2⁰ Curso de Biologia Molecular da

Hemorrede Nacional aplicado à Triagem de

Doadores de Sangue

Trasnporte de Amostras e Validações

Milena Batista de Oliveira

2015
Oficina de Produção de Hemocomponentes com ênfase em Transporte e
Distribuição

Experiências no transporte de amostras de

doadores e de pacientes

Milena Batista de Oliveira

2014
 Validação do
transporte de amostras biológicas
2013
 354 km
(424 km)
590 km
(673 km
) 14 km
 A manutenção de uma temperatura adequada
durante o envio das amostras constitui uma variável
pré- analítica relevante em virtude do impacto
sobre a confiabilidade e a qualidade dos resultados
liberados na rotina dos laboratórios.
Em qual temperatura validar?
 Segundo o critério de aceitabilidade validado pelo
Kit NAT HIV/HVC de Bio-Manguinhos e kits de
diagnóstico sorológico utilizados na Fundação
Hemominas as amostras devem ser mantidas entre 2
a 8ºC para permitir o correto desempenho do teste.
• Etapas do Estudo:
•
• 1- Diagnóstico inicial: avaliar a situação do recebimento
das amostras encaminhadas por todas as unidades à
Gerência de Laboratório
 Qual a situação de envio
das amostras encaminhadas
por todas as unidades da
Fundação à Gerência de
Laboratório ?
 Qual a situação de envio A temperatura de recebimento das
das amostras encaminhadas amostras, mensurada com o
por todas as unidades da termômetro de infravermelho, e as
Fundação à Gerência de condições de envio foram
Laboratório ? registradas diariamente em
planilhas durante quinze dias
 Qual a situação de envio A temperatura de recebimento das
das amostras encaminhadas amostras, mensurada com o
por todas as unidades da termômetro de infravermelho, e as
Fundação à Gerência de condições de envio foram
Laboratório ? registradas diariamente em
planilhas durante quinze dias
 Qual a situação de envio
das amostras encaminhadas
por todas as unidades da
Fundação à Gerência de
Laboratório ?
A temperatura de recebimento das
amostras, mensurada com o
termômetro de infravermelho, e as
condições de envio foram
registradas diariamente em
planilhas durante quinze dias

Para tal foram

padronizados 5
modelos de caixas de
isopor :

- PP (22x13x18cm)
- P (28X20X24cm)
- M (36X22X29cm)
- G (43X24X34cm)
- GG (50X40X46cm)
 Das 19 UFHs que enviam amostras para a
GLA, apenas oito unidades apresentaram
a temperatura de transporte dentro do
limite aceitável
CSO/NAT
20.0

17.5

15.0

12.5
Temp (C)

10.0

7.5

5.0

2.5

0.0
S
IV
LP

V
A

U
R

JK

IA

C
O
O

U
I

ET
I

D
PM

PA
PA
O

R
SJ
SL

IT

PO
C
O

PN
JF

D
U
A

B
U
G

M
M
Qual a condições de envio
das amostras nas unidades
que apresentaram
temperatura de transporte
dentro do limite aceitável ?
Qual a condições de envio
das amostras nas unidades
que apresentaram
N amostras
temperatura de transporte Gelox Pequeno
dentro do limite aceitável ? Gelox Grande
Temp
350 8
300
N de amostras 6
250

Temp(C )
N Gelox/
200
4
150
100 2
50
0 0

M
PP

G
G
Tamanho da caixa
• Etapas do Estudo:

• 2- Stress durante o transporte: Avaliar se a quantidade de

gelox padronizada é capaz de manter a temperatura crítica
por um período de estresse de 48 horas.
 A quantidade de Montagem de
gelox padronizada caixas de
para cada um dos transporte
tamanhos de caixas é conforme
capaz de manter a modelo
temperatura crítica proposto
em período de
estresse de 48 horas. Utilização de alíquotas de amostras já
testadas para os parâmetros de
interesse

Gelox

Papelão furado
1 1 1 1 1 1 1 1 1 2
10 20 30 40 50 60 70 80 90 01
1 2 3 4 5 6 7 8 9 0
Amostras
Data logger Papelão furado

Gelox
 Disposição das
caixas em ambiente
Medição da temperatura
sob stress térmico
externa e interna de hora em
por 48 horas.
hora (Data logger)
(Ambiente sem
refrigeração)
 Disposição das
caixas em ambiente
Medição da temperatura
sob stress térmico
externa e interna de hora em
por 48 horas.
hora (Data logger)
(Ambiente sem
refrigeração)

24 horas

Avaliação da
reprodutibilidade dos
resultados

Retirada de
parte das
amostras
previamente
caracterizadas
 Disposição das
caixas em ambiente
Medição da temperatura
sob stress térmico
externa e interna de hora em
por 48 horas.
hora (Data logger)
(Ambiente sem
refrigeração)

24 horas 48 horas

Avaliação da Avaliação da
reprodutibilidade dos reprodutibilidade dos
resultados resultados

Retirada de Retirada de
parte das parte das
amostras amostras
previamente previamente
caracterizadas caracterizadas
 C a ix a P P
C a ix a P
C a ix a M
C a ix a G
C a ix a G G
A m b ie n te

30
Caixa PP
Caixa P
Caixa M
Caixa G 25
Caixa GG
Ambiente

30

25
20
20

15
Temp(C )

15
10
(C

5
T e m p )

0
0 2 4 6 8 10 12 1 4 1 6 18 20 22 24 26 28 3 0 32 34 36 38 40 4 2 44 4 6 48
-5 Tempo (h)

-10
10

0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48
-5 T e m p o (h )

-1 0

A análise dos dados indicou que apenas as caixas PP e M não

conseguiram manter a temperatura entre 2 a 8ºC durante um período
mínimo de 24 horas. Contudo, ambos os sistemas mantiveram uma
temperatura aceitável para o transporte por até 22 horas.
 O CT tanto para o HIV quanto para o HCV NAT não
ultrapassou o limite de aceitabilidade do laboratório
(±3DP), em ambos os tempos monitorados.
HCV
HIV
24 31
33 48 + 3DP 24
+ 3DP Basal
30 48
32 + 2DP
Basal
+ 2DP 29
+ 1DP
31 + 1DP
28

CT
Média Média
30
CT

27
- 1DP - 1DP
29 26
- 2DP
- 2DP

28 - 3DP 25
- 3DP
24
27
P P M G G
P G
Caixa Caixa

Amplificação dos alvos HIV e HCV por PCR em tempo real através do Kit diagnóstico NAT Bio-manguinhos após 24 e 48 horas de
permanecia nas condições simuladas nos sistemas experimentais.
• Etapas do Estudo:

• 3- Monitoramento da temperatura do transporte na

rotina de envio das amostras: Averiguar se as
condições de envio pré-padronizadas são adequadas
em manter a temperatura desejada na rotina de
transporte das amostras.
As condições de envio
pré-padronizadas são
As UFHs foram instruídas
adequadas em
a montar as caixas de
manter a
transporte conforme
temperatura
modelo proposto
desejada na rotina de
transporte das
amostras ?
As condições de envio A temperatura de
pré-padronizadas são recebimento das
As UFHs foram instruídas
adequadas em amostras e as
a montar as caixas de
manter a condições de envio
transporte conforme
temperatura foram monitoradas
modelo proposto
desejada na rotina de durante cinco
transporte das semanas
amostras ?

Acompanhamento da
temperatura via data
loggers
foi realizado uma vez
por semana
As condições de envio A temperatura de
pré-padronizadas são recebimento das
As UFHs foram instruídas
adequadas em amostras e as
a montar as caixas de
manter a condições de envio
transporte conforme
temperatura foram monitoradas
modelo proposto
desejada na rotina de durante cinco
transporte das semanas
amostras ?

O registro da Acompanhamento da
temperatura foi temperatura via data
realizado diariamente loggers
através do foi realizado uma vez
termômetro por semana
infravermelho
Os dados eram registrados em
planilhas padronizadas
EtMonitoramento diário da temperatura via termômetro infravermelho das
caixas de envio de amostras

A média das aferições de cinco unidades

ultrapassou o valor superior estipulado. O teste
T de amostra única indicou que apenas para o
HJK a média foi estatisticamente superior a 8ºC.
Antes
CSO/NAT
20.0

17.5

15.0

12.5
)
Tem p (C

10.0

7.5

5.0

2.5

0.0

Depois
• Etapas do Estudo:

• 4- Condição de estocagem extrema: Verificar se

amostras quando estocadas em temperatura
ambiente por 24 horas mantêm a reprodutibilidade e
confiabilidade dos resultados.
 Amostras, previamente Alíquotas do plasma
caracterizadas, quando controle interno
estocadas em temperatura produzidos in house,
ambiente por 24 horas foram deixadas
mantêm a reprodutibilidade temperatura
e confiabilidade dos ambiente durante 24
resultados? horas.
 Amostras, previamente Alíquotas do plasma
caracterizadas, quando controle interno As amostras foram
estocadas em temperatura produzidos in house, testados, conforme o
ambiente por 24 horas foram deixadas padrão de trabalho do
mantêm a reprodutibilidade temperatura laboratório
e confiabilidade dos ambiente durante 24
resultados? horas.
O perfil de amplificação tanto para o HIV quanto para o HCV
NAT não ultrapassou o limite de aceitabilidade do laboratório
(±3DP). Por sua vez, as amostras negativas permaneceram
indetectáveis.
 Os resultados desse estudo permitiram padronizar e
validar as condições necessárias para que a temperatura
das amostras de todas as UFHs permaneça dentro da
faixa ideal, 2 a 8ºC, durante todo o período de
transporte.
São aceitas para testagem, mediante justificativa da
UFH, amostras que permaneceram por até 24 horas a
temperatura de 9º a 25ºC.
 RESOLUÇÃO - RDC Nº 20, DE 10 DE ABRIL DE 2014

Esta Resolução possui o objetivo de definir e estabelecer padrões

sanitários para o transporte de material biológico de origem
humana em suas diferentes modalidades e formas, sem prejuízo do
disposto em outras normas vigentes peculiares a cada material e
modo de transporte, para garantir a segurança, minimizar os riscos
sanitários e preservar a integridade do material transportado
.
Se aplica a todo remetente,
transportador, destinatário e
demais envolvidos no
transporte.

Portaria Conjunta ANVISA/SAS Nº 370 DE 07/05/2014

Art. 2º O regulamento técnico-sanitário de que trata esta Portaria tem

por objetivo definir e estabelecer requisitos sanitários para o
transporte de sangue e componentes, em suas diferentes
modalidades e formas, para garantir a segurança, minimizar os riscos
sanitários e preservar a integridade do material.
 Embalagem tríplice

•1) Primária – Vedação a prova de vazamentos;

 Embalagem tríplice

•2) Secundária – Impermeável a prova de vazamentos,

utilizado no acondicionamento da embalagem primária;
 Embalagem tríplice

•2.1) As amostras devem ser organizadas de forma a

evitar o derramamento e o impacto entre as amostras.
Deve-se utilizar material absorvente para absorver todo
o conteúdo caso haja extravasamento do material.
Deve-se utilizar substância termo isolante.
1 1 1 1 1 1 1 1 1 2
10 20 30 40 50 60 70 80 90 01
1 2 3 4 5 6 7 8 9 0
 Embalagem tríplice

•3) Terciária – Rígida, de tamanho adequado, com

dispositivo de fechamento, protegendo seus conteúdos
de influências exteriores, tais como danos físicos e água
em trânsito.
Embalagem tríplice
 Material Refrigerante

•A quantidade de material refrigerante deve ser definida

pra cada modelo de acondicionamento e considerando a
quantidade de material biológico, para garantir a
conservação da temperatura pelo tempo determinado.
O gelo reciclável (gelox) deve ser pré- acondicionado em
temperatura especificada e por tempo definidos.
§ 1º A temperatura de conservação da amostra biológica para
triagem laboratorial de doadores e receptores estará de acordo
com as instruções dos fabricantes dos conjuntos diagnósticos
utilizados no laboratório, registrada durante o processo de
transporte, devendo ser monitorada por mecanismos que
possibilitem a verificação de valores fora do limite estabelecido.
( Portaria 370)

Art. 24. As etapas de acondicionamento e

controle de temperatura durante o transporte de
sangue e componentes serão validadas pelo
serviço de hemoterapia remetente ou sob sua
instrução.
 Caixa Caixa Caixa Caixa
Coleman
Marca
Coleman 05 Excursion Marine 28QT Marine 50QT 
Modelo QT 16QT

Altura 20,0 34,9 34,0 38,0

Medidas Largura 17,8 39,7 50,0 70,0
(cm)
Profundida 26,4 27,6 30,0 37,0
de

Capacidade total 4,7 15,1 28,4 47,3

(Litros)

Material Polietileno/ Poliuretano

 Funcionários NAT

http://www.dollzmania.net/CandyDollMaker3.htm
Felipe Brito Sônia Mara
GLA/HLA CSO
Vídeo