Adipcito Multilocular A mitocndria deste tipo celular possui uma peculiaridade importante : a sua membrana interna rica na protena

a termogenina. Essa protena permite o fluxo retrgrado de prtons ; em vez de utiliz-los na sntese de ATP, produz calor. Os animais hibernantes armazenam gorduras que os protegem do frio no inverno; para isso apresentam bastante tecido adiposo multilocular capaz de gerar calor e funcionar como isolante trmico. FIGURA 3 Neurnio As mitocndrias dos neurnios esto concentradas basicamente em duas partes diferentes da clula : no corpo celular, que precisa de energia para sintetizar protenas para toda a clula, e no terminal axnico. Na sinapse, ocorre a fuso de vesculas contendo o neurotransmissor com a membrana FIGURA plasmtica e a reciclagem de membrana, processos dependentes de Cada hepatcito apresenta mais de 800 mitocndrias, cada qual com inmeras cristas, o que potencializa a produo energtica. Os hepatcitos Hepatcito mais prximos veia centrolobular contm mais mitocndrias que os da periferia do lbulo, pois so mais ativos. O hepatcito possui inmeras funes importantes na homeostase do organismo : sntese protica, secreo da bile, acmulo de reservas energticas e vitamina A, FIGURA metabolismo de diversas substncias e neutralizao de molculas txicas. A mitocndria atua tanto na produo de energia como diretamente na funo de metabolizao, atravs da produo de agentes oxidantes. PROCURAR mediadores como o Ca2+ e de transporte ativo.

Patologia
A mitocndria pode ser sede de diversas patologias. As anomalias podem ser estruturais ou simplesmente funcionais. Algumas das anomalias so genticas, enquanto outras so secundrias. As

anomalias com herana gentica so passadas de me para filho, afetando ambos os sexos igualmente. Os efeitos sistmicos mais notveis so os neurodegenerativos, musculares (principalmente fraqueza) ou decorrentes de disfunes metablicas por excesso de cido lctico. importante ressaltar o fenmeno da heteroplasmia nas doenas mitocondriais, ou seja, os pacientes apresentam variao nos sintomas a depender da quantidade de mitocndrias normais e mutantes em suas clulas, j que o vulo que "carrega" as mitocndrias mutantes tambm possui mitocndrias normais. As encefalomiopatias mitocondriais funcionais so diversas e raras. A falha pode estar na utilizao do substrato, no acoplamento da oxidao e produo de ATP ou na cadeia respiratria. Ao ME a clula muscular esqueltica mostra-se repleta de mitocndrias; a duplicao excessiva das mitocndrias uma tentativa de superar o dficit energtico nesta patologia, assim como em qualquer outra condio fisiolgica ou patolgica de dficit energtico na clula. A febre mitocondrial uma anormalidade funcional no acoplamento da oxidao com a produo de ATP em que a mitocndria produz pirncipalmente energia trmica, e no qumica. O paciente demonstra quadro crnico, que se manifesta logo na infncia, de febre, aparncia magra, sudorese excessiva e intolerncia ao calor. importante distingui-la do hipertireoidismo. O mitocondrioma uma anormalidade estrutural encontrada em tumores especficos das glndulas salivares e ocasionalmente no fgado. Caracteriza-se por um descontrole da duplicao mitocondrial, tornando o citoplasma repleto da organela e comprimindo as outras estruturas celulares. O mecanismo ainda desconhecido. Teorias recentes sugerem que a anormalidade deve ser enquadrada como um tumor benigno das mitocndrias.

O depsito de clcio achado frequente e no patolgico nas mitocondrias dos osteoblastos. A disfuno dos hormnios calcitonina e paratormnio provoca hipercalcemia sangunea que reflete-se em um excesso de clcio citoplasmtico que pode depositar-se na mitocndria, causando danos ao rim e corao. A clula pode tornar-se repleta de clcio e morrer. Algumas quadros anormalidades patolgicos, estruturais como podem ser causadas virais por e intoxicao por substncias, como lcool, quelantes, reserpina e hipofisectomia, hepatites deficincia nutricionais. Pode-se perceber alteraes ao ME como mitocndrias de formas bizarras, gigantes e vaculolizadas. No entanto, nenhuma patologia O foi atribuda diretamente um s alteraes global da mitocondriais. hipertireoidismo produz aumento

concentrao de mitocondrias nas clulas, pois os hormnios T 3 e T4 estimulam a proliferao e aumento da atividade das mitocndrias.

Sntese e Secreo de Macromolculas

Introduo: A necessidade de sntese das clulas

A Sntese Protica depende dos genes presentes no DNA de cada clula e de todo um aparato enzimtico necessrio para a transcrio e traduo. No processo de diferenciao celular, fatores de crescimento e diferenciao, hormnios, neurotransmissores e fatores da matriz extracelular podem induzir uma cascata de sinais intracelulares que alteram a expresso gnica da clula. Isso controlado por fatores de transcrio que ativam ou reprimem diferentes genes. Assim, aps

esse processo, um hepatcito expressar genes diferentes daqueles expressos em um neurnio. A transcrio depende de enzimas que produziro o RNA mensageiro a partir do DNA. O RNA mensageiro migrar atravs do complexo de poros nucleares para o citoplasma, onde ocorrer a sntese protica.

. Renovao das estruturas celulares

clula

est as

constantemente demandas

renovando

seu as

sistema

de

endomembranas. A permanente produo de membranas tem como objetivo suprir funcionais, renovar membranas desgastadas pelo envelhecimento ou duplic-las antes da mitose. Para isto necessrio a sntese de lipdios, protenas e hidratos de carbono. Estas molculas se incorporam membrana do Retculo Endoplasmtico (RE); medida que o sistema de endomembranas se desenvolve, pores do RE se desprendem, na forma de vesculas que se fundem a outras organelas membranosas. Algumas protenas de membrana so sintetizadas no citoplasma e transferidas para organelas especficas.

. Sistema de Endomembranas
O Sistema de Endomembranas um dos maiores compartimentos celulares. composto por cisternas, sculos e tbulos que se comunicam atravs de vesculas transportadoras. Uma vescula

transportadora brota da membrana da organela doadora, trafega pelo citosol e se funde na membrana da organela receptora; deste modo, no s o contedo da vescula, mas tambm a sua membrana, so transferidos organela receptora. As organelas que compem o Sistema de Endomembranas so formadas por membranas bilipdicas similares Membrana Plasmtica. So elas: Retculo Endoplasmtico Rugoso, Retculo Endoplasmtico Liso, Complexo de Golgi, Endossomas, Lisossomas e Peroxissomas. A parte externa da membrana de cada organela, relacionada com o Citosol, chamada face citoslica e a interna, face luminal.

Retculo Endoplasmtico Rugoso (RER)

composto por uma rede tridimensional de

tbulos e cisternas interconectados, que vai desde a membrana nuclear (a cisterna do RE contnua com a cisterna perinuclear) at a membrana plasmtica. dividido em dois setores: RERugoso -- com poliribossomas aderidos face citoslica -- e RELiso -- que alm de no possui protica polirribossomas e enzimtica aderidos, de apresenta diferente e composio contedo . sua membrana

A ligao de polirribossomas superfcie citoslica do RER feita atravs de protenas integrais: . Docking protein (partcula receptora de reconhecimento de sinal) . Riboforinas I e II (protenas receptoras do ribossoma) . Protena do Poro A presena de polirribossomas no RER possibilita sua funo: sntese de protenas. Por isto ele e to desenvolvido em clulas com
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intensa sntese protica, destinada exportao ou a organelas com membrana. Alm disso, o RER tambm participa de modificaes ps-traducionais proticas: sulfatao, pregueamento e glicosilao.

Retculo Endoplasmtico Liso (REL)

As

clulas

que

possuem

REL

mais

desenvolvido

realizam

intensa atividade de sntese de esterides,

colesterol e triglicrides, armazenam glicognio ou possuem atividade de desintoxicao (ex.: hepatcito). As enzimas necessrias ao metabolismo de lipdios e acares esto associadas membrana do REL ou em seu lume. Alm disso, o REL tem importante funo no controle do Ca2+ intracelular. Nas fibras musculares estriadas, onde a liberao de Ca2+ para o citossol essencial para o mecanismo de contrao das miofibrilas, mecanismos ativos de transporte associados membrana do REL possibilitam a rpida movimentao do Ca2+ para fora e para dentro de suas cisternas.

Complexo de Golgi (CG)

 um sistema de cisternas achatadas e ligeiramente curvas, que se situam entre o RE e a Membrana Plasmtica (MP). O CG possui uma face cis (convexa), voltada para o ncleo, e uma face trans (cncava), voltada para a membrana plasmtica. Entre elas esto as cisternas medianas. As molculas proticas chegam ao CG pela incorporao de vesculas de transporte, advindas do RER, na face cis. Da migram, tambm atravs de vesculas transportadoras, para as cisternas medianas e, finalmente para a cisterna trans, de onde sero endereadas MP, aos lisossomas, ao RE ou ao prprio Golgi. O CG modifica as protenas produzidas pelo RER, alterando seu padro de glicosilao, fosforilao, sulfatao e hidroxilao. Alm disso, enzimas associadas membrana do CG concentram e endeream -bioquimicamente -- estas protenas para os diferentes compartimentos membranares. Assim, vesculas contendo as hidrolases cidas, que formaro os lisossomas, expressaro em suas membranas o receptor de manose-6-fosfato. As vesculas brotam do Complexo de Golgi recobertas por clatrina ou outras protenas que se conectam com o domnio citoslico das protenas transmembranares caractersticas de cada vescula (por ex.: manose-6-fosfato na membrana de lisossomas). Os triesquelions de clatrina (complexo protico constitudo de trs cadeias pesadas e trs cadeias leves) se autoconstroem, induzindo, na face citoslica da membrana do CG, a fora mecnica que provoca a sua invaginao. Inicialmente forma-se uma fosseta, que em seguida se converte em

uma

vescula,

que

destaca

liberada

no

citosol.

Fotomicrografia eletrnica de transmisso de clula folicular de ovrio de S. spilopleura. Ver Complexo de Golgi e cisternas do Retculo Endoplasmtico Rugoso dilatadas.

Sinais podem

relacionados seguir os

ao

Complexo seguintes

de

Golgi

As protenas depois de endereadas e encapsuladas em vesculas, caminhos :

1 2 3

Inserir-se MP, se contiverem protenas (ou lpides) com domnios de ancoragem na membrana plasmtica. Fundir-se MP e promover a exocitose do seu contedo, se contiverem protenas destinadas ao meio extracelular. Acomodar-se no citoplasma, como grnulos de secreo, para posteriormente serem exocitados.

4 Formar lisossomas que podero se fundir com endossomas. 5 Voltar s Cisternas Cis do CG. 6 Fundir-se ao RE, tranferindo a este protenas processadas no CG. Desta forma, os mecanismos em duas de secreo vias celular podem ser

classificados

distintas:

A Via Secretria Regulada controla o transporte de protenas destinadas aos lisossomas(4) e para vesculas secretoras(3). A liberao destas protenas depende da ordenao de uma substncia indutora. A Via Secretria Constitutiva, ou Padro, no tem um processo regulador prprio, as molculas so secretadas automaticamente. seguida pelas protenas destinadas MP(1) e ao meio extra-celular(2).

Compartimento Endossmico

O Compartimento Endossmico o conjunto de vesculas endocticas mais ou menos prximas da membrana plasmtica. Os Endossomas so vesculas formadas pelos mecanismos de endocitose (micropinocitose, pinocitose e fagocitose). De acordo com as protenas associadas face citosslica das vesculas, elas podem migrar atravs do citoesqueleto para regies mais internas da clula, associando-se a lisossomas e formando endossomas secundrios. Algumas vesculas endossmicas podem voltar membrana plasmtica, reciclando assim receptores e fosfolipdios. Nos endossomas secundrios, as enzimas hidrolticas dos lisossomas podem ser ativadas (pH cido) e digerir o material endocitado. Endossomas tardios contm material j parcialmente ou totalmente digerido. Corpos residuais so formados pelo acmulo de substncias que as enzimas da clula no conseguem digerir.

Sntese Protica
A sntese, ou traduo protica, um processo que requer um filamento de RNA mensageiro (RNAm), RNAs transportadores e subunidades ribossmicas. As subunidades ribossmicas associam-se ao RNAm, formando o Polirribossoma, estrutura composta de uma fita de RNAm e cerca de 15 ribossomos aderidos, que possibilita a sntese de um grande nmero de molculas proticas ao mesmo tempo.

Fotomicrografia eletrnica de transmisso de clula rica em polirribossomas livres.

CEMEL - ICB Cortesia da Profa. Rossana C. N. Melo - Laboratrio de Biologia Celular - UFJF Tese: Desnervao simptica, inflamao e parasitismo no corao de ratas infectadas experimentalmente por Trypanosoma cruzi: efeitos da irradiao gama e do tratamento com slica na infeco aguda. Departamento de Morfologia UFMG

A constituio da protena sintetizada depende diretamente do cdigo gentico, revelado no RNA pela sequncia de cdons. Estes so trincas (trplets) de nucleotdeos que se relacionam especificamente com os 20 aminocidos usados na sntese de protenas. O nmero de cdons na fita de RNAm determina o tamanho da protena. Existem, ao todo, 64 cdons. Como existem mais cdons (64) que aminocidos (20), quase todos os aminocidos podem ser reconhecidos por mais de um cdon, isso porque algumas trincas de nucleotdeos atuam como sinnimos. O local onde ocorre a sntese protica est relacionado com o destino da protena produzida:

Um Peptdios Sinal, pequena sequncia de aminocidos na poro N-terminal ou C-terminal da protena, vai enderear a protena a diferentes locais das clulas. Assim, protenas destinadas ao ncleo celular, s mitocndrias e aos peroxissomos so sintetizadas em Polirribossomas livres. As protenas que precisam ser empacotadas e enviadas para fora da clula (protenas de superfcie da Membrana Plasmtica, ou que constituiro o contedo dos lisossomas e de outros componentes do sistema de endomembranas) sero sintetizadas no RER.

Sntese de protenas destinadas ao Citosol O processo de sntese protica se inicia quando a subunidade pequena do ribossoma se associa fita de RNAm. Ela tem dois stios ativos: P (de peptidil) e A (de aminoacil). No stio P, onde o RNAm exibe o cdon

AUG iniciador, se liga um RNAt iniciador, com seu aminocido associado: metionina. Neste momento a subunidade ribossmica grande se liga ao complexo inicial, e um segundo peptidil RNAt (RNAt associado a um aminocido) se liga no stio A. Uma ligao peptdica, com a formao de pontes de hidrognio e liberao de uma molcula de gua, estabelecida entre os dois aminocidos carreados pelo RNAt. O stio P do ribossoma deixa, ento, "escapar" o RNAt iniciador e o RNAt que ocupava o stio A se move para o stio P vago. O ribossoma move-se um cdon abaixo do RNAm, de modo que o prximo cdon posicionado no stio A. Esse mecanismo se repete inmeras vezes, enquanto o ribossoma se move ao longo da cadeia de RNAm, na direo 5` --> 3`, proporcionando o elongamento da cadeia protica. A sntese de polipeptdeos continua at que o ribossoma encontra um cdon de terminao, que determina o fim da sntese protica e a liberao da nova cadeia de polipeptdeos. Uma vez que a sntese completada, as duas subunidades ribossmicas se dissociam do mRNA e retornam ao citosol. Regulao elongamento fatores de iniciao da e (IF). Os IF-2, Sntese Protica terminao. IF-3 e IF-4 agem no

A sntese de protenas pode ser dividida em trs etapas: iniciao, A etapa de iniciao regulada por protenas citoslicas denominadas reconhecimento do RNAm pelo subunidade menor do ribossomo, e sua ligao ao RNAm. Um outro fator de iniciao, IF-5, media a ligao das duas subunidades ribossmicas no RNAm, ao final da etapa de iniciao, aps o desligamento dos outros IFs. A etapa de elongamento comea quando o segundo peptidil RNAt se aproxima do stio A do ribossomo, se unindo ao RNAm. Esta reao mediada por um fator de elongamento, chamado EF-1 e consome

energia, que fornecida por GTP. Um outro fator de elongamento, EF-2, responsvel pela translocao, isto , o deslocamento do ribossomo pelo RNAm. A etapa de terminao determina a concluso da sntese da protena, quando o ribossoma atinge o cdon de terminao (UAA, UGA ou UAG). Isto faz com que o stio A seja ocupado por um fator de terminao: eRF-1, impedindo a ligao de um outro RNAt. Depois disto ocorre o desprendimento do polipeptdeo, que depende do eRF-3, outro fator de terminao.

Sntese

de

protenas

destinadas

ao

RER A

As primeiras etapas da sntese de uma protena ocorrem sempre em ribossomas livre no citosol, mesmo se ela for destinada ao RER. ligao do ribossoma ao RER se d logo aps o incio da traduo, quando emerge, da protena em construo, um peptdeo sinal. Este direciona e possibilita, atravs de sua ligao partcula de reconhecimento do sinal, a unio do complexo ribossomo-protena ao RER. Desta forma, toda protena que contm um peptdeo sinal liberada na luz do RER, depois de concluda a sua sntese. As protenas destinadas insero na membrana do RER tambm possuem sinais especficos. Alm do peptdeo sinal, possuem um ou mais sinais adicionais, que possibilitam a ancoragem (sinal de ancoragem) e a situao destas protenas transmembranas, quer sejam elas monopasso (atravessam a membrana bilipdica apenas uma vez) , bipasso(atravessam a membrana 2 vezes) ou multipasso (atravessam a membrana mltiplas vezes). De acordo com a natureza da protena, ela permanecer na membrana do RER, ou passar, atravs do sistema de vesculas, para outra organela (CG, endossoma) ou MP.

. Glicosilao de Protenas Para cada protena, especificamente, existem reaes importantes "ps-traducionais", que concluem sua moldagem e a torna pronta estruturalmente e funcionalmente. Estas reaes ocorrem no interior do CG, listadas nas suas regies Cis, abaixo: Mediana e Trans. As principais modificaes ps-traducionais realizadas no CG esto

Remoo de CIS Manoses Fosforilao de Manoses Remoo de MEDIANA Manoses Glicosilao Terminal Sulfatao e TRANS fosforilao de aminocidos

Endereamento de protenas
Os intinerrios seguidos pelas protenas dependem de certos sinais em suas molculas e de receptores especficos distribudos nos locais por onde elas passam. isto que faz, por exemplo, uma enzima hidroltica,

recm sintetizada, se dirigir ao endossoma e no superfcie celular. O quadro abaixo apresenta alguns sinais envolvidos no transporte de protenas pelo sistema de endomembranas:

Sinal KDEL KKXX GPI Manose-6-fosfato Vrias L e Y YQRL NPXY

Transporte Do RER para o complexo de Golgi e retorno ao RE Do complexo de Golgi para a membrana plasmtica (secreo) Do complexo de Golgi para os lisossomas (enzimas hidrolticas) Da membrana plasmtica para os endossomas (endocitose)

D: cido asprtico; E: cido glutmico; K: leucina; N: asparagina; P: prolina; Q: glutamina; R: arginina; Y: tirosina; X: qualquer aminocido; GPI: glicosilfosfatidilinositol.

. Sntese de lipdios, fosfolipdios e esterides

A sntese de fosfolpides para as membranas celulares feita por protenas integrais da membrana do REL. Algumas molculas de fosfolpides, depois de sintetizadas pelas enzimas do REL, so completadas no CG. S ento atingem as membranas celulares. O transporte dos fosfolpides s membranas celulares feito atravs de vesculas transportadoras ou por protenas transportadoras especiais, que atravessam o citosol, translocando o fosfolpide, sempre, de uma membrana rica em fosfolpide (REL) , para outra (por.ex.: peroxissoma), pobre em fosfolpides. Durante este transporte as molculas de fosfolpides sofrem inmeras alteraes, o que explica composio lipdica das diversas membranas A produo de hormnios esterides, nas clulas a diferente celulares. gonadais e

supra-renais, inicia-se com a captao do colesterol do meio extracelular. O colesterol , ento, transportado at a mitocndria, onde convertido em pregnenolona. Esta sai da mitocndria e penetra no RE, onde continua seu metabolismo por meio de diversas enzimas que atuam sequencialmente, para formar a desoxicorticosterona, o desoxicortisol e o andrgeno androstenediona. O desoxicorticosterona e o desoxicortisol retornam mitocndria, onde sero convertidos, respectivamente em corticosterona e cortisol. Posteriormente, a corticosterona, nas clulas da zona glomerulosa da supra-renal, o corticosterol convertido no mineralocorticide aldosterona.

Chaperoninas
As Chaperoninas so monmeros que se associam entre si, formando uma estrutura tridimensional denominada Chaperona. Cada Chaperona possui um compartimento central, que acomoda a protena recm-sintetizada, impedindo que esta tenha um dobramento

prematuro e de forma inadequada. Assim, as Chaperonas ajudam as protenas a se moldar, associar a outras protenas de maneira estvel e tornarem-se estruturas ativas, evitando a associao de protenas ainda no dobradas corretamente. Tambm atuam ativamente, com hidrlise de ATP e modificao conformacional de algumas protenas. Existem diferentes famlias proticas de Chaperonas, como a hsp 70 e hsp 60. Elas tm este nome (hsp = heat shock protein) porque so sintetizadas em grande quantidade quando a clula submetida a altas temperaturas (> 42o C) e situaes de estresse metablico, quando a maioria das protenas celulares so desnaturadas. Em tais circunstncias, as chaperonas agem facilitando a renaturao protica. Estas famlias se diferem entre as organelas celulares. As hsp70 mitocondriais, por exemplo, so diferentes das do citosol. No RER uma hsp70 especial (BIP) ajuda a dobrar as protenas neste compartimento.

A hsp60 tem forma de barril, por onde passam as protenas que sero modificadas.

A hsp 70 atua ainda na primeira fase de formao da protena, ligando-se a fitas com sequncia hidrofbica antes mesmo da protena deixar o ribossoma

As Chaperonas ao realizar sua funo consumem energia na forma de ATP. Depois que a protena se libera da chaperona e fixa sua residncia no Citosol, a chaperona fica livre, podendo ser reutilizada.

. Caractersticas morfolgicas de algumas clulas secretoras

A ultra-estrutura das clulas com intensa atividade protica varia de acordo com o destino das protenas sintetizadas. Veja no quadro abaixo alguns exemplos:

Clula

Funo Principal Secreo ativa de protenas

Caractersticas morfolgicas - Citoplasma ocupado, em grande parte, por polirribossomas livres -Ncleo vesiculoso -Grande volume de RER com

Eritroblasto

citoslicas (Hemoglobina para transporte de O2)

Plasmcito

Secreo direta de protenas. cisternas dilatadas (Anticorpos) - CG desenvolvido - Ausncia de grnulos de secreo Sntese de protenas e sua estocagem em grnulos que permanecero no interior da clula. Sntese e acmulode grnulos de secreo, posteriormente exportados por exocitose. (Enzimas Digestivas) - Ncleo vesiculoso - Citoplasma preenchido por grnulos de armazenamento. -Preenchida por grnulos de armazenamento (zimognio) -Regio basal rica em RER -Grande volume de REL, mitocndrias com cristas tubulares -Ncleo Basal -pice preenchido por grnulos de glicoprotenas -Grande volume de C. Golgi e RER

Eosinfilo

Clula Acinosa do Pncreas

Clula Secretora de Hormnios Esterides

Produo de molculas lipossolveis.

Clulas Caliciformes Intestinais

Produo de muco glicoprotico.

Vesculas Secretrias com gros de Zimognio- Secreo Serosa Eletromicrografia elaborada por Ramon Lamar de Oliveira Junior, aluno de Mestrado da PG em Biologia Celular. Orientador : Nilo Bazzoli . Laboratrio de Ictiohistologia

Vesculas do Complexo de Golgi - Secreo Mucosa

CEMEL - ICB