DESMIELINIZAO TXICA DO SISTEMA NERVOSO CENTRAL

I. AO D E UMA DROGA I N T E R C A L A N T E GLI OTXI CA

N A ME D UL A E S P I N H A L DE RATOS WI S T A R
DOMINGUITA LHERS GRAA *
RESUMO Pequenos volumes de brometo de etdio foram injetados nas colunas dorsais da
medula lombar de ratos Wistar. Foi assim induzido processo desmielinizante que variou em
natureza e velocidade de reparao de acordo com a dose empregada. As leses produzidas
foram classificadas em trs tipos ( I , rpidas; I I , lentas; I I I , intermedirias), de acordo com
as caractersticas histolgicas e a extenso da remielinizao. Em algumas leses ou em reas
dentro da mesma leso, os restos de mielina e de clulas gliais eram rapidamente processados
por macrfagos e os axnios rapidamente remielinizados por clulas de Schwann, enquanto
em outras leses de durao similar, ou em reas dentro da mesma leso, a mielina se
transformava em emaranhados de membranas que persistiam ao redor do axnio por longos
perodos de tempo. Nas leses que continham tais membranas derivadas da mielina, os macr-
fagos eram escassos e a remielinizao, feita pelas clulas de Schwann, era demorada e
trabalhosa. Concluiu-se que a resoluo lenta de algumas leses resultara do lapso transcor-
rido entre a intoxicao e o desaparecimento das clulas relacionadas mielina, significando
que as respostas celulares desmielinizao tiveram lugar em rea livre de clulas gliais.
Esta no podia sustentar, portanto, a movimentao celular necessria para a remoo dos
restos de mielina e a posterior remielinizao. Esta investigao indica que o desenvolvi-
mento e o desfecho da desmielinizao podem ser alterados pelos eventos celulares que acom-
panham a degenerao dos oligodendrcitos.
Toxic demyelination of the central nervous system: I. Effects of an intercalating gliotoxic
chemical in the spinal cord of Wistar rats.
S UMMARY Small volumes of ethidium bromide were injected into the dorsal columns of
the spinal cord of Wistar rats. It was induced a demyelinating process, variable in nature
and speed of repair according to the dose used. The induced lesions were classified into
three groups (type I or fast lesions; type I I or slow lesions; type I I I or intermediate lesions)
according to the histological appearance and extension of remyelination. In some lesions or
in areas within the same lesion, myelin and glial cell debris were rapidly processed by
macrophages and the naked axons soon remyelinated by Schwann cells. In other lesions of
similar duration, or areas within the lesions, myelin underwent transformation into mazes of
membranes which persisted around the axons for long periods of time. In the lesions which
contained such myelin_derived membranes, macrophages were scant and remyelination by
Schwann cells was slow and arduous. It may be concluded that the slow resolution of some
lesions resulted from the time elapsed between intoxication and disappearance of myelin_related
cells. That time difference determined that the cellular responses to demyelination took place
in an area devoid of glial cells and therefore without a support for the cellular migration
needed for the removal of myelin debris and eventual remyelination. This investigation
indicates that the development and outcome of demyelination may be altered by the cellular
events that occur during oligodendrocyte degeneration.
Departamento de Patologia, Universidade Federal de Santa Maria : * DMV, PhD, Pro-
fessor Adjunto.
Departamento de Patologia, Universidade Federal de Santa Maria Caixa Postal 5092, Balco
Postal UFSM 97119 Santa Maria RS Brasil.
reas de desmielinizao podem ser induzidas na medula espinhal de animais
por injeo de pequenos volumes de drogas gliotxicas na substncia branca 1,2,10. Os
axnios desprovidos de suas bainhas so remielinizados por oligodentrcitos ou clulas
de Schwann, dependendo do grau de destruio dos astrcitos 3,8
e
da espcie animal
usada
12
. O corante intercalante brometo de etdio ( BE) , extensivamente usado como
tripanocida nos pases africanos? atualmente utilizado para destruir seletivamente a
neurglia da substncia branca e induzir reas de desmielinizao no sistema nervoso
central de mamferos 4,n,i2,i5,i6.
No presente estudo examinado o efeito de injees intramedulares de BE no
rato. Os resultados mostram que o tempo, o tipo e a extenso da remielinizao so
influenciados pelos eventos locais ocorridos aps a injeo do txico. Tais resultados
tambm apontam para os efeitos do meio em que jaz o axnio desmielinizado, na deter-
minao do processo de reparao.
MA T E R I A L E MTODO
Oitenta e quatro ratos Wistar adultos, de ambos os sexos, receberam injees intra-
medulares de BE dissolvido em salina normal. Foram usadas duas concentraes: 0,5mg/ml
e 1,0mg/ml e trs volumes: 0,5, 0,8 e 1,0^1. Nove ratos receberam injees de 1,0^1 de salina
normal. Para a injeo, os ratos eram anestesiados com Halotano e era feita laminectomia
na primeira vrtebra lombar. As injees eram realizadas na substncia branca dorsal com
micropipeta de vidro colada na agulha de seringa Hamilton em micromanipulador (8). Os
animais foram sacrificados em vrios tempos entre 24h e 9 meses aps a injeo, por perfuso
intra-artica, sob anestesia geral, com glutaraldedo a 4%em tampo fosfato. A medula
pr-fixada era removida e a rea da leso identificada e cortada em seces transversais de
1 mm de espessura. Os fragmentos eram ps-fixados em tetrxido de smio e includos em
Resina Taab. De cada bloco, seces de um mcron de espessura foram cortadas e coradas
pelo azul de toluidina para exame em microscpio ptico. reas selecionadas foram eviden-
o
ciadas e cortadas com espessura de 700A, coradas com sais de chumbo e uranila e examinadas
em microscpio eletrnico de transmisso Hitachi HS-8.
RES ULTADOS
A resposta do tecido quanto natureza da patologia mostrou marcante variao rela-
cionada concentrao de BE utilizada. Trs tipos de leso se desenvolveram: rpidas,
lentas e intermedirias tipos I , I I e I I I , respectivamente (Tabela 1). O tipo I I , ou leso
lenta, estava associado com doses baixas de BE. A concentrao alta de BE induziu leses
rpidas ou intermedirias (Fig. 1).
O BE induziu alteraes degenerativas em todas as clulas da medula espinhal, com
exceo das clulas endoteliais. As clulas mais afetadas foram as da neurglia, das quais
a que mais rapidamente degenerou foi o astrcito. As bainhas de mielina mostravam vacuoli-
zao e vesiculao e as clulas da glia mostravam tumefao das mitocndrias, desarranjo
da cromatina nuclear e alteraes do citoesqueleto (Fig. 2). As mudanas observadas no
retculo endoplasmtico dos oligodendrcitos durante a mielinizao do tronco cerebral de
ratos lactentes expostos ao BE (11) no foram detectadas neste estudo. As alteraes dege-
Tipo
Caractersticas
histolgicas Remielinizao
Velocidade de
desenvolvimento
I alta celularidade
ntida fagocitose
extensa e uniformemente
distribuda
rpida
I I baixa celularidade,
pouca atividade
fagocitria
escassa, somente
em reas subpiais
lenta
I I I celularidade mdia,
atividade fagocitria
inconstante
varivel, ao redor
de vasos sangneos
e sob a pia
intermediria
Tabela 1
ratos.
Tipos de leso induzidas
classificadas de acordo com
por brometo de estdio (BE)
a extenso da remielinizao.
na medula espinhal de
Desmielinisao txica do SNS 265
266 Arq Neur-Psiquiat (So Paulo) Jf7(3) 1989
nerativas evoluiram at o 13' dia. Nias leses rpidas, a mielina e as clulas degeneradas eran
removidas por abundantes macrfagos ativados, de modo que aos 7 dias aps a injeo de BI
muitos axnios tinham perdido suas bainhas. Nas leses lentas, a presena de macrfago!
era escassa e neles se acumulavam grandes quantidades de membranas derivadas da mielini
( MDM) (Fig. 3). Nas leses intermedirias (Tipo I I I ), eventos dos dois tipos ocorriam simul
taneamente. A partir do 13? dia era visualizada a reparao do tecido pelas clulas d<
Schwann, sob a pia e ao redor dos vasos sangneos, locais a partir dos quais migravarr
ordenadamente entre os axnios desmielinizados. Os oligodendrcitos remielinizavam fibras
adjacentes ao tecido normal.
Concluiu-se que, aps a injeo intramedular de BE, houve desmielinizao e complet.
remielinizao. Observou-se que a resposta do tecido intoxicao foi dose-dependente e qu<
reparao mais eficiente teve lugar quando o dano infligido ao tecido nervoso foi maior (Fig. 4)
COMENTRI OS
O fato mais notvel nas leses induzidas pelo BE na medula espinhal do rato
foi a variao na natureza do processo de degradao das bainhas de mielina e a dife-
rena na velocidade em que as leses se repararam. A desmielinizao primria nor-
malmente caracterizada pela ativao macrofgica e o rpido processamento das
bainhas de mielina 13. Nessas circunstncias, a remielinizao por oligodentrcitos e
clulas de Schwann rpida, to logo o estmulo desmielinizante seja removido 5.
O acmulo de mielina vesiculada (leses lentas) ocorreu em reas com poucos macr-
fagos ativados, indicando que ela forma e persiste quando a degradao tem lugar na
ausncia ou sem a adequada induo de resposta macrofgica normal aps a morte dos
oligodendrcitos
12
. A maioria dessas leses lentas ocorreu quando a menor dose do
BE foi injetada.
As alteraes celulares e teciduais so induzidas pela ao intercalante do BE 14 e
pela reao inflamatoria no especfica no local da injeo
6
. Portanto, quando se
considera o efeito da injeo de BE na medula espinhal, importante considerar os
efeitos no especficos induzidos pelo txico, os quais poderiam influenciar o desen-
volvimento da leso. Assim, as leses induzidas por dose alta podem ser rpidas no
s por ocorrer pronta desmielinizao, mas por haver estimulao no especfica para a
entrada de macrfagos na rea Na ausncia de tal estimulao, a entrada dos macr-
fagos pode ser retardada, ocorrendo acmulo de mielina vesiculada, o qual protrai a
reparao do tecido.
Agradecimentos A excelente assistncia tcnica de Irene LLoyd e Robert Patterson
(University of Cambridge) e de I ara Ethur Flores (Universidade Federal de Santa Maria)
calorosamente reconhecida.
REFERNCI AS
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