UNI VERSI DADE FEDERAL DE SO CARLOS

Cent r o de Ci nc i as Agr r i as campus Ar ar as

Pr of . J or ge J os Cor r a Lopes
UFSCar /DTAi SER/CCA campus de Ar ar as/SP
e-mai l : j l opes@c c a.uf sc ar .br
LEVEDURAS E A
FERMENTAO ETANLI CA
5-10m
LEVEDURA AGENTE DA FERMENTAO
VACOLO
MITOCNDRIAS
(CRESCIMENTO)
APARELHO
DE GOLGI
CITOPLASMA
(FERMENTAO)
NCLEO
RETCULO
CICATRIZ
MEMBRANA
PLASMTICA
(TREALOSE)
A CLULA DE LEVEDURA
LEVEDURAS

MORFOLOGI A
UNI CELULARES, FREQUENTEMENTES OVAI S,
ARREDONDADAS OU EL PTI CAS.
COMPRI MENTO: 5 - 16
LARGURA: 3 7
AFETADAS POR DEFI CI NCI AS DE NUTRI ENTES
( P, Mg, Mn, Zn, et c .) E VI TAMI NAS (BI OTI NA,
NI ACI NA, CI DO PANTOTNI CO E PI RAMI DI NA).
TAMANHO: 5 VEZES MAI ORES QUE AS
BACTRI AS: PERMI TE CENTRI FUGAO E
CONTAGEM DI RETA (NEUBAUER).
FI GURA 1: DI AGRAMA DE UMA CLULA DE S. S. c er evi si ae c er evi si ae
PAREDE CELULAR: 30% DO PESO
SECO DA CLULA.
COMPOSI O: POL MEROS DE
GLUCANA (CELULOSE), MANANA
(GOMAS), QUI TI NA, LI P DEOS,
FOSFATOS E ESTERI DES.
ASPECTO: POROSO
(FI LTROS)/SELETI VI DADE;
PROPRI EDADES PARA SUBSTNCI AS
< QUE 4.800 (PM) AT S TI O DE
ABSORO.
ENZI MAS EXTRACELULARES:
I NVERTASE, MELI BI ASE,
GLUCOAMI LASE et c .
(TRANSLOCAO E DESDOBRAMENTO
DAS FONTES DE ENERGI A PARA O
CI TOPLASMA).
MEMBRANA CI TOPLASMTI CA
OU PLASMALEMA.
LOCALI ZADA ABAI XO DA
PAREDE CELULAR DELI MI TA EM
SEU I NTERI OR TODAS AS
MI CROESTRUTURAS E O
HI ALOPLASMA.
I NTEGRI DADE E ESTABI LI DADE:
CTI ONS I NORGNI COS Mg
2+
,
Ca
2+
e K
+
.
PERMEABI LI DADE SELETI VA:
CONTROLE DE TRANSLOCAO
DE COMPOSTOS DO MEI O
EXTERNO PARA O I NTERNO DA
CLULA E VI CE-VERSA.
RET CULO ENDOSPLASMTI CO:
S NTESE DE PROTE NAS.
VACOLO:
MEMBRANA VACUOLAR:
NATUREZA LI POPROTEI CA.
ARMAZENAMENTO TEMPORRI O
DE POLI FOSFATOS, LI P DEOS E
ENZI MAS.
MI TOCONDRI A: PEQUENAS
ORGANELAS COM MEMBRANAS
UPLAS COM I NVAGI NAES
I NTERNAS ( CRI STAS ).
FUNO: CONVERSO DE
ENERGI A (ATP) E S NTESES DE
PROTE NAS E RNA.
RI BOSSOMOS: S NTESE
PROTEI CA (OCORRE NO
CI TOPLASMA).
NUTRI ENTES DE RESERVA:
CARBOI DRATOS E LI P DEOS.
NCLEO:
DESOXI RI BONUCLEOPROTE NAS
E RI BONUCLEOPROTE NAS.
BROTAMENTO OU GEMULAO: MULTI PLI CAO
VEGETATI VA (ASSEXUADA).
ESPORULAO: FORMAO DE ASCOS - SEXUADA (SOB
ESTRESSE).
REPRODUO EM LEVEDURAS
CI CLO VI TAL DE S. c er evi si ae (BERGEYS MANUAL 2005).
METABOLI SMO DAS LEVEDURAS
CATABOLI SMO ANABOLI SMO
DEGRADAO DO SUBSTRATO
(FERMENTAO E RESPI RAO)
S NTESE DE MATERI AL CELULAR
LI BERA0 DE ENERGI A (ATP) ENERGI A PARA S NTESE
METABOLI SMO DAS LEVEDURAS
RESPI RAO:OXI DAO BI OLGI CA DE
SUBSTRATOS ORGNI COS QUE ENVOLVE
UM SI STEMA MULTI ENZI MTI CO E O
TRANSPORTE DE ELTRONS PELA CADEI A
RESPI RATRI A (STE), RESULTANDO NA
FORMAO DE H
2
O.
FERMENTAO: REAES EM QUE
COMPOSTOS ORGNI COS ATUAM COMO
SUBSTRATOS E COMO AGENTES DE
OXI DAO, EM UMA SEQUNCI A
ORDENADA DE REAES ENZI MTI CAS.
VI A BI OSSI NTTI CA DA DEGRAO DE CARBOI DRATOS E PRODUO DE ETANOL POR
LEVEDURAS (S. c er evi si ae).
DESENVOLVI MENTO DAS LEVEDURAS
CRESCI MENTO POPULACI ONAL:
SUPRI MENTO DE NUTRI ENTES
COMPOSI O QU MI CA DO MEI O
COMPOSI O F SI CA DO MEI O
CONSTI TUI O E ESTGI O DE DESENVOLVI MENTO
DOS MI CROORGANI SMOS
DESENVOLVI MENTO DAS LEVEDURAS
FUNO DE:
CONDI ES DO MEI O
NUTRI ENTES E ACI DEZ
AERAO E AGI TAO
TEMPERATURA
CLULAS TOTAI S
1 - LAG-FASE
2 FASE DE ACELERAO DO
CRESCI MENTO
3 LOG-FASE OU EXPONENCI AL
DE CRESCI MENTO
4 FASE DE DESACELERAO DO
CRESCI MENTO
5 FASE ESTACI ONRI A
6 FASE DE DECL NI O
1 - LAG-FASE: ADAPTAO, RESCONSTI TUI O
ENZI MTI CA, DEGRADAO MACROMOLECULAR, ETC.
FUNO DE:
LI NHAGEM DA LEVEDURA;
I DADE DO CULTI VO ANTES D TRANSFERNI A PARA O
MEI O;
COMPOSI ES DOS MEI OS DE CULTI CO ANTERI OR E
NOVO.
FASES DE CRESCI MENTO DE CLULAS DE LEVEDURAS
2 FASE DE ACELERAO: AUMENTO GRADUAL DA
VELOCI DADE DE MULTI PLI CAO CELULAR.
3 FASE EXPONENCI AL: AUMENTO EXPONENCI AL DO
NMERO DE CLULAS. CADA CLULA SE DI VI DE A
I NTERVALOS CONSTANTES DE TEMPO. CARACTERZA-SE
POR:
AUMENTO EXPONECI AL DO NMERO DE CLULAS;
I NTENSO METABOLI SMO CELULAR
GRANDE QUANTI DADE DE PRODUTOS DE EXCREO,
METABLI TOS I NTERMEDI RI OS, TEMPERATURAS E
OUTROS FATORES QUE ALTERAM RAPI DAMENTE A
COMPOSI O DO MEI O;
TEMPO DESTA FASE CONTROLADA PELA COMPOSI O
E ESTADO F SCO DO MEI O E DEPENDE DO NMERO DE
CLULAS POR UNI DADE DE VOLUME E ACMULO DE
METABLI TOS E PRODUTOS FI NAI S (I NI BI DORES);
A QUANTI I DADE DE I NCULO NO I NFLUENCI A O TEMPO
DE GERAONA FASE EXPONENCI AL, MAS RETARDA A
FASE DE MULTI PLI CAO CELULAR.
FASES DE CRESCI MENTO DE CLULAS DE LEVEDURAS
FASES DE CRESCI MENTO DE CLULAS DE LEVEDURAS
4 FASE ESTACI ONRI A: O NMERO DE CLULAS
PERMANECE QUASE QUE CONSTANTEPOR UM PER ODO
DE TEMPO; H BAI XO CONSUMO DE ENERGI A,
MANUTENAO DA VI ABI LI DADE CELULAR AT
ESGOTAMENTO DOS NUTRI ENTES. I NFULENCI ADA
POR;
ESGOTAMENTO DE NUTRI ENTES DO MEI O;
ACMULO DE PRODUTOS FI NAI S TXI COS.
5 FASE DE DECL NI O: O NMERO DE CLULAS QUE
MORRE EXCEDE O DE CLULAS NOVAS, QUE FUNO
DE:
COMPOSI O DO MEI O (ESGOTAMENTO DO MEI O,
ACMULO DE PRODUTOS FI NAI S,ETC);
CONDI ES F SI CAS E QU MI CAS DO MEI O( pH,
TEMPERATURA,ETC)
OBJ ETI VO DA LEVEDURA
REPRODUZI R-SE (CRESCI MENTO) PARA A
PERPETUAO DA ESPCI E.
O CRESCI MENTO EM ANAEROBI OSE OBRI GA
A LEVEDURA A PRODUZI R ETANOL E CO
2
.
A ESCOLHA DO ETANOL FOI FRUTO DE BI LHES
DE ANOS DE EVOLUO, PERMI TI NDO
LEVEDURA MAI OR COMPETI TI VI DADE FRENTE A
OUTROS ORGANI SMOS (AO ANTI SSPTI CA).
OBJ ETI VO DA LEVEDURA
TRANSFORMANDO O ACAR EM LCOOL A
LEVEDURA OBTM A ENERGI A (ATP) E
MATERI AL NECESSRI OS SOBREVI VNCI A E
CRESCI MENTO.
LCOOL E GS CARBNI CO SO PRODUTOS DE
EXCREO, SEM UTI LI DADE METABLI CA PARA A
LEVEDURA EM ANAEROBI OSE.
CI NTI CA DE CRESCI MENTO DE LEVEDURAS

O ESTUDO DA CI NTI CA DE CULTI VOS

O ESTUDO DA CI NTI CA DE CULTI VOS
MI CROBI ANOS EST VOLTADO PARA
MI CROBI ANOS EST VOLTADO PARA
DOI S GRANDES OBJ ETI VOS:
DOI S GRANDES OBJ ETI VOS:

MEDI R VELOCI DADES DE TRANSFORMAES

MEDI R VELOCI DADES DE TRANSFORMAES
QUE OCORREM DURANTE OS PROCESSOS
QUE OCORREM DURANTE OS PROCESSOS
FERMENTATI VOS: COMO CONSUMO DE
FERMENTATI VOS: COMO CONSUMO DE
SUBSTRATOS, ACMULO DE PRODUTOS E
SUBSTRATOS, ACMULO DE PRODUTOS E
BI OMASSAS.
BI OMASSAS.


ESTUDAR A I NFLUNCI A DE FATORES NAS
ESTUDAR A I NFLUNCI A DE FATORES NAS
VELOCI DADESDE TRANSFORMAES:
VELOCI DADESDE TRANSFORMAES:
TEMPERATURAS, pH, GEOMETRI A DOS
TEMPERATURAS, pH, GEOMETRI A DOS
BI OREATORES, ETC.
BI OREATORES, ETC.
1.I NTRODUO
A CI NTI CA DE CULTI VOS MI CROBI ANOS
A CI NTI CA DE CULTI VOS MI CROBI ANOS
PERMI TE O CONHECI MENTO DE CONDI ES
PERMI TE O CONHECI MENTO DE CONDI ES
MAI S FAVORVEI S
MAI S FAVORVEI S
DE SE CONDUZI R E
DE SE CONDUZI R E
CONTROLAR PROCESSOS FERMENTATI VOS.
CONTROLAR PROCESSOS FERMENTATI VOS.
O ESTUDO CI NTI CO ENVOLVE DUAS PARTES:
O ESTUDO CI NTI CO ENVOLVE DUAS PARTES:


O TRABALHO EXPERI MENTAL DE COLETA DE
O TRABALHO EXPERI MENTAL DE COLETA DE
DADOS EM LABORATRI O, ONDE POCURA
DADOS EM LABORATRI O, ONDE POCURA
-
-
SE MED
SE MED
VELOCI DADES E ESTUDAR I NFLUNCI A DE
VELOCI DADES E ESTUDAR I NFLUNCI A DE
FATORES. APS OBTENO DESSES DADOS, TEM
FATORES. APS OBTENO DESSES DADOS, TEM
QUE I NTERPRET
QUE I NTERPRET
-
-
LOS.
LOS.


DETERMI NAR AS VELOCI DADES DE
DETERMI NAR AS VELOCI DADES DE
TRANSFORMAES.
TRANSFORMAES.
t empo
Concent r ao
(g/L)
[ Subs t r at o]
[ Pr odut o]
[ Bi omassa]

QUE VELOCI DADES DEVE

QUE VELOCI DADES DEVE
-
-
SE DETERMI NAR?
SE DETERMI NAR?


PARA ESSAS TRANSFORMAES A VELOCI DADE
PARA ESSAS TRANSFORMAES A VELOCI DADE
PODER SER DEFI NI DA A PARTI R DO CONSUMO DA
PODER SER DEFI NI DA A PARTI R DO CONSUMO DA
SUBSTNCI A
SUBSTNCI A
S
S
OU A PARTI R DA PRODUO DA
OU A PARTI R DA PRODUO DA
SUBSTNCI A P OU
SUBSTNCI A P OU
X.
X.
(
(
dS
dS
/
/
dt
dt
)
)
t
t
1 1
= VELOCI DADE DE CONSUMO DE
= VELOCI DADE DE CONSUMO DE
SUBSTRATO
S NO I NSTANTE t
S NO I NSTANTE t
1 1
(g/L.h)
(g/L.h)
(
(
dP
dP
/
/
dt
dt
)
)
t
t
1 1
= VELOCI DADE DE FORMAO DE
= VELOCI DADE DE FORMAO DE
PRODUTO
P NO I NSTANTE t
P NO I NSTANTE t
1 1
(g/L.h)
(g/L.h)
(
(
dS
dS
/
/
dt
dt
)
)
t
t
1 1
= VELOCI DADE DE FORMAO DE
= VELOCI DADE DE FORMAO DE
B
BI OMASSA CELULAR
X NO I NSTANTE t
X NO I NSTANTE t
1 1
(g/L.h)
(g/L.h)

NO ESTUDO DE PROCESSOS FERMENTATI VOS,

NO ESTUDO DE PROCESSOS FERMENTATI VOS,
AS TRANASFORMAES SO CATALI SADAS POR
AS TRANASFORMAES SO CATALI SADAS POR
ENZI MAS
ENZI MAS
QUE,
QUE,
SO PRODUZI DAS POR
SO PRODUZI DAS POR
MI CRORGANI SMOS. A CONCENTRAO DE
MI CRORGANI SMOS. A CONCENTRAO DE
MI CRORGANI SMOS PRESENTES NO
MI CRORGANI SMOS PRESENTES NO
CONSTANTE COM O TEMPO, DI FI CULTANDO
CONSTANTE COM O TEMPO, DI FI CULTANDO
COMPARAES ENTRE i NSTANTES
COMPARAES ENTRE i NSTANTES
CONSECUTI VOS.
CONSECUTI VOS.


COMO SOLUCI ONAR TAL PROBLEMA?
COMO SOLUCI ONAR TAL PROBLEMA?

=
=
VELOCI DADE ESPEC FI CA DE CRESCI MENTO
VELOCI DADE ESPEC FI CA DE CRESCI MENTO

S S
= (1/E) . (
= (1/E) . (
dS
dS
/
/
dt
dt
)
)
E = CONCENTRAO DO COMPLEXO
E = CONCENTRAO DO COMPLEXO
ENZI MA/SUBSTRATO (DI F CI L
ENZI MA/SUBSTRATO (DI F CI L
DETERMI NAO EXPERI MENTAL)
DETERMI NAO EXPERI MENTAL)

P P
= (1/E) . (
= (1/E) . (
dP
dP
/
/
dt
dt
)
)

S S
= (1/S) . (
= (1/S) . (
dS
dS
/
/
dt
dt
)
)

P P
= (1/P) . (
= (1/P) . (
dP
dP
/
/
dt
dt
)
)

X X
= (1/X) . (
= (1/X) . (
dP
dP
/
/
dt
dt
)
)
2.TEMPO DE GERAO


O TEMPO NECESSRI O PARA QUE A MASSA OU
O TEMPO NECESSRI O PARA QUE A MASSA OU
NMERO DE MI CRORGANI SMOS DUPLI QUE.
NMERO DE MI CRORGANI SMOS DUPLI QUE.
NMERO DE
NMERO DE
CLULAS
CLULAS
NMERO DE
NMERO DE
GERAES
GERAES
1
2
3
4
n
(0) X
0
. 2
0
(1) X
0
. 2
1
(2) X
0
. 2
2
(3) X
0
. 2
2
(n) X
0
. 2
2