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Bioproduo e extrao otimizada de

cido ctrico de Aspergillus Niger por


fermentao slida em biorreator rotativo DHILLON et al. (2012) Canad

Apresentao: Sandy Emilly L. N.

Leitura de artigo cientfico:

cido Ctrico
Frmula molecular C6H8O7 Segundo maior produto via fermentao do mundo Bioproduo estimada de 1,7 milhes de toneladas por ano; Frutas ctricas; Baixa toxicidade;

Produto qumico multifuncional;

Utilizao Estabilizante de leos e gorduras e limpeza de

Referncia NOTHEMBERG, 1983

caldeiras
Melhora a disponibilidade de P para as plantas Condicionador qumico sobre a superfcie dental Possibilita avaliar o contedo de micronutrientes em fertilizantes ALCARDE e VALE, 2001 NETO e GREGHI, 2001 ANDRADE et al., 2003

Complexao de ctions na confeco de


cermicas Extrator de metais pesados Complemento de rao animal

ROCHA e MUCCILLO, 2001

PIRES et al., 2004 BOLING, ANKENBACH et al., 2001

Utilizao Estabilizante de leos e gorduras e limpeza de

Referncia NOTHEMBERG, 1983

caldeiras
Melhora a disponibilidade de P para as plantas Condicionador qumico sobre a superfcie dental Possibilita avaliar o contedo de micronutrientes em fertilizantes ALCARDE e VALE, 2001 NETO e GREGHI, 2001 ANDRADE et al., 2003

Complexao de ctions na confeco de


cermicas Extrator de metais pesados Complemento de rao animal

ROCHA e MUCCILLO, 2001

PIRES et al., 2004 BOLING, ANKENBACH et al., 2001

Vrias novas aplicaes vindo a tona todos os dias!

Fermentao em estado slido (SSF)


Resduos agro-industriais
= baixo custo

Crescimento do microrganismo de forma eficiente; Produo concentrada de AC = resultados significativos Diminuio de contaminaes; Espuma Dificuldade de se medir parmetros.

Outros produtos obtidos via fermentao slida


Produto Microrganismo Materiais

Natto
Temp Queijo Massa de po

Bacillus natto
Rhizopus oligosporus Penicillium roqueforti Saccharomyces cerevisiae, Lactobacillus sanfrancisco Aspergillus oryzae, A. kawachii A. oryzae

Soja
Soja Trigo Trigo

Saqu Miss

Arroz, cevada Soja, arroz

Biorreator de tambor rotativo


Reatores agitados = homogeneizao Movimentos rotacionais; A agitao pode ser contnua ou espordica; Controle de temperatura; Danificao das estruturas de alguns microrganismos ou do meio.

Biorreator do tipo tambor rotativo

Objetivos
A extrao eficiente de cido Ctrico a partir da biomassa slida

fermentada;

Objetivos
A extrao eficiente de cido Ctrico a partir da biomassa slida

fermentada;

Otimizar os diferentes parmetros de extrao, tais como tempo de

extrao (min), agitao (rpm) e o volume de extrao (ml / g de


substrato) para maior extrao de cido Ctrico;

Objetivos
A extrao eficiente de cido Ctrico a partir da biomassa slida

fermentada;

Otimizar os diferentes parmetros de extrao, tais como tempo de

extrao (min), agitao (rpm) e o volume de extrao (ml / g de


substrato) para maior extrao de cido Ctrico;

Estudar o efeito de lcoois, utilizando bagao de ma para cultivar A.


niger NRRL 567 para fermentao em estado slido no biorreator rotativo.

Fluxograma do processo
Preparao do inculo

Fluxograma do processo
A. niger NRRL 567;
Preparao do inculo Subcultivo em BDA; Incubao durante 7,8 dias; Colheita e contagem de esporos, usando a cmara de Neaubauer; Inculo utilizado = 1x10^7 esporos/ml.

Fluxograma do processo
Preparao do inculo

Substrato e pr-tratamento

3 kg de bagao de ma fresca; suplementado com casca de arroz 1% (w/w); Completamente desidratado e peneirado.

Fluxograma do processo
Preparao do inculo

Substrato e pr-tratamento
BM (75%, v / w); 3% (v / w) de indutores Amostras retiradas

Fermentao em estado slido Biorreator rotativo, 12L

Fluxograma do processo
Preparao do inculo

Substrato e pr-tratamento
BM (75%, v / w); 3% (v / w) de indutores Amostras retiradas

Fermentao em estado slido Biorreator rotativo, 12L

Condies asspticas necessrias; Agitao intermitente de 2 rpm (de 1 hora aps cada 12 h); Fermentao durante 12 dias;

Fluxograma do processo
Preparao do inculo 17 amostras

Substrato e pr-tratamento

Fermentao em estado slido Biorreator rotativo, 12L

3g fermentado + H2O Filtrado

Extrao do cido Ctrico

Fluxograma do processo
Preparao do inculo 17 amostras

Substrato e pr-tratamento

Fermentao em estado slido Biorreator rotativo, 12L

3g fermentado + H2O Filtrado Agitado a 200 rpm, 25C Centrifugado (9000 x g/ 20 min)

Extrao do cido Ctrico

Fluxograma do processo
Preparao do inculo 17 amostras

Substrato e pr-tratamento

Fermentao em estado slido Biorreator rotativo, 12L

Extrao do cido Ctrico

Otimizao da extrao

Otimizao da extrao de cido Ctrico


RSM: Metodologia da Superfcie de Resposta
Variveis Tempo de extrao (min) - 1.682 11.10 Baixo 15 Mdio 20 Alto 25 + 1.682 28.94

Velocidade de agitao (rpm)


Volume de extrao (ml/g)

110.56
6.10

150
15

200
20

250
25

289.44
23.94

Testes

Tempo de extrao (min)


15

Velocidade de agitao (rpm)


150

Volume de extrao (ml/g)


15

AC (g/kg de substrato)
115.98

2
3 4 5 6 7 8 9 10

15
15 15 25 25 25 25 11.10 28.94

150
250 250 150 150 250 250 200 200

25
15 25 15 25 15 25 20 20

103.74
165.72 183.61 129.10 113.44 185.70 197.38 247.61 252.85

11
12 13 14 15 16 17

20
20 20 20 20 20 20

110.56
289.44 200 200 200 200 200

20
20 6.10 23.94 15 15 15

72.45
243.98 98.70 202.62 294.20 290.31 294.24

Testes

Tempo de extrao (min)


15

Velocidade de agitao (rpm)


150

Volume de extrao (ml/g)


15

AC (g/kg de substrato)
115.98

2
3 4 5 6 7 8 9 10

15
15 15 25 25 25 25 11.10 28.94

150
250 250 150 150 250 250 200 200

25
15 25 15 25 15 25 20 20

103.74
165.72 183.61 129.10 113.44 185.70 197.38 247.61 252.85

11
12 13 14 15 16 17

20
20 20 20 20 20 20

110.56
289.44 200 200 200 200 200

20
20 6.10 23.94 20 20 20

72.45
243.98 98.70 202.62 294.20 290.31 294.24

Resultados e discusso
A suplementao com indutor, isto , lcoois inferiores influenciou na concentrao de cido Ctrico;

Resultados e discusso
A suplementao com indutor, isto , lcoois inferiores influenciou na concentrao de cido Ctrico e na viabilidade do fungo;

Tempo de incubao (h)

Resultados e discusso
A suplementao com indutor, isto , lcoois inferiores influenciou na concentrao de cido Ctrico e na viabilidade do fungo;

Metanol

Tempo de incubao (h)

Resultados e discusso
A suplementao com indutor, isto , lcoois inferiores influenciou na concentrao de cido Ctrico;

Tempo de incubao (h)

Resultados e discusso
A suplementao com indutor, isto , lcoois inferiores influenciou na concentrao de cido Ctrico;

Tempo de incubao (h)

Comparao da produo de AC usando diferentes substratos slidos e tcnicas de fermentao

Concluso
Suplementao com metanol e etanol > maior produo de cido

ctrico > 37,7% e 27,6% mais elevada em comparao com a


controlada;

A metodologia empregada na otimizao da extrao no foi significativa para a extrao do cido ctrico, porm em outros processos pode levar a resultados positivos.

Obrigada pela ateno.

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