Material Didtico de apoio a disciplina BVE 270 Professor Marcelo Ehlers Loureiro Professor Carlos Martinez

Participao na editorao e processamento de imagens: Marcelo Francisco Pompelli, Leonardo Carnevalli Dias

1) Introduo
A fotossntese pode ser considerada a principal rota biossinttica da vida no planeta Terra. Em um ano, cerca de 7 1010 toneladas de carbono so fixados em compostos orgnicos. Isto equivale a 1% das reservas conhecidas de combustveis fsseis (carvo, gs e petrleo) e cerca de 10 vezes o consumo mundial de energia. Por meio da fotossntese, as plantas, algas e alguns tipos de bactrias convertem a energia fsica da luz solar em energia qumica. Essa energia ser ento armazenada nos compostos orgnicos presentes nas plantas, e servir como elo fundamental na manuteno de outras cadeias alimentares. A fotossntese pode ser definida como um processo fsico-qumico, mediante o qual os organismos fotossintticos sintetizam compostos orgnicos a partir de matria-prima inorgnica, na presena de luz solar. Ela pode ser dividida em duas fases: a fase fotoqumica, na qual a energia luminosa utilizada, gerando ATP e NADPH, os quais sero ento utilizados na segunda fase, a fase de fixao de CO2 (Fig. 1). O processo fotossinttico das plantas ocorre nos cloroplastos e resulta na liberao de oxignio molecular e na captura de dixido de carbono da atmosfera, que utilizado para sintetizar carboidratos.

Figura1: Fases da fotossntese. Na fase fotoqumica, a energia luminosa utilizada para retirar eltrons de molculas de gua, os quais sero transportados na membrana do tilacide resultando na produo de ATP e NADPH, compostos ricos em energia, e que sero utilizados nas reaes bioqumicas para a fixao de CO2.

2) Luz: Conceitos Bsicos

A luz , fonte primria de energia na fotossntese, parte da radiao eletromagntica que visvel ao olho humano. A "luz visvel" tm comprimentos de onda que vo do violeta, com cerca de 380 nm, ao vermelho, com 700 nm. Essa faixa do espectro de radiao eletromagntica tambm chamada "radiao fotossinteticamente ativa" (Figura 2). A luz possui caractersticas de uma partcula (fton) e de uma onda eletromagntica. Assim a luz uma corrente de partculas carregando energia, a qual designada quanta (singular quantum). Cada quantum de luz, ou fton, contem uma quantidade de energia. Assim, nem todas as cores da luz (comprimentos de onda) possuem a mesma energia, pois o nvel energtico de um fton inversamente proporcional ao seu comprimento de onda.

Figura 2: Caractersticas de vrias regies de comprimentos de onda da luz. Os limites de comprimentos de onda ligados a sensao de uma cor particular so de algum modo arbitrrios e variam com os indivduos.

3) Pigmentos Fotossintticos
3.1 Tipos de pigmentos presentes em plantas e sua funo Para que a energia da luz possa ser utilizada na fotossntese, ela primeiro precisa ser absorvida. Molculas que absorvem luz so chamadas de pigmentos, e pigmentos fotossintticos so aqueles pigmentos localizados no cloroplasto, especificamente associados membrana dos tilacides, os quais captaro a energia da luz e permitiro a sua utilizao. As clorofilas (Fig. 3) so os principais pigmentos fotossintticos. Carotenides (Fig. 4) tambm so pigmentos fotossintticos, embora com uma funo acessria a das clorofilas.

Figura 3: Estrutura das clorofilas a e b, principais formas de clorofilas presentes em plantas. Outras clorofilas esto presentes em algas e bactrias e apresentam valor taxonmico.

Figura 4: Estrutura de alguns carotenides. As xantofilas representam um subgrupo dentro dos carotenides e so caracterizadas pela presena de hidroxilas em um ou mais dos seus anis, sendo representadas acima pela luteina, violaxantina e zeaxantina. -caroteno e lutena so os carotenos mais abundantes nos tilacides. Outro exemplo de caroteno, o licopeno, presente em altos nveis em frutos do tomate, sendo responsvel pela cor vermelha desse fruto.

As molculas de clorofila possuem uma cauda hidrofbica, chamada de fitol, a qual responsvel pela sua insero, em conjunto com protenas associadas (protenas das antenas fotossintticas), na membrana do tilacide, no influenciando suas propriedades de absoro de luz. O nmero de tomos de oxignio presentes em uma molcula um dos principais fatores determinantes da polaridade de uma substncia, sendo diretamente proporcional a essa. Assim, comparando-se as estruturas qumicas dos pigmentos acima apresentadas, conclui-se que os carotenos so mais hidrofbicos (menos polares) do que as clorofilas, e que a clorofila b mais polar que a clorofila a. Clorofilas e carotenos tambm possuem diferentes espectros de absoro, os quais podem ser comparados com o espectro de ao fotossinttico, como mostrado na figura abaixo:

Figura 5: Espectro de absoro de clorofilas e carotenos, e taxa fotossinttica sob luz monocromtica (espectro de ao).

Observa-se na figura anterior que as clorofilas possuem dois picos de absoro, um localizado sob a regio da luz azul, e outro sob a regio da luz vermelha. J os carotenos possuem dois picos de absoro limitados regio do azul. Observa-se tambm que, embora possuam os carotenides um segundo pico de absoro na faixa do espectro de 520 nm, a taxa fotossinttica nessa regio apresenta-se em franco declnio, representando evidncia para a funo acessria dos carotenides na absoro da energia luminosa para a fotossntese. De fato, esses pigmentos possuem funo mais importante como elementos estruturais das antenas e tm importante participao na dissipao do excesso de excitao energtica das clorofilas. Outros pigmentos existem que no participam na fotossntese e estes esto presentes principalmente no vacolo. Esses pigmentos no fotossintticos so hidrossolveis e grande parte deles pertence grande classe de compostos fenlicos denominada flavonides, a qual composta por mais de 4500 tipos de pigmentos j caracterizados. A estrutura bsica composta por 15 tomos de carbono em um arranjamento C6 (anel fenlico A) C3 (ponte de 3 carbonos), e C6 (anel fenlico B) (Fig.6). As antocianinas so flavonides com acares ligados a sua estrutura carbnica. Esses flavonides possuem importante papel na interao plantas-animais, sendo os responsveis pela cor das flores e frutos, na atrao polinizadores e dispersadores de sementes e frutos. Antocianinas sem acares ligados a sua estrutura so chamadas de antocianidinas (Fig. 6). Flavonides podem tambm proteger as plantas contra a radiao ultravioleta ou de ataques de herbvoros e fungos, sinais na interao legume-Rhizobium, e na formao do cerne de troncos lenhosos, aonde so responsveis pelas caractersticas de cor, qualidade e resistncia da madeira. Vrios flavonides tm tambm sido estudados, devido s suas propriedades medicinais, como moduladores da resposta imune, antiflamatria, anti-cancer, antiviral, e hepatoprotetora.

Antocianidina Pelargonidina Cianidina Delfinidina Peonidrina Petunidina 4 = OH

Substituio 3 = OH, 4 = OH 3 = OH, 4 = OH, 5 = OH 3 = OCH3, 4 = OH 3 = OCH3, 4 = OH, 5 = OCH3

Cor Vermelho-alaranjado Vermelho-arrouxeado Prpura-azulado Vermelho-rseo Prpura

Figura 6: Estrutura de algumas antocianinas e antocianidinas responsveis pela colorao de algumas flores e frutos.As cores das antocianidinas dependem em parte das molculas ligadas ao anel B. Um aumento no nmero de grupos hidroxlicos muda a absoro para comprimentos de onda maiores e resultam em uma cor azul do pigmento. Substituio de um grupo hidroxil por um grupo metoxil (OCH3) muda a absoro para comprimentos de onda mais curtos, resultando em uma cor mais avermelhada. As antocianinas possuem cores variadas, dependendo do pH do vacolo.

3.2 Pigmentos Fotossintticos: Absoro da Luz e Converso Energtica Quando um pigmento fotossinttico absorve a energia de um fton, ocorre uma transformao na molcula do pigmento, a qual passa do seu nvel energtico baixo (nvel bsico) a um alto nvel energtico (estado excitado). Essa alterao no nvel energtico corresponde passagem de um eltron de um orbital mais prximo do ncleo atmico, para um orbital mais externo (mais alto nvel de energia).

3.3 Absoro de Luz pelos Pigmentos no Conmplexo Antena e Transferncia de Energia Funcionalmente, as molculas de clorofila atuam agrupadas. A luz coletada por um complexo formado por 200-300 molculas de pigmento, que esto ligadas a protenas formando o complexo antena coletor de luz (LHC, Light-Harvesting-Complex). Essas antenas, por sua vez, encontram-se associadas a dois grandes complexos proticos fundamentais s reaes fotoqumicas: fotossistema I e fotossistema II (ver mais adiante). De acordo com essa concepo, a energia de um fton, absorvida em qualquer ponto do conjunto de molculas de clorofila da antena, migra a um centro de reao e promove o evento de transferncia de um eltron (Figura 7).

Figura 7: Representao esquemtica de um fotossistema e sua respectiva antena. Os pigmetos fotossintticos localizados na antena so aqueles que realizaro a transferncia de energia por ressonncia indutiva at as molculas de clorofila do centro de reao. Somente essas molculas de pigmentos (cilindro verde, no esquema), localizadas no centro de reao que participaro das reaes fotoqumicas, perdendo eltrons para um aceptor de eltrons (cilindro rosa), sendo reposto esse eltron clorofila por um doador de eltrons (cilindro azul).

A estrutura da antena composta por protenas e pigmentos, possuindo as protenas a funo estrutural do arranjo espacial ordenado das clorofilas e carotenides. A protena LHCIIb a protena mais abundante dos tilacides (50%) e sua interao com os pigmentos tem sido caracterizada como mostrado na Fig. 8.

Figura 8: Distribuio espacial da associao entre os pigmentos e a protena LHC2b no complexo antena dos fotossistemas. Somente o anel tetrapirrlico das molculas de clorofila apresentado. Doze molculas de clorofila e 2 molculas de carotenides fazem parte dessa unidade funcional. (Fonte Buchanan, Gruissen e Jones, 2000)

A unidade formada pela protena LHCIIb e os seus pigmentos associados, organiza-se funcionalmente como trmeros, os quais so elementos responsveis pela absoro de luz tanto nas antenas dos fotossistema I como do fotossistema II. Outros complexos entre outras protenas, como mostrado na figura 10, tm a funo de transferir a energia captada pelo complexo LHCII ao centro de reao de cada fotossistema.

Figura 9: Esquema mostrando a organizao de trmeros do complexo LCHIIb na antena do fotossistema I e II, bem como do arranjamento espacial de outras protenas componentes dessa estrutura (Modificado de Buchanan, Gruissen e Jones, 2000).

As protenas LHCIIb tambm possuem a importante funo do deslocamento de parte das antenas entre o fotossistema II e I, de forma a equilibrar a energia recebida por cada fotossistema. A organizao dos pigmentos fotossintticos em outros organismos ocorre de outra forma. Nas cianobactrias os pigmentos encontram-se organizados em ficobilinossomas.

4) Cloroplastos: Estrutura, Funo e Evoluo

4.1 Estrutura e Funo do Cloroplasto Nas plantas, o processo fotossinttico ocorre dentro dos cloroplastos, que so plastdeos localizados em clulas especializadas das folhas (clulas do mesfilo palissdico e do mesfilo lacunoso). O nmero de cloroplastos por clula varia de um a mais de cem, dependendo do tipo de planta e das condies de crescimento. Os cloroplastos tm forma discide com dimetro de 5 a 10 micrmetros e so limitados por uma dupla membrana (externa e interna). A membrana interna atua como uma barreira controlando o fluxo de molculas orgnicas e ons dentro e fora do cloroplasto (Fig. 10). Molculas pequenas como CO2 , O2 e H2O passam livremente atravs das membranas do cloroplasto.

Figura 10: Estrutura do cloroplasto, indicando as membranas e organizao dos tilacides. O interior dos tilacides denominado de lmem.

Internamente, o cloroplasto composto de um sistema complicado de membranas, conhecidas como membranas fotossintticas (ou membranas tilacoidais ou lamelas), que contm a maioria das protenas necessrias para a etapa fotoqumica da fotossntese. As protenas requeridas para a fixao e reduo do CO2 esto localizadas na matriz incolor chamada estroma. As membranas tilacoidais formam os tilacides, que so vesculas achatadas com um espao interno aquoso chamado lmen. Os tilacides, em certas regies, se dispem em pilhas chamadas de grana.

Figura 11: Estrutura granal de um cloroplasto, indicando as membranas e organizao dos tilacides.

Alm da fotossntese, ocorrem vrias outras rotas metablicas dentro do cloroplasto, como a sntese de aminocidos , reduo do nitrognio inorgnico, sntese de amido, sntese de cido graxo, sntese de hormnios como o cido abscsico, entre vrias outras rotas de compostos secundrios, como, por exemplo, de compostos envolvidos nas interaes das plantas com outros organismos (fungos e herbvoros, por exemplo). A riqueza energtica dessa organela explica em parte a presena de tantas diferentes rotas metablitas compartimentalizadas dentro dessa organela, sendo a sua regulao metablica muito complexa e muito longe ainda de ser satisfatoriamente compreendida.

4. Evoluo do Cloroplasto Existem evidncias de que os cloroplastos so derivados evolutivos de bactrias de vida livre, que invadiram clulas no fotossintticas, nos primrdios do processo evolutivo. A presena de DNA cromossomal que se replica de forma semelhante a bactrias e de ribossomas no estroma, com estrutura semelhante aos ribossomas dos procariotos, so evidncias para suportar a teoria endossimbionte. As mesmas evidncias tambm existem paras as mitocndrias, suportando a aplicao dessa teoria na explicao da origem dessa organela durante a evoluo. Mas, como dito na introduo, a fotossntese tambm ocorre em procariotos, os quais no possuem organelas. O cloroplasto somente surgiu nos eucariotos durante a evoluo, provavelmente h cerca de um bilho de anos atrs. Nas bactrias verdes, os pigmentos e protenas localizam-se em uma regio discreta (a, linha de cor vinho, fig. 12) na membrana plasmtica da clula da bactria (a, linha preta). Na evoluo dos procariotos, essas regies fotossintetizantes discretas da membrana invaginaram-se, originando posteriormente os cromatforos nas bactrias prpuras (b). Nos procariotos mais evoludos, como nas cianobactrias , surgiu pela primeira vez na evoluo uma estrutura similar aos tilacides (c). O cloroplasto comeou a ser observado nas algas vermelhas, onde os tilacides apresentam-se como inmeras estruturas individuais, essencialmente no conectadas. Nas algas marrons e dinoflagelados passou a ocorrer a interconeco e arranjo organizado dos tilacides, os quais podem ser encontrados formando duplas ou tripletes. Organizao mais complexa dos tilacides pode ser observada nas Brifitas (musgos, por exemplo), nas quais

pode ser observado um maior empilhamento de tilacides, embora ainda no to organizados como observado em outras plantas. Assim, somente em plantas superiores pode ser observada a grana, forma mais organizada de empilhamento dos tilacides.

Figura = 12: Evoluo da estrutura fotossintetizante entre os procariotos e eucariotos.

A evoluo do cloroplasto ainda um processo dinmico na evoluo. Observa-se que quanto maior o nvel de evoluo do organismo considerado, menor o nmero de genes presentes em seus cloroplastos ou nas mitocndrias. Durante a evoluo, os genes tm migrado para o cromossoma nuclear, por um processo de mecanismo ainda desconhecido e denominado de fluxo gnico. Um exemplo a protena Rubisco (Carboxilase da Ribulose 1,5bisfosfato), a qual formada por dois tipos de subunidades, a grande e a pequena. O gene responsvel pela sntese da subunidade pequena esta presente no cromossoma nuclear enquanto que o gene que codifica a subunidade grande est no cromossoma cloroplastdico.