Biosseguranca Laboratorios Biomedicos Microbiologia

Ttulo original: Biosafcty in Microbiological and
Biomcdical Iaboratorics 4
th
cdition May of 1999
3.
a
edio revista e atualizada
2.
a
reimpresso
Srie A. Normas e Manuais Tcnicos
Braslia DF
2006
MINISTRIO DA SADE
Secretaria de Vigilncia em Sade
Departamento de Vigilncia Epidemiolgica
BIOSSEGURANA
EM LABORATRIOS
BIOMDICOS E DE
MICROBIOLOGIA
2000 Ministrio da Sade.
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desta obra em portugus.
Edio original em ingls: Biosafety in
Microbiological and Biomedical Laboratories
Editada pelo CDC Prevention and Control
Center of Diseases and INS National
Institute of Health Washington United
States 4
th
edition May of 1999, 1
st
edition
1994.
Srie A. Normas e Manuais Tcnicos
Tiragem: 3. edio em portugus
revista e atualizada 2. reimpresso
2006 1.500 exemplares
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3. edio revista e atualizada 2004:
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Ficha Catalogrca
Brasil. Ministrio da Sade. Secretaria de Vigilncia em Sade. Departamento de Vigilncia Epidemiolgica.
Biossegurana em laboratrios biomdicos e de microbiologia / Ministrio da Sade, Secretaria de Vigilncia
em Sade, Departamento de Vigilncia Epidemiolgica. 3. ed. em portugus rev. e atual. Braslia: Ministrio
da Sade, 2006.
290 p.: il. (Srie A. Normas e Manuais Tcnicos)
ISBN 85-334-0777-7
Traduo do ingls: Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories
ISBN 017-040-00547-4
1. Laboratrios de sade pblica. 2. Tcnicas e procedimentos de laboratrio. I. Ttulo. II. Srie.
NLM QY 25
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Capa e projeto grco: Fabiano Bastos
Ttulo para indexao:
Em espanhol: Biosecuridad en laboratorios biomdicos y de microbiologa
DEDICATRIA*
Esta quarta edio de Biossegurana em Laboratrios Biomdi-
cos e de Microbiologia dedicada vida e s realizaes de John
H. Richardson, D. V. M., M. P. H.
Dr. Richardson foi pioneiro e incessante defensor da segurana
para a educao biolgica. Ele foi o co-editor das duas primeiras
edies da BLBM, cujas normas so agora aceitas como o padro
ouro internacional para a conduo segura de uma pesquisa mi-
crobiolgica. Ele adaptou os programas de quarentena de animais
importados para os Estados Unidos e o de manejo de organismos
biolgicos perigosos em laboratrios de pesquisas. Ele foi scio-
presidente e ex-presidente da Associao Americana de Seguran-
a Biolgica (American Biological Safety Association) e auxiliou no
desenvolvimento do programa de qualicao dos prossionais da
rea de segurana biolgica. Aps uma longa e ilustre carreira no
Servio de Sade Pblica (Public Health Service), ele atuou como
diretor de Segurana do Meio Ambiente e na Secretaria de Sade
da Universidade de Emory, antes de se tornar um renomado con-
sultor de Biossegurana.
Talvez o aspecto mais importante, por ter sido um cavalheiro e
defensor da sade pblica, os muitos amigos e associados que ti-
veram o privilgio de conhec-lo e trabalhar ao seu lado sentiro
muito a sua falta.
* Traduo el ao texto publicado na 4
a
edio da obra impressa em Washington United States.
SUMRIO
REIAO DE TABEIAS, FIGURAS E IISTAS ......................................................... 7
APRESENTAO ....................................................................................................................................... 9
PREFCIO.......................................................................................................................................................... 11
SEO I ................................................................................................................................................................ 13
Introduo .......................................................................................................................................................... 13
SEO II .............................................................................................................................................................. 19
Princpios de Biossegurana ........................................................................................................... 19
SEO III ........................................................................................................................................................... 29
Nveis de Biossegurana Laboratorial .................................................................................. 29
SEO IV ............................................................................................................................................................ 65
Critrios para os Nveis de Biossegurana
para Animais Vertebrados ................................................................................................................. 65
SEO V .............................................................................................................................................................. 89
Avaliao dos Riscos ................................................................................................................................ 89
SEO VI ............................................................................................................................................................ 97
Nveis de Biossegurana Recomendados para Agentes
Infecciosos e Animais Infectados .............................................................................................. 97
SEO VII ......................................................................................................................................................... 101
Relao dos Agentes ................................................................................................................................ 101
Seo VII-A: Agentes Bacterianos ................................................................................... 101
Seo VII-B: Agentes Fngicos ........................................................................................... 127
Seo VII-C: Agentes Parasitrios ................................................................................... 132
Seo VII-D: Prons ......................................................................................................................... 138
Seo VII-E: Agentes Rickettsiais .................................................................................... 149
Seo VII-F: Agentes Virais (No Incluindo o Arbovrus) ..................... 153
Seo VII-G: Arbovrus e Vrus Zoonticos Relacionados .................... 178
REFERNCIAS BIBIIOGRFICAS ..................................................................................... 195
Referncias e Lista de Notas ........................................................................................................... 195
APNDICE A ................................................................................................................................................... 235
Conteno Primria: Cabines de Segurana Biolgica ....................................... 235
APNDICE B ................................................................................................................................................... 247
Imunoprolaxia ............................................................................................................................................ 247
APNDICE C ................................................................................................................................................... 249
Transporte e Transferncia de Agentes Biolgicos ................................................ 249
APNDICE D .................................................................................................................................................. 255
Patgenos Animais .................................................................................................................................... 255
APNDICE E ................................................................................................................................................... 257
Fontes de Informaes ......................................................................................................................... 257
APNDICE F.................................................................................................................................................... 259
Segurana do Laboratrio e Resposta de Emergncia
para Laboratrios Biomdicos e de Microbiologia ................................................. 259
APNDICE G ................................................................................................................................................... 265
Gerenciamento Integrado de Roedores e de Insetos ........................................... 265
APNDICE H .................................................................................................................................................. 271
Trabalhos com Clulas e Tecidos Humanos e de Outros Primatas ....... 271
APNDICE I ..................................................................................................................................................... 273
Normas para o Trabalho com Toxinas de Origem Biolgica ........................ 273
NDICE REMISSIVO .............................................................................................................................. 279
EQUIPE TCNICA E EDITORIAI .......................................................................................... 287
7
REIAO DE TABEIAS
Tabela 1. Resumo dos nveis de biossegurana
recomendados para agentes infecciosos ............................................. 64
Tabela 2. Resumo dos nveis de biossegurana
recomendados para as atividades nas quais animais
vertebrados infectados naturalmente ou
experimentalmente so utilizados ...................................................... 88
Tabela 3. As doenas causadas por prons .......................................... 139
Tabela 4. Agentes causadores de infeces
adquiridas em laboratrio ................................................................... 179
Tabela 5. Cepas vacinais de vrus do NB-3/4
que podem ser manipuladas em um nvel de biossegurana 2 ................. 185
Tabela 6. Infeces associadas ao laboratrio ou
ao laboratrio animal (1) ..................................................................... 186
Tabela 7. Infeces associadas ao laboratrio ou
ao laboratrio animal (2) ..................................................................... 192
Tabela 8. Comparao entre as cabines
de segurana biolgica ......................................................................... 239
Tabela 9. Patgenos animais .................................................. ............. 255
REIAO DE FIGURAS
Figura 1. Cabine de segurana biolgica classe I ................................ 241
Figura 2a. Cabine de segurana biolgica classe II, tipo A ................. 242
RELAO
DE TABELAS,
FIGURAS
E LISTAS
Figura 2b. Cabine de segurana biolgica classe II, tipo B1 ...............243
Figura 2c. Cabine de segurana biolgica classe II, tipo B2 ...............244
Figura 2d. Cabine de segurana biolgica classe II, tipo B3 ..............245
Figura 3. Cabine de segurana biolgica classe III ..............................246
Figura 4. Embalagem e rotulagem de substncias infecciosas ...........254
Figura 5. Embalagem e rotulagem de amostras clnicas ....................254
REIAO DE IISTAS
Lista 1. Precaues padro para autpsias de
pacientes com suspeita de doena por prons ....................................145
Lista 2. Procedimentos de descontaminao
da sala de autpsia ...............................................................................146
Lista 3. Procedimentos de corte do crebro ........................................147
Lista 4. Preparao do tecido ...............................................................147
Lista 5. Arbovrus e arenavrus designados
para o nvel de biossegurana 2 ...........................................................182
Lista 6. Arbovrus e alguns outros vrus
designados para o nvel de biossegurana 3
(com base em experincia insuciente) ..............................................189
Lista 7. Arbovrus e alguns outros vrus
designados para o nvel de biossegurana 3 .......................................190
Lista 8. Arbovrus, arenavrus e lovrus
designados para o nvel de biossegurana 4 .......................................193
9
APRESENTAO
O imprevisvel e diversicado comportamento das doenas in-
fecciosas emergentes e reemergentes tem acarretado a discusso
das condies de biossegurana nas instituies de ensino, pes-
quisa, desenvolvimento tecnolgico e de prestao de servios. A
despeito do avano tecnolgico, o prossional de sade est fre-
qentemente exposto a riscos biolgicos e de produtos qumicos,
cujo enfrentamento est consubstanciado na adequao das ins-
talaes do ambiente de trabalho e na capacitao tcnica desses
prossionais. O manejo e a avaliao de riscos so fundamentais
para a denio de critrios e aes e visam a minimizar os ris-
cos que podem comprometer a sade do homem, dos animais, do
meio ambiente ou a qualidade dos trabalhos desenvolvidos.
A biossegurana constitui uma rea de conhecimento relativa-
mente nova, regulada em vrios pases por um conjunto de leis,
procedimentos ou diretrizes especcas. No Brasil, a legislao de
biossegurana foi criada em 1995 e, apesar da grande incidncia
de doenas ocupacionais em prossionais de sade, engloba ape-
nas a tecnologia de engenharia gentica, estabelecendo os requisi-
tos para o manejo de organismos geneticamente modicados.
A segurana dos laboratrios e dos mtodos de trabalho trans-
cende aos aspectos ticos implcitos nas pesquisas com manipu-
lao gentica. Medidas de biossegurana especcas devem ser
adotadas por laboratrios e aliadas a um amplo plano de educao
baseado nas normas nacionais e internacionais quanto ao trans-
porte, conservao e manipulao de microorganismos pato-
gnicos.
10
APRESENTAO
Ao apresentar este livro, traduo autorizada do original em
ingls Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories 4
th

Edition CDC-INH, 1999, esperamos atender s necessidades de
conhecimento bsico de biossegurana laboratorial dos prossio-
nais participantes do Programa Nacional de Capacitao em Bios-
segurana Laboratorial, que est sendo desenvolvido pelo Cen-
tro Nacional de Epidemiologia da Fundao Nacional de Sade
(Cenepi/Funasa), e constituir um roteiro atualizado de condutas
gerais de segurana para os prossionais que atuam na Rede Na-
cional de Laboratrios de Sade Pblica.
Braslia (DF), abril de 2004.
Jarbas Barbosa da Silva Junior
Secretrio de Vigilncia em Sade do Ministrio da Sade
11
PREFCIO
Esta publicao descreve as combinaes das prticas padro
de microbiologia e as especiais dos equipamentos de segurana e
das instalaes que constituem os nveis de biossegurana de 1-4
recomendados para um trabalho que envolva uma variedade de
agentes infecciosos em vrios estabelecimentos laboratoriais.
Essas recomendaes possuem um carter consultivo. A inten-
o a de fornecer um guia voluntrio ou um cdigo de prtica,
assim como os objetivos para as operaes de um nvel mais alto.
Esses conselhos so tambm oferecidos como um guia e uma refe-
rncia na construo das instalaes de um novo laboratrio e na
reforma de instalaes j existentes.
Porm, a aplicao destas recomendaes na operao de um
laboratrio particular dever se basear na avaliao do risco dos
agentes e das atividades especiais, ao invs de ser considerada
como um cdigo universal e genrico aplicvel a todas as situa-
es.
Desde a publicao da terceira edio do livro Biossegurana
em Laboratrios Biomdicos e de Microbiologia, ocorreram in-
meros eventos que acabaram por inuenciar algumas das mudan-
as feitas nesta quarta edio.
Em resposta preocupao global referente s doenas
infecciosas emergentes e s reemergentes, a seo de
Avaliao de Riscos foi ampliada para proporcionar ao
laboratorista informaes adicionais para facilitar a im-
plantao de tais determinaes.
12
PREFCIO
Devido grande demanda de projetos e construes de
laboratrios biomdicos e microbiolgicos, particular-
mente nos nveis de biossegurana 3, foram incorpora-
dos esclarecimentos e acrscimos s sees Instalaes,
em particular s sees III e IV. O objetivo a expanso
da abordagem baseada na atuao, com o objetivo de se
obter uma conteno apropriada.
Com a identicao da encefalopatia espongiforme bovi-
na (EEB) na Inglaterra, houve um aumento signicativo
do interesse sobre doenas provocadas por prons. Por
essa razo, foi acrescentado um apndice para direcionar
as vrias preocupaes associadas ao trabalho com tais
agentes.
Como tm ocorrido vrias infeces associadas a labo-
ratrios envolvendo agentes previamente conhecidos e
desconhecidos, foram modicados ou acrescentados v-
rios resumos das caractersticas de agentes nesta edio.
Os resumos de agentes agora contm informaes sobre
os requisitos necessrios para a obteno de licenas para
o transporte de microorganismos infecciosos. O motivo
para essa modicao foi a preocupao em relao ao
crescente transporte nacional e internacional de micro-
organismos infecciosos.
E, nalmente, nestes ltimos anos, houve uma preocu-
pao crescente em relao ao bioterrorismo, o que tem
provocado um considervel interesse nas questes que
envolvem a biossegurana. Portanto, foi acrescentado
um apndice para ajudar na concentrao das atenes
sobre as necessidades de se aumentar a segurana nos
laboratrios de microbiologia.
Gostaramos tambm de agradecer as contribuies de mui-
tos prossionais da comunidade cientca que proporcionaram
idias para o aperfeioamento desta edio. Em particular, temos
um grande dbito com o Comit Tcnico de Reviso (Technical Re-
view Committee) da Associao Americana de Segurana Biolgica
(American Biological Safety Association), por seus amveis comen-
trios e suas valiosas sugestes.
13
Laboratrios de microbiologia so, com freqncia, ambientes
singulares de trabalho que podem expor as pessoas prximas a
eles, ou que neles trabalham, a riscos de doenas infecciosas iden-
ticveis. As infeces contradas em um laboratrio tm sido
descritas por meio da histria da microbiologia. Os relatrios de
microbiologia publicados na virada do sculo descreveram casos
de tifo, clera, mormo, brucelose e ttano associados a laborat-
rios.
1
Em 1941, Meyer e Eddie
2
publicaram uma pesquisa de 74
casos de brucelose associados a laboratrio ocorridos nos Estados
Unidos e concluram que a manipulao de culturas ou espcies
e a inalao da poeira contendo a bactria Brucella so eminente-
mente perigosas para os trabalhadores de um laboratrio. In-
meros casos foram atribudos falta de cuidados ou a uma tcnica
de manuseio ruim de materiais infecciosos.
Em 1949, Sulkin e Pike
3
publicaram a primeira de uma srie de
pesquisas sobre infeces associadas a laboratrios. Eles consta-
taram 222 infeces virais, sendo 21 delas fatais. Em pelo menos
um tero dos casos, a provvel fonte de infeco estava associada
ao manuseio de animais e tecidos infectados. Acidentes conheci-
dos foram registrados em 27 (12%) dos casos relatados.
Em 1951, Sulkin e Pike
4
publicaram a segunda de uma srie
de pesquisas baseada em um questionrio enviado a 5.000 labo-
ratrios. Somente um tero dos 1.342 casos citados foi relatado
na literatura. A brucelose era a infeco mais freqentemente en-
contrada nos relatrios em relao s infeces contradas em um
SEO I
INTRODUO
14
SEO I
INTRODUO
laboratrio e, juntamente com a tuberculose, a tularemia, o tifo e
a infeco estreptoccica, contribua para 72% de todas as infec-
es bacterianas e 31% das infeces causadas por outros agentes.
O ndice total de mortalidade era de 3%. Somente 16% de todas as
infeces relatadas estavam associados a um acidente documen-
tado. A maioria desses estava relacionada ao uso de pipetas, se-
ringas e agulhas.
Essa pesquisa foi atualizada em 1965,
5
quando houve um
acrscimo de 641 novos casos ou de casos que no haviam sido
relatados anteriormente. Em 1976,
6
houve uma nova atualizao,
perfazendo um total acumulativo de 3.921 casos. A brucelose, o
tifo, a tularemia, a tuberculose, a hepatite e a encefalite eqina
venezuelana eram as infeces mais comumente relatadas. Me-
nos de 20% de todos os casos estavam associados a um acidente
conhecido. A exposio aos aerossis infecciosos era considerada
uma fonte plausvel, mas no conrmada, de infeco para mais
de 80% dos casos em que as pessoas infectadas haviam trabalhado
com o agente.
Em 1967,
7
Hanson e colaboradores relataram 428 casos paten-
tes de infeces de arbovrus associados a laboratrio. Em alguns
casos, a capacidade de um dado arbovrus de produzir uma do-
ena humana foi primeiramente conrmada como o resultado de
uma infeco no-intencional da equipe laboratorial. No caso, os
aerossis infecciosos eram considerados a fonte mais comum de
infeco.
Em 1974, Skinholj
8
publicou os resultados de uma pesquisa se-
gundo a qual os funcionrios dos laboratrios clnicos dinamar-
queses apresentavam uma relatada incidncia de hepatite (2,3
casos ao ano por 1.000 funcionrios) sete vezes maior que a po-
pulao em geral. De maneira semelhante, uma pesquisa de 1976,
realizada por Harrington e Shannon,
9
indicou que os trabalhado-
res de laboratrios mdicos na Inglaterra apresentavam um risco
cinco vezes maior de adquirir uma tuberculose do que a populao
em geral. A hepatite B e a shigelose tambm eram conhecidas por
serem um contnuo risco ocupacional. Junto com a tuberculose,
essas eram as trs causas mais comuns de infeces associadas a
laboratrio relatadas na Gr-Bretanha.
15
SEO I
INTRODUO
Embora esses relatrios sugerissem que os funcionrios de la-
boratrios corriam um elevado risco de se contaminar pelos agen-
tes que eles prprios manipulavam, os ndices atuais de infeco
no se encontram disponveis. Porm, os estudos de Harrington
e Shannon e os de Skinholj
10
indicam que as equipes laboratoriais
apresentavam maiores ndices de tuberculose, shigelose e de he-
patite B do que a maioria da populao em geral.
Ao contrrio das ocorrncias documentadas de infeces con-
tradas por funcionrios de laboratrios, esses laboratrios que
trabalham com agentes infecciosos no representam uma amea-
a sociedade. Por exemplo, embora 109 casos de infeces as-
sociadas a laboratrios tenham sido registrados nos Centros de
Preveno e Controle de Doenas, de 1947 a 1973,
11
nenhum caso
secundrio foi relatado nos membros da famlia ou em contatos
comunitrios. O Centro Nacional de Doena Animal relatou uma
experincia
12
semelhante, sem nenhum caso secundrio ocorrido
nos contatos laboratoriais e no-laboratoriais em relao aos 18
casos de infeces associadas a laboratrio no perodo de 1960
a 1975. Por meio de um caso secundrio da doena de Marburg,
contrado pela esposa de um paciente de caso primrio, concluiu-
se que a infeco havia sido sexualmente transmitida dois meses
aps o marido ter recebido alta do hospital.
13
Trs casos secun-
drios de varola foram relatados em dois surtos associados a la-
boratrio, na Inglaterra, em 1973
14
e 1978.
15
Relatos anteriores
de seis casos de febre Q entre os funcionrios de uma lavanderia
comercial que lavava os uniformes e as roupas de um laboratrio
que manipulava o agente,
16
um caso de uma pessoa que visitava o
laboratrio
17
e dois casos de febre Q em contatos domiciliares de
um rickettsiologista
18
tambm foram constatados. Existe o rela-
to de um caso de transmisso do vrus B de um macaco para um
tratador de animais infectados e deste para sua esposa, aparente-
mente provocado pelo contato do vrus com a pele lesionada do
indivduo.
19
Esses casos so representativos da natureza espor-
dica e da pouca freqncia das infeces na comunidade de traba-
lhadores de laboratrio que lidam com agentes infecciosos.
Na reviso de 1979,
20
Pike chegou concluso de que o co-
nhecimento, as tcnicas e o equipamento para a preveno das
infeces laboratoriais j estavam disponveis. Nos Estados Uni-
16
SEO I
INTRODUO
dos, porm, nenhum cdigo de prtica, padres, diretrizes ou ou-
tras publicaes proporcionaram descries detalhadas das tcni-
cas, do equipamento e de outras consideraes ou recomendaes
para maior esfera de ao das atividades laboratoriais conduzidas
com uma variedade de agentes infecciosos exticos e nativos. O
folheto Classicao dos Agentes Etiolgicos Baseando-se no Grau de
Risco
21
serviu como uma referncia geral para vrias atividades la-
boratoriais que utilizam agentes infecciosos. Nesse folheto, o con-
ceito sobre a classicao dos agentes infecciosos e das atividades
laboratoriais em quatro nveis ou classes serviu como um formato
bsico para as edies anteriores do Biossegurana em Laboratrios
Biomdicos e de Microbiologia (BLBM). Esta quarta edio do BLBM
continua a descrever especicamente as combinaes de prticas
microbiolgicas, instalaes laboratoriais, equipamento de segu-
rana e recomendaes sobre suas utilizaes nas quatro catego-
rias ou nos quatro nveis de biossegurana de operao laborato-
rial com agentes infecciosos que afetam homens.
As descries dos nveis de biossegurana de 1-4 paralelas
quelas contidas nas Diretrizes do NIH para Pesquisa Envolvendo
o DNA Recombinante
22, 23
esto de acordo com os critrios gerais
originalmente usados para a designao dos agentes infecciosos
para as classes de 1-4 na Classicao dos Agentes Etiolgicos Ba-
seando-se no Grau de Risco.
24
Quatro nveis de biossegurana tam-
bm so determinados para as atividades de doenas infecciosas
utilizando pequenos animais de laboratrio. As recomendaes
para os nveis de biossegurana para agentes especcos so feitas
com base no risco potencial do agente, da funo ou da atividade
do laboratrio.
Desde o incio dos anos 80, os laboratrios aplicam esses fun-
damentos em atividades associadas com manipulaes envolven-
do o vrus da imunodecincia humana (HIV). Mesmo antes de o
HIV ter sido identicado como o agente causador da sndrome da
imunodecincia adquirida (AIDS), os princpios que regulam a
manipulao de um patgeno presente no sangue j eram consi-
derados adequados para um trabalho laboratorial seguro. Normas
tambm foram publicadas para os trabalhadores da rea de sa-
de sob o ttulo de Precaues Universais.
25
De fato, as Precaues
Universais e esta publicao tornaram-se a base do manuseio se-
17
SEO I
INTRODUO
guro de sangue e de uidos corporais, como descrito na recente
publicao da OSHA, intitulada Padro de Patgenos Sangneos.
26
No nal dos anos 80, havia uma grande preocupao com o
lixo mdico-hospitalar, o que levou publicao do Ato de Rastre-
amento de Lixo Hospitalar, de 1988.
27
Os princpios estabelecidos
nos volumes anteriores do BLBM, para o manuseio de dejetos po-
tencialmente infecciosos como um risco ocupacional, foi refora-
do pela Pesquisa do Conselho Nacional intitulada Biossegurana
em Laboratrios: Prticas Prudentes para o Manuseio e Remoo de
Materiais Infecciosos.
28
No momento em que esta publicao estava sendo editada,
houve uma preocupao crescente em relao ao reaparecimen-
to do M. tuberculosis, segurana dos trabalhadores de laborat-
rios e aos equipamentos da rea de sade. Os princpios descritos
no BLBM que tentam assegurar as prticas, os procedimentos e
as instalaes de segurana na sade so aplicveis ao controle
deste patgeno areo, incluindo suas cepas resistentes a inmeras
drogas (multidrogas) resistentes.
29, 30
As tecnologias com DNA re-
combinante esto sendo aplicadas rotineiramente em laboratrios
para modicar a composio gentica de vrios microorganismos.
Uma avaliao completa de riscos deve ser conduzida quando nos
referimos a essas atividades e a seus resultados desconhecidos.
A experincia tem demonstrado a importncia das precaues
tomadas com as prticas, os procedimentos e as instalaes dos
nveis de biossegurana de 1-4 descritas para as manipulaes de
agentes etiolgicos em montagem de laboratrios e dependn-
cias para animais. Embora no exista nenhum tipo de relatrio
nacional que descreva as infeces associadas a laboratrio, casos
curiosos sugerem que uma rgida adeso a essas normas contribui
para um meio de trabalho mais seguro e saudvel para a equipe
do laboratrio, seus colaboradores e a comunidade ao redor. Para
reduzir ainda mais o potencial de risco de infeces associadas a
laboratrios, as normas apresentadas aqui devem ser considera-
das como uma orientao mnima para conteno das mesmas. As
normas devem ser adaptadas para cada laboratrio em particular
e podem ser utilizadas juntamente com outras informaes cien-
tcas disponveis.
19
SEO II
PRINCPIOS DE
BIOSSEGURANA
O termo conteno usado para descrever os mtodos de segu-
rana utilizados na manipulao de materiais infecciosos em um
meio laboratorial onde esto sendo manejados ou mantidos. O
objetivo da conteno reduzir ou eliminar a exposio da equipe
de um laboratrio, de outras pessoas e do meio ambiente em geral
aos agentes potencialmente perigosos.
A conteno primria, a proteo da equipe do laboratrio e
do meio de trabalho contra a exposio aos agentes infecciosos,
proporcionada por uma boa tcnica de microbiologia e pelo uso
de um equipamento de segurana adequado. O uso de vacinas
pode fornecer um elevado nvel de proteo pessoal. J a conten-
o secundria, a proteo do meio ambiente externo ao laborat-
rio contra a exposio aos materiais infecciosos, proporcionada
pela combinao de um projeto das instalaes e das prticas ope-
racionais. Dessa forma, os trs elementos de conteno incluem
a prtica e a tcnica laboratorial, o equipamento de segurana e
o projeto da instalao. A avaliao do risco do trabalho a ser rea-
lizado com um agente especco determinar a combinao ade-
quada desses trs elementos.
Punitcn e TecNtcn Inuounioutnt: O elemento de conten-
o mais importante a adeso rgida s prticas e s tcnicas pa-
dro de microbiologia. As pessoas que trabalham com agentes in-
fecciosos ou com materiais potencialmente contaminados devem
se conscientizar dos riscos potenciais, devem ser treinadas e es-
tar aptas a exercer as tcnicas e prticas necessrias para o manu-
seio seguro dos materiais. Cabe ao diretor ou pessoa responsvel
20
SEO II
PRINCPIOS DE BIOSSEGURANA
pelo laboratrio a funo de fornecer ou elaborar um treinamento
adequado para os funcionrios.
Cada laboratrio dever desenvolver ou adotar um manual de
biossegurana ou de operaes que identique os riscos que po-
dem ser encontrados e que especique tambm as prticas e os
procedimentos especcos para minimizar ou eliminar as exposi-
es aos perigos. Os funcionrios devem receber informaes so-
bre os riscos especiais, devem ler e seguir todas as prticas e os
procedimentos solicitados. Um cientista treinado e com grande
conhecimento das tcnicas laboratoriais apropriadas, dos proce-
dimentos de segurana e dos perigos associados ao manuseio de
agentes infecciosos deve ser o responsvel pela conduo do tra-
balho envolvendo quaisquer agentes ou materiais infecciosos.
Quando as prticas laboratoriais padro no forem sucientes
para controlar os perigos associados a um agente ou a um procedi-
mento laboratorial em particular, medidas adicionais podero ser
necessrias. O diretor do laboratrio ser o responsvel pela sele-
o das prticas adicionais de segurana, que devem estar relacio-
nadas aos riscos associados aos agentes ou aos procedimentos.
A equipe, as prticas de segurana e as tcnicas laboratoriais
devero ser complementadas com um projeto apropriado das ins-
talaes e das caractersticas da arquitetura, do equipamento de
segurana e das prticas de gerenciamento.
EqutvnmeNio oe SeouunNn (Bnuuetuns Putmnutns): O
equipamento de segurana inclui as cabines de segurana biol-
gica (CSB), os recipientes adequados e outros controles da enge-
nharia de segurana projetados para remover ou minimizar expo-
sies aos materiais biolgicos perigosos. A CSB o dispositivo
principal utilizado para proporcionar a conteno de borrifos ou
aerossis infecciosos provocados por inmeros procedimentos mi-
crobiolgicos. Trs tipos de cabines de segurana biolgica (classes
I, II e III) usados em laboratrios de microbiologia esto descritos
e ilustrados no apndice A. As cabines de segurana biolgica clas-
ses I e II, que possuem a frente aberta, so barreiras primrias que
oferecem nveis signicativos de proteo para a equipe do labora-
trio e para o meio ambiente quando utilizados com boas tcnicas
microbiolgicas. A cabine de segurana biolgica classe II tambm
21
SEO II
fornece uma proteo contra a contaminao externa de materiais
(por exemplo, cultura de clulas, estoque microbiolgico) que se-
ro manipulados dentro das cabines. A cabine de segurana bio-
lgica classe III hermtica e impermevel aos gases proporciona o
mais alto nvel de proteo aos funcionrios e ao meio ambiente.
Um outro exemplo de barreira primria o copo de seguran-
a da centrfuga, um recipiente conectado centrfuga projetado
para evitar que aerossis sejam liberados durante uma centrifuga-
o. Para minimizarmos esse perigo, controles de conteno como
as cabines de segurana biolgica ou os copos da centrfuga deve-
ro ser utilizados na manipulao de agentes infecciosos que pos-
sam ser transmitidos com a exposio aos aerossis.
O equipamento de segurana tambm pode incluir itens para a
proteo pessoal, como luvas, aventais, gorros, proteo para sa-
patos, botas, respiradores, escudo ou protetor facial, mscaras fa-
ciais ou culos de proteo. O equipamento de proteo pessoal
freqentemente usado em combinao com as cabines de segu-
rana biolgica e outros dispositivos que faam a conteno dos
agentes, dos animais ou dos materiais que esto sendo manipula-
dos. Em alguns casos nos quais torna-se impossvel trabalhar em
cabines de segurana biolgica, o equipamento de segurana pes-
soal deve formar a barreira primria entre os trabalhadores e os
materiais infecciosos. Os exemplos incluem certos estudos e ne-
cropsias de animais, atividades de produo do agente em grande
escala e atividades relacionadas manuteno, aos servios ou ao
suporte de instalao do laboratrio.
PuoJeio e CoNsiuuno ons INsintnes (Bnuuetuns Se-
cuNonutns): O planejamento e a construo das instalaes con-
tribuem para a proteo da equipe do laboratrio, proporcionando
uma barreira de proteo para as pessoas que se encontram fora
do laboratrio e para as pessoas ou os animais da comunidade
contra agentes infecciosos que podem ser liberados acidentalmen-
te pelo laboratrio. A gerncia do laboratrio deve zelar para que
as instalaes estejam de acordo com o funcionamento do mesmo
e com o nvel de biossegurana recomendado para os agentes que
forem ali manipulados.
22
SEO II
As barreiras secundrias recomendadas dependero do risco
de transmisso dos agentes especcos. Por exemplo, o risco das
exposies para grande parte dos trabalhos laboratoriais em de-
pendncias de nveis de biossegurana 1 e 2 ser o contato dire-
to com os agentes ou as exposies inadvertidas por intermdio
de um meio de trabalho contaminado. As barreiras secundrias
nos laboratrios podem incluir o isolamento da rea de trabalho
para o acesso pblico, a disponibilidade de uma dependncia para
descontaminao (por exemplo, uma autoclave) e as dependncias
para lavagem das mos.
Quando o risco de contaminao por meio de exposio aos
aerossis infecciosos estiver presente, nveis mais elevados de
conteno primria e barreiras de proteo secundrias podero
ser necessrios para evitar que agentes infecciosos escapem para
o meio ambiente. Essas caractersticas do projeto incluem siste-
mas de ventilao especializados em assegurar o uxo de ar uni-
direcionado, sistemas de tratamento de ar para descontaminao
ou remoo do ar liberado, zonas de acesso controlado, cmaras
pressurizadas, entradas de laboratrio separadas ou mdulos para
isolamento do laboratrio. Os engenheiros responsveis pelo pro-
jeto devem levar em considerao as recomendaes especcas
para ventilao, como as encontradas no Manual de Aplicaes para
Calefao, Ventilao e Refrigerao (Applications Handbook for He-
ating, Ventilation and Air-Conditioning HVAC), publicado pela So-
ciedade Americana de Engenheiros de Calefao, Refrigerao e
Condicionamento de Ar (American Society of Heating, Refrigera-
ting and Air-Conditioning Engineers ASHRAE).
1
Nvets oe BtosseouunNn: Os quatro nveis de biosseguran-
a (NB) esto descritos na seo III e consistem em combinaes
de prticas e tcnicas de laboratrio, equipamentos de segurana
e instalaes do laboratrio. Cada combinao especicamente
adequada para operaes realizadas, vias de transmisses docu-
mentadas ou suspeitas de agentes infecciosos e funcionamento ou
atividade do laboratrio.
Os nveis de biossegurana recomendados para os organismos
da seo VII (Resumo dos Agentes) representam as condies nas
quais o agente pode ser manuseado com segurana. O diretor do
23
SEO II
laboratrio o responsvel pela avaliao dos riscos e pela aplica-
o adequada dos nveis de biossegurana recomendados. Geral-
mente, o trabalho com agentes desconhecidos deve ser conduzido
em um nvel de biossegurana recomendado pela seo VII. Prti-
cas mais (ou menos) rgidas podero ser adotadas quando temos
uma informao especca disponvel que possa sugerir a viruln-
cia, a patogenicidade, os padres de resistncia aos antibiticos
e s vacinas e a disponibilidade de tratamento ou outros fatores
signicativamente alterados.
Nvet oe BtosseouunNn i: As prticas, os equipamentos
de segurana e o projeto das instalaes so apropriados para o
treinamento educacional secundrio ou para o treinamento de
tcnicos e de professores de tcnicas laboratoriais. Esse conjunto
tambm utilizado em outros laboratrios onde realizado o tra-
balho com cepas denidas e caracterizadas de microorganismos
viveis, conhecidos por no causarem doenas em homens adul-
tos e sadios. O Bacillus subtilis, o Naegleria gruberi, o vrus da he-
patite canina infecciosa e os organismos livres sob as Diretrizes
do NIH de DNA Recombinantes so exemplos de microorganis-
mos que preenchem todos os requisitos descritos. Muitos agentes
que geralmente no esto associados a processos patolgicos em
homens so, entretanto, patgenos oportunos que podem causar
uma infeco em jovens, idosos e indivduos imunosupressivos ou
imunodeprimidos. As cepas de vacina que tenham mltiplas pas-
sagens in vivo no devero ser consideradas no-virulentas sim-
plesmente por serem cepas de vacinas.
O nvel de biossegurana 1 representa um nvel bsico de con-
teno que se baseia nas prticas padro de microbiologia sem
uma indicao de barreiras primrias ou secundrias, com exce-
o de uma pia para a higienizao das mos.
Nvet oe BtosseouunNn i: As prticas, os equipamentos, a
planta e a construo das instalaes so aplicveis aos laborat-
rios clnicos, de diagnstico, laboratrios-escola e outros laborat-
rios onde o trabalho realizado com um maior espectro de agen-
tes nativos de risco moderado, presentes na comunidade e que
estejam associados a uma patologia humana de gravidade vari-
vel. Com boas tcnicas de microbiologia, esses agentes podem ser
24
SEO II
usados de maneira segura em atividades conduzidas sobre uma
bancada aberta, uma vez que o potencial para a produo de bor-
rifos e aerossis baixo. O vrus da hepatite B, o HIV, a salmonela
e o Toxoplasma spp. so exemplos de microorganismos designados
para esse nvel de conteno. O nvel de biossegurana 2 ade-
quado para qualquer trabalho que envolva sangue humano, lqui-
dos corporais, tecidos ou linhas de clulas humanas primrias em
que a presena de um agente infeccioso pode ser desconhecida.
Os laboratoristas que trabalham com materiais humanos devem
consultar o livro Padro de Patgenos Transmitidos pelo Sangue, da
OSHA (OSHA Bloodborne Pathogen Standard),
2
para as precaues
especcas necessrias.
Os perigos primrios em relao aos funcionrios que traba-
lham com esses agentes esto relacionados com acidentes percu-
tneos das exposies da membrana mucosa ou com a ingesto
de materiais infecciosos. Deve-se tomar um extremo cuidado com
agulhas contaminadas ou com instrumentos cortantes. Embora os
organismos rotineiramente manipulados em um nvel de biosse-
gurana 2 no sejam transmitidos por aerossis, os procedimen-
tos envolvendo um alto potencial para a produo de salpicos ou
aerossis que possam aumentar o risco de exposio desses fun-
cionrios devem ser conduzidos com um equipamento de conten-
o primria ou com dispositivos como a CSB ou os copos de segu-
rana da centrfuga. Outras barreiras primrias, como os escudos
para borrifos, as protees faciais, os aventais e as luvas, devem
ser utilizadas de maneira adequada.
As barreiras secundrias, como pias para higienizao das mos
e instalaes para descontaminao de lixo, devem existir com o
objetivo de reduzir a contaminao potencial do meio ambiente.
Nvet oe BtosseouunNn : As prticas, os equipamentos de
segurana, o planejamento e a construo das dependncias so
aplicveis para laboratrios clnicos, de diagnsticos, laboratrios-
escola, de pesquisa ou de produes. Nesses locais, realiza-se o tra-
balho com agentes nativos ou exticos que possuam um potencial
de transmisso via respiratria e que podem causar infeces s-
rias e potencialmente fatais. O Mycobacterium tuberculosis, o vrus
da encefalite de St. Louis e a Coxiella burnetii so exemplos de mi-
25
SEO II
croorganismos determinados para esse nvel. Os riscos primrios
causados aos trabalhadores que lidam com esses agentes incluem a
auto-inoculao, a ingesto e a exposio aos aerossis infecciosos.
No nvel de biossegurana 3, enfatizamos mais as barreiras pri-
mrias e secundrias para protegermos os funcionrios de reas
contguas, a comunidade e o meio ambiente contra a exposio
aos aerossis potencialmente infecciosos. Por exemplo, todas as
manipulaes laboratoriais devero ser realizadas em uma cabi-
ne de segurana biolgica (CSB) ou em um outro equipamento de
conteno, como uma cmara hermtica de gerao de aerossis.
As barreiras secundrias para esse nvel incluem o acesso contro-
lado ao laboratrio e sistemas de ventilao que minimizem a li-
berao de aerossis infecciosos do laboratrio.
Nvet oe BtosseouunNn q: As prticas, os equipamentos de
segurana, o planejamento e a construo das dependncias so
aplicveis para trabalhos que envolvam agentes exticos perigosos,
que representam um alto risco por provocarem doenas fatais em
indivduos. Esses agentes podem ser transmitidos via aerossis e,
at o momento, no h nenhuma vacina ou terapia disponvel. Os
agentes que possuem uma relao antignica prxima ou idntica
aos dos agentes do nvel de biossegurana 4 tambm devero ser
manuseados nesse nvel. Quando possumos dados sucientes, o
trabalho com os agentes deve continuar neste nvel ou em um n-
vel inferior. Os vrus, como os de Marburg ou da febre hemorrgi-
ca Crimia-Congo, so manipulados no nvel de biossegurana 4.
Os riscos primrios aos trabalhadores que manuseiam agentes
do nvel de biossegurana 4 incluem a exposio respiratria aos
aerossis infecciosos, a exposio da membrana mucosa e/ou da
pele lesionada s gotculas infecciosas e a auto-inoculao. Todas
as manipulaes de materiais de diagnstico potencialmente in-
fecciosos, substncias isoladas e animais naturalmente ou experi-
mentalmente infectados apresentam um alto risco de exposio e
infeco aos funcionrios de laboratrio, comunidade e ao meio
ambiente.
O completo isolamento dos trabalhadores de laboratrio em
relao aos materiais infecciosos aerossolizados realizado pri-
mariamente em cabines de segurana biolgica classe III ou com
26
SEO II
um macaco individual suprido com presso de ar positivo. A ins-
talao do nvel de biossegurana 4 geralmente construda em
um prdio separado ou em uma zona completamente isolada com
uma complexa e especializada ventilao e sistemas de gerencia-
mento de lixo que evitem uma liberao de agentes viveis no
meio ambiente.
O diretor do laboratrio primariamente e especicamente
responsvel pela operao segura do laboratrio. O conhecimento
e o julgamento dele so crticos para a avaliao dos riscos e para
a aplicao adequada destas recomendaes. O nvel de biossegu-
rana recomendado representa as condies sob as quais o agente
pode ser manipulado com segurana. As caractersticas especiais
dos agentes utilizados, o treinamento, a experincia dos emprega-
dos e a natureza da funo do laboratrio podero posteriormen-
te inuenciar o diretor quanto aplicao destas recomendaes.
DeveNoNctns vnun ANtmnts: Os quatro nveis de biossegu-
rana tambm so descritos para as atividades que envolvem o
trabalho de doenas infecciosas com animais experimentais. Essas
quatro combinaes de prticas, equipamentos de segurana e de
instalaes so denominadas de nveis de biossegurana animal 1,
2, 3 e 4 e proporcionam nveis crescentes de proteo aos funcio-
nrios e ao meio ambiente.
Inuouniutos CtNtcos: Os laboratrios clnicos, especial-
mente aqueles situados em clnicas e hospitais, recebem amostras
clnicas requisitando uma grande variedade de diagnsticos e ser-
vios de apoio clnico. Geralmente, a natureza infecciosa do ma-
terial clnico desconhecida e as amostras so freqentemente
submetidas a uma ampla solicitao de exames microbiolgicos
em relao aos mltiplos agentes (por exemplo, o escarro pode
ser submetido a uma cultura de rotina, cido resistente e cultura
fngica. responsabilidade do diretor do laboratrio estabelecer
procedimentos padro no laboratrio que, de fato, direcionem a
questo do perigo da infeco imposto pelas amostras clnicas.
Com exceo de circunstncias extraordinrias (por exemplo,
suspeita de uma febre hemorrgica), o processamento inicial de
uma amostra clnica e a identicao sorolgica de substncias
27
SEO II
isoladas podero ser realizados de forma segura em um nvel de
biossegurana 2, o nvel recomendado para o trabalho com pat-
geno do sangue, como o vrus da hepatite B e o HIV. Os elementos
de conteno descritos no nvel de biossegurana 2 devero estar
de acordo com o padro da OSHA, Exposio Ocupacional aos Pa-
tgenos Transmitidos atravs do Sangue,
3, 4
publicado pela Admi-
nistrao de Sade e Segurana Ocupacional. Isso requer o uso de
precaues especcas para todas as amostras clnicas de sangue
ou outros materiais potencialmente infecciosos (Precaues ou
Padres Universais).
5
Alm disso, outras recomendaes espec-
cas para laboratrios clnicos podem ser obtidas com o Comit
Nacional de Padres para Laboratrios Clnicos (National Com-
mittee for Clinical Laboratory Standard).
6

As recomendaes para o nvel de biossegurana 2 e os reque-
rimentos da OSHA enfocam a preveno exposio por contato
da pele e das mucosas com materiais clnicos. Barreiras primrias,
como as cabines de segurana biolgica (classes I e II), devem ser
usadas em procedimentos que causam gotejamento, pulverizao
e salpicos de gotas. As cabines de segurana biolgica tambm de-
vem ser usadas no incio da manipulao de espcimes clnicos,
cuja natureza do teste o requerer, ou em presena de um agen-
te que reconhecidamente transmita infeces por aerossis (por
exemplo, M. tuberculosis) ou quando o uso de uma cabine de segu-
rana biolgica (classe II) for indicado para proteger a integridade
do espcime.
A segregao das funes de um laboratrio clnico e o aces-
so limitado ou restrito a essas reas so de responsabilidade do
diretor da instituio. responsabilidade tambm do diretor es-
tabelecer um padro e procedimentos por escrito que direcionem
os riscos potenciais e os cuidados ou as precaues necessrias a
serem implantadas.
Imvouinno e Exveotno INieuesinount oe Ceuios Mn-
ieutnts Btomeotcos: A importao de vetores e agentes etiolgi-
cos de patologias humanas est sujeita aos regulamentos da Public
Health Service Foreign Quarentine. Os regulamentos do Servio de
Sade Pblica e do Departamento de Transportes especicam os
requisitos necessrios para a embalagem, a rotulagem e o embar-
28
SEO II
que de agentes etiolgicos e amostras para diagnsticos expedi-
dos para o comrcio interestadual (veja o apndice C).
O Departamento de Agricultura dos EUA regulamenta a im-
portao e a expedio interestadual de patgenos animais e pro-
be a importao, a posse ou o uso de certos agentes patolgicos de
animais exticos que possam ser uma ameaa para aves e criaes
em geral por provocarem srias doenas (veja o apndice D).
29
Os principais requisitos exigidos para os quatro nveis de bios-
segurana em atividades que envolvam microorganismos infeccio-
sos e animais de laboratrio esto resumidos na tabela 1 desta se-
o e na tabela 2 da seo IV. Os nveis so designados em ordem
crescente, pelo grau de proteo proporcionado ao pessoal do la-
boratrio, ao meio ambiente e comunidade.
Nvel de Biossegurana (NB-1)
O nvel de biossegurana 1 adequado ao trabalho que envol-
va agentes bem caracterizados e conhecidos por no provocarem
doena em seres humanos e que possuam mnimo risco ao pessoal
do laboratrio e ao meio ambiente. O laboratrio no est separa-
do das demais dependncias do edifcio. O trabalho conduzido,
em geral, em bancada, com adoo das boas prticas laboratoriais
(BPL). Equipamentos especcos de proteo ou caractersticas es-
peciais de construo no so geralmente usados ou exigidos. O
pessoal do laboratrio dever ter treinamento especco nos pro-
cedimentos realizados no laboratrio e dever ser supervisionado
por um cientista com treinamento em microbiologia geral ou ci-
ncia correlata.
Os seguintes padres e prticas especiais, os equipamentos de
segurana e as instalaes devero ser aplicados aos agentes de-
signados ao nvel de biossegurana 1:
A. Prticas Padro em Microbiologia
1. O acesso ao laboratrio dever ser limitado ou restrito de
acordo com a denio do diretor do laboratrio quando
estiverem sendo realizados experimentos ou trabalhos
com culturas e amostras.
SEO III
NVEIS DE BIOSSEGURANA
LABORATORIAL
30
SEO III
NVEIS DE BIOSSEGURANA LABORATORIAL
2. As pessoas devero lavar as mos aps o manuseio de
materiais viveis, aps a remoo das luvas e antes de
sarem do laboratrio.
3. No permitido comer, beber, fumar, manusear lentes
de contato, aplicar cosmticos ou armazenar alimentos
para consumo nas reas de trabalho. As pessoas que
usam lentes de contato em laboratrios devero usar
tambm culos de proteo ou protetores faciais. Os ali-
mentos devero ser guardados fora das reas de trabalho
em armrios ou geladeiras especcos para tal m.
4. proibida a pipetagem com a boca; devem ser utilizados
dispositivos mecnicos.
5. Devem ser institudas normas para o manuseio de agulhas.
6. Todos os procedimentos devem ser realizados cuidadosa-
mente a m de minimizar a criao de borrifos ou aerossis.
7. As superfcies de trabalho devem ser descontaminadas,
pelo menos, uma vez ao dia e sempre depois de qualquer
derramamento de material vivel.
8. Todas as culturas, colnias e outros resduos devero
ser descontaminados antes de serem descartados com
um mtodo de descontaminao aprovado, como, por
exemplo, esterilizao por calor mido (autoclave). Os
materiais que forem ser descontaminados fora do labo-
ratrio devero ser colocados em recipientes inquebr-
veis, prova de vazamentos e hermeticamente fechados
para serem transportados ao local desejado. Os materiais
que forem enviados para descontaminaco fora da insti-
tuio devero tambm ser embalados de acordo com os
regulamentos locais, estaduais e federais, antes de serem
removidos das dependncias do laboratrio.
9. O smbolo de Risco Biolgico dever ser colocado na
entrada do laboratrio em qualquer momento em que
o agente infeccioso estiver presente no local. Este sinal
de alerta dever indicar o(s) agente(s) manipulado(s) e o
nome e o nmero do telefone do pesquisador.
10. Deve ser providenciado um programa rotineiro de con-
trole de roedores e insetos (veja o apndice G).
31
SEO III
B. Prticas Especiais
Nenhuma.
C. Equipamentos de Segurana (Barreiras Primrias)
1. Os equipamentos especiais de conteno, tais como as
cabines de segurana biolgica, no so geralmente exi-
gidos para manipulaes de agentes de classe de risco 1.
2. recomendado o uso de jalecos, aventais ou uniformes
prprios, para evitar contaminao ou sujeira de suas
roupas normais.
3. Recomenda-se o uso de luvas para os casos de rachaduras ou
ferimentos na pele das mos. Algumas alternativas, como
o uso de luvas de ltex com talco, devero ser avaliadas.
4. culos protetores devero ser usados na execuo de
procedimentos que produzam borrifos de microorganis-
mos ou de materiais perigosos.
D. Instalaes Laboratoriais (Barreiras Secundrias)
1. Os laboratrios devero possuir portas para o controle
do acesso.
2. Cada laboratrio dever conter uma pia para lavagem
das mos.
3. O laboratrio deve ser projetado de modo a permitir fcil
limpeza. Carpetes e tapetes no so apropriados para la-
boratrios.
4. recomendvel que a superfcie das bancadas seja im-
permevel gua e resistente ao calor moderado e aos
solventes orgnicos, cidos, lcalis e qumicos usados
para a descontaminao da superfcie de trabalho e do
equipamento.
5. Os mveis do laboratrio devero ser capazes de supor-
tar cargas e usos previstos. Os espaos entre bancadas,
cabines e equipamentos devero ser sucientes de modo
a permitir fcil acesso para limpeza.
6. Se o laboratrio possuir janelas que se abram para o exte-
rior, estas devero conter telas de proteo contra insetos.
32
SEO III
Nveis de Biossegurana 2 (NB-2)
O nvel de biossegurana 2 semelhante ao nvel de biosse-
gurana 1 e adequado ao trabalho que envolva agentes de risco
moderado para as pessoas e o meio ambiente. Difere do NB-1 nos
seguintes aspectos: o pessoal de laboratrio dever ter um treina-
mento especco no manejo de agentes patognicos e devem ser
supervisionados por cientistas competentes; o acesso ao laborat-
rio deve ser limitado durante os procedimentos operacionais; pre-
caues extremas sero tomadas em relao a objetos cortantes
infectados; e determinados procedimentos nos quais exista a pos-
sibilidade de formao de aerossis e borrifos infecciosos devem
ser conduzidos em cabines de segurana biolgica ou em outros
equipamentos de conteno fsica.
Os seguintes padres e as prticas especiais, os equipamentos
de segurana e as instalaes so aplicveis aos agentes designa-
dos para o nvel de biossegurana 2:
A. Prticas Padro de Microbiologia
estiver sendo realizado o experimento.
2. As pessoas devem lavar as mos aps a manipulao de
materiais viveis, aps a remoo das luvas e antes de
sarem do laboratrio.
3. proibido comer, beber, fumar, manusear lentes de con-
tato e aplicar cosmticos nas reas de trabalho. Os ali-
mentos devero ser guardados fora das reas de trabalho
em armrios ou geladeiras especcas para tal m.
4. proibida a pipetagem com a boca; devem ser utilizados
mente a m de minimizar a criao de borrifos ou aerossis.
7. As superfcies de trabalho devem ser descontaminadas
com desinfetantes que sejam ecazes contra os agentes
manipulados, ao nal do trabalho ou no nal do dia e
aps qualquer vazamento ou borrifada de material vivel.
33
SEO III
8. Todas as culturas, colnias e outros resduos devero ser
descontaminados antes de serem descartados com um
mtodo de descontaminao aprovado, como, por exem-
plo, esterilizao por calor mido (autoclave). Os mate-
riais descontaminados fora do prprio laboratrio deve-
ro ser colocados em recipientes inquebrveis, prova
de vazamentos e hermeticamente fechados para serem
transportados ao local desejado.
trole contra roedores e insetos (veja o apndice G).
acordo com a denio do diretor, quando o trabalho com
agentes infecciosos estiver sendo realizado. Em geral,
pessoas susceptveis s infeces ou pessoas que quando
infectadas possam apresentar srias complicaes no
sero permitidas no laboratrio ou nas salas dos animais.
Por exemplo, pessoas que estejam imunocomprometidas
ou imunodeprimidas podero estar correndo um srio
risco de se contaminarem. Cabe ao diretor a deciso nal
quanto avaliao de cada circunstncia e a determina-
o de quem deve entrar ou trabalhar no laboratrio ou
na sala de animais.
2. O diretor do laboratrio dever estabelecer normas e
procedimentos com ampla informao a todos que traba-
lharem no laboratrio sobre o potencial de risco associa-
do ao trabalho, bem como sobre os requisitos especcos
(por exemplo, imunizao) para entrada em laboratrio.
3. O smbolo de Risco Biolgico dever ser colocado na
entrada do laboratrio onde agentes etiolgicos es-
tiverem sendo utilizados. Este sinal de alerta dever
conter informaes como o(s) nome(s) do(s) agente(s)
manipulado(s), o nvel de biossegurana, as imunizaes
necessrias, o nome e o nmero do telefone do pesqui-
sador, o tipo de equipamento de proteo individual que
dever ser usado no laboratrio e os procedimentos ne-
cessrios para sair do laboratrio.
34
SEO III
4. O pessoal do laboratrio deve estar apropriadamente
imunizado ou examinado quanto aos agentes manipu-
lados ou potencialmente presentes no laboratrio (por
exemplo, vacina contra a hepatite B ou teste cutneo
para a tuberculose).
5. Quando apropriado, dependendo do(s) agente(s)
manipulado(s), para referncia futura, devem ser man-
tidas amostras sorolgicas da equipe do laboratrio e de
outras pessoas possivelmente expostas aos riscos. Amos-
tras sorolgicas adicionais devem ser colhidas periodi-
camente, dependendo dos agentes manipulados ou da
funo das instalaes laboratoriais.
6. Os procedimentos de biossegurana devem ser incor-
porados aos procedimentos padro operacionais ou a
um manual de biossegurana especco do laboratrio,
adotado ou preparado pelo diretor do laboratrio. Todo
pessoal deve ser orientado sobre os riscos e devem ler e
seguir as instrues sobre as prticas e os procedimentos
requeridos.
7. O diretor do laboratrio dever assegurar que o labora-
trio e a equipe de apoio recebam um treinamento apro-
priado sobre os riscos potenciais associados ao trabalho
desenvolvido, as precaues necessrias para preveno
de exposio e os procedimentos para avaliao das ex-
posies. A equipe de funcionrios dever receber cursos
anuais de atualizao ou treinamento adicional, quando
necessrios e tambm no caso de mudanas de normas
ou procedimentos.
8. Deve-se sempre tomar uma enorme precauo em rela-
o a qualquer objeto cortante, incluindo seringas e agu-
lhas, lminas, pipetas, tubos capilares e bisturis.
a. Agulhas e seringas hipodrmicas ou outros instru-
mentos cortantes devem car restritos ao laboratrio
e ser usados somente quando no houver outra alter-
nativa para inoculao parenteral, ebotomia ou aspi-
rao de uidos de animais de laboratrio e de garrafas
com diafragma. Recipientes plsticos devem ser subs-
titudos por recipientes de vidro sempre que possvel.
35
SEO III
b. Devem ser usadas somente seringas com agulha xa
ou agulha e seringa em uma unidade nica descart-
vel usada para injeo ou aspirao de materiais in-
fecciosos. As agulhas descartveis usadas no deve-
ro ser dobradas, quebradas, reutilizadas, removidas
das seringas ou manipuladas antes de desprezadas.
Ao contrrio, elas devero ser cuidadosamente co-
locadas em recipiente resistente a perfuraes lo-
calizado convenientemente e utilizado para recolhi-
mento de objetos cortantes desprezados. Objetos
cortantes no-descartveis devem ser colocados em
um recipiente cuja parede seja bem resistente para o
transporte at a rea para descontaminao, de pre-
ferncia por meio de uma autoclave.
c. As seringas que possuam um envoltrio para a agu-
lha ou sistemas sem agulha e outros dispositivos de
segurana devero ser utilizadas quando necessrio.
d. Vidros quebrados no devem ser manipulados dire-
tamente com a mo, devem ser removidos por ou-
tros meios, tais como vassoura e p de lixo, pinas
ou frceps. Os recipientes que contm agulhas, equi-
pamentos cortantes e vidros quebrados contamina-
dos devero passar por um processo de descontami-
nao antes de serem desprezados, de acordo com os
regulamentos locais, estaduais ou federais.
9. Culturas, tecidos e amostras de uidos corpreos ou de-
jetos potencialmente infecciosos devem ser colocados
em um recipiente com uma tampa que evite o vazamento
durante a coleta, o manuseio, o processamento, o arma-
zenamento, o transporte ou o embarque.
10. O equipamento laboratorial e as superfcies de trabalho
devero ser descontaminados rotineiramente com um
desinfetante ecaz, aps a concluso do trabalho, com
materiais infecciosos e especialmente aps borrifos e
derramamentos ou depois que outras contaminaes por
materiais infecciosos tenham ocorrido. O equipamento
contaminado dever ser descontaminado de acordo com
as normas locais, estaduais ou federais, antes de ser en-
36
SEO III
viado para conserto, manuteno ou acondicionamento
para transporte, de acordo com as normas locais, estadu-
ais ou federais aplicveis, antes de ser removido do local.
11. Respingos e acidentes resultantes de uma exposio de
materiais infecciosos aos organismos devero ser ime-
diatamente noticados ao diretor do laboratrio. A ava-
liao mdica, a vigilncia e o tratamento devero ser
providenciados. Registros do acidente e das providncias
adotadas devero ser mantidos por escrito.
12. proibida a admisso de animais que no estiverem rela-
cionados ao trabalho em execuo no laboratrio.
1. Devem ser usadas cabines de segurana biolgica manti-
das de maneira adequada, de preferncia de classe II, ou
outro equipamento de proteo individual adequado ou
dispositivos de conteno fsica sempre que:
a. Sejam realizados procedimentos com elevado poten-
cial de criao de aerossis ou borrifos infecciosos,
como centrifugao, triturao, homogeneizao,
agitao vigorosa, misturas, ruptura por sonicao,
abertura de recipientes contendo materiais infeccio-
sos em que a presso interna possa ser diferente da
presso ambiental, inoculao intranasal em animais
e em cultura de tecidos infectados de animais ou de
ovos embrionados.
b. Altas concentraes ou grandes volumes de agentes
infecciosos forem utilizados. Tais materiais s pode-
ro ser centrifugados fora das cabines de segurana
se forem utilizadas centrfugas de segurana e fras-
cos lacrados. Estes s devero ser abertos no interior
de uma cabine de segurana biolgica.
2. Proteo para o rosto (mscaras de proteo, protetor
facial, culos de proteo ou outra proteo para respin-
gos) deve ser usada para prevenir respingos ou sprays
proveniente de materiais infecciosos ou de outros mate-
riais perigosos, quando for necessria a manipulao de
microrganismos fora das cabines de segurana biolgica.
37
SEO III
3. No interior do laboratrio, os freqentadores devero
utilizar roupas apropriadas, como jalecos, gorros ou uni-
formes de proteo. Antes de sair do laboratrio para as
reas externas (cantina, biblioteca, escritrio administra-
tivo), a roupa protetora deve ser retirada e deixada no la-
boratrio ou encaminhada para a lavanderia da institui-
o. A equipe do laboratrio nunca deve lev-la para casa.
4. Devem ser usadas luvas quando houver um contato dire-
to com materiais e superfcies potencialmente infeccio-
sos ou equipamentos contaminados. O mais adequado
usar dois pares de luvas. Essas luvas devem ser despre-
zadas quando estiverem contaminadas, quando o traba-
lho com materiais infecciosos for concludo ou quando a
integridade das luvas estiver comprometida. Luvas des-
cartveis no podero ser lavadas, reutilizadas ou usadas
para tocar superfcies limpas (teclado, telefones, etc.)
e no devem ser usadas fora do laboratrio. Alternativas
como luvas de ltex com talco devero estar disponveis.
As mos devero ser lavadas aps a remoo das luvas.
D. Instalaes Laboratoriais (Barreiras Secundrias)
1. exigido um sistema de portas com trancas em depen-
dncias que abrigarem agentes restritos (como o denido
em 42 CFR 72.6).
2. Considere a construo de novos laboratrios longe de
reas pblicas.
3. Cada laboratrio dever conter uma pia para a lavagem
das mos. Recomendamos a construo de pias que fun-
cionem automaticamente ou que sejam acionadas com o
p ou com o joelho.
4. O laboratrio dever ser projetado de modo a permitir
fcil limpeza e descontaminao. Carpetes e tapetes no
so apropriados para laboratrio.
5. As bancadas devero ser impermeveis gua e resisten-
tes ao calor moderado e aos solventes orgnicos, cidos,
lcalis e solventes qumicos utilizados na descontamina-
o das superfcies de trabalho e do equipamento.
38
SEO III
6. Os mveis do laboratrio devem suportar cargas e usos
previstos com espaamento suciente entre bancadas, ca-
bines e equipamentos, para permitir acesso fcil para lim-
peza. As cadeiras e outros mveis utilizados no trabalho
laboratorial devem ser cobertos com um material que no
seja tecido e que possa ser facilmente descontaminado.
7. Cabines de segurana biolgica devem ser instaladas, de
forma que a variao da entrada e da sada de ar da sala
no provoque alterao nos padres de conteno de seu
funcionamento. As cabines de segurana biolgica devem
estar localizadas longe de portas e janelas que possam
ser abertas, reas laboratoriais muito cheias e que possu-
am outros equipamentos potencialmente dilaceradores,
de forma que sejam mantidos os parmetros de uxo de
ar nessas cabines de segurana biolgica.
8. Um lava-olhos deve estar disponvel.
9. A iluminao dever ser adequada para todas as ativi-
dades, evitando reexos e luzes fortes e ofuscantes que
possam impedir a viso.
10. No existem exigncias em relao ventilao. Porm,
o planejamento de novas instalaes deve considerar
sistemas mecnicos de ventilao que proporcionem um
uxo interno de ar sem que haja uma recirculao para
os espaos fora do laboratrio. Caso o laboratrio possua
janelas que se abram para o exterior, essas devero pos-
suir telas para insetos.
Nvel de Biossegurana 3 (NB-3)
O nvel de biossegurana 3 aplicvel para laboratrios clni-
cos, de diagnstico, ensino e pesquisa ou de produo onde o tra-
balho com agentes exticos possa causar doenas srias ou po-
tencialmente fatais, como resultado de exposio por inalao. A
equipe laboratorial deve possuir treinamento especco no ma-
nejo de agentes patognicos e potencialmente letais, devendo ser
supervisionados por competentes cientistas que possuam vasta
experincia com os agentes.
Todos os procedimentos que envolverem a manipulao de
materiais infecciosos devem ser conduzidos dentro de cabines de
39
SEO III
segurana biolgica ou de outro dispositivo de conteno fsica.
Os manipuladores devem usar roupas e equipamentos de prote-
o individual.
Sabe-se, porm, que algumas instalaes existentes podem no
possuir todas as caractersticas recomendadas para um nvel de
biossegurana 3 (por exemplo, uma rea de acesso com duas por-
tas, selamento das entradas de ar). Nessas circunstncias, um nvel
aceitvel de segurana para a conduo dos procedimentos de ro-
tina (por exemplo, procedimentos para diagnsticos envolvendo a
reproduo de um agente para identicao, tipagem, teste de sus-
ceptibilidade, etc.) poder ser conseguido com instalaes do nvel
de biossegurana 2, garantindo-se que o ar liberado do laboratrio
seja jogado para fora da sala; a ventilao do laboratrio seja equi-
librada para proporcionar um uxo de ar direcionado para dentro
da sala; o acesso ao laboratrio seja restrito quando o trabalho
estiver sendo realizado; e as prticas padro de microbiologia, as
prticas especiais e o equipamento de segurana para o nvel de
biossegurana 3 sejam rigorosamente seguidas. A deciso de im-
plementar essas modicaes das recomendaes do nvel de bios-
segurana 3 deve ser tomada somente pelo diretor do laboratrio.
Os seguintes padres e as prticas de segurana especiais, os
equipamentos e as instalaes se aplicam aos agentes enumerados
no nvel de biossegurana 3:
1. O acesso ao laboratrio deve ser limitado ou restrito de
experimentos estiverem sendo realizados.
2. As pessoas devem lavar as mos aps a manipulao de
materiais infecciosos, aps a remoo das luvas e antes
de sarem do laboratrio.
tato e aplicar cosmticos dentro da rea de trabalho. As
pessoas que usarem lentes de contato em laboratrios
devero tambm usar culos de proteo ou protetores
faciais. Os alimentos devem ser armazenados fora do
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SEO III
ambiente de trabalho em armrios ou geladeiras utiliza-
dos somente para tal m.
4. proibida a pipetagem com a boca e devem ser utilizados
mente a m de minimizar a criao de aerossis.
pelo menos uma vez ao dia e depois de qualquer derra-
mamento de material vivel.
8. Todas as culturas, colnias e outros resduos relacionados
devem ser descontaminados antes de serem descartados,
por meio de um mtodo de descontaminao aprovado,
como, por exemplo, a autoclavao. Os materiais descon-
taminados fora da rea prxima ao laboratrio devero
ser colocados dentro de um recipiente rgido, prova de
vazamento e hermeticamente fechado para ser transpor-
tado do laboratrio. O lixo infeccioso de laboratrios de
nveis de biossegurana 3 dever ser descontaminado an-
tes de ser removido para locais fora do laboratrio.
1. As portas do laboratrio devem permanecer fechadas
quando experimentos estiverem sendo realizados.
2. O diretor do laboratrio dever controlar e limitar o aces-
so ao laboratrio. Somente as pessoas necessrias para
que o programa seja executado ou o pessoal de apoio de-
vem ser admitidos no local. As pessoas que apresenta-
rem risco aumentado de contaminao ou que possam
ter srias conseqncias, caso sejam contaminadas, no
sero permitidas dentro do laboratrio ou na sala de
animais. Por exemplo, pessoas imunocomprometidas ou
imunodeprimidas podem estar mais susceptveis a uma
contaminao. O diretor dever ser o responsvel nal
pela avaliao de cada caso e pela determinao de quem
41
SEO III
dever ou no entrar ou trabalhar dentro do laboratrio.
No permitida a entrada de menores no laboratrio.
3. O diretor do laboratrio dever estabelecer normas e
procedimentos por meio dos quais s sero admitidas no
laboratrio ou nas salas dos animais pessoas que j tive-
rem recebido informaes sobre o potencial de risco, que
atendam todos os requisitos para a entrada no mesmo
(por exemplo, imunizao) e que obedeam a todas as re-
gras para entrada e sada no laboratrio.
4. Quando materiais infecciosos ou animais infectados es-
tiverem presentes no laboratrio ou no mdulo de con-
teno, deve ser colocado em todas as portas de acesso
do laboratrio e das salas de animais um sinal de alerta
contendo o smbolo universal de risco biolgico e a iden-
ticao do agente, do nome do pesquisador principal ou
de outro responsvel, com endereo completo. O sinal de
alerta tambm dever indicar qualquer requisito especial
necessrio para a entrada no laboratrio, tais como a ne-
cessidade de imunizao, respiradores ou outras medidas
de proteo individual.
5. O pessoal do laboratrio deve ser apropriadamente imu-
nizado ou examinado quanto aos agentes manipulados
ou potencialmente presentes no laboratrio (por exem-
plo, vacina para hepatite B ou teste cutneo para tuber-
culose). Exames peridicos tambm so recomendados.
6. Amostras sorolgicas de toda a equipe e das pessoas
expostas ao risco devero ser coletadas e armazenadas
adequadamente para futura referncia. Amostras soro-
lgicas adicionais podero ser periodicamente coletadas,
dependendo dos agentes manipulados ou do funciona-
mento do laboratrio.
7. Um manual de biossegurana especco dever ser prepa-
rado e adotado pelo diretor do laboratrio e os procedi-
mentos de biossegurana devem ser incorporados aos pro-
cedimentos padro operacionais. Todo pessoal deve ser
orientado sobre os riscos especiais, deve ler e seguir as ins-
trues sobre as prticas e os procedimentos requeridos.
42
SEO III
8. A equipe do laboratrio e a equipe de apoio devero re-
ceber treinamento adequado sobre os riscos potenciais
associados ao trabalho desenvolvido, os cuidados neces-
srios para evitar uma exposio perigosa ao agente in-
feccioso e sobre os procedimentos de avaliao da expo-
sio. A equipe do laboratrio dever freqentar cursos
necessrio, e tambm em caso de mudanas de normas e
procedimentos.
9. Caber ao diretor do laboratrio assegurar que, antes que
o trabalho com os organismos designados para o nvel de
biossegurana 3 se inicie, toda a equipe do laboratrio
demonstre estar apta para prticas e tcnicas padro de
microbiologia e esteja habilitada tambm para prticas e
operaes especcas do laboratrio. Podem estar inclu-
dos experincia anterior em manipulao de patgenos
humanos, culturas de clulas e treinamento especco
proporcionado pelo diretor do laboratrio ou por outros
peritos na rea de manejo de prticas e tcnicas micro-
biolgicas seguras.
10. Deve-se tomar extrema precauo quando objetos cor-
tantes (incluindo seringas e agulhas, lminas, pipetas,
tubos capilares e bisturis) forem manipulados.
mentos cortantes devem car restritos ao laborat-
rio e ser usados somente quando no houver outra
alternativa para inoculao parenteral, ebotomia
ou aspirao de uidos de animais de laboratrio e
de garrafas com diafragma. Recipientes plsticos de-
vem ser substitudos por recipientes de vidro sempre
que possvel.
b. Devem ser usadas somente seringas com agulha xa
ou agulha e seringa em uma unidade descartvel
(por exemplo, quando a agulha parte integrante da
seringa) para injeo ou aspirao de materiais infec-
ciosos. As agulhas descartveis usadas no devero
ser dobradas, quebradas, reutilizadas, removidas das
seringas ou manipuladas antes de serem despreza-
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das. Ao contrrio, elas devero ser cuidadosamente
colocadas em um recipiente resistente a perfuraes
localizado convenientemente e utilizado para reco-
lhimento de objetos cortantes desprezados. Objetos
cortantes no-descartveis devero ser colocados em
um recipiente cuja parede dever ser bem resistente
para o transporte at uma rea para descontamina-
o, de preferncia com uma autoclave.
c. Seringas que possuem um envoltrio para a agulha
ou sistemas sem agulhas e outros dispositivos de se-
gurana devero ser utilizados quando necessrios.
tamente com a mo, devem ser removidos por outros
meios mecnicos, tais como vassoura e p de lixo, pin-
as ou frceps. Os recipientes que contm agulhas,
equipamentos cortantes e vidros quebrados conta-
minados devero passar por um processo de descon-
taminao antes de serem desprezados, de acordo
com os regulamentos locais, estaduais ou federais.
11. Todas as manipulaes abertas que envolvam materiais
infecciosos devero ser conduzidas no interior de cabi-
nes de segurana biolgica ou de outros dispositivos de
conteno fsica dentro de um mdulo de conteno. Ne-
nhum trabalho em que haja necessidade de abrir a pele
para se alcanar os vasos dever ser conduzido em ban-
cadas abertas. A limpeza dever ser facilitada pelo uso
de toalhas absorventes com uma face de plstico volta-
da para baixo, recobrindo as superfcies de trabalho no
perfuradas das cabines de segurana biolgica.
12. O equipamento laboratorial e as superfcies de trabalho
devero ser descontaminados rotineiramente com um
desinfetante ecaz aps a concluso do trabalho com
materiais infecciosos, especialmente no caso de derra-
mamento, vazamentos ou outras contaminaes por ma-
teriais infecciosos.
a. Vazamentos de materiais infecciosos devero ser
descontaminados, contidos e limpos pela equipe de
prossionais especializados ou por outras pessoas
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SEO III
adequadamente treinadas e equipadas para traba-
lharem com material infeccioso concentrado. Os
procedimentos para vazamento devero ser desen-
volvidos e noticados.
b. O equipamento contaminado dever ser desconta-
minado antes de ser removido do laboratrio para
conserto, manuteno ou para ser embalado para
transporte de acordo com os regulamentos locais,
estaduais e federais aplicveis.
13. As culturas, os tecidos, as amostras de uidos corpreos
ou resduos devero ser colocados em um recipiente que
evite um vazamento durante coleta, manuseio, processa-
mento, armazenamento, transporte ou embarque.
14. Todos os dejetos contendo materiais contaminados em
laboratrio (por exemplo, luvas, jalecos de laboratrios,
etc.) devero ser descontaminados antes de serem des-
prezados ou reutilizados.
15. Vazamentos e acidentes que resultem em exposies
abertas dos materiais infecciosos aos organismos deve-
ro ser imediatamente relatados ao diretor do laborat-
rio. Avaliao mdica adequada, vigilncia e tratamento
devero ser proporcionados e registros por escrito deve-
ro ser mantidos.
16. Animais e plantas que no estiverem relacionados ao tra-
balho em desenvolvimento no devero ser admitidos
dentro do laboratrio.
1. Roupas de proteo (como jalecos com uma frente intei-
ra, macaco ou uniforme de limpeza) devero ser usadas
pela equipe quando estiver dentro do laboratrio. A rou-
pa de proteo no dever ser usada fora do laboratrio.
Antes de ser lavada a roupa dever ser descontaminada e
trocada depois de contaminada.
2. Todos devero usar luvas quando estiverem manuseando
materiais infecciosos, animais infectados e equipamen-
tos contaminados.
45
SEO III
3. Recomenda-se a mudana freqente das luvas acompa-
nhada de lavagem das mos. As luvas descartveis no
devero ser reutilizadas.
4. Todas as manipulaes de materiais infecciosos, necrop-
sias de animais infectados, coleta de tecidos ou lquidos
de animais infectados ou de ovos embrionados, etc. de-
vero ser conduzidas em uma cabine de segurana biol-
gica de classe II ou III (veja o apndice A).
5. Quando um procedimento ou processo no puder ser
conduzido dentro de uma cabine de segurana biolgica,
devem ser utilizadas combinaes apropriadas de equi-
pamentos de proteo individual (por exemplo, respira-
dores, protetores faciais) com dispositivos de conteno
fsica (por exemplo, centrfugas de segurana e frascos
selados).
6. A proteo facial e o respirador devero ser usados quan-
do a equipe estiver dentro de salas contendo animais in-
fectados.
D. Instalaes do Laboratrio (Barreiras Secundrias)
1. O laboratrio, com acesso restrito, dever estar separado
das reas de trnsito irrestrito do prdio. exigido um
sistema de dupla porta com sistema de intertravamento
automtico como requisito para entrada no laboratrio a
partir de corredores de acesso ou outras reas contguas.
As portas devero conter fechaduras (veja o apndice F).
Uma sala para a troca de roupas dever ser includa no
laboratrio.
2. Cada sala do laboratrio dever possuir uma pia para la-
vagem das mos. A pia dever ser acionada automatica-
mente sem o uso das mos e estar localizada perto da
porta de sada.
3. As superfcies das paredes internas, dos pisos e dos tetos
das reas, em que os agentes de NB-3 so manipulados,
devero ser construdas e mantidas de forma que faci-
litem a limpeza e a descontaminao. Toda a superfcie
deve ser selada e sem reentrncias. As paredes, os tetos
e os pisos devero ser lisos, impermeveis e resistentes a
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SEO III
substncias qumicas e desinfetantes normalmente usa-
dos em laboratrios. Os pisos devero ser monolticos e
antiderrapantes. O uso de revestimento de piso dever
ser levado em considerao. Orifcios ou aberturas nas
superfcies de pisos, paredes e teto devero ser selados.
Dutos e espaos entre portas e esquadrias devem permi-
tir o selamento para facilitar a descontaminao.
4. As bancadas devero ser impermeveis e resistentes ao
calor moderado e aos solventes orgnicos, cidos, lcalis
e solventes qumicos utilizados para descontaminao de
superfcies e equipamentos.
5. Os mveis do laboratrio devero suportar cargas e usos
previstos com espaamento suciente entre bancadas,
cabines e equipamentos para permitir acesso fcil para
a limpeza. As cadeiras e outros mveis utilizados em um
laboratrio devero ser cobertos por uma material que
no seja tecido e possa ser facilmente descontaminado.
6. Todas as janelas do laboratrio devero ser fechadas e la-
cradas.
7. Um mtodo para descontaminao de todos os dejetos
do laboratrio dever estar disponvel para a equipe e ser
utilizado de preferncia dentro do laboratrio (por exem-
plo, autoclave, desinfeco qumica, incinerao ou ou-
tros mtodos aprovados de descontaminao). Deve-se
considerar os meios de descontaminao de equipamen-
tos. Caso o lixo seja transportado para fora do laborat-
rio, ele dever ser adequadamente lacrado e no dever
ser transportado em corredores pblicos.
8. Devero existir cabines de segurana biolgica em todos
os laboratrios. Essas cabines devero estar distantes de
portas, de venezianas, do almoxarifado e de reas do la-
boratrio que possuam um grande movimento.
9. O laboratrio dever ter um sistema de ar independente,
com ventilao unidirecional que permita que o uxo de
ar penetre no laboratrio atravs da rea de entrada. O
sistema de ar dever tirar o ar contaminado para fora do
laboratrio e jogar o ar de reas limpas para dentro do
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mesmo. O ar de exausto no dever recircular em outras
reas do prdio. A ltrao e outros tratamentos do ar
liberado no so necessrios, mas podero ser utilizados
dependendo das condies do local, dos agentes espec-
cos manipulados e das condies de uso. O ar liberado
dever ser jogado fora de reas ocupadas e de entradas
de ar ou dever ser ltrado atravs de ltro HEPA (High
Eciency Particulated Air). A equipe do laboratrio dever
vericar constantemente se o uxo de ar (para dentro do
laboratrio) est funcionando de forma adequada. Reco-
menda-se que um monitor visual seja instalado para in-
dicar e conrmar a entrada direcionada do ar para dentro
do laboratrio. Devemos considerar a instalao de um
sistema de controle HVAC para evitar uma pressurizao
positiva contnua do laboratrio. Alarmes audveis tam-
bm so recomendados para noticar a equipe de uma
possvel falha no sistema HVAC.
10. O ar exaurido de uma cabine de segurana biolgica clas-
se II, ltrado pelo HEPA, poder recircular no interior do
laboratrio se a cabine for testada e certicada anualmen-
te. O ar exaurido das cabines de segurana biolgica deve
ser retirado diretamente para fora do ambiente de traba-
lho atravs do sistema de exausto do edifcio. As cabines
devero estar conectadas de maneira que evitem qualquer
interferncia no equilbrio do ar das cabines ou do siste-
ma de exausto do edifcio (por exemplo, uma abertura
de ar entre o exaustor das cabines e o duto do exaustor).
Quando as cabines de segurana biolgica classe III forem
utilizadas, estas devero estar conectadas diretamente ao
sistema de exaustores. Se as cabines de classe III estive-
rem conectadas ao sistema de insuao do ar, isso deve-
r ser feito de tal maneira que previna uma pressurizao
positiva das cabines (veja o apndice A).
11. Centrfugas de uxo contnuo ou outros equipamentos
que possam produzir aerossis devero ser refreados
por dispositivos que liberem o ar atravs de ltros HEPA
antes de serem descarregados no do laboratrio. Esses
sistemas HEPA devero ser testados anualmente. Uma
48
SEO III
outra alternativa seria jogar o ar de sada das cabines
para fora, em locais distantes de reas ocupadas ou das
entradas de ar.
12. As linhas de vcuo devero ser protegidas por sifes con-
tendo desinfetantes lquidos e ltros HEPA ou o equiva-
lente. Os ltros devero ser substitudos quando neces-
srio. Uma alternativa usar uma bomba a vcuo porttil
(tambm adequadamente protegida com sifes e ltros).
13. Um lava-olhos deve estar disponvel no laboratrio.
14. A iluminao dever ser adequada para todas as atividades,
evitando reexos e brilhos que possam ofuscar a viso.
15. O projeto da instalao e os procedimentos operacionais
do nvel de biossegurana 3 devem ser documentados.
Os parmetros operacionais e das instalaes devero
ser vericados quanto ao funcionamento ideal antes que
o estabelecimento inicie suas atividades. As instalaes
devero ser vericadas pelo menos uma vez ao ano.
16. Protees adicionais ao meio ambiente (por exemplo,
chuveiros para a equipe, ltros HEPA para ltrao do ar
exaurido, conteno de outras linhas de servios e a des-
contaminao dos euentes) devero ser consideradas
em conformidade com as recomendaes para manipu-
lao dos agentes, com as normas de avaliao de risco,
condies do local ou outras normas locais, estaduais ou
federais aplicveis.
Nvel de Biossegurana 4 (NB-4)
O nvel de biossegurana 4 indicado para o trabalho que en-
volve agentes exticos e perigosos que exponham o indivduo a
um alto risco de contaminao de infeces que podem ser fatais,
alm de apresentarem um potencial elevado de transmisso por
aerossis. Os agentes com uma relao antignica prxima ou
idntica aos dos agentes includos no nvel de biossegurana 4 de-
vero ser manipulados neste nvel at que se consigam dados su-
cientes para conrmao do trabalho neste nvel ou para o tra-
balho em um nvel inferior. A equipe do laboratrio dever ter um
treinamento especco e completo direcionado para a manipula-
o de agentes infecciosos extremamente perigosos e dever ser
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capaz de entender as funes da conteno primria e secundria,
das prticas padro especcas, do equipamento de conteno e
das caractersticas do planejamento do laboratrio. Os trabalha-
dores devero ser supervisionados por cientistas competentes,
treinados e com vasta experincia no manuseio dos agentes. O
acesso ao laboratrio dever ser rigorosamente controlado pelo
diretor. A instalao dever ser em um edifcio separado ou em
uma rea controlada dentro do edifcio que seja totalmente isola-
da de todas as outras. Um manual de operaes especco para as
instalaes dever ser preparado ou adotado.
Dentro do ambiente de trabalho, todas as atividades devero
permanecer restritas s cabines de segurana biolgica classes III
ou II usadas com roupas de proteo com presso positiva, ven-
tiladas por sistema de suporte de vida. O laboratrio do nvel de
biossegurana 4 dever possuir caractersticas especcas quanto
ao projeto e engenharia para preveno da disseminao de mi-
croorganismos dentro do meio ambiente.
As seguintes prticas padro de segurana e especiais, bem
como as instalaes, se aplicam aos agentes pertencentes ao nvel
de biossegurana 4:
1. O acesso ao laboratrio dever ser limitado pelo diretor
quando experimentos estiverem sendo realizados.
2. A norma para manipulao segura de objetos perfurocor-
tantes dever ser instituda.
3. Todos os procedimentos devero ser cuidadosamente re-
alizados para minimizar a produo de aerossis.
pelo menos uma vez ao dia e depois de qualquer vaza-
mento de material vivel.
5. Todo o lixo dever ser descontaminado antes de ser des-
prezado por meio de um mtodo de descontaminao
aprovado tal qual a autoclavao.
6. Deve-se providenciar um programa rotineiro de controle
de roedores e insetos (veja o apndice G).
50
SEO III
1. Somente as pessoas envolvidas na programao e no su-
porte ao programa a ser desenvolvido, cujas presenas
forem solicitadas no local ou nas salas do laboratrio,
devero ter permisso para entrada no local. As pessoas
que estiverem imunocomprometidas ou imunodeprimi-
das estaro correndo um alto risco de adquirir infeces.
Portanto, as pessoas que forem susceptveis ou as pesso-
as em que uma eventual contaminao possa provocar
srios danos, como no caso de crianas ou gestantes, no
recebero permisso para entrar no laboratrio ou nas
salas de animais.
O supervisor do laboratrio dever ter a responsabilida-
de nal no controle do acesso. Por questo de segurana,
o acesso ao laboratrio dever ser bloqueado por portas
hermeticamente fechadas. A entrada dever ser contro-
lada pelo diretor do laboratrio, por outra pessoa res-
ponsvel pelo controle dos riscos biolgicos ou por outra
pessoa responsvel pela segurana fsica da instalao.
Antes de entrar no laboratrio, as pessoas devero ser
avisadas sobre o risco potencial e instrudas sobre as me-
didas apropriadas de segurana. As pessoas autorizadas
devero cumprir com rigor as instrues dadas e todos os
outros procedimentos aplicveis para entrada e sada no
laboratrio. Dever haver um registro, por escrito, de en-
trada e sada de pessoal, com data, horrio e assinaturas.
2. Quando materiais infecciosos ou animais infectados es-
tiverem presentes no laboratrio, deve ser colocado em
todas as portas de acesso ao laboratrio e s salas de
animais um sinal de alerta contendo o smbolo universal
de risco biolgico. O sinal de alerta dever identicar o
agente, relacionar o nome do diretor do laboratrio ou
outra pessoa responsvel e tambm indicar qualquer re-
quisito especial necessrio para a entrada na rea (por
exemplo, necessidade de imunizao, respiradores ou ou-
tras medidas de proteo individual).
3. O diretor do laboratrio dever ser o responsvel por as-
segurar que, antes de iniciar o trabalho com organismos
51
SEO III
pertencentes ao nvel de biossegurana 4, toda a equipe
demonstre uma alta competncia em relao a prticas
e tcnicas microbiolgicas e a prticas e operaes espe-
ciais especcas do laboratrio. Isso poder incluir uma
experincia anterior no manuseio de patgenos huma-
nos, culturas de clulas ou em um treinamento especco
fornecido pelo diretor do laboratrio ou por outro perito
com experincia nessas tcnicas e prticas microbiolgi-
cas singulares.
4. A equipe do laboratrio dever receber imunizaes para
os agentes manipulados ou potencialmente presentes no
laboratrio.
5. Amostras sorolgicas de toda a equipe do laboratrio e
de outras pessoas expostas a um elevado risco devero
ser coletadas e armazenadas. Amostras sorolgicas adi-
cionais devero ser periodicamente coletadas, depen-
dendo dos agentes manipulados ou do funcionamento
do laboratrio. Ao estabelecer um programa de vigilncia
sorolgica, deve-se considerar a disponibilidade dos m-
todos para a avaliao do(s) anticorpo(s) do(s) agente(s)
em questo. O programa para o teste das amostras soro-
lgicas dever ter um intervalo a cada coleta, e o respon-
svel pelo projeto dever comunicar os resultados aos
participantes.
6. Um manual sobre biossegurana dever ser preparado ou
adotado. A equipe dever ser avisada quanto aos perigos
e riscos especiais, ler e seguir as instrues sobre as pr-
ticas e os procedimentos.
7. A equipe do laboratrio e a equipe de apoio devero rece-
ber treinamento adequado sobre os perigos e riscos asso-
ciados ao trabalho, as precaues necessrias para a pre-
veno de exposies e os procedimentos de avaliao da
exposio. A equipe tambm dever participar de cursos
necessrio, em caso de mudanas nos procedimentos.
8. A entrada e a sada de pessoal do laboratrio devem ocor-
rer somente aps uso do chuveiro e troca de roupas. Os
funcionrios devero usar o chuveiro de descontamina-
52
SEO III
o a cada sada do laboratrio. A entrada e a sada de
pessoal por antecmara pressurizada somente devero
ocorrer em situaes de emergncia.
9. Para entrar no laboratrio, a roupa comum dever ser
trocada (nos vestirios externos) por roupa protetora
completa e descartvel. Todas as roupas usadas no labo-
ratrio (incluindo roupas de baixo, calas e camisas ou
macaces, sapatos e luvas) devero ser fornecidas e utili-
zadas por todas as pessoas que entrarem no laboratrio.
Ao deixarem o local e antes de se dirigirem para as reas
de banho, as pessoas devero retirar a roupa usada no la-
boratrio, no vestirio interno. As roupas sujas devero
passar pela autoclave antes de lavadas.
10. Estoques e materiais necessrios para o laboratrio de-
vero ser descontaminados em autoclave de dupla porta,
cmara de fumigao ou sistema de antecmara pressu-
rizada antes de utilizados. Aps garantir a segurana das
portas externas, a equipe dentro do laboratrio dever
retirar os materiais abrindo as portas interiores da auto-
clave, da cmara de compresso ou da cmara de fumiga-
o. As portas devero ser trancadas depois da retirada
dos materiais.
11. Deve-se sempre tomar extrema precauo com qualquer
objeto perfurocortante contaminado, como seringas e
agulhas, lminas, pipetas, tubos capilares e bisturis.
mentos cortantes so restritos ao laboratrio e usa-
dos somente quando no houver outra alternativa
para inoculao parenteral, ebotomia ou aspirao
de uidos de animais de laboratrio e de garrafas
com diafragma. Recipientes plsticos devem ser
substitudos por recipientes de vidro sempre que
possvel.
b. Devem ser usadas somente seringas com agulhas
xas ou agulha e seringa em uma unidade nica e
descartvel (por exemplo, quando a agulha parte
integrante da seringa) para injeo ou aspirao de
materiais infecciosos. As agulhas descartveis usa-
53
SEO III
das no devero ser dobradas, quebradas, reutiliza-
das, removidas das seringas ou manipuladas antes
de desprezadas. Ao contrrio, elas devero ser cui-
dadosamente acondicionadas em um recipiente re-
sistente a perfuraes localizado convenientemente
e utilizado para recolhimento de objetos cortantes
desprezados. Objetos cortantes no descartveis
devero ser acondicionados em um recipiente cuja
parede dever ser bem resistente para o transporte
at uma rea para descontaminao, de preferncia
por meio de autoclave.
c. As seringas que possuem um envoltrio para a agu-
lha ou sistemas sem agulha e outros dispositivos de
segurana devero ser utilizados quando necessrio.
tamente com a mo, devem ser removidos por meios
mecnicos, como vassoura e p de lixo, pinas ou
frceps. Os recipientes que contm agulhas, equipa-
mentos cortantes e vidros quebrados contaminados
devero passar por um processo de descontaminao
antes de desprezados, de acordo com os regulamen-
tos locais, estaduais ou federais.
12. O material biolgico vivel ou intacto a ser removido
de cabines classe III ou do laboratrio de nvel de bios-
segurana dever ser acondicionado em recipiente de
conteno primria lacrado e inquebrvel. Este, por sua
vez, dever ser acondicionado em um segundo recipiente
tambm selado e inquebrvel que dever passar por um
tanque de imerso contendo desinfetante, uma cmara
de fumigao ou por uma cmara de compresso planeja-
da com esse propsito.
13. Nenhum material, com exceo do material biolgico,
que dever permanecer intacto ou vivel, poder ser re-
movido de um laboratrio de nvel de biossegurana 4,
sem antes ter sido autoclavado ou descontaminado. Equi-
pamentos ou materiais que no resistam a temperaturas
elevadas ou ao vapor devero ser descontaminados utili-
54
SEO III
zando-se gases ou vapor em uma cmara de compresso
ou em uma cmara especca para tal m.
14. O equipamento do laboratrio dever ser descontami-
nado rotineiramente aps o trabalho com materiais in-
fecciosos e especialmente depois de vazamentos, goteja-
mentos ou outras contaminaes por material infeccioso.
O equipamento dever ser descontaminado antes de ser
enviado para conserto ou manuteno.
15. Vazamentos de materiais infecciosos devero ser refre-
ados e limpos por prossionais especializados ou outros
propriamente treinados e equipados para o trabalho com
material infeccioso concentrado. Um procedimento para
vazamento dever ser desenvolvido e adotado pelo labo-
ratrio.
16. Um sistema de noticao de acidentes e exposies la-
boratoriais, absentesmo de empregados e doenas asso-
ciadas ao laboratrio dever ser organizado, bem como
um sistema de vigilncia mdica. Relatos por escrito de-
vero ser preparados e mantidos. Deve-se, ainda, prever
uma unidade de quarentena, isolamento e cuidados m-
dicos para o pessoal contaminado por doenas conheci-
das ou potencialmente associadas a laboratrio.
17. Todos os materiais no relacionados ao experimento que
estiver sendo realizado no momento (por exemplo, plan-
tas, animais e roupas) no devero ser permitidos no la-
boratrio.
Todos os procedimentos dentro do laboratrio devero ser con-
duzidos em cabines de segurana biolgica classe III ou cabines
de classe II usadas em associao com roupas de proteo pessoal
com presso positiva e ventiladas por sistema de suporte de vida.
D. Instalaes dos Laboratrios (Barreiras Secundrias)
Existem dois modelos de laboratrio de nvel de biossegurana 4:
(A) o laboratrio cabine, onde todas as manipulaes do agente
so realizadas em uma cabine de segurana biolgica classe III; e
(B) o laboratrio escafandro, onde a equipe usa uma roupa de
55
SEO III
proteo. Os laboratrios de nvel de biossegurana 4 podem se
basear em um dos modelos ou em uma combinao dos dois mo-
delos na construo de um s laboratrio. Se a combinao for
utilizada, cada tipo dever atender todos os requisitos identica-
dos para o mesmo.
(A) Laboratrio Cabine (veja o apndice A)
1. O laboratrio de biossegurana 4 dever estar separado
do prdio ou em uma rea claramente demarcada e iso-
lada. As salas do laboratrio devero ser planejadas para
assegurar a passagem atravs de, no mnimo, duas portas
antes de se entrar nas salas contendo as cabines de segu-
rana biolgica classe III (sala das cabines). Devem estar
previstas cmaras de entrada e sada de pessoal, para tro-
ca de roupas, separadas por chuveiro. Deve ser previsto,
ainda, um sistema de autoclave de duas portas, um tan-
que de imerso contendo desinfetante, uma cmara de
fumigao ou uma ante-sala ventilada para descontami-
nao na barreira de conteno para o uxo de materiais,
estoques ou equipamentos que no passam pelo interior
dos vestirios para chegar at a sala.
2. Inspees dirias de todos os parmetros de Conteno
(por exemplo, uxo de ar direcionado) e sistemas de su-
porte de vida devero estar concludos antes que o tra-
balho se inicie dentro do laboratrio, para assegurar que
este esteja funcionando de acordo com os parmetros de
operao.
3. As paredes, os pisos e os tetos da sala contendo as ca-
bines e do vestirio interno devero ser construdos de
maneira que formem uma concha interna selada que fa-
cilitar a fumigao e evitar entrada e sada de animais
e insetos. Os pisos devero ser totalmente selados e re-
vestidos. As superfcies internas da concha devero ser
resistentes a lquidos e produtos qumicos, para facilitar
a limpeza e a descontaminao da rea. Aberturas ao re-
dor das portas das salas de cabine e dentro dos vestirios
internos devero ser minimizadas e facilmente seladas
para facilitar a descontaminao. O sistema de drenagem
56
SEO III
do piso da sala da cabine dever estar conectado direta-
mente ao sistema de descontaminao do dejeto lqui-
do. O sistema de esgoto e outra linha de servio devero
conter ltros HEPA e protees contra animais nocivos,
parasitas, etc.
4. As bancadas devero possuir superfcies seladas e sem
reentrncias que devero ser impermeveis gua e re-
sistentes ao calor moderado e aos solventes orgnicos,
cidos, lcalis e solventes qumicos utilizados na desconta-
minao das superfcies de trabalho e dos equipamentos.
5. Os mveis do laboratrio devero ter uma construo
simples e suportar cargas e usos previstos. O espaamen-
to entre bancadas, cabines, armrios e equipamentos
dever ser suciente para facilitar a limpeza e a descon-
taminao. As cadeiras e outros mveis usados em um la-
boratrio devero ser cobertos por um material que no
seja tecido e que possa ser facilmente descontaminado.
6. Pias com acionamento automtico ou que sejam aciona-
das sem uso das mos devero ser construdas prximas
porta da sala da cabine e perto dos vestirios internos e
externos.
7. Se existir um sistema central de vcuo, este no dever
servir s reas fora da sala das cabines. Filtros HEPA em
srie devero ser colocados da forma mais prtica poss-
vel em cada ponto onde ser utilizado ou prximo da vl-
vula de servio. Os ltros devero ser instalados de forma
a permitir a descontaminao e a substituio local dos
mesmos. Outras linhas utilitrias, como a de gs e lqui-
dos, que convergem para a sala das cabines, devero ser
protegidas por dispositivos que evitem o retorno do uxo.
8. Se houver bebedouros de gua, eles devero ser aciona-
dos automaticamente ou com os ps e devero estar lo-
calizados nos corredores do local, fora do laboratrio. O
servio de abastecimento da gua dos bebedouros dever
ser isolado do sistema de distribuio e abastecimento de
gua das reas laboratoriais e dever ser equipado com
um dispositivo que previna o retorno do uxo.
57
SEO III
9. As portas de acesso ao laboratrio devero possuir tran-
cas e fechamento automtico.
10. Todas as janelas devero ser inquebrveis e seladas.
11. Todos os laboratrios devero possuir autoclaves de duas
portas para a descontaminao de materiais que passem
pelas cabines de segurana biolgica classe III e pelas sa-
las com cabines. As portas das autoclaves, que se abrem
para fora da barreira de conteno, devero ser seladas s
paredes da barreira de conteno. Essas portas devero
ser controladas automaticamente de forma que a porta
externa da autoclave somente possa ser aberta depois que
o ciclo de esterilizao da autoclave tenha sido concludo.
12. Todos os laboratrios devero possuir tanques de imer-
so contendo desinfetantes, cmaras de fumigao ou
mtodos equivalentes de descontaminao, de forma
que os materiais e os equipamentos que no possam ser
descontaminados em uma autoclave sejam removidos de
maneira segura das cabines de segurana biolgica classe
III e das salas com as cabines.
13. Euentes lquidos vindos da parte suja dos vestirios in-
ternos (incluindo os vasos sanitrios), das pias das salas
das cabines, do sistema de esgoto (se utilizado), das c-
maras da autoclave e de outras fontes dentro da sala das
cabines devero ser descontaminados com um mtodo de
descontaminao comprovado, de preferncia por meio
de um tratamento por calor antes de serem jogados no
esgoto sanitrio. Os euentes vindos de chuveiros e va-
sos sanitrios limpos devero ser jogados no esgoto sem
antes passar por um tratamento. O processo usado para
a descontaminao de dejetos lquidos dever ser valida-
do sicamente e biologicamente.
14. Todos os laboratrios devero possuir um sistema de
ventilao sem uma recirculao. Os componentes de
abastecimento e de liberao do sistema devero estar
equilibrados para assegurar um uxo de ar direcionado
da rea de menos risco para rea(s) de maior risco poten-
cial. O sistema de ar no laboratrio dever prever presso
58
SEO III
diferencial e uxo unidirecionado de modo a assegurar
diferencial de presso que no permita a sada do agen-
te de risco. O uxo de ar direcionado/presso diferencial
dever ser monitorado e dever conter um alarme que
acuse qualquer irregularidade no sistema. Um dispositi-
vo visual que monitorize a presso de maneira apropria-
da, que indique e conrme o diferencial da presso da
sala das cabines, dever ser providenciado e dever ser
colocado na entrada do vestirio. O uxo de ar de entra-
da e sada tambm dever ser monitorado, e um sistema
de controle HEPA dever existir para evitar uma cont-
nua pressurizao positiva do laboratrio. A cabine de
classe III dever ser diretamente conectada ao sistema de
exaustores. Se a cabine de classe III estiver conectada ao
sistema de abastecimento, isso dever ser feito de forma
que previna uma pressurizao positiva da cabine.
15. O ar que entra e sai da sala das cabines, do vestirio in-
terno e da ante-sala dever passar pelo(s) ltro(s) HEPA.
O ar dever ser liberado longe dos espaos ocupados e das
entradas de ar. O(s) ltro(s) dever(o) estar localizado(s)
de maneira mais prxima possvel da fonte a m de mini-
mizar a quantidade de canos potencialmente contamina-
dos. Todos os ltros HEPA devero ser testados e certi-
cados anualmente. O alojamento dos ltros HEPA dever
ser projetado de maneira que permita uma descontami-
nao in situ do ltro antes de este ser removido ou antes
da remoo do ltro em um recipiente selado e de con-
teno de gs para subseqente descontaminao e/ou
destruio por incinerao. O projeto do abrigo do ltro
HEPA dever facilitar a validao da instalao do ltro.
O uso de ltros HEPA pr-certicados pode ser vantajoso.
A vida mdia de ltros HEPA de exausto pode ser pro-
longada com uma pr-ltrao adequada do ar insuado.
16. O projeto e os procedimentos operacionais de um local
de nvel de biossegurana 4 devero ser documentados.
O local dever ser testado em funo do projeto e dos
parmetros operacionais para ser vericado se estes real-
mente atendem a todos os critrios, antes que comecem
59
SEO III
a funcionar. Os locais devero ser checados novamente
pelo menos uma vez ao ano, e os procedimentos neles
existentes devero ser modicados de acordo com a ex-
perincia operacional.
17. Sistemas de comunicao apropriados devero ser insta-
lados entre o laboratrio e o exterior (por exemplo, fax,
computador, interfone).
(B) Laboratrio Escafandro
1. A instalao de nvel de biossegurana 4 consiste de um
edifcio separado ou de uma rea claramente demarcada
e isolada dentro do edifcio. As salas devero ser cons-
trudas de forma que assegurem a passagem atravs dos
vestirios e da rea de descontaminao antes da entra-
da na(s) sala(s) onde o trabalho com os agentes do NB-
4 (rea do escafandro) realizado. Vestirios interno e
externo, separados por um chuveiro, devero ser cons-
trudos para entrada e sada da equipe que trabalha no
laboratrio escafandro. Uma rea para o uso do escafan-
dro, projetada especialmente para o local, tambm ser
construda para proporcionar uma proteo pessoal equi-
valente quela proporcionada pelas cabines de segurana
biolgica classe III. As pessoas que entrarem nesta rea
devero vestir uma roupa de pea nica de presso posi-
tiva e que seja ventilada por um sistema de suporte de
vida protegido pelo sistema de ltros HEPA. O sistema
de suporte de vida inclui compressores de respirao de
ar, alarmes e tanques de ar de reforo de emergncia. A
entrada nesta rea dever ser feita atravs de uma cma-
ra de compresso adaptada com portas hermticas. Um
chuveiro qumico para descontaminao da superfcie da
roupa, antes que o trabalhador saia da rea, dever ser
instalado. Um gerador de luz, automaticamente acionado
em casos de emergncia, ser instalado para evitar que
os sistemas de suporte de vida, os alarmes, a iluminao,
os controles de entrada e sada e as cabines de seguran-
a parem de funcionar. A presso do ar dentro da roupa
dever ser positiva em relao rea ao redor do labora-
60
SEO III
trio. J a presso do ar dentro da rea da roupa dever
ser menor que aquela das reas adjacentes. A iluminao
e os sistemas de comunicao de emergncia devero ser
instalados. Todas as aberturas e fendas dentro da concha
interna da sala da roupa de proteo, do chuveiro qumi-
co e das fechaduras devero ser seladas.
2. Uma inspeo diria de todos os parmetros de con-
teno (por exemplo, uxo de ar direcionado, chuveiros
qumicos) e dos sistemas de suporte de vida dever estar
concluda antes que o trabalho no laboratrio se inicie,
para garantir que o laboratrio esteja operando de acor-
do com os parmetros operacionais.
3. Uma autoclave com duas portas dever ser instalada na
barreira de conteno para descontaminao dos dejetos
a serem removidos da rea do laboratrio escafandro. A
porta da autoclave, que se abre para a rea externa da
sala escafandro, dever ser automaticamente controlada
de forma que a porta exterior s possa ser aberta depois
que o ciclo de esterilizao esteja concludo. Um tanque
de imerso, uma cmara de fumigao ou de compresso
dever ser colocado no local para permitir a passagem de
materiais, suprimentos ou equipamentos que sero tra-
zidos para o interior do laboratrio escafandro, atravs
dos vestirios. Esses dispositivos podem tambm ser
utilizados para a remoo de materiais, suprimentos ou
equipamentos que no possam ser descontaminados em
uma autoclave.
4. As paredes, os pisos e os tetos do laboratrio escafandro
devero ser construdos de maneira que formem uma
concha interna selada, que facilite a fumigao e que evite
a entrada de animais e insetos (veja o apndice G). As su-
perfcies internas da concha devero ser resistentes a l-
quidos e solues qumicas, facilitando a limpeza e a des-
contaminao da rea. Todas as aberturas e fendas nessas
estruturas e superfcies devero ser seladas. Qualquer
sistema de drenagem do piso dever conter sifes cheios
de desinfetante qumico de eccia comprovada contra o
agente-alvo que devero estar conectados diretamente ao
61
SEO III
sistema de descontaminao de dejetos lquidos. O esgo-
to e outras linhas de servio devero conter ltros HEPA.
5. Acessrios internos como dutos de ventilao, sistemas
de suprimento de luz e gua devero ser instalados de
maneira que minimizem a rea da superfcie horizontal.
6. As bancadas devero possuir superfcies seladas e sem
emendas, impermeveis e resistentes ao calor moderado
e aos solventes orgnicos, cidos, lcalis e solventes qu-
micos utilizados na descontaminao das superfcies de
trabalho e nos equipamentos.
7. Os mveis do laboratrio devero ter uma construo
simples e suportar cargas e usos previstos. Recomenda-
se o uso de materiais no porosos. Os espaos entre as
bancadas, as cabines e armrios e o equipamento devero
ser sucientes para facilitar a limpeza e a descontamina-
o. As cadeiras e outros mveis do laboratrio devero
ser cobertos por um material que no seja tecido e que
possa ser facilmente descontaminado.
8. Pias com funcionamento automtico ou que sejam acio-
nadas sem o uso das mos devero ser construdas prxi-
mas rea em conjunto com a roupa de proteo. A cons-
truo de pias para a lavagem das mos nos vestirios
internos e externos dever ser considerada bsica para a
avaliao de risco.
9. Se existir um sistema central de vcuo, este no servi-
r s reas fora do laboratrio conjunto com a roupa de
proteo. Os ltros HEPA enleirados devero ser colo-
cados da forma mais prtica possvel em cada ponto em
que sero utilizados ou prximo da vlvula de servio. Os
ltros devero ser instalados de modo que permitam a
descontaminao e a substituio local dos mesmos. Ou-
tros servios de gs e lquidos para essas reas conjuntas
devero ser protegidos por meio de dispositivos que evi-
tem o retorno do uxo.
10. As portas de acesso ao laboratrio devero possuir tran-
cas e fechamento automtico. As portas internas e exter-
nas ao chuveiro qumico e as internas e externas s en-
62
SEO III
tradas de ar devero ser trancadas para evitar que ambas
as portas sejam abertas simultaneamente.
11. Todas as janelas devero ser resistentes e seladas.
12. Euentes lquidos provenientes das pias, dos canos de es-
goto do piso (se utilizado), das cmaras da autoclave e de
outras fontes dentro da barreira de conteno devero ser
descontaminados com um mtodo de descontaminao
comprovado, de preferncia por um tratamento com ca-
lor, antes de serem jogados no esgoto sanitrio. Os euen-
tes vindos de chuveiros e vasos sanitrios limpos devero
ser jogados no esgoto sem antes passar por um trata-
mento. O processo usado para a descontaminao de de-
jetos lquidos dever ser validado fsica e biologicamente.
13. Todos os laboratrios devero possuir um sistema de
ventilao sem recirculao. Os componentes de insua-
o e exausto de ar do sistema devero estar equilibra-
dos para assegurar um uxo de ar direcionado da rea de
menos risco para rea(s) de maior perigo. Recomenda-
mos o uso de ventiladores para abastecimento e liberao
de ar. O uxo de ar direcionado/presso diferencial entre
as reas adjacentes dever ser monitorado e dever con-
ter um alarme para indicar qualquer irregularidade no
sistema. Um dispositivo visual que monitore a presso de
maneira apropriada, que indique e conrme o diferencial
da presso da sala das cabines dever ser providenciado e
colocado na entrada do vestirio. O uxo de ar nos com-
ponentes de abastecimento e escape tambm dever ser
monitorado, e um sistema de controle HVAC dever ser
instalado para evitar uma pressurizao positiva do labo-
ratrio.
14. O ar que abastece a rea conjunta, o chuveiro qumico e
a cmara de compresso dever passar atravs do ltro
HEPA. O ar que sai dessa rea conjunta, do chuveiro qu-
mico e das cmaras de compresso e de descontaminao
dever passar por dois ltros HEPA em srie antes de ser
jogado para fora do laboratrio. O ar dever ser lanado
distante dos espaos ocupados e das entradas de ar. O(s)
ltro(s) HEPA devero estar localizados de maneira mais
63
SEO III
prxima possvel da fonte a m de minimizar a extenso
dos canos potencialmente contaminados. Todos os ltros
HEPA devero ser testados e certicados anualmente. O
abrigo para os ltros HEPA dever ser projetado de ma-
neira que permita uma descontaminao in situ do ltro
antes de este ser removido. Uma outra alternativa seria a
remoo do ltro em um recipiente primrio e hermtico
ao gs para subseqente descontaminao e/ou destrui-
o por incinerao. O projeto do abrigo do ltro HEPA
dever facilitar a validao da instalao do ltro. O uso
de ltros HEPA pr-certicados pode ser vantajoso. A
vida mdia de ltros HEPA exaustores pode ser prolon-
gada com uma pr-ltrao adequada do ar fornecido.
15. O posicionamento dos pontos de entrada e sada de ar
dever ser de forma que os espaos de ar estticos dentro
do laboratrio escafandro sejam minimizados.
16. O ar de sada tratado e o liberado das cabines de seguran-
a biolgica classe II, localizadas no local onde os traba-
lhadores vestem a roupa de presso positiva, poder ser
jogado para dentro do ambiente de trabalho ou para o
exterior atravs do sistema de exaustores do local. Se o
ar tratado for liberado para fora atravs dos exaustores,
este dever estar diretamente conectado ao sistema, de
maneira que evite qualquer interferncia no equilbrio do
ar das cabines ou do sistema de exaustores.
17. O projeto e os procedimentos operacionais de um local
de nvel de biossegurana 4 devero ser documentados.
O local dever ser testado em funo do projeto e dos pa-
rmetros operacionais, para que se verique se realmen-
te atendem a todas as necessidades antes que comecem
a funcionar. Os locais devero ser checados novamente
uma vez ao ano, e os procedimentos neles existentes de-
vero ser modicados de acordo com a experincia ope-
racional.
18. Sistemas de comunicao apropriados devero ser insta-
lados entre o laboratrio e o exterior (por exemplo, fax,
computador, interfone).
64
SEO III
Tabela 1. Resumo dos nveis de biossegurana recomendados para
agentes infecciosos
NB AGENTES PRTICAS
EQUIPAMENTOS DE
SEGURANA
(Barrciras Primrias)
INSTAIAOES
(Barrciras Sccundrias)
1 Que no so co-
nhecidos por cau-
sarem doenas
em adultos sa-
dios.
Prticas padro de mi-
crobiologia.
No so necessrios. Bancadas abertas com
pias prximas.
2 Associados com
doenas huma-
nas, risco = le-
so percutnea,
ingesto, exposi-
o da membra-
na mucosa.
Prtica de NB-1 mais:
acesso limitado;
avisos de risco biol-
gico;
precaues com ob-
jetos perfurocortan-
tes;
manual de biosse-
gurana que defina
qualquer desconta-
minao de dejetos
ou normas de vigi-
lncia mdica.
Barreiras primrias =
cabines de classe I ou
II ou outros dispositi-
vos de conteno fsica
usados para todas as
manipulaes de agen-
tes que provoquem ae-
rossis ou vazamento
de materiais infeccio-
sos; procedimentos es-
peciais como o uso de
aventais, luvas e prote-
o para o rosto, quan-
do necessrio.
NB-1 mais: autoclave
disponvel.
3 Agentes exticos
com potenci al
para transmisso
via aerossol; a
doena pode tra-
zer conseqn-
cias srias ou at
fatais.
Prticas de NB-2 mais:
acesso controlado;
descontaminao de
todo o lixo;
descontaminao da
roupa usada no labo-
ratrio antes de ser
lavada;
amostra sorolgica.
cabines de classe I ou II
ou outros dispositivos
de conteno usados
para todas as manipula-
es abertas de agentes;
uso de aventais, luvas e
proteo respiratria,
quando necessrio.
NB-2 mais:
separao fsica dos
corredores de acesso;
portas de acesso du-
plas com fechamento
automtico;
ar de exausto no re-
circulante;
fluxo de ar negativo
dentro do laborat-
rio.
4 Agentes exti-
cos ou perigosos
que impem um
alto risco de do-
enas que amea-
am a vida, infec-
es laboratoriais
transmitidas via
aerossol ou rela-
cionadas a agen-
tes com risco
desconhecido de
transmisso.
NB-3 mais:
mudana de roupa
antes de entrar;
banho de ducha na
sada;
todo o material des-
contaminado na sa-
da das instalaes.
todos os procedimentos
conduzidos em cabines
de classe III ou classe I
ou II juntamente com
macaco de presso po-
sitiva com suprimento
de ar.
NB-3 mais:
edifcio separado ou
rea isolada;
sistemas de abasteci-
mento e escape a v-
cuo e de descontami-
nao;
outros requisitos su-
blinhados no texto.
65
Caso sejam usados animais experimentais, a administrao da
instituio dever fornecer instalaes adequadas, equipe para
cuidar dos animais e estabelecer prticas que assegurem nveis
apropriados para qualidade, segurana e cuidados com o meio am-
biente. As instalaes para animais de laboratrio consistem de
um tipo especial de laboratrio. Como princpio geral, os nveis de
biossegurana (as instalaes laboratoriais, as prticas e os requi-
sitos operacionais) indicados para o trabalho envolvendo agentes
infecciosos in vivo e in vitro so similares.
Porm, bom lembrarmos que as salas onde se encontram os
animais podem apresentar alguns problemas singulares. No la-
boratrio de microbiologia, as condies de risco so provocadas
pela equipe do laboratrio ou pelo equipamento usado por eles.
Nas salas dos animais, as atividades dos prprios animais podem
apresentar novos riscos. Os animais podem produzir aerossis,
morder e arranhar e podem estar infectados por uma doena zo-
ontica.
Essas recomendaes presumem que as dependncias de um
laboratrio de experimentao animal, as prticas operacionais
e a qualidade do tratamento ao animal atendam a padres e
regulamentos aplicveis (por exemplo, Guide for the Care and Use
of Laboratory Animals
1
e Laboratory Animal Welfare Regulations
2
)
e que espcies adequadas tenham sido selecionadas para os
experimentos animais. Alm desse aspecto, a organizao dever
ter um plano de segurana e de sade ocupacionais. A publicao
recente do Institute of Medicine, Occupational Health and Safety
Care of Research Animals
3
auxilia muito.
SEO IV
CRITRIOS PARA OS NVEIS
DE BIOSSEGURANA PARA
ANIMAIS VERTEBRADOS
66
SEO IV
CRITRIOS PARA OS NVEIS DE BIOSSEGURANA PARA ANIMAIS VERTEBRADOS
O ideal seria que as dependncias para animais de laboratrio
usados nos estudos de doenas infecciosas ou no infecciosas pos-
sussem um isolamento fsico de outros locais onde so realizadas
atividades, tais como a reproduo animal e a quarentena, de la-
boratrios clnicos e especialmente de dependncias onde pacien-
tes so atendidos. No momento da elaborao do projeto das ins-
talaes, deve-se considerar o uxo de pessoas no local, de forma
que minimize o risco de infeces.
As recomendaes detalhadas a seguir descrevem quatro com-
binaes de prticas, equipamentos de segurana e dependn-
cias para experimentos com animais infectados por agentes que
provocam ou possam provocar infeces humanas. Essas quatro
combinaes, designadas de nveis de biossegurana para animais
(NBA) 1-4, proporcionam nveis crescentes de proteo ao pessoal
e ao meio ambiente e so recomendadas como padres mnimos a
serem seguidos em atividades que envolvam animais de laborat-
rios infectados. Os quatro nveis descrevem as dependncias para
animais e prticas aplicveis para o trabalho com animais infecta-
dos por microorganismos pertencentes aos nveis de biosseguran-
a 1-4, respectivamente.
Os pesquisadores inexperientes quanto conduo desses ti-
pos de procedimentos devero procurar ajuda com pessoas que
possuam experincia com esse trabalho especial para que possam
realiz-lo com segurana.
Padres para as instalaes e prticas de manuseio de vetores
e hospedeiros invertebrados no esto includos nos padres de
trabalho para animais de laboratrio comumente utilizados. O li-
vro Laboratory Safety for Arboviruses and Certain Other Viruses of
Vertebrates,
4
preparado pelo Subcomit de Segurana de Labora-
trios de Arbovrus (SALS), do Comit Americano de Vrus de Ar-
trpodes, serve como uma referncia til no planejamento e na
operao das dependncias onde sero realizados trabalhos com
artrpodes.
Nvel de Biossegurana Animal 1 (NBA-1)
O nvel de biossegurana animal 1 (NBA-1) recomendado
para o trabalho que envolva agentes bem caracterizados, que no
67
SEO IV
sejam conhecidos por provocarem doenas em humanos adultos
sadios e que apresentem um risco potencial mnimo para a equipe
laboratorial e para o meio ambiente.
A. Prticas Padro
1. O chefe do laboratrio de experimentao animal deve-
r estabelecer normas, procedimentos e protocolos para
situaes de emergncia. Cada projeto dever ser sub-
metido a uma pr-aprovao pelo Comit Institucional
de Tratamento e Uso de Animais (IACUC) e pelo Comit
Institucional de Biossegurana (IBC). Quaisquer prticas
especiais devero ser aprovadas nesse momento.
2. Somente as pessoas que trabalham ou que fazem par-
te da equipe de apoio devero receber autorizao para
entrar no local. Antes de entrarem, as pessoas devero
ser avisadas quanto aos riscos biolgicos potenciais e re-
ceber instrues sobre os procedimentos de segurana
apropriados.
3. Um programa de vigilncia mdica adequado dever ser
institudo.
4. Um manual de segurana dever ser preparado ou adota-
do. A equipe dever ser avisada sobre os riscos especiais,
ler e seguir as instrues sobre as prticas e os procedi-
mentos.
tato e aplicar cosmticos. Os alimentos para uso huma-
no devero ser guardados somente em reas designadas
para tal m e no sero permitidos nas salas de trabalho
ou nas salas dos animais.
6. Todos os procedimentos devero ser realizados com cui-
dado para minimizar a criao de aerossis e borrifos.
7. As superfcies de trabalho devero ser descontaminadas
aps o uso ou depois de qualquer derramamento de ma-
teriais viveis.
8. Todos os rejeitos da sala de animais (incluindo tecidos,
carcaas e o material das camas de animais contamina-
dos) devero ser transportados da sala dos animais em
68
SEO IV
recipientes rgidos, cobertos e a prova de vazamento para
serem adequadamente desprezados de acordo com os re-
quisitos locais ou institucionais aplicveis. Recomenda-
se a incinerao.
9. Normas quanto ao manuseio seguro de objetos cortantes
devero ser institudas.
10. A equipe dever lavar as mos aps ter manuseado cul-
turas e animais, depois da remoo das luvas e antes de
sarem da sala dos animais.
11. Um aviso de risco biolgico dever ser colocado na entra-
da da sala de animais quando agentes infecciosos estive-
rem presentes no local. O aviso de risco dever identicar
o(s) agente(s) infeccioso(s) em uso, o nome e o nmero
do telefone da pessoa responsvel e indicar os requisitos
especiais para a entrada na sala dos animais (por exem-
plo, necessidade de imunizao e do uso de respirado-
res).
B. Prticas Especiais:
Nenhuma.
C. Equipamentos de Segurana (Barreiras Primrias):
1. Recomenda-se o uso de jalecos, aventais e/ou uniformes
prprios nas dependncias. Estes devero permanecer no
local e no devero ser usados fora das dependncias do
laboratrio de experimentao animal.
2. As pessoas que tiverem contato com primatas no-hu-
manos devero avaliar o risco de exposio das mucosas
e usar uma proteo para os olhos e a face.
5
D. Instalaes (Barreiras Secundrias):
1. As dependncias do laboratrio de experimentao ani-
mal devero estar separadas das reas do edifcio abertas
ao pblico.
2. As portas externas do laboratrio devero ser fechadas e
trancadas automaticamente. As portas das salas dos ani-
69
SEO IV
mais devero abrir para dentro, fechar automaticamente e
ser mantidas fechadas quando os animais estiverem pre-
sentes. As portas internas da sala e da ante-sala devero
abrir para fora ou deslizar vertical ou horizontalmente.
3. As dependncias devero ser planejadas, construdas e
mantidas de forma a facilitar a limpeza e a manuteno.
As superfcies das paredes, dos pisos e dos tetos devero
ser impermeveis gua.
4. Acessrios internos, como xao de luzes, dutos de ar
e canos de gs e gua devero ser instalados de forma a
minimizar reas de superfcie horizontal.
5. Janelas no so recomendadas. Qualquer janela dever
ser resistente quebra. Em todos os locais possveis, as
janelas que porventura existirem devero ser seladas. Se
as dependncias para animais possurem janelas que so
abertas, estas devero conter telas para insetos.
6. Se houver sistema de drenagem no piso, os ralos devero
sempre conter gua e/ou um desinfetante adequado.
7. A ventilao a ser instalada dever estar de acordo com
a ltima edio do Guide for Care and Use of Laboratory
Animals.
6
No dever haver nenhuma recirculao do ar
exaurido. Recomenda-se que as salas para os animais se-
jam mantidas com uma presso negativa em relao aos
corredores adjuntos.
8. A dependncia dever conter uma pia para lavagem das
mos.
9. As caixas e gaiolas devero ser lavadas manualmente ou
em uma mquina para sua lavagem mecnica. A mquina
dever ter enxge nal com gua a uma temperatura de
pelo menos 72C (180F).
evitando reexos e brilhos que possam impedir a viso.
O nvel de biossegurana animal 2 envolve prticas para o tra-
balho com agentes associados a doenas humanas. Este nvel in-
dicado tanto para riscos advindos da ingesto quanto para expo-
70
SEO IV
sies da membrana mucosa e cutnea. O NBA-2 baseia-se nos
requisitos de prticas padro, procedimentos, equipamentos de
conteno e instalaes do NBA-1.
A. Prticas Padro
1. Alm das normas, dos procedimentos e dos protocolos
padro para situaes de emergncia estabelecidas pelo
diretor do local, normas e procedimentos especiais de-
vero ser desenvolvidos quando necessrio e devero ser
aprovados pelo Comit Institucional de Tratamento e
Uso de Animais (IACUC) e pelo Comit Institucional de
Biossegurana (IBC).
2. O acesso s salas dos animais dever ser limitado, permi-
tindo o acesso ao menor nmero de pessoas possvel. As
pessoas que receberem autorizao para entrar nas salas
para trabalhar ou realizar algum tipo de servio, quando
o trabalho estiver sendo realizado, devero ser avisadas
em relao aos riscos em potencial.
adotado. Toda a equipe dever ser imunizada e testada
contra os agentes manuseados ou potencialmente pre-
sentes (por exemplo, vacina de hepatite B e teste cutneo
para TB). Quando apropriado, um sistema de vigilncia
sorolgica dever ser implementado.
7
4. Um manual de biossegurana dever ser preparado ou
adotado. A equipe do laboratrio dever ser avisada so-
bre os riscos especiais, ler e seguir as instrues sobre
prticas e procedimentos.
tato e aplicar cosmticos. Os alimentos de uso humano
devero ser guardados somente em reas designadas
para tal m e no sero permitidos dentro das salas para
os animais ou salas de procedimentos.
6. Todos os procedimentos devero ser realizados com cui-
dado para minimizar a criao de aerossis e borrifos.
7. O equipamento e as superfcies de trabalho na sala deve-
ro ser rotineiramente descontaminados com um desin-
71
SEO IV
fetante de ao comprovada, aps o trabalho com o agen-
te e especialmente depois de borrifos, derramamentos ou
de outras contaminaes com materiais infecciosos.
8. Todas as amostras infecciosas devero ser coletadas, eti-
quetadas, transportadas e processadas de maneira que
contenham e previnam a transmisso do(s) agente(s).
Todos os rejeitos da sala para animais (incluindo tecidos,
carcaas e o material das camas contaminadas dos ani-
mais, sobra de alimentos e objetos perfurocortantes) de-
vero ser transportados da sala de animais em recipien-
tes rgidos, cobertos e a prova de vazamentos, de acordo
com os requisitos locais aplicveis. A superfcie exterior
dos recipientes dever ser desinfetada antes de o mate-
rial ser transportado. Antes da incinerao o contedo
dever ser autoclavado.
9. Normas para um manuseio seguro de objetos perfurocor-
tantes devero ser adotadas:
a. As seringas e agulhas ou outros instrumentos per-
furocortantes devero car restritos ao laboratrio
e ser usados somente quando no houver uma outra
alternativa, como nos casos de injeo parenteral,
ebotomia, aspirao de lquidos de animais e de
garrafas de diafragma.
b. Usar seringas que possuam envoltrio para a agulha,
ou sistemas que no utilizam agulhas e outros dis-
positivos de segurana quando apropriados.
c. Recipientes de plstico devero ser substitudos por
recipientes de vidro sempre que possvel.
10. A equipe dever lavar as mos aps o manuseio de cul-
turas e animais, aps a remoo das luvas e antes de sair
das dependncias dos animais.
11. Um aviso de risco biolgico dever ser colocado na en-
trada da sala dos animais sempre que houver agentes in-
fecciosos presentes. O aviso dever conter a identicao
do(s) agente(s) infeccioso(s), dever relacionar o nome e
o telefone da pessoa responsvel e indicar os requisitos
72
SEO IV
especiais (por exemplo, necessidade de imunizao e do
uso de respiradores) para a entrada na sala dos animais.
12. Um programa de controle de insetos e roedores dever
ser adotado (veja o apndice G).
1. As pessoas que tratam dos animais e as que do suporte
ao programa devero receber treinamento adequado so-
bre os riscos potenciais associados ao trabalho, sobre as
precaues necessrias para evitar exposies e os pro-
cedimentos de avaliao da exposio. A equipe dever
receber cursos anuais de atualizao ou treinamento adi-
cional quando forem necessrias mudanas de normas
ou procedimentos. Os registros de todo o treinamento
fornecido devero ser mantidos. Em geral, as pessoas ex-
postas a um elevado risco de contaminao ou para quem
as infeces possam ser perigosas no sero permitidas
dentro da sala para animais, a menos que procedimentos
especiais possam eliminar os riscos extras.
2. Somente animais usados para o(s) experimento(s) sero
permitidos na sala.
3. Todo o equipamento dever ser adequadamente descon-
taminado antes de ser removido da sala.
4. Respingos e acidentes que resultem em exposies a ma-
teriais infecciosos devero ser imediatamente relatados
ao chefe do laboratrio. Avaliao mdica, vigilncia e
tratamento devero ser providenciados e registros por
escrito devero ser mantidos.
1. Os aventais, uniformes ou jalecos de laboratrio deve-
ro ser usados enquanto a pessoa estiver dentro da sala
dos animais. O jaleco do laboratrio dever ser removido
e mantido dentro da sala. Antes de sair desta, os aven-
tais, uniformes e jalecos devero ser removidos. As luvas
devero ser usadas ao manipular animais infectados e
quando for inevitvel o contato da pele com os animais
infectados.
73
SEO IV
2. O equipamento de proteo individual dever ser basea-
do nas determinaes da avaliao do risco (veja a seo
V). Protetores respiratrios e para olhos/rosto devero
ser usados por todos que entrarem nas salas de animais
que abrigam primatas no-humanos.
8
3. Cabines de segurana biolgica, assim como outros dis-
positivos de conteno fsica e/ou equipamentos de
conteno fsica (por exemplo, respiradores, protetores
faciais), devero ser usados ao conduzir procedimentos
que apresentem um alto potencial de criao de aeros-
sis. Esses procedimentos incluem necropsia de animais
infectados, coleta de tecidos, lquidos de animais ou ovos
infectados e inoculao intranasal de animais.
4. Quando necessrio, os animais devero ser alojados em
equipamentos de conteno primria apropriados s es-
pcies animais. Sistemas com ltros de caixas ou gaiolas
devero sempre ser manipulados em cabines de biocon-
teno animal, recomendadas para roedores, adequada-
mente projetadas e operadas.
D. Instalaes (Barreiras Secundrias)
1. A dependncia para animais dever ser separada das re-
as que so abertas ao trnsito irrestrito de pessoas den-
tro do edifcio.
2. O acesso s dependncias dever ser limitado com portas
hermeticamente fechadas. As portas externas devero
ser fechadas e trancadas automaticamente. As portas das
salas dos animais devero se abrir para dentro, ser fecha-
das automaticamente e mantidas fechadas quando os
animais estiverem presentes. As portas internas da sala
e da ante-sala devero ser abertas para fora ou deslizar
vertical ou horizontalmente.
3. As dependncias devero ser planejadas, construdas e
mantidas de tal forma a facilitar a limpeza e a manuten-
o. As superfcies das paredes, dos pisos e dos tetos de-
vero ser impermeveis gua.
74
SEO IV
5. As janelas no so indicadas. Qualquer janela dever ser
resistente quebra. Em todos os locais possveis, as jane-
las que porventura existirem devero ser seladas.
6. Se houver sistema de drenagem no piso, os sifes deve-
ro sempre conter desinfetante adequado.
7. O ar exaurido dever ser jogado para o lado de fora do
prdio, sem recircular por outras salas. A ventilao a ser
instalada dever estar de acordo com a ltima edio do
Guide for Care and Use of Laboratory Animals. A direo do
uxo de ar na sala dos animais dever ser para dentro. As
salas para os animais devero ser mantidas sob presso
negativa em relao aos corredores adjuntos.
em uma mquina para a lavagem mecnica. A mquina
9. Dever existir uma autoclave dentro do laboratrio de
experimentao animal para descontaminao do lixo
infeccioso.
10. A sala de manuteno de animais infectados dever con-
ter uma pia para lavagem das mos, assim como em qual-
quer outro lugar do laboratrio.
11. A iluminao dever ser adequada para todas as ativi-
dades, evitando reexos e brilhos que possam impedir a
viso.
Nvel de Biossegurana Animal 3 (NBA 3)
O nvel de biossegurana animal 3 envolve as prticas adequa-
das para o trabalho com animais infectados por agentes nativos
ou exticos que apresentem potencial elevado de transmisso por
aerossis e risco de provocar doenas fatais ou srias. O NBA-3
baseia-se nos requisitos de prticas padro, procedimentos, equi-
pamentos de conteno e instalaes do NBA-2.
75
SEO IV
A. Prticas Padro
1. Alm de normas, procedimentos e protocolos padro para
situaes de emergncia estabelecidas pela chea do la-
boratrio, normas e procedimentos especiais devero ser
desenvolvidos quando necessrio e ser aprovados pelo Co-
mit Institucional de Tratamento e Uso de Animais (IA-
CUC) e pelo Comit Institucional de Biossegurana (IBC).
2. O chefe do laboratrio limitar o acesso s salas dos ani-
mais ao menor nmero de pessoas possvel. As pessoas
que receberem autorizao de entrada, para trabalhar ou
realizar algum tipo de servio, devero ser avisadas em
relao ao risco em potencial.
adotado. Toda a equipe dever ser imunizada e testada
contra os agentes manuseados ou potencialmente pre-
sentes (por exemplo, vacina de hepatite B, teste cutneo
para TB). Quando apropriado, um sistema de vigilncia
sorolgica dever ser adotado
9
. Em geral, as pessoas que
podem estar passando por um risco crescente de adquirir
a infeco ou para quem as infeces possam ter srias
conseqncias no sero permitidas dentro da sala para
animais, a menos que procedimentos especiais possam
eliminar os riscos extras.
4. Um manual de biossegurana dever ser preparado ou
adotado. A equipe do laboratrio dever ser avisada so-
bre os riscos especiais, ler e seguir as instrues sobre
prticas e procedimentos.
tato e aplicar cosmticos. Os alimentos de uso humano
devero ser guardados somente em reas designadas
para tal m e no sero permitidos dentro das salas para
animais ou das salas de procedimentos.
6. Todos os procedimentos devero ser realizados cuidadosa-
mente para minimizar a produo de aerossis e borrifos.
7. Os equipamentos e as superfcies de trabalho na sala
devero ser rotineiramente descontaminados com de-
sinfetante que possua ao comprovada, aps o trabalho
76
SEO IV
com agentes infecciosos e especialmente aps borrifos,
derramamentos ou outras contaminaes com materiais
infecciosos que tenham ocorrido.
8. Todos os rejeitos da sala de animais (incluindo tecidos,
carcaas e o material das camas dos animais contamina-
dos, alimentao que no tenha sido utilizada e objetos
perfurocortantes) devero ser transportados da sala dos
animais em recipientes rgidos, a prova de vazamentos e
cobertos, para serem desprezados de forma adequada e
de acordo com os requisitos locais ou institucionais apli-
cveis. Recomendamos a incinerao. A superfcie exter-
na dos recipientes dever ser desinfetada antes da remo-
o do material (veja Prticas Especiais n. 3, a seguir).
9. Normas quanto ao manuseio seguro de objetos perfuro-
cortantes devero ser institudas.
a. As seringas e agulhas ou outros instrumentos perfu-
rocortantes devero ser restritos ao laboratrio e so-
mente usados quando no houver outra alternativa,
como nos casos de injeo parenteral, ebotomia,
aspirao de lquidos de animais e de garrafas de dia-
fragma. Os recipientes de plstico devero ser substi-
tudos por recipientes de vidro sempre que possvel.
b. As seringas que possuem um envoltrio para a agu-
lha ou sistemas sem agulhas e outros dispositivos de
c. Vasilhas plsticas devero ser substitudas por vasi-
lhames de vidro sempre que possvel.
10. A equipe dever lavar as mos aps ter manuseado cultu-
ras e animais, depois da remoo das luvas e antes de sair
da sala dos animais.
trada da sala do laboratrio de experimentao animal
quando agentes infecciosos estiverem presentes no lo-
cal. O aviso de risco dever identificar o(s) agente(s)
infeccioso(s) em uso, relacionar o nome e o nmero do
telefone da pessoa responsvel e indicar os requisitos es-
77
SEO IV
peciais para a entrada na sala dos animais (por exemplo,
necessidade de imunizao e do uso de respiradores).
12. Todas as amostras infecciosas devero ser coletadas, etique-
tadas, transportadas e processadas de maneira que faam
a devida conteno e previnam a transmisso de agentes.
13. As pessoas que cuidam dos animais de laboratrio e as
que do suporte ao programa devero receber treina-
mento adequado sobre os riscos potenciais associados
ao trabalho, sobre as precaues necessrias para evitar
exposies e os procedimentos de avaliao da exposio.
A equipe dever receber cursos anuais de atualizao ou
treinamento adicional quando forem necessrias mudan-
as de normas ou procedimentos. Os registros de todo o
treinamento fornecido devero ser mantidos.
14. Um programa de controle de insetos e roedores dever
ser adotado.
1. As caixas e gaiolas dos animais devero passar pela auto-
clave ou tero que ser descontaminadas antes que o ma-
terial da cama seja removido e antes de serem lavadas. O
equipamento dever ser descontaminado de acordo com
as normas locais, estaduais ou federais antes de ser em-
balado para transporte ou remoo do local, para reparo
ou manuteno.
2. Deve-se desenvolver um procedimento para o caso de
respingos. Somente o pessoal adequadamente treinado e
equipado para trabalhar com materiais infecciosos dever
limpar os respingos. Respingos e acidentes que resultem
em uma exposio direta com materiais infecciosos deve-
ro ser imediatamente relatados ao chefe do laboratrio.
Avaliao mdica, vigilncia e tratamento devero ser pro-
videnciados e registros por escrito devero ser mantidos.
3. Antes de incinerados, todos os rejeitos provenientes das
salas de animais devero passar pela autoclave ou ser
tratados com outro mtodo de esterilizao.
78
SEO IV
4. Os materiais que no tiverem relao alguma com o expe-
rimento (por exemplo, plantas ou animais que no forem
ser utilizados no ensaio) no sero permitidos na sala.
1. Uniformes ou roupas especcos devero ser usados pelas
pessoas que entrarem na sala de animais. As vestimentas
tero toda a frente protegida. As roupas abotoadas na
frente no so adequadas. O uniforme dever ser retira-
do e deixado na sala de animais NBA-3. Antes de sair das
salas, as roupas ou os uniformes devero ser removidos
e adequadamente acondicionados e descontaminados
antes de lavados ou descartados (no caso de uniformes
descartveis).
2. O equipamento de proteo individual dever ser usado
de acordo com as determinaes da avaliao de riscos.
a. O equipamento de proteo individual dever ser
usado em todas as atividades envolvendo manipula-
es de material infeccioso ou de animais infectados.
b. A equipe dever usar luvas ao manusear animais in-
fectados. As luvas devero ser removidas asseptica-
mente e autoclavadas juntamente com outros lixos
da sala de animais antes de descartadas.
c. Protetores respiratrios e para olhos/rosto devero ser
usados por todos que entrarem nas salas de animais.
d. Botas, sapatilhas ou pr-ps ou outro tipo de prote-
o para os ps e banhos desinfetantes para os ps
ou lava-ps devero ser avaliados e usados onde
forem indicados.
3. Podemos reduzir o risco de formao de aerossis infec-
ciosos advindos da manipulao de animais infectados ou
dos materiais utilizados nas camas infectadas, se os ani-
mais forem colocados em sistemas de connamento par-
cial, como caixas cobertas com ltros e paredes rgidas,
colocadas em locais com ventilao direcionada para o
interior das mesmas (por exemplo, cabines de uxo lami-
nar) ou outros sistemas similares de conteno primria.
79
SEO IV
4. As cabines de segurana biolgica e outros dispositivos
de conteno fsica devero ser usados ao conduzir pro-
cedimentos que possuam um alto risco de criao de ae-
rossis. Esses incluem a necropsia de animais infectados,
coleta de tecidos, lquidos de animais ou ovos infectados
e inoculao intranasal de animais. Em um laboratrio
NBA-3, todo o trabalho dever ser realizado em uma bar-
reira primria, caso contrrio as pessoas devero usar
protetores respiratrios dentro da sala.
1. A dependncia para os animais dever ser separada das
reas que so abertas ao trnsito irrestrito de pessoas
dentro do edifcio.
2. O acesso s dependncias dever ser limitado por meio
de portas que se fecham e se trancam automaticamen-
te, com sistema de intertravamento ou leitura tica ou
carto magntico. A entrada de pessoal para a sala dos
animais dever ser realizada atravs de uma antecmara
pressurizada, que dever incluir chuveiro(s) e um vesti-
rio para troca de roupa. Um acesso adicional com porta
dupla (air-lock) dever ser construdo ou uma autocla-
ve com porta dupla dever existir no local para o uxo
de suprimentos e rejeitos dentro e fora do laboratrio,
respectivamente. As portas para as salas de animais de-
vero se abrir para dentro e se fechar automaticamente.
As portas internas da ante-sala dentro de uma sala para
animais devero ser abertas para fora ou deslizar vertical
ou horizontalmente.
3. As instalaes de um laboratrio de experimentao ani-
mal NBA-3 devero ser planejadas, construdas e man-
tidas de forma que facilitem a limpeza e a manuteno.
As superfcies das paredes, dos pisos e dos tetos devero
ser impermeveis gua. Selar juntas, fendas ou aber-
turas em paredes, pisos e tetos. Penetraes das linhas
de servio, tais como gua, luz, gs e outras devem ser
vedadas. Os espaos entre portas e esquadrias devero
80
SEO IV
permitir um selamento para facilitar a descontaminao
do ambiente.
4. Cada sala para animais dever conter uma pia perto das
portas de sada, para lavagem das mos acionada auto-
maticamente ou sem o uso destas. O sifo da pia dever
conter um desinfetante adequado aps o uso da mesma.
6. Qualquer janela dever ser resistente quebra. Em todos
os locais possveis, as janelas que porventura existirem
devero ser vedadas. Se as instalaes para animais pos-
surem janelas que so abertas, estas devero conter telas
contra insetos.
7. Se houver sistema de drenagem no piso, este dever sem-
pre conter um desinfetante adequado.
8. A ventilao instalada dever estar de acordo com a
ltima edio do Guide for Care and Use of Laboratory
Animals. Os sistemas de entrada de ar e exausto devem
ser interligados. O sistema cria um uxo de ar direciona-
do, retirando o ar contaminado de dentro do laboratrio,
jogando-o para fora e ao mesmo tempo retirando o ar das
reas limpas e jogando-o para dentro do laboratrio. O
ar exaurido no pode recircular em nenhuma outra rea
do prdio. Filtrao ou outros tipos de tratamento do ar
exaurido podem no ser necessrios, mas devero ser
considerados, com base nos requisitos do local, nos mi-
croorganismos especcos manipulados e nas condies
de uso. O ar exaurido dever ser lanado para longe de
reas ocupadas e de entradas de ar ou poder ser ltrado
atravs de ltros HEPA. A equipe dever vericar se a di-
reo do ar insuado (para dentro das reas dos animais)
est apropriada. Recomenda-se o uso de monitores visu-
ais que indiquem e conrmem o uxo de ar direcionado
para dentro do recinto. Devemos considerar a instalao
de um sistema de controle de HVAC para evitar a pressu-
rizao positiva nas reas onde esto os animais. Alar-
81
SEO IV
mes audveis devem ser considerados para evidenciar
qualquer falha no sistema de controle HVAC.
9. O ar ltrado pelo HEPA de uma cabine de segurana biol-
gica classe II poder recircular dentro da sala para animais
se a cabine for testada e aprovada anualmente. Quando
o ar exaurido das cabines de segurana biolgica classe II
for lanado para fora do ambiente de trabalho, atravs do
sistema de exausto do edifcio, as cabines devero estar
conectadas de maneira que evitem qualquer interferncia
no equilbrio do ar das cabines ou do sistema de exaus-
to do edifcio (por exemplo, uma conexo metlica en-
tre o exaustor das cabines e o que se prende ao duto dos
exaustores do edifcio). Quando as cabines de segurana
biolgica classe III forem utilizadas, elas devero estar
conectadas diretamente ao sistema de exausto. Se as ca-
bines de classe III estiverem conectadas ao sistema de in-
suao, isso dever ser feito de tal maneira que previna
a pressurizao positiva das cabines (veja o apndice A).
em uma mquina para a lavagem mecnica. A mquina
11. Dever existir uma autoclave dentro da sala de experi-
mentao animal NBA-3, onde o risco est contido, para
descontaminao de lixo infeccioso antes de ser removi-
do para outras reas do local.
12. Se houver um sistema de vcuo (por exemplo, central ou
local), cada conexo de servio dever possuir um sifo
contendo desinfetante lquido e um ltro HEPA em li-
nha, colocado o mais prximo possvel de cada ponto de
uso ou da vlvula de servio. Os ltros devero ser insta-
lados de tal forma que permitam a descontaminao e a
substituio dos mesmos no local.
evitando reexos e brilhos que possam impedir a viso.
14. O projeto de edicao e os procedimentos operacionais
do laboratrio de experimentao animal NBA-3 devem
82
SEO IV
ser documentados. O local dever ser testado em fun-
o do projeto e dos parmetros operacionais, para que
se verique se realmente eles atendem a todas as neces-
sidades antes que comecem a operar. Os locais devero
ser checados novamente pelo menos uma vez ao ano. Os
procedimentos neles existentes devero ser modicados
de acordo com a experincia operacional.
15. Protees adicionais ao meio ambiente (por exemplo,
chuveiros para a equipe, ltros HEPA para ltrao do ar
exaurido, conteno de outras linhas de servios e provi-
so da descontaminao dos euentes) devero ser con-
sideradas, se recomendadas devido s caractersticas dos
agentes manipulados, como determinado pela avaliao
do risco das condies locais ou por outros regulamentos
locais, estaduais ou federais.
O nvel de biossegurana animal 4 envolve as prticas adequa-
das para o trabalho com agentes perigosos ou exticos que expo-
nha o indivduo a um alto risco de infeces que podem ser fatais,
alm de apresentarem um potencial elevado de transmisso por
aerossis ou de agentes relacionados com um risco de transmisso
desconhecido. O NBA-4 baseia-se nos requisitos de prticas, pro-
cedimentos, equipamentos de conteno e instalaes padro do
NBA-3. Os procedimentos devero ser desenvolvidos no prprio
local para direcionar as operaes especcas das cabines de segu-
rana biolgica classe III ou no laboratrio escafandro.
A. Prticas Padro
1. Alm de normas, procedimentos e protocolos padro para
situaes de emergncia estabelecidos pela chea do labo-
ratrio, normas e procedimentos especiais devero ser de-
senvolvidos, quando necessrio, e aprovados pelo Comit
Institucional de Tratamento e Uso de Animais (IACUC)
e pelo Comit Institucional de Biossegurana (IBC).
2. O chefe do laboratrio dever limitar o acesso s salas dos
animais, permitindo o acesso ao menor nmero de pes-
soas possvel. As pessoas que receberem autorizao de
83
SEO IV
entrada, para trabalhar ou realizar algum tipo de servio,
devero ser avisadas em relao ao risco em potencial.
adotado para todas as pessoas que entrarem em um la-
boratrio NBA-4. Esse programa dever incluir imuni-
zaes, coleta para acompanhamento sorolgico, dispo-
nibilidade de aconselhamento ps-exposio e potencial
prolaxia.
10
Em geral, as pessoas que podem estar pas-
sando por um crescente risco de adquirir a infeco ou
para quem as infeces possam ser perigosas no sero
permitidas dentro da sala para animais, a menos que pro-
cedimentos especiais possam eliminar os riscos extras. A
avaliao dever ser realizada pelo mdico do trabalho.
4. Um manual de biossegurana especco para o local de-
ver ser preparado ou adotado. A equipe do laboratrio
dever ser avisada sobre os riscos especiais, ler e seguir
as instrues sobre prticas e procedimentos.
tato e aplicar cosmticos. O alimento de uso humano de-
ver ser guardado somente em reas designadas para tal
m e no ser permitido dentro das salas para os animais
ou salas de procedimentos.
6. Todos os procedimentos devero ser realizados cuidadosa-
mente para minimizar a produo de aerossis e borrifos.
7. Os equipamentos e as superfcies de trabalho na sala
devero ser rotineiramente descontaminados com de-
sinfetante que possua ao comprovada, aps o trabalho
com agentes infecciosos e especialmente aps borrifos,
derramamentos ou outras contaminaes com materiais
infecciosos que tenham ocorrido.
8. Um procedimento para borrifos dever ser desenvolvido
e institudo. Somente o pessoal adequadamente treina-
do e equipado para esse tipo de trabalho dever limpar
os borrifos de materiais infecciosos. Borrifos e acidentes
que resultem em uma exposio direta com materiais in-
fecciosos devero ser imediatamente relatados ao chefe
do laboratrio. Avaliao mdica, vigilncia e tratamento
84
SEO IV
devero ser providenciados e registros por escrito deve-
ro ser mantidos.
9. Todos os rejeitos provenientes das salas de animais (in-
cluindo tecidos animais, carcaas e material da cama con-
taminado), outros materiais que sero descartados e as
roupas ou uniformes usados que iro ser encaminhados
para a lavanderia devero ser esterilizados em uma auto-
clave de porta dupla (veja B-4, a seguir). Recomendamos
a incinerao de materiais descartveis.
10. Normas quanto ao manuseio seguro de objetos perfuro-
cortantes devero ser institudas.
a. Seringas, agulhas ou outros instrumentos perfuro-
cortantes devero ser restritos sala dos animais e
usados somente quando no houver outra alternati-
va, como nos casos de injeo parenteral, coleta de
sangue ou aspirao de lquidos de animais de labo-
ratrio e de garrafas de diafragma.
b. As seringas que possuem um envoltrio para a agu-
lha ou sistemas sem agulhas e outros dispositivos de
c. Vasilhas plsticas devero ser substitudas por vasi-
lhames de vidro sempre que possvel.
trada da sala do laboratrio de experimentao animal,
quando agentes infecciosos estiverem presentes no lo-
cal. O aviso de risco dever identificar o(s) agente(s)
infeccioso(s) em uso, relacionar o nome e o nmero do
telefone da pessoa responsvel e indicar os requisitos es-
peciais para a entrada na sala dos animais (por exemplo,
necessidade de imunizao e do uso de respiradores).
12. As pessoas que cuidam dos animais de laboratrio e as
que do suporte ao programa devero receber treina-
mento adequado sobre os riscos potenciais associados
ao trabalho, sobre as precaues necessrias para evitar
exposies e os procedimentos de avaliao da exposio.
A equipe dever receber cursos anuais de atualizao ou
treinamento adicional quando forem necessrias mudan-
85
SEO IV
as de normas ou procedimentos. Os registros de todo o
treinamento fornecido devero ser mantidos.
13. As caixas e gaiolas dos animais devero passar pela au-
toclave ou tero que ser descontaminadas antes que o
material da cama seja removido e antes de lavadas. Os
equipamentos e as superfcies de trabalho devero ser
rotineiramente descontaminados com desinfetante que
possua ao comprovada, aps o trabalho com materiais
infecciosos e especialmente depois de borrifos, derrama-
mentos ou outras contaminaes com materiais infec-
ciosos. Os equipamentos devero ser descontaminados
de acordo com qualquer regulamento local, estadual ou
federal antes de ser removido do local para reparo ou ma-
nuteno.
14. As pessoas responsveis pelo trabalho com animais in-
fectados devero trabalhar em pares. Baseados na ava-
liao dos riscos (veja a seo V), procedimentos deve-
ro ser adotados, tais como o uso de caixas ou gaiolas de
conteno, realizao de trabalho somente com animais
anestesiados ou outros que visem a reduzir as possveis
exposies do trabalhador.
15. Os materiais no relacionados ao ensaio (por exemplo,
plantas e animais no utilizados) no sero permitidos
no local.
1. Medidas adicionais devero ser efetivadas para controle
do acesso (por exemplo, um sistema de guarda durante
24 horas para entrada e sada de pessoas). A equipe deve-
r entrar ou sair do local somente atravs do vestirio e
das salas de banhos. Cada vez que sair do local, a equipe
dever tomar banho. A entrada ou a sada de pessoal por
antecmara pressurizada somente dever ocorrer em si-
tuaes de emergncia.
2. Em uma operao na cabine de segurana biolgica classe
III, a roupa do pessoal dever ser retirada no vestirio ex-
terno e deixada l mesmo. O traje laboratorial completo,
incluindo peas ntimas, calas e camisas ou macaces,
86
SEO IV
sapatos e luvas, dever ser providenciado e usado pelo
pessoal. Na sada, as pessoas devero retirar os trajes la-
boratoriais no vestirio interno antes de entrar na sala
de banho. A roupa suja (usada) dever ser esterilizada na
autoclave.
3. Nos procedimentos operacionais em laboratrios NBA-
4, dever ser necessria a mudana completa de roupa.
Um banho ser necessrio aps a remoo da roupa des-
contaminada. As roupas sujas do laboratrio devero ser
autoclavadas antes de lavadas.
4. Os materiais e suprimentos que forem introduzidos no
laboratrio devero passar por uma autoclave de por-
ta dupla ou por uma cmara de fumigao. Depois que
a porta externa estiver trancada, as pessoas dentro do
laboratrio devero abrir a porta interna e retirar os ma-
teriais. As portas da autoclave e da cmara de fumigao
devero ser interligadas de maneira que a porta externa
s seja aberta depois que o ciclo de esterilizao tenha
sido concludo ou depois que a cmara de fumigao te-
nha sido descontaminada.
5. Um sistema para noticao de acidentes, incidentes, ex-
posies e absentesmo deve ser estabelecido, bem como
um outro sistema para a vigilncia mdica de doenas
potencialmente associadas ao trabalho em laboratrio.
Um aspecto essencial para essa vigilncia/noticao a
disponibilidade de um local para quarentena, isolamento
e atendimento mdico de pessoas com suspeitas de con-
taminao.
6. As amostras sorolgicas coletadas devero ser analisadas
periodicamente. Os resultados devero ser comunicados
aos participantes.
1. Os animais infectados com microorganismos da classe de
risco 4 devero ser alojados dentro de cabines de segu-
rana biolgica classe III em um laboratrio NBA-4. Em
um laboratrio NBA-4 escafandro, toda a equipe dever
vestir macaces com presso positiva e ventilados com
87
SEO IV
um sistema de suporte de vida. Os animais infectados
devero ser alojados em um sistema de conteno parcial
(como em caixas abertas colocadas em locais ventilados,
caixas de paredes slidas, possuindo um sistema de ven-
tilao e exausto feitas atravs de ltros e abertas em
uxos laminares ou outros sistemas de conteno prim-
ria equivalentes).
2. O uso de materiais descartveis que no requerem lim-
peza, incluindo caixas e gaiolas de animais, dever ser
levado em considerao. Esses materiais descartveis
devero passar pela autoclave na sada do laboratrio e
depois incinerados.
Os laboratrios NBA-4 podero ser includos como uma parte
integrante dos laboratrios NBA-4 de cabine ou aos laboratrios
NBA-4 de escafandro, como descrito na seo III deste documen-
to. Os requisitos para instalao descritos na seo laboratrio
NB-4 devero ser utilizados juntamente com o uso das caixas des-
critas na seo de equipamentos.
88
SEO IV
Tabela 2. Resumo dos nveis de biossegurana recomendados
para as atividades nas quais animais vertebrados infectados
naturalmente ou experimentalmente so utilizados
BSI Agcntcs Prticas
Equipamcntos dc
Scgurana
(Barrciras Primrias)
Instalacs
(Barrciras Sccundrias)
1 Desconhecidos por
causarem doenas
em adultos humanos
sadios.
Cuidados com o animal e as
prticas padro de gerencia-
mento, incluindo progra-
mas de vigilncia mdica
adequados.
Cuidados normais solicitados
de cada espcie.
Instalao padro para animais:
- nenhuma recirculao do ar
exaurido;
- recomendao de fluxo de ar
direcionado;
- recomendao de pia para lava-
gem das mos.
2 Associados com do-
enas humanas. Ris-
co: exposio cut-
nea, ingesto, expo-
sio da membrana
mucosa.
Prticas de NBA-1 mais:
- acesso limitado;
- avisos de risco;
- precauo com objetos
perfurocortantes;
- manual de biossegurana;
- descontaminao de todo
o lixo infeccioso e de caixas
e gaiolas de animais antes
da lavagem.
Equipamento de NBA-1 mais
barreiras primrias: equipa-
mento de conteno adequado
para espcies animais; PPES:
jalecos, luvas, proteo facial
e respiradores quando ne-
cessrios.
Instalaes de NBA-1 mais:
- autoclave disposio;
- pia para lavagem das mos dentro
da sala de animais;
- uso de lavagem mecnica das
caixas e gaiolas.
3 Agentes nativos ou
exticos com elevado
potencial de trans-
misso por aerossis;
doenas que podem
causar srios danos
sade.
Prticas de NB-2 mais:
- acesso controlado;
- descontaminao de todo
o lixo;
- descontaminao da roupa
usada no laboratrio antes
de ser lavada;
- amostra sorolgica.
- acesso controlado;
- descontaminao das roupas
antes de serem lavadas;
- descontaminao das caixas
e gaiolas antes de o material
da cama ser removido;
- lavagem dos ps com desin-
fetante.
Equipamento de NBA-2 mais:
- equipamento de conteno para
manuteno dos animais;
- cabines SB de classe I ou II para
manipulaes (inoculao, ne-
cropsia) que possam criar aeros-
sis infecciosos. PPEs: proteo
respiratria adequada.
- separao fsica dos corredores
de acesso;
- fechamento automtico, porta
dupla de acesso;
- linhas de penetrao seladas;
- janelas vedadas;
- autoclave presente no local.
4 Agentes exticos ou
perigosos que impo-
nham alto risco de
doena fatal, trans-
misso por aeros-
sis ou relacionada
a agentes com risco
de transmisso des-
conhecido.
- entrada atravs do vesti-
rio para troca de roupa
onde a roupa pessoal re-
movida e a do laboratrio,
vestida. Banho na sada;
- todos os lixos devero ser
descontaminados antes da
remoo do local.
Equipamento de NBA-3 mais:
- equipamento de mxima
conteno (CSB classe III ou
de conteno parcial junto
com macaco pressurizado
positivamente com ar) usado
para todas as atividades e os
procedimentos.
- edifcio separado ou rea iso-
lada;
- sistemas de insuao e exausto,
vcuo e sistemas de desconta-
minao;
- outros requisitos enfatizados
no texto.
89
SEO V
AVALIAO DOS RISCOS
A palavra risco indica a probabilidade que um dano, um feri-
mento ou uma doena ocorra. No contexto dos laboratrios bio-
mdicos e de microbiologia, a avaliao do risco se concentra
primariamente na preveno de infeces relacionadas aos labo-
ratrios. Ao enderear atividades laboratoriais que envolvam ma-
teriais infecciosos ou potencialmente infecciosos, a avaliao do
risco um exerccio essencial e produtivo. Ele auxilia a designar
os nveis de biossegurana (instalaes, equipamentos e prticas)
que reduziro, para um risco mnimo, a exposio de trabalhado-
res e do meio ambiente a um agente perigoso. A inteno desta se-
o fornecer um guia e estabelecer parmetros para a seleo do
apropriado nvel de biossegurana.
A avaliao do risco pode ser qualitativa ou quantitativa. Na
presena de riscos conhecidos (por exemplo, nveis residuais de
gs de formaldedo depois da descontaminao do laboratrio),
a avaliao quantitativa poder ser realizada. Mas, em muitos
casos, os dados quantitativos estaro incompletos ou ausentes
(por exemplo, a investigao de um agente desconhecido ou de
uma amostra sem rtulo). Os tipos, os subtipos e as variantes dos
agentes infecciosos envolvendo vetores diferentes ou raros, a di-
culdade de avaliar as medidas de um potencial de amplicao do
agente e as singulares consideraes dos recombinantes genticos
so alguns dos vrios desaos na conduo segura de um labo-
ratrio. Diante de tal complexidade, nem sempre os mtodos de
amostragem quantitativa signicativos esto nossa disposio.
Dessa forma, o processo de avaliao do risco para o trabalho com
90
SEO V
AVALIAO DOS RISCOS
materiais biolgicos perigosos pode no depender de um algorit-
mo prescrito.
O diretor do laboratrio ou o principal pesquisador dever ser
o responsvel pela avaliao dos riscos que implique no estabeleci-
mento de nveis de biossegurana para o trabalho. Isso dever ser
realizado em colaborao com o Institutional Biosafety Committee
(e/ou outros prossionais ou instituies, se necessrio) para as-
segurar a obedincia s normas e regras estabelecidas.
Ao se realizar a avaliao do risco qualitativo, todos os fato-
res de risco devero ser identicados e explorados. Informaes
relacionadas devero estar disponveis na forma de um manual.
Consultas s Normas do NIH de DNA Recombinante, Normas de
Biossegurana em Laboratrios Canadenses e Normas de Segu-
rana da Organizao Mundial da Sade devero ser considera-
das. Em alguns casos, devemos conar nas fontes de informaes,
como os dados de campo de um expert no assunto. Essa informa-
o dever ser interpretada pela sua tendncia em aumentar ou
diminuir o risco de uma infeco adquirida em laboratrio.
1
O desao da avaliao do risco se encontra naqueles casos em
que uma informao completa sobre esses fatores no est nos-
sa disposio. Uma abordagem conservadora geralmente acon-
selhada quando as informaes forem insucientes, forando a
um julgamento subjetivo. As Precaues Universais devero sem-
pre ser recomendadas.
Os fatores de interesse em uma avaliao dos riscos incluem:
A patogenicidade do agente infeccioso ou suspeito, in-
cluindo a incidncia e a gravidade da doena (por exem-
plo, morbidade mdia contra uma mortalidade alta, do-
ena aguda versus doena crnica). Quanto mais grave a
potencialidade da doena adquirida, maior ser o risco.
Por exemplo, o Sthaphilococcus aureus raramente provoca
uma doena grave ou fatal em um indivduo contamina-
do em um laboratrio e est relegado ao NB-2. J vrus
como o ebola, Marburg e da febre de Lassa, que provocam
doenas com alta taxa de mortalidade, para as quais no
existem vacinas ou tratamentos, so trabalhadas em um
91
SEO V
AVALIAO DOS RISCOS
NB-4. Porm, a gravidade da doena precisa ser ameniza-
da por outros fatores. O trabalho com um vrus humano
de imunodecincia (HIV) e com o vrus da hepatite B
tambm feito em um NB-2, embora eles possam causar
uma doena potencialmente fatal. Mas esses vrus no
so transmitidos por meio de aerossis, e a incidncia de
uma infeco adquirida em laboratrio extremamente
baixa para o HIV. No caso da hepatite B, j existe uma
vacina ecaz contra esta patologia.
A via de transmisso (por exemplo, parenteral, via a-
rea ou por ingesto) de agentes isolados recentemente
pode no estar denitivamente estabelecida. Os agentes
que podem ser transmitidos via aerossol tm provocado
grande parte das infeces laboratoriais. Ao planejar o
trabalho com um agente relativamente no caracteriza-
do e com um modo de transmisso desconhecido, o mais
seguro considerar o potencial de transmisso por via
aerossol. Quanto maior o potencial do aerossol, maior o
risco.
A estabilidade do agente um aspecto que envolve no
somente a infectividade por aerossis (por exemplo, por
bactrias formadoras de esporos), mas tambm a capa-
cidade do agente de sobreviver por um tempo extra no
meio ambiente. Fatores como a dissecao, a exposio
luz solar ou ultravioleta ou a exposio a desinfetantes
qumicos devero ser considerados.
A dose infecciosa do agente um outro fator a ser con-
siderado. A dose infecciosa pode variar de uma a milha-
res de unidades. A natureza complexa da interao dos
microorganismos e do hospedeiro apresenta um desao
signicativo at mesmo para o mais saudvel e imuniza-
do trabalhador de laboratrio, podendo impor um srio
risco queles com menos resistncia. O grau de imuniza-
o do trabalhador do laboratrio est diretamente rela-
cionado sua susceptibilidade doena provocada por
um agente infeccioso.
A concentrao (nmero de organismos infecciosos por
unidade de volume) ser importante na determinao do
92
SEO V
AVALIAO DOS RISCOS
risco. Essa determinao dever considerar o meio que
contm o organismo (por exemplo, tecido slido, sangue
viscoso, escarro ou meio lquido) e a atividade laborato-
rial planejada (por exemplo, amplicao, sonicao
ou centrifugao do agente). O volume do material con-
centrado a ser manipulado tambm importante. Na
maioria dos casos, os fatores de risco aumentam com o
aumento do volume de trabalho de microorganismos de
alta titulao, uma vez que um manuseio adicional dos
materiais freqentemente solicitado.
A origem do material potencialmente infeccioso tam-
bm fundamental para a avaliao dos riscos. A palavra
origem pode se referir localizao geogrca (por exem-
plo, domstico ou originrio de outros pases), hospe-
deiro (por exemplo, animal ou ser humano infectado ou
no) ou natureza da fonte (por exemplo, potencialmente
zoontica ou associada a um outro surto de doena). Sob
outro ngulo, esse fator pode tambm levar em conside-
rao o potencial dos agentes que ameaam as aves e os
animais de criao.
A disponibilidade de dados gerados por estudos animais,
na falta de dados humanos, poder fornecer informaes
teis para uma avaliao do risco. As informaes sobre a
patogenicidade, a infectividade e a via de transmisso em
animais podem proporcionar informaes valiosas. Po-
rm, sempre devemos tomar cuidado em traduzir dados
de uma espcie animal para os de outras espcies.
A disponibilidade de uma prolaxia ecaz estabelecida
ou de uma interveno teraputica outro fator impor-
tante a ser considerado. A forma mais comum de prola-
xia a imunizao com uma vacina eciente. A avaliao
do risco inclui a determinao da disponibilidade de imu-
nizaes ecazes. Em alguns casos, a imunizao pode
afetar o nvel de biossegurana (por exemplo, o vrus Ju-
nin do grupo NB-4 pode ser trabalhado no NB-3 por um
trabalhador imunizado). A imunizao tambm pode ser
passiva (por exemplo, o uso de uma imunoglobulina so-
rolgica nas exposies ao HBV). Apesar de importante,
93
SEO V
AVALIAO DOS RISCOS
a imunizao somente servir como uma camada adicio-
nal de proteo mediante os controles de engenharia, as
prticas e os procedimentos padro e o uso de equipa-
mentos de proteo individual. Ocasionalmente, a imu-
nizao ou a interveno teraputica (terapia com antibi-
ticos ou antiviral) pode ser particularmente importante
nas condies de campo. A oferta de imunizaes parte
do gerenciamento do risco.
A vigilncia mdica assegura que as normas de seguran-
a decididas realmente produzam os resultados positivos
esperados. A vigilncia mdica tambm parte da admi-
nistrao do risco. Podemos incluir o banco de soro, o
monitoramento da condio de sade do trabalhador e a
participao em um gerenciamento ps-exposio.
A avaliao do risco tambm pode incluir uma avaliao
da experincia e do nvel de capacitao das pessoas ex-
postas a riscos, como os laboratoristas e as pessoas que
cuidam dos animais, da limpeza e da manuteno (veja
a seo III). Uma educao adicional tambm pode ser
necessria para garantir a segurana das pessoas que tra-
balham em cada um dos nveis de biossegurana.
Os agentes infecciosos cujo risco avaliado freqentemente
sero classicados em uma destas categorias:
Mnieutnts coNieNoo noeNies tNrecctosos coNnectoos.
As caractersticas da maioria dos agentes infecciosos so conhe-
cidas. As informaes teis para a avaliao do risco podem ser
obtidas com pesquisas laboratoriais, vigilncia da doena e estu-
dos epidemiolgicos. Os agentes infecciosos conhecidos por cau-
sarem infeces associadas a laboratrio esto includos no re-
sumo das caractersticas dos agentes, neste volume (veja a seo
VII). Outras fontes incluem o manual do American Public Health
Association, Control of Communicable Diseases.
2
Os artigos liter-
rios sobre infeces adquiridas em laboratrio tambm podero
ser teis.
3, 4, 5, 6, 7, 8

Mnieutnts coNieNoo noeNies tNrecctosos oescoNnect-
oos. O desao aqui estabelecer o nvel de biossegurana mais
adequado, tendo em mos somente informaes limitadas. Com
94
SEO V
AVALIAO DOS RISCOS
freqncia essas sero amostras clnicas. Algumas perguntas que
podero auxili-lo em uma avaliao de risco so as seguintes:
1. Por que um agente infeccioso considerado suspeito?
2. Quais so os dados epidemiolgicos disponveis? Qual
via de infeco indicada? Qual o ndice de morbidade
ou de mortalidade associado ao agente?
3. Quais so os dados mdicos disponveis?
As respostas a essas perguntas podem identicar o agente ou
o agente substituto cujas caractersticas so encontradas no resu-
mo das caractersticas dos agentes e podero ser utilizadas para
determinar um nvel de biossegurana. Na ausncia de dados con-
cretos, recomenda-se uma abordagem conservadora.
Mnieutnts coNieNoo motecutns oe DNA uecomutNnNies.
Essa categoria de agentes inclui os microorganismos que foram
geneticamente modicados por tecnologias do DNA recombinan-
te. Essas tecnologias continuam a ser desenvolvidas rapidamen-
te. Os projetos experimentais designados para extrair novos v-
rus, bactrias, levedo e outros microorganismos recombinantes se
tornaram comuns nos dias de hoje. muito provvel que futuras
aplicaes da tecnologia do DNA recombinante produziro novos
vrus hbridos. A publicao do National Institutes of Health cha-
mada Guidelines for Research Involving Recombinant DNA Molecu-
les
9
um excelente ponto de referncia para a seleo de um nvel
de biossegurana adequado para o trabalho que envolva microor-
ganismos recombinantes.
Ao selecionar um nvel de biossegurana apropriado para este
trabalho, talvez o maior desao seja avaliar o aumento do risco
biolgico associado a uma modicao gentica em particular. Em
grande parte dos casos, a seleo de um nvel de biossegurana
adequado comea ao se estabelecer a classicao dos vrus no
modicados. Entre os vrus recombinantes, agora rotineiramente
desenvolvidos, esto o adenovrus, alfavrus, retrovrus, vrus va-
cnia, herpesvrus e outros designados para expressar os produtos
de genes heterlogos. Porm, a natureza da modicao gentica
e a quantidade de vrus devero ser cuidadosamente considerados
95
SEO V
AVALIAO DOS RISCOS
ao selecionar um nvel de biossegurana adequado para o trabalho
com um vrus recombinante.
Dentre os pontos a serem considerados no trabalho com os mi-
croorganismos recombinantes esto:
O gene inserido codica uma toxina conhecida ou uma
toxina relativamente descaracterizada?
A modicao possui um potencial para alterar o alcance
do hospedeiro ou o tropismo celular do vrus?
A modicao possui um potencial para aumentar a ca-
pacidade de replicao do vrus?
O gene inserido codica um oncogene conhecido?
O gene inserido possui potencial para alterar o ciclo celular?
O DNA viral se integra ao genoma do hospedeiro?
Qual a probabilidade de que cepas de vrus competen-
tes replicados sejam geradas?
A lista de perguntas no signica que seja uma questo inclu-
siva. Pelo contrrio, elas servem como um exemplo de informa-
o necessrio para julgar se um nvel de biossegurana maior
necessrio para o trabalho com microorganismos geneticamente
modicados. J que em muitos casos as respostas para essas per-
guntas no sero denitivas, importante que a empresa possua
um Comit Institucional de Biossegurana constitudo e informa-
do, como enfatizado pelos estatutos do NIH, para vericar a ava-
liao do risco.
Mnieutnts que vossnm coNieu ou Nno noeNies tNrec-
ctosos oescoNnectoos. Na ausncia de informaes que pos-
sam sugerir a infectividade do agente, deve-se considerar as pre-
caues universais.
Esiuoos ANtmnts. Estudos laboratoriais que envolvam ani-
mais podero apresentar muitos tipos diferentes de riscos fsicos,
biolgicos e ao meio ambiente. Os riscos especcos presentes
em qualquer dependncia para animais em particular so nicos,
variando de acordo com as espcies envolvidas e com a natureza
da pesquisa desenvolvida. A avaliao do risco quanto ao perigo
biolgico dever se concentrar particularmente no potencial das
96
SEO V
AVALIAO DOS RISCOS
instalaes animais para uma aumentada exposio de patgenos
humanos e aos agentes zoonticos.
Os prprios animais podem introduzir novos perigos biol-
gicos nas instalaes. As infeces latentes so mais comuns em
animais capturados no campo ou em animais vindos de popula-
es no selecionadas. Por exemplo, o vrus-b do macaco apresen-
ta um risco latente aos indivduos que lidam com smios. As vias
de transmisso animais devem tambm ser consideradas na ava-
liao do risco. Os animais que transmitem vrus por dissemina-
o respiratria ou disseminao na urina ou nas fezes so muito
mais perigosos do que aqueles que no o fazem. As pessoas que
lidam com animais experimentais em locais de pesquisas e traba-
lham com agentes infecciosos apresentam um risco muito maior
de exposio devido s mordidas, aos arranhes e aos aerossis
provocados por eles. A seo IV descreve prticas e instalaes
aplicveis ao trabalho de animais infectados por agentes listados
nos nveis de biossegurana de 1-4.
1
Ouiuns nvttcnes. O processo de avaliao dos riscos des-
critos tambm se aplica s operaes laboratoriais que no envol-
vam o uso de agentes primrios de doenas humanas. verdade
que os estudos microbiolgicos de patgenos especcos de hos-
pedeiros animais, do solo, da gua, dos alimentos, das raes e de
outros materiais naturais ou industrializados impem riscos con-
sideravelmente menores para os laboratoristas. Ainda assim, os
microbiologistas e outros cientistas que trabalhem com esses ma-
teriais podem achar de grande valor tais prticas, equipamentos
de conteno e recomendaes para as instalaes descritas neste
livro, para o desenvolvimento de padres operacionais que aten-
dam a todas as necessidades de suas prprias avaliaes.
97
SEO VI
NVEIS DE BIOSSEGURANA
RECOMENDADOS PARA
AGENTES INFECCIOSOS E
ANIMAIS INFECTADOS
A seleo de um nvel de biossegurana adequado para o tra-
balho envolvendo um agente ou um estudo animal em particular
depende de um nmero de fatores (veja a seo V, Avaliao dos
Riscos). Alguns desses fatores mais importantes so a virulncia,
a patogenicidade, a estabilidade biolgica, a rota de disseminao
e a transmissibilidade do agente; a natureza ou a funo do labo-
ratrio; os procedimentos e as manipulaes envolvendo o agen-
te; a endemicidade do agente e a disponibilidade de vacinas ou de
medidas teraputicas ecazes.
A relao sumria dos agentes apresentada nesta seo pro-
porciona um guia para a seleo dos nveis de biossegurana ade-
quados. Tambm se encontram relacionadas nesta seo as infor-
maes especcas sobre riscos laboratoriais relacionados com um
agente em particular e as recomendaes sobre uma conduta se-
gura de procedimentos que possam reduzir signicativamente o
risco de doenas associadas ao trabalho laboratorial. As relaes
sumrias dos agentes incluem um ou mais dos seguintes critrios:
o agente um fator de risco comprovado para os trabalhadores
que manipulam materiais infecciosos (por exemplo, vrus da hepa-
tite B, M. tuberculosis); o potencial para as infeces associadas ao
trabalho laboratorial elevado mesmo na falta de um documento
prvio das infeces adquiridas em laboratrio (por exemplo, ar-
bovrus exticos) ou as conseqncias da infeco sero graves.
As recomendaes para o uso de vacinas e toxides esto inclu-
das nas relaes sumrias dos agentes, assim como os produtos
licenciados disponveis, alm dos produtos em investigao pelo
Investigational New Drug (IND) (veja o apndice B, Imunoprola-
98
SEO VI
NVEIS DE BIOSSEGURANA RECOMENDADOS PARA AGENTES INFECCIOSOS E ANIMAIS INFECTADOS
xia). Quando aplicvel, as recomendaes para o uso desses pro-
dutos sero baseadas nas recomendaes do Public Health Service
Advisory Committee on Immunization Practice e so especcas s
pessoas que esto expostas a esse tipo de risco, que trabalham em
laboratrio ou as que tm de entrar em reas laboratoriais. Essas
recomendaes especcas de maneira alguma devero impedir o
uso rotineiro desses produtos, como o toxide tetnico-diftrico,
a vacina contra plio, a vacina contra inuenza e outras, porque o
risco potencial de exposio da comunidade independe de quais-
quer riscos laboratoriais. Precaues adequadas devero ser toma-
das na administrao de vacinas atenuadas de vrus vivo em indi-
vduos com sistema auto-imune alterado ou com outra condio
mdica (por exemplo, gravidez), nos quais uma infeco viral pode
resultar em conseqncias adversas.
As avaliaes dos riscos e os nveis de biossegurana recomen-
dados nas relaes sumrias dos agentes referem-se a uma popu-
lao de indivduos imunocompetentes. As pessoas com a imu-
nocompetncia alterada podero ser expostas gradativamente
aos riscos. A imunodecincia pode ser hereditria, congnita ou
induzida por um nmero de doenas neoplsicas ou infecciosas,
por terapia ou por radiao. O risco de se tornar infectado ou a
conseqncia de uma infeco podem tambm ser inuenciados
por fatores, tais como: idade, sexo, raa, gravidez, cirurgias (por
exemplo, esplenectomia, gastrostomia), predisposio a doenas
(por exemplo, diabetes, lpus eritematoso) ou uma funo sio-
lgica alterada. Estas e outras variveis devero ser consideradas
na aplicao das avaliaes dos riscos s atividades especcas dos
indivduos selecionados.
O nvel de biossegurana escolhido para um agente baseado
nas atividades associadas ao crescimento e manipulao das quan-
tidades e concentraes dos agentes infecciosos requeridos para re-
alizar a identicao ou a tipagem. Se as atividades com os mate-
riais infecciosos provocarem um menor risco aos trabalhadores do
que aquelas atividades associadas com a manipulao de culturas,
recomenda-se um nvel de biossegurana menor. Por outro lado, se
as atividades envolverem grandes volumes e/ou altas concentra-
es (quantidades de produo) ou se as manipulaes geralmente
99
SEO VI
provocarem a formao de aerossis ou que sejam intrinsecamente
perigosas, podem ser indicadas precaues individuais especcas
ou se elevar os nveis de conteno primria a secundria.
O termo quantidades de produo se refere a grandes volumes
ou altas concentraes de agentes infecciosos considerados vo-
lumosos em relao quelas usadas para a identicao e a tipa-
gem. A propagao e a concentrao dos agentes infecciosos, como
ocorre na fermentao em grande escala, na produo de antge-
nos e vacinas e em inmeras atividades comerciais e de pesquisa,
lidam claramente com massas signicativas de agentes infecciosos
que so considerados quantidades de produo. Porm, em termos
de um risco potencialmente aumentado em funo da massa de
agentes infecciosos, impossvel denir como quantidades de pro-
duo os volumes ou as concentraes nitas de qualquer agente.
Portanto, cabe ao diretor do laboratrio realizar uma avaliao das
atividades conduzidas e das prticas selecionadas, dos equipamen-
tos de conteno e das instalaes apropriadas ao risco, indepen-
dente do volume ou da concentrao do agente envolvido.
Haver casos em que o diretor do laboratrio ter que sele-
cionar um nvel de biossegurana maior que o recomendado. Por
exemplo, um nvel de biossegurana maior poder ser indicado
pela natureza nica da atividade proposta (por exemplo, a ne-
cessidade de uma conteno especial para aerossis gerados ex-
perimentalmente para estudos de inalao) ou pela proximidade
das reas de risco do laboratrio (por exemplo, um laboratrio de
diagnsticos localizado prximo s reas de atendimento de pes-
soas). Da mesma forma, um nvel de biossegurana recomendado
pode ser adaptado para compensar a ausncia de certas protees
recomendadas. Por exemplo, nas situaes em que recomendado
o nvel de biossegurana 3, pode-se conseguir um nvel satisfat-
rio de proteo nas operaes rotineiras ou repetitivas (por exem-
plo, procedimentos para diagnstico envolvendo a reproduo de
um agente para identicao, tipagem e teste de susceptibilidade)
nos laboratrios onde as caractersticas construtivas satisfaam
as recomendaes para o nvel de biossegurana 2, providos das
boas prticas microbiolgicas, de prticas especiais e de equipa-
mentos de segurana para que o nvel de biossegurana 3 seja ri-
gorosamente seguido.
100
SEO VI
Um exemplo envolve o trabalho com o vrus da imunodecin-
cia humana (HIV). O trabalho de rotina para o diagnstico do v-
rus com amostras clnicas pode ser feito com segurana em um
nvel de biossegurana 2, usando as prticas e os procedimentos
do nvel de biossegurana 2. O trabalho de pesquisa (incluindo
co-cultivo, estudos de replicao do vrus ou manipulaes envol-
vendo o vrus concentrado) pode ser feito em instalaes NB-2,
usando as prticas e os procedimentos de NB-3. As atividades de
produo de vrus, incluindo as concentraes virais, requerem
instalaes NB-3 e o uso de prticas e procedimentos de NB-3
(veja o resumo dos agentes).
A deciso de adaptar as recomendaes do nvel de biossegu-
rana 3, como foi feito no exemplo citado, dever ser tomada so-
mente pelo diretor do laboratrio. Essa adaptao, porm, no
indicada para operaes ou atividades de produo de agentes em
que os procedimentos freqentemente so mudados. O diretor do
laboratrio tambm dever ter uma ateno especial ao estabe-
lecer procedimentos de segurana para os materiais que possam
conter um agente suspeito. Por exemplo, soro de origem humana
pode conter vrus da hepatite B e, dessa forma, todo o sangue ou
os uidos derivados do sangue devero ser manuseados sob con-
dies que evitem ao mximo a exposio cutnea, da membrana
mucosa ou parenteral do pessoal. O escarro enviado ao laborat-
rio para o ensaio do bacilo da tuberculose dever ser manipulado
sob condies que evitem a formao de aerossis durante a ma-
nipulao dos materiais clnicos ou das culturas.
Os agentes infecciosos que atendam aos critrios anterior-
mente estabelecidos esto relacionados pela categoria do agente
na seo VII. Para usar esses sumrios, primeiro localize o agente
na lista pela categoria adequada ao mesmo. Segundo, utilize as
prticas, os equipamentos de segurana e o tipo de instalao re-
comendado nas relaes dos agentes, como descrito na seo VII
para o trabalho com materiais clnicos, culturas, agentes infeccio-
sos ou animais infectados.
O diretor do laboratrio tambm ser o responsvel pela ava-
liao dos riscos e pela utilizao adequada das prticas, dos equi-
pamentos de conteno e das instalaes para os agentes no in-
cludos na lista dos agentes.
101
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
SEO VII-A: AGENTES BACTERIANOS
Agcntc: Bacillus anthracis
Numerosos casos de carbnculo adquiridos em laboratrio, que
acontecem primariamente em locais onde so conduzidas pesqui-
sas do antraz, tm sido relatados.
1, 2
Nenhum caso de antraz que
no esteja associado a laboratrio foi relatado nos Estados Unidos
desde o nal dos anos 50, quando a vacina contra o carbnculo foi
introduzida. Todo trabalho com o B. anthracis requer considera-
es de segurana especiais devido ao seu uso potencial no terro-
rismo biolgico. Os animais naturalmente e experimentalmente
infectados oferecem um risco potencial equipe do laboratrio e
aos tratadores de animais.
Rtscos em Inuouniuto: O agente pode estar presente no
sangue, em exudatos de leso de pele, no lquido cerebroespinhal,
no lquido pleural, no escarro e raramente na urina e nas fezes. O
contato direto e indireto da pele intacta e rachada com culturas
e superfcies laboratoriais contaminadas, inoculaes parenterais
por acidente, e raramente por aerossis infecciosos, considerado
como risco primrio para os trabalhadores de um laboratrio.
Puecnues RecomeNonons: As prticas, os equipamentos
de conteno e as dependncias do nvel de biossegurana 2 deve-
ro ser os procedimentos indicados para as atividades que utili-
zem materiais clnicos e quantidades de culturas infecciosas para
diagnstico. As prticas, os equipamentos de conteno e as de-
pendncias do nvel de biossegurana animal 2 so os recomenda-
102
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
dos para estudos que utilizem roedores de laboratrio infectados
experimentalmente. J as prticas, os equipamentos de conten-
o e as dependncias do nvel de biossegurana 3 so indicados
para o trabalho que envolva quantidades ou concentraes de pro-
duo de culturas e para as atividades com um alto potencial para
a produo de aerossis.
Ouseuvnno: Uma vacina licenciada est disponvel por meio
dos Centers for Disease Control and Prevention. Porm, a imuniza-
o de toda a equipe no recomendada a no ser que o freqente
trabalho com amostras clnicas ou culturas para diagnstico esteja
previsto (por exemplo, laboratrio de diagnstico de doena ani-
mal). Nessas dependncias, a imunizao desse agente pode ser
obtida junto ao CDC. J para a exportao, ligue para o Depart-
ment of Commerce. necessrio um registro do laboratrio com
o CDC antes de enviar ou receber esse agente. Uma licena para
a importao ou o transporte domstico pode ser obtida com a
USDA/APHIS/VS.
Agcntc: Bordetella pertussis
O Bordetella pertussis, um patgeno presente no sistema respi-
ratrio humano e de distribuio mundial, o agente causador da
coqueluche. A doena ocorre tipicamente na infncia; entretanto,
o agente tem sido cada dia mais associado com a doena em adul-
tos.
3, 4, 5
Vrios surtos em trabalhadores da rea da sade foram re-
latados na literatura.
6, 7
Adolescentes e adultos com doena atpica
ou sem diagnstico podem servir como reservatrios da infeco
e podem transmitir o patgeno para recm-nascidos e crianas.
8

Oito casos de infeco em adultos pelo B. pertussis foram docu-
mentados em um instituto de grandes pesquisas. Os indivduos
infectados no trabalhavam diretamente com o microorganismo,
mas possuam um acesso aos espaos em comum de um labora-
trio onde o agente era manipulado. Um caso de transmisso se-
cundria para uma pessoa da famlia foi tambm documentado.
9

Um incidente semelhante ocorreu em uma grande universidade
do meio-oeste dos Estados Unidos, que resultou em dois casos do-
cumentados de infeco adquirida em laboratrio e um caso docu-
mentado de transmisso secundria.
10
Outras infeces com o B.
pertussis adquiridas em laboratrio foram relatadas, assim como
103
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
a transmisso de adulto para adulto no local de trabalho.
11, 12
As
infeces adquiridas em laboratrio resultantes de manipulao
de amostras clnicas ou substncias isoladas no foram relatadas.
A incidncia dessa infeco disseminada no ar inuenciada pela
intimidade e freqncia da exposio de indivduos susceptveis.
Rtscos em Inuouniuto: O agente pode estar presente em
secrees respiratrias, mas no encontrado no sangue ou teci-
do. Uma vez que o modo de transmisso via respiratria, quanto
maior a gerao de aerossis, durante a manipulao de culturas
ou de suspenses concentradas do agente, maior ser o risco.
de conteno e as dependncias do nvel de biossegurana 2 so
recomendados para todas as atividades que envolvam a manipu-
lao de materiais ou culturas conhecida ou potencialmente in-
fecciosas. J o nvel de biossegurana animal 2 dever ser usado
para o alojamento de animais. Os dispositivos e equipamentos de
conteno primria (por exemplo, cabines de segurana biolgi-
ca, conchas de segurana para centrfugas ou centrfugas de se-
gurana especialmente projetadas) devero ser utilizados para as
atividades que provavelmente iro causar a formao de aerossis
potencialmente infecciosos. As prticas, os procedimentos e as
dependncias do nvel de biossegurana 3 so indicados para pro-
dues em grande escala.
Ouseuvnno: As vacinas contra a coqueluche esto dispon-
veis, mas no so atualmente recomendadas para uso em adultos.
Sugere-se ao leitor consultar as recomendaes atuais do Advisory
Committee on Immunization Practices (ACIP), publicada no CDC
Morbidity and Mortality Weekly Report (MMWR), para a vacinao
de adultos contra a coqueluche.
TunNsreuNctn oo AoeNie: A licena de importao desse
agente dever ser obtida junto ao CDC.
Agente: Brucella (B. abortus, B. canis, B. melitensis, B. suis)
A brucelose continua sendo a infeco bacteriana associada a
laboratrio mais comumente relatada.
13, 14, 15
O B. abortus, o B. ca-
nis, o B. melitensis e o B. suis tm provocado vrias doenas em tra-
104
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
balhadores de laboratrios.
16, 17, 18
A hipersensibilidade aos ant-
genos da Brucella tambm prejudicial equipe do laboratrio.
Casos ocasionais tm sido atribudos exposio a animais infec-
tados experimentalmente ou naturalmente e aos seus tecidos.
Rtscos em Inuouniuto: O agente pode estar presente no
sangue, no lquido cerebroespinhal, no smen e ocasionalmen-
te na urina. A maioria dos casos associados a laboratrio ocor-
reu em dependncias para pesquisas e envolveu a exposio ao
agente Brucella largamente produzido. Vrios casos em laborat-
rios clnicos tambm foram constatados em culturas bacteriolgi-
cas desprezadas.
19
O contato direto da pele com culturas ou com
amostras clnicas infecciosas de animais (por exemplo, sangue,
secrees uterinas) est comumente envolvido nesses casos. Os
aerossis formados durante os procedimentos laboratoriais tm
provocado grandes surtos.
20, 21
Pipetagem com a boca, inoculaes
parenterais acidentais e sprays lanados nos olhos, nariz e boca
tambm tm provocado infeces.
Puecnues RecomeNonons: Recomendam-se as prticas do
nvel de biossegurana 2 para atividades que envolvam amostras
clnicas de origem humana ou animal contendo ou potencialmen-
te contendo Brucella spp. patognico. J as prticas, os equipa-
mentos de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 3
e do nvel de biossegurana animal 3 so recomendados, respecti-
vamente, para todas as manipulaes de culturas do Brucella spp.
patognico relacionadas neste resumo e para estudos de animais
experimentais.
Ouseuvnno: Embora as vacinas humanas contra a brucelose
tenham sido desenvolvidas e testadas em outros pases com limi-
tado sucesso, at o momento da publicao deste volume nenhuma
vacina humana encontrava-se disposio nos Estados Unidos.
22
TunNsreuNctn oo AoeNie: A licena para a importao des-
te agente deve ser conseguida junto ao CDC, e a licena de expor-
tao dever ser obtida no Department of Commerce. No caso de
envio ou recebimento deste agente necessrio obter um registro
do laboratrio com o CDC. A licena para importao ou transpor-
te domstico do agente poder ser obtida no USDA/APHIS/VS.
105
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Agcntcs: Burkholderia pseudomallei
(Pseudomonas pseudomallei)
Dois casos de melioidose associados a laboratrio foram rela-
tados: um associado exposio massiva da pele aos aerossis e, o
segundo, provocado pela formao de aerossis durante a destrui-
o de uma cultura que se supunha ser de Ps. Cepacia, em frasco
aberto atravs de ondas sonoras de alta freqncia.
24
Rtscos em Inuouniuto: Este agente pode estar presente no
escarro, no sangue, nos exsudatos de um ferimento e em vrios
tecidos, dependendo do local da infeco. O contato direto com
culturas e materiais infecciosos de homens, animais ou do meio
ambiente, a ingesto, a auto-inoculao e a exposio aos aeros-
sis e perdigotos infecciosos so considerados como riscos prim-
rios de um laboratrio. O agente tem sido encontrado em sangue,
escarro e materiais de abscesso e pode estar presente em amos-
tras de solo e de gua de reas endmicas.
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so re-
comendados para todas as atividades que envolvam lquidos cor-
porais, tecidos e culturas reconhecidamente ou potencialmente
infecciosas. Deve-se usar luvas ao manusear animais infectados
durante a necropsia e quando existir a possibilidade de contato
direto da pele com os materiais infecciosos dos animais. A con-
teno primria e as precaues pessoais adicionais, como aque-
las descritas para o nvel de biossegurana 3, podem ser indicadas
para atividades com um alto potencial para produo de aeros-
sis ou perdigotos e para as atividades envolvendo quantidades
ou concentraes de produo de materiais infecciosos. As vacinas
no se encontram atualmente disposio para o uso em homens.
TunNsreuNctn oo AoeNie: Entre em contato com o Depart-
ment of Commerce para uma licena de exportao do agente.
Agcntc: Campylobacter (C. jejuni/C. coli, C. fetus subsp. fetus)
O C. jejuni/C. coli gastroenteritis raramente a causa de doenas
associadas a laboratrio, embora alguns casos adquiridos em labo-
ratrio tenham sido documentados.
25, 26, 27
Numerosos animais do-
msticos e selvagens, incluindo aves, animais de estimao, ani-
106
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
mais de fazenda, animais de laboratrio e pssaros selvagens so
reconhecidos como reservatrios e so uma fonte potencial de in-
feco para as pessoas que cuidam desses animais e que trabalham
no laboratrio. Animais experimentalmente infectados tambm
so uma fonte potencial de infeco.
28
Rtscos em Inuouniuto: As campylobacters patognicas po-
dem ser encontradas em amostras fecais em grande nmero. A
C. fetus subsp. fetus pode tambm estar presente no sangue, nos
exsudatos de abscessos, nos tecidos e no escarro. A ingesto ou
inoculao parenteral da C. jejuni constitui os riscos primrios de
um laboratrio. A ingesto oral de 500 microorganismos provo-
cou uma infeco em um indivduo.
29
A importncia da exposio
aos aerossis no conhecida.
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so re-
comendados para atividades que envolvam culturas ou materiais
clnicos potencialmente infecciosos. As prticas, os equipamentos
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana animal 2
so recomendados para atividades com animais experimental ou
naturalmente infectados. As vacinas, atualmente, no se encon-
tram disposio para o uso em humanos.
TunNsreuNctn oo AoeNie: Para obteno de uma licena
para importao, entre em contato com o CDC.
Agcntcs: Chlamidia psittaci, C. pneumoniae, C. trachomatis.
Infeces como a psitacose, tracoma e o linfogranuloma ven-
reo j foram, no passado, as infeces bacterianas mais comuns
associadas a laboratrio.
30
Em casos relatados antes de 1955,
31

a maioria das infeces diagnosticadas era de psitacose, que era
a doena que apresentava o mais alto ndice de mortalidade de
agentes infecciosos adquiridos em laboratrio. O contato e a ex-
posio aos aerossis infecciosos ao manusear, cuidar ou realizar
necropsias em animais natural ou experimentalmente infectados
so as maiores fontes de transmisso da psitacose associada a la-
boratrio. Ratos e ovos infectados so fontes menos importantes
do C. psittaci. Os animais de laboratrio no so fontes relatadas
de infeco humana com o C. trachomatis.
107
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Rtscos em Inuouniuto: A bactria C. psittaci pode estar
presente nos tecidos, nas fezes, nas secrees nasais e no sangue
de pssaros infectados e no sangue, no escarro e nos tecidos de
homens infectados. A C. trachomatis pode estar presente nos l-
quidos genitais, bulbares e conjuntivais de homens infectados. A
exposio aos aerossis e perdigotos infecciosos produzidos du-
rante o manuseio de pssaros e tecidos infectados o risco prim-
rio para os trabalhadores de um laboratrio que trabalham com a
bactria psitacose. J os riscos primrios em um laboratrio, em
relao ao C. trachomatis, se encontram na inoculao parenteral
acidental e na exposio direta ou indireta das membranas muco-
sas dos olhos, do nariz e da boca aos lquidos genitais, bulbares e
conjuntivais, aos materiais de culturas de clulas e aos lquidos de
ovos infectados. Os aerossis infecciosos tambm podem ser uma
fonte potencial de infeco.
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so os
recomendados para atividades envolvendo a necropsia de pssa-
ros infectados e no diagnstico de tecidos ou de culturas conhe-
cidas por conterem ou estarem potencialmente infectadas com a
C. psittaci ou a C. trachomatis. Para reduzir o risco de formao de
aerossis de fezes e secrees nasais infectadas contidas nas asas
e nas superfcies externas do pssaro, o melhor procedimento
molhar as asas dos pssaros infectados com um detergente-desin-
fetante antes de realizar a necropsia. As prticas, os equipamen-
tos de conteno, as instalaes e a proteo respiratria do nvel
de biossegurana animal 2 so os procedimentos indicados para
as pessoas que realizam trabalhos com pssaros engaiolados natu-
ral ou experimentalmente infectados. Recomenda-se o uso de lu-
vas para a necropsia dos pssaros e ratos, para a abertura de ovos
inoculados e quando houver a possibilidade de contato direto da
pele com tecidos infectados, lquido bulbar e outros materiais cl-
nicos. As instalaes e as prticas do nvel de biossegurana 3 so
indicadas para as atividades com alto potencial de produo de
perdigotos ou aerossis e para as atividades envolvendo grandes
quantidades ou concentraes de materiais infecciosos.
Ouseuvnno: Atualmente, as vacinas para esses agentes no
se encontram disponveis para o uso humano.
108
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Transferncia dos Agentes: Para obter uma licena para exporta-
o dos agentes, entre em contato com o Department of Commerce.
Agcntc: Clostridium botulinum
Embora s exista um relatrio
32
sobre o botulismo associado
ao manuseio do agente ou da toxina no laboratrio ou no trabalho
com animais natural ou experimentalmente infectados, as conse-
qncias de tais intoxicaes ainda so consideradas bem graves.
O trabalho com culturas de C. botulinum requer consideraes es-
peciais de segurana devido ao uso potencial dessas culturas no
terrorismo biolgico.
Rtscos em Inuouniuto: O C. botulinum ou a sua toxina pode
estar presente em uma variedade de produtos alimentcios, em
materiais clnicos (soro, fezes) e amostras do meio ambiente (solo,
gua de superfcie). A exposio toxina do C. botulinum conside-
rada o risco laboratorial primrio. Essa toxina pode ser absorvida
aps ingesto ou contato posterior com a pele ou com as membra-
nas mucosas, incluindo o trato respiratrio. A inoculao paren-
teral acidental tambm representa uma signicativa exposio
toxina. O crescimento das culturas em caldos, quando sob tima
produo de toxina, pode conter uma DL
50
de 2x10
6
ratos por mL.
34
indicados para todas as atividades com materiais conhecidos por
conter ou potencialmente conter a toxina. Um toxide pentava-
lente do botulismo (ABCDE) encontra-se disponvel por meio dos
Centers for Disease Control and Prevention, como uma nova droga
de pesquisa (IND). Esse toxide indicado para as pessoas que
trabalham com culturas de C. botulinum ou com suas toxinas. So-
lues de hipoclorito de sdio (0.1%) ou de hidrxido de sdio
(0.1 N) inativam a toxina prontamente e so recomendadas para
a descontaminao das superfcies de trabalho e de perdigotos de
culturas ou de toxinas. Cuidados pessoais e conteno primria
adicional, como os recomendados para o nvel de biossegurana 3,
so indicados para as atividades com um alto potencial para a pro-
duo de aerossis ou perdigotos e para as atividades envolvendo
quantidades grandes de toxinas. As prticas, os equipamentos de
109
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
conteno e as instalaes do nvel de biossegurana animal 2 so
indicados para estudos de diagnsticos e titulao da toxina.
TunNsreuNctn oo AoeNie: Para obter uma licena de im-
portao para esse agente, entre em contato com o CDC.
Agcntc: Clostridium tetani
Embora o risco de infeco da equipe do laboratrio seja in-
signicante, cinco incidentes relacionados exposio do pessoal
durante a manipulao da toxina foram relatados.
35
Rtscos em Inuouniuto: A inoculao parenteral acidental e
a ingesto da toxina so consideradas como risco primrio para a
equipe laboratorial. Como no se tem certeza se a toxina pode ser
absorvida atravs das membranas mucosas, os riscos associados
aos aerossis e perdigotos ainda permanecem desconhecidos.
Puecnues RecomeNonons: As prticas, os equipamen-
tos de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so
indicados para atividades envolvendo a manipulao de culturas
ou toxinas. Embora o risco de ttano associado a laboratrio seja
baixo, a administrao de um toxide ttano-difteria adulto, em
intervalos de 10 anos, reduz o risco de exposio toxina e de
contaminao por ferimento do pessoal do laboratrio e dos tra-
tadores de animais e , portanto, altamente recomendada.
36
O lei-
tor dever consultar as atuais recomendaes do Advisory Commit-
tee on Immunization Practices (ACIP), publicadas no CDC Morbidity
and Mortality Weekly Report (MMWR), para a vacinao de adultos
contra o C. tetani.
TunNsvouie oo AoeNie: Para obter uma licena de impor-
tao para esse agente, entre em contato com o CDC e com o De-
partment of Commerce para uma licena de exportao. O regis-
tro do laboratrio com o CDC ser necessrio antes do envio ou
recebimento do agente.
Agcntc: Corynebacterium diphtheriae
As infeces com o C. diphtheriae associadas a laboratrio tm
sido relatadas, ao contrrio das associadas a animais de laboratrio.
37
Rtscos em Inuouniuto: O agente pode estar presente em ex-
sudatos ou secrees de nariz, garganta (amgdala), faringe, laringe,
110
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
ferimentos, sangue e sobre a pele. A inalao, a inoculao parente-
ral acidental e a ingesto so os riscos primrios em um laboratrio.
indicados para todas as atividades utilizando materiais clnicos ou
culturas potencial ou conhecidamente infectadas. J as prticas
do nvel de biossegurana animal 2 so indicadas para estudos que
utilizem animais de laboratrio infectados. Embora o risco da dif-
teria associado a laboratrio seja baixo, a administrao de um to-
xide ttano-difteria adulto em intervalos de 10 anos pode poste-
riormente reduzir o risco de exposies toxina e a trabalhos com
materiais infecciosos pela equipe do laboratrio e aos tratadores
de animais.
38
O leitor dever consultar as atuais recomendaes
do Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP), publica-
das no CDC Morbidity and Mortality Weekly Report (MMWR), para
a vacinao contra o C. diphtheriae.
TunNsreuNctn oo AoeNie: Para obteno de uma licena
para esse agente, entre em contato com o CDC.
Agcntcs: Escherichia coli (organismos produtorcs
(VTEC/SIT) dc citotoxina)
As cepas produtoras de citotoxina (VTEC/SLT) da Escherichia
coli (tambm chamada de cepas enteroemorrgicas) so riscos
comprovados para as pessoas que trabalham em laboratrios nos
Estados Unidos e em outros locais.
39, 40, 41
A sndrome urmica he-
moltica ocorre em uma pequena proporo de pacientes (geral-
mente crianas) e a responsvel pela maioria das mortes asso-
ciadas s infeces com esses organismos. Os animais domsticos
de fazendas (em particular os bovinos) so reservatrios signi-
cativos do organismo. Porm, os pequenos animais experimental-
mente infectados tambm so fontes de infeces no laboratrio.
Rtscos em Inuouniuto: A E. coli enteroemorrgica ge-
ralmente isolada nas fezes. Uma grande variedade de alimentos
contaminados com esses agentes pode servir como veculo de
transmisso e inclui a carne moda crua e os produtos de laticnio
no-pasteurizados. Ela raramente encontrada no sangue de ho-
mens e animais infectados. A ingesto o risco laboratorial pri-
111
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
mrio. A importncia da exposio aos aerossis ainda no co-
nhecida.
indicados para todas as atividades utilizando materiais clnicos
ou culturas conhecidamente ou potencialmente infecciosos. J as
prticas do nvel de biossegurana animal 2 so indicadas para as
atividades com animais natural ou experimentalmente infectados.
Atualmente, as vacinas para uso em homens no se encontram
disposio. O leitor deve consultar as recomendaes atualizadas
do ACIP, relacionadas no CDC Morbidity and Mortality Weekly Re-
port (MMWR), sobre a existncia de indicaes para a vacinao
contra cepas enteroemorrgicas de E. coli.
TunNsreuNctn oo AoeNie: A licena para importao desse
agente dever ser obtida no CDC.
Agcntc: Francisella tularensis
A tularemia tem sido uma infeco bacteriana associada a la-
boratrio comumente relatada.
42
Quase todos os casos ocorreram
nas dependncias onde a pesquisa da tularemia estava sendo re-
alizada. Casos ocasionais tm sido relacionados ao trabalho com
animais natural ou experimentalmente infectados ou seus ecto-
parasitas. Embora no tenham sido relatados, existem casos que
ocorreram em laboratrios. O trabalho com culturas de F. tularen-
sis requer uma segurana especial devido ao seu potencial uso no
terrorismo biolgico.
exsudatos de leses, nas secrees respiratrias, no lquido cere-
broespinhal, no sangue, na urina, nos tecidos de animais infecta-
dos e nos lquidos de artrpodes infectados. Resultaram em in-
feco o contato direto da pele ou de membranas mucosas com
materiais infecciosos, a inoculao parenteral acidental e a inges-
to e a exposio aos aerossis e perdigotos infecciosos. A infec-
o tem sido mais comumente associada s culturas do que aos
materiais clnicos e animais infectados. As doses de 25% a 50%
infecciosas para homens so de aproximadamente 10 microorga-
nismos pela via respiratria.
43
112
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
de conteno e as dependncias do nvel de biossegurana 2 so
indicados para as atividades com materiais clnicos de origem hu-
mana ou animal contendo ou potencialmente contendo Francisella
tularensis. J as prticas, os equipamentos de conteno e as ins-
talaes do nvel de biossegurana 3 e do nvel de biossegurana
animal 3 so indicados, respectivamente, para todas as manipula-
es de culturas e para estudos de animais experimentais.
Ouseuvnno: A vacinao contra a F. tularensis encontra-se
disposio para a populao e deve ser levada em considerao pe-
las pessoas que trabalham com materiais infecciosos ou roedores
infectados. A vacina tambm recomendada para as pessoas que
trabalham com o agente ou animais infectados e para aquelas que
trabalham dentro ou que entram no laboratrio ou na sala para
animais onde as culturas ou animais infectados esto sendo man-
tidos.
44
O leitor dever consultar as recomendaes atualizadas do
Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP), publicadas
no CDC Morbidity and Mortality Weekly Report (MMWR), sobre as
recomendaes para vacinas contra a F. tularensis.
TunNsreuNctn oo AoeNie: Para obteno de licena para
importao do agente, entre em contato com o CDC. Se a licena
for para exportao do agente, entre em contato com o Depart-
ment of Commerce. O registro do laboratrio com o CDC necess-
rio antes do envio ou recebimento do agente.
Agcntc: Heliobacter pylori
Desde a sua descoberta em 1982, a Heliobacter pylori tem rece-
bido uma grande ateno como um agente causador da gastrite.
45

O habitat principal da H. pylori a membrana mucosa gstrica hu-
mana. A infeco com esse agente pode ser longa quanto dura-
o, com poucos ou nenhum sintoma ou pode-se apresentar como
uma doena gstrica aguda. Tanto as infeces humanas associa-
das a laboratrios experimentais quanto as acidentais foram rela-
tadas.
46, 47
O agente pode estar presente nas secrees gstricas ou
orais e nas fezes. A transmisso, embora no seja completamente
clara, acredita-se ser atravs da via oral-fecal ou oral-oral.
113
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Rtscos em Inuouniuto: O agente pode ser encontrado nas
secrees gstricas e orais ou nas fezes. A ingesto o principal
risco dentro de um laboratrio. A importncia da exposio aos
aerossis desconhecida.
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so indi-
cados para as atividades com materiais clnicos e culturas conheci-
damente ou potencialmente infectados pelo agente. J as prticas,
os equipamentos de conteno e as instalaes do nvel de biosse-
gurana animal 2 so indicados para atividades com animais natu-
ral ou experimentalmente infectados. Atualmente, as vacinas no
se encontram disposio para o uso em homens.
TunNsreuNctn oo AoeNie: A licena para importao do
agente poder ser obtida junto ao CDC.
Agcntc: Leptospira interrogans todos os sorotipos
A leptospirose um risco laboratorial muito bem documenta-
do. Pike relatou 67 infeces associadas a laboratrio, 10 mortes
48

e ainda trs casos foram relatados em outros locais.
49

Um coelho infectado experimentalmente foi identicado como
uma fonte de contaminao do L. interrogans sorotipo icterohemor-
rhagiae.
50
Tanto o contato direto e indireto com lquidos e tecidos
de mamferos natural ou experimentalmente infectados, durante o
manuseio e o cuidado, quanto a necropsia so fontes potenciais de
infeco. Em animais com infeces renais crnicas, o agente en-
contrado na urina em numerosas quantidades por longos perodos.
Rtscos em Inuouniuto: O agente pode ser encontrado na
urina, no sangue e nos tecidos de animais e homens infectados. A
ingesto, a inoculao parenteral acidental e o contato direto ou
indireto da pele ou da membrana mucosa com culturas, tecidos ou
lquidos corporais infectados especialmente a urina so con-
siderados riscos laboratoriais primrios. Ainda no se conhece a
importncia da exposio aos aerossis.
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so in-
dicados para todas as atividades que envolvam o uso ou a manipu-
114
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
lao de tecidos, lquidos corporais e culturas conhecidamente ou
potencialmente infecciosas e para o alojamento de animais infecta-
dos. Recomenda-se o uso de luvas para o manuseio e a necropsia de
animais infectados e quando houver uma possibilidade de contato
direto da pele com os materiais infectados. Atualmente, as vacinas
contra o agente no se encontram disposio para uso em homens.
TunNsreuNctn oe AoeNies: Uma licena para importao
dos agentes poder ser obtida junto ao CDC. Uma licena para im-
portao ou transporte domstico do agente poder ser obtida no
USDA/APHIS/VS.
Agcntc: Listeria monocytogenes
A Listeria monocytogenes oferece um risco potencial para a
equipe do laboratrio. Os bacilos aerbicos gram-positivos e no
formadores de esporos so hemolticos e catalase positivos.
51
As
bactrias tm sido isoladas no solo, na poeira, no alimento huma-
no, nos animais e nos humanos assintomticos.
52, 53
A maioria dos
casos de listerose aconteceu devido ingesto de alimentos conta-
minados, mais notavelmente de queijos suaves, carne crua e vege-
tais crus no-lavados.
54
Embora adultos e crianas saudveis pos-
sam contrair a infeco por Listeria, elas geralmente no adquirem
uma doena sria. J as mulheres grvidas, os recm-nascidos e as
pessoas com um sistema imunodeciente fazem parte do grupo
de risco e adquirem a forma grave da doena.
Rtscos em Inuouniuto: A Listeria monocytogenes pode ser
encontrada nas fezes, no lquido cerebroespinhal e no sangue, as-
sim como em alimentos e materiais provenientes do meio am-
biente.
55, 56
Os animais naturalmente ou experimentalmente in-
fectados so uma fonte de exposio para os trabalhadores de
laboratrio, para as pessoas que zelam pelos animais e para outros
animais. A ingesto o modo de exposio mais provvel, mas a
Listeria tambm pode causar infeces nos olhos e na pele aps
uma exposio direta. As infeces causadas pelo agente em mu-
lheres grvidas ocorrem com mais freqncia no terceiro semes-
tre e podem precipitar o parto. A transmisso transplacentria do
agente oferece um grave risco ao feto e pode at resultar em um
abscesso disseminado, contribuindo para o ndice de mortalidade
de aproximadamente 100%.
57
115
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
dicados para todas as atividades com amostras clnicas e culturas
reconhecidas ou suspeitas de conterem o agente. Recomenda-se o
uso de luvas e proteo para os olhos ao manusear culturas infec-
tadas. As prticas, os equipamentos de conteno e as instalaes
do nvel de biossegurana animal 2 so indicados para atividades
com animais natural ou experimentalmente infectados. Atualmen-
te, as vacinas no se encontram disposio para uso humano.
58

Mulheres grvidas que trabalham com o agente em um laboratrio
de diagnstico ou de pesquisa devero ser informadas sobre os ris-
cos potenciais associados ao agente, inclusive para o feto.
TunNsreuNctn oo AoeNie: Uma licena para importao ou
transporte domstico do agente poder ser obtida junto ao USDA/
APHIS/VS.
Agcntcs: Legionella pneumophila
(c outros agcntcs scmclhantcs a Legionella)
Devido a uma presumida exposio aos aerossis ou perdigo-
tos durante estudos animais com o agente da febre de Pontiac (L.
pneumophilia), um nico documento apresentando um caso de le-
gionelose associado a laboratrio foi relatado.
59
A transmisso de
homem para homem ainda no foi documentada.
As infeces experimentais so prontamente produzidas em
cobaias e ovos de galinha embrionrios.
60
Coelhos de laboratrio
tambm desenvolvem anticorpos, mas no a doena clnica, en-
quanto que os camundongos so resistentes exposio paren-
teral. Estudos no publicados dos Centers for Disease Control and
Prevention mostram que a transmisso de animais para animais
no acontece em uma variedade de espcies mamferas e avcolas
experimentalmente infectadas.
Rtscos em Inuouniuto: O agente pode ser encontrado no
lquido pleural, no tecido, no escarro e nas fontes do meio am-
biente (por exemplo, gua de torre). Uma vez que o modo natural
de transmisso aparentemente via area, o maior risco potencial
a produo de aerossis durante a manipulao de culturas ou
de outros materiais que contenham uma grande concentrao de
116
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
microorganismos infecciosos (por exemplo, tecidos e o saco vite-
lino infectado).
cados para todas as atividades envolvendo o uso ou a manipulao
de materiais clnicos ou de culturas sabiamente ou potencialmen-
te infecciosas. J as prticas do nvel de biossegurana 3 com dis-
positivos de conteno primrios e equipamentos (por exemplo,
cabines de segurana biolgica, conchas de segurana em centr-
fugas) so usadas para atividades que possivelmente produzem
aerossis potencialmente infecciosos e para as atividades que en-
volvam quantidades de produo de microorganismos.
Ouseuvnno: Atualmente, as vacinas para uso em homens
no se encontram disposio.
TunNsreuNctn oo AoeNie: A obteno de uma licena para
importao do agente dever ser feita junto ao CDC.
Agcntc: Mycobacterium leprae
A transmisso parenteral acidental da lepra de homens para
homens tem sido relatada aps a contaminao de um cirurgio
por uma picada acidental de uma agulha
61
e pelo uso de uma agu-
lha para tatuagem provavelmente contaminada.
62
No existem ca-
sos relatados que tenham sido provocados pelo trabalho em um
laboratrio envolvendo bipsias ou outros materiais clnicos de
origem humana e animal. Embora a lepra que ocorra naturalmen-
te e as doenas semelhantes lepra tenham sido relatadas em ta-
tus
63
e em primatas no-humanos,
64, 65
o ser humano o nico re-
servatrio importante da doena.
Rtscos em Inuouniuto: O agente infeccioso pode ser en-
contrado em tecidos e exsudatos de leses de homens infectados e
em animais natural ou experimentalmente infectados. O contato
direto da pele e das membranas mucosas com materiais e inocu-
laes parenterais acidentais infecciosas considerado risco pri-
mrio de um laboratrio, associado com o manuseio de materiais
clnicos infecciosos.
117
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
cados para todas as atividades com materiais clnicos sabidamen-
te ou potencialmente infecciosos de homens e animais infectados.
Um cuidado especial deve ser tomado para evitar uma inoculao
parenteral acidental com instrumentos cortantes contaminados.
As prticas, os equipamentos de conteno e as instalaes do nvel
de biossegurana animal 2 so indicados para estudos animais que
utilizem roedores, tatus e primatas-no humanos. Atualmente, as
vacinas para uso em humanos no se encontram disposio.
Agcntcs: Mycobacterium spp. difcrcntc da M. tuberculosis, M.
bovis ou M. leprae
Pike relatou 40 casos de tuberculose no-pulmonar que se acre-
ditava estar relacionada a acidentes ou incidentes ocorridos no la-
boratrio ou na sala de autpsia.
66
Provavelmente, essas infeces
eram provocadas por um outro tipo de micobactria que no a M.
tuberculosis ou a M. bovis. Um nmero de micobactrias que so
ubquas na natureza associado com outras doenas que no a tu-
berculose ou a lepra em homens, animais domsticos e selvagens.
Em relao s caractersticas, esses organismos so infecciosos,
mas no so contagiosos. J clinicamente, as doenas associadas
com as infeces por essas atpicas bactrias podem ser divididas,
em geral, em trs categorias:
1. Doenas semelhantes tuberculose, que podem estar
associadas com a infeco pelo complexo M. kansasii, M.
avium e raramente pelo M. xenopi, M. malmoense, M. asia-
ticum, M. simiae e M. szulgai.
2. Limfadenitis, que podem estar associadas infeco pelo
complexo M. scrofulaceum, M. avium e raramente pelo M.
fortuitum e M. kansasii.
3. lceras de pele e infeces de ferimentos do tecido mole,
que podem estar associadas infeco pelo complexo M.
ulcerans, M. marinum, M. fortuitum e M. chelonei.
118
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Rtscos em Inuouniuto: Os agentes podem ser encontrados
no escarro, nos exsudatos de leses, nos tecidos e em amostras do
meio ambiente (por exemplo, solo e gua). O contato direto da
pele ou da membrana mucosa com materiais infecciosos, a inges-
to e a inoculao parenteral acidental so riscos primrios labo-
ratoriais associados aos materiais clnicos e s culturas. Um risco
de infeco potencial aos trabalhadores de laboratrio tambm
oferecido pelos aerossis infecciosos criados durante a manipula-
o do caldo de culturas ou homogeneizao de tecidos contendo
esses organismos associados doena pulmonar.
dicados para atividades com materiais clnicos e culturas de Myco-
bacterium spp. com exceo dos tipos M. tuberculosis ou M. bovis.
As prticas, os equipamentos de conteno e as instalaes do n-
vel de biossegurana animal 2 so indicados para estudos animais
com a micobactria que no a M. tuberculosis, M. bovis ou M. leprae.
Atualmente, as vacinas para uso humano ainda no se encontram
disponveis.
Agcntc: Mycobacterium tuberculosis, M. bovis
As infeces com a Mycobacterium tuberculosis e a M. bovis (in-
cluindo a BCG) so um risco comprovado aos trabalhadores de
laboratrio, assim como para outras pessoas que podem estar
expostas aos aerossis infecciosos no laboratrio.
67, 68, 69, 70, 71
A in-
cidncia da tuberculose em pessoas que trabalham com a M. tu-
berculosis em laboratrio tem sido relatada como sendo trs vezes
maior do que em pessoas que no trabalham com o agente. Prima-
tas no-humanos infectados natural ou experimentalmente so
uma fonte comprovada de infeco humana (por exemplo, o ndi-
ce de converso anual de tuberculina em pessoas que trabalham
com primatas no-humanos infectados de aproximadamente
70/10.000 se comparado ao ndice de menos de 3/10.000 da po-
pulao em geral).
73
Cobaias ou camundongos experimentalmente
infectados no oferecem o mesmo risco, uma vez que ncleos em
perdigotos no so produzidos pela tosse nessas espcies. Porm,
119
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
o dejeto de animais infectados pode se tornar contaminado e ser-
vir como uma fonte de aerossis infecciosos.
Rtscos em Inuouniuto: Os bacilos da tuberculose podem
ser encontrados no escarro, nos lquidos de lavagem gstrica, no
lquido cerebroespinhal, na urina e nas leses em vrios tecidos.
74

A exposio aos aerossis produzidos em laboratrio o risco
mais importante encontrado. Os bacilos da tuberculose podem
sobreviver em esfregaos xados com o calor
75
e ser nebulizados
na preparao de seces congeladas e durante a manipulao de
culturas lquidas. Devido baixa dose infecciosa da M. tuberculosis
para homens (i.e., DI
50
< 10 bacilos) e, em alguns laboratrios, um
alto ndice de isolamento de organismos resistentes ao cido ori-
ginado de amostras clnicas (>10%),
76
o escarro e outras amostras
clnicas de casos de tuberculose suspeitos ou j comprovados de-
vem ser considerados potencialmente infecciosos e manipulados
com os adequados cuidados.
dicados para as manipulaes de materiais clnicos que no produ-
zam aerossis, como a preparao de esfregaos cido-resistentes.
Todas as atividades que formem aerossis devero ser conduzidas
em cabines de segurana biolgicas classe I ou II. Recomenda-se o
uso de uma bandeja para aquecer a lmina ao invs de sec-la em
um bico de Bunsen. A liquidicao ou a concentrao do escarro
para a colorao cido-resistente pode tambm ser conduzida de
forma segura em uma bancada aberta, tratando, primeiramente, a
amostra (em uma cabine de segurana classe I ou II) com um igual
volume de soluo de hipoclorito de sdio a 5% (branqueamento
domstico no-diludo) e, depois, esperando 15 minutos antes da
centrifugao.
77, 78
As prticas, os equipamentos de conteno e as instalaes do
nvel de biossegurana 3 so indicados para atividades laborato-
riais na propagao e na manipulao de culturas de M. tuberculo-
sis ou M. bovis e para estudos animais que utilizem primatas no-
humanos naturalmente ou experimentalmente infectados com a
M. tuberculosis ou a M. bovis. Estudos animais utilizando cobaias
120
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
ou camundongos podem ser conduzidos em um nvel de biossegu-
rana animal 2.
79
Ouseuvnno: O teste cutneo com uma protena puricada
derivada (PPD) de pessoas que trabalham em laboratrios e apre-
sentem um teste cutneo negativo pode ser usado como um pro-
cedimento de vigilncia. Uma vacina de vrus vivo atenuado (BCG)
encontra-se disposio, mas no usada nos Estados Unidos
para equipes de laboratrio. O leitor deve consultar as recomen-
daes atuais do Advisory Committee on Immunization Practices
(ACIP), publicadas no CDC Morbidity and Mortality Weekly Report
(MMWR), para as recomendaes atuais de vacinao.
importao do agente conseguida no CDC. J a licena para im-
portao e transporte domstico da M. bovis deve ser obtida junto
ao USDA/APHIS/VS.
Agcntc: Neisseria gonorrhoeae
As infeces gonoccicas associadas a laboratrio tm sido re-
latadas nos Estados Unidos.
80
Rtscos em Inuouniuto: Esse agente pode ser encontrado em
exsudatos cervicais, uretrais e conjuntivais, no lquido sinovial, na
urina, nas fezes e no lquido cerebroespinhal. A inoculao paren-
teral acidental e o contato direto ou indireto da membrana mucosa
com materiais infecciosos so os riscos primrios laboratoriais co-
nhecidos. A importncia dos aerossis no foi ainda determinada.
dicados para todas as atividades que envolvam o uso ou a mani-
pulao de materiais clnicos ou de culturas. Recomenda-se o uso
de luvas ao manipular animais laboratoriais infectados e quando
houver a possibilidade do contato direto da pele com os materiais
infecciosos. Cuidados de conteno primria ou pessoal, como as
descritas para o nvel de biossegurana 3, podem ser indicados
para a produo de perdigotos ou aerossis e para as atividades
envolvendo quantidades de produo ou concentraes de mate-
riais infecciosos. As vacinas, atualmente, no esto disponveis
para uso em humanos.
121
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
TunNsreuNctn oo AoeNie: A obteno e a licena para im-
portao do agente devero ser feitas junto ao CDC.
Agcntc: Neisseria meningitis
A meningite meningoccica um risco demonstrado, mas raro
de ocorrer com trabalhadores de laboratrio.
81, 82, 83
Rtscos em Inuouniuto: O agente pode ser encontrado em
exsudatos faringneos, no lquido cerebroespinhal, no sangue e na
saliva. A inoculao parenteral, a exposio da membrana mucosa
a perdigotos e a ingesto so os riscos primrios para a equipe do
laboratrio.
dicados para todas as atividades que utilizem lquidos corpreos,
tecidos e culturas conhecidamente ou potencialmente infeccio-
sas. Precaues pessoais e de conteno primria adicional, como
as descritas para o nvel de biossegurana 3, podem ser indicadas
para atividades com um alto risco potencial para formao de per-
digotos ou aerossis e para as atividades que envolvam quantida-
des de produo ou concentraes de materiais infecciosos.
Ouseuvnno: As vacinas para a N. meningitidis esto dispon-
veis e devem ser indicadas para as pessoas que trabalham regular-
mente com materiais infecciosos. O leitor deve consultar as atuais
recomendaes do Advisory Committee on Immunization Practices
(ACIP), publicadas no CDC Morbidity and Mortality Weekly Report
(MMWR), para as recomendaes sobre vacinao contra a N. me-
ningitidis.
TunNsreuNctn oe AoeNies: A obteno de uma licena para
importao do agente deve ser feita junto ao CDC.
Agcntc: Salmonella todos os sorotipos, com cxcco do typhi
A salmonelose um risco documentado para as pessoas que
trabalham em laboratrios.
84, 85, 86
Os hospedeiros, reservatrios
primrios, compreendem um amplo espectro de animais doms-
ticos e selvagens, incluindo pssaros, mamferos e rpteis, sendo
que todos podem servir como uma fonte de infeco para a equipe
laboratorial.
122
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
fezes, no sangue, na urina e em alimentos, raes e materiais pro-
venientes do meio ambiente. A ingesto ou a inoculao parente-
ral um perigo primrio para um laboratrio. A importncia da
exposio aos aerossis ainda desconhecida. Animais natural-
mente ou experimentalmente infectados so uma fonte potencial
de infeco para funcionrios do laboratrio e para os que tratam
dos animais, alm de perigosos para outros animais tambm.
cados para as atividades com materiais clnicos e culturas conhe-
cidas por possurem ou potencialmente conterem os agentes. As
prticas, os equipamentos de conteno e as instalaes do nvel
de biossegurana animal 2 so recomendados para atividades com
animais naturalmente ou experimentalmente infectados. As vaci-
nas ainda no se encontram disposio da populao.
agente deve ser obtida junto ao CDC.
Agcntc: Salmonella typhi
A febre tifide um risco comprovado para pessoas que traba-
lham em laboratrio.
87, 88, 89
fezes, no sangue, na vescula biliar (bile) e na urina. O ser humano
o nico reservatrio conhecido da infeco. A ingesto e a inocula-
o parenteral do agente representam o risco primrio em laborat-
rio. No se conhece ainda a importncia da exposio aos aerossis.
dicados para todas as atividades que utilizem materiais clnicos e
culturas sabidamente ou potencialmente infecciosas. As prticas
do nvel de biossegurana 3 so indicadas para atividades que pos-
sivelmente provoquem a formao de aerossis ou de atividades
que envolvam quantidades de produo de microorganismos.
As vacinas para a S. typhi esto disponveis no mercado e de-
vem ser indicadas para as pessoas que trabalham regularmente
123
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
com materiais potencialmente infecciosos. O leitor deve consultar
as recomendaes atuais do Advisory Committee on Immuniza-
tion Practices (ACIP), publicadas pelo CDC Morbidity and Morta-
lity Weekly Report (MMWR), para as recomendaes sobre a vaci-
nao contra a S. typhi.
TunNsreuNctn oo AoeNie: A licena para importao pode
ser conseguida junto ao CDC.
Agcntc: Shiguella spp.
A shigelose um risco comprovado aos trabalhadores de um la-
boratrio, com dzias de casos relatados s nos Estados Unidos e
na Gr-Bretanha.
90, 91, 92, 93
Embora surtos tenham ocorrido em pri-
matas no-humanos em cativeiro, somente o ser humano consi-
derado um reservatrio signicativo da infeco. Porm, cobaias,
outros roedores e primatas no-humanos experimentalmente in-
fectados tambm so fontes comprovadas de infeco.
fezes e raramente no sangue de animais e humanos infectados.
A ingesto e a inoculao parenteral do agente so os riscos pri-
mrios de um laboratrio. A dose oral de 25% a 50% infecciosa
do agente da S. exneri para humanos de aproximadamente 200
microorganismos.
94
Ainda no se sabe a importncia da exposio
aos aerossis do agente.
dicados para todas as atividades que utilizem materiais clnicos ou
culturas sabidamente ou potencialmente infecciosas. J as prti-
cas e as instalaes do nvel de biossegurana animal 2 so indi-
cadas para atividades com animais infectados experimentalmente
ou naturalmente. As vacinas no se encontram disposio no
mercado para uso humano.
TunNsreuNctn oo AoeNie: A licena para a exportao do
agente dever ser obtida no Department of Commerce.
Agcntc: Treponema pallidum
A slis um risco comprovado para as pessoas de laboratrio
que manipulam ou coletam materiais clnicos de leses cutneas.
124
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Pike relacionou 20 casos dessa infeco associada a laboratrio.
95

O ser humano o nico reservatrio conhecido desse agente. Um
exemplo o caso de um agente que foi transmitido a um indivduo
da equipe de um laboratrio que trabalhava com uma suspenso
concentrada do T. pallidum obtido de um coelho com orquite ex-
perimental.
96
A transferncia hematognica da slis tem ocorrido
por meio da transfuso de uma unidade de sangue fresco obtida
de um paciente com slis secundria. O T. pallidum se encontra
presente na circulao durante a slis primria e a secundria. O
nmero mnimo de organismos do T. pallidum (DL
50
) necessrio
para infectar um indivduo por uma injeo subcutnea de 23.
97

A concentrao do T. pallidum no sangue de pacientes durante o
incio da slis, porm, ainda no foi determinada.
Nenhum caso de infeco associado a laboratrios animais foi
relatado at o momento. Porm, cepas do T. pallidum (Nichols e
possivelmente outras) adaptadas a coelhos conservaram suas vi-
rulncias em homens.
materiais coletados de leses cutneas, de membranas mucosas
primrias e secundrias e no sangue. A inoculao parenteral aci-
dental, o contato das membranas mucosas e de pele lesada com os
materiais infecciosos e possivelmente com aerossis infecciosos so
os riscos primrios para as pessoas que trabalham em laboratrio.
dicados para todas as atividades que envolvam o uso ou a mani-
pulao de sangue ou material de leses de homens ou de coe-
lhos infectados. Recomenda-se o uso de luvas quando houver a
possibilidade do contato direto da pele com os materiais da leso.
O monitoramento sorolgico peridico deve ser considerado para
pessoas que trabalham com materiais infecciosos. As vacinas, atu-
almente, no se encontram disponveis para o uso em humanos.
125
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Agcntcs: Vibrionic enteritis
(Vibrio cholerae,Vibrio parahaemolyticus)
A enterite vibrinica causada pelo Vibrio cholerae ou pelo Vibrio
parahaemolyticus uma doena documentada associada a labora-
trio, mas rara.
98
Os animais naturalmente ou experimentalmen-
te infectados so uma fonte potencial de infeco.
Rtscos em Inuouniuto: Os vibries patognicos podem
ser encontrados nas fezes. A ingesto do V. cholerae e a ingesto
ou inoculao parenteral de outros vibries constituem os riscos
primrios laboratoriais. A dose infecciosa oral humana de apro-
ximadamente 10
6
organismos.
99
A importncia da exposio aos
aerossis ainda desconhecida. O risco de infeco aps uma ex-
posio oral pode ser aumentado em indivduos aclordricos.
cados para atividades com culturas ou materiais clnicos potencial-
mente infecciosos. J as prticas, os equipamentos de conteno
e as instalaes do nvel de biossegurana animal 2 so indicados
para atividades com animais naturalmente ou experimentalmente
infectados. Embora existam vacinas contra a clera, no se reco-
menda o uso rotineiro pela equipe laboratorial. O leitor deve con-
sultar as atuais recomendaes do Advisory Committee on Immuni-
zation Practices (ACIP), publicadas no CDC Morbidity and Mortality
Weekly Report (MMWR), sobre as recomendaes para a vacinao
humana contra o V. parahaemolyticus.
TunNsreuNctn oo AoeNie: A licena para exportao do
agente dever ser obtida no Department of Commerce.
Agcntc: Yersinia pestis
A peste um risco laboratorial comprovado, mas raro. Nos Es-
tados Unidos h relatos dessa infeco.
100, 101
O trabalho com o Y.
pestis requer consideraes especiais de segurana devido ao seu
alto uso potencial no terrorismo biolgico.
Rtscos em Inuouniuto: Esse agente pode ser encontrado
no lquido bulbar, no sangue, no escarro, no lquido cerebroespi-
nhal, nas fezes e na urina humana, dependendo da forma clnica
e do estgio da doena. Os riscos primrios para a equipe do labo-
126
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
ratrio se constituem por meio do contato direto com culturas e
materiais infecciosos de homens ou animais, aerossis ou perdi-
gotos infecciosos produzidos durante a manipulao de culturas e
de tecidos infectados. Na necropsia de roedores, o risco primrio
para a equipe laboratorial inclui a inoculao parenteral acidental,
a ingesto e a picada de pulgas infectadas coletadas em roedores.
dicados para todas as atividades que envolvam o manuseio de ma-
teriais clnicos e culturas potencialmente infecciosas. Deve-se to-
mar um cuidado especial para evitar a produo de aerossis de
materiais infecciosos e durante a necropsia de roedores natural-
mente ou experimentalmente infectados. Recomenda-se o uso de
luvas ao manusear roedores de laboratrio coletados no campo ou
infectados e quando houver a possibilidade do contato direto da
pele com os materiais infecciosos. A necropsia de roedores ide-
almente conduzida em uma cabine de segurana biolgica. Pre-
caues individuais e de conteno primria adicional, como as
descritas para o nvel de biossegurana 3, so recomendadas para
atividades com um alto potencial para formao de perdigotos ou
aerossis, para o trabalho com cepas resistentes a antibiticos e
para as atividades envolvendo quantidades ou concentraes de
produo de materiais infecciosos.
Ouseuvnno: A vacina para o Y. pestis est disposio para
uso em humanos e deve ser usada pela equipe do laboratrio que
trabalha com materiais infecciosos ou roedores infectados. O lei-
tor deve consultar as recomendaes atuais do Advisory Commit-
tee on Immunization Practices (ACIP), publicadas no CDC Morbidity
and Mortality Weekly Report (MMWR), para maiores informaes
sobre a vacinao contra o Y. pestis.
agente dever ser obtida no CDC. J a licena para exportao
deve ser conseguida por intermdio do Department of Commer-
ce. necessrio o registro do laboratrio junto ao CDC antes do
envio ou recebimento desse agente.
127
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
SEO VII-B: AGENTES FNGICOS
Agcntc: Blastomyces dermatitidis
Infeces locais associadas a laboratrio tm sido relatadas
aps a inoculao parenteral acidental com tecidos ou culturas in-
fectadas contendo formas da B. dermatitidis semelhantes leve-
dura.
1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8
Infeces pulmonares ocorreram depois de uma
suposta inalao de condios; duas pessoas desenvolveram pneu-
monia e uma apresentou uma leso osteoltica da qual se retirou
amostra da B. dermatitidis para cultura.
9, 10
Provavelmente, as in-
feces pulmonares esto associadas somente s formas seme-
lhantes levedura formadoras de esporos (condios).
Rtscos em Inuouniuto: Formas semelhantes a leveduras
podem ser encontradas nos tecidos de animais infectados e em
amostras clnicas. A inoculao parenteral (subcutnea) desses
materiais pode provocar granulomas locais. As culturas das for-
mas fngicas da B. dermatitidis contendo condios infecciosos,
solo processado ou outras amostras ambientais podem oferecer
um risco quanto exposio aos aerossis.
Puecnues RecomeNonons: As prticas e as instalaes do
nvel de biossegurana 2 e do nvel de biossegurana animal 2 so
indicadas para as atividades com materiais clnicos, tecidos ani-
mais, culturas, amostras ambientais e animais infectados.
agente dever ser obtida junto ao CDC. O registro do laboratrio no
CDC dever ser obtido antes do envio ou recebimento do agente.
Agcntc: Coccidioides immitis
A coccidioidomicose adquirida em laboratrio um risco do-
cumentado.
11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22
Smith relatou que de 31
infeces adquiridas em laboratrio da sua instituio, 28 (90%)
resultaram em uma doena clnica, em que mais da metade dessas
infeces adquiridas na natureza eram assintomticas.
23
Rtscos em Inuouniuto: Devido ao tamanho (2-5 milim-
crons), os artrocondios tendem a ser prontamente espalhados no
ar e retidos nos profundos espaos pulmonares. Quanto maior o
128
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
tamanho da esfrula (30-60 milimcrons), mais reduzida ser a
eccia dessa forma de fungo como um patgeno areo.
As esfrulas dos fungos podem estar presentes em amostras
clnicas e tecidos animais. J os artrocondios infecciosos so en-
contrados em culturas e solos mofados ou em outras amostras de
locais naturais. A inalao do artrocondio contido nas amostras
ambientais ou nas culturas da forma fngica um perigo srio
dentro de um laboratrio. Um risco terico dentro de um labora-
trio imposto por amostras clnicas ou tecidos de animais ou ho-
mens infectados que foram armazenados ou embalados de forma
a produzir a germinao de artrocondios. H um nico relatrio
sobre um veterinrio com uma coccidiodomicose que se iniciou 13
dias depois da autpsia de um cavalo com essa infeco, embora o
veterinrio morasse em uma rea endmica.
24
A inoculao percu-
tnea acidental da esfrula pode resultar na formao de um gra-
nuloma local.
25
A doena disseminada ocorre com uma freqncia
muito maior em negros e em lipinos do que em brancos.
nvel de biossegurana 2 so indicadas para manuseio e processa-
mento de amostras clnicas, identicao isolada e processamento
dos tecidos animais. J as prticas e as instalaes do nvel de bios-
segurana animal 2 so indicadas para estudos de experimentao
animal quando a via de transmisso do agente a via parenteral.
As prticas e as instalaes do nvel de biossegurana 3 so in-
dicadas para reproduo e manipulao de culturas que formam
esporos j identicados como C. immitis e para o processamento
de solo ou outros materiais do meio ambiente que contenham ou
possivelmente contenham artrocondios infecciosos.
agente dever ser obtida junto ao CDC. O registro do laboratrio
dever ser obtido no CDC antes do envio ou recebimento do agente.
Agcntc: Cryptococcus neoformans
A inoculao acidental de uma pesada quantidade de Cryp-
tococcus neoformans nas mos de um trabalhador de laboratrio
ocorreu durante a injeo ou a necropsia de animais de laborat-
rios.
26, 27
Mas no houve a formao de um granuloma local e nem
129
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
uma leso, sugerindo uma baixa patogenicidade por esta via. As
infeces respiratrias como conseqncia de exposio laborato-
rial ainda no foram registradas.
Rtscos em Inuouniuto: A inoculao parenteral acidental
de culturas ou de outros materiais infecciosos representa um risco
potencial para a equipe laboratorial, particularmente queles que
possam estar imunodeprimidos. Mordidas de camundongos expe-
rimentalmente infectados e as manipulaes de materiais do meio
ambiente infeccioso (por exemplo, excrementos de pombos) tam-
bm representam um risco primrio ao pessoal do laboratrio.
indicadas, respectivamente, para atividades com materiais clni-
cos, ambientais ou de culturas sabidamente ou potencialmente in-
fecciosas e ainda com animais infectados experimentalmente.
O processamento do solo ou de outros materiais do meio am-
biente que contenha ou que potencialmente contenha clulas in-
fecciosas semelhantes levedura dever ser conduzido em cabines
de segurana biolgicas classe I ou II. Essa precauo tambm
indicada para a cultura do estado perfeito ou sexual do agente.
Agcntc: Histoplasma capsulatum
A histoplasmose associada a laboratrio um risco comprova-
do em instalaes onde so conduzidos trabalhos de investigao
ou de diagnsticos.
28, 29, 30
As infeces pulmonares so resultan-
tes de culturas que formam fungos.
31
J uma perfurao na pele
durante uma autpsia de um indivduo infectado
32
e uma inocu-
lao parenteral acidental de uma cultura vivel
33
provocam uma
infeco local. A coleta e o processamento de amostras de solo re-
tiradas de reas endmicas tm provocado infeces pulmonares
em trabalhadores de laboratrio. Os esporos encapsulados so
resistentes secagem e podem permanecer viveis durante lon-
gos perodos de tempo. O pequeno tamanho do condio infeccioso
(menos que 5 mcrons) possibilita sua disperso no ar e a reten-
o intrapulmonar. Furcolow relatou que em camundongos 10 es-
130
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
poros foram quase que to infecciosos quanto uma dose letal de
10.000 a 100.000 esporos.
34

Rtscos em Inuouniuto: O estgio infeccioso desse fungo
dimrco (condio) est presente nas culturas de formas esporu-
ladas e no solo de reas endmicas. A forma de levedura em teci-
dos ou lquidos de animais infectados pode produzir uma infeco
local aps uma inoculao parenteral. As prticas e as instalaes
do nvel de biossegurana 2 e do nvel de biossegurana animal 2
so indicadas para o manuseio e o processamento de materiais cl-
nicos, identicao de substncias isoladas, tecidos animais e cul-
turas fngicas, identicao de culturas na rotina de laboratrios
de diagnsticos e para estudos animais experimentais quando a
via do agente for parenteral.
As prticas e as instalaes do nvel de biossegurana 3 so in-
dicadas para reproduo e manipulao de culturas j identica-
das como de H. capsulatum e para o processamento de solo ou de
outros materiais ambientais conhecidos por conter ou possivel-
mente conter condio infeccioso.
agente deve ser feita junto ao CDC.
Agcntc: Sporothrix schenckii
O S. schenckii tem causado um nmero expressivo de infeces
locais na pele e nos olhos de pessoas que trabalham em laborat-
rios.
35
A maioria dos casos est associada a acidentes que ocor-
rem com borrifos do material de uma cultura dentro do olho,
36, 37

arranho
38
ou mordida de um animal infectado
40, 41
ou ao injetar
39

material infectado na pele. As infeces dermatolgicas so cau-
sadas tambm pelo manuseio de culturas
42, 43
ou por necropsias
de animais
45
sem que ocorra um conhecido erro tcnico na hora
do procedimento. No houve nenhum caso de infeco pulmo-
nar resultante da exposio laboratorial, embora se suponha que
a doena pulmonar tenha ocorrido naturalmente como resultado
de uma inalao.
indicadas para todas as atividades em laboratrio e em ativida-
131
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
des com experimentao animal com S. schenckii. Recomenda-se o
uso de luvas ao manusear animais experimentalmente infectados
e durante operaes com culturas lquidas (caldos) que possam re-
sultar em uma contaminao da mo.
Agcntcs: Mcmbros patogcnicos dos gcncros
Epidermophyton, Microsporum e Trychophyton
Embora as infeces de pele, cabelo e unhas provocadas por
esses fungos dermatofdites estejam entre as infeces humanas
mais freqentes, o processamento do material clnico ainda no
foi associado s infeces laboratoriais. As infeces relatadas fo-
ram adquiridas por meio de contatos com animais de laboratrio
naturalmente ou experimentalmente infectados (camundongo, co-
baias, etc.) e ocasionalmente com o manuseio de culturas.
46, 47, 48, 49
Peutoos em Inuouniuto: Os agentes podem ser encontra-
dos na pele, no cabelo e nas unhas de hospedeiros humanos e ani-
mais. O contato com animais de laboratrios infectados que apre-
sentem infeces aparentes ou no considerado risco primrio
para a equipe do laboratrio. As culturas e os materiais clnicos
no so uma fonte importante de infeco humana.
indicadas para todas as atividades em laboratrio e em atividades
com experimentao animal com os dermatotdes. Os animais
infectados experimentalmente devem ser manipulados com luvas
descartveis.
Agcntcs: Fungos diversos
Vrios fungos tm provocado srias infeces em hospedeiros
imunocompetentes aps uma provvel inalao ou inoculao pa-
renteral acidental de fontes do meio ambiente. Esses agentes so
os Penicillium marneei, Exophiala (Wangiella) dermatitidis, Fonseca-
132
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
ea pedrosoi, Ochroconis gallopavum, Clauduphialopora bantians e Ra-
michlorisium mackenzieim. Embora nenhuma infeco causada por
grande parte desses agentes associados a laboratrio tenha sido
registrada, a gravidade dessa patologia adquirida naturalmente
suciente para se adotar cuidados especiais no laboratrio. O Peni-
cillium marneei causou uma infeco local por inoculao acidental
em um laboratorista.
50
J o Stachybotrus atra provavelmente no
o agente causador da infeco em seres humanos quando o fungo
ou fmites contidos no mofo so inalados, embora a ingesto de
gros mofados que possuam o fungo tenha envenenado animais.
Rtscos em Inuouniuto: A inalao de condios em culturas
de fungos com esporos ou a injeo acidental na pele durante um
procedimento de infeco de animais de experimentao so ris-
cos tericos aos trabalhadores de um laboratrio.
nvel de biossegurana 2 so indicadas para reproduo e manipu-
lao de culturas conhecidas por conterem esses agentes.
TunNsreuNctn oo AoeNie: A licena para importao deve-
r ser obtida junto ao CDC.
SEO VII-C: AGENTES PARASITRIOS
Agcntcs: Protozorios Parasitas de Tecido e Sangue Humanos
Infeces com o Plasmodium spp. (incluindo o P. cynomolgi), o
Trypanosoma spp. e a Leishmania spp. adquiridas em laboratrio
foram relatadas.
1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12
Embora nenhuma infeco
laboratorial com a Babesia spp. tenha sido relatada, um indivduo
pode adquirir uma infeco por meio de uma picada acidental com
agulha ou por uma picada de um carrapato infectado.
Embora infeces associadas a animais de laboratrio no se-
jam comuns, a malria transmitida pelo mosquito realmente ocor-
re. Outras fontes diretas potenciais de infeco para a equipe de
um laboratrio incluem o contato com um material extrado de
uma leso de roedores que apresentam uma leishmaniose cutnea
e o contato com fezes ou sangue de animais experimentalmente
ou naturalmente infectados com T. cruzi.
13
133
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Rtscos em Inuouniuto: Os estgios contagiosos desses
agentes podem estar presentes no sangue, nas fezes, no uido
cerebroespinhal, na medula ssea ou em outros tecidos de bip-
sia, exsudatos de leso e artrpodes infectados. Dependendo do
parasita, os riscos primrios laboratoriais incluem a ingesto, a
penetrao na pele por meio de ferimentos ou microabrases, a
inoculao parenteral acidental e a transmisso por vetores artr-
podes. A exposio aos aerossis ou perdigotos de organismos nas
membranas mucosas dos olhos, do nariz ou da boca considerada
um risco potencial quando o trabalho realizado com culturas de
Leishmania spp., T. cruzi ou com homogeneizao de culturas ou de
sangue contendo hemoagelados. Os indivduos imunocompro-
metidos devem evitar qualquer trabalho com esses agentes vivos.
nvel de biossegurana 2 so indicadas para atividades com est-
gios infecciosos dos parasitas relacionados. Os artrpodes infec-
tados devem ser mantidos em dependncias que impeam a expo-
sio do pessoal do laboratrio ou a sada do artrpode para fora
do local. A conteno primria (por exemplo, cabine de segurana
biolgica) e a proteo pessoal (por exemplo, proteo facial) po-
dem ser indicadas quando o trabalho for realizado com culturas de
Leishmania spp., T. cruzi ou com a homogeneizao de tecidos ou
de sangue contendo hemoagelados.
14, 15
Recomenda-se o uso de
luvas para atividades nas quais exista a possibilidade do contato
direto da pele com os estgios infecciosos dos parasitas referidos.
O tratamento apropriado para a maioria das infeces provocadas
por protozorios existe. As informaes sobre dosagem, fonte da
droga, etc. se encontram disposio.
16
Agcntcs: Protozorios Parasitas do Intestino Humano
Infeces com Toxoplasma spp., Entamoeba spp., Isospora spp.,
Giardia spp., Sarcocystis spp. e o Cryptosporidium spp. associadas a
laboratrio foram relatadas.
17, 18, 19, 20, 21
Nenhuma infeco labora-
torial com microspordios foi registrada, mas a ingesto de espo-
ros encontrados nas fezes, na urina, no escarro, no uido cerebro-
espinhal ou nas culturas pode provocar uma infeco.
134
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Infeces associadas ao laboratrio de experimentao animal
tm sido relatadas e constituem uma fonte direta de infeco para
as pessoas que trabalham nesses locais e esto em contato com
as fezes de animais naturalmente ou experimentalmente infecta-
dos. No caso de roedores inoculados experimentalmente com o
Toxoplasma via intraperitoneal, o contato com o lquido peritoneal
pode provocar uma exposio aos organismos infecciosos.
J as infeces com o Cryptosporidium adquiridas em laborat-
rio ocorrem com regularidade em quase todos os laboratrios que
trabalham com esse agente, especialmente aqueles nos quais os
bezerros so usados como fonte de ocitos. Outros animais infec-
tados experimentalmente tambm oferecem riscos potenciais. A
evidncia circunstancial sugere que a transmisso area de ocitos
desse pequeno organismo pode acontecer. Uma obedincia rigo-
rosa a todas essas recomendaes reduz a ocorrncia de infeces
nos laboratrios e em tratadores de animais.
Rtscos em Inuouniuto: Os estgios ativos infecciosos po-
dem ser encontrados nas fezes ou em outros uidos e tecidos cor-
porais. Dependendo do parasita, a ingesto o risco primrio la-
boratorial. Embora no se conhea o nvel do risco, as exposies
das membranas mucosas dos olhos, do nariz ou da boca aos ae-
rossis ou perdigotos de trofozotas podem ser riscos potenciais
quando esto sendo realizados trabalhos com culturas de amebas
que vivem livremente, como a Naegleria fowleri, Acanthamoeba ou
a Balamuthia. Os indivduos imunocomprometidos devem evitar
o trabalho com organismos vivos. Devido s graves conseqncias
da toxoplasmose em fetos em desenvolvimento e em mulheres so-
rologicamente negativas que podem engravidar, cabe ao supervi-
sor do laboratrio informar essas mulheres sobre os riscos poten-
ciais ao feto. Caso os empregados bem informados sobre os riscos
se recusarem a car expostos a esses agentes, o laboratrio dever
designar outras atividades em uma rea de trabalho onde o toxo-
plasma no esteja sendo manipulado. O trabalho com ocitos con-
tagiosos oferece um risco maior de se adquirir uma infeco. As
picadas de agulhas com material contendo taquizotas ou bradizo-
tas atravs da membrana mucosa ou de abrases na pele tambm
so riscos signicativos. A infeco por taquizotas ou bradizotas
atravs da membrana mucosa ou de abrases da pele tambm so
135
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
possveis. Os laboratrios que conduzem estudos somente com
materiais de parasitas mortos ou inativados e com fraes de pa-
rasitas no oferecem riscos signicativos de infeco.
nvel de biossegurana 2 so indicadas para atividades com est-
gios contagiosos dos parasitas citados. A conteno primria (por
exemplo, cabine de segurana biolgica) e a proteo pessoal (por
exemplo, protetor facial) podem ser indicadas em trabalhos en-
volvendo culturas de Naegleria fowleri ou Cryptosporidium. O tra-
tamento apropriado para a maioria das infeces provocadas por
protozorios j existe. Mais informaes sobre a dose e a fonte
das drogas, etc. esto disponveis.
22
Agcntcs: Trematdeos Parasitas de Humanos
(Schistosoma spp. e Fasciola spp.)
Infeces com o Schistosoma spp. e a Fasciola spp. adquiridas em
laboratrio tm sido relatadas. Nenhuma infeco estava direta-
mente associada aos animais de laboratrio, com exceo dos mo-
luscos infectados, que so os hospedeiros intermedirios.
23, 24, 25, 26
Rtscos em Inuouniuto: Os estgios contagiosos do Schis-
tosoma spp. (cercria) e da Fasciola spp. (metacercria) podem ser
encontrados, respectivamente, na gua ou encistados em plantas
de aqurios de laboratrios usados para manter os caracis hos-
pedeiros. A penetrao das cercrias do esquistossomo na pele e
a ingesto da metacercria de qualquer trematdeo so conside-
radas riscos primrios. A disseco e o esmagamento de caracis
infectados pelo esquistossomo podem tambm resultar na expo-
sio da pele ou da membrana mucosa aos tecidos contendo as
cercrias. Alm disso, a metacercria pode ser transferida inad-
vertidamente das mos para a boca pelos dedos ou pelas luvas,
depois do contato com a vegetao aqutica contaminada ou com
as superfcies contaminadas do aqurio. A maioria das exposies
laboratoriais ao Schistosoma spp. supostamente resultaria em bai-
xas cargas de vermes com um potencial mnimo da doena. Dro-
gas seguras e ecazes para o tratamento da esquistossomose j se
encontram no mercado.
136
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
nvel de biossegurana 2 so indicadas para atividades com os est-
gios contagiosos dos parasitas citados. Recomenda-se o uso de lu-
vas quando houver um contato direto com gua contaminada por
cercrias ou vegetao contendo metacercria de caracis infecta-
dos experimentalmente ou naturalmente. Jalecos de mangas com-
pridas ou outro traje de proteo devero ser usados quando esti-
ver sendo realizado um trabalho ao redor do aqurio ou em outras
fontes de gua que possam conter cercrias do esquistossomo. Os
caracis e as cercrias encontradas na gua proveniente do aqu-
rio do laboratrio devem ser eliminados com substncias qumicas
(por exemplo, hipoclorito, iodo) ou por meio do calor antes de se-
rem jogados no esgoto. O tratamento apropriado para grande par-
te das infeces causadas por trematdeos existe. As informaes
sobre a fonte das drogas e sobre as dosagens esto disponveis.
27
Agcntcs: Cestides Parasitas de Humanos Echinococcus
granulosus, Taenia solium (cysticercus cellulosae) e
Hymenolepis nana
Embora nenhuma infeco com o E. granulosus ou a T. solium
relacionada a laboratrio tenha sido relatada, as conseqncias
dessas infeces aps a ingesto de ovos infectados por E. granu-
losus ou T. solium so potencialmente srias. A H. nana um para-
sita cosmopolita que no requer um hospedeiro intermedirio, e a
contaminao se d diretamente pela ingesto de fezes humanas
ou de roedores infectados.
Rtscos em Inuouniuto: Os ovos infectados podem ser en-
contrados nas fezes de ces ou de outros candeos (hospedeiro de-
nitivo do E. granulosus) ou nas fezes humanas (o hospedeiro de-
nitivo da T. solium). A ingesto de ovos infectados dessas fontes
considerada risco primrio em laboratrios. Os cistos e o uido
de cistos do E. granulosus no so infecciosos para o homem. J os
cistos que contm a larva da T. solium (Cysticercus cellulosae) pron-
tamente produzem a infeco humana com a solitria adulta. A in-
gesto de um nico ovo infectado pelos dois parasitas, proveniente
das fezes do hospedeiro denitivo, pode potencialmente resultar
137
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
em uma sria patologia. A ingesto dos ovos da H. nana nas fe-
zes do hospedeiro denitivo pode causar uma infeco intestinal.
nvel de biossegurana 2 so indicadas para o trabalho com os es-
tgios contagiosos desses parasitas. Deve-se dar uma ateno es-
pecial higiene pessoal (por exemplo, lavagem das mos) e evitar
a ingesto de ovos infectados. Recomenda-se o uso de luvas quan-
do houver um contato direto com as fezes ou com superfcies con-
taminadas por fezes frescas de ces infectados por E. granulosus,
com humanos infectados pela T. solium adulta ou com humanos
ou roedores infectados pela H. nana. O tratamento adequado para
muitas infeces causadas por cestides existe. Informaes sobre
a fonte das drogas, da dosagem, etc. j se encontram disponveis.
28
Agcntcs: Nematides Parasitas de Humanos
Infeces por Ascaris spp., Strongyloides spp., ancilstomos e
Enterobius spp. j foram relatadas. As reaes alrgicas a vrios
componentes antignicos de nematides (por exemplo, antgenos
de Ascaris nebulizados) podem representar um risco ao indivduo
sensvel. As infeces associadas a laboratrio (incluindo artrpo-
des) no foram registradas, mas as larvas contagiosas encontra-
das nas fezes de primatas no-humanos infectados com o Stron-
gyloides spp. so consideradas um risco potencial de infeco para
trabalhadores de laboratrio e tratadores de animais.
Rtscos em Inuouniuto: Os ovos e as larvas de fezes frescas
do hospedeiro denitivo no so geralmente infecciosos, uma vez
que o desenvolvimento dos estgios infecciosos pode levar de um
dia at vrias semanas. A Trichinella preocupa porque o tecido fres-
co ou digerido pode conter larvas que seriam infecciosas se ingeri-
das. A ingesto de ovos infectados e a penetrao de larvas infecta-
das na pele so os riscos primrios para as pessoas que trabalham
em um laboratrio e as que tratam dos animais. Os artrpodes
infectados com os parasitas lariais oferecem um risco potencial
para a equipe laboratorial. comum o desenvolvimento de uma
138
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
hipersensibilidade em trabalhadores de laboratrio que freqen-
temente so expostos aos antgenos aerolizados de Ascaris spp.
Puecnues RecomeNonons: As prticas e as instala-
es do nvel de biossegurana 2 so indicadas para ativida-
des que envolvam os estgios contagiosos relacionados. A ex-
posio aos antgenos sensibilizados aerolizados do Ascaris spp.
deve ser evitada. Uma conteno primria (por exemplo, ca-
bine de segurana biolgica) pode ser necessria para o tra-
balho com esses materiais por indivduos hipersensveis. O
tratamento adequado para maior parte das infeces causa-
das por nematides existe. Maiores informaes sobre a do-
sagem, a fonte das drogas, etc. j se encontram disponveis.
32
SEO VII-D: PRONS
Os Centros para Preveno e Controle de Doenas e os Institutos
Nacionais de Sade gostariam de expressar seus agradecimentos a Jiri
Safar, M.D; Darlene Groth, A.B; Stephen J. DeArmond, M.D., PhD.
e Stanley B. Prusiner, M.D., da University of California San Francis-
co, San Francisco, CA, pelas contribuies neste campo emergente e na
preparao desta seo.
Os prons so partculas infecciosas de proteinceos que no
possuem cidos nuclicos.
1
Os prons so, em grande parte, se no
totalmente, compostos por um isoforme anormal de uma prote-
na celular normal. Em mamferos, os prons so compostos de um
isoforme anormal, patognico da protena prinio (PrP), chamada
de PrP
Sc
. O expoente Sc inicialmente derivou-se do termo scra-
pie (tronco), j que scrapie um distrbio degenerativo conta-
gioso do sistema nervoso de ovinos e caprinos provocado pelos
prons. Uma vez que todas as doenas conhecidas causadas por
prons (tabela 3) em mamferos envolvem o metabolismo aber-
rante do PrP semelhante ao observado na scrapie, o uso de um
expoente Sc indicado para todos os isoformes PrP patognicos
anormais.
2
Nesse contexto, o expoente Sc utilizado para desig-
nar a isoforma do PrP semelhante da scrapie.
139
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Um gene cromossmico decodica os genes PrP e no PrP que
so encontrados em preparaes puricadas dos prons. O PrP
Sc

derivado do PrP
C
(o isoforme celular do PRP) por um proces-
so ps-translacional em que o PrP
Sc
adquire um alto contedo da
enzima B da ovelha.
3
Nem os cidos nuclicos especcos de pr-
ons nem as partculas semelhantes ao vrus foram detectados nas
preparaes infecciosas puricadas. Em fungos, evidncias de trs
prons diferentes foram acumuladas.
4
Os prons em mamferos causam scrapie e outras doenas neu-
rodegenerativas relacionadas ao homem e aos animais (tabela 3).
As doenas provocadas pelos prons tambm so referidas como
encefalopatias espongiformes transmissveis (TSEs).
5
Tabela 3. As doenas causadas por prons
Patologias (abreviao) Hospedeiro natural Prons
Isoforma patognica
do PrP
Scrapie ovelhas e cabras scrapie
prons
OvPrP
Sc
Encefalopatia transmissvel
de viso (TME)
viso prons
TME
MkPrP
Sc
Doena crnica distrca (CWD) alce e veado de orelhas
longas
prons
CWD
MdePr
Sc
Encefalopatia espongiforme
bovina (BSE)
gado prons
BSE
BoPrP
Sc
Encefalopatia espongiforme
felina (FSE)
gatos prons FSE FePrP
Sc
Encefalopatia extica ungula-
do (EUE)
antlope africano e niala prons
EUE
UngPrP
Sc
Kuru humanos prons
kuru
HuPrP
Sc
Doena de Cretzfeldt Jakob
(CDJ)
humanos prons
CJD
HuPrP
Sc
Sndrome de Gerstmann
Stussler-Scheinker (GSS)
humanos prons
GSS
HuPrP
Sc
Insnia familiar Gatal (FFI) humanos prons FFI HuPrP
Sc
PuoNs esvecrtcos oe esvectes: Diferente de alguns vrus,
as propriedades dos prons mudam dramaticamente quando so
passados de uma espcie para outra. Os resultados de estudos
transgnicos (Tg) em camundongos indicam que, quando os pr-
140
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
ons de homens so passados para os camundongos, a patogeni-
cidade potencial dos no-transgnicos para os humanos diminui
drasticamente.
6
Os prons que so reproduzidos em camundongos
no-transgnicos so agora prons de camundongos e prons no-
humanos. Os prons de camundongos contm o PrP
Sc
e o PrP
Sc

no-humano. Essa mudana especca da espcie na molcula do
PrP
Sc
acompanhada pela alterao na patogenicidade do prons.
Em contraste com os prons humanos, os prons de camundon-
gos so altamente patognicos para os prprios camundongos. A
compreenso dessas mudanas especcas na patogenicidade do
prons de cada espcie proveniente, em grande parte, de estudos
de camundongos que apresentam uma variedade de transgenes
PrP. Uma vez que o PrP
Sc
produzido no camundongo derivado do
PrP
C
, no possvel determinar a origem do prons inicialmente
inoculados no camundongo.
7
Vale a pena observar que a susceptibilidade de espcies em par-
ticular a um pron de outras espcies pode ser profundamente afe-
tada pelas diferentes cepas de prons. As propriedades manifesta-
das pelas cepas de prons, como o perodo de incubao e os pers
neuropatolgicos, parecem estar contidas na estrutura do PrP
Sc
.
Tais consideraes dos princpios bsicos da biologia prinica
ajudam a formar a base para a classicao da biossegurana de
diferentes prons.
Ctnsstrtcnno oo Nvet oe BtosseouunNn: Os prons hu-
manos e os reproduzidos em macacos e chimpanzs so manipu-
lados no nvel de biossegurana 2 ou 3, dependendo dos estudos
que esto sendo conduzidos. Os prons BSE so igualmente mani-
pulados no nvel de biossegurana 2 ou 3, devido possibilidade
de os prons terem sido transmitidos aos seres humanos na Gr-
Bretanha e na Frana.
9
Todos os outros prons animais so considerados patgenos do
nvel de biossegurana 2. Portanto, baseado na nossa compreen-
so atual sobre a biologia descrita dos prons, assim que os prons
humanos so passados para camundongos, ocorre a produo do
PrP
Sc
de camundongo. Nesse caso, esses prons devem ser consi-
derados como do nvel de biossegurana 2, embora os prons hu-
manos sejam manipulados no nvel de biossegurana 3, em gran-
141
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
de parte das condies experimentais. Uma exceo a essa regra
o caso de camundongos que apresentam transgenes de camundon-
gos/humanos quimricos ou humanos. Os camundongos trans-
gnicos produzem prons humanos quando infectados por prons
humanos e devem ser tratados no nvel de biossegurana 2 ou 3,
de acordo com os procedimentos descritos. Os mecanismos dos
prons disseminados em ovelhas e caprinos, que so os respons-
veis pelo desenvolvimento do scrapie, ainda so desconhecidos.
10, 11

Acredita-se que os prons CWD, TME, BSE, FSE e EUE ocorrem de-
pois do consumo de alimentos infectados por prons.
12, 13, 14, 15
DoeNns HumnNns Puovocnons vou PuoNs: Os mesmos
cuidados usados em pacientes com aids ou com hepatite so certa-
mente adequados para as patologias provocadas por prons e pa-
cientes que esto morrendo devido a tal patologia. Em contras-
te com essas doenas virticas, as doenas provocadas por prons
no so transmissveis nem contagiosas.
16
No h evidncias so-
bre a transmisso por contato de aerossis de prons de um indi-
vduo para outro. Porm, esses agentes se tornam contagiosos em
algumas circunstncias como, por exemplo, no ritual de canibalis-
mo na Nova Guin, que provoca a doena chamada kuru, na admi-
nistrao do hormnio do crescimento contaminado por prons,
que resultar na CJD iatrognica e no transplante de enxertos de
tecido da dura-mter contaminado por prons que provocam a do-
ena em outras pessoas. J as doenas CJD, GSS e FFI familiares
so doenas provocadas por prons dominantes herdados. Cinco
mutaes diferentes do gene PrP mostraram ser geneticamente li-
gadas ao desenvolvimento da doena congnita. Muitos prons de
doenas congnitas foram transmitidos a chimpanzs, macacos e
camundongos portadores de transgenes PrP humano.
20, 21, 22
PuoceotmeNios Ctuuotcos: Os procedimentos cirrgicos
em pacientes diagnosticados como portadores da doena prinica
devem ser minimizados. Acredita-se que a CJD tenha sido trans-
mitida de um paciente portador da CJD para dois outros que,
momentos depois, sofreram procedimentos neurocirrgicos na
mesma sala de cirurgia.
23
Embora no existam documentos que
comprovem a transmisso de prons aos homens pela exposio
da pele intacta ou das membranas mucosas e gstricas aos per-
digotos de sangue ou de lquido cerebroespinhal, o risco da ocor-
rncia de tais infeces uma possibilidade. A esterilizao dos
142
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
instrumentos e a descontaminao da sala de cirurgia devem ser
realizadas de acordo com as recomendaes descritas.
Por serem importantes o estabelecimento de um diagnstico
denitivo de uma doena provocada por prons e a distino entre
casos familiares e espordicos e as doenas adquiridas pela con-
taminao ocorrida em procedimentos mdicos ou pela ingesto
de alimentos contaminados por prons, deve-se obter o tecido ce-
rebral no-xado. Em todos os casos de suspeita de uma doena
prinica, o mnimo de um centmetro cbico de crtex cerebral
no-xado deve fazer parte da bipsia. A amostra deve ser bissec-
cionada a partir da superfcie cortical at a substncia branca do
crebro adjacente, com uma metade da amostra xada em forma-
lina e a outra metade congelada.
Auivstns: As autpsias de rotina e o processamento de quan-
tidades de tecidos xados em formalina contendo prons humanos
requerem os cuidados de um nvel de biossegurana 2.
21
Na autp-
sia, todo o crebro deve ser coletado e cortado em seces coronais
de aproximadamente 4cm de espessura. Pequenos blocos de teci-
dos podem facilmente ser removidos de cada seco coronal e colo-
cados em um xador para posterior anlise histopatolgica. Cada
seco coronal dever ser imediatamente lacrada por calor em uma
sacola de plstico para carga pesada. Pressupe-se que o exterior
da sacola esteja contaminado por prons e outros patgenos. Com
luvas novas ou com a ajuda de um assistente que esteja usando
luvas sem contaminao, a sacola contendo a amostra dever ser
colocada em outra sacola plstica que no possua uma superfcie
exterior contaminada. As amostras, ento, devero ser congeladas
em gelo seco ou colocadas diretamente em um freezer com tempe-
ratura de 70C, para armazenamento. Deve-se obter e congelar,
no mnimo, uma seco coronal do hemisfrio do cerebelo conten-
do o tlamo e uma do hemisfrio cerebelar e do tronco cerebral.
A ausncia de qualquer tratamento ecaz para doenas prini-
cas demanda muita cautela. As maiores concentraes de prons
se encontram na rea do sistema nervoso central. Com base em
estudos animais, h a possibilidade de que altas concentraes de
prons sejam encontradas no bao, no timo, nos ndulos linfti-
cos e nos pulmes. O principal cuidado a ser tomado, quando se
143
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
estiver realizando um trabalho com material contaminado ou in-
fectado por prons, o de evitar a perfurao da pele.
25
A pessoa
que estiver realizando o procedimento dever utilizar luvas resis-
tentes a perfuraes. Caso ocorra uma contaminao acidental da
pele, a rea dever ser esfregada com hidrxido de sdio a 1N du-
rante cinco minutos e depois lavada com enormes quantidades de
gua. As listas de 1 a 4 proporcionam procedimentos para a redu-
o de perfuraes na pele, formao de aerossis e contaminao
da sala de cirurgia, das superfcies do necrotrio e dos instrumen-
tos. As amostras no-xadas de crebro, medula espinhal e de ou-
tros tecidos contendo prons humanos devero ser processadas
com extremo cuidado em um nvel de biossegurana 3.
ENcerntovnitn EsvoNotroume BovtNn: O risco de conta-
minao humana pelos prons BSE ainda no est muito claro.
Talvez, a abordagem mais prudente seja estudar os prons BSE em
dependncias de um nvel de biossegurana 2 ou 3 dependendo
das amostras a serem estudadas, como observado para prons hu-
manos (crebro e medula espinhal).
DoeNns PutNtcns em Roeooues ExveutmeNints: Os ca-
mundongos e hamsters so os animais experimentais de escolha
para todos os estudos da doena prinica. Com o desenvolvimen-
to do camundongo transgnico, que altamente susceptvel aos
prons humanos, o uso de chimpanzs e macacos raramente ne-
cessrio. As maiores titulaes de prons (~10
9,5
DI
50
/g) so encon-
tradas no crebro e na medula espinhal de roedores de laboratrio
infectados com cepas adaptadas de prons.
26, 27
As menores titula-
es (~10
6
DI
50

/g) esto presentes no bao e no sistema linforre-
ticular.
28, 29
Puovuteonoes Fstcns oos PuoNs: A menor partcula de um
pron infeccioso provavelmente de um dmero de PrP
Sc
. Essa esti-
mativa consistente com o tamanho de um alvo de radiao ioni-
zante de 55 9 kDa.
30
Portanto, os prons podem no ser contidos
pela maioria dos ltros existentes que, de forma ecaz, eliminam
as bactrias e os vrus. Alm disso, os prons se agregam s part-
culas de tamanho no-uniforme e, assim, os detergentes no con-
seguem solubiliz-los, exceto sob condies de desnaturao em
que a infectividade perdida.
31, 32
Os prons resistem inativao
144
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
por meio da nuclease,
33
da irradiao de UV a 254nm
34, 35
e do tra-
tamento com psoralens,
36
ctions divalentes, queladores do on
metal, cidos (entre pH 3 e 7), hidroxilamina, formalina, ebulio
ou proteases.
37, 38
INnitvnno oos vuoNs. Os prons se caracterizam pela ex-
trema resistncia aos procedimentos convencionais de inativa-
o, incluindo a irradiao, a ebulio, o calor seco e os agentes
qumicos (formalina, betapropiolactona e lcoois). Embora a in-
fectividade do pron em amostras puricadas seja diminuda pela
prolongada digesto com proteases,
39, 40
os resultados de ebulies
em dodecilsulfato de sdio e uria so variveis. A esterilizao de
extratos cerebrais de roedores com altas titulaes requer o uso
da autoclave a 132C durante quatro horas e meia. Os solventes
orgnicos desnaturadores, como o fenol, os reagentes caotrpicos,
como o tiocianato de guanidina, e os lcalis, como o NaOH, po-
dem tambm ser utilizados para a esterilizao.
41, 42, 43, 44, 45
Os pr-
ons so inativados por meio do NaOH a 1N, do cloridrato ou do
isocianato de guanidnio a 4.0 M, do hipoclorito de sdio (concen-
trao de cloro livre 2%) e da autoclave a vapor a 132C durante
quatro horas e meia.
46, 47, 48, 49
Recomenda-se que o dejeto seco seja
autoclavado a 132C durante quatro horas e meia ou ento inci-
nerado. Grandes volumes de dejetos lquidos infecciosos conten-
do altas titulaes de prons podem ser totalmente esterilizados
por meio do tratamento com NaOH a 1N (concentrao nal) ou
por meio de uma autoclave a 132C durante quatro horas e meia.
Os vasilhames plsticos, que podem ser descartados como dejeto
seco, so altamente recomendveis. Uma vez que o procedimento
de vaporizao com paraformaldedo no diminui a titulao do
prons, as cabines de segurana devem ser descontaminadas com
NaOH a 1N, seguido de HCI a 1N e depois enxaguadas com gua.
Os ltros HEPA devem ser autoclavados e incinerados.
Embora no haja evidncias que possam sugerir que a trans-
misso via aerossol ocorra na doena natural, mais prudente
evitar a formao de aerossis ou perdigotos durante a manipu-
lao de tecidos ou lquidos e durante a necropsia de animais ex-
perimentais. Recomenda-se, tambm, o uso de luvas para ativida-
des que propiciem o contato direto da pele com tecidos e lquidos
infecciosos. Os tecidos xados em formaldedos e embebidos em
145
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
parana, especialmente os tecidos cerebrais, permanecem infec-
ciosos. Alguns pesquisadores recomendam que tecidos de casos
suspeitos de doenas prinicas xados em formaldedos sejam
imersos, durante 30 minutos, em cido frmico a 96% ou em fe-
nol, antes de ser processados histopatologicamente,
50
mas esse
tratamento pode distorcer a neuropatologia microscpica.
MnNuseto e PuocessnmeNio oe Tectoos oe PncteNies
com Susvetin oe DoeNn vou PuoNs: As caractersticas es-
peciais do trabalho com prons requerem uma ateno particular
com as instalaes, os equipamentos, as normas e os procedimen-
tos envolvidos. As consideraes relacionadas sublinhadas nas se-
guintes listas devem ser incorporadas administrao dos riscos
laboratoriais para este trabalho.
Lista 1. Precaues padro* para autpsias de pacientes com
suspeita de doena por prons
*No confundir com procedimentos padro universais.
1. O atendimento dever ser limitado a um patologista ex-
periente e a uma equipe pequena. Os membros da equipe
devero evitar o contato direto com o corpo, mas deve-
ro assistir ao procedimento por meio do manuseio dos
instrumentos e recipientes da amostra.
2. Um traje padro para autpsia obrigatrio.
a. Ao invs de um avental de tecido, deve-se usar uma
roupa descartvel e prova de gua.
b. Luvas resistentes a cortes e perfuraes devero ser
colocadas debaixo de dois pares de luvas cirrgicas
ou luvas chain mail, que devero ser usadas entre
dois pares de luvas cirrgicas.
c. Os aerossis so formados principalmente durante a
abertura do crnio com uma serra Stryker. Uma prote-
o respiratria adequada dever ser utilizada (PAPR).
3. Para reduzir a contaminao da sala de autpsia:
a. A mesa de autpsia dever ser coberta com um len-
ol descartvel com fundo plstico prova dgua.
b. Os instrumentos contaminados devero ser coloca-
dos em um papel absorvente.
146
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
c. O crebro dever ser removido, enquanto a cabea
dever ser colocada em um saco plstico para a redu-
o da nebulizao e de borrifos.
d. O crebro poder ser colocado em um recipiente com
um revestimento de saco plstico para pesagem.
e. O crebro dever ser colocado em uma tbua de cor-
te e as amostras adequadas sero dissecadas para o
congelamento instantneo (veja a lista 3).
f. O crebro ou os rgos a ser fixados devero ser
imediatamente colocados em um recipiente com um
tampo neutro de formalina a 10%.
g. Na maioria dos casos de suspeita de doena prini-
ca, a autpsia pode ser limitada somente ao exame
do crebro. Em casos que exijam uma autpsia com-
pleta, devemos considerar o exame e a amostragem
dos rgos torcicos e abdominais in situ.
Lista 2. Procedimentos de descontaminao da sala de autpsia
1. Os instrumentos (grampos) e as lminas da serra deve-
ro ser colocados em uma placa grande de ao inoxidvel
que dever ser imersa durante uma hora em hidrxido de
sdio a 2N ou durante duas horas em hidrxido de sdio
a 1N. Depois devero ser bem enxaguados em gua antes
de serem autoclavados a uma temperatura de 134C (au-
toclave de vapor com deslocamento de gravidade por 1
hora; autoclave de vapor para cargas porosas por um ciclo
de 18 minutos a 30 libras por polegada quadrada ou seis
ciclos de 3 minutos a 30 libras por polegada quadrada).
2. A serra Stryker dever ser descontaminada com repetidas
umidicaes com uma soluo de hidrxido de sdio a
2N, por um perodo de um hora. Uma lavagem adequada
dever ser realizada para remoo do NaOH residual.
3. O papel absorvente que cobre a mesa e envolve os instru-
mentos, as roupas descartveis, etc. devero ser dupla-
mente embalados em sacos adequados para lixos infec-
ciosos, para posterior incinerao.
4. Quaisquer reas suspeitas de contaminao da mesa ou
da sala de autpsia devero ser descontaminadas por re-
147
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
petidos banhos de uma soluo de hidrxido de sdio a
2N, durante uma hora.
Lista 3. Procedimentos de corte do crebro
1. Aps a adequada xao em formaldedo (pelo menos de
10 a 14 dias), o crebro dever ser examinado e cortado so-
bre uma mesa coberta com um papel absorvente que pos-
sua a parte de trs coberta por um material impermevel.
2. As amostras para a histologia devero ser etiquetadas
com o termo: As precaues da CJD. Para laboratrios
que no possuam equipamento para colorao e imerso
ou um micrtomo exclusivo para doenas infecciosas
incluindo a CJD, blocos de tecido xado pela formalina
podero ser colocados em cido frmico absoluto a 96%
durante 30 minutos, seguido de uma soluo de tampo
neutro de formalina a 10% por pelo menos 48 horas.
51

O bloco de tecido ser, ento, imerso em parana como
normalmente realizado. As tcnicas padro neurois-
tolgicas ou imunoistoqumicas no so afetadas pelo
tratamento com o cido frmico. Porm, de acordo com
experincias, os cortes de tecidos se tornam quebradios
e danicados durante o seccionamento.
3. Todos os instrumentos e as superfcies que tiveram um
contato com o tecido devero ser descontaminados como
descrito na lista 2.
4. Os resduos de tecidos, fragmentos de cortes e a soluo
de formaldedo contaminado devero ser descartados
como lixo hospitalar para eventual incinerao.
Lista 4. Preparao do tecido
1. Os tcnicos de histologia devero usar luvas, aventais,
jalecos e proteo facial.
2. A xao adequada de pequenas amostras de tecidos (por
exemplo, bipsias) de um paciente com suspeita de doen-
a prinica dever passar por uma ps-xao em cido
frmico absoluto a 96% durante 30 minutos, seguido de
48 horas em formalina fresca a 10%.
148
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
3. O dejeto lquido dever ser coletado em um garrafo para
lixo de 4 litros contendo 600ml de hidrxido de sdio a 6N.
4. As luvas, os moldes imersos e todos os materiais de ma-
nipulao devero ser descartados como lixo de perigo
biolgico.
5. As tas de tecido devero ser processadas manualmente
para prevenir a contaminao dos processadores de tecido.
6. Os tecidos devero ser imersos em um molde descart-
vel. Caso haja sua utilizao, as pinas devero ser des-
contaminadas.
7. Ao preparar as seces, recomenda-se o uso de luvas. Os
cortes no usados devero ser coletados e desprezados
em um recipiente para lixo de perigo biolgico. A faca
dever ser lavada com uma soluo de NaOH a 1-2N e
dever ser descartada imediatamente em um recipiente
para objetos cortantes biolgicos. As lminas devero ser
etiquetadas com os dizeres Precaues contra CDJ. O
bloco seccionado dever ser xado com parana.
8. Colorao de rotina:
a. As lminas devero ser processadas manualmente.
b. Os reagentes devero ser preparados em clices de
100ml descartveis.
c. Aps a colocao da lamnula, as lminas devero ser
descontaminadas ao mergulh-las em uma soluo
de NaOh a 2N durante 1 hora.
d. As lminas devero ser etiquetadas como CDJ In-
fecciosos.
9. Outras sugestes:
a. Os clices descartveis ou as estantes para lminas
podero ser usados para os reagentes.
b. As lminas para a imunocitoqumica podero ser
processadas em placas de Petri descartveis.
c. O equipamento dever ser descontaminado como
descrito.
149
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
SEO VII-E: AGENTES RICKETTSIAIS
Agcntc: Coxiella burnetii
Dos agentes rickettisiais, a Coxiella burnetii provavelmente o
agente que apresenta o maior risco de uma infeco laboratorial.
O organismo altamente contagioso e incrivelmente resistente
secagem e s condies ambientais.
1
A dose infecciosa dos orga-
nismos da fase I virulenta em laboratrios animais tem sido calcu-
lada como sendo to pequena quanto um nico microorganismo.
A dose humana infecciosa estimada ID
25-50
(inalao) para a febre
Q de 10 organismos.
2
O resumo de Pike indica que a febre Q a
segunda infeco associada a laboratrio mais comumente relata-
da, com surtos envolvendo 15 ou mais pessoas registradas em v-
rias instituies.
3, 4
Vrios mamferos domsticos e selvagens so
os hospedeiros naturais da febre Q e podem servir como fontes
potenciais de infeco para as pessoas que trabalham em um labo-
ratrio e para os tratadores de animais de laboratrio. A exposio
a ovelhas naturalmente infectadas e freqentemente assintom-
ticas e a seus lhotes so parte de um risco documentado ao pes-
soal.
5, 6
Embora rara, a C. burnetii conhecida por causar infeces
crnicas como a endocardite ou a hepatite granulomatosa.
Rtscos em Inuouniuto: A necessidade do uso de ovos em-
brionrios ou de tcnicas de cultura celular para a reproduo da
C. burnetii leva a extensivos procedimentos de puricao. A ex-
posio aos aerossis contagiosos e a inoculao parenteral so as
fontes mais provveis de contgio para as pessoas que trabalham
em laboratrios e as que tratam de animais.
7
Os agentes podem
ser encontrados em artrpodes infectados, no sangue, na urina,
nas fezes, no leite e nos tecidos de hospedeiros animais ou hu-
manos infectados. As placentas de ovelhas infectadas podem con-
ter at 10
9
organismos por grama de tecido,
8
enquanto que o leite
pode conter 10
5
organismos por grama.
nvel de biossegurana 2 so indicadas para procedimentos labo-
ratoriais no-reprodutivos, incluindo os exames sorolgicos e a
colorao de impresso dos esfregaos. As prticas e as instalaes
150
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
do nvel de biossegurana 3 so indicadas para atividades envol-
vendo a inoculao, a incubao e a coleta de ovos embrionados
ou de culturas de clulas, a necropsia de animais infectados e a
manipulao de tecidos infectados. Uma vez que cobaias e outros
roedores possam conter o agente nas fezes ou na urina,
9
os roedo-
res experimentalmente infectados devero ser mantidos sob um
nvel de biossegurana animal 3. O isolamento clonal especco de
cepas no-virulentas (fase II) pode ser considerado para condies
de conteno inferiores.
10
Spinelli
11
e Bernard
12
descreveram as precaues recomendadas
para as instalaes quando ovelhas so utilizadas como animais
experimentais. Uma nova fase I de investigao, a vacina contra a
febre Q (IND), j se encontra disponvel para os indivduos inclu-
dos no Special Immnunizations Program (USAMRIID), em Fort
Detrick, Maryland. O uso da vacina deve se limitar aos indivduos
que esto expostos a altos riscos e que no tenham demonstrado
sensibilidade ao antgeno da febre Q. Os indivduos que possuem
uma doena cardiovalvular no devero trabalhar com a C. burnetii.
agente deve ser obtida junto ao CDC. No caso de uma licena para
exportao, esta dever ser conseguida no Department of Commer-
ce. O registro do laboratrio junto ao CDC necessrio para envio
ou recebimento do agente. J a licena para importao ou trans-
porte domstico do agente poder ser obtida no USDA/APHI/VS.
Agcntcs: Rickettsia prowazekii, Rickettsia typhi
(R. mooseri), Orientia (Rickettsia) tsutsugamushi
e os agentes do Grupo da Febre Maculosa de Doena
Humana; Rickettsia ricketsii, Rickettsia conorii,
Rickettsia akari, Rickettsia australis, Rickettsia
siberica e Rickettsia japonicum.
Pike relatou 57 casos de tifo (tipo no especicado) associado a
laboratrio; 56 casos de tifo epidmico, com trs mortes; e alguns
casos de tifo murino.
13
Mais recentemente, trs casos de tifo mu-
rino foram relatados em um laboratrio de pesquisa.
14
Dois desses
trs casos estavam associados ao manuseio de materiais infeccio-
sos em bancadas abertas. O terceiro caso foi provocado por uma
inoculao parenteral acidental. Esses trs casos representaram
151
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
uma incidncia de 20% das pessoas que trabalham com materiais
infecciosos.
A febre maculosa das Montanhas Rochosas um risco docu-
mentado para as equipes laboratoriais. Pike relatou 63 casos ad-
quiridos em laboratrio, dos quais 11 foram fatais.
15
Oster, por
sua vez, registrou 9 casos que ocorreram por um perodo de 6
anos em um laboratrio, que acreditava serem resultantes de uma
exposio aos aerossis infecciosos.
16
Rtscos em Inuouniuto: A inoculao parenteral acidental
e a exposio aos aerossis contagiosos so as fontes mais prov-
veis de infeces associadas a laboratrio.
17
A transmisso bem-
sucedida por meio de aerossis contaminados por R. rickettsii foi
documentada experimentalmente em primatas no-humanos.
18

Cinco casos de varola por riqutsia registrados por Pike estavam
associados exposio s picadas de caros infectados.
19
Mamferos naturalmente ou experimentalmente infectados,
seus ectoparasitas e seus tecidos infectados so considerados ris-
cos potenciais de infeco humana. Os organismos so relativa-
mente instveis sob condies ambientais normais.
nvel de biossegurana 2 so indicadas para procedimentos labo-
ratoriais no-reprodutivos, incluindo procedimentos sorolgicos
e de anticorpo uorescente e, ainda, a colorao de impresso dos
esfregaos. As prticas e as instalaes do nvel de biossegurana 3
so indicadas para todas as outras manipulaes de materiais sabi-
damente ou potencialmente infecciosos, incluindo a necropsia de
animais experimentalmente infectados e a triturao de seus teci-
dos, a inoculao, a incubao e a coleta de ovos embrionados e as
culturas de clulas. As prticas e as instalaes do nvel de biosse-
gurana animal 2 so indicadas para o alojamento de mamferos,
com exceo dos artrpodes experimentalmente infectados. J as
prticas e as instalaes do nvel de biossegurana 3 so indicadas
para estudos animais com artrpodes naturalmente ou experimen-
talmente infectados por agentes rickettsiais da doena humana.
Devido ao valor comprovado da terapia com antibiticos nos
estgios iniciais da infeco, essencial que os laboratrios que
152
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
trabalham com a riqutsia possuam um sistema ecaz de relato
de doenas febris na equipe laboratorial, uma avaliao mdica de
casos potenciais e, quando indicada, a instituio de uma terapia
antibitica adequada. As vacinas, atualmente, no esto disposi-
o para uso em homens (veja a seo seguinte sobre Vigilncia).
agente deve ser obtida junto ao CDC. No caso de uma licena para
exportao, esta dever ser conseguida no Department of Commer-
ce. O registro do laboratrio junto ao CDC necessrio para envio
ou recebimento do agente.
Vigilncia da Equipe Laboratorial em Relao s Infeces
Rickettsiais Adquiridas em Laboratrio
Sob circunstncias naturais, a gravidade da doena causada por
agentes rickettsiais varia consideravelmente. Em laboratrio, ino-
culaes muito grandes so possveis, o que poderia produzir res-
postas raras, mas muito srias. A vigilncia da equipe em relao
s infeces por riqutsias adquiridas em laboratrio pode reduzir
de forma dramtica o risco de srias conseqncias da doena.
A experincia mostra que as infeces, quando adequadamente
tratadas com quimioterapia anti-rickettisial especca no primeiro
dia da doena, geralmente no provocam srios problemas no in-
divduo. A demora em adotar essa quimioterapia, porm, pode re-
sultar em uma doena debilitante ou muito aguda, variando com
perodos crescentes de convalescena no caso do tifo, e em morte
no caso de tifo rural em infeces por R. rickettsii. A chave para a
reduo da gravidade da doena provocada por infeces associa-
das a laboratrio um sistema convel de vigilncia, que inclui:
1. Disponibilidade total de um mdico experiente; 2. Doutrina-
o de toda a equipe sobre os riscos potenciais do trabalho com
agentes rickettisiais e as vantagens de uma terapia precoce; 3. Um
sistema de relatrios para todas as exposies conhecidas e os aci-
dentes ocorridos; 4. Relatrios de todas as doenas febris, especial-
mente as associadas dor de cabea, ao mal-estar e prostrao,
quando no existir nenhuma outra causa; e 5. Uma atmosfera de
no-punio que possa motivar o relato de qualquer doena febril.
Os agentes rickttesiais podem ser manipulados em um labora-
trio com um perigo real mnimo, quando um sistema adequado
153
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
de vigilncia for complementado por uma equipe que tenha co-
nhecimento sobre os riscos de infeces por riqutsias e usos de
medidas seguras recomendadas pelo Resumo das Caractersticas
dos Agentes.
SEO VII-F: AGENTES VIRAIS (NO INCLUINDO
O ARBOVRUS)
Agcntcs: Hantavrus
O trabalho com o vrus de Hantaan (febre hemorrgica com
sndrome renal) e outros hantavrus (Puumala, Seul e Sin Nombre
sendo ou no registrados no International Catalogue of Arboviruses
and Certain Other Viruses 1985, como o vrus El Moro Canyon)
em ratos, ratazanas e outros roedores de laboratrio dever ser
conduzido com especial cuidado devido ao risco extremo de cont-
gio por aerossis, especialmente da urina de roedores infectados.
A sndrome pulmonar por hantavrus (HPS) uma nova do-
ena grave e freqentemente fatal, causada pelo vrus Sin Nombre
e/ou um vrus relacionado.
1
A maioria dos casos de patologias hu-
manas resultou de exposies a roedores selvagens naturalmente
infectados. Os vetores artrpodes no so conhecidos como trans-
missores do hantavrus. Nenhuma transmisso de um indivduo
para outro foi provocada por um vrus associado a essa doena.
Rtscos em Inuouniuto: A transmisso laboratorial do
hantavrus de roedores para os homens por aerossol bem do-
cumentada.
2, 3, 4, 5
As exposies s excrees de roedores, ao ma-
terial fresco para necropsia e s roupas que envolvem os animais
de laboratrio so supostamente associadas ao risco. Outras vias
potenciais de infeco incluem a ingesto, o contato de materiais
contagiosos com membranas mucosas ou pele rachada e, em par-
ticular, as mordidas de animais.
Quatro trabalhadores de laboratrio foram infectados enquan-
to trabalhavam com o vrus Hantaan adaptado a uma cultura de
clulas. Embora os procedimentos associados s infeces ainda
no estejam bem explicados, esses quatro indivduos trabalharam
repetidas vezes com culturas de hantavrus e realizaram a cen-
154
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
trifugao do vrus concentrado.
6
O RNA viral foi detectado em
amostras de necropsias e no sangue e plasma de um paciente co-
letados no incio da doena.
7
As implicaes dessas descobertas
para a infectividade do sangue ou dos tecidos so desconhecidas.
Puecnues RecomeNonons: As prticas e as instalaes do n-
vel de biossegurana 2 so indicadas para o manuseio laboratorial de
soros de pessoas potencialmente infectadas com os agentes da HPS.
O uso de uma cabine de segurana biolgica certicada recomen-
dado para todas as manipulaes com lquidos humanos corporais
quando existe um potencial para a formao de borrifos ou aerossis.
Amostras de tecidos potencialmente infectados devero ser ma-
nipuladas em instalaes do NB-2, seguindo as prticas e os pro-
cedimentos do NB-3. A reproduo do vrus em culturas de clulas
dever ser realizada em uma instalao do NB-3, seguida das pr-
ticas e dos procedimentos do NB-3. O crescimento em grande es-
cala do vrus, incluindo a preparao e o manuseio dos concentra-
dos virais, dever ser feito em instalaes de conteno do NB-4.
Espcies de roedores experimentalmente infectados conheci-
dos por no apresentarem o vrus nas fezes podero ser alojados
em instalaes do NBA-2, usando prticas e procedimentos do
NBA-2. As cabines de segurana e outros dispositivos de conten-
o fsica primria devero ser utilizados onde procedimentos com
um alto potencial para formao de aerossis estiverem sendo
conduzidos. O soro ou as amostras de tecidos de roedores poten-
cialmente infectados devero ser manipulados em NB-2, usando
prticas e procedimentos de um NB-3. Todo o trabalho envol-
vendo a inoculao do vrus contendo amostras do P. maniculatus
ou outras espcies permissivas dever ser conduzido em NBA-4.
TunNsreuNctn oo AoeNie: A licena para importao des-
ses agentes deve ser conseguida no CDC. A licena para exporta-
o dever ser conseguida junto ao Department of Commerce e
necessrio o registro do laboratrio no CDC antes do envio ou re-
cebimento dos agentes.
155
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Agcntcs: Hendra e Vrus Semelhantes Hendra
(inclusivc o vrus antcriormcntc conhccido
como Morbilivrus Eqino)
Surtos de um paramixovrus anteriormente desconhecido, que
foi primeiramente chamado de morbilivrus eqino e posterior-
mente denominado de vrus Hendra, ocorreram em cavalos na
Austrlia em 1994 e 1995.
8, 9, 10, 11, 12
Trs pessoas que possuam
um contato prximo com cavalos enfermos desenvolveram a en-
cefalite ou a doena respiratria e duas falecerem. Nenhum surto
associado doena humana foi reconhecido, mas dois indivduos
que trabalhavam em chiqueiro de porcos lembraram de uma doen-
a que tiveram semelhante gripe, na mesma poca em que ocor-
reram os surtos. Alm disso, todos os dois indivduos possuam
titulaes neutralizadoras de anticorpos ao vrus de Menangle. De
1998 a 1999, um surto da doena provocado por um vrus seme-
lhante, mas distinto do Hendra, aconteceu em Cingapura e na Ma-
lsia.
13
Nesses dois pases, a doena humana caracterizada por
febre, dor de cabea grave, mialgia e sinais de encefalite acome-
teu indivduos que tiveram um contato prximo com porcos (isto
, fazendeiros e trabalhadores de abatedouros). Poucos pacientes
desenvolveram uma doena respiratria. Metade das pessoas in-
fectadas por esse vrus faleceram. O(s) hospedeiro(s) natural(is)
da Hendra e dos vrus semelhantes Hendra no foram identica-
dos. Porm, na Austrlia os morcegos eram animais suspeitos de
carregarem o vrus Hendra. Estudos epidemiolgicos e laborato-
riais esto em andamento.
Nenhuma infeco adquirida em laboratrio conhecida por
ter sido resultante da exposio ao vrus Hendra ou semelhante
a ele. Porm, deve-se observar que nos surtos da Austrlia e da
Malsia/Cingapura, o vrus foi reconhecido como um signicativo
patgeno veterinrio. Estudos laboratoriais foram limitados aos
laboratrios de doenas infecciosas humanas e/ou veterinrias de
alta conteno. Os cientistas e veterinrios da sade pblica, por
sua vez, tm acompanhado de perto todos esses estudos.
Rtscos em Inuouniuto: O modo exato de transmisso ain-
da no foi estabelecido. Todos os casos at hoje estavam associa-
dos ao contato prximo com cavalos e com sangue ou lquidos cor-
porais de cavalos (Austrlia) ou de porcos (Malsia/Cingapura). O
156
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
vrus Hendra e o semelhante a ele foram encontrados nos tecidos
de animais contaminados durante os surtos descritos. Em um re-
cente surto na Malsia e em Cingapura, o antgeno viral foi desco-
berto no sistema nervoso central, nos tecidos renais e pulmonares
de casos humanos fatais.
14
Puecnues RecomeNonons: Devido aos riscos desconheci-
dos para os trabalhadores do laboratrio e ao impacto potencial
sobre criaes de animais nativos, o vrus dever ser pesquisado
ou diagnosticado no laboratrio. Os scais da sade e os gerentes
dos laboratrios devero avaliar a necessidade de se realizar um
trabalho com o vrus e a capacidade das dependncias antes de
iniciarem qualquer contato com o vrus Hendra, com o semelhan-
te a ele ou com vrus suspeitos relacionados. Especialistas em do-
enas da sade pblica e veterinria devero desenvolver planeja-
mentos, como estudos laboratoriais e transporte de amostras e de
substncias isoladas para o laboratrio. At que mais informaes
sejam conseguidas, o manuseio de amostras clnicas humanas e
as tentativas de isolamento desse vrus devero ser realizados em
dependncias de um NB-3 e por pessoas experientes. O NB-4 (la-
boratrio escafandro ou cabines de segurana classe III) dever
ser utilizado em qualquer trabalho envolvendo animais contami-
nados ou grandes quantidades de vrus.
15
se agente deve ser obtida junto ao CDC. No caso de uma licen-
a para exportao, esta dever ser conseguida no Department of
Commerce. O registro do laboratrio junto ao CDC necessrio
para envio ou recebimento do agente.
Agcntcs: Vrus da Hepatite A, Vrus da Hepatite E
As infeces com os vrus da hepatite A e E adquiridas em la-
boratrio no parecem ser importantes riscos ocupacionais para
as equipes laboratoriais. Porm, a doena um risco documentado
para as pessoas que manuseiam animais e para outros que traba-
lham com chimpanzs e outros primatas no-humanos experimen-
tal ou naturalmente contaminados.
16
O vrus da hepatite E parece
ser um risco menor para as pessoas que trabalham com ele em rela-
o ao grande risco envolvendo os que manuseiam o vrus da hepa-
tite A, exceto durante a gravidez, quando a infeco pode resultar
157
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
em uma doena fatal ou grave. Os trabalhadores que manipulam
outros primatas recentemente capturados e susceptveis (maca-
cos-coruja, sagis) podem tambm estar correndo um srio risco.
Rtscos em Inuouniuto: Os agentes podem ser encontra-
dos nas fezes, na saliva e no sangue de humanos e primatas no-
humanos contaminados. A ingesto de fezes, gua de vaso sani-
trio e outros materiais contaminados o risco primrio para a
equipe laboratorial. A importncia da exposio aos aerossis no
foi demonstrada. Cepas atenuadas ou no-virulentas dos vrus da
hepatite A resultantes de passagens em srie em cultura celular
foram descritas.
17, 18
de segurana e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so in-
dicados para atividades com fezes humanas ou de primatas no-
humanos conhecidamente ou potencialmente contaminadas. J
as prticas e as instalaes do nvel de biossegurana animal 2 so
indicadas para atividades que usem primatas no-humanos natu-
ralmente ou experimentalmente contaminados. Os tratadores de
animais devero usar luvas e tomar outras precaues adequadas
para evitar possveis exposies fecais-orais. Uma vacina inativa-
da licenciada contra a hepatite A est disponvel na Europa. Nos
Estados Unidos encontramos somente uma vacina de pesquisa re-
comendada para os trabalhadores de laboratrio. As vacinas con-
tra a hepatite E no esto disponveis para o uso em humanos.
Agcntcs: Vrus da Hepatite B, Vrus da Hepatite C
(anteriormente conhecidos como Vrus no-A e
Vrus no-B) e Vrus da Hepatite D
A hepatite B tem sido uma das infeces associadas a laborat-
rio
19
mais freqentemente encontradas, e os trabalhadores de la-
boratrio so reconhecidos como o grupo de maior risco de conta-
minao por esse vrus.
20
Os indivduos contaminados pelo vrus
da hepatite B correm o risco de contrarem o vrus da hepatite D
(delta), que incompleto e requer a presena do vrus da hepatite
B para se reproduzir.
158
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
A infeco por hepatite C pode acontecer em um laboratrio.
A prevalncia do anticorpo da hepatite C levemente maior em
trabalhadores da rea da sade pblica do que na populao em
geral. Evidncias epidemiolgicas indicam que a hepatite C dis-
seminada predominantemente pela via parenteral.
21, 22, 23
Rtscos em Inuouniuto: O vrus da hepatite B pode ser en-
contrado no sangue e nos produtos sangneos de origem huma-
na, na urina, no smen, no lquido cerebroespinhal e na saliva. A
inoculao parenteral, a exposio das membranas mucosas e da
pele lesada aos perdigotos so os riscos primrios laboratoriais. O
vrus pode ser estvel no sangue ou nos componentes do sangue
seco. Cepas atenuadas ou no-virulentas no foram identicadas.
O vrus da hepatite C tem sido detectado primariamente em
sangue e soro, menos freqentemente na saliva e raramente em
urina ou smen. Ele parece ser relativamente instvel, quando es-
tocado em temperatura ambiente e em congelamentos e descon-
gelamentos repetidos.
dicados para todas as atividades utilizando lquidos corporais e te-
cidos conhecidamente ou potencialmente contaminados. Precau-
es pessoais e conteno primria adicional, como as descritas
para o nvel de biossegurana 3, podem ser indicadas para ativi-
dades com potencial para a formao de perdigotos ou aerossis
e para as atividades envolvendo quantidades ou concentraes de
produo de materiais infecciosos. As prticas, os equipamentos
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana animal
2 so indicados para atividades que utilizem chimpanzs ou ou-
tros primatas no-humanos contaminados naturalmente ou ex-
perimentalmente. Deve-se usar luvas quando trabalhos com ani-
mais contaminados estiverem sendo realizados ou quando houver
a possibilidade de contato da pele com materiais contaminados.
As vacinas recombinantes licenciadas contra a hepatite B esto
disponveis e so altamente recomendadas e oferecidas aos traba-
lhadores de laboratrio.
24
J as vacinas contra as hepatites C e D
ainda no esto disponveis para uso humano.
159
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Alm dessas precaues recomendadas, as pessoas que traba-
lham com o HBV, o HVC ou outros patgenos do sangue devero
consultar o OSHA Bloodborne Pathogen Standard.
25
Questes rela-
cionadas interpretao desses padres devero ser direcionadas
aos escritrios federais, regionais e estaduais da OSHA.
ses agentes dever ser obtida junto ao CDC.
Agcntcs: Herpesvirus simiae (Cercopithecine herpesvirus
[CHV-1], B-virus)
O CHV-1 um alfaherpesvrus que ocorre naturalmente conta-
minando smios livres ou em cativeiro, incluindo a Macaca mulatta,
a M. fascicularis e outros membros do gnero. Em smios, este est
associado a leses orais vesiculares agudas, assim como infeces
latentes e freqentemente recrudescentes.
26
A infeco humana
tem sido documentada em pelo menos 50 casos, geralmente com
um resultado fatal ou com srias seqelas de encefalites.
27, 28, 29, 30,
31, 32, 33
Vinte e nove casos fatais de infeces humanas (com um n-
dice de fatalidade de 58%) com o CHV-1 foram relatados.
34, 35, 36, 37
Embora o CHV-1 apresente um risco potencial aos trabalha-
dores de laboratrios que manipulam esse agente, as infeces
humanas com o CHV-1 adquiridas em laboratrio, com raras ex-
cees, se limitaram aos trabalhadores que tiveram um contato
direto com os smios. As culturas celulares primrias de smios,
incluindo as clulas dos rins dos macacos rhesus comercialmente
preparadas, ocasionalmente podem ser assintomaticamente con-
taminadas com o CHV-1 e comprometidas em um caso humano.
38
O treinamento especco peridico sobre a avaliao do risco,
a compreenso dos modos de transmisso, a exposio ao CHV-1
e o uso adequado de equipamentos de proteo pessoal so itens
altamente recomendados para as pessoas que trabalham com ou
que possuam um contato direto com smios, seus tecidos e com
um meio ambiente potencialmente contaminado por eles (in-
cluindo gaiolas, brinquedos e materiais de dejetos). necessrio
um treinamento adequado para primeiros socorros e para o abas-
tecimento, alm de um apoio mdico emergencial.
160
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Rtscos em Inuouniuto: O alojamento assintomtico acon-
tece na maioria das transmisses entre os macacos e os trabalha-
dores humanos, embora o maior risco de se adquirir o vrus CHV-
1 de smios seja por meio da mordida de um macaco contaminado
que possua leses ativas. A contaminao da pele rachada ou das
membranas mucosas por secrees orais, oculares ou urogenitais
de smios contaminados durante suas infeces recrudescentes
ou primrias tambm perigosa e tem provocado pelo menos um
caso de mortalidade ocupacional.
39
A estabilidade de partculas vi-
rais em gaiolas e outras superfcies no conhecida, mas o risco
potencial dever ser reconhecido para cortes ou abrases provoca-
dos por essas superfcies potencialmente contaminadas. Acredita-
se que outros alfaherpesvrus no iro persistir no meio ambien-
te por longo tempo. O trabalho experimental com animais indica
que a importncia da exposio aos aerossis do CHV-1 possi-
velmente mnima. Cepas atenuadas ou no-virulentas ainda no
foram identicadas.
O agente tambm pode ser encontrado em vsceras torcicas e
abdominais e nos tecidos nervosos de smios naturalmente conta-
minados. Esses tecidos e as culturas preparadas a partir deles so
riscos potenciais.
40
nvel de biossegurana 2 so indicadas para todas as atividades en-
volvendo uso ou manipulao de tecidos lquidos corporais e mate-
riais para cultura de tecidos de smios. As prticas e as precaues
individuais adicionais, como as detalhadas para o nvel de biossegu-
rana 3, so indicadas para atividades envolvendo uso ou manipu-
lao de qualquer material conhecido por conter ou supostamente
conter o CHV-1, incluindo a reproduo in vitro do vrus para diag-
nstico. Seria prudente limitar as manipulaes de culturas posi-
tivas contendo altas titulaes de vrus para instalaes do nvel
de biossegurana 4 (CSB de classe III ou laboratrio escafandro
veja a seo III), dependendo da deciso do diretor do laboratrio.
As prticas e as instalaes do nvel de biossegurana 4 so re-
comendadas para as atividades envolvendo a reproduo e a mani-
pulao de quantidades e concentraes de produo de CHV-1.
161
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Todas as colnias de smios, mesmo as que acreditamos no pos-
surem o anticorpo do CHV-1, devem ser vistas como naturalmen-
te contaminadas. Os animais com leses orais sugestivas de uma
infeco pelo vrus B ativo devero ser identicados e manipulados
com extremo cuidado. Os estudos com animais experimentalmen-
te contaminados por CHV-1 devero ser conduzidos em um NBA-3.
Existem normas para o trabalho seguro com smios e estas de-
vero ser consultadas.
41, 42
O uso de luvas, mscaras, jalecos e ma-
caces recomendado para todas as pessoas enquanto estiverem
trabalhando com primatas no-humanos especialmente smios
e outras espcies do Velho Mundo e para todas as pessoas que
entrarem nas salas de animais onde os primatas no-humanos so
alojados. Para minimizar o potencial da exposio da membrana
mucosa,
43
alguma forma de barreira dever ser utilizada para pre-
venir a contaminao dos olhos, da boca e das narinas por borri-
fos e perdigotos. O uso de diferentes tipos de equipamento de pro-
teo individual (culos de proteo, culos com escudos slidos
ou escudos faciais usados juntamente com mscaras e respirado-
res) deve ser obrigatrio para a avaliao do risco em laboratrio.
As especicaes do equipamento devero ser balanceadas com o
trabalho realizado, de maneira que as barreiras selecionadas no
aumentem o perigo apresentado pelo local de trabalho, obscure-
cendo a viso e contribuindo para o aumento de mordidas, pica-
das por agulhas ou arranhes de animais.
As drogas antivirais representam grandes promessas em rela-
o terapia de coelhos contaminados com H. simiae. A limitada
experincia clnica
44, 45
sugere que essa terapia pode ser estendida
ao homem.
46, 47
Devido gravidade da infeco com o vrus, pessoas
com experincia mdica devero estar constantemente presentes
e disponveis para que possam gerenciar os incidentes envolven-
do as exposies ao agente ou as infeces suspeitas. A transmis-
so de homens para homens foi documentada em um nico caso,
mostrando que se deve tomar cuidado com lquidos vesiculares,
secrees orais e secrees conjuntivais de pessoas contamina-
das.
48
As vacinas no esto disponveis para o uso em humanos.
TunNsreuNctn oo AoeNie: A licena para a importao do
162
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Agcntc: Herpesvrus Humano
Os herpesvrus so patgenos humanos ubquos e so co-
mumente encontrados em uma variedade de materiais clnicos
submetidos ao isolamento do vrus. Embora poucos vrus sejam
agentes comprovadamente causadores de infeces associadas a
laboratrio, eles so patgenos primrios e oportunistas, espe-
cialmente em hospedeiros imunocomprometidos. Os vrus herpes
simples 1 e 2 e o vrus da varicela apresentam algum risco pelo
contato direto e/ou pelos aerossis. J os citomegalovrus e o v-
rus Epstein-Barr apresentam riscos de infeco relativamente bai-
xos para as equipes de laboratrio. O risco de uma infeco labo-
ratorial tendo os herpesvrus 6 e 7 como agentes etiolgicos ainda
desconhecido. Embora esse grupo diversicado de agentes virais
nativos no atenda aos critrios para que possam ser includos no
resumo das caractersticas dos agentes (isto , risco comprovado
ou alto risco potencial para infeces associadas a laboratrio e
para graves seqelas provocadas por uma infeco), a freqncia
de sua presena em materiais clnicos e o uso comum desse grupo
em pesquisas garante sua incluso nesta publicao.
Rtscos em Inuouniuto: Os materiais clnicos e as subs-
tncias isoladas dos herpesvrus apresentam um risco de infec-
o aps ingesto, inoculao parenteral acidental, exposio das
membranas mucosas dos olhos, do nariz ou da boca aos perdigo-
tos ou inalao de materiais concentrados nebulizados. As amos-
tras clnicas contendo o Herpesvirus simiae (vrus B), mais virulen-
to, podem ser inadvertidamente submetidas a diagnstico de uma
suspeita infeco por herpes simples. O vrus tambm foi encon-
trado em culturas de clulas renais primrias dos macacos rhesus.
O citomegalovrus pode ser um risco especial durante a gravidez
devido infeco potencial do feto.
cados para atividades que utilizem materiais clnicos sabidamente
ou potencialmente infecciosos ou culturas de agentes virais nati-
vos que estejam associadas ou sejam identicadas como patge-
nos primrios de doena humana. Embora existam poucas evidn-
cias de que os aerossis infecciosos sejam uma fonte signicativa
de infeces associadas a laboratrio, mais prudente evitar a for-
163
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
mao de aerossis durante a manipulao de materiais clnicos
ou de produtos isolados ou durante a necropsia de animais. Os
dispositivos de conteno primria (cabines de segurana biol-
gica) constituem a barreira bsica de proteo dos trabalhadores
para evitar a exposio a aerossis infecciosos.
ses agentes dever ser obtida junto ao CDC.
Agcntc: Inuenza
As infeces adquiridas em laboratrio e que possuem o vrus
da inuenza como agente causador no so normalmente docu-
mentadas na literatura. Entretanto, devem-se considerar dados
informais e relatrios publicados que indicam que, quando novas
cepas que apresentam um desvio ou uma utuao antignica fo-
ram introduzidas em um laboratrio para diagnstico ou pesqui-
sa, acabaram por causar infeces desse tipo.
49
As infeces adquiridas em laboratrios animais, por sua vez,
no foram relatadas, mas h uma grande possibilidade de trans-
misso por doninhas infectadas para o ser humano e vice-versa.
tecidos ou secrees respiratrias de humanos ou de grande parte
de animais contaminados e na cloaca de muitas espcies de aves
contaminadas. O vrus pode ser disseminado em mltiplos rgos
de algumas espcies animais infectadas.
O risco laboratorial primrio a inalao do vrus pela forma-
o de aerossis de materiais de animais contaminados ou pela
aspirao, suspenso ou mistura de amostras contaminadas pelo
vrus. A manipulao gentica tem um potencial de alterar o al-
cance, a patogenicidade e a composio dos vrus da inuenza.
Existe um potencial desconhecido na introduo de vrus huma-
nos transmissveis com uma nova composio antignica.
nvel de biossegurana 2 so indicadas para recebimento e inocula-
o rotineira de amostras laboratoriais para diagnsticos. O mate-
rial para autpsia dever ser manipulado em uma cabine de seguran-
a biolgica usando os procedimentos do nvel de biossegurana 2.
164
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Aitvtonoes UitttznNoo Cevns oe Vuus Nno-CoNiemvo-
unNens: Os requisitos para a biossegurana, no caso de infeco
adquirida em laboratrio e transmisso subseqente, devem estar
de acordo com as informaes disponveis sobre a patogenicidade
e a virulncia das cepas que esto sendo usadas e o potencial de
danos para o ser humano ou para a sociedade. As atividades de
produo e pesquisa utilizando cepas contemporneas podem ser
realizadas com segurana usando as prticas de conteno do nvel
de biossegurana 2. A susceptibilidade infeco com cepas hu-
manas no contemporneas mais velhas, recombinantes ou com
substncias isoladas de animais garante o uso de procedimentos
de conteno do nvel de biossegurana 2. Mas no h evidncias
para infeces adquiridas em laboratrio com referncia s cepas
A/PR/8/34 e A/WS/33 ou com suas variantes neurotrpicas mais
comumente usadas.
agente dever ser feita junto ao CDC. J a licena para importao
ou transporte domstico dever ser obtida junto ao USDA/APHIS/VS.
Agcntc: Vrus da Coriomeningite Linfoctica
As infeces com o vrus LCM adquiridas em laboratrio so
bem documentadas onde ocorram infeces em roedores de labo-
ratrio especialmente camundongos, hamsters e cobaias.
50, 51, 52

Os camundongos desprotegidos podem oferecer riscos especiais
por alojarem infeces crnicas silenciosas. As culturas celulares
que inadvertidamente se tornaram contaminadas representam
uma fonte potencial de infeco ou de disseminao do agente.
As infeces naturais so encontradas em primatas no-humanos,
incluindo chimpanzs e macacos sagis (o vrus Callitrichid um
vrus coriomeningite linfoctica), e pode ser fatal para os sagis.
Sunos e ces so vetores menos importantes.
Rtscos em Inuouniuto: Esse agente pode ser encontrado
no sangue, no lquido cerebroespinhal, na urina, nas secrees da
nasofaringe, nas fezes e nos tecidos de hospedeiros animais con-
taminados e, possivelmente, do homem. A inoculao parenteral,
a inalao, a contaminao das membranas mucosas ou de peles
rachadas por tecidos ou lquidos contaminados de animais in-
165
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
fectados so os riscos mais comuns. A transmisso por aerossis
tambm bem documentada.
53
O vrus pode oferecer um risco es-
pecial durante a gravidez devido infeco potencial do feto.
nvel de biossegurana 2 so indicadas para as atividades que utili-
zam lquidos corporais sabidamente ou potencialmente infecciosos
e passagem de cultura celular de cepas de clulas cerebrais de ca-
mundongo adaptadas para laboratrio. As prticas e as instalaes
do nvel de biossegurana animal 2 so adequadas para estudos em
camundongos adultos com cepas de passagem cerebrais de rato.
Porm, a conteno e as precaues individuais adicionais, como
as descritas para o nvel de biossegurana 3, so indicadas para
atividades que possuam um alto potencial para a formao de ae-
rossis ou atividades que envolvam quantidades ou concentraes
de produo de materiais infecciosos. Essas precaues tambm
so recomendadas para a manipulao de tumores contaminados
infectveis, o isolamento de campo e os materiais clnicos de casos
humanos. As prticas e as instalaes do nvel de biossegurana
animal 3 so recomendadas para o trabalho com hamsters conta-
minados. As vacinas no esto disponveis para uso em humanos.
54
Agcntc: Poliovrus
As infeces com o poliovrus adquiridas em laboratrio so
raras e se limitam s pessoas que trabalham diretamente com esse
vrus em laboratrio e no so vacinadas.
55
Existem no mnimo 12
casos documentados de infeces por poliovrus associados a labo-
ratrio, incluindo duas mortes entre 1941 e 1976.
56
Porm, uma
vez que ~1% das infeces com o poliovrus resultou em patolo-
gia, sem uma conrmao laboratorial impossvel estimar pre-
cisamente os nmeros das infeces adquiridas em laboratrio.
Com vacinas e instalaes laboratoriais ecazes, tecnologia e pro-
cedimentos bem possvel que essas infeces j sejam raras em
laboratrios. Mas, se os trabalhadores de um laboratrio se con-
taminarem, eles se tornaro uma fonte de vrus para a populao
no-vacinada.
57
As infeces em animais associadas a laboratrio,
entretanto, no tm sido relatadas,
58
mas os primatas no-huma-
166
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
nos experimentalmente ou naturalmente contaminados poderiam
ser uma fonte de infeco se expostos s pessoas no-imunizadas.
Os ratos transgnicos apresentam o receptor humano para o polio-
vrus e podem tambm ser fontes potenciais de infeco humana.
Rtscos em Inuouniuto: Esse agente est presente nas fezes
e em secrees de garganta de pessoas infectadas. A ingesto e a
inoculao parenteral de tecidos ou lquidos infecciosos por traba-
lhadores no-imunizados so consideradas como risco primrio de
infeco em laboratrios. As exposies laboratoriais oferecem um
risco insignicante para as pessoas adequadamente imunizadas.
nvel de biossegurana 2 so indicadas para todas as atividades
que utilizam lquidos sabidamente ou potencialmente infecciosos
e materiais clnicos contendo ou suspeitos de conter cepas do tipo
selvagem. Todos os trabalhadores de laboratrio que trabalhem
diretamente com o agente devero possuir um atestado de vaci-
nao ou provas sorolgicas da imunidade a todos os trs tipos de
poliovrus.
59
As prticas e as instalaes do nvel de biossegurana
animal 2 so indicadas para estudos de vrus virulentos em ani-
mais. A menos que existam fortes razes cientcas para o traba-
lho com poliovrus virulentos (que foram erradicados dos Estados
Unidos), os laboratrios devero usar cepas de vacina oral Sabin
de poliovrus atenuado. Essas no oferecem risco algum equipe
imunizada dos laboratrios.
A Organizao Mundial da Sade (WHO) tem publicado guias
documentadas
60
relacionadas ao trabalho com o poliovrus selva-
gem. A partir de 1999, os laboratrios que manipulam o poliovrus
devero estabelecer um NB-2 (especco para plio) para todos os
trabalhadores que manipulam ou que forem manipular o poliovrus
selvagem. As NB-2 para plio seguem os requisitos do NB-2 tradi-
cional quanto a instalaes, prticas e procedimentos com os se-
guintes acrscimos: 1) todos os estoques de poliovrus e materiais
potencialmente infecciosos sero descartados quando no houver
mais a necessidade de ret-los para a realizao de pesquisas ou
diagnsticos; 2) todas as pessoas que entrarem no laboratrio de-
vero estar completamente imunizadas contra o vrus da plio; 3)
o acesso ao laboratrio dever ser restrito; 4) todos os poliovrus
167
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
selvagens retidos no laboratrio devero ser relacionados e arma-
zenados em uma rea separada e segura com acesso limitado; 5) so-
mente os vrus que forem prontamente identicveis por mtodos
moleculares sero usados se as cepas de vrus selvagens ou estoques
de trabalho forem necessrios; e 6) o descarte de poliovrus selva-
gens, materiais infecciosos e materiais potencialmente infecciosos
dever ser feito utilizando a esterilizao e/ou a incinerao.
Todos os laboratrios que desejarem guardar materiais conta-
minados por poliovrus selvagem ou potencialmente infecciosos
devero comear a implementao dos procedimentos de conten-
o do nvel de biossegurana 3 para plio e fornecer a documen-
tao necessria para implementao at o segundo ano. Os labo-
ratrios que desejarem ser qualicados como uma instalao de
NB-3/plio e quiserem reter materiais contaminados por polio-
vrus devero ser relacionados na Agency/Institutional e no Na-
tional Inventories. J os que no desejarem a converso para uma
conteno de NB especca para a plio devero destruir todos os
materiais contendo o poliovrus selvagem ou potencialmente in-
fecciosos com incinerao ou uso da autoclave. Uma outra alter-
nativa seria o contato com um depsito especco designado pela
Organizao de Sade Pblica para conteno de agentes de um
NB-3/plio, que sero responsveis pelo transporte e armazena-
mento dos materiais selecionados.
Quando a imunizao pela OPV (vacina oral de poliovrus vivos)
terminar, todo o trabalho com o poliovrus selvagem car restrito
a laboratrios de conteno mxima (NB-4). Essa dever ser em la-
boratrios cabines ou laboratrios de roupa de proteo (seo III).
TunNsreuNctn oo AoeNie: A licena para a importao des-
se agente dever ser obtida junto ao CDC.
Agcntc: Poxvrus
Casos espordicos de infeces por poxvrus (catapora, vac-
nia, yabapox, tanabox) foram relatados.
61
Evidncias epidemiol-
gicas sugerem que a transmisso do vrus do macaco para homens
ou de roedores para homens possa ter ocorrido na natureza, mas
no nas dependncias de um laboratrio. Animais de laboratrios
naturalmente ou experimentalmente contaminados so fontes
168
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
potenciais de infeco para pessoas que trabalham em um labo-
ratrio e no so vacinadas. Vrus da vacnia recombinantes repro-
duzidos geneticamente oferecem um risco potencial ainda maior
para a equipe laboratorial devido ao contato direto ou contato
com materiais clnicos de voluntrios ou animais contaminados.
Rtscos em Inuouniuto: Esses agentes podem ser encontra-
dos em lquidos de leses ou em escaras, secrees respiratrias ou
tecidos de hospedeiros contaminados. A ingesto, a inoculao pa-
renteral e a exposio de membranas mucosas ou da pele rachada
aos perdigotos ou aerossis de lquidos ou tecidos infecciosos so
os riscos primrios para trabalhadores de laboratrio e tratadores
de animais. Alguns poxvrus so estveis em temperatura ambien-
te quando secos e podem ser transmitidos por meio dos fmites.
Puecnues RecomeNonons: A posse e o uso do vrus da va-
rola cam restritos ao Collaborating Center for Smallpox and Other
Poxvirus Infections, da Organizao Mundial da Sade, localizado
nos Centros de Controle e Preveno de Doenas, em Atlanta, Ge-
orgia. As prticas e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so
recomendadas para todas as atividades envolvendo o uso ou a ma-
nipulao de poxvrus, com exceo do vrus da varola, que apre-
senta um grande risco de infeco aos homens. Todas as pessoas
que trabalham dentro de um laboratrio ou que forem entrar nas
reas de laboratrio ou reas dos animais onde atividades com os
vrus vacnia, vrus da varola bovina e de macacos estiverem sen-
do conduzidas devero possuir um atestado de vacinao. Essa
imunizao dever ter sido realizada dentro de um perodo de dez
anos. As atividades com os vrus relacionados anteriormente, em
quantidades maiores que as apresentadas nas culturas para diag-
nstico, podero tambm ser conduzidas em um nvel de biosse-
gurana 2, mas por pessoas imunizadas j que todas as mani-
pulaes de materiais viveis devero ser realizadas em cabines
de segurana biolgica classe I ou II. Indivduos imunodeprimidos
correm um risco de adquirirem uma patologia ainda mais grave
quando infectados por um poxvrus.
64
se agente dever ser obtida junto ao CDC. No caso de uma licena
169
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
para exportao, esta dever ser obtida no Department of Com-
merce. O registro dos laboratrios junto ao CDC dever ser obtido
antes do envio ou recebimento dos agentes.
Agcntc: Vrus da Raiva
As infeces provocadas por esse agente e adquiridas em labo-
ratrio so extremamente raras. Somente duas foram documenta-
das. Todas as duas resultaram de uma suposta exposio a nevoas
infecciosas de altas titulaes, sendo uma formada em um local
de produo da vacina
65
e a outra em um local de pesquisa.
66
Os
animais naturalmente ou experimentalmente contaminados, seus
tecidos e suas excrees constituem uma fonte potencial de expo-
sio para o pessoal do laboratrio e tratadores de animais.
todos os tecidos de animais contaminados. As maiores titulaes
so encontradas em tecidos do sistema nervoso central, glndulas
salivares e na saliva. A inoculao acidental, os cortes ou as farpas
de equipamento laboratorial contaminado, as mordidas de ani-
mais infectados e a exposio de membranas mucosas (ou da pele
rachada) a lquidos ou tecidos contaminados so as fontes mais
provveis de riscos para a equipe laboratorial e os tratadores de
animais. J os aerossis contaminados ainda no foram demons-
trados como sendo um perigo comprovado ao pessoal que traba-
lha com materiais clnicos e conduzem exames de diagnsticos.
Cepas xas ou atenuadas desse vrus so supostamente menos
perigosas, mas os nicos dois casos comprovados de raiva adqui-
ridos em laboratrio resultaram de exposio de um Padro Viral
Desaador (CVS) xo e de uma cepa atenuada derivada de uma
cepa SAD (Street Alabama Duerin), respectivamente.
67, 68
que utilizam materiais sabidamente ou potencialmente infeccio-
sos. A imunizao recomendada para todos os indivduos an-
tes que se inicie o trabalho com o vrus da raiva ou com animais
infectados ou atividades que envolvam diagnstico, produo ou
pesquisa do vrus. A imunizao tambm recomendada para to-
dos os indivduos que forem entrar na mesma sala onde o vrus da
raiva ou de animais contaminados estiver sendo usado. Embora
170
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
no seja sempre possvel abrir o crnio ou retirar o crebro de um
animal infectado dentro de uma cabine de segurana biolgica,
essencial o uso de luvas pesadas de proteo para prevenir cortes
ou farpas de instrumentos cortantes ou de fragmentos de ossos e
tambm o uso de um escudo facial para proteo das membranas
mucosas dos olhos, do nariz e da boca quanto exposio destas
aos perdigotos infecciosos ou aos fragmentos de tecidos. Se a ser-
ra de Stryker for usada para abrir o crnio, evite o contato do cre-
bro com a lmina da serra. A conteno primria e as precaues
individuais adicionais, como as descritas para o nvel de biossegu-
rana 3, podero ser indicadas para atividades com um alto poten-
cial de formao de aerossis ou perdigotos e para as atividades
que envolvam quantidades ou concentraes de materiais infec-
ciosos em grande escala.
Agcntcs: Retrovrus, incluindo o Vrus da Imunodecincia
Humana e o Vrus da Imunodecincia Smia (HIV e SIV)
Os dados sobre a transmisso do HIV ocupacional para traba-
lhadores de um laboratrio so coletados por intermdio de dois
sistemas de vigilncia nacional apoiados pelos CDC: vigilncia
quanto aids e s pessoas infectadas pelo HIV que no adquiriram
a infeco em exposies ocupacionais. Para propsitos de vigiln-
cia, os trabalhadores de laboratrio so denidos como as pessoas,
incluindo estudantes e estagirios, que trabalham ou j trabalha-
ram em um laboratrio para diagnstico do HIV ou laboratrio cl-
nico a partir de 1987. Os casos reportados nesses dois sistemas so
classicados como uma transmisso ocupacional possvel ou docu-
mentada. As que so classicadas como transmisso ocupacional
documentada possuem evidncias de uma soroconverso do HIV
(um teste HIV negativo no momento da exposio que se alterou
e se tornou positivo) seguida de uma discreta exposio ocupacio-
nal percutnea ou mucocutnea ao sangue, aos lquidos ou a ou-
tras amostras clnicas ou laboratoriais. At junho de 1998, o CDC
havia registrado 16 trabalhadores de laboratrios (todos clnicos)
nos Estados Unidos com transmisso ocupacional documentada.
69
171
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Em 1992, dois trabalhadores de diferentes laboratrios desen-
volveram o vrus da imunodecincia de smios (SIV) aps terem
se exposto. Um caso estava associado a uma picada de agulha, que
aconteceu enquanto o trabalhador estava manipulando uma agu-
lha contaminada com sangue aps uma hemorragia em um maca-
co infectado por SIV.
70
J o outro caso envolveu um trabalhador
que manipulava amostras de sangue de um macaco infectado pelo
SIV sem usar luvas. Embora ele no se lembrasse desse incidente
especco, este indivduo apresentou dermatites nos antebraos
e nas mos enquanto trabalhava com amostras de sangue infec-
tado.
71
O primeiro trabalhador apresentou uma soroconverso e,
portanto, no apresentou evidncia alguma de infeco pelo SIV.
O segundo era soropositivo durante pelo menos nove anos, sem
evidncia alguma da doena ou de decincia imunolgica.
Publicaes recentes
72, 73
identicaram a prevalncia (4/231,
1,8%) da infeco por vrus espumosos de smios (SFV) entre hu-
manos ocupacionalmente expostos a primatas no-humanos. O
diagnstico de infeces por SFV inclui a soropositividade, a de-
teco de DNA proviral e o isolamento do vrus espumoso. O SFV
se originou do macaco-verde africano (uma pessoa) e de babunos
(trs pessoas). Essas infeces ainda no provocaram doenas ou
transmisso sexual e podem representar infeces benignas.
Rtscos em Inuouniuto: O HIV tem sido isolado do sangue,
do smen, da saliva, das lgrimas, da urina, do lquido cerebro-
espinhal e do tecido de pessoas infectadas e de primatas no-hu-
manos experimentalmente infectados.
74
O CDC recomenda que
os cuidados com o sangue e os lquidos corporais sejam intensi-
cados consistentemente quando amostras de sangue contami-
nadas estejam sendo manipuladas.
75, 76
Essa abordagem, chamada
de precaues universais, inclui a necessidade de identicar as
amostras clnicas obtidas de pacientes soropositivos ou de se rea-
lizar um teste HIV da amostra.
Embora o risco de um HIV adquirido ocupacionalmente se d
primariamente por meio da exposio ao sangue contaminado,
deve-se usar luvas quando outros lquidos corporais como fezes,
saliva, urina, lgrimas, suor, vmito e leite do seio humano esti-
verem sendo manipulados. Esse procedimento tambm reduzir
172
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
o potencial de exposio a outros microorganismos que possam
causar outros tipos de infeces.
No laboratrio, deve-se supor que o vrus esteja presente em
todas as amostras sangneas ou clnicas contaminadas por san-
gue, em qualquer tecido ou rgo (que no seja a pele intacta) hu-
mano (vivo ou morto) no xado, em culturas de HIV, em todos
os materiais derivados de culturas de HIV e em/sobre equipamen-
tos e dispositivos que tenham um contato direto com qualquer
um desses materiais.
J o SIV tem sido isolado no sangue, no lquido cerebroespi-
nhal e em uma variedade de tecidos de primatas no-humanos in-
fectados. Existem dados limitados sobre a concentrao do vrus
no smen, na saliva, no lquido cerebroespinhal, na urina, no leite
materno humano e no lquido amnitico. No laboratrio, deve-se
supor que o vrus esteja presente em todas as culturas com SIV,
em animais experimentalmente infectados ou inoculados com
SIV, em todos os materiais derivados de culturas de HIV ou de SIV
e em/sobre todos os equipamentos de dispositivos que tenham
um contato direto com qualquer um desses materiais.
77
No laboratrio, a pele (especialmente quando arranhes, cor-
tes, abrases, dermatites ou outras leses estiverem presentes) e
as membranas mucosas dos olhos, do nariz e da boca devero ser
consideradas como vias de entrada potenciais desses retrovrus.
No se sabe se a infeco pode ocorrer via trato respiratrio. A
necessidade do uso de objetos cortantes no laboratrio dever ser
avaliada. Agulhas, instrumentos aados, vidros quebrados e ou-
tros objetos aados devero ser cuidadosamente manipulados e
adequadamente descartados. Deve-se tomar cuidado para preve-
nir a formao de borrifos ou o vazamento do lquido de cultura
de clulas contaminadas e de outros materiais contendo o vrus
ou potencialmente contaminados.
78
Puecnues RecomeNonons: Alm das seguintes precau-
es recomendadas, as pessoas que trabalham com o HIV, o SIV
ou outros patgenos presentes no sangue devero consultar a
OSHA Bloodborne Pathogen Standard.
79
As questes relacionadas
173
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
interpretao desse padro devero ser dirigidas aos escritrios
federais, regionais ou estaduais da OSHA.
1. O padro do NB-2 e as prticas especiais, os equipamen-
tos de conteno e as instalaes so indicados para as
atividades que envolvam todas as amostras clnicas con-
taminadas com sangue, lquido corporal e tecidos de to-
dos os homens ou animais laboratoriais inoculados ou
infectados com SIV ou HIV.
2. As atividades como a produo de quantidades em gran-
de escala, para laboratrios de pesquisas de HIV ou SIV,
a manipulao de preparaes concentradas de vrus e a
conduo de procedimentos que

possam formar perdi-
gotos ou aerossis devero ser realizadas em um local de
NB-2, mas usando prticas e equipamentos de conteno
adicionais recomendadas para o nvel de biossegurana 3.
3. As atividades que envolvem volumes em escala industrial
ou a preparao de HIV ou SIV concentrado devero ser
conduzidas em um local de NB-3, usando prticas e equi-
pamentos de contenos 3.
4. Primatas no-humanos ou outros animais infectados
com HIV ou SIV devero ser alojados em instalaes de
NB-2 usando prticas especiais e equipamentos de con-
teno de NBA-2.
ComeNinutos AotctoNnts:
1. No existem evidncias de que as roupas usadas em la-
boratrio representam um risco para a transmisso do
retrovrus. Porm, as roupas contaminadas pelo HIV ou
SIV devero ser descontaminadas antes de encaminha-
das

para a lavanderia ou descartadas. A equipe do labora-
trio dever retirar a roupa usada nesse local antes de se
dirigir s reas no-pertencentes ao laboratrio.
2. As superfcies de trabalho devero ser descontamina-
das com um germicida qumico apropriado depois de o
procedimento ser concludo, quando as superfcies esti-
verem excessivamente contaminadas e no nal de cada
dia de trabalho. Muitos desinfetantes qumicos vendidos
comercialmente
80, 81, 82, 83, 84
podero ser utilizados para
174
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
a descontaminao das superfcies do laboratrio e de
alguns instrumentos, para limpeza local de roupas con-
taminadas usadas em laboratrio e para vazamento de
materiais infecciosos. A descontaminao imediata de
vazamentos ocorridos dever ser uma prtica padro.
3. O soro humano de qualquer fonte usado como um con-
trole ou reagente em um teste dever ser manipulado em
um NB-2.
4. Recomenda-se que todas as instituies estabeleam nor-
mas por escrito em relao ao gerenciamento das expo-
sies em laboratrio do HIV e do SIV juntamente com
as leis federais, estaduais e locais aplicveis. Tais normas
devero considerar como condenciais questes como o
consentimento para realizao de teste, a administrao
de terapia de drogas prolticas adequadas,
85
o aconse-
lhamento e outros itens relacionados. Se um trabalhador
do laboratrio expuser a membrana mucosa ou parente-
ral ao sangue, ao lquido corporal ou ao material de cul-
tura viral, o material utilizado dever ser identicado e,
se possvel, testado para vericao da presena do vrus.
Se o material fonte for HIV positivo para o antgeno, v-
rus ou anticorpo ou no possuir quantidade suciente
para realizao do teste, o trabalhador dever ser acon-
selhado sobre o risco de infeco e avaliado clinicamente
e sorologicamente para evidncia de uma infeco por
HIV. A prolaxia ps-exposio dever ser oferecida de
acordo com as ltimas normas. O trabalhador deve ser
instrudo a relatar e procurar atendimento mdico caso
haja a ocorrncia de um quadro agudo de febre, com 12
semanas aps a exposio.
86
Uma vez que a doena pos-
sui caractersticas singulares, se o indivduo apresentar
sintomas como febre, erupes ou linfoadenopatias, es-
ses podero ser indicativos de uma infeco recente ao
HIV. Se no incio (no momento da exposio) o teste for
negativo, o trabalhador dever refazer o teste 6 semanas
depois da exposio e, a partir da, periodicamente (isto
, na 12. semana e no 6., 9. e 12. ms aps a exposi-
o). Durante o acompanhamento, os trabalhadores ex-
175
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
postos devero ser aconselhados a se prevenir contra a
transmisso do HIV.
87, 88, 89, 90, 91
5. Outros agentes patognicos oportunistas e primrios po-
dero estar presentes nos lquidos corporais e tecidos de
pessoas infectadas com o HIV. Os trabalhadores de labo-
ratrio devero seguir as prticas de biossegurana acei-
tas para assegurar uma proteo mxima contra a expo-
sio inadvertida aos agentes, que podem tambm estar
presentes em amostras clnicas ou em amostras obtidas
de primatas no-humanos.
92, 93, 94
A pesquisa envolvendo outros retrovrus humanos (isto , v-
rus linfotrpico-T tipos I e II) e de smios est sendo desenvolvida
em muitos laboratrios. Uma vigilncia recente para essas infec-
es revelou a exposio e a infeco ocupacional pelo vrus espu-
moso do smio entre zeladores de animais de locais de pesquisas
laboratoriais.
95, 96
As precaues destacadas devero ser sucientes
enquanto o trabalho com os agentes estiver sendo conduzido.
Os laboratrios que trabalham com vetores do retrovrus, es-
pecialmente os que possurem genomas moleculares infecciosos
de longa durao (HIV-1), devero ser manipulados em NB-2 sob
a prtica de NB-2/3. Isso inclui os clones infecciosos derivados de
vrus no-humanos, mas que possuem uma esfera de hospedeiro
xemotrpio (especialmente para clulas humanas).
Agcntcs: Encefalopatias Espongiformes Transmissveis
(por agcntcs da Creutzfeldt-Jakob, kuru e outros
agentes)
As infeces por encefalopatias espongiformes transmiss-
veis adquiridas em laboratrio (doenas prinicas) ainda no fo-
ram documentadas. Porm, existe uma evidncia de que a doena
de Creutzfeldt-Jakob (CJD) tenha sido iatrogenicamente trans-
mitida aos pacientes em transplantes de crnea, transplantes da
dura-mter, na extrao do hormnio do crescimento das glndu-
las pituitrias humanas e pela exposio aos eletrodos eletroen-
cefalogrcos contaminados.
97
A infeco sempre fatal. No se
176
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
conhece um reservatrio no-humano para a CJD ou para a kuru.
Os primatas no-humanos e outros animais de laboratrio foram
contaminados por intermdio da inoculao, mas no existem evi-
dncias de uma transmisso secundria. A scrapie de ovelhas e ca-
bras, a encefalopatia espongiforme bovina e a encefalopatia de vi-
ses so encefalopatias espongiformes transmissveis de animais
que so semelhantes s doenas humanas transmissveis. Entre-
tanto, no existem evidncias de que as doenas animais possam
ser transmitidas ao homem. (Veja tambm a seo VII-D, Prons).
Rtscos em Inuouniuto: Altas titulaes de um agente
transmissvel foram encontradas no crebro e na medula espi-
nhal de pessoas com kuru. Em pessoas com a doena de Creutzfel-
dt-Jakob e as variantes da Sndrome de Gerstmann-Strussler-
Schenker, encontrou-se um agente transmissvel semelhante no
crebro, no bao, no fgado, nos ndulos linfticos, nos pulmes,
na medula espinhal, nos rins, na crnea, nas lentes, no lquido
espinhal e no sangue. A inoculao parenteral acidental, especial-
mente de tecidos nervosos, incluindo amostras de tecidos no--
xados, extremamente perigosa. Embora os tecidos no-nervosos
sejam bem menos infecciosos, todos os tecidos de homens e de
animais infectados com esses agentes devero ser considerados
potencialmente perigosos. O risco de uma infeco por aerossis,
perdigotos e exposies da pele intacta, das membranas mucosas
e gstricas no conhecido. No h evidncia de contaminaes
por transmisso por aerossis ou contato. Esses agentes so ca-
racterizados pela extrema resistncia aos procedimentos de inati-
vao convencionais, incluindo a radiao, a ebulio, o calor seco
e as substncias qumicas (formalina, betapropiolactona, lcool).
Porm, eles foram inativados pelo uso de NaOH a 1N, de hipoclo-
reto de sdio (concentrao de cloro livre > 2%) e da autoclave a
vapor durante quatro horas e meia em uma temperatura de 132C.
utilizando tecidos e lquidos sabidamente ou potencialmente in-
fecciosos de homens naturalmente infectados e de animais expe-
rimentalmente infectados. Deve-se tomar um extremo cuidado
para evitar a auto-inoculao acidental ou outras inoculaes pa-
renterais traumticas de tecidos e lquidos infecciosos.
98
Embora
177
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
no haja evidncias que sugiram a transmisso via aerossis na
doena natural, mais prudente evitar a formao de aerossis
ou perdigotos durante a manipulao de tecidos e lquidos e du-
rante a necropsia de animais experimentais. Recomenda-se mui-
to o uso de luvas para as atividades que proporcionem o contato
da pele com tecidos e lquidos infectados. Os tecidos xados em
formaldedo e imersos em parana, especialmente os tecidos do
crebro, permanecem infecciosos. Recomenda-se, ento, que os
tecidos de casos suspeitos de encefalopatia xados em formalina
sejam imersos em cido frmico a 96% durante trinta minutos
antes do processamento histopatolgico.
99
As vacinas no esto
disponveis para uso em humanos.
100
ses agentes dever ser obtida junto ao CDC. A licena para impor-
tao ou transporte domstico do vrus da encefalopatia espongi-
forme bovina poder ser obtido no USDA/APHIS/VS.
Agcntc: Vrus da Estomatite Vesicular (VSV)
Um nmero de infeces por cepas nativas do VSV adquiridas
em laboratrio foi relatado.
101
As atividades laboratoriais com es-
sas cepas apresentam dois diferentes nveis de risco ao pessoal
do laboratrio e esto relacionadas, pelo menos em parte, his-
tria das passagens das cepas utilizadas. As atividades que usam
criaes, seus tecidos infectados e substncias virulentas isoladas
dessas fontes so um perigo demonstrado aos funcionrios do la-
boratrio e aos tratadores de animais.
102, 103
Os ndices de sorocon-
verso e doena clnica em pessoas que trabalham com esses ma-
teriais so altos.
104
Riscos semelhantes podem estar associados s
cepas exticas como a Piry.
105
Em contraste, informaes no-ociais indicam que as ativi-
dades com cepas menos virulentas adaptadas a laboratrio (por
exemplo, Indiana, San Juan e Glascow) so raramente associa-
das com a soroconverso ou com a doena. Essas cepas so comu-
mente utilizadas por bilogos moleculares, freqentemente em
grandes volumes e altas concentraes, sob condies de conten-
o mnima ou nenhuma conteno primria. Algumas cepas do
VSV so consideradas organismos restritos pelos regulamentos
da USDA (9CFR 122.2). Ratos infectados experimentalmente no
serviram como uma fonte documentada de infeco humana.
178
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Rtscos em Inuouniuto: O agente pode ser encontra-
do no lquido vesicular, nos tecidos de animais infectados e no
sangue e nas secrees de garganta de homens infectados. A
exposio aos aerossis ou perdigotos contaminados, ao con-
tato direto da pele e da membrana mucosa com os tecidos e l-
quidos infectados e a auto-inoculao acidental so os perigos
primrios associados com a substncia virulenta isolada. A ino-
culao parenteral acidental e a exposio aos aerossis infec-
tados representam os riscos potenciais ao pessoal que traba-
lha com cepas menos virulentas adaptadas aos laboratrios.
nvel de biossegurana 3 so indicadas para atividades que envol-
vam o uso ou a manipulao de tecidos infectados e substncias vi-
rulentas isoladas de animais de criao infectados naturalmente ou
experimentalmente. As luvas e a proteo respiratria so recomen-
dadas para a necropsia e o manuseio de animais infectados. As pr-
ticas e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so indicadas para
atividades que utilizam cepas adaptadas em laboratrios de baixa
virulncia. As vacinas no esto disponveis para uso em humanos.
TunNsreuNctn oo AoeNie: A licena para exportao desse
agente dever ser obtida no Department of Commerce. J a licen-
a para importao ou transporte domstico para o agente dever
ser obtido no USDA/APHIS/VS.
SEO VII-G: ARBOVRUS E VRUS ZOONTICOS
RELACIONADOS
Arbovrus Designados para o Nvel de Biossegurana 2
O American Committee on Arthropod-Borne Viruses (ACAV)
registou 537 casos de arbovrus at dezembro de 1997. Em 1979,
o subcomit da ACAV sobre a segurana quanto ao arbovrus em
laboratrio (Subcommittee on Arbovirus Laboratory Safety
SALS) classicou e registrou 424 vrus no Catalogue of Arboviru-
ses and Certain Other Viruses of Vertebrates (Catlogo de Arbo-
vrus e Alguns Outros Vrus de Vertebrados) em um dos quatro
grupos de prticas, equipamentos de segurana e instalaes

reco-
mendadas. Essas recomendaes esto descritas nesta publicao
179
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
como nveis de biossegurana 1-4.
2
O SALS tem atualizado perio-
dicamente a publicao de 1980, fornecendo uma lista suplemen-
tar para os arbovrus registrados desde 1979.
As classicaes do SALS se baseiam nas avaliaes do risco
derivadas de informaes fornecidas por uma pesquisa mundial
de 585 laboratrios que trabalham com o arbovrus. O SALS reco-
menda que o trabalho com grande parte desses agentes seja con-
duzido em um nvel semelhante ao do nvel de biossegurana 2
(lista 5). O SALS tambm reconhece cinco cepas de vacinas comu-
mente usadas, nas quais a atenuao foi rmemente estabelecida.
Esses vrus podem ser manipulados com segurana em um nvel
de biossegurana 2, uma vez que as pessoas que trabalham com
essas cepas de vacinas so imunizadas (tabela 5). O SALS classi-
cou todos os vrus registrados com os quais a experincia labora-
torial insuciente como um nvel de biossegurana 3 (lista 6) e
reavalia a classicao assim que recebe novas informaes.
Os vrus classicados em um NB-2 esto relacionados por ordem
alfabtica na lista 5 e incluem os seguintes agentes que so relata-
dos como causadores de infeces adquiridas em laboratrio.
3, 4, 5
Tabela 4. Agentes causadores de infeces adquiridas em laboratrio
Vrus Casos
Estomatite Vesicular** 46
Febre do Carrapato do Colorado 16
Dengue* 11
Pichinde 17
Encefalomielite Eqina Ocidental** 7 (2 mortes)
Rio Bravo 7
Kunjin 6
Catu 5
Caraparu 5
Rio Ross 5
Bunyamwera 4
Encefalomielite Eqina do Leste* ** 4
Zika 4
continua
180
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Vrus Casos
Apeu 2
Marituba 2
Tacaribe 2
Murutucu 1
Onyong-nyong 1
Modoc 1
Oriboca 1
Ossa 1
Keystone 1
Bebaru 1
Bluetongue * ** 1
* Licena de exportao obtida no Department of Commerce.
** A licena para importao ou transporte domstico para este agente pode ser obtida
junto ao USDA/APHIS/VS.
Os resultados de uma pesquisa realizada pelo SALS indicam,
claramente, que a fonte suspeita das infeces adquiridas em labo-
ratrio relacionadas no foi a exposio aos aerossis infecciosos.
A recomendao de que o trabalho com os 342 vrus relacionados
na lista 5 seja conduzido em um nvel de biossegurana 2 baseou-
se na existncia de uma experincia laboratorial durante toda a
histria, para a avaliao dos riscos do trabalho com esse grupo de
vrus de risco. Isso indica que (a) nenhuma infeco aberta e asso-
ciada ao laboratrio foi relatada; (b) as infeces foram provoca-
das por exposies diferentes das exposies aos aerossis; ou (c)
se a doena provocada pela exposio aos aerossis foi documen-
tada, ela rara.
Rtscos em Inuouniuto: Os agentes relacionados neste gru-
po podem ser encontrados no sangue, lquido cerebroespinhal, te-
cidos do sistema nervoso central e outros tecidos e em artrpo-
des infectados, dependendo do agente e do estgio da infeco.
Os riscos primrios em laboratrios so impostos pela inoculao
parenteral acidental, contato do vrus com pele rachada ou mem-
branas mucosas e mordidas de roedores e artrpodes de laborat-
rio. Porm, os aerossis infecciosos podem tambm ser uma fonte
potencial de infeco.
Puecnues RecomeNonons: As prticas, os equipamen-
tos de segurana e as instalaes do nvel de biossegurana 2
so indicados para as atividades com materiais clnicos poten-
continuao
181
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
cialmente infecciosos, ovos embrionados e roedores. A infeco
de galinhas recm-nascidas pelos vrus da encefalomielite eqi-
na ocidental e do leste especialmente perigosa e dever ser
manipulada por pessoas imunizadas em condies de um n-
vel de biossegurana 3. As vacinas investigacionais (IND) con-
tra a encefalomielite eqina do leste e a ocidental esto dis-
posio por meio do Centro de Preveno e Controle da Doena
(telefone 404-639-3356) e por meio do Instituto de Pesquisa
Mdica de Doenas Infecciosas do Exrcito (USDAMRIID) em
Fort Detrick, Maryland (telefone 301-619-2833). O uso des-
sas vacinas recomendado para as pessoas que trabalham dire-
tamente e regularmente com esses dois agentes no laboratrio.
Antes de 1988, foram relatados 12 casos de dengue adquiri-
dos em laboratrio. Porm, de 1988 at 1991, somente quatro ca-
sos foram documentados. Em todos os quatro casos, no se usou
uma roupa de segurana apropriada (jaleco de manga comprida
amarrado atrs, luvas, mscaras e culos de proteo) e em trs ca-
sos a conteno para aerossis potenciais em uma cabine de bios-
segurana de uxo laminar foi ignorada. Esses sprays ou lquidos
infectados possivelmente contaminaram a pele desprotegida ou
rachada. Um fator adicional nesses casos foi o trabalho com quan-
tidades de vrus altamente concentradas. A manipulao segura
do vrus da dengue em laboratrio (particularmente em prepara-
es concentradas) requer uma obedincia severa s recomenda-
es do nvel de biossegurana 2.
Grandes quantidades e/ou altas concentraes de qualquer v-
rus possuem um potencial para superar os mecanismos imunes
naturais e a imunidade induzida pela vacina. Quando um vrus do
nvel de biossegurana 2 produzido em grandes quantidades ou
em altas concentraes, os diretores dos laboratrios devero ga-
rantir que a roupa de proteo adequada seja usada, como descrita
no pargrafo anterior, e que as manipulaes sejam realizadas em
cabines de biossegurana de uxo laminar (veja tambm a seo V,
"Avaliao dos Riscos").
TunNsreuNctn oo AoeNie: A licena para importao desses
agentes dever ser conseguida no CDC. O registro do laboratrio jun-
to ao CDC necessrio antes do envio ou recebimento dos agentes.
182
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Abras
Abu Hammad
Acado
Acara
Aguacate
Alfuy
Almpiwar
Amapari
Ananindeua
Anhang
Anhembi
Anlo A
Anlo B
Apeu
Apoi
Aride
Arkonam
Aroa
Aruac
Arumowot
Aura
Avalon
Babahoyo
Bagaza
Bahig
Bakau
Baku
Bandia
Bangoran
Bangui
Banzi
Barur
Batai
Batama
Bauline
Bebaru
Belmont
Benevides
Benca
Bertioga
Bimiti
Birao
Bluetongue*
Boracia
Botambi
Boteke
Bouiboui
Bujaru
Bunyamwera
Bunyp Creek
Burg El Arab
Bushbush
Bussuquara
Buttonwillow
Bwamba
Cacao
Cache Valley
Caimito
California Enc.
Calovo
Candiru
Cape Wrath
Capim
Caraparu
Catu
Chaco
Chagres
Chandipuras
Changuinola
Chardleville
Chenuda
Chilibre
Chobar Gorge
Clo Mor
Corriparta
Cotia
Cowbone Ridge
Csiro Village
Cuiab
DAguilar
Dengue-1
Dengue-2
Dengue-3
Dengue-4
Dera Ghazi Khan do Leste **
Doena Hem. Ep.
Edge Hill
Encef. Eqina
Encef. Eqina Ocid.**
Erve
Eubenangee
Eyach
Feb. do Carrapato do Colorado
Febre do Mosquito-Plvora (Naples)
Febre do Mosquito-Plvora (Sicilian)
Febre Hem. de Smios
Flanders
Floresta Barmah
Forte Morgan
Frijoles
Gamboa
Gan Gan
Gomoka
Gossas
Grand Arbaud
Great Island
Guajara
Guama
Guaratuba
Guaroa
Gumbo Limbo
Lista 5. Arbovrus e arenavrus designados para o nvel de
biossegurana 2
continua
183
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Hart Park
Highlands J
Huacho
Hughes
Icoaraci
Ieri
Ilesha
Ilha Carey
Ilheus
Ingwavuma
Inkoo
Ippy
Irituia
Isfahan
Itaporanga
Itaqui
Jamestown Canyon
Japanaut
Johnson Atoll
Joinjakaka
Juan Diaz
Jugra
Jurona
Jutiapa
Kadam
Kaeng Khoi
Kaikalur
Kaisodi
Kamese
Kammavanpettai
Kannamangalam
Kao Shuan
Karimabad
Karshi
Kasba
Kemerovo
Kern Canyn
Ketapang
Keterah
Keuraliba
Keystone
Kismayo
Klamath
Kokobera
Kolongo
Koongol
Kowanyama
Kunjin
Kununurra
Kwatta
La Crosse
La Joya
Landjia
Langat
Lanjan
Las Maloyas
Latino
Le Bombo
Le Dantec
Lednice
Lipovnik
Lokern
Lone Star
Lukuni
Mpoko
Madrid
Maguari
Main Drain
Malakal
Manawa
Manitoba
Manzanilla
Mapputta
Maprik
Marco
Marituba
Marrakai
Matara
Matruh
Matucare
Melao
Mermet
Minatitlan
Minnal
Mirim
Mitchell River
Modoc
Mono Lake
Mont. Myotis leuk
Morcego Dakar
Morcego Entebe
Morcego Lagos
Morcego Mount Elgon
Morcego Phnom-Penh
Moriche
Mosqueiro
Mossuril
Murutucu
Mykines
Navarro
Ncgaigan
Nepuyo
Nique
Nkolbisson
Nola
Ntaya
Nugget
Nyamanini
Nyando
Onyong-nyong
Okhotskiy
Okola
Olifantsvlei
Oriboca
Ossa
Pacora
Pacui
Palyam
Paran
Pata
continua
continuao
184
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Pathum Tani
Patois
Pichinde
Pixuna
Pongola
Ponteves
Precarious Point
Pretoria
Prospect Hill
Puchong
Punta Salinas
Punta Toro
Qalyub
Quaranl
Rede Mahogany
Restan
Rio Bravo
Rio Grande
Ross River
Royal Farm
Sabo
Saboya
Saint Floris
Sakhalin
Salehabad
San Angelo
Sandjimba
Sango
Sathuperi
Sawgrass
Sebokele
Seletar
Serra do Navio
Shark River
Sharmonda
Shuni
Silverwater
Simbu
Sindbis
Sixgun City
Snowshoew Hare
Sokuluk
Soldado
Sororoca
Stratford
Sunday Canyon
Tacaiuma
Tacaribe
Taggert
Tahyna
Tamiami
Tanga
Tanjong Rabok
Tataguine
Tehran
Tembre
Tembusu
Tensaw
Tete
Tettnang
Timiri
Tottapalayan
Tibrogargan
Timbo
Timboteua
Toscana
Toure
Tribec
Triniti
Trivittatus
Tsuruse
Turlock
Tyndholmur
Tyuleniy
Uganda S.
Uma
Umatilla
Umbre
Upolu
Urucuri
Usutu
Uukuniemi
Vellore
Venkatapuram
Vinces
Virgin River
VS-Indiana
VS-New Jersey
Wad Medani
Wallal
Wanowrie
Warrego
Whataroa
Witwatersand
Wongal
Wongorr
Wyeomyia
Yaquina Head
Yata
Yogue
Zaliv Terpeniya
Zegla
Zika
Zirqa
* A licena para a exportao desse agente deve ser obtida no Department of Commerce.
** A vacina j se encontra disponvel e recomendada para todas as pessoas que traba-
lham com o agente.
A licena para importao ou transporte domstico para esse agente poder ser obtida
continuao
185
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
TunNsreuNctn oo AoeNie: A licena para importao dos
agentes deve ser obtida no CDC. O registro do laboratrio junto
ao CDC necessrio para o envio ou recebimento dos agentes.
Tabela 5. Cepas vacinais de vrus do NB-3/4 que podem ser
manipuladas em um nvel de biossegurana 2
Vrus Cepa da Vacina
Chikungunya* 131/25
Junin* cndida n. 1
Febre do Vale Rift* 20 MP-12
Encefalomielite Eqina Venezuelana* TC-83
Febre Amarela* 17-D
* A licena para exportao deve ser obtida no Department of Commerce.
Arbovrus e Arenavrus Designados para o
Nvel de Biossegurana 3
O SALS recomenda que o trabalho com os 184 arbovrus inclu-
dos nas listas por ordem alfabtica das listas 6 e 7 seja conduzido
pelas prticas, pelos equipamentos de segurana e pelas instala-
es semelhantes as do nvel de biossegurana 3. Essas recomen-
daes baseiam-se nos seguintes critrios: para a lista 6, o SALS
considerou inadequada a experincia laboratorial para a avaliao
de risco, sem levar em considerao as informaes disponveis so-
bre a gravidade da doena. Para os agentes relacionados na lista 7,
o SALS registrou as infeces adquiridas em laboratrios abertos
que eram transmitidas por aerossis e na ausncia de vacinas. O
SALS considerou que a doena natural em homens potencialmen-
te grave, ameaa vida ou causa seqelas. Os arbovrus tambm
foram classicados no NB-3 por causarem doenas em animais do-
msticos em pases fora dos Estados Unidos.
As infeces associadas ao laboratrio ou ao laboratrio ani-
mal com os seguintes agentes de NB-3 foram relatados:
6, 7, 8
186
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Tabela 6. Infeces associadas ao laboratrio ou ao laboratrio
animal (1)
Vrus Casos (SALS)
Encefalomielite Eqina Venezuelana* 150 (1 morte)
Febre do Vale Rift

* 47 (1 morte)
Chikungunya * 39
Febre Amarela* 38 (8 mortes)
Encefalite Japonesa* 22
Encefalite Ovina 22
Nilo Oeste 18
Coriomeningite Linfoctica* 15
Orungo 13
Piry 13
Wesselsbron 13
Mucambo 10
Bhanja 6
Hantaan* 6
Mayaro 5
Spondweni 4
Encefalite do Vale Murray 3
Semliki Forest 3 (1 morte)
Powassan 2
Dugbe 2
Issyk-kul 1
Koutango 1
* A licena para a exportao desses agentes deve ser obtida no Department of Commerce.
A licena para importao ou transporte domstico do agente dever ser conseguida
Grandes quantidades e altas concentraes do vrus da oresta
de Semliki so comumente usadas ou manipuladas por bilogos
moleculares sob condies de uma conteno moderada ou bai-
xa. Embora os anticorpos tenham sido demonstrados em indiv-
duos que trabalhavam com esse vrus, a primeira infeco aberta
(e fatal) adquirida em laboratrio foi relatada em 1979. Uma vez
que o resultado dessa infeco pode ter sido inuenciado por uma
via de exposio incomum ou por uma alta dose, um hospedeiro
comprometido ou uma cepa de vrus mutante, este caso e seu re-
sultado no so exemplos tpicos. Mais recentemente, o SFV foi
187
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
associado ao surto de doenas febris entre soldados europeus cuja
base militar era em Bangui.
9
A via de exposio no foi determina-
da na infeco laboratorial fatal, uma vez que os mosquitos foram
os provveis vetores dessas infeces naturais. O SALS continua
a classicar esse vrus (SFV) como um vrus do NB-3, com adver-
tncia de que a maioria das atividades com o vrus pode ser con-
duzida com segurana em um nvel de biossegurana 2.
Alguns vrus (por exemplo, a meningoencefalite turca de Israel,
Akabane) esto relacionados em um NB-3, no por serem uma
ameaa sade humana, mas por serem doenas exticas de aves
ou criaes domsticas.
Rtscos em Inuouniuto: Os agentes relacionados nesse gru-
po podem ser encontrados no sangue, no lquido cerebroespinhal,
na urina e nos exsudatos, dependendo do agente especco e do
estgio da doena. Os riscos laboratoriais primrios so a expo-
sio aos aerossis de solues infecciosas e roupas de cama de
animais, inoculao parenteral acidental e o contato com a pele
rachada. Alguns desses agentes (por exemplo, o VEE) podem ser
relativamente estveis no sangue seco ou em exsudatos. Para os
vrus de um NB-3/4, as cepas atenuadas existem e podem ser ma-
nipuladas em um NB-2, conforme relacionado na tabela 5.
de segurana e as instalaes do nvel de biossegurana 3 so indi-
cados para as atividades que usam materiais clnicos potencialmen-
te infecciosos e culturas de tecido, animais e artrpodes infectados.
Um vrus vivo atenuado licenciado se encontra disposio
para a imunizao contra a febre amarela. Recomenda-se o uso
dessa vacina para as pessoas que trabalham com o agente ou com
animais infectados e a pessoas autorizadas a entrar na sala onde
os agentes ou os animais infectados estejam presentes. Realmen-
te, para essa vacina, a infectividade dos aerossis e o alto ndice
de fatalidade do vrus da febre amarela fazem com que ele seja
classicado como um vrus do NB-4. Para a encefalomielite eqi-
na venezuelana, a vacina investigacional TC-83 proporciona uma
excelente proteo contra muitas cepas epizoticas. Essa proteo
pode se estender a outras cepas de VEE do complexo, incluindo
os vrus Everglades, Mucambo, Tonate e Cabassou. A vacina TC-38
188
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
dever ser usada como parte de um programa de segurana e pode
ser particularmente importante para a proteo das pessoas que
trabalham com animais infectados e vrus concentrados. A admi-
nistrao da vacina e o uso desse complemento inativado (C-84)
devero ser determinados por peritos com experincia no uso des-
sas vacinas dentro das restries compatveis com as drogas de
pesquisa. De forma semelhante, a vacina IND inativada est dis-
posio para o vrus da febre do Vale Rift. Uma vacina de vrus Ju-
nin atenuado (Cndida n. 1) tambm est disponvel. Essas vaci-
nas de IND podem ser obtidas no U.S Army Medical Research and
Material Command, aps consulta ao USAMRIID (telefone 301-
619-2833).
O SALS tem diminudo a classicao do risco biolgico do v-
rus Junin para o nvel de biossegurana 3, j que todas as pessoas
do grupo de risco so imunizadas e o laboratrio se encontra equi-
pado com ltros HEPA de exausto. O SALS tambm diminuiu a
classicao do vrus da encefalite transmitida pelo carrapato da
Europa Central (CETBE) para o nvel de biossegurana 3, j que to-
das as pessoas do grupo de risco so imunizadas. Uma vacina IND
inativada para o CTEBE se encontra disponvel junto ao USAMRIID
e recomendada para todos os funcionrios de laboratrio e trata-
dores de animais que trabalham com o agente ou os animais infec-
tados e tambm para todas as pessoas que entrarem nos laborat-
rios ou nas salas de animais quando o agente estiver sendo usado.
CoNieNno nceNiunon oo Nvet oe BtosseouunNn :
Podem ocorrer situaes em que so necessrias intensicaes
das prticas e dos equipamentos do nvel de biossegurana 3. Um
exemplo dessa situao seria um laboratrio de NB-3 realizar tes-
tes de diagnstico em amostras de pacientes com febre hemorr-
gica quando se suspeita de uma febre amarela ou dengue. Quando
a origem das amostras a frica, o Oriente Mdio ou a Amri-
ca do Sul, o potencial est presente em amostras que contenham
agentes etiolgicos como o arenavrus, lovrus ou outros vrus
que so geralmente manipulados em laboratrios de NB-4. As in-
tensicaes aos laboratrios de NB-3 podem incluir uma ou mais
destas trs categorias a seguir: a) aumentada proteo respirat-
ria individual contra os aerossis; b) ltrao pelo HEPA do ar li-
berado do laboratrio; c) descontaminao de euentes lquidos
189
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
de laboratrios. Um treinamento apropriado para as pessoas que
tratam dos animais dever ser considerado.
BtocoNieNno oe AoeNies INrecctosos DescoNnectoos:
As decises em relao classicao do perigo biolgico para ma-
teriais que contenham um vrus infeccioso devero se basear em
todas as informaes disponveis em relao ao agente. Os vrus
isolados de pacientes humanos infectados devero ser manipula-
dos em um nvel de biossegurana 3 com precaues intensicadas,
como detalhado no resumo das caractersticas do agente Hantavrus
ou de preferncia em um NB-4, a menos que se tenha certeza de que
o agente no infeccioso por meio de aerossis. Todas as amostras
desconhecidas devero ser manipuladas em um NB-3, a menos que
haja evidncias de uma transmisso por aerossis (que iria reque-
rer uma conteno do NB-4). O SALS continuar a avaliar a infecti-
vidade e os dados sobre a virulncia para todos os vrus registrados
no Catalogue of Arboviruses and Certain Other Viruses of Vertebra-
tes e para vrus recentemente desenvolvidos antes do registro.
TunNsreuNctn oo AoeNie: A licena para a importao dos
agentes dever ser conseguida junto ao CDC.
Lista 6. Arbovrus e alguns outros vrus designados para o nvel
de biossegurana 3 (com base em experincia insuciente)
Adelaide River
gua Preta
Alenquer
Almeirim
Altamira
Andasibe
Antequera
Araguari
Aransas Bay
Arbia
Arboledas
Babanki
Batken
Belm
Berrimah
Bimbo
Bobaya
Bobia
Bozo
Buenaventura
Cabassou
1, 2
Cacipacore
Calchaqui
Canania
Canind
Chim
Coastal Plains
Connecticut
Corfou
Dabakala
Douglas
Enseada
Estero Real
Fomede
Forecariah
Fort Sherman
Gabek Forest
Gadgets Gully
Garba
Gordil
Gray Lodge
Gurupi
Iaco
Ibaraki
Ife
Iguape
Inhangapi
Inini
continua
190
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Issyk-Kul
Itaituba
Itimirim
Itupiranga
Jacareacanga
Jamanxi
Jar
Kedougou
Khasan
Kindia
Kyzylagach
Lake Clarendon
Llano Seco
Macaua
Mapuera
Mboke
Meaban
Moji Dos Compos
Monte Dourado
Munguba
Naranjal
Nariva
Nasoule
Ndelle
New Minto
Ngari
Ngoupe
Nodamura
Northway
Odrenisrou
Omo
Oriximina
Ouango
Oubangui
Oubi
Ourem
Palestina
Palma
Para
Paramushir
Paroo River
Perinet
Petevo
Picola
Playas
Pueblo Viejo
Purus
Radi
Razdan
Resistencia
Rochambeau
Salanga
San Juan
Santa Rosa
Santarm
Saraca
Saumarez Reef
Sena Madureira
Sendlec
Sepik
Shokwe
Slovakia
Somone
Sripur
Tai
Tamdy
Telok Forest
Termeil
Tiafora
Tilligerry
Tinaroo
Tlacotalpan
Tonate
1, 2
Utinga
Xiburema
Yacaaba
Yaounde
Yoka
Yug Bogdanovac
O SALS recomenda que o trabalho com esse agente dever ser feito somente em insta-
laes de NB-3 que proporcionem a ltrao HEPA de todo o ar liberado antes de ser
jogado para o laboratrio.
A vacina TC-83 est disponvel e recomendada para todas as pessoas que trabalhem
com o agente.
Lista 7. Arbovrus e alguns outros vrus designados para o nvel
de biossegurana 3
Aino
Akabane
c
Banna
a, f
Bhanja
Central Eur. TBE
b, d

(Kumlinge. Hypr,
Hanzalova, Absettarov)
Chikungunya
c, d
Cocal
Dhori
Dobrava-Belgrade
Doena Ovina de Nairobi
a

Dugbe
Enc. de Vale Murray
Encef. Japonesa
h
Encefalite Eqina
Venezuelana
c, d, h
Estomatite Vesicular
(Alagoas)
h
Everglades
c, d
Febre Amarela
c, d
Febre do Rift Valley
a, c, d, h
Flexal
continuao
continua
191
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
Germiston
c
Getah
Haantan
h
Junin
c, d, h
Kairi
Kimberley
Koutango
Kumlinge (Europa
Central, TBE)
Louping III
a, c, h
Mayaro
Menin. Tur. de Israel.
Mopeia
e
Middelburg
Mobala
Mucambo
c, d
Ndumu
Negishi
Oropouche
c
Orungo
Peaton
Piry
Puumala
Rocio
Sagiyama
Sal Vieja
San Perlita
Seuol
Sin Nombre
Spondweni
Togoto
Turuna
Wesselsbron
a, c
West Nile
Zinga
g
a. A importao, a posse e o uso desse agente cam restritos ao regulamento ou norma
administrativa do USDA. Veja o apndice D.
b. O vrus da encefalite do carrapato da Europa Central (CETBE) no um nome regis-
trado no Te International Catalogue of Arboviruses 1985. At a questo do registro do
nome ter sido resolvida taxonomicamente, a CETBE se refere ao seguinte grupo de a-
vivrus associado ao carrapato muito prximo, mas no idntico, da Tchecoslovquia,
Finlndia e Rssia, como: Absettarov, Hanzalova, Hypr e Kumlinge. Esses quatro vrus
so antigenicamente homogneos e so diferenciados do vrus da encefalite primave-
ra-vero da Rssia (RSSE).
10, 11, 12
Embora haja uma vacina que conra imunidade ao
grupo da CETBE de vrus geneticamente homogneos (> 98%), a eccia dessa vacina
contra as infeces causadas pelo vrus da CETBE ainda no foi estabelecida. Dessa
forma, o SALS reclassicou o grupo de vrus CETBE como do nvel de biossegurana 3,
quando as pessoas esto imunizadas com a vacina contra a CETBE. O RSSE continua
classicado como um vrus pertencente ao nvel de biossegurana 4.
c. O SALS tambm recomenda que o trabalho com esses agentes seja conduzido somente
em instalaes do nvel de biossegurana 3 que proporcionem uma ltrao HEPA de
todo o ar liberado antes de ser jogado para dentro do laboratrio.
d. A vacina est disponvel e recomendada para todas as pessoas que trabalhem com
esse agente.
e. Esse vrus atualmente est sendo registrado no Catalogue of Arboviruses.
f. Os cientistas da Repblica da China verbalmente relataram o vrus Banna como sendo
associado a casos graves de encefalites. As tradues dos originais do chins para o in-
gls no se encontravam disposio para esta reviso.
g. O vrus Zinga agora reconhecido como idntico ao vrus da febre do Rift Vale.
h. A licena para exportao desse vrus deve ser obtida junto ao Department of Com-
merce.
i. Uma licena de importao ou transporte domstico desse agente pode ser obtida jun-
to ao USDA/APHIS/VS.
Arbovrus, Arenavrus e Filovrus Designados para o Nvel
de Biossegurana 4
O SALS recomenda que o trabalho com os 11 arbovrus, arena-
vrus ou lovrus
13
includos na lista 8 seja conduzido pela prtica,
pelos equipamentos de segurana e pelas instalaes semelhantes
s do nvel de biossegurana 4. Essas recomendaes so basea-
continuao
192
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
das em casos documentados de infeces freqentemente fatais
ocorridas naturalmente em homens e nas infeces transmitidas
por aerossis em laboratrios. O SALS tambm recomenda que
alguns agentes com uma relao prxima com os agentes do nvel
de biossegurana 4 (por exemplo, o vrus da encefalite primave-
ra-vero da Rssia) tambm sejam provisoriamente manipulados
nesse nvel at que experincias laboratoriais sucientes indi-
quem a posio do mesmo nesse nvel ou a reclassicao deste
para um nvel menor. Como observado a seguir, com a imuniza-
o, o SALS recomenda uma diminuio do nvel de classicao
do vrus Junin e do complexo de vrus da encefalite do carrapato
da Europa Central (Absettarov, Hanzalova, Hypr e Kumlinge) ao
nvel de biossegurana 3. As infeces associadas a laboratrio ou
ao laboratrio animal provocadas pelos seguintes agentes foram
relatadas:
14, 15, 16, 17, 18, 19, 20
Tabela 7. Infeces associadas ao laboratrio ou ao laboratrio
animal (2)
Vrus Casos (SALS)
Junin* 21 (1 morte)
Marburg* 25 (5 mortes)
Enc. Primavera-Vero 8
Enc. Hemorrgica Crimia-Congo 8 (1 morte)
Febre Hemorrgica Omsk 5
Lassa* 2 (1 morte)
Machupo* 1 (1 morte)
Ebola* 1
Sabia* 3 (1 morte)
* A licena para exportao desse agente dever ser obtida junto ao Department of Commerce.
Os roedores so hospedeiros naturais do vrus da Las-
sa (Mastomys spp.), do Junin, do vrus Machupo (Calomys
spp.), Guaranito (Zygodontomys spp.) e talvez de outros mem-
bros desse grupo. Os primatas no-humanos estavam associa-
dos aos surtos iniciais da doena da oresta de Kyasanur (Pres-
bytis spp.) e o vrus da doena de Marburg (Cercopithecus
spp.). Mais recentemente, os lovrus relacionados com o ebo-
193
SEO VII
RELAO DOS AGENTES
la foram associados com o Macaca spp. e chimpanzs (Pan tro-
glodytes). Os artrpodes so os vetores naturais do complexo
de agentes da encefalite do carrapato. O trabalho com ou a ex-
posio aos roedores, aos primatas no-humanos ou aos veto-
res naturalmente ou experimentalmente infectados com esses
agentes representa uma fonte potencial de infeco humana.
Rtscos em Inuouniuto: Os agentes infecciosos podem ser
encontrados no sangue, na urina e nas secrees da garganta, no
smen e nos tecidos de hospedeiros humanos ou animais, artr-
podes, roedores e primatas no-humanos. A exposio respirat-
ria aos aerossis infecciosos, a exposio da membrana mucosa
aos perdigotos infecciosos e a inoculao parenteral acidental so
os perigos primrios para o laboratrio e para as pessoas que cui-
dam de animais.
21, 22
que utilizem materiais sabidamente ou potencialmente infeccio-
sos de origem humana, animal ou artrpode. As amostras clnicas
de pessoas com suspeita de terem sido contaminadas pelos agen-
tes relacionados devero ser submetidas a um exame laboratorial
do nvel de biossegurana 4 de mxima conteno.
23, 24
TunNsreuNctn oo AoeNie: A licena para a importao dos
agentes dever ser obtida no CDC. J a licena para exportao
dever ser conseguida no Department of Commerce. O registro do
laboratrio necessrio junto ao CDC antes do envio ou recebi-
mento dos agentes.
Lista 8. Arbovrus, arenavrus e lovrus designados para o nvel
de biossegurana 4
Encefalite do Carrapato da
Europa Central
Febre Hemorrgica
Crimia-Congo
Ebola
Guaranito
Junin
Doena da Floresta de Kyasanur
Lassa
Machupo
Febre Hemorrgica de Omsk
Encefalite Primavera-Vero da
Rssia
Sabia
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235
APNDICE A
CONTENO PRIMRIA:
CABINES DE SEGURANA
BIOLGICA
As cabines de segurana biolgica (CSB) esto entre os mais
comuns e ecazes dispositivos de conteno primria utilizados
em laboratrios que trabalham com agentes infecciosos 1. Os trs
tipos gerais de cabines (classes I, II e III) possuem caractersticas e
aplicaes que sero descritas neste apndice.
As CSB de classes I e II adequadamente mantidas, quando usa-
das em conjunto com boas tcnicas de microbiologia, proporcio-
nam um sistema de conteno ecaz para uma manipulao se-
gura de microorganismos de risco moderado ou alto (agentes dos
nveis de biossegurana 2 e 3). Tanto as cabines de classe I como
as de classe II possuem uma velocidade de uxo de ar (75-100 ps
lineares por minuto) que proporciona nveis de conteno compa-
rveis proteo dos funcionrios de laboratrio e do meio am-
biente das reas adjacentes contra aerossis infecciosos gerados
dentro das cabines. As cabines de segurana biolgica de classe II
tambm protegem o prprio material e a pesquisa com uma ltra-
o altamente eciente (ltrao HEPA) do uxo de ar sobre toda
a superfcie de trabalho (uxo laminar vertical). J as cabines de
classe III oferecem uma proteo mxima para os trabalhadores
do laboratrio, para a comunidade e para o meio ambiente porque
todos os materiais perigosos esto contidos em uma cabine venti-
lada e totalmente fechada.
Classe I
(Ouseuvnno: as cabines de classe I, atualmente, esto sendo
fabricadas em nmero limitado. Muitas podem ser substitudas
por cabines de classe II).
236
APNDICE A
CONTENO PRIMRIA: CABINES DE SEGURANA BIOLGICA
A cabine de segurana biolgica de classe I (g. 1) uma cabi-
ne ventilada de presso negativa operada por uma abertura fron-
tal e uma mnima velocidade de face para abertura de trabalho de
75 ps lineares por minuto (lfpm). Todo o ar da cabine liberado
atravs de um ltro HEPA para dentro ou para fora do laboratrio.
A cabine de classe I projetada para a pesquisa geral de agentes
microbiolgicos de risco moderado e baixo e til para a conten-
o de processadores, liquidicadores e outros equipamentos. Es-
sas cabines no so apropriadas para a manipulao de materiais
de pesquisa que sejam vulnerveis contaminao pelo ar, uma
vez que o uxo interno do ar no-ltrado do laboratrio pode car-
regar microorganismos contaminantes para dentro da cabine.
A cabine de classe I pode tambm ser usada com um painel
frontal fechado e sem as luvas de borracha, que aumentaro a velo-
cidade do uxo interno para aproximadamente 150 lfpm. Se essas
cabines equipadas estiverem ligadas por dutos externos de exaus-
to, elas podero ser usadas para materiais txicos ou com baixos
nveis radioativos usados como auxiliares da pesquisa microbio-
lgica. Alm disso, as luvas de braos longos de borracha podem
ser anexadas ao painel frontal com um dispositivo de liberao da
presso do ar para proteo adicional. Nessa congurao, ne-
cessrio instalar uma entrada de ar adaptada e ajustada com um
ltro HEPA na cabine.
Classe II
A cabine de segurana biolgica de classe II (g. 2) projetada
com um uxo de ar interior com uma velocidade de 75-100 lfpm,
para proteger os funcionrios, um uxo de ar laminar vertical l-
trado pelo sistema HEPA, para proteo do produto, e com ar de
sada, de exausto, ltrado pelo sistema HEPA para proteo do
meio ambiente. Os padres do projeto, da construo e da atua-
o das cabines de classe II, assim como as listas de produtos que
atendam a esses padres, foram desenvolvidos pela National Sa-
nitation Foundation International 2, em Ann Arbor, Michigan. A
utilizao do padro e da lista dever ser o primeiro passo na sele-
o e aquisio de uma cabine de classe II.
As cabines de classe II so classicadas em dois tipos (A e B)
baseados na construo, nas velocidades e nos padres do uxo
237
APNDICE A
de ar e nos sistemas de exausto. Basicamente, as cabines do tipo
A so adequadas para pesquisas microbiolgicas na ausncia de
substncias qumicas volteis ou txicas e de radionucldeos, uma
vez que o ar recirculado dentro da cabine. As cabines do tipo A
podem ter exausto dentro do laboratrio ou para fora atravs de
uma conexo metlica que se prende ao sistema de exaustores do
edifcio.
As cabines do tipo B so subdivididas em tipos B1, B2 e B3.
Uma comparao entre as caractersticas do projeto e as aplica-
es est representada nas guras 2b, 2c e 2d, respectivamente.
As cabines do tipo B possuem dutos rgidos conectados ao siste-
ma de exausto do prdio e contm um sistema de ar de presso
negativa. Essas caractersticas, mais uma velocidade plena de 100
lfpm, permitem o trabalho a ser feito com substncias qumicas
txicas ou radionucldeos.
essencial que as cabines de proteo biolgica I e II sejam
testadas e certicadas in situ no momento da instalao dentro do
laboratrio, todas as vezes que a CSB for removida ou uma vez ao
ano. A vericao local pode atestar a performance da cabine indi-
vidual ou modelo, mas no poder excluir os testes crticos antes
do uso em laboratrio.
Como em qualquer equipamento de laboratrio, as pessoas de-
vero ser treinadas para o uso adequado das cabines de seguran-
a biolgica. De particular interesse so as atividades que possam
romper o uxo direcionado para o interior. Causam a liberao de
partculas aerolizadas de dentro da cabine fatores como a insero
e a retirada repetida dos braos dos trabalhadores para dentro e
para fora das cabines, a abertura e o fechamento de portas do la-
boratrio ou do cubculo de isolamento, a colocao ou a operao
imprpria dos materiais ou dos equipamentos dentro da cmara
de trabalho ou uma caminhada vigorosa prxima CSB enquan-
to esta estiver sendo utilizada. As cabines de classes I e II devero
estar localizadas longe do uxo de pessoas e das portas. O uxo
de ar gerado por ventiladores, a ventilao proveniente de vene-
zianas metlicas em portas ou paredes e outros dispositivos para
movimentao do ar podem interromper o padro de uxo de ar
na frente da cabine. A obedincia severa a essas regras para uso de
238
APNDICE A
CSB e a colocao adequada das mesmas em um laboratrio so
to importantes na manuteno da capacidade de conteno m-
xima do equipamento quanto o prprio funcionamento deste.
Classe III
A cabine de segurana biolgica de classe III (g. 3) uma ca-
bine totalmente fechada e ventilada, prova de escape de ar, que
oferece o mais alto grau de proteo ao pessoal e ao meio ambien-
te contra aerossis infecciosos, assim como a proteo de mate-
riais de pesquisa de contaminantes microbiolgicos. As cabines
de classe III so mais adequadas para o trabalho com agentes peri-
gosos que requerem uma conteno de um nvel de biossegurana
3 ou 4.
Todas as operaes na rea de trabalho da cabine devero ser
realizadas por meio de braos com luvas de borracha ou por meio
de macaco. A cabine de classe III operada com presso negativa.
O suprimento de ar ltrado atravs do sistema HEPA, e o ar libe-
rado da cabine ltrado atravs de dois ltros HEPA em srie ou a
ltrao HEPA seguida de uma incinerao, antes de ser descar-
tado para fora do local.
Todos os equipamentos necessrios para uma atividade em um
laboratrio, como as incubadoras, geladeiras e centrfugas deve-
ro ser uma parte integral do sistema de cabine. A cabine de classe
III dever ser conectada a uma autoclave de duas portas e/ou um
tanque de imerso qumica usado para esterilizar ou desinfetar
todos os materiais que sarem da cabine, permitindo que os esto-
ques entrem na cabine. Vrias cabines de classe II so, portanto,
tipicamente instaladas como um sistema interconectado.
Macaco individual de presso positiva
A proteo individual equivalente fornecida por cabines de
classe III tambm pode ser obtida pelo uso de uma vestimenta de
pea nica e ventilada. O trabalhador dever us-la quando esti-
ver trabalhando com agentes do nvel de biossegurana 3 ou 4 em
uma rea de risco correspondente e usando CSB de classe I ou II.
A roupa individual mantida sob uma presso positiva com um
sistema de suporte de vida, para prevenir o vazamento dentro da
239
APNDICE A
vestimenta. Nesse sistema de conteno, o trabalhador dever es-
tar isolado dos materiais de trabalho.
A rea escafandro dever ser essencialmente equivalente a uma
cabine grande de classe III. A entrada nessa rea dever ser feita
atravs da cmara de compresso adaptada com portas hermti-
cas. Um chuveiro qumico dever ser instalado como um tanque
de imerso para descontaminao das superfcies da roupa e dos
trabalhadores que entram e saem da rea. O ar liberado da rea
escafandro dever ser ltrado atravs de dois ltros HEPA instala-
dos em srie. Toda a rea dever estar sob presso negativa.
Assim como nas CSB III, as luvas das roupas individuais so o
componente mais vulnervel do sistema, pois esto sujeitas a per-
furaes por objetos cortantes e mordidas de animais.
Ouiuos otsvostitvos: As bancadas de uxo laminar de ar
horizontal de clean benches so usadas em instalaes clnicas, far-
macuticas e laboratoriais estritamente para garantir a proteo
do produto. Esse equipamento nunca dever ser usado para a ma-
nipulao de materiais txicos, infecciosos, radioativos ou sensi-
bilizadores, uma vez que o trabalhador respira o ar liberado da
bancada limpa. As bancadas de uxo laminar vertical podem ser
teis para algumas manipulaes de materiais limpos (por exem-
plo, placa de agar), mas no devero ser usadas quando o trabalho
com materiais infecciosos estiver sendo conduzido.
Tabela 8. Comparao entre as cabines de segurana biolgica
Tipo
Vclocidadc
frontal
Padro dc uxo
do ar
Radionucldcos/
substncias
qumicas
Nvcis dc
biosscgurana
Protco
do
Produto
Classe I* com
a frente aberta
75
Frontal, atrs e
acima atravs do
ltro HEPA.
No 2, 3 No
Classe II
Tipo A
75
70% de ar
recirculado atravs
do HEPA; exausto
atravs do HEPA.
No 2, 3 Sim
Tipo B1 100
30% de ar
recirculado atravs
do HEPA; exausto
de ar via HEPA e
dutos.
Sim
(nveis baixos/
volatilidade)
2, 3 Sim
continua
240
APNDICE A
Tipo
Vclocidadc
frontal
Padro dc uxo
do ar
Radionucldcos/
substncias
qumicas
Nvcis dc
biosscgurana
Protco
do
Produto
Tipo B2 100
Nenhuma
recirculao do ar;
total exausto via
HEPA e dutos.
Sim 2, 3 Sim
Tipo B3 100
Idntica s cabines
II A, mais o sistema
de ventilao
plena sob presso
negativa para sala e
exausto atravs de
dutos.
Sim 2, 3 Sim
Classe III NA
Entradas e sada do
ar atravs do ltro
HEPA 2.
Sim 3, 4 Sim
* Os compartimentos para as luvas podero ser acrescentados e aumentaro a velocida-
de frontal para 150 lfpm. As luvas podem ser adicionadas com a liberao da presso
da entrada de ar, que permitir o trabalho com radionucldeos/substncias qumicas.
continuao
241
APNDICE A
Figura 1. Cabine de segurana biolgica classe I. (A) Abertura
frontal. (B) Vidraa corredia. (C) Filtro HEPA para exausto.
(D) Espao de exausto.
vista lateral
Ar ambiente
Ar potencialmente contaminado
Ar ltrado por ltro HEPA
242
APNDICE A
Figura 2a. Cabine de segurana biolgica classe II, tipo A.
(A) Abertura frontal. (B) Vidraa corredia. (C) Filtro HEPA para
exausto. (D) Espao posterior. (E) Filtro HEPA para suprimento
de ar. (F) Ventilador.
Ar ambiente
243
APNDICE A
Figura 2b. Cabine de segurana biolgica classe II, tipo B1
(desenho clssico). (A) Abertura frontal. (B) Vidraa corredia.
(C) Filtro HEPA para exausto. (D) Filtro HEPA para suprimento
de ar. (E) Espao de exausto com presso negativa.
(F) Ventilador. (G) Filtro HEPA adicional para suprimento de ar.
Ouseuvnno: O exaustor da cabine necessita ser conectado ao
sistema de exaustores do edifcio.
vista lateral vista frontal
Ar ambiente
CONEXO NECESSRIA DE SISTEMA DE
EXAUSTORES DO EDIFCIO
244
APNDICE A
Figura 2c. Cabine de segurana biolgica classe II, tipo B2.
(A) Abertura frontal. (B) Vidraa corredia. (C) Filtro HEPA para
exausto. (D) Filtro HEPA para suprimento de ar. (E) Espao de
exausto com presso negativa. (F) Tela do ltro.
Ouseuvnno: O ltro de carbono do sistema de exaustores do
edifcio no est mostrado nesta gura. O ar de exausto na
cabine dever ser conectado ao sistema de exaustores do edifcio.
Ar ambiente
245
APNDICE A
Figura 2d. Cabine de segurana biolgica classe II, tipo B3
(modelo de mesa). (A) Abertura frontal. (B) Vidraa corredia.
(C) Filtro HEPA de exausto. (D) Filtro HEPA para suprimento de
ar. (E) Espao de presso positiva. (F) Espao de presso negativa.
Ouseuvnno: Os exaustores da cabine devero ser conectados
aos sistemas de exaustores do edifcio.
Ar ambiente
246
APNDICE A
Figura 3. Cabine de segurana biolgica classe III.
(A) Compartimento para xao de luvas longas de borracha
cabine. (B) Vidraa corredia. (C) Filtro HEPA para exausto.
(D) Filtro HEPA para o suprimento de ar. (E) Autoclave dupla
sada na extremidade ou caixa de passagem da cabine.
Ouseuvnno: Um tanque de imerso qumica pode ser instalado
e dever ser colocado abaixo da superfcie de trabalho da CSB com
o acesso por cima. O sistema de exaustores da cabine necessita ser
conectado a um sistema de exaustores independente.
Ar ambiente
vista frontal vista lateral
247
Um nvel adicional de proteo para pessoas do grupo de ris-
co pode ser conseguido com imunizaes prolticas adequadas.
essencial uma norma organizacional por escrito que dena as
pessoas do grupo de risco, os riscos e os benefcios das vacinas
especcas, fazendo distino entre as vacinas solicitadas e as re-
comendadas. Ao se desenvolver tal norma, as recomendaes e os
requisitos devero ser especicamente concentrados em doenas
infecciosas que sero ou provavelmente vo ser encontradas em
um local em particular.
As vacinas licenciadas cujos benefcios (nveis de anticorpos
considerados como protetores) excedam os riscos (por exemplo,
as reaes locais ou sistmicas) devero ser requisitadas para to-
das as pessoas claramente identicadas. Exemplos dessas prepa-
raes incluem as vacinas anti-rbicas e contra hepatite B, febre
amarela e plio. As recomendaes para aplicao de vacinas me-
nos ecazes, como as associadas aos altos ndices de reaes locais
ou sistmicas, as que produzem reaes muito graves com o uso
repetido e as vacinas no-licenciadas, dadas sob os protocolos de
uma nova droga de pesquisa (IND), devero ser cuidadosamente
consideradas. Os produtos com essas caractersticas (por exem-
plo, as vacinas contra a clera, o antraz e a tularemia) podem ser
recomendados, mas no podero ser requisitados para o trabalho.
Um registro completo das vacinas recebidas baseando-se em re-
quisitos ou recomendaes ocupacionais dever ser mantido em
cada cha mdica do trabalhador.
As recomendaes para o uso de vacinas adaptadas da
lista mencionada no Public Health Service Advisory Committee
APNDICE B
IMUNOPROFILAXIA
248
APNDICE B
IMUNOPROFILAXIA
on Immunization Practices esto includas no resumo das
caractersticas dos agentes na seo VII e esto elaboradas nas
referncias a seguir.
1, 2
O leitor dever consultar as recomendaes
atuais da ACIP publicadas no CDC Morbidity and Mortality Weekly
Report (MMWR). Deve-se dar uma ateno particular para os
indivduos que esto ou que podem se tornar imunodeprimidos,
uma vez que as recomendaes para a administrao de vacinas
podem ser diferentes das recomendaes indicadas para um
adulto imunologicamente competente.
249
Os agentes biolgicos incluem os agentes infecciosos de ho-
mens, plantas e animais, assim como as toxinas que podem ser
produzidas por micrbios e por material gentico potencialmente
perigoso por si s ou quando introduzido em um vetor adequado.
Agentes etiolgicos e substncias infecciosas so termos intima-
mente relacionados e so encontrados nas normas de transporte e
de transferncia. Os agentes biolgicos podem existir em culturas
puricadas e concentradas, mas tambm podem ser encontrados
em uma variedade de materiais como uidos corpreos, tecidos,
amostras de solo, etc. Agentes biolgicos e materiais suspeitos de
cont-los, ou que sabidamente os contm, so reconhecidos pelos
governos federais e estaduais como materiais perigosos, e o trans-
porte e a transferncia desses materiais devero estar sujeitos a
controle normativo.
O termo transporte se refere ao acondicionamento e envio des-
ses materiais pelo ar, pela terra ou pelo mar, geralmente feito por
uma empresa comercial. J o termo transferncia se refere ao pro-
cesso de mudana de local dos materiais.
Transporte
Os regulamentos sobre o transporte de agentes biolgicos so
denidos de forma a assegurar proteo ao pblico e aos trabalha-
dores da rede de transporte contra a exposio a qualquer agen-
te que possa estar presente na embalagem. A proteo obtida
por meio de: (a) requisitos para um rigoroso acondicionamento
que suporte manipulaes bruscas e a conteno de todo o ma-
terial lquido dentro da embalagem sem que ocorra vazamento
para o lado de fora; (b) rotulagem adequada das embalagens com
APNDICE C
TRANSPORTE E
TRANSFERNCIA DE
AGENTES BIOLGICOS
250
APNDICE C
TRANSPORTE E TRANSFERNCIA DE AGENTES BIOLGICOS
o smbolo de risco biolgico e outros rtulos que alertem os tra-
balhadores da rede de transporte sobre o contedo perigoso da
embalagem; (c) documentao sobre o contedo perigoso da em-
balagem contendo informaes necessrias para o caso de uma si-
tuao de emergncia; e (d) treinamento de trabalhadores da rede
de transporte para que possam se familiarizar com os contedos
perigosos, de forma que sejam capazes de responder s situaes
de emergncia.
Regulamentos
Servio Pblico de Sade. 42 CRF Parte 72. Transporte Interes-
tadual de Agentes Etiolgicos. Este regulamento est sendo revi-
sado para se harmonizar com outros regulamentos internacionais
e dos E.U.A. Uma cpia do regulamento atual poder ser consegui-
da pela internet: <http://www.cdc.gov/od/ohs>.
Departamento de Transporte. 49 CFR Partes 171-178. Regula-
mentos para transporte de Materiais Perigosos. Este se aplica aos
agentes biolgicos e s amostras clnicas. Maiores informaes
podero ser obtidas pela internet: <http://dot.gov.rules.html>.
Servio Postal dos Estados Unidos. 39 CFR Parte 111. Envio
Postal de Agentes Etiolgicos. Codicados no Manual de Posta-
gem Domstica 124.38: Preparaes dos Agentes Etiolgicos.
Uma cpia do Manual de Postagem Domstica poder ser obtida
no Setor de Publicao do Governo pelo telefone 1-202-512-1800
ou pela internet: <http://www.access.gpo.gov>.
Administrao da Segurana e da Sade Ocupacional (OSHA).
29 CFR Parte 1910.1030: Exposio Ocupacional aos Patgenos do
Sangue. Estabelece os requisitos mnimos de acondicionamento e
rotulagem para o transporte de sangue e de uidos corpreos dentro
e fora do laboratrio. Maiores informaes podero ser adquiridas
no escritrio local da OSHA ou pela internet: <http://osha.gov>.
Regulamentos sobre Produtos Perigosos (DGR). Associao In-
ternacional de Transporte Areo (IATA). Esses regulamentos for-
necem os requisitos para o acondicionamento e a rotulagem de
substncias e materiais infecciosos e de amostras clnicas que pos-
suam uma baixa probabilidade de conter substncias infecciosas.
Esses so os regulamentos seguidos pelas empresas areas. Eles se
251
baseiam nos regulamentos do Comit de Peritos em Transporte
de Produtos Perigosos e do Secretariado das Naes Unidas e nas
Instrues Tcnicas para o Transporte de Produtos Perigosos via
area, que so fornecidas pela Organizao Internacional da As-
sociao Civil (ICAO). A cpia do DGR poder ser obtida pelo tele-
fone 1-800-716-6326 ou pela internet: <http://www.iata.org> ou
<http://who.org>.
Requisitos Gerais de Acondicionamento para Transporte
de Agentes Biolgicos e de Amostras Clnicas
A gura 4 mostra o acondicionamento do tipo triplo (container
primrio, embalagem secundria com conteno de gua, emba-
lagem externa resistente a impacto) necessrio para agente bio-
lgico oriundo de doena humana ou de materiais suspeitos de
cont-los ou que sabidamente os contm. Essa embalagem requer
a colocao de um rtulo externo, com os dizeres Substncia In-
fecciosa, como mostrado na gura 2. A embalagem dever aten-
der aos testes de performance enfatizados nos regulamentos do
DOT, USPS, PHS e da IATA.
As amostras clnicas com uma baixa probabilidade de conter
um agente infeccioso tambm necessitam de um acondiciona-
mento triplo, mas os testes de performance s exigem que a em-
balagem no apresente vazamentos aps o teste de uma queda
de quatro ps. O DOT, o PHS e a IATA exigem um rtulo externo
identicando a embalagem como Amostra Clnica.
Transferncia
Os regulamentos para a transferncia de agentes biolgicos ob-
jetivam assegurar que a mudana de posse dos materiais biolgi-
cos esteja dentro dos interesses do pblico e da nao. Esses regu-
lamentos exigem a documentao dos trabalhadores, instalaes
e justicativa da necessidade de transferncia do agente e subse-
qente aprovao desse processo por uma autoridade federal. Os
seguintes regulamentos se aplicam nesta categoria:
Importao de Agentes Etiolgicos de Doenas Humanas
42 CFR Parte 71 Quarentena Estrangeira. Parte 71.54 Agentes,
Hospedeiros e Vetores Etiolgicos. Esse regulamento exige uma li-
cena para a importao (obtida nos Centros de Preveno e Con-
252
APNDICE C
trole de Doenas) dos agentes etiolgicos de doenas humanas e de
quaisquer materiais, incluindo animais e insetos vivos que possam
cont-los. Um requerimento e maiores informaes sobre as licen-
as para importao podero ser obtidos pelo telefone 1-888-CDC-
FAXX e dando entrada no documento nmero 101000 ou pela
internet: <http://www.cdc.gov/od/ohs/biosty/imprtper.html>.
Importao de Agentes Etiolgicos de Criaes, Aves e de
Outras Doenas em Animais
9 CFR Partes 92, 94, 95, 96, 122 e 130. Esses regulamentos
exigem que uma licena de importao obtida no Departamento
de Agricultura dos Estados Unidos (USDA), no Servio de Inspe-
o de Sade de Plantas e Animais (APHIS) e nos servios vete-
rinrios para importao ou transferncia domstica de agentes
etiolgicos de criaes, aves, outros animais e qualquer outro ma-
terial que possa conter esses agentes etiolgicos. Maiores infor-
maes podero ser obtidas pelo telefone (301) 734-3277 ou pela
internet: <http://aphisweb.aphis.usda.gov/ncie>.
Importao de Pestes de Plantas
7 CFR Parte 330. Regulamentos Federais de Pestes de Plan-
tas; Geral; Pestes de Plantas; Solo; Pedras e Produtos de Ardsia;
Lixo. Esse regulamento exige uma licena para a importao ou a
transferncia domstica de pestes botnicas, agentes biolgicos
de plantas ou de qualquer material que possa cont-los. Maiores
informaes podero ser obtidas pelo telefone 301-734-3277 ou
pela internet: <http://aphis.usda.gov./ppq/ppqpermits.html>.
Transferncia de Agentes Biolgicos Selecionados de
Doenas Humanas
42 CFR Parte 72.6. Exigncias Adicionais para Instalaes
que Realizam Transferncias ou Recebimento de Agentes Sele-
cionados. Instalaes que transferem ou importam agentes se-
lecionados devero ser registradas junto ao CDC. Cada trans-
ferncia de um agente selecionado dever ser documentada.
Maiores informaes podero ser conseguidas pela internet:
<http://www.cdc.gov/od/ohs/lrsat>.
253
Exportao de Agentes Etiolgicos Humanos, Animais,
Plantas e Materiais Relacionados
Departamento de Comrcio. 15 CFR Partes 730 a 799. Esses
regulamentos exigem que os exportadores de uma grande varie-
dade de agentes etiolgicos humanos, plantas e doenas animais,
incluindo o material gentico e produtos que podero ser usados
na cultura de grandes quantidades de agentes, possuam uma li-
cena para exportao. Maiores informaes podero ser obti-
das pelo telefone do DOC Bureau of Export Administration: 202-
482-4811 ou pela internet: <http://www.bxa.fedworld.gov> ou
<http://www.bxa.doc.gov>.
As guras 4 e 5 ilustram o acondicionamento e a rotulao de
substncias e amostras clnicas infecciosas em volumes de menos
de 50ml, de acordo com as provises do subpargrafo 72.3 (a) do
regulamento do Interstate Shipment of Etiologic Agents (42 CFR,
Parte 72). A reviso depende ainda dos resultados dos requisitos
adicionais de rotulao de embalagens, mas at o momento da pu-
blicao desta quarta edio do BMBL essas modicaes no ha-
viam sido concludas.
Para maiores informaes sobre qualquer clusula deste regu-
lamento, entre em contato com:
Ccntcrs for Discasc Control and Prcvcntion
Attn: External Activities Program
Mail Stop F-05
1600 Clifton Road N.E.
Atlanta, GA 30.333
Telephone: (404) 639-4418
FAX: (404) 639-2294.
Observe que o nome, o endereo e o nmero de telefone do
remetente devero ser colocados nos lados externo e interno dos
containers. Recomendamos ao leitor consultar outras clusulas
adicionais do Department of Transportation (49 CFR, Partes 171-
180) Hazardous Materials Regulations.
254
APNDICE C
Figura 4. Embalagem e rotulagem de substncias infecciosas
Figura 5. Embalagem e rotulagem de amostras clnicas
Recipiente primrio
Embalagem de material absorvente
Cultura
Tampa
Rtulo de risco biolgico
Segundo recipiente ou
recipiente secundrio
Nome, telefone e
endereo
do remetente.
Rtulo de substncia infecciosa
Embalagem de
material absorvente
Cultura
Fita prova dgua
Outro
recipiente
Rtulo de identicao
da amostra
Lista discriminada dos contedos
Recipiente hermtico primrio
Recipiente secundrio hermeticamente fechado (lacrado em um saco plstico)
Recipiente secundrio
hermeticamente fechado
(lacrado em um saco plstico)
Recipiente hermtico primrio
Embalagem de material absorvente
Amostra ID
Nome, telefone e endereo do destinatrio
Embalagem de
material absorvente
Rtulo da amostra clnica
Embalagem exterior
255
Os patgenos que normalmente no so encontrados na cria-
o domstica de aves e de gado podero necessitar de um projeto
laboratorial especial, uma operao e de caractersticas espec-
cas de conteno, que geralmente no esto especicadas nesta
publicao. A importao, a posse e o uso dos seguintes agentes
so proibidos ou restritos por lei ou pelos regulamentos ou nor-
mas administrativas do Departamento de Agricultura dos Estados
Unidos ou por polticas administrativas:
Tabela 9. Patgenos animais
Doena do cavalo africano Mycoplasma mycoides (mycoides)
Vrus da febre suna africana*
Vrus da doena de ovinos africanos
(vrus Ganjam)
Vrus da Akabane
Vrus da doena de Newcastle* (cepas
velognicas)
Vrus da inuenza aviria
Peste dos pequenos ruminantes*
(praga dos pequenos ruminantes)
Besnoitia Besnoiti Vrus da febre do Vale Rift*
Vrus da lngua azul* Vrus de Rinderspest*
Vrus da doena de Borna Varola de ovinos e caprinos*
Encefalopatia espongiforme bovina Vrus da doena vesicular de sunos*
Agente da febre petequial
infecciosa bovina
Vrus da doena de Teschen*
Brucella abortus
Brucellosis melitensis*
Teileria annulata
Teileria lawrencei
Burckholderia mallei
(Pseudomonas mallei Glanders)
Teileria bovis
APNDICE D
PATGENOS ANIMAIS
continua
256
APNDICE D
PATGENOS ANIMAIS
Vrus da varola do camelo Teileria hirci
Febre suna clssica Trypanosoma brucei
Cochliomya hominivorax
(larva da Cochliomya hominivorax)
Trypanosoma congolense
Cowdria ruminantium (caudriose) Trypanosoma equiperdum (dourine)
Encefalopatia espongiforme bovina, va-
riante da doena de Creutzeldt-Jakob
Trypanosoma evansi
Vrus da febre efemeral Trypanosoma vivax
Vrus da doena da mo-e-boca* Encefalomielite eqina venezuelana
Histoplasma (Zymonema) farciminosum Vrus do exantema vesicular
Vrus da encefalite bovina Estomatite vesicular
Vrus da doena da pele granulosa Doena hemorrgica viral de coelhos
Mycobacterium bovis Vrus da doena de Wesselsbron
Mycoplasma agalactiae
A importao, a posse, o uso ou o embarque interestadual de
patgenos animais, com exceo dos relacionados, podem tam-
bm estar sujeitos aos regulamentos do Departamento de Agri-
cultura dos Estados Unidos.
A licena para importao por meio do USDA/APHIS neces-
sria para a importao de qualquer agente infeccioso animal que
esteja na lista de patgenos animais da USDA/APHIS. Essa licena
poder ser requerida para a importao de qualquer outro agente
de infeco de aves e gado. Uma licena tambm necessria para
a importao de qualquer produto derivado de aves ou de gado,
tais como sangue, soro ou outros tecidos.
Mais informaes podero ser obtidas escrevendo para:
U.S. Dcpartmcnt of Agriculturc
Animal and Plant Health Inspection Service
Veterinary Services, National Center for Import and Export
4700 River Road, Unit # 40
Riverdale, Maryland 20737-1231
Telefone: (301) 734-3277
Fax: (301) 734-8226
Internet: http://www.aphis.usda.gov/ncei
continuao
257
As fontes de informaes, as consultas e as recomendaes so-
bre o controle de risco biolgico, os procedimentos de desconta-
minao e outros aspectos do gerenciamento da segurana de um
laboratrio incluem:
Ccntcrs for Discasc Control and Prcvcntion
Attention: External Activities Program
Atlanta, Georgia 30333
Telefone: (404) 639-4418
National Institutcs of Hcalth
Attention: Division of Safety
Bethesda, Maryland
Telefone: (301) 496-1357
National Animal Discasc Ccntcr
U.S Department of Agriculture
Ames, Iowa 50010
Telefone: (515) 862-8258
Unitcd Statcs Dcpartmcnt of Iabor, Occupational Safcty
and Hcalth Administration
Exposio Ocupacional aos Patgenos do Sangue, Regra Final
Fed Reg 1991; 56: 64041-64182
http://www.osha-slc.gov/OshStd_data/1910_1030.html.
Regra Proposta para TB:
http://www.osha-slc.gov/FedReg_osha_data/FED19980205.html.
Padres de Segurana e de Sade. Ocupacional 29 CFR Parte 1910:
http://www.oshda-slc.gov/OshStd_toc/OSHA_Std_toc_1910.html
APNDICE E
FONTES DE INFORMAES
258
APNDICE E
FONTES DE INFORMAES
Normas:
Ccntros dc Prcvcno c Controlc dc Docnas
Tuberculose:
1994: http://www.cdc.gov/nchstp/tb/pubs/250001.pdf
1997 (labs): http://www.cdc.gov/od/ohs/tbdoc2.html
Imunizao para Trabalhadores da rea de Sade:
http://www.cdc.gov/epo/mmwr/preview/rr4618.html
Normas para Controle de Infeces em Trabalhadores da rea
de Sade, 1998:
http://www.cdc.gov/ncidod/hip/draft_gu/waisgate.txt
Prolaxia para o HIV:
http://www.cdc.gov/epo/mmwr/mmwr_rr.html
Dcpartamcnto do Excrcito, DOD. 32 CFR Partcs 626, 627
Programa dc Scgurana da Dcfcsa Biolgica:
http://www.gpo.gov
Comitc Nacional para Padrcs dc Iaboratrios Clnicos (NCCIS)
Normas aprovadas para a proteo de trabalhadores de labo-
ratrios contra os agentes de risco biolgico e doenas infec-
ciosas transmitidas pelo sangue, uidos corpreos e tecidos.
Dezembro de 1997, NCCLS Doc. M29-A (ISBN1-56238-339-6.
http://www/exoce@nccls.org ).
Institutos Nacionais dc Sadc
Normas do NIH para Molculas de DNA Recombinante:
http://www.NIH.gov/od/orda/toc.html
Escritrio do NIH para Atividades com DNA Recombinante:
http://www.NIH.gov/od/orda
259
APNDICE F
SEGURANA DO
LABORATRIO E
RESPOSTA DE EMERGNCIA
PARA LABORATRIOS
BIOMDICOS E DE
MICROBIOLOGIA
Normas tradicionais de segurana laboratorial enfatizam o uso
de boas prticas de trabalho, de equipamentos de conteno ade-
quados, dependncias bem projetadas e controles administrativos
que minimizem os riscos de uma infeco acidental ou ferimentos
em trabalhadores de laboratrio e que evitem a contaminao do
meio ambiente.
Embora os laboratrios clnicos e de pesquisas possam conter
uma variedade de materiais biolgicos, qumicos e radioativos pe-
rigosos, at o momento existem poucos relatrios sobre o uso in-
tencional de quaisquer desses materiais para ferir trabalhadores
de laboratrio ou outras pessoas.
1, 2, 3, 4, 5, 6
Entretanto, h uma crescente preocupao sobre o possvel
uso de materiais biolgicos, qumicos e radioativos como agentes
para o terrorismo.
7, 8
Em resposta a essas preocupaes, as seguin-
tes normas orientam essas questes de segurana laboratorial
(por exemplo, preveno da entrada de pessoas no autorizadas
em reas laboratoriais e preveno da remoo no autorizada de
agentes biolgicos perigosos).
Os seguintes itens so oferecidos como normas para os labora-
trios que usam agentes biolgicos ou toxinas capazes de causa-
rem doenas srias ou fatais aos homens e aos animais. A maioria
desses laboratrios estaria trabalhando sob condies de nveis
de biossegurana 3 ou 4 descritas nas sees II e III. Porm, os la-
boratrios de pesquisa, de produo e os clnicos que trabalham
com patgenos recentemente identicados, patgenos animais de
alto nvel e/ou toxinas no-cobertas pelas recomendaes dos n-
260
APNDICE F
SEGURANA DO LABORATRIO E RESPOSTA DE EMERGNCIA PARA LABORATRIOS BIOMDICOS E DE MICROBIOLOGIA
veis de biossegurana 3 ou 4 devero tambm seguir essas normas
para minimizar as oportunidades de remoo acidental ou inten-
cional dos agentes de um laboratrio.
1. Reconhecer que a segurana do laboratrio est relatada, mas
diferente de um laboratrio seguro
Envolver prossionais com experincia em segurana e
proteo para avaliao e desenvolvimento das recomen-
daes para um dado local ou laboratrio.
Revisar as normas e os procedimentos de segurana re-
gularmente. A administrao dever revisar as normas
para garantir que esto adequadas para as condies atu-
ais e consistentes com outras normas e procedimentos
amplos do local. Os supervisores do laboratrio devero
assegurar que todos os trabalhadores e visitantes de um
laboratrio entendam os requisitos de segurana e sejam
treinados e equipados para seguirem os procedimentos
estabelecidos.
Rever as normas e os procedimentos quando ocorrer um
incidente ou quando uma nova ameaa for identicada.
2. Acesso controlado s reas onde agentes biolgicos ou toxinas
estejam sendo usados ou armazenados
As reas dos laboratrios e de tratamento de animais de-
vero ser separadas das reas pblicas dos edifcios onde
se encontram localizadas.
As reas do laboratrio ou de cuidados animais devero
ser trancadas todas as vezes.
Os cartes-chave ou dispositivos similares devero ser
usados para permitir a entrada nas reas do laboratrio e
nas de cuidado dos animais.
Todas as entradas (incluindo as entradas para visitantes,
trabalhadores de manuteno, trabalhadores para reali-
zao de reparos e outros que precisarem entrar ocasio-
nalmente) devero ser registradas por um dispositivo
semelhante a um carto-chave (prefervel) ou pela assi-
natura no livro de entrada.
261
APNDICE F
Somente os trabalhadores necessrios para a realizao
de um trabalho devero receber permisso para entrar
nas reas e nas horas que um trabalho em particular for
realizado.
a. O acesso para estudantes, cientistas, etc. dever ser
limitado ao horrio em que os funcionrios regula-
res estiverem presentes.
b. O acesso para limpeza, manuteno e consertos roti-
neiros dever ser limitado ao horrio em que os fun-
cionrios estiverem presentes.
Freezers, geladeiras, cabines e outros recipientes, em que
estoques de agentes biolgicos, materiais clnicos ou ra-
dioativos so guardados, devero ser trancados quando
no estiverem vista dos trabalhadores (por exemplo,
quando localizados em reas de armazenamento no fre-
qentadas regularmente).
3. Saber quem est nas reas do laboratrio
Os supervisores e diretores do local devero conhecer
todos os trabalhadores. Dependendo dos agentes biol-
gicos envolvidos e do tipo de trabalho a ser desenvolvido,
deve-se fazer uma reviso da limpeza e da segurana an-
tes que novos funcionrios sejam designados para a rea
de trabalho.
Todos os trabalhadores (incluindo estudantes, cientistas
visitantes e outros trabalhadores temporrios) devero
usar crachs de identicao. Os crachs devero conter
no mnimo uma fotograa, o nome do indivduo e a data
de vencimento da identicao. O uso de marcadores co-
loridos ou de outros smbolos facilmente identicveis
sobre os crachs seria til para a identicao e para in-
dicar a liberao para a entrada em reas restritas (por
exemplo, laboratrios de NB-3 ou 4 e reas de tratamen-
to de animais).
Os visitantes devero ser identicados com crachs e
acompanhados ou autorizados a entrar usando os mes-
mos procedimentos como os usados para trabalhadores.
262
APNDICE F
4. Saber quais os materiais que esto sendo trazidos para dentro
da rea laboratorial
Todos os materiais devero ser vericados (visualmente ou
por raios-x) antes de trazidos para dentro do laboratrio.
Os pacotes contendo amostras, substncias bacterianas
ou isoladas ou toxinas devero ser abertos em uma ca-
bine de segurana ou em outro dispositivo de conteno
adequado.
5. Saber quais materiais esto sendo removidos da rea
laboratorial
Os materiais/toxinas biolgicas que sero removidos
para outros laboratrios devero ser embalados e rotula-
dos de acordo com todos os regulamentos locais, federais
e internacionais aplicveis.
9
a. As licenas necessrias (por exemplo, PHS, DOT,
DOC, USDA) devero ser obtidas antes que os mate-
riais sejam acondicionados e rotulados.
b. Os recipientes (de preferncia) ou o local de recebi-
mento dos materiais devero ser conhecidos pelo
remetente. Este dever fazer um esforo para asse-
gurar que os materiais sejam enviados para um local
equipado com recursos para manipular os materiais
com segurana.
O transporte manual de materiais e toxinas biolgicas
para outros laboratrios considerado inadequado. Se
os materiais ou toxinas biolgicas a serem carregados
manualmente forem transportados por carregadores co-
muns, todos os regulamentos devero ser seguidos.
Materiais contaminados ou possivelmente contaminados
devero ser descontaminados antes de sar da rea do la-
boratrio. Os materiais qumicos e radioativos devero
ser descartados de acordo com os regulamentos locais,
federais e estaduais.
6. Tenha um plano de emergncia
O controle do acesso s reas do laboratrio poder fazer
com que os procedimentos de emergncia sejam dicul-
263
APNDICE F
tados. Esse fato dever ser considerado quando os planos
de emergncia forem desenvolvidos.
a. Uma avaliao da rea laboratorial pelos funcion-
rios do local, com prossionais de fora, se necess-
rio, para a identicao dos aspectos de segurana e
proteo, dever ser conduzida antes que um plano
de emergncia seja desenvolvido.
b. Os administradores, diretores, principais pesquisa-
dores e trabalhadores do laboratrio e os trabalha-
dores responsveis pela segurana do local devero
estar envolvidos no planejamento de emergncia.
c. A polcia, o corpo de bombeiros ou outras pessoas
envolvidas em situaes de emergncia devero ser
informados quanto aos tipos de materiais biolgicos
em uso nas reas laboratoriais e devero dar uma
assistncia ao planejamento dos procedimentos de
emergncia nas reas laboratoriais.
d. Os planos devero incluir a proviso de uma noti-
cao imediata aos diretores e trabalhadores do
laboratrio e pessoas encarregadas pela segurana
ou outros indivduos quando ocorrer uma emergn-
cia, de maneira que possam lidar com as questes de
biossegurana caso ocorram.
O planejamento de emergncia laboratorial dever ser
coordenado com planos de expanso. Fatores como ame-
aas de bombas, problemas climticos (furaco e inunda-
o), terremotos, falta de energia e outros desastres na-
turais (ou no-naturais) devero ser considerados quando
o plano de emergncia estiver sendo desenvolvido.
7. Possua um protocolo para relato de incidentes
Os diretores do laboratrio, em cooperao com os encar-
regados pela segurana e proteo do local, devero ter
normas e procedimentos no local para relatar e investigar
os incidentes ou possveis incidentes (por exemplo, visi-
tantes sem documentos, desaparecimento de substn-
cias qumicas, telefonemas incomuns ou ameaadores).
265
APNDICE G
GERENCIAMENTO
INTEGRADO DE ROEDORES
E DE INSETOS
O gerenciamento de roedores e de insetos uma parte impor-
tante na administrao de um local de pesquisa. Muitos insetos,
como mosquitos e baratas, podem ser vetores e espalhar mecani-
camente os patgenos de doenas, comprometendo o meio am-
biente de pesquisa. Mesmo a presena de insetos incuos contri-
bui para as condies fora dos padres sanitrios.
A abordagem mais comum para o controle de roedores e de in-
setos tem sido a aplicao de produtos qumicos, como uma me-
dida preventiva ou remediadora. Os tratamentos com pesticidas
podem ser ecazes e necessrios como medidas corretivas, mas
tm resultados limitados a longo prazo quando usados sozinhos.
As aplicaes de pesticidas tambm apresentam potencial de con-
taminao para o meio ambiente de pesquisa, pela aerolizao e
volatilizao do pesticida.
Para controlar os roedores e os insetos e minimizar o uso de
pesticidas, necessrio empregar um programa de abordagem
que integre os servios de limpeza, de manuteno e de controle
de roedores e insetos. Esse mtodo de controle freqentemen-
te chamado de gerenciamento integrado de roedores e de insetos
(GIRI). O objetivo primrio de um programa GIRI prevenir os
problemas causados pelos roedores e insetos por meio do geren-
ciamento do meio ambiente local, de maneira que o torne menos
propcio para a infestao de roedores e de insetos. Juntamente
com as aplicaes limitadas de pesticidas, o controle consegui-
do com estratgias de intervenes administrativas e operacionais
retroativas para corrigirem condies que propiciem o surgimento
de roedores e insetos.
266
APNDICE G
GERENCIAMENTO INTEGRADO DE ROEDORES E DE INSETOS
O GIRI um servio baseado em estratgias. A deciso de im-
plementar um programa GIRI dever se basear no somente no
custo, mas tambm na eccia dos componentes do servio. O
GIRI especco para cada local. Cada programa dever ser idea-
lizado conforme o meio ambiente onde ser aplicado. Os servios
de GIRI em um laboratrio sero diferentes daqueles aplicados em
um edifcio de escritrios ou em um local de tratamento de ani-
mais.
Os programas de gerenciamento integrado de roedores e de in-
setos (GIRI) so baseados nos vrios componentes que esto in-
ter-relacionados e que contribuem para o gerenciamento do meio
ambiente de pesquisa para controlar os roedores e os insetos. So
eles:
PuoJeio oo Iocnt: A incluso de questes e requisitos
para o gerenciamento de roedores e de insetos no pla-
nejamento, no projeto e na construo proporciona a
oportunidade de incorporar caractersticas que auxiliam
a impedir a presena de roedores e de insetos, a mini-
mizar o seu habitat e a promover condies sanitrias
adequadas. Isso poder ajudar a reduzir a necessidade
de futuros servios corretivos de gerenciamento de roe-
dores e de insetos, que podem ser um obstculo para as
operaes de pesquisa.
MoNtiounmeNio: Armadilhas, inspees visuais e en-
trevistas com os funcionrios so usadas para identica-
o das reas e das condies que possam abrigar roedo-
res e insetos. O monitoramento a atividade central de
um programa de GIRI e usado no lugar de tratamentos
preventivos com pesticidas.
MnNuieNno oo Iocnt e oo SnNenmeNio Bnstco:
Muitos dos problemas com roedores e insetos podem
ser prevenidos ou corrigidos ao usarmos um saneamen-
to adequado, reduzindo a desordem e o habitat desses.
A manuteno de registros das decincias estruturais
e das condies de manuteno do local pode ajudar a
detectar problemas e determinar se as aes corretivas
foram concludas de maneira satisfatria.
267
APNDICE G
ComuNtcnno: Um membro da equipe do laboratrio
pode ser designado para se reunir com os funcionrios
do gerenciamento de roedores e de insetos, para assisti-
los nas resolues de questes especcas do laboratrio
que tenham impacto sobre o gerenciamento de roedores
e de insetos. As informaes sobre as atividades de roe-
dores e de insetos e as recomendaes sobre as prticas
e as condies do local que possam impactar o gerencia-
mento de roedores e de insetos devem ser retransmiti-
dos verbalmente ou por escrito para aquelas pessoas. O
treinamento dos indivduos em questes relacionadas
identicao, biologia e s condies sanitrias pode
tambm promover a compreenso e a cooperao com os
objetivos do programa de GIRI.
MnNuieNno oe Reotsiuos: Um livro de registro pode
ser usado para anotar a atividade dos roedores e dos inse-
tos e as condies pertinentes ao programa de GIRI. O li-
vro poder conter os protocolos e os procedimentos para
os servios de GIRI naquela instalao, folhas de dados
sobre a segurana dos pesticidas, rtulos dos mesmos,
registros de tratamento, planos para o uso, relatrios de
pesquisa, etc.
CoNiuote oe Roeooues e oe INseios sem o uso oe
Pesitctons: Os mtodos de controle como o uso de ar-
madilhas, calafetagem ou vedao, lavagem e congela-
mento podem ser aplicados de forma segura e eciente,
quando usados juntamente com condies sanitrias e
reparos estruturais adequados.
CoNiuote oe Roeooues e oe INseios usnNoo Pesit-
ctons: As aplicaes preventivas dos pesticidas devero
ser desencorajadas, e os tratamentos devero car restri-
tos s reas de atividades conhecidas de roedores e dos
insetos. Quando os pesticidas so aplicados, deve-se usar
e aplicar produtos menos txicos, de melhor eccia, de
maneira segura.
Avnttnno e GnunNitn oe Qunttonoe oo Puoounmn:
A reviso do programa e a garantia da qualidade devero
268
APNDICE G
proporcionar uma avaliao contnua e objetiva das ati-
vidades e da eccia do GIRI. Isso feito para assegurar
que o programa esteja realmente controlando os roedores
e os insetos e atendendo as necessidades bsicas do pro-
grama de instalao e de seus ocupantes. Baseado nessa
reviso, os protocolos de gerenciamento de roedores e de
insetos podem ser modicados e novos procedimentos
podem ser implementados.
Peuctn TecNtcn: Um entomologista qualicado pode
fornecer um guia tcnico til ao desenvolvimento e
implementao de um programa GIRI. As pessoas res-
ponsveis pelo gerenciamento de roedores e de insetos
devero ser licenciadas e certicadas por uma agncia
regulamentadora adequada.
SeouunNn: Ao limitar o espectro dos tratamentos com
pesticidas e ao usarmos prticas de controle sem pesti-
cidas, o programa de GIRI poder minimizar o potencial
de exposio do meio ambiente de pesquisa e da equipe
de funcionrios ao pesticida.
Antes de iniciar qualquer tipo de programa de controle de roe-
dores e de insetos, o desenvolvimento de uma estrutura operacio-
nal para os servios GIRI poder ajudar a promover a colaborao
entre especialistas no controle e o pessoal do local. Essa estrutura
pode tambm ser usada para incorporar as restries de instala-
o fsica laboratorial e questes operacionais e processuais den-
tro do programa de GIRI. Um programa ecaz de gerenciamento
de roedores e de insetos uma parte integral da administrao
das instalaes laboratoriais. Ao incluir uma poltica de GIRI nos
procedimentos padro de operao de instalaes laboratoriais,
aumenta-se a conscientizao do programa.
O treinamento sobre os princpios e as prticas do gerencia-
mento estrutural (indoor) integrado ao gerenciamento de roedo-
res e de insetos e as informaes sobre o programa do GIRI esto
disponveis em muitas fontes. Algumas delas so: os departamen-
tos de entomologia de universidades, os escritrios de extenso
municipal, a Sociedade Entomolgica dos EUA, os departamentos
estaduais de agricultura, as associaes estaduais de controle de
269
APNDICE G
roedores e de insetos, os estoques de equipamentos para controle
e os consultores ou as rmas de gerenciamento de roedores e de
insetos. H tambm cursos por correspondncia em vrias univer-
sidades, cursos de curta extenso e conferncias de treinamento
sobre o gerenciamento estrutural de roedores e de insetos.
INroumnes notctoNnts:
Urban Entomolgy. 1996. Insect and mite Pests in the Human
Environment. W.H. Robinson. Chapman and Hall. New York.
Advances in Urban Pest Management. 1986. Gary W. Bennett and
John M. Owens, eds. Van Nostrand Reinhold Company. New York.
Common Sense Pest Control. 1991. Least-toxic solutions for
four home, garden, pests and community. William Olkowski,
Sheila Daar, Helga Olkowski. The Taunton Press Inc.
INieuNei:
Associao Nacional de Controle de Roedores e de Insetos:
http://www.pestworld.org
Rede de Biocontrole:
http://www.bioconet.com
271
APNDICE H
TRABALHOS COM CLULAS
E TECIDOS HUMANOS E DE
OUTROS PRIMATAS
Os Centers for Disease Control and Prevention e o National
Institutes of Health gostariam de expressar agradecimentos a Frank
P. Simione, M.S. e Jane Caputo, B.A., da American Type Culture
Collection (ATCC), uma organizao global de biocincia dedicada
aos padres biolgicos e biodiversidade, por suas contribuies na
preparao deste apndice.
Pelo menos 24 casos documentados de infeco em funcion-
rios de laboratrio que manipulam culturas de clulas primrias
(por exemplo, clulas renais do macaco rhesus) ocorreram nos l-
timos 30 anos.
1, 2
Embora um nmero limitado de infeces adqui-
ridas em laboratrio tenha sido relatado como resultado da ma-
nipulao de clulas humanas e de outros primatas, h um risco
signicativamente maior em adquirir uma infeco pelo HIV ou
pelo HBV por meio da exposio ao sangue humano e a outros
lquidos corporais.
3, 4, 5
Por essa razo, a OSHA desenvolveu um
padro para patgenos do sangue.
6
Os procedimentos foram pu-
blicados para reduzir a contaminao de culturas celulares com
microorganismos
7, 8
ou com outras clulas.
9
Rtscos PoieNctnts em Inuouniutos: Os riscos potenciais
laboratoriais associados s clulas e aos tecidos humanos incluem
os patgenos do sangue HBV e HIV, assim como agentes tais como
Mycobacterium tuberculosis que podem estar presentes nos tecidos
pulmonares humanos. Outras clulas e tecidos de primatas tam-
bm apresentam riscos aos trabalhadores de laboratrio.
10
Riscos
potenciais aos trabalhadores de laboratrio so apresentados por
clulas transformadas por agentes virais, como as SV-40, EBV ou
a HBV, assim como as clulas que carregam material gentico vi-
272
APNDICE H
TRABALHOS COM CLULAS E TECIDOS HUMANOS E DE OUTROS PRIMATAS
ral. As clulas humanas tumorignicas tambm podem oferecer
potenciais riscos como resultado de uma auto-inoculao.
11
Punitcns RecomeNonons: Clulas humanas e de outros pri-
matas devero ser manipuladas usando as prticas e a conteno
do nvel de biossegurana 2. Todo o trabalho dever ser realizado
em uma cabine de segurana biolgica, e todo o material dever
ser descontaminado pela autoclave ou desinfetado antes de ser
descartado.
12, 13, 14, 15
Todos os funcionrios que trabalham com c-
lulas e tecidos humanos devero ser registrados no Programa de
Patgenos do Sangue e trabalhar de acordo com as normas e po-
lticas estabelecidas pelo Plano Institucional de Controle de In-
feco.
16
Os empregados devero fornecer uma amostra do soro,
permitir a sua imunizao contra o vrus da hepatite B e ser ava-
liados por um prossional da rea de sade depois de qualquer
exposio incidental.
273
APNDICE I
NORMAS PARA O
TRABALHO COM TOXINAS
DE ORIGEM BIOLGICA
Em reconhecimento ao crescente nmero de laboratrios bio-
mdicos e microbiolgicos que trabalham com toxinas de origem
biolgica, apresentamos as seguintes normas para o trabalho com
essas toxinas.
O material a seguir foi adaptado do Programa de Segurana
da Defesa Biolgica e dos Requisitos de Segurana Tcnica (DA
Pamphlet 385-69)
1
e do apndice A do United States Department
of Labor Occupational Safety and Health Association regulado por
Occupational Exposure to Hazardous Chemicals in Laboratories.
2
Os gerentes de laboratrio e os encarregados pela segurana
das instalaes devero ser encorajados a utilizar as referncias re-
lacionadas a seguir e a consultar peritos no assunto antes de usar
qualquer toxina, para assegurar que as instalaes, os equipamen-
tos de conteno, as normas e os procedimentos, os programas de
treinamento de pessoal e os protocolos de vigilncia mdica espe-
ccos para a toxina e para o laboratrio so adequados.
Geral
As instalaes, os equipamentos e os procedimentos labora-
toriais para o trabalho com toxinas de origem biolgica devero
reetir o nvel intrnseco de perigo imposto por uma toxina em
particular, assim como os riscos potenciais inerentes s operaes
realizadas. Se a toxina e os agentes infecciosos forem usados, os
dois devero ser levados em considerao quando o equipamento
de conteno for selecionado e os procedimentos e as normas fo-
rem escritos. Caso sejam usados animais, as prticas de segurana
animal tambm devero ser consideradas.
274
APNDICE I
NORMAS PARA O TRABALHO COM TOXINAS DE ORIGEM BIOLGICA
Prticas Padro
As prticas padro relacionadas nos NB-2 e 3 devero ser revisa-
das e incorporadas aos protocolos para o trabalho com as toxinas.
Prticas Especiais
As prticas especiais relacionadas nos NB-2 e 3 devero ser re-
visadas e incorporadas aos protocolos apropriados para o trabalho
com as toxinas.
1. Cada laboratrio dever desenvolver um plano de higie-
nizao qumica especco para a(s) toxina(s) usada(s).
O plano de higienizao qumica dever: 1) identicar os
perigos que sero encontrados no uso normal da toxina e
no caso de um vazamento ou outro acidente; e 2) especi-
car as prticas e normas a serem usadas para minimizar
os riscos (por exemplo, equipamento de conteno e pro-
teo individual, gerenciamento de vazamentos, geren-
ciamento de exposies acidentais e vigilncia mdica).
3
2. O treinamento especco para o uso de toxinas dever
ser exigido e documentado para todos os funcionrios
de laboratrio que trabalhem com as toxinas antes que o
trabalho com esse elemento seja iniciado e, a partir da,
em intervalos de tempo.
3. Um sistema de controle de inventrio dever ser adotado.
4. As toxinas devero ser guardadas em salas de armazena-
mento, cabines ou freezers trancados, quando no estive-
rem sendo usadas.
5. O acesso s reas que contm toxinas dever car restri-
to s pessoas que trabalham no local.
6. A preparao de recipientes primrios contendo estoques
de solues de toxinas e manipulaes de containers pri-
mrios de formas secas de toxinas dever ser conduzida
em uma coifa qumica a vapor, em uma cabine com lu-
vas (glove box), em uma cabine de segurana biolgica ou
em um sistema de conteno equivalente aprovado pelo
responsvel pela segurana. A ltrao do ar liberado
atravs de ltros HEPA e/ou atravs de carvo poder ser
necessria, dependendo da toxina.
275
APNDICE I
7. O usurio dever vericar o uxo de ar no interior da coi-
fa ou da cabine de segurana biolgica antes de iniciar o
trabalho.
8. Todo trabalho dever ser feito dentro de uma rea efetiva
da coifa ou da cabine de segurana biolgica.
9. Quando as toxinas estiverem sendo usadas, a sala dever
conter um aviso indicando Toxinas em Uso Somente
Pessoas Autorizadas. Qualquer solicitao especial para
a entrada no recinto dever ser colocada na entrada da
sala. Somente os funcionrios cuja presena necessria
devero ser permitidos enquanto as toxinas estiverem
sendo usadas.
10. Todas as operaes de alto risco devero ser conduzidas
na presena de duas pessoas experientes. Cada um deve-
r estar familiarizado com os procedimentos aplicveis,
mantendo o contato visual um com o outro e pronto a
prestar socorro no caso de um acidente.
11. Antes que os recipientes sejam removidos da sala, da coi-
fa, das cabines ou da cabine com luvas (glove box), o exte-
rior do recipiente primrio fechado dever ser desconta-
minado e colocado em um container secundrio limpo. As
toxinas devero ser transportadas somente em containers
prova de vazamentos.
12. As roupas e os equipamentos de proteo contaminados
ou potencialmente contaminados devero ser descon-
taminados utilizando mtodos conhecidos pela eccia
contra toxinas antes de serem removidos do laboratrio,
para que possam ser desprezados, limpos ou conserta-
dos. Caso a descontaminao no seja possvel/prtica,
os materiais (por exemplo, luvas usadas) devero ser des-
cartados como lixo txico. Os materiais contaminados
com agentes infecciosos e as toxinas devero tambm ser
autoclavados ou convertidos em no-infecciosos de outra
maneira antes de deixar o laboratrio.
13. O interior da coifa, da cabine com luvas (glove box) ou da
cabine dever ser descontaminado periodicamente, por
exemplo, no nal de uma srie de experimentos relacio-
276
APNDICE I
nados. At que sejam descontaminadas, a coifa, a cabine
com luvas e a cabine devero conter um aviso indicando
que toxinas esto sendo usadas e que o acesso ao equi-
pamento e aos utenslios ca restrito aos funcionrios
autorizados.
Equipamentos de Segurana
As normas para o uso de equipamentos de segurana relacio-
nados nos nveis de biossegurana 2 e 3 (veja seo III) devero
ser revisadas e incorporadas adequadamente aos protocolos para
o trabalho com as toxinas.
1. Quando utilizando coifas a vapor com abertura frontal
ou cabine de segurana biolgica, roupa de proteo,
incluindo as luvas e uma capa descartvel que cubra o
corpo e tenha manga comprida (jaleco, avental ou traje
semelhante), estes devero ser usados de maneira que as
mos e os braos estejam completamente cobertos.
2. Uma proteo para os olhos dever ser utilizada se um
sistema de conteno que possua uma abertura na frente
for usado.
3. Outro equipamento poder ser necessrio, dependendo
das caractersticas da toxina e do sistema de conteno.
Por exemplo, use uma proteo respiratria adicional se
a a formao de aerossis ocorrer e no for possvel o uso
de um equipamento de conteno ou de outros controles
de engenharia de segurana.
4. Quando manipular formas secas de toxinas que sejam
eletrostticas:
a. No use luvas (como as de ltex) que ajudem a for-
mar eletricidade esttica.
b. Use uma glove box ou uma cabine com luvas ou uma
cabine de segurana biolgica de classe III.
5. Quando manipular toxinas que sejam perigosas para a
membrana percutnea (irritantes, que provocam necrose
no tecido ou sejam extremamente txicas para a exposi-
o dermatolgica), selecione luvas que sejam imperme-
veis toxina.
277
APNDICE I
6. Considere a toxina e o diluente quando for selecionar lu-
vas e outras roupas de proteo.
7. Se os agentes infecciosos e as toxinas forem usados jun-
tamente com um sistema experimental, considere os
dois quando for selecionar os equipamentos e as roupas
de proteo.
Instalaes do Laboratrio
As recomendaes de instalao do laboratrio relacionadas
para os nveis de biossegurana 2 e 3 (veja a seo III) e os padres
da OSHA* devero ser revisados e incorporados de forma apro-
priada nos protocolos para o trabalho com toxinas.
1. ItNnns oe Vncuo. Ao usar as linhas de vcuo juntamen-
te com sistemas de conteno de toxinas, estas devero
ser protegidas com um ltro HEPA para prevenir a en-
trada de toxinas nas linhas. Os ralos das pias devero ser
tambm protegidos quando os aspiradores de gua forem
usados.
279
NDICE
REMISSIVO
A
Agentes Bacterianos 101
Agentes Parasitrios 132
Trematdeos 135, 136
agentes virais 153, 162, 271
Agulhas e seringas 34, 42, 52
Antraz 101, 247
Arbovrus e Arenavrus 182, 185
Ascaris spp 137, 138
Avaliao dos Riscos 23, 26, 85, 89, 90, 92, 96, 97, 100, 180
B
Bacillus anthracis 101
Bacillus subtilis 23
Besnoitia Besnoiti 255
BMBL 253
Bordetella pertussis 102
Botulismo 108
Bovino 110, 139, 143, 168, 176, 177, 255, 256
Abortus 103, 255
Canis 103, 201
Melitensis 103, 201, 202, 255
Suis 103
Brucelose 13, 14, 103, 104
280
NDICE REMISSIVO
C
Cabines de Segurana Biolgica 20, 21, 24, 25, 27, 31, 32, 36, 38, 43,
46, 47, 49, 54, 55, 57, 59, 63, 73, 79, 81, 82, 86, 88, 103, 116,
119, 129, 160, 163, 168, 235, 237, 238, 239, 246
Classe I 64, 88, 119, 129, 168, 235, 236, 238, 239, 241
Classe II 20, 27, 36, 45, 47, 54, 63, 81, 235, 236, 238, 239, 242,
243, 244, 245
Classe III 21, 25, 47, 53, 54, 55, 57, 58, 59, 64, 81, 82, 85, 86, 88,
156, 160, 235, 238, 239, 240, 246, 276
Calomys spp. 192
Campylobacter 105, 106, 202, 203
Caudriose 256
Cercopithecus spp. 192
Chimpanzs 140, 141, 143, 156, 158, 164, 193
Citomegalovrus 162
Clostridium 108, 109
Coccidioides immitis 127
Clera 13, 125, 247
Condios 127, 132
Conteno 17, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 27, 31, 32, 36, 38, 39, 41,
43, 45, 48, 49, 53, 55, 57, 58, 60, 62, 64, 70, 73, 74, 77, 78,
79, 82, 85, 87, 88, 96, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106,
107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 115, 116, 117, 118, 119,
120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 133, 135, 138, 150, 154,
155, 158, 162, 163, 164, 165, 167, 170, 173, 177, 181, 186,
188, 189, 193, 235, 236, 238, 239, 249, 251, 255, 259, 262,
272, 273, 274
Conteno primria 19, 22, 24, 49, 53, 73, 78, 87, 99, 103, 105,
108, 120, 121, 126, 133, 135, 138, 158, 163, 170, 177, 235
Conteno secundria 19
Coriomeningite Linfoctica 164, 186
Coxiella burnetii 24, 149, 218
Cryptococcus neoformans 128, 209
CSB. veja Cabines de Segurana Biolgica
D
Dengue 179, 181, 182, 188
281
NDICE REMISSIVO
Descontaminao 22, 24, 30, 31, 33, 35, 37, 40, 43, 45, 46, 48, 49,
51, 53, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 74, 80, 81, 82,
88, 89, 108, 142, 146, 174, 188, 239, 257, 275
Difteria 109, 110
Doena da Floresta de Kyasanur 192, 193
E
Ebola 90, 192, 193, 229
Encefalite 186, 190, 193
Encefalomielite eqina 179, 185, 186, 190, 256
Envio 104, 109, 112, 126, 127, 128, 150, 152, 154, 156, 169, 181,
185, 193, 249, 250
Equipamento de segurana 16, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 29, 32,
39, 64, 66, 99, 100, 157, 178, 180, 185, 187, 191, 276
Escherichia coli 110, 203
F
Fasciola spp 135
Febre Amarela 185, 186, 187, 188, 190, 247
Febre de Pontiac 115
Febre Hemorrgica de Omsk 193
Febre maculosa das Montanhas Rochosas 151
Febre Q 15, 149, 150
Febre tifide 122
Filovrus 188, 191, 192, 193
Filtro HEPA 47, 58, 62, 63, 81, 236, 239, 240, 241, 242, 243, 244,
245, 246
Francisella tularensis 111, 112, 203
G
Giardia spp 133
H
Hantavrus 153, 189
Heliobacter pylori 112, 203
Hepatite 14, 15, 23, 24, 27, 34, 41, 70, 75, 91, 97, 100, 141, 149,
282
NDICE REMISSIVO
156, 157, 158, 247, 272
Herpesvrus 94, 162
Histoplasma 129, 256
Capsulatum 129, 130
Farciminosum 256
I
Imunoprolaxia 97, 247
Inuenza 98, 163, 223, 255
Instalaes animais 96
K
Kuru 139, 141, 175, 176, 214
L
Laboratrios clnicos 14, 23, 24, 26, 27, 38, 66, 104, 259
Laboratrio escafandro 54, 59, 60, 63, 82, 156, 160
Legionella pneumophila 115, 204
Leishmania spp 132, 133
Lepra 116, 117
Limpeza 31, 37, 38, 43, 44, 45, 46, 55, 56, 60, 61, 69, 73, 79, 87, 93,
174, 261, 265
Listeria monocytogenes 114, 204
Luvas 21, 24, 30, 31, 32, 37, 39, 44, 45, 52, 64, 68, 71, 72, 76, 78,
86, 88, 105, 107, 114, 115, 120, 124, 126, 131, 133, 135, 136,
137, 142, 143, 144, 145, 147, 148, 157, 158, 161, 170, 171,
177, 178, 181, 236, 238, 239, 240, 246, 274, 275, 276, 277
M
Machupo 192, 193
Malria 132
Marburg 15, 25, 90, 192, 229
Meningitis 121, 206
Metacercria 135, 136
Meyer e Eddie 13
Moldes 148
283
NDICE REMISSIVO
Mycobacterium 24, 116, 117, 118, 256, 271
asiaticum 117
bovis 117, 118, 119, 120, 255, 256
fortuitum 117
kansasii 117
leprae 116, 117, 118
malmoense 117
marinum 117
scrofulaceum 117
simiae 117, 159, 161, 162, 222
szulgai 117
tuberculosis 17, 24, 27, 97, 117, 118, 119, 196, 197, 205, 271
ulcerans 117
xenopi 117
Mycoplasma agalactiae 256
Mycoplasma mycoides 255
N
Naegleria 23, 134, 135
fowleri 134, 135
gruberi 23
Neisseria 120, 121
Nveis de Biossegurana (NB) 16, 17, 22, 23, 26, 29, 32, 40, 64, 65,
66, 88, 89, 90, 93, 96, 97, 98, 179, 235, 259, 276, 277
Nvel de Biossegurana 1 23, 29, 32
Nvel de Biossegurana 2 23, 24, 27, 32, 39, 99, 100, 101, 103, 104,
105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 115, 116, 117,
118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129,
130, 131, 132, 133, 135, 136, 137, 138, 140, 141, 142, 143,
149, 151, 154, 157, 158, 160, 162, 163, 164, 165, 166, 168,
169, 176, 178, 179, 180, 181, 182, 185, 187, 272
Nvel de Biossegurana 3 24, 25, 38, 39, 42, 48, 99, 100, 102, 103,
104, 105, 107, 108, 112, 116, 119, 120, 121, 122, 126, 128,
130, 140, 143, 150, 151, 158, 160, 165, 167, 170, 173, 178,
179, 181, 185, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 238
Nvel de Biossegurana 4 25, 26, 48, 49, 51, 53, 54, 55, 58, 59, 63,
160, 191, 192, 193
Nvel de Biossegurana Animal 1 66
284
NDICE REMISSIVO
Nvel de Biossegurana Animal 2 69, 101, 103, 106, 107, 109, 110,
111, 113, 115, 117, 118, 120, 122, 123, 125, 127, 128, 129,
130, 131, 151, 157, 158, 165, 166
Nvel de Biossegurana Animal 3 74, 104, 112, 150, 165
Nvel de Biossegurana Animal 4 82
Normas 2, 3, 9, 16, 17, 30, 32, 33, 34, 35, 36, 40, 41, 42, 48, 64, 67,
68, 70, 71, 72, 75, 76, 77, 82, 84, 85, 90, 93, 145, 161, 174,
249, 255, 258, 259, 260, 263, 272, 273, 274, 276
Nova droga de pesquisa 108, 247
O
Objetos cortantes 32, 35, 42, 43, 53, 68, 148, 172, 239
P
Patgenos 17, 23, 24, 27, 28, 42, 51, 96, 140, 142, 159, 162, 172,
250, 255, 256, 257, 259, 265
Patgenos animais 28, 255, 256, 259
Patgenos do sangue 159, 271, 272
Pipetagem 30, 32, 40, 104
Poliovrus 165, 166, 167, 223
Poxvrus 167, 168
Praga 255
Prticas laboratoriais 29
Precaues universais 16, 90, 95, 171
Presbytis spp 192
Primatas 68, 73, 116, 117, 118, 119, 123, 137, 151, 156, 157, 158,
161, 164, 165, 171, 172, 173, 175, 176, 192, 193, 271, 272
Prons 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 176
Projeto da instalao 19, 48
Protozorios parasitas 133, 135
Pseudomonas 105, 255
pseudomallei 105
Psittaci 106, 107
Q
Quantidades de produo 98, 99, 116, 120, 121, 122
285
NDICE REMISSIVO
R
Reaes alrgicas 137
Retrovrus 94, 170, 172, 173, 175
Rickettsia 150, 219
akari 150
australis 150
conorii 150
coxiella burnetii 218
grupo da febre maculosa 151
mooseri 150
prowazekii 150
rickettsii 151, 152, 219
Riscos laboratoriais 97, 98, 113, 145, 187
S
Salmonella 121, 122, 206
SALS 66, 178, 179, 180, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192
Schistosoma spp 135
Shiguella spp 123
Slis 123, 124
Smio 175
Sujeira 31
T
Taenia solium 136
Tatus 117
Tecnologias do DNA recombinante 94
Ttano 13, 109, 110
Toxinas de origem biolgica 273
Toxides 97
Toxoplasma spp 24, 133
Transporte e Transferncia de Agentes Biolgicos 249
Treponema pallidum 123
Trypanosoma 132, 256
cruzi 132, 133, 212
evansi 256
vivax 256
286
NDICE REMISSIVO
Tuberculose 14, 15, 34, 41, 100, 117, 118, 119, 258
Tularemia 14, 111, 203, 247
V
Vacinas 19, 23, 90, 97, 98, 99, 103, 104, 105, 106, 107, 111, 112,
113, 114, 115, 116, 117, 118, 120, 121, 122, 123, 124, 125,
152, 157, 158, 161, 165, 177, 178, 179, 181, 185, 188, 247,
248
Vacnia 94, 167, 168
Varola 15, 151, 168, 255, 256
Vigilncia 36, 44, 51, 54, 64, 67, 70, 72, 75, 77, 83, 86, 88, 93, 120,
152, 153, 170, 175, 273, 274
Vrus da doena de Borna 255
Vrus da Estomatite Vesicular (VSV) 177
Vrus da febre do Vale Rift 188, 255
Vrus da febre efemeral 256
Vrus da imunodecincia humana 16, 100, 170
Vrus da raiva 169
Vrus hendra 220
Vrus Junin 92, 188, 192
Y
Yersinia pestis 125
287
EQUIPE TCNICA E EDITORIAL
Editores da Obra Original 1999
Jonathan Y. Richmond, Ph.D. Dirctor do Escritrio dc Sadc c Scgurana
Servio de Sade Pblica
Centros de Preveno e Controle da Doena
1600 Clifton Road N. E.
Atlanta, Gergia, 30333
Robcrt W. McKinncy, Ph.D. Dirctor da Diviso dc Scgurana
Servio de Sade Pblica
Institutos Nacionais de Sade
Building 31, Room 1C02
Bethesda, Maryland, 20892
Editores Convidados
Centers for Prevention and Control of the Diseases (United States)
Robcrt B. Cravcb, M.D. Chcfc do Dcpartamcnto dc Epidcmiologia
Diviso de Doena Provocada por Arbovrus
Centro Nacional de Doenas Infecciosas
Mark I. Ebcrhard, Ph.D. Chcfc da Diviso dc Biologia c Diagnsticos
Diviso de Doenas Parasitrias
Tomas Folks, Ph.D. Chcfc da Diviso dc HIV c Rctrovirologia
Diviso de AIDS, DST e Laboratrio de Pesquisa.
Bradford Kay, Dr. P.H. Consultor Scnior do Iaboratrio da Diviso dc Bactcriologia
c Docnas Micticas.
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Secretaria da Sade e Segurana
Brian W. J. Mahy, Sc. D, Ph.D. Dirctor da Diviso dc Docnas Virais c Rickcttsiais.
C.J. Pctcrs, M.D. Chcfc da Diviso dc Patgcnos Espcciais
Margarct A.Tipplc, M.D. Chcfc do Programa dc Atividadcs Extcrnas
Secretaria da Sade e Segurana
National institute of Health (United States)
John Bcnnctt, M.D. Chcfc da Sco dc Micologia do Instituto
Nacional de Alergias e Doenas Infecciosas
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Pgina 4 - A IV
Dcborah E. Wilson, Dr. P.H. Chcfc da Diviso dc Scgurana c Sadc Ocupacional
Departamento de Segurana
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Atlanta, GA
288
Pctcr J. Gcronc, Sc.D. Dirctor do Ccntro dc Pcsquisa Rcgional dc Primatas dc Tulanc
Centro Mdico da Universidade de Tulane
Convington, Louisiana
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Durham, North Carolina
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Tomas Kost, Ph.D. Chcfc do Dcpartamcnto dc Cicncias Molccularcs
Glaxo Welcome, Inc.
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Editor Tcnico
Maric J. Murray Editor Escritora
Atlanta, GA
Editores da Obra Traduzida
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(Normalizao, reviso, editorao, impresso e acabamento)
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