;
No levar nada boca, nariz ou olhos;
No inspirar (cheirar) nenhuma substncia ou material exposto;
Se comportar de maneira adequada para evitar danos e/ou acidentes dentro do
laboratrio.

OBS: Para utilizar os produtos qumicos ou equipamentos,

necessrio autorizao de professores, tcnicos ou estagirios.

Higienizao dos
laboratrios
Esta Norma Tcnica Especial tem por finalidade,
melhorar a qualidade dos servios de segurana e
resultados prestados pelos Laboratrios de Anlises
Clnicas e Postos de Coleta dematerial

Limpeza e Desinfeco

Para o espao fsico dos laboratrios clnicos, importante que a desinfeco de pisos,
paredes, vidraas, bancadas e superfcies no metlicas, seja feita com hipoclorito e sdio
0,5% e para superfcies metlicas, lcool etlico 70%, o piso deve ser limpo duas vezes por
dia e o lixo retirado nessa frequncia tambm.

Todos os funcionrios devero usar avental de mangas compridas, cor clara, fechado ou
abotoado na frente.
Fazer lavagem do material, limpeza e desinfeco em geral, manuseio com o lixo, s poder
ser realizado por funcionrio protegido com avental, luvas de borracha e botas de borracha.
O preparo e manipulao de reativos que possuam ou produzam gases txicos e irritantes
devero ser feitos em capelas.
Aps o expediente de trabalho, ou quando se fizer necessrio, deve ser feita a limpeza e
desinfeco de balces, superfcies, paredes e pisos com soluo desinfetante (de acordo
com a Portaria do MS n 196 de 24/06/83).

Higienizao das mos

Mos contaminadas podem ser as principais vias de transmisso de infeco

O simples ato de lavar as mos com gua e sabo liquido, visando a remoo de
bactrias transitrias e algumas residentes, como tambm clulas descamativas,
pelos suor, sujidades e oleosidade da pele, contribui para a diminuio do risco de
infeco:

Abrir a torneira e molhar as mos sem encostar-se a pia.

Ensaboar as mos com sabo liquido. Friccionar as mos por cerca de 30
segundos, realizando todos os movimentos a seguir:
a) friccione circularmente palma com palma;
b) friccione circularmente dorso com palma;
c) lavar os espaos interdigitais deslizando uma mo sobre a outra;
d) friccione as articulaes de uma mo sobre a palma da outra;
e) lave o polegar com auxilio da outra mo;

Acidente com derramamento de Material Biolgico

Isolar a rea atingida.

Impedir a manipulao no local por pelo menos 30 minutos.
Usar EPIs.
Colocar papel toalha sobre o material derramado e sobre o mesmo, soluo de
hipoclorito de sdio a 2%, ou cloro ativo, aguardar 15 minutos.
Recolher em recipiente com saco para resduo infectante ou saco autoclavavel as
toalhas de papel, luvas e todo material usado na descontaminao.
Estilhaos de vidro ou plstico devero ser recolhidos em caixa de perfuro cortante.
Refazer a descontaminao da rea com soluo de hipoclorito de sdio a 2%.

Acidente com derramamento de Produtos Qumicos

Utilizar EPIs.
Conter o liquido derramado em rea reduzida.
Cobrir o resduo com vermiculina ou areia e aguardar sua absoro.
Recolher todo o resduo e o material utilizado para limpar a rea em saco plstico
preto para posterior descarte.

Resduos

Os Resduos de Servios de Sade (RSS), segundo a RDC no 306 de 2004 da Anvisa,

so classificados em cinco grupos, a saber:

Grupo A: resduos com a possvel presena de agentes biolgicos que, por suas
caractersticas, podem apresentar risco de infeco.
Grupo B: resduos contendo substancias qumicas que podem apresentar risco a
sade publica ou ao meio ambiente, dependendo de suas caractersticas de
inflamabilidade, corrosividade, reatividade e toxicidade.
Grupo C: quaisquer materiais resultantes de atividades que contenham
radionuclideos em quantidades superiores ao nvel de iseno estabelecida pelas
normas da Comisso Nacional de Energia Nuclear (CNEN).
Grupo D: resduos que no apresentam risco biolgico qumico ou radiolgico
podendo ser equiparado a resduo domestico passvel de segregao para
reciclagem.
Grupo E: materiais perfuro cortantes ou escarificantes.

3.5.1. Coleta interna I

De acordo com a Norma NBR 12807, acoleta interna I a operao de
transferncia dos recipientes do local de gerao, para a sala de resduo
temporrio. Consiste no recolhimento do lixo das lixeiras, no fechamento do saco
e no seu transporte at a sala de resduos, local de armazenamento temporrio.
Obs.: Durante o perodo de transporte, os elevadores so bloqueados e destinados
exclusivamente para descida dos resduos, desta forma evitando o cruzamento de
material limpo com material sujo. Os mesmo so higienizados aps cada trmino
da coleta.
A coleta I realizada para os resduos do grupo A,D e E .

3.5.2. Coleta interna II

A Coleta interna II definida como a operao de transferncia dos recipientes do
armazenamento temporrio para o armazenamento externo. Consiste no
recolhimento dos resduos em contineres de acordo com a especificidade at
abrigo externo. estabelecida:
A destinao final para cada grupo de resduos adotado pelos rgos pblicos
municipais :
3.6.1. Resduos do grupo A e E descontaminao;
3.6.2. Resduos do grupo B incinerador;
3.6.3. Resduos do grupo D aterro sanitrio.

LIXO
Todo o material proveniente da bacteriologia dever ser autoclavado antes de ser
eliminado.
Todo o material utilizado que ser desprezado dever ser acondicionado em sacos
de polietileno, ou sacos duplos, segregados de outros resduos no contaminados,
com uma cruz vermelha ou a palavra "Contaminada" inscrita na embalagem.
Este lixo dever ser transportado cuidadosamente e a disposio final deve ser
adequada (incinerao, aterro, coleta especial ou outro processo de destruio
que no contamine o ambiente e manipuladores).
V POSTO DE COLETA DE MATERIAL

Rotulagem e
Simbologia dentro
dos Laboratrios

Devemos sempre estar atentos e observar bem os rtulos dos

produtos e manuais de equipamentos contidos nos laboratrios.
Nos rtulos das substncias qumicas constam especificaes
sobre a composio e os perigos que estas podem oferecer.
Muitas vezes, essas informaes se apresentam simbolizadas,
seguindo um padro pr-estabelecido.
A seguir, apresentam-se a simbologia padro constante nesses
produtos, a que esto associados e algumas precaues que
devem ser adotadas para utilizao e armazenamento dos
mesmos.

 Facilmente Inflamvel (F)

- Classificao: determinados perxidos orgnicos; lquidos com
pontos de inflamao inferior a 21C, substncias slidas que so
fceis de inflamar, de continuar queimando por si s; liberam
substncias facilmente inflamveis por ao de umidade.
Precauo: evitar contato com o ar, a formao de misturas
inflamveis gs-ar e manter afastadas de fontes de ignio.
Extremamente inflamvel (F +)

- Classificao: lquidos com ponto de inflamabilidade inferior a 0C

e o ponto mximo de ebulio 35C; gases, misturas de gases (que
esto presentes em forma lquida) que com o ar e a presso normal
podem se inflamar facilmente.
Precaues: manter longe de chamas abertas e fontes de ignio.

Txicos (T)

- Classificao: inalao, ingesto ou absoro atravs da pele, provoca

danos sade na maior parte das vezes, muito graves ou mesmo letais.
Precauo: evitar qualquer contato com o corpo humano e observar
cuidados especiais com produtos cancergenos, teratognicos ou
mutagnicos.
Muito Txico (T+)

- Classificao: inalao, ingesto ou absoro atravs da pele, provoca

danos sade na maior parte das vezes, muito graves ou mesmo letais.
- Precauo: evitar qualquer contato com o corpo humano e observar
cuidados especiais com produtos cancergenos, teratognicos ou
mutagnicos.

Oxidante (O)

- Classificao: substncias comburentes podem inflamar substncias

combustveis ou acelerar a propagao de incndio.
Precauo: evitar qualquer contato com substncias combustveis. Perigo
de incndio. O incndio pode ser favorecido dificultando a sua extino.
Nocivo (Xn)
Classificao: em casos de intoxicao aguda (oral, dermal ou por

inalao), pode causar danos irreversveis sade.

- Precauo: evitar qualquer contato com o corpo humano, e observar
cuidados especiais com produtos cancergenos, teratognicos ou
mutagnicos.

Irritante (Xi)

- Classificao: este smbolo indica substncias que podem desenvolver uma

ao irritante sobre a pele, os olhos e as vias respiratrias.
Precauo: no inalar os vapores e evitar o contato com a pele e os olhos.
Explosivo (E)

- Classificao: indica substncias que podem explodir sob determinadas

condies.
Precauo: evitar atrito, choque, frico, formao de fasca e ao do calor.
Corrosivo (C)

- Classificao: por contato, estes produtos qumicos destroem o tecido vivo,

bem como vesturio.
- Precauo: no inalar os vapores e evitar o contato com a pele, os olhos e
vesturio.

Biossegurana

Material Radioativo

Risco Biolgico

Material nocivo ou irritante

Transgnicos

Material corrosivo

Material txico

Inflamvel

Explosivo

Extintor de incndio Proteo obrigatria para as mos

Uso obrigatrio de mscara Uso obrigatrio de culos de proteo

roteo obrigatria para os ps

Obrigatrio o uso de Jaleco

Lavagem obrigatria das mos

Entrada proibida

Proibido fumar