UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALAGOAS – UFAL

CENTRO DE CIÊNCIAS AGRÁRIAS – CECA

Programa de Pós-graduação em Proteção de Plantas
Disciplina de Seminário I

RNA de interferência (RNAi) como

estratégia de controle de fitoviroses

Euzanyr Silva Kamila Correia

Doutoranda em Proteção de Plantas - UFAL Orientadora

Rio Largo – AL
2020
Como se da
aplicação na
agricultura?
Aplicação

Como funciona o mecanismo?

RNAi
INTRODUÇÃO

O RNAi, de inteferência ou interferente, é um processo

natural que as células usam para “desligar” ou
“silenciar” genes indesejados. Possuem esse nome
pois interferem no processo de formação de proteínas
específicas.
DESCOBERTA
 Descoberta acidental;

• Catalogado pela primeira vez em petúnias. É descoberto um fenômeno de silenciamento que foi
1990
chamado de “co-supressão”.

• O mecanismo de RNAi foi desvendado por dois pesquisadores norte-americanos Andrew Fire e
1998
Craig Mello, trabalhando com os nematoides.

• Andrew Fire e Craig Mello ganham o Prêmio Nobel de Medicina e Fisiologia pela descoberta do
2006
silenciamento de genes por RNAi.
Da esquerda para direita, Andrew Z. Fire e Craig C. Mello cientistas laureados com o Prêmio Nobel
em medicina e fisiologia (2006). Fotos de L. Cicero e J. Mottern respectivamente. Adaptado de
Nobel Prize.org.
 MECANISMO
Célula

DNA
 MECANISMO
Célula RNA
Mensageiro

DNA

Transcrição
 MECANISMO
Célula RNA
Mensageiro

DNA Proteína

Transcrição Tradução
 MECANISMO
Célula RNA
Mensageiro

DNA

Transcrição
 MECANISMO
Célula RNA
Mensageiro

DNA

Transcrição

Moléculas de RNAi
 MECANISMO
Célula RNA
Mensageiro
Tradução
DNA

Transcrição

Moléculas de RNAi
 MECANISMO
Célula RNA
Mensageiro Proteína
Tradução
DNA

Transcrição

Moléculas de RNAi
 MECANISMO
Célula RNA
Mensageiro Proteína
Tradução
DNA

Transcrição

Moléculas de RNAi
MECANISMO
dsRNA 1°
MECANISMO
dsRNA 1°
MECANISMO
dsRNA 1°

siRNA
2°
19 -24 nt
MECANISMO
dsRNA 1°

3°
RNA mensageiro
siRNA
2°
19 -24 nt
MECANISMO
dsRNA 1°

3°
RNA mensageiro
siRNA
2°
siRNA
19 -24 nt
MECANISMO
dsRNA 1°

Sileciamento gênico

3°
RNA mensageiro
siRNA
2°
Proteína
19 -24 nt
siRNA
4°
APLICAÇÃO NA AGRICULTURA
R N A i
Utilizado para melhorar características das plantas e no controle de doenças e
pragas agrícolas

Métodos transformativos Métodos não transformativos

Maça que não escurece

Tabaco sem nicotina

Aplicação de produtos a base de RNAi
para controle de doenças e pragas
Silenciamento de genes para
controle de pragas e doenças
APLICAÇÃO

OBTENÇÃO DE FEIJOEIRO RESISTENTE AO VÍRUS DO

MOSAICO DOURADO

Francisco José Lima Aragão e Josias Corrêa de Faria

APLICAÇÃO
 Objetivo

Obtenção de plantas geneticamente modificadas

resistentes à doença, usou da estratégia de RNA
interferente (RNAi) 
 APLICAÇÃO

Planta geneticamente modificada (direita) mostrando imunidade à doença do mosaico dourado

e uma planta não modificada (esquerda) apresentando os sintomas típicos. Ambas foram
inoculadas com o vírus transmitido por mosca branca.
Aragão e Farias, 2005.
ARAGÃO, Francisco José Lima; FARIA, Josias C. Obtenção de feijoeiro resistente ao vírus do mosaico
dourado. Goiânia, Embrapa. 111p, 2005.
 APLICAÇÃO

Vargens de uma planta geneticamente modificada resistente ao vírus do mosaico dourado

(esquerda) e vargens de plantas comuns com os sintomas provocados pela infecção com o
vírus (direita).

Aragão e Farias, 2005.

ARAGÃO, Francisco José Lima; FARIA, Josias C. Obtenção de feijoeiro resistente ao vírus do mosaico
dourado. Goiânia, Embrapa. 111p, 2005.
APLICAÇÃO

Clay nanosheets for topical delivery of RNAi for

sustained protection against plant viruses

Neena Mitter, Elizabeth A. Worrall, Karl E. Robinson, Peng Li, Ritesh G.

Jain, Christelle Taochy, Stephen J. Fletcher, Bernard J. Carroll, G. Q. (Max)
Lu and Zhi Ping Xu
 APLICAÇÃO
 Cucumber mosaic virus (CMV)

Mitter et al., 2017

MITTER, Neena et al. Clay nanosheets for topical delivery of RNAi for sustained protection against plant
viruses. Nature plants, v. 3, n. 2, p. 1-10, 2017.
 APLICAÇÃO
 Cucumber mosaic virus (CMV)

Mitter et al., 2017

MITTER, Neena et al. Clay nanosheets for topical delivery of RNAi for sustained protection against plant
viruses. Nature plants, v. 3, n. 2, p. 1-10, 2017.
APLICAÇÃO

Novo método funciona como vacina para controle de

viroses em tomateiro baseado no mecanismo de RNA

Foto: André Fachini Minitti

de interferência
APLICAÇÃO
 Experimento
Vírus do mosaico-do-tomateiro
APLICAÇÃO
 Experimento
Vírus do mosaico-do-tomateiro

Testados quatro métodos de aplicação da solução

aquosa
APLICAÇÃO
 Experimento
Vírus do mosaico-do-tomateiro

Testados quatro métodos de aplicação da solução

aquosa mecânico - esfregaço da solução juntamente com
um pó abrasivo nas folhas;
pulverização nas folhas com e sem pó abrasivo;
absorção pelas raízes.
APLICAÇÃO
 Experimento
Vírus do mosaico-do-tomateiro

Testados quatro métodos de aplicação da solução

aquosa mecânico - esfregaço da solução juntamente com
um pó abrasivo nas folhas;
pulverização nas folhas com e sem pó abrasivo;
absorção pelas raízes.
Diferentes concentrações de dsRNA
APLICAÇÃO
 Experimento
Vírus do mosaico-do-tomateiro

Testados quatro métodos de aplicação da solução

aquosa mecânico - esfregaço da solução juntamente com
um pó abrasivo nas folhas;
pulverização nas folhas com e sem pó abrasivo;
absorção pelas raízes.
Diferentes concentrações de dsRNA 0 – 400
µg/plantas
 APLICAÇÃO
Aplicação tópica nas folhas
demonstra maior eficiência

O resultado mais promissor foi

obtido pelo método mecânico,
seguido da pulverização com

Foto: Camila Machado.

abrasivo e da pulverização sem
abrasivo. Já a absorção da solução
com dsRNA pelas raízes não surtiu
efeito para ativar o mecanismo de
defesa da planta via RNAi.
APLICAÇÃO
Em jullho de 2018, essa pesquisa
foi contemplada com o primeiro
lugar na categoria “Doenças de
Plantas”, durante o 2º Scientific

Foto: Camila Machado.

Day, promovido pela empresa
Monsanto, em Santa Cruz das
Palmeiras (SP).
NORMAS
 Comissão Técnica Nacional de Biossegurança (CTNBIO)

CTNBio publicou uma Tecnologia como um método

2018
normativa que não envolve transgenia

Classificando-a de Técnica Inovadora de Melhoramento de Precisão (TIMP).

Assim, a tecnologia do RNAi não estará sujeita aos mesmos critérios de aprovação
exigidos para os organismos geneticamente modificados (OGMs).
CONSIDERAÇÕES FINAIS

• Os cientistas buscam estimular a ativação desse mecanismo de

defesa na planta, via RNAi, para que ela possa se proteger contra a
ação de vírus que prejudicam seu desenvolvimento e reduzem sua
produtividade. Entre as principais vantagens da utilização de
métodos alternativos para o controle de viroses na agricultura
destaca-se a redução da dependência de defensivos químicos, o que
contribui para melhorar a sustentabilidade do sistema de produção.
OBRIGADA!
euzanyrsilva@yahoo.com.br