Biofilme - Uma Cidade de Microrganismos

Costerton et al. (1978)

Ambientes aquáticos

Corpo humano

Ambientes terrestres

≈ 90% das bactérias, na natureza,

encontram-se em BIOFILMES
 Conceito de Biofilme
Comunidades microbianas complexas, e dinâmicas, envoltas
por uma matriz, geralmente polissacarídica, que se formam
seqüencialmente e sofrem alterações ao longo do tempo
 Porque formar biofilmes?
Melhores condições de sobrevivência nos ambientes naturais

• Proteção contra
• Radiações UV
• Fagocitose
• Desidratação
• Predadores
• Antimicrobianos

• Aproveitamento de nutrientes
• Sintrofia
• Troca de material genético
 Etapas no desenvolvimento de um biofilme

Mecanismos de comunicação intercelular

Expressão diferencial de genes

1) Iniciação: Associação transiente  Associação estável

2) Maturação: Formação e estruturação de microcolônias

Síntese de Exopolissacarídeos
Interações metabólicas e genéticas

3) Dispersão: Liberação de células

 Etapas de formação de um biofilme

Biofilme artificial de V. cholerae

Watnick, P. & Kolter, R. (2000) Biofilm, city of microbes. J. Bacteriol., 182:2675-2679

 A - Iniciação de um biofilme

Associação transiente do organismo com superfícies ou

outros organismos
- Flagelos, Pilus tipo IV, adesinas
- Movimentação bidirecional

Associação estável
- Redução da motilidade (inibição do gene de flagelina)
- Síntese de exopolissacarídeos
 B - Maturação do biofilme

Jenkinson, H.F. & Lappin-Scott, H.M. (2001) Biofilms adhere to stay. Trends Microbiol., 9:9-10.
 Aumento da síntese de exopolissacarídeo
(além de proteínas e outras moléculas)

Matriz
Celulose (Gluconoacetobacter, E. coli)
Poli-N-Acetilglicosamina (S. aureus e S. epidermidis)
Adesina intercelular polissacarídica (PIA) (S. aureus e S. epidermidis)
PIA-like (Yersinia, E. coli)
Ácido colânico (E. coli)
Alginato, PEL, PSL (Pseudomonas)
Definição dos nichos ecológicos: Subpopulações fisiologicamente
distintas em biofilmes de Pseudomonas aeruginosa

Células expressando pilus tipo IV formam os chapéus, enquanto células

não móveis formam a base do biofilme.

Webb, J.S.; Givskov, M.; Kjelleberg, S. (2003) Bacterial biofilms: prokaryotic adventures in multicellularity.
Curr. Op. Microbiol., 6:578–585.
Associação de atividades metabólicas

Interações metabólicas nos biofilmes

Davey, M.E. & O’Toole, G.A. (2000) Microbial biofilms: from ecology to molecular genetics. Microbiol.
Mol. Biol. Rev., 64:847-867.
 Microcolônia de Lodo (Esgoto)

Interações metabólicas de Archaea metanogênicas (verde) com bactérias

oxidantes de propionato (vermelho), aceleram a degradação do lodo.

Davey, M.E. & O’Toole, G.A. (2000) Microbial biofilms: from ecology to molecular genetics. Microbiol. Mol. Biol.
Rev., 64:847-867.
 Comunicação intercelular

Importância do Quorum sensing na resistência de biofilmes de P.

aeruginosa aos antimicrobianos.
Em verde: células vivas
Em vermelho: células mortas

Webb, J.S.; Givskov, M.; Kjelleberg, S. (2003) Bacterial biofilms: prokaryotic adventures in multicellularity. Curr.
Op. Microbiol., 6:578–585.
 C - Dispersão dos biofilmes

1 - Expansiva: liberação de células do interior das microcolônias

Morte celular - limitação nutricional, espécies reativas
de oxigênio, apoptose, lise por fagos
Degradação da matriz por liases
Restauração da motilidade

2 - Fragmentação: forças mecânicas

S. aureus

3 - Superficial: migração do biofilme

 Exemplos de biofilmes de interesse humano

Doenças associadas a biofilmes: 65 a 80% das infecções tratadas,

em países desenvolvidos.
- Processos crônicos
- Infecções de dispositivos implantáveis

“Epidemias virtuais crônicas”

 Placa dental

Overman, P.R. (2000) Biofilm: a new view of plaque. J. Contemp. Dent. Pract., 1:1-8.
Rickard, A.H.; Gilbert, P., High, N.J., Kolenbrander, P.E.; Handley, P.S. (2003) Bacterial coaggregation: an
integral process in the development of multi-species biofilms. Trends Microbiol., 11:94-100.
Infecções de dispositivos implantáveis
Catéteres, Marca-passos, Válvulas cardíacas,
Próteses

S. aureus, S. epidermidis
P. aeruginosa

Endocardites: espécies de Streptococcus

Pneumonias em pacientes com fibrose cística: P. aeruginosa

 Biofilmes de S. aureus

Hall-Stoodley, L.; Costerton, J.W.; Stoodley, P. (2004) Bacterial biofilms: from the natural
environment to infectious diseases. Nature Rev., 2:95-108.
Kelley, S.T.; Theisen, U.; Angenent,L.; Amand,A.S.; Pace, N.R. (2004) Molecular analysis of shower
curtain biofilm microbes. Appl. Environ. Microbiol., 70:4187–4192.
 “Os microbiologistas levaram cerca de 100 anos para serem
capazes de estudar as bactérias em culturas puras.
Provavelmente, agora serão necessários mais 100 anos, para que
sejam capazes de estudar as bactérias como estas vivem na
natureza, ou seja: em biofilmes!!!”