ENZIMAS E COENZIMAS

ESTRUTURA E PROPRIEDADES
GERAIS
Bioquimica: A Lgica Molecular dos Organismos Vivos.

INTRODU
O

Manuteno Vida
Celular
Reaes
Qumicas

Especifica
s

Velocidades
Adequadas
Suficiente
Produtos
Remoo
Metabolitos

Produtos
Definidos

ENZIMA
S

DEFINICOES
Enzim
as
Protenas que catalisam
reaes
biolgicas.
Riboenzimas constitudas de RNA

Catalisadores
Aceleram velocidade da reao
qumica sem serem consumidos
no
processo.
Modificam
o estado de transio
diminuindo a energia de transio
Concentrao constante: grande
eficincia em pequenas quantidades

DEFINICOES
Energia de
Ativao

Energia (calor) inicial

necessria para que uma
reao acontea.
Energia
em quilojoule
necessria para que 1 mol de
reagente reaja.
Encontro e coliso
Rompimento ligaes
qumicas
Formao novas ligaes
qumicas
Estado de

Transio

Ponto de mxima energia de ativao

Existe por um perodo extremamente breve de
tempo (10-15 s).
A energia necessria para alcanar o estado de
transio igual a energia de ativao da

ESTRUTURA
Enzima
Simples
Enzima
Conjugad
a

Holoenzi
ma

Aminoacid
os
Aminoacid
os
Parte
Proteca
Apoenzi
ma

Parte no
Proteca

Grupo
Prostetico

Coenzi
Cofato
ma
r
Estrutura Proteica Tridimensional
Determina:
Funo Enzimtica
Especificidade de substrato
Dependncia da temperatura
Dependncia do pH

COFATORES E
COENZIMAS
Cofator
es
Pequenas molculas orgnicas (flavina, heme)
ou inorgnicas (ions metalicos) necessrias para
a funo de uma enzima.
No esto ligados permanentemente molcula
da enzima mas, na ausncia deles, a enzima
inativa.

Anidrase
carbnica II. A
esfera a cinzento
um ion de zinco
que funciona
como cofator no
stio ativo.

COFATOR

ENZIMA

Zn2+

Anidrasecarbnica

Zn2+

Carboxipeptidase

Mg2+

Hexoquinase

COFATORES E
COENZIMAS
Coenzim
as
Compostos orgnicos, quase sempre derivados de
vitaminas (riboflavina, tiamina, cido flico) que
atuam em conjunto com as enzimas.
Transportam grupos qumicos de uma enzima
para outra
So modificadas quimicamente como
consequncia da ao enzimtica (classe especial
de substratos, ou substratos secundrios)

Modelo tridimensional da coenzima NADH

COFATORES E
COENZIMAS
Coenzim
as
COENZIMA

ENZIMA

Pirofosfato de Tiamina (TTP)

Piruvato
desidrogenase

Flavina Adenina Dinucleotdeo (FAD)

Monoaminooxidase

Nicotinamida Adenina Dinucleotdeo

(NAD)

Lactato
desidrogenase

Pirodoxal fosfato

Glicognio
fosforilase

Coenzima A (CoA)

Acetil-CoAcarboxilase

Biotina

Piruvato-carboxilase

Tetraidrofolato

Timidilate-sintase

SUBSTRATO E CENTRO ATIVO

Substrato
Substncia sobre a qual a
enzima exerce sua ao cataltica
Transformado em produto (s)
Liga-se enzima atravs do
centro ativo
Centro Ativo
Pequena regio bem definida da
enzima onde se liga o substrato e
ocorre ao cataltica
Formada por poucos resduos de
aminocidos da cadeia polipeptdica
Arranjo tridimensional
complementar molcula do

SUBSTRATO E CENTRO ATIVO

Outros Stios de
Ligao
Stios onde se ligam cofatores
Stios de ligaes para pequenas
molculas,
que so produtos ou substratos,
diretos ou indiretos, da reao
catalisada.
Estas ligaes servem para
aumentar ou diminuir a atividade da
enzima, providenciando um meio de
regulao por feedback.

ESPECIFICIDADE ENZIMASUBSTRATO
A forma complementar, carga e
caractersticas
hidroflicas /hidrofbicas, so
responsveis
pela especificidade enzima-substrato.
Grau de especificidade enzimas + 1 substrato
enzimas + diferentes substratos
estruturalmente relacionados

ESPECIFICIDADE ENZIMASUBSTRATO
Modelos de
Especificidade
Modelo Chave-Fechadura
Encaixe perfeito do substrato
no stio de ligao, que seria
rgido como uma
fechadura.
Enzimas e substratos
apresentam
formas geomtricas
complementares
se encaixando de maneira
precisa
umas nos outros.

ESPECIFICIDADE ENZIMASUBSTRATO
Modelos de
Especificidade
Modelo Encaixe
*Induzido
Stio de ligao no totalmente pr-formado, mas
sim moldvel molcula do substrato;
* A enzima se ajustaria molcula do substrato na
sua presena.
* As cadeias laterais dos aminocidos que formam o
stio ativo sofrem uma reorientao de maneira a que
as suas posies potenciem
a ao cataltica da enzima

NOMENCLATURA DAS ENZIMAS

A determinao do nome das enzimas normatizada por um
comit especializado, o Nomenclature Committee of the
International Union of Biochemistry and Molecular Biology
(NC-IUBMB).
Nome Recomendado: Mais curto e utilizado no dia a dia de
quem trabalha com enzimas; Utiliza o sufixo "ase" para
caracterizar a enzima. Exs: Urease, Hexoquinase, Peptidase.
Nome Usual : Consagrados pelo uso; Exs: Tripsina, Pepsina,
Ptialina.
Nome Sistemtico: Mais complexo, nos d informaes
precisas sobre a funo metablica da enzima. Ex: E.C.
2.7.1.1.ATP: D-hexose 6 -Fosfo-Transferase (Hexoquinase)
E.C. Enzyme Commission
2. Classe 2 (Transferase)
7. Sub-classe 7 (Transferencia de Fosfato)
1. Sub-sub classe (Funcao Alcool como aceptor

CLASSE DAS ENZIMAS

Classe 1

Oxirredutases
Desidrogenases
e Oxidases

Classe 2

Transferases
Quinases e
Transaminases

Classe 3

Hidrolases
peptidades

Catalisam
reaes de
oxirreduo,
transferindo
eletrons, hidretos
(H-) ou protons
(H+).
Transferem
grupos qumicos
entre molculas.
Utilizam a gua
como receptor de
grupos
funcionais de
outras
molculas.

CLASSE DAS ENZIMAS

Classe 4

Classe 5

Classe 6

Liases
Dehidratases e
Descarboxilases

Isomerases
Epimerases

Ligases
Sintetases

Formam ou
destroem
ligaes duplas,
respectivamente
retirando ou
adicionando
grupos
funcionais.
Transformam
uma molcula
num seu
ismero.
Formam ligaes
qumicas por
reaces de
condensao,
consumindo
energia sob a
forma de ATP.

CINETICA ENZIMATICA
Estudo da velocidade das reaes enzimticas, e os
fatores que influenciam nesta velocidade.
A cintica de uma enzima estudada avaliando-se a
quantidade de produto formado ou a quantidade de
substrato consumido por unidade de tempo de
reao.
Equao de Michaelis-Menten

CINETICA ENZIMATICA
Efeito da Concentrao do Substrato
na Velocidade da Reao

CINETICA ENZIMATICA
Constante de Michaelis-Menten (KM )
Concentrao de Substrato correspondente a metade da
velocidade mxima.
Enzimas tem KM caracterstico para um substrato em
dado pH e mesma temperatura.
Grau de afinidade entre enzima e substrato
Quanto menor o Km, maior a especificidade, e vice-versa.
Define a concentrao de substrato que uma enzima
requer para trabalhar com eficincia

Concentrao da
Enzima
Velocidade reao enzimtica e
diretamente proporcional a concentrao
da enzima, considerando-se que a
concentrao do substrato seja fixa

Velocidade

FATORES QUE INFLUENCIAM A VELOCIDADE

DE UMA REACAO ENZIMATICA

Concentracao Enzimatica

Enzimas cuja Concentrao Plasmtica

esta Alterada em Condies Patolgicas
Patologia
Enzimas
Hepatite

Transaminases
Creatinaquinase,

Enfarte Miocardio
Lactato Desidrogenase
Pancreatite
Embolia Pulmonar
Processos Obstrutivos Biliares

Amilase, Lipase
Transaminases
Fosfatase Alcalina

FATORES QUE INFLUENCIAM A VELOCIDADE

DE UMA REACAO ENZIMATICA
Efeito do
pH
pH timo ao enzimtica
mxima do pH diminuio
Alterao
atividade enzima
Afeta o carter inico dos
grupos COO e NH3
Modificaes no Centro ativo
Modificaes conformao
enzima
Valores de pH timo de Algumas
Enzimas
Enzima
Substrato
timo

Pepsina (mucosa gastrica) Ovoalbumina

Amilase (pancreatica)
Amido
Urease (feijao-soja)
Urea
Arginase (figado)
L-Arginina

pH

1.5
6.7
7.0
9.8

FATORES QUE INFLUENCIAM A VELOCIDADE

DE UMA REAO ENZIMTICA
Efeito da
Temperatura
A velocidade de uma
reao enzimtica
aumenta a medida que a
temperatura se eleva ate
atingir a temperatura
tima
Enzimas celulares
humanas 37C

REGULACAO ENZIMATICA

Mecanismos que regulam a atividade

enzimtica:
Variao da concentrao de
substrato
Variao de pH e temperatura
Inibio enzimtica

Modulao alostrica
Modulao
covalente

REGULAO ENZIMTICA
Modulacao
Alosterica
Ocorre em enzimas que possuem um local de
modulao alostrico
Heterotropismo
(o modulador
diferente do
substrato)

Homotropismo
(o modulador
igual ao
substrato)

Modulador
alostrico
Positivo
(ativam a
enzima)

Negativo
(inibe a
enzima)

A ligao entre o modulador e a enzima no-covalente

REGULACAO ENZIMATICA
Modulao Alostrica

Induz
:
Modificaes
conformacionais na
estrutura espacial do
enzima

Modifica a afinidade
do enzima para com
os seus substratos

INIBI`CO ENZIMTICA

Reversvel
Competitiva
No Competitiva
Mista

Irreversvel

INIBIO ENZIMTICA
Inibio Reversvel
Competitiva

H competio pelo centro ativo da

enzima
O inibidor estruturalmente
semelhante ao substrato
A inibio pode ser revertida adicionando
mais substracto ao meio
O Km aumenta e o Vmax no se altera

INIBICAO ENZIMATICA
Inibio Reversvel No
Competitiva

O inibidor liga-se a um local especfico

da enzima (que no o centro ativo)
O inibidor liga-se apenas ao complexo
ES, formando o complexo ESI
O Km diminui e o Vmax diminui

INIBICAO ENZIMATICA
Inibio Reversvel
Mista

O inibidor liga-se a um local especfico

da enzima (que no o centro ativo)
O inibidor liga-se tanto ao enzima livre
como ao complexo ES
Vmax diminui
Km pode aumentar, diminuir ou
manter-se

INIBICAO ENZIMATICA
Inibio
Irreversvel

O inibidor combina-se permanentemente

enzima de uma das seguintes formas:

Ligao covalente

Destruio de um grupo funcional essencial ao

funcionamento do enzima

Ligao no covalente particularmente estvel

INIBICAO ENZIMATICA
Usos de inativadores
Medicamentos
Venenos
Aspirina inibe a ciclooxigenase 1 e a ciclooxigenase
2, que so enzimas que produzem um mensageiro
que age em casos de inflamao, neste caso uma
prostaglandina, suprimindo assim a dor e a
inflamao.
O cianureto um inativador enzimtico irreversvel,
cido flico
(
que se combina com cobre eOzinco
no stio
ativo da
e a droga
enzima citocromo c oxidase esquerda)
bloqueando
a respirao
anticancergena
celular
metotrexato so
semelhantes na sua
estrutura. Como
resultado, o metotrexato

ZIMOGENIOS
Enzimas de acao
extracelular

zimogenio
s

precursores inativos intracelulares

Hidrolise ligacoes peptidicas

Remocao de residuos de
aminoacidos
Nova Estrutura
Tridimensional
Enzima
Ativa

Zimogeni
o Intracelular

plasma, trato
digestivo

Clivagem
proteoltica
Extracelular

Transformacao
extracelular

Enzima
Extracelular
ativa

ENZIMAS E PATOLOGIAS
* Alterao em genes que codifiquem enzimas
(mutaes ou deleces) poder ter como efeito o
aparecimento de doenas genticas.
* Fenilcetonria - Uma mutao num nico
aminocido da enzima fenilalanina hidroxilase, que
cataliza o primeiro passo na degradao da
fenilalanina, resulta na acumulao da fenilalanina e
dos produtos associados. Isto pode causar atraso
mental se a doena no for tratada.
* Mutaes em genes que codificam enzimas
envolvidas no reparo de DNA causam sndromas de
cancro hereditrio, tal com a xerodermia pigmentosa.
Defeitos nestas enzimas podem causar cancro, visto

APLICACOES DAS ENZIMAS

Sistemas Biolgicos:
Enzimas digestivas tais como a amilase, protease e
lipase, reduzem os alimentos em componentes
menores que so mais facilmente absorvidos no
trato digestivo.
Diagnstico Clnico:
Investigao laboratorial e na medio de
concentraes de substncias com interesse
clnico (Patologia Clnica, anlises clnicas).

APLICACOES DAS ENZIMAS

Indstria:
Enzimas de processamento alimentar glucoamilase podem reduzir o alimento em glicose.
Produo de antibiticos em larga escala.
Proteases em produtos de limpeza, para ajudar a
digerir gorduras e protenas presentes em ndoas.
A indstria txtil utiliza enzimas nas fases de
fiao, tingimento e acabamento dos tecidos. Estas
enzimas objetivam: a limpeza de superfcie do
material e reduo das pilosidades; melhoramento
de caractersticas de toque (maciez), produz uma
melhor tica da superfcie.