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INTRODUO:
A cromatografia envolve uma srie de processos de separao de misturas, acontece pela passagem de uma mistura atravs de duas fases: uma estacionria (fixa) e outra mvel. A interao dos componentes da mistura com estas duas fases influenciado por diferentes foras intermoleculares, incluindo inica, bipolar, apolar, e especficos efeitos de afinidade e solubilidade.
A cromatografia pode ser utilizada para a identificao de compostos, por comparao com padres previamente existentes, para a purificao de compostos, separando-se as substncias indesejveis e para a separao dos componentes de uma mistura.
1. Classificao pela forma fsica do sistema cromatogrfico 2. Classificao pela fase mvel empregada 3. Classificao pela fase estacionria utilizada
Em relao forma fsica do sistema, a cromatografia pode ser subdividida em cromatografia em coluna e cromatografia planar. EM COLUNA: cromatografia lquida, gasosa e supercrtica. PLANAR: Centrfuga, em papel e camada delgada.
Separaes cromatogrficas se devem adsoro, partio, troca inica, excluso ou misturas desses mecanismos.
CROMATOGRAFIA
PLANAR
COLUNA
CENTRFUGA
CCD
CSC
GASOSA
CP
CG
CGAR
LQUIDA
CLSSICA
CLAE
Cromatografia planar
A cromatografia em papel (CP) uma tcnica de partio lquidolquido. Baseia-se na diferena de solubilidade das substncias em questo entre duas fases imiscveis, sendo geralmente a gua um dos lquidos. Este mtodo muito til para a separao de compostos polares, sendo largamente usado em bioqumica.
A cromatografia em camada delgada (CCD) uma tcnica de adsoro lquidoslido. Nesse caso, a separao se d pela diferena de afinidade dos componentes de uma mistura pela fase estacionria.
Cromatografia em coluna
A cromatografia lquida clssica muito
utilizada para isolamento de produtos naturais e purificao de produtos de reaes qumicas. As fases estacionrias mais utilizadas so slica e alumina, entretanto estes adsorventes podem servir simplesmente como suporte para uma fase estacionria lquida. Fases estacionrias slidas levam separao por adsoro e fases estacionrias lquidas por partio.
A Cromatografia Lquida de Alta Eficincia (CLAE) uma tcnica analtica usada para separar e quantificar componentes numa mistura lquida. A utilizao de suportes com partculas diminutas so os responsveis pela alta eficincia desse mtodo de cromatografia. A fase mvel (lquida) movimenta-se continuamente atravs da coluna contendo a FASE ESTACIONRIA (slido). O soluto interage com as fases estacionria e mvel por adsoro, partio, excluso molecular, troca inica. As separaes em CLAE podem se dar por adsoro (separao slido-lquido), partio (separao lquidolquido) ou ambos.
O detector mais utilizado para separaes por CLAE o detector de ultravioleta (Absoro da luz na faixa UV visvel), sendo tambm empregados detectores de fluorescncia, de indce de refrao, e eletroqumicos, entre outros.
Cromatografia Gasosa
Tcnica de separao e anlise de misturas por interao dos seus componentes entre uma fase estacionria e uma fase mvel.
Mecanismo de separao
A amostra injetada (injetor de amostra) e arrastada pela fase mvel (gs arrastador) atravs da coluna que contm a fase estacionria (coluna CG aquecida), onde ocorre a separao da mistura. As substncias separadas saem da coluna dissolvidas na fase mvel e passam por um detector que gera um sinal eltrico proporcional quantidade de material separado.
Inerte No interage nem com a amostra, nem com a fase estacionria, apenas transporta a amostra atravs da coluna. Puro Isento de impurezas que possam contaminar a amostra, ou gerar rudo no sinal. Compatvel com o detector. Exemplo: H2, N2, He
Parafinas apolares Poliglicis polares Polisteres - polares Silicones cobrem ampla faixa de polaridade.
Ambiente: - Determinao de resduos de pesticidas em produtos alimentares, guas ou esgotos. - Determinao de gases e solventes orgnicos na atmosfera, solos ou rios.
A cromatografia gasosa uma das tcnicas analticas mais utilizadas. Alm de possuir um alto poder de resoluo, muito atrativa devido possibilidade de deteco em escala de nano a picogramas.
A diferena entre CG e CGAR est na coluna (tubos longos de metais como ao ou cobre, vidro ou teflon). Colunas de CGAR so maiores em comprimento, menores em dimetro, possuem a fase lquida como um filme aplicado diretamente s paredes do tubo da coluna e so mais eficientes.
Referncias Bibliogrficas
COLLINS, C.H.; BRAGA, G.L. e BONATO, P.S. Introduo a mtodos cromatogrficos. 5 ed. Campinas: Editora da Unicamp, 1993. LOUGH, W.J. e WAINER, I.W. High Performance liquid chromatography: fundamental principles and practice. Blackie Academic and Professional, 1995. CHAVES, M.H.; Anlise de extratos de plantas por CCD: uma metodologia aplicada disciplina Qumica Orgnica. Qumica Nova, v. 20, n. 5, p. 560-562, 1997. ANDRADE, J.B.; PINHEIRO, H.L.C.; LOPES, W.A.; MARTINS, S.; AMORIM, A.M.M. e BRANDO, A.M. Determinao de cafena em bebidas atravs de cromatografia lquida de alta eficincia (CLAE). Qumica Nova, v. 18, n. 4, p. 379-381, 1995. NETO, F.R.A.; CGAR em anlise de resduos. Qumica Nova, v. 18, n. 1, p.65-67, 1995.