MICROSCOPIA

Organizao: Eliana Maria Beluzzo Dessen e Jorge Oyakawa

Diagramao: Regina de Siqueira Bueno

Conhecendo o microscpio
A vista humana no capaz de perceber objetos com dimetros inferiores a um dcimo do milmetro (0,1mm ou 100m). O microscpio ptico utilizado para a observao de clulas vivas ou mortas (preferencialmente aps xao e colorao) cujas medidas encontram-se abaixo de 0,1mm. Entre elas temos clulas dos organismos eucariotos, as bactrias, os ovos de vermes e muitas estruturas dos seres vivos.

Figura 1. Microscpio ptico

Lente ocular encaixada Tubo ou canho nos microscpios que possuem uma s
ocular (monoculares), o tubo um cilindro metlico reto ou oblquo. Nos microscpios que possuem duas oculares (binoculares) o tubo pode ser inclinado, com ajuste para os diferentes espaos entre os olhos de cada observador na extremidade superior do tubo, sua funo aumentar a imagem formada pela objetiva. O aumento fornecido pela ocular est, geralmente, gravado nela prpria. Por exemplo: 5x, 8x, 10x, etc.

suporte pesado que sustenta os tubos, a mesa, o porta-condensador e os parafusos micro e macromtrico

Estativa, brao ou coluna

Revlver ou tambor Nele esto

inseridas as lentes objetivas que podem ser movimentadas quando o tambor girado. Este movimento deve ocorrer sempre no sentido da objetiva de menor para a de maior aumento

Charriot pea opcional localizada na mesa e que serve para movimentar a lmina para localizao do campo de observao desejado

Parafuso micromtrico
a movimentao deste parafuso permite uma focalizao mais limitada e mais na, pois o tubo desloca no mximo dois milsimos de milmetro

Lente objetiva permite a ampliao da imagem de um objeto qualquer. Pode tambm corrigir os defeitos das cores dos raios luminosos. Para se utilizar a objetiva (100x) de imerso, coloca-se entre ela e a lamnula uma gota de leo de cedro ou de imerso. Este sistema permite um maior aproveitamento da quantidade de luz com maior ampliao, pois com esse processo, captam-se os feixes luminosos que com as objetivas secas so desviados. Os aumentos fornecidos pelas objetivas encontram-se gravados nas mesmas. Platina ou mesa pode ser xa,
mvel ou giratria no plano horizontal. A lmina com o material a ser observado colocada sobre a platina que apresenta uma abertura no seu centro permitindo a passagem dos raios luminosos, coletados pelo espelho. Estes so convergidos pelo condensador e pelo diafragma, passando pelo material que est na lmina, pela lente objetiva do tubo e da ocular at atingir a retina do globo ocular do observador

Parafuso macromtrico
a movimentao deste parafuso permite uma focalizao grosseira do material. Possui um percurso vertical com cerca de 7,5 cm

P ou base o local de apoio do aparelho feito de ligas de metais pesados

Espelho ou fonte de luz pea

Legenda:

Parte Mecnica Parte ptica

encaixada por baixo do condensado. O espelho, quando presente, possui duas faces: uma plana e outra cncava. A face plana, usada nas grandes ampliaes e na observao com sistema de imerso, colhe e projeta os raios paralelos e divergentes. A face cncava colhe e projeta os raios convergentes sendo usada nas pequenas ampliaes.

Condensador ou diafragma - localizado abaixo da platina cuja funo principal o fornecimento de uma grande quantidade de luz. Ao utilizar as objetivas de pequeno aumento, o diafragma deve ser fechado para eliminar os raios laterais. Em maiores ampliaes, abre-se proporcionalmente o diafragma.

Procedimentos bsicos para a correta observao microscpica de uma preparao:

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. Ligar a fonte luminosa. Colocar a lmina com a preparao sobre a platina. Com o auxlio do condensador e do diafragma obter uma boa iluminao. Olhando pelo lado externo, girar o parafuso macromtrico de forma a aproximar a objetiva de 10x o mais perto possvel da preparao. Olhando pela ocular, girar o mesmo parafuso no sentido inverso at obter uma imagem ntida da preparao. A seguir fazer o foco com a objetiva de 40x: girar o tambor colocando a objetiva de 40x na direo da preparao e focalizar com o auxlio do parafuso micromtrico. Para uma ampliao maior, (objetiva de 100x), girar o canho apenas o suciente para afastar a objetiva de 40x da preparao. Colocar uma gota de leo de imerso sobre a preparao citolgica. Em seguida, girar o tambor de forma que a objetiva de 100x que posicionada sobre a preparao. Girar o parafuso micromtrico at obter o melhor foco do material.

ATENO! Evitar o contato do leo de imerso com as objetivas de 10 e 40x, pois este pode danic-las. Limpar o leo da lente assim que terminar a observao para que este no seque e danique lente.

Discuta com seus colegas e responda:

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. Para transportar um microscpio, qual a melhor maneira de segur-lo? Que pea movimentada quando giramos o parafuso macromtrico? Para que serve o parafuso micromtrico? O que ocorre quando o giramos? O movimento to ntido quanto o do parafuso macromtrico? Eleve o canho girando o macromtrico e observe as objetivas. So todas iguais e do mesmo tamanho? Verique os nmeros dos aumentos gravados nas objetivas. Como calcular o aumento que o microscpio fornece? Qual a funo do espelho? Onde deve ser colocada a lmina contendo a preparao para observao? Qual objetiva deve ser inicialmente usada para o procedimento de focalizao? A que distncia da lmina deve ser colocada a objetiva antes de ser focalizado o material desejado? Qual parafuso deve ser usado inicialmente para focalizar o material?

10. Quais outras partes do microscpio devem ser controladas para obteno de maiores aumentos? 11. Para ter certeza de que a preparao est em cima do foco de luz voc olha por fora do microscpio ou diretamente atravs da ocular? 12. Acoplado ao condensador existe um diafragma. Mover a alavanca do diafragma e descrever o que ocorre. 13. Girar o tambor de forma a colocar a objetiva de menor aumento em cima da lmina com preparao. Abaixar o canho girando o macromtrico. Mexendo o espelho, coloc-lo na posio capaz de iluminar o interior do tubo. Tanto melhor ser a focalizao quanto mais claro estiver o crculo que voc est vendo. Este crculo o campo do microscpio. A preparao a ser observada deve estar no centro geomtrico do campo iluminado. Na objetiva ocular h uma pestana (que funciona como uma seta). Girando-se a ocular a pestana se move e voc pode us-la para indicar uma estrutura que esteja querendo mostrar para algum. Como exerccio, focalizar um material e colocar a seta na regio que deve ser observada.

PREPARANDO LETRAS PARA SEREM OBSERVADAS AO MICROSCPIO

Cortar um pedao de jornal de aproximadamente 1 cm.

1 cm 1 cm

Limpar bem uma lmina e, com um conta-gotas pingar, sobre ela, uma gota de gua;

Sobre a gota colocar o pedao de jornal e esperar alguns segundos;

g ua

Sobre o jornal colocar uma lamnula limpa;

Se houver bolhas de ar pressionar levemente a lamnula com uma pina;

Levar a lmina com a preparao ao microscpio

Observar em menor aumento (100x, sendo 10x da objetiva e 10x da ocular)